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DISEO DE BIORREACTORES

ES UNA TAREA DE INGENIERIA COMPLEJA (Implica muchas variables) Dimensionamiento, Tamao del fermentador, Ecuaciones de diseo Aireacin y agitacin, factores propios del proceso como la adecuada transferencia de O2 y energa, la cual va a permitir una buena mezcla, velocidad de agitacin, y flujos de aire. Escalamiento: laboratorio planta piloto escala industrial

Un biorreactor es un recipiente o sistema que mantiene un ambiente biolgicamente activo. (su diseo depende del tipo de cultivo a utilizar) Este proceso puede ser aerbico o anaerbico. son comnmente cilndricos, variando en tamao y son usualmente fabricados en acero inoxidable.
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FUNCIONES

En trminos generales, un biorreactor busca mantener ciertas condiciones ambientales ESPECIFICAS propicias tanto de pH, temperatura, limpieza, concentracin de gases (oxgeno, CO2), nutrientes, al organismo o sustancia qumica que se cultiva.

OBJETIVOS DEL DISEO DE BIORREACTORES

Agitacin efectiva para mantener las clulas uniformemente distribuidas en todo el volumen de cultivo. Mantener constante y homognea la temperatura. Eliminar adecuadamente el calor (fermentacin y agitacin) Minimizar los gradientes de concentracin de nutrientes Permitir la difusin de gases nutrientes a la velocidad requerida por el cultivo. Mantener un ambiente asptico y de fcil limpieza.

Maximizar el rendimiento y la produccin.


Minimizar el gasto y los costos de produccin. Reducir al mximo el tiempo.
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PARMETROS A CONTROLAR

Temperatura (sensores de temperatura, intercambiador de calor) pH (Condensador de acidez, Condensador de alcalino, Bombas peristlticas con mangueras de siliconas) Espuma (No se pueden realizar bien las mediciones) (Antiespumante)

TRANSFERENCIA DE CALOR

TIPOS DE OPERACION
En funcin de los flujos de entrada y salida, la operacin de un biorreactor puede ser de tres modos distintos: 1. Lote (Batch) o discontinua. 2. Lote alimentado (Fed-Batch) 3. Continuo o quimiostato.

Fig. Mecanismo de operacin discontinuo

Desventajas (Operacin Batch)


- Dificultad de controlar la velocidad de crecimiento, excepto variando la composicin

del medio o las condiciones de proceso. - Altas concentraciones de nutrientes pueden inhibir el crecimiento debido al aumento de la presin osmtica del medio o toxicidad de nutrientes. - Alta demanda de oxgeno puede generar una limitacin debido a una insuficiente capacidad del reactor para transferir O2 al medio. - Inconvenientes para remover calor. - Tiempos muertos entre procesos disminuye la productividad.

Ventajas operacin (fed-Batch)


- Limitar la demanda de O2 del cultivo. - Obtener altas concentraciones de sustrato evitando el efecto osmtico y txico de nutrientes. - Incrementar la tasa de produccin (metabolitos secundarios, protenas ) para maximizar el coeficiente de rendimiento. - Maximizar el crecimiento celular

F(t) SR(t)

Vf, Xf VR = Vf - V0 V0, X0, S0

RESERVORIO

BOMBA BIORREACTOR

Ventajas (Operacin Continua)


- Opera por periodos largos; tiempos muertos

bajos. - El cultivo se mantiene con coeficientes de crecimiento constantes. - Crecimiento balanceado, celular constante. (equilibrio) composicin

-Productividad. constante y mayor.

Desventajas
Alto costo por alta calidad de equipos y accesorios. Lo que encarece los costos de operacin y

trabajo Requiere gran reservorio para almacenamiento de medio o suministro continuado de sustrato. Se incrementa el riesgo de contaminacin debido a la amplia operacin Esterilizacin continuada, separacin continuada de producto y niveles de purificacin. Biosensores sofisticados y automatizacin computarizada para operacin ptima.

TRANSFERENCIA DE OXIGENO
El oxgeno es un gas poco soluble en agua [9 mg/L] solucin saturada. Una vez disuelto el O2 ste tiene que transferirse desde la burbuja de gas a cada clula individual. Para ello deben ser superadas varias resistencias parcialmente independientes:

1. Difusin desde el seno o ncleo del gas a la interfase gas lquido; 2. Movimiento a travs de la interfase gas lquido; 3. Difusin del soluto a travs de la regin estancada adyacente a la burbuja; 4. Transporte del soluto a travs del seno del fluido lquido; 5. Movimiento a travs de la segunda regin estancada asociada con la clula; 6. Transporte difusivo hacia el interior de la clula; 7. Si las clulas estn en un floculo, agregado o partcula slida, difusin a travs del slido hasta cada clula individual; 8. Transporte a travs del citoplasma hasta el lugar de reaccin.

El oxigeno es un substrato que limita el crecimiento, sin embargo, arriba de cierta concentracin, el crecimiento depender de su disponibilidad en el medio. La ley de Henry describe la solubilidad del oxgeno y de cualquier otro gas en soluciones de nutrientes en relacin a la presin parcial de estos en la fase gaseosa: C = P0 / H Donde: C = concentracin de O2 de la solucin de nutrientes a cierta saturacin ; P0 = presin parcial del gas en la fase gaseosa H = constante de Henry que es especfica para cada tipo de gas.

DEMANDA DE OXGENO DE UN CULTIVO


Un cultivo aerbico de clulas requiere del suministro de oxgeno a una determinada velocidad para asegurar la plena satisfaccin de sus requerimientos metablicos. La demanda de oxgeno, NO2 ,se define como: La cantidad de oxgeno requerida por unidad de tiempo y por unidad de volumen de cultivo

No2

x
Yo 2
x

DEMANDA DE OXIGENO = OFERTA DE OXIGENO

VELOCIDAD DE TRANSFERENCIA DE OXIGENO


Na k L a(C * -C )
NA = kLa (C* - C) = H kLa (P P*)

Na = flujo de oxigeno ; kL = coeficiente global de transferencia de masa; a = area superficial de las burbujas C* = Concentracin equivalente del liquido en equilibrio con la presin parcial en el seno del gas C = Concentracin de oxigeno en el seno del liquido ; P* : Presin de O2 en el equilibrio P : Presin de O2 en el seno de la fase gas.; H : cte. de Henry..

AGITACIN
La agitacin es una operacin muy importante tanto del punto de vista tcnico como econmica. La agitacin es importante para:
un mezclado homogneo

Diferentes clases de RODETES Impeler

Una buena transferencia de masa y de calor, permite disminuir el espesor de la pelcula lquida esttica.

TIPOS DE BIORREACTORES

a) b) c)

Hay tres grupos de biorreactores usados actualmente para la produccin industrial: No agitados, sin aeracin No agitados, con aeracin Agitados, con aeracin

Se encuentran dos tipos de biorreactores de uso muy difundido Tanque agitado , Air lift".

BIORREACTOR DE TANQUE
AGITADO

Reactor de tanque agitado: Ms utilizados Confiables Sistema de agitacin mecnica

Caractersticas *Agitacin continua Motor en la parte superior *Inyeccin de aire por la parte inferior *Burbujas: difusin de oxgeno * Contiene varios de flectores: *Mejor mezclado *Sistema de calor por fuera chaqueta de enfriamiento o calentamiento La relacin altura dimetro (2:1 y 6:1)

G E O M E T R I A

CRITERIOS PARA EL DISEO

FUNCIONAMIENTO BIRREACTOR DE TANQUE AGITADO

En el tanque agitado, la agitacin se realiza mecnicamente mediante un eje provisto de turbinas accionado por un motor. El aire se inyecta por la parte inferior del tanque y es distribuido por una corona que posee pequeos orificios espaciados regularmente. El chorro de aire que sale de cada orificio es "golpeado" por las paletas de la turbina inferior generndose de este modo miles de pequeas burbujas de aire, desde las cuales difunde el 02 hacia el seno del lquido. El sistema de agitacin se completa con cuatro o seis deflectores que tienen por finalidad cortar o romper el movimiento circular que imprimen las turbinas al lquido, generando de este modo mayor turbulencia y mejor mezclado. El tanque est rodeado por una camisa por la que circula agua, lo que permite controlar la temperatura.

BIORREACTOR AIR LIFT En los reactores de tipo "air lift, el mismo aire inyectado promueve la agitacin. Bsicamente consiste en dos cilindros concntricos y por la base de uno de ellos, por ejemplo el interior, se inyecta aire. De este modo se genera una circulacin de lquido ascendente en el compartimento interno y descendiente en el externo, lo que favorece el mezclado.

TIPOS DE BIORREACTORES DE ELEVACION CON AIRE

a) Elevacion con aire estandar; b) elevacion con aire wasco; c) elevacion con aire kaneguchi; d)
elevacion con aire lefrancois

ESCALADO

El escalamiento involucra el estudio de los problemas asociados a transferir la informacin obtenida en el laboratorio (ml) y desde escala de planta piloto (lt) a escala industrial (m3). Las condiciones de produccin a pequea escala no son, por lo general, extrapolables a la escala industrial, debido a que la fluidodinmica del sistema, los procesos de transporte y el comportamiento celular son diferentes.

Por ello, se aplica un proceso gradual, manteniendo una velocidad de transferencia de oxgeno constante, as como la potencia consumida por unidad de volumen, al tiempo que el tamao del cultivo se va aumentando en proporcin 1:10.

En cada una de las etapas de escalamiento se evalan algunos aspectos del proceso:
1.

Escala de laboratorio se llevan a cabo:


la seleccin de cepas estudios bsicos de cinticas de crecimiento seleccin del medio, etc.

2.

Planta piloto se optimizan las condiciones de operacin


forma de operacin flujos, presiones Temperaturas velocidades de agitacin, etc.

3.

Escala industrial se lleva a cabo la produccin del producto de inters a niveles rentables.

CRITERIOS DE ESCALAMIENTO
1.- Coeficiente de transferencia de oxgeno (kla) => (kla) escala1 = (kla) escala2 2.- Potencia por unidad de volumen (Pg/V) => (Pg/V)escala1= (Pg/V)escala 2 3.- Velocidad tangencial de agitacin (p N Di) = (p N Di) escala1= (p N Di) escala2 4.- Mantencin del NReynold ( N Di2 r/) > (N Di2 r/) escala1 = (N Di2 r/) escala 2 5.-Velocidad de Bombeo de aire (F/V) => (F/V) escala1 = (F/V) escala2

CORRELACIONES PARA EL COEFICIENTE DE TRANSFERENCIA DE MASA Y LAS VARIABLES DE DISEO


Cuando una fermentacion se aumenta de escala, es importante que en la escala mayor se utilice el valor de kLa optimo en contrado en la escala mas baja

. (kla) escala1 = (kla) escala2


vsb Nc

I)

kLa = cte ( a + d N. impeler) ( Pg /V )d

Donde
Pg/V: Potencia por unidad de volumen vs : Velocidad del aire a travs del estanque vaco

Nimpeler: Nmero de agitadores


N: Velocidad de agitacin cte,a,d, b,c,d: Constantes que dependen del sistema
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CORRELACIONES PARA EL COEFICIENTE DE TRANSFERENCIA DE MASA Y LAS VARIABLES DE DISEO


II) Donde F: es el flujo de aire V: Volumen del lquido HL: Altura del lquido vb : Velocidad de ascenso de las burbujas db : Dimetro de las burbujas
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kLa = cte * (F /V ) HL vb1/2 dB 3/2

MANTENCIN DE POTENCIA POR UNIDAD DE VOLUMEN (PG/V)


El conocer los valores potencia que se le suministra al biorreactor va a perimir mantener y controlar el nivel de agitacin. Al momento de aplicarlo se debe tener cuidado de no sobrepasar los lmites tanto de esfuerzo de corte mximo y nivel de trasferencia de oxgeno mnima. (Pg/V)escala1= (Pg/V)escala2 Dado que siempre se cumple que: Pg/V a N3 Di2, a partir de ello se puede deducir que (Probarlo): (N3 Di2)escala 1 = = (N3 Di2)escala 2

Pg/V: Potencia por unidad de volumen; N: Velocidad de agitacin, Di = dimetro del agitador
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Clculo de Potencia:

Mecanismos de Agitacin en Sistemas sin Gas

Po g c Np r N 3 Di 5
Donde

Po : Potencia externa entregada por el agitador [Kgf m /s]


1 HP = 76 Kgf m/sec gc :Factor de conversin : 9.8 kg m/Kgf sec2 N :Velocidad de rotacin del impeler [rps ] Di
:Dimetro

del impeler [m]

r Densidad del Fludo [kg/m3] Np = f( NRe modificado nDi2 r/m , geometra del sistema)

MANTENCIN DE VELOCIDAD TANGENCIAL, ESFUERZO DE CORTE, p N Di


El conocimiento detallado de esta variable, Permite mantener el nivel de agitacin adecuado y optimo. Esta variable deber ser simple y evaluada en cualquier momento dado que se puede estar trabajando con microorganismos que no resistan esfuerzos de corte mayores que los establecidos. Debe prevalecer este criterio. (pNDi)escala 1 = = (pNDi)escala 2

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MANTENCIN DEL NUMERO DE REYNOLD

(N Di2 r/)
El conocer un adecuado numero de Reynolds, Asegura un nivel de agitacin adecuado ya que indica si el regimen del fluido es turbulento o laminar.
(N Di2 r/) escala1 = (N Di2 r/) escala2

Di = dimetro del agitador (cm) N= velocidad de rotacion del agitador (cm/s) r densidad del liquido Viscosidad del fluido
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TASA DE BOMBEO, F/V.


Asegura una adecuada aireacin del sistema, lo cual no asegura una adecuada transferencia de oxigeno, por lo cual se debe verificar en el proceso. Siempre se cumple que la razn de Bombeo es proporcional a la velocidad de agitacin, F/V a N. Entonces al aplicar este criterio de escalamiento se cumple:

(F/V)escala 1 = = (F/V)escala 2
(N)escala 1 = = (N)escala 2

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CONCLUSIONES
La estimacin de factores como la transferencia de oxigeno, el tiempo de mezclado, niveles de agitacin, la capacidad de generar y eliminar calor, requieren diferentes enfoques para distintos tipos de configuraciones de biorreactores. Todo esto relacionado al tiempo es lo que hace que el diseo de estos equipos sea un complejo ejercicio de ingeniera.

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