Capitulo 7

CAPITULO
Interacciones entre las clulas y su entorno

7-1 El espacio extracelular 7-2 Adherencia de clulas a sustratos no celulares 7-3 Adherencia de clulas a otras clulas La perspectiva humana: Papel de la adherencia celular en la inflamacin y la metstasis 7-4 Uniones hermticas: sellado del espacio extracelular 7-5 Uniones de abertura y plasmodesmosomas: mediacin de la comunicacin celular 7-6 Paredes celulares La va experimental: Papel de las uniones de abertura en la comunicacin intercelular
unque la frontera entre una clula viviente y su entorno no viviente es la membrana plasmtica, los materiales presentes por fuera de dicha membrana desempean un papel muy importante en la vida de la clula. En un animal o planta multicelulares, la mayor parte de las clulas se organizan en tejidos claramente definidos cuyas clulas componentes mantienen una relacin predecible entre s y con los materiales extracelulares situados entre las clulas. Aun clulas sin relacin fija dentro de un tejido slido, como los leucocitos de la sangre que viajan por todo el cuerpo, deben interacruar de manera muy especfica con otras clulas y los materiales extracelulares con los cuales se ponen en contacto. Estas interacciones regulan actividades tan diversas como migracin celular, crecimiento y diferenciacin de la clula, y organizacin tridimensional de los tejidos y rganos que aparecen durante el desarrollo embrionario. Este captulo se refiere principalmente al entorno extracelular y las diferentes interacciones en las que participan las clulas.
7-1 El espacio extracelular

FIGURA 7-A. Fibroblasto de piel humana teido y cultivado con anticuerpos contra fibronectina (mostrados en rojo). El ncleo est teido con colorante azul que se enlaza a DNA. Se observa la fibronectina localizada en el citoplasma, donde se sintetiza, y en el espacio extracelular, donde aparece ms difusa. (Segn Nancy Kedersha, Immunogen.)
Desplazndose hacia afuera de la membrana plasmtica se pueden examinar los elementos extracelulares que rodean los diferentes tipos de clulas. En captulos previos se hizo notar que casi todas las protenas integrales de membrana, y tambin los lpidos, poseen cadenas cortas de azcares
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CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno
proyectadas hacia afuera de la membrana plasmtica (fig. 4-4). Estos carbohidratados forman parte de una capa ntimamente aplicada sobre la superficie exterior de la membrana plasmtica denominada glucocliz (o cubierta celular) (fig. 7-1, a). Adems de los carbohidratos de la membrana, el glucocliz por lo general contiene otros materiales extracelulares secretados por la clula hacia el espacio externo, donde permanecen ntimamente relacionados con la superficie celular. Este material extracelular es muy prominente en algunos tipos de clulas, como las epiteliales que revisten el conducto digestivo de los mamferos (fig. 7-1, b). Adems de desempear un papel clave en las interacciones clula-clula y clula-sustrato, el glucocliz puede suministrar proteccin mecnica a la clula y servir como barrera contra las partculas que llegan hasta la membrana plasmtica.
GC
(a)
0.5 Jim
Muchos tipos de clulas contienen una matriz extracelular (MEC), red organizada de materiales extracelulares que se halla ms lejos de la vecindad inmediata de la membrana plasmtica. A veces, la matriz extracelular consta de una mezcla amorfa mal definida de protenas y polisacridos, como se puede observar en el espacio extracelular del tejido conectivo laxo, o puede tomar la forma de una estructura distinta cuyo contorno puede observarse con el microscopio de luz (fig. 7-2). La MEC es algo ms que un material pasivo protector inerte; puede desempear un papel clave en la morfologa y actividades de la clula. Por ejemplo, la digestin enzimtca de la MEC que rodea clulas cultivadas de cartlago o clulas epiteliales de la glndula mamaria provoca notable disminucin de la actividad secretoria y de sntesis de las clulas. Si se aade otra vez al cultivo el material de la matriz extracelular se restablece e! estado de diferenciacin celular y la capacidad para producir los productos habituales. Una de las matrices extracelulares mejor definida es la membrana basal (o lmina basal), capa engrosada de unos 50 a 200 nm que rodea a las clulas musculares y adiposas y que cubre la superficie basal de tejidos epiteliales, como la piel (fig. 7-3, a), el revestimiento interno de los conductos digestivo y respiratorio, y de los vasos sanguneos. Se piensa que la membrana basal puede participar en el mantenimiento de la polaridad de las clulas epiteliales; en definir la va de migracin celular; en separar tejidos adyacentes, ayudando as a compartamentalizar un rgano en desarrollo, y en actuar como barrera al paso de las macromolculas. En esta ltima funcin, la membrana basal desempea un papel importante al evitar que las protenas salgan de la sangre cuando fluyen a travs de los poros de las paredes
(b)
FIGl'RA 7 - 1 El glucocliz. a) Superficie basa] de una clula ectodrmica de un embrin de pollo en sus primeras etapas. Se pueden distinguir dos estructuras distintas ntimamente aplicadas a la superficie externa de la clula; un glucocliz interno (GC) y una lmina basal (LB) externa (o membrana basal). El glucocliz incluye las porciones carbohidrato de las protenas y lpidos de la membrana, en tanto que la membrana basal es una estructura extracelular organizada distinta de la membrana celular, b) Micrografa electrnica de la superficie apical de una clula epitelial del revestimiento del intestino que muestra el glucocliz, que se ha teido con la protena ferritina que contiene hierro, (a: Segn A. Martinez-Paiomo, Int. Rev. Cytol. 29:64, 1970; b: segn S. Ito y D.W. Fawcett/Photo Researchers.)
FIGURA 7-2. Determinacin experimental del espesor de la matriz extracelular. Cuando se desarrollan en cultivo clulas cartilaginosas (condrocitos), producen una matriz extracelular cuyo contorno se puede observar aadiendo una suspensin de pequeas partculas, como eritrocitos fijos, como aqu se muestra. Lo extenso de la matriz extracelular que rodea a cada clula se puede medir por el espesor del espacio que queda sin penetrar por la partcula (cabeza de la flecha). La barra representa 10 /m. (Cortesa de Greta M. Lee, Brian Johnstone, Ken Jacobson y Bruce Caterson.)
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estroma de Ja crnea. En estos tejidos, las clulas que secretan la MEC slo equivalen a una fraccin del volumen tisular. La matriz extracelular, ms bien que las propias clulas, es la que confiere a estos tejidos sus propiedades identificables: dureza para la matriz sea, resistencia y flexibilidad para la matriz del cartlago, resistencia a la tensin para la matriz del tendn y transparencia para la matriz del estroma corneal. Aunque la matriz extracelular puede adoptar diferentes formas en diversos tejidos y organismos, los materiales que constituyen la MEC pertenecen a un nmero relativamente pequeo de familias moleculares; cada una de dichas familias puede contener varias molculas relacionadas. Iniciaremos aqu con una de las molculas ms importantes y ubicuas de la MEC, la glucoprotena colgena.
Colgena
Las colgenas son una familia de glucoprotenas fibrosas que forman parte exclusivamente de matrices extracelulares a las que confieren sus propiedades funcionales. Se observan en todo el reino animal y son notables por su alta resistencia a la tensin, que puede medirse como resistencia a fuerzas de traccin. Las colgenas constituyen la protena simple ms abundante en el cuerpo humano (ms de 25% de toda la protena), hecho que refleja la importancia y amplia distribucin de las matrices extracelulares. La colgena se produce principalmente en los fibroblastos, clulas presentes en diferentes tipos de tejidos conectivos y en clulas epiteliales. Hasta ahora se han identificado ms de 15 tipos distintos de colgena, algunos descritos en el cuadro 7-1. Cada tipo de colgena se restringe a un sitio particular dentro del cuerpo, pero a menudo hay dos o ms diferentes tipos reunidos en la misma MEC. Aunque hay grandes diferencias entre los miembros de la familia de la colgena, todos comparten ciertas caractersticas estructurales importantes. Toda molcula de colgena es un trmero que consta de tres cadenas de polipptidos denominadas cadenas a (fig. 2-33, a). Algunos tipos de molculas de colgena contienen tres cadenas a idnticas, en tanto que otros son heterotrmeros que contienen dos o tres cadenas diferentes. Por ejemplo, una molcula de colgena tipo I consta de dos cadenas al(I) y una cadena a2(II). Cuando menos en una parte de su longitud, las tres cadenas de polipptidos que forman una molcula de colgena se enredan sobre s mismas formando una triple hlice caracterstica (estudiada en la pgina 57). Numerosas colgenas, incluyendo los tipos I, II y III, se describen como colgenas fibrares debido a que se ensamblan en fibrillas semejantes a cables, que a su vez se ensamblan a fibras ms gruesas, de ordinario lo bastante grandes para observarlas con el microscopio de luz. En la figura 2-33, b, se muestra el empaque lado a lado de las filas de molculas de colgena I dentro de una fibrilla de colgena. Las molculas individuales de colgena no se alinean al mismo nivel en una fibrilla, sino que se escalonan ms o menos a la altura de la cuarta parte de la longitud de sus vecinas. Esta disposicin escalonada de las molculas componentes incrementa la resistencia mecnica del complejo y
FIGURA 7-3. La membrana basal (lmina basal). a) Gammagrafa electrnica de piel humana. La epidermis se ha separado de una parte de la membrana basal, que se puede observar por debajo de las clulas epidrmicas, b) Una membrana basal de espesor poco comn se forma entre los vasos sanguneos del glomrulo y el extremo proximal de los tbulos renales del rion. Esta capa extracelular desempea un papel importante para filtrar el lquido expulsado de los capilares haca el interior de los tbulos renales durante la formacin de orina. Los puntos negros dentro de la membrana basal glomerular (MBG) son partculas de oro fijas en los anticuerpos enlazados a molculas de colgena IV en la membrana basal (LC, luz capilar; P, podocito del tbulo). La barra representa 0.5/m. (a: Cortesa de K. Hollbrook; b: segn Michael Desjardins y M. Bendayan, J. Cell Biol. 113:695, 1991; con autorizacin de Rockefeller University Press.)
capilares. Esto tiene particular importancia en el rion, donde la sangre se filtra a travs de la doble membrana basal que separa los capilares del glomrulo de las paredes del tbulo renal (fig. 7-3, b). En la diabetes prolongada, la insuficiencia renal puede producir engrasamiento anormal de la membrana basal que rodea al glomrulo. La membrana basal tambin sirve como barrera contra la invasin de tejidos por clulas cancerosas errantes. Las matrices extracelulares ms extensas se observan en tejidos conectivos como cartlago, hueso, tendones y el
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CAPITULO 7 interneciones entre as clulas y sw entorno CUADRO 7-1. Tipos de colgena Tipo Cadenas al(I), a2{I) al(II)
Cfl(IIl)
Estructura Fibrilar Fibrilar Fibrilar No fibrilar Fibrilar Fibrilar No fibrilar ? ? ? Fibrilar ?
Localizaran Piel, tendn, hueso, etc. Cartlago, humor vitreo Piel, msculo, etc. Todas las membranas bsales La mayor parte de los tejidos intersticiales La mayor parte de los tejidos intersticiales Fijacin de fibrillas Algunas clulas endoteliales Cartlago Cartlago hipertrfico y en etapa de mineralizacin Cartlago Piel, tendn
I
II III
IV V VI VII VIII IX X XI XII
al (IV), a2(IV) al(V), a2(V), o3(V) al(VI), a2(VI), a3{VI) l(VII) al (VIII) al(IX), a2(IX), a3(IX) al(X) trl(XI), a2(XI), a3(XI) al (XII)
Segn K. Kuhn, en R. Mayne y R.E. Burgeson, eds. Stmcture and Function o/Collagen Types, Academic Press, 1987, p. 2.
produce los patrones de banda caractersticos de las fibrillas de colgena (fig. 2-33, c). Las fibrillas aumentan todava ms su resistencia mediante uniones covalentes transversales formadas entre lisina e hidroxilisina de molculas adyacentes de colgena. Cuando se rompen estos enlaces intermoleculares cruzados, como a veces ocurre en animales que ingieren /3-aminopropionitrilo, una sustancia txica presente en semillas de chcharos dulces, el tejido conectivo puede debilitarse mucho. Entre los diferentes componentes de la MEC, las molculas de colgena proporcionan el armazn insoluole que determina muchas de las propiedades mecnicas de la matriz. En realidad, las propiedades de un tejido particular con frecuencia se pueden correlacionar con la organizacin tridimensional de sus molculas de colgena. Por ejemplo, los tendones, que conectan los msculos a los huesos, deben resistir tremendas fuerzas de traccin durante los momentos de la contraccin muscular. Los tendones contienen una MEC en que las fibras de colgena se alinean paralelas al'eje mayor del tendn, y por lo tanto paralelas a la direccin de las fuerzas de traccin. La crnea tambin es un tejido notable; debe servir como capa protectora durable en la superficie del globo ocular, pero tambin ser transparente para permitir el paso de la luz a travs del cristalino en direccin a la retina. La gruesa capa media de la crnea es el estroma, que contiene fibrillas de colgena relativamente cortas organizadas en distintas capas. La estructura en capas del estroma es similar a la corteza de un rbol; las fibrillas de cada capa son paralelas a las otras fibrillas de la misma capa, pero perpendiculares a las fibrillas de las capas situadas en ambos lados (fig. 7-4). Esta estructura parecida a la corteza de un rbol suministra resistencia a este delicado tejido, en tanto que la uniformidad de tamao y la disposicin de las fibras favorece la transparencia del tejido. No todas las colgenas forman fibrillas. Una de las colgenas no fibrilares es el tipo IV, cuya distribucin se restringe a las membranas bsales (pg. 240). Las membranas bsales son lminas de apoyo muy delgadas y las molcu-
las de colgena tipo IV se organizan formando una red aplanada que sirve como estructura para el depsito de otros materiales extracelulares. A diferencia de la colgena I, que consta de una triple hlice larga ininterrumpida, los trmeros de la colgena IV contienen segmentos no helicoidales interpuestos a lo largo de la molcula y de los dominios globulares en cada extremo. Los segmentos no helicoidales confieren a la molcula flexibilidad, en tanto que los extremos globulares sirven como sitios de interaccin entre molculas que dan al complejo su carcter tipo reticular (fig. 7-5). Proteoglicanos Adems de la colgena, las matrices extracelulares tpicamente contienen una gran cantidad de un tipo distintivo de
1 pm
FKURA 7-4. Estroma corneal. Consta principalmente de capas de fibras de colgena en las cuales las molculas de capas alternas se disponen en ngulos rectos entre s, lo que recuerda la estructura de la madera laminada (triplay). (Cortesa de M. Takus.)
CAPITULO 7 Interacciones entre !as clulas y su entorno
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50 nm
FIGURA 7-5. Red de colgena tipo IV de la membrana basal. Mkrografa electrnica de una membrana basal del tejido amntico humano extrado mediante una serie de soluciones salinas para eliminar los materiales no colagenosos. El tratamiento deja una red poligonal muy ramificada de fibras que forman una estructura irregular. Las pruebas indican que esta estructura consta de molculas de colgena tipo IV entrelazadas en disposicin tridimensional compleja. En la figura 7-11 se muestra un modelo del armazn de la membrana basal. (Segn Peter D. Yurchenco y George C. Rubn,}. Cell Biol. 105:2561,1987; por Tw Rockefeller University Press.)
complejo proteinicopolisacrido denominado proteoglicano. Un proteoglicano (fig. 7-6, a) consta de una molcula protenica central a la cual se unen cadenas de glucosaminglicanos (GAG) (mostradas en rojo en la figura). Cada cadena de glucosaminglicano se compone de un disacrido repetitivo; o sea, posee una estructura A-B-A-B-A, donde A y B representan dos azcares diferentes. Los GAG son muy cidos debido a la presencia de grupos sulfato y carboxilo unidos a los anillos de los azcares (fig. 7-6, b). El papel de la colgena y de los proteoglicanos en la estructura y funcin de la matriz extracelular se puede ilustrar en el tejido cartilaginoso. El cartlago consta principalmente de una matriz extracelular secretada por condrocitos vivientes que quedan aprisionados en sus propias secreciones (fig. 7-7, a). Las molculas de colgena forman fibrillas distintas, en tanto que los proteoglicanos constituyen un material amorfo a su alrededor que llena el espacio extracelular (fig. 7-7, b,c). Los proteoglicanos de la matriz cartilaginosa estn ensamblados en un complejo gigantesco por la unin de las protenas centrales a una molcula de cido hialurnico, un GAG no sulfatado (fig. 7-6, b). En la figura 7-6, c, se muestra el aspecto microscpico de uno de estos complejos que puede ocupar un volumen equivalente a una clula bacteriana. Debido a las cargas negativas generadas sobre los GAG, los proteoglicanos pueden enlazarse a numerosos cationes,
que a su vez arrastran abundantes molculas de agua. Como resultado, los proteoglicanos forman un gel poroso hidratado que acta como "material de empaque" para resistir fuerzas de compresin (aplastamiento). Esta propiedad complementa a la de las molculas adyacentes de colgena que resisten fuerzas de traccin, y suministran un bastidor de apoyo para los proteoglicanos. En conjunto, colgenas y proteoglicanos suministran al cartlago, y a otras matrices extracelulares, fuerza y resistencia a la deformacin. (Se puede obtener una "sensacin" de las propiedades mecnicas del cartlago comprimindose una oreja o el puente de la nariz.) La matriz extracelular del hueso tambin se compone de colgena y proteoglicanos, pero se endurece por impregnacin de sales de fosfato de calcio. Una familia de proteoglicanos, los hepamn sulfato proteoglicanos (HSPG), adems de ser el principal componente de la MEC, tambin desempean algunas funciones en la superficie celular (fig. 7-8, a). Los miembros de esta familia incluyen sindecanos, betaglicanos y el CD44. La protena central de estos proteoglicanos rodea la membrana plasmtica, en tanto que los GAG se unen al dominio extracelular de la protena (fig. 7-8, &). Se cree que el dominio citoplsmico de la protena central interacta con el citoesqueleto, y que el dominio extracelular (particularmente el GAG unido a ese extremo de la protena} interacta con varias protenas de la MEC. Adems de fijar las clulas a la MEC, el dominio extracelular del HSPG puede enlazarse a una gran variedad de molculas difusibles, incluyendo enzimas y factores de crecimiento (fig. 7-8, b). El HSPG es uno de los diferentes tipos de macromolculas que forman un puente entre los medios externo e interno de la clula. Como tal, esta molcula se encuentra en posicin ideal para transmitir seales a travs de la membrana plasmtica. Dichas seales pueden influir en muchos aspectos de la conducta de la clula, incluyendo cambios en la morfologa celular, motilidad, adherencia, crecimiento y diferenciacin de la clula. El papel de los receptores de la superficie celular para transmitir mensajes ser explorado con mayor detalle en la pgina 258 y en el captulo 15.
Fibronectina, laminilla y otras protenas de la MEC

El trmino "matriz" implica una estructura formada por una red de elementos que interactan. Este trmino es muy adecuado para la matriz extracelular, que adems de colgena y proteoglicanos contiene varias protenas que interactan entre s con mucha precisin y de manera definida. La f ibronectina es una de las protenas extracelulares mejor estudiadas y revela muchas de las caractersticas observadas en la mayor parte de los componentes de otras matrices. Por ejemplo, la fibronectina, igual que otras protenas de la MEC, contiene una cantidad de dominios distintos, cada uno con funciones particulares (fig. 7-9, a). Cada cadena de polipptido que forma una molcula de fibronectina contiene: 1. Sitios de enlace para otros componentes de la MEC, incluyendo colgenas y glucosaminoglicanos especfi-
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CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno Acido hialurnico p
Protena central
o.
HJ
o,
Y"
NHCOCH,
Hivi
OH H
Condroitiiv sulfato
Protena central Condroitincosulfato
OH
CH?H Queratansulfao
HO \. H
Queratansulfato
.... HJ
CH2oso30. ,0'
?-':
OH
H NHCOCH,
H
(a)
(c)
0.5 p
flGURA 7-6. Estructura de un complejo proteoglicano. a) Representacin esquemtica de un proteoglicano simple que consta de una molcula central de protena a la cual se unen numerosas cadenas de glucosarninglicanos (GAG). Los proteoglicanos procedentes de una matriz cartilaginosa contienen cadenas de queratansulfato y de condroitinsulfato cuyas estructuras se muestran en la parte b. b) En la matriz del cartlago, los proteoglicanos estn unidos a un GAG no sulfatado, llamado cido hialurnico, para formar un complejo gigante. En esta figura se muestran las estructuras de los disacridos repetitivos que constituyen cada uno de los GAG. Todos los GAG poseen numerosas cargas negativas (indicadas por el sombreado azul), c) Micrografa electrnica de un complejo proteoglicano comparable al ilustrado en la parte b, aislado de la matriz del cartlago, (c: Cortesa de Laivrence C. Rosenberg.)
(b)
Fibrillas de colgena
(O
FIGURA 7-7. Estructura del cartlago, a) Micrografa electrnica de una sola clula cartilaginosa (condrocito) rodeada por la matriz extracelular que secretan las clulas (N, ncleo; M, mitocondria; ER, retculo endoplsmico; V, vacuola citoplsmica; MV, vescula extracelular; C, colgena), b) Micrografa de alta resolucin que muestra la matriz extracelular. La matriz contiene delgadas fibrillas de colgena tipo II y pequeas condensaciones electrnicamente densas de proteoglicanos. Los materiales ms oscuros y de mayor tamao son organelos vesiculares que presuntamente contienen materiales de la matriz extracelular. c) Diagrama esquemtico de la organizacin aparente de la colgena y del proteoglicano de la matriz del cartlago. (a,b: Segn Louis C. Gerstenfeld y William /. Landis, J. Cell Biol. 112:508-9, 1991; con permiso de Rockefeller University Press.)
CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas \j su entorno
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Condroitinsulfato
Citoplasma Filamento de actina
(b)
FIGURA 7-8. Proteoglicanos que rodean la membrana, a) El sindecano, un proteoglicano que contiene beparansulfato, se localiza en la superficie celular de esta clula de Schwann, segn lo revela la unin con anticuerpos antisindecano. b) Dibujo esquemtico de una molcula sindecano compuesta de una protena central que abraza a la membrana, en la cual se unen ei heparansulfato y los glucosaminglicanos condroitinsulfato extracelulares. Se cree que el dominio citoplsmico de la molcula sindecano interacta con microfilamentos que contienen actina, en tanto que los GAG extracelulares interactan con ligandos especficos, como el factor de crecimiento de fibroblastos (FCF). (a: Segn David ]. Carey y cois. }. Celi Biol. 124:169, 1994; con permiso de Rockefeller University Press.)
eos, que ayudan a unir estas diversas molculas en una red estable interconectada. 2. Sitios de enlace para receptores situados sobre toda la superficie de la clula, que sirven para mantener una unin estable entre la MEC y la clula (fig. 7-13). Desde hace mucho tiempo se emplea fibronectina purificada en cultivo de clulas para proporcionar a stas una superficie donde adherirse y crecer. La importancia de la fibronectina en la MEC es muy evidente cuando los tejidos participan en actividades dinmicas, como las observadas durante el desarrollo embrionario. El desarrollo se caracteriza por oleadas de migracin celular que obligan a las clulas a seguir diferentes rutas de una a otra parte del embrin (fig. 7-10). Muchos estudios indican que las fibrillas con fibronectina a menudo se sitan en las vas que las clulas prefieren para desplazarse ffig. 7-9, b). Por ejemplo, las clulas de la cresta neural, que se desplazan afuera del sistema nervioso en desarrollo hacia el interior de casi todas las partes del embrin (fig. 7-10), atraviesan vas ricas en fibronectina. Estos movimientos celulares pueden inhibirse si se inyectan anticuerpos al embrin, que se enlazan a sitios de reconocimiento de las molculas de fibronectina y los bloquean. La importancia de la fibronectina en el desplazamiento de las clulas de la cresta neural puede demostrarse fcilmente in vitro (fig.
7-9, c). No es sorprendente que los ratones que carecen de un gen funcional para fibronectina sean incapaces de sobrevivir despus de las primeras etapas del desarrollo embrionario. Otra glucoprotena de la MEC es la laminina, cuyos polipptidos, igual que los de fibronectina, contienen dominios distintos con sitios de enlace especficos. Adems de enlazarse fuertemente a los receptores de la superficie celular, la laminina se puede enlazar a otras molculas de laminina, a heparansulfato proteoglicanos y a colgena tipo IV, un componente ubicuo de las membranas bsales (pg. 242). Se cree que la laminina y las molculas de colgena del tipo IV se entrelazan con una armazn porosa, como se muestra en la figura 7-11. Adems de su papel estructural, la laminina puede actuar en la capacidad reguladora e influir en el potencial de crecimiento y diferenciacin de la clula. La laminina ha sido mejor estudiada en relacin con su papel como gua del trayecto de los axones conforme crecen fuera del sistema nervioso central durante el desarrollo embrionario. La laminina est presente a lo largo de muchas de estas vas en el embrin, y cuando aparece sobre la superficie de un cultivo de neuroblastos promueve activamente el desarrollo del axn. El posible papel de la laminina en la diseminacin de las clulas cancerosas se estudia en La perspectiva humana, en la pgina 260.
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RGD
Dominio Dominio Dominio Dominio para el para el para el para el enlace de enlace de enlace efe enlace de heparina colgena fibrina clulas (a) y fibrina
Sitio Sitio para el para el enlace de enlace de heparina fibrina
(C)
FIGURA 7-9. Estructura y funcin de la fibronectina. a) Una molcula de fibronectina humana consta de dos polipptidos similares, pero no idnticos, unidos por un par de enlaces disulfuro localizados cerca del C terminal. Cada polipptido se pliega en algunos dominios estructuralmente distintos que tambin poseen propiedades funcionales distintas. Lo ms importante es que cada dominio contiene uno o ms sitios de enlace para componentes especficos de la matriz extracelular o para la superficie de otras clulas. Algunas de las actividades de enlace se indican por los letreros de los dominios. Se indica el sitio dentro de! dominio de enlace celular que contiene la secuencia (arg-gli-asp, o RGD). Segn se analiza despus en el captulo, esta secuencia se enlaza especficamente a un tipo particular de protenas integrales de la membrana plasmtica (integrinas) que participan en la unin celular y en la transduccin de seales, b) Corte a travs de un embrin de pollo en etapa temprana tratado con anticuerpos fluorescentes contra fibronectina. La fibronectina se concentra en las membranas bsales (sitios rojo oscuro) situadas por debajo del epitelio embrionario y suministran un sustrato sobre el cual migrarn las clulas, c) En esta micrografa, las clulas de la cresta neural emigran desde una porcin del sistema nervioso de pollo en desarrollo (a la izquierda de la fotografa) a un plato de vidrio de cultivo que contiene tiras de una superficie recubierta de fibronectina que alterna con tiras de vidrio descubiertas. La regin revestida de fibronectina est indicada por las lneas blancas. Es evidente que las clulas permanecen exclusivamente sobre las regiones cubiertas de fibronectina. Las clulas que llegan al sustrato de vidrio (flechas) tienden a redondearse y a perder su capacidad migratoria. La flecha indica la direccin de la migracin, (b: Cortesa de ames W. Lash; c: segn Ciovanni Levi, Jean-Loup Ditband y ean Paul Tliiery, Int. Rev. Cytol. 123:213, 1990.)
Entre otras protenas de la MEC se incluyen tenascina, entactina y trombospondina. La tenascina es una glucoprotena oligomrica grande que se observa principalmente sobre !a superficie de las clulas embrionarias y varias clulas tumorales. A diferencia de la fibronectina, que promueve la adherencia celular, la tenascina parece que acta principalmente como componente antiadherente (fg. 7-2). Sin embargo, los ratones que se desarrollan sin copias de genes funcionales para tenascina no parecen mostrar efectos patolgicos por la ausencia de la protena. La entactina, componente de la membrana basal donde se enlaza a la laminina, puede desempear un papel importante en la adherencia y penetracin del embrin primitivo de mamfero en el revestimiento del tero durante la implantacin. Una gran variedad de clulas secretan trombospondina en la MEC, y es particularmente prominente en la matriz que rodea el
revestimiento de vasos sanguneos maduros. En este sitio, la trombospondina parece inhibir la neoformacin de vasos sanguneos (angiognesis). La combinacin nica de los diferentes componentes de la MEC contribuye a las caractersticas especficas de cada tipo de tejido. La mayor parte de los componentes de la MEC son grandes macromolculas compuestas de subunidades con estructura modular y poseen sitios de enlace entre s. Por consiguiente, las interacciones entre los materiales de la MEC pueden ser muy complejas. Incluso algunas molculas pueden poseer sitios de enlace con actividades opuestas, por ejemplo, un sitio que promueve la adherencia celular y otro que la inhibe. En estos casos, la organizacin supramolecular de los diferentes componentes puede determinar en ltimo trmino el efecto sobre la conducta de la clula, efecto dinmico que puede cambiar de un momento a otro.
CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno Clulas de la cresta neural
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MC
7S
Col-IV
Lm
Clulas linfoides Clulas del primordio germinal (CPG) FIGURA 7-10. Resumen de algunos desplazamientos celulares que ocurren durante el desarrollo de un mamfero. Los movimientos ms extensos son efectuados por las clulas de la cresta neural que migran por fuera de la placa neural hacia la lnea media dorsal del embrin y originan todas las clulas pigmentadas de la piel (P), los ganglios simpticos (SpG), la mdula suprarrenal (AdM) y el cartlago del crneo embrionario (Mx, Md para los arcos maxilar y mandibular). Las clulas del primordio germinal (CPG) migran desde el saco vitelino al sitio donde se forman las gnadas (G) dentro del embrin. Los progenitores de clulas linfoides se transportan al hgado (L), mdula sea (Mo), timo (Ti), ganglios linfticos (GL) y bazo (Ba). (Nota: Las "vas" aqu mostradas conectan los puntos donde se originan las clulas con su destino; no muestran con precisin la verdadera ruta de las clulas.) (Segn Aaron A. Moscona y R.E. Hausman, en Cell and Tissue Interactions, J.W. Lash y M.M.. Burger, eds., Raven Press, 1977.)
FIGURA 7-11. Modelo de armazn de membrana basal. La disposicin de molculas de colgena tipo IV del armazn de la membrana basal se muestra en la figura 7-5. Aqu tambin se incluyen otras molculas que constituyen la membrana basal, principalmente la protena laminina (Lm), indicada por molculas engrosadas en forma de cruz, y la entactina (En). (Segn Peter D. Yurchenco, Yi-Shan Cheng y Hoy Colognato, J. Cell Biol. 117:1132, 1992; con permiso de Rockefeller University Press.)
7-2 Adherencia de clulas a sustratos no celulares

En el anlisis previo hicimos notar que ciertos componentes de la MEC, incluyendo fibronectina, laminina y colgena, tienen capacidad para enlazarse a receptores situados sobre la superficie de la clula. El grupo ms importante de receptores que fijan la clula a su microambiente extracelular son las integrinas.
Integrinas
Las integrinas son una superf amilia de protenas integrales de membrana compuestas de cadenas de polipptidos que abrazan toda la membrana, una cadena a y una cadena j$ unidas mediante enlaces no covalentes (fig. 7-13). Cuando menos se han identificado 15 diferentes subunidades a y ocho diferentes subunidades /3. Tericamente, pueden existir ms de 100 pares posibles de subunidades a y/3 en forma de heterodmeros, aunque el verdadero nmero est bastante restringido. En la superficie de la clula slo se han identificado unas 20 integrinas diferentes, cada una con distribucin tisular especfica predecible.
Ambas subunidades de integrina, a y /?, poseen una gran porcin extracelular donde se encuentran los sitios de enlace para ligandos especficos; un segmento corto, nico, que rodea a la membrana, y un pequeo dominio citoplsmico (40 a 50 aminocidos de largo)1 que contiene sitios de enlace para componentes del citoesqueleto (fig. 7-18). Por lo tanto, las integrinas tienen capacidad para enlazarse a sustancias en ambos lados de la membrana plasmtica. De hecho, el nombre "integrna" concuerda con el concepto de que estas protenas pueden transmitir seales entre los compartimientos extracelular e intracelular como una manera de "integrar" sucesos externos e internos. Este aspecto de la funcin de las integrinas se analiza con mayor detalle en la pgina 258. En el cuadro 7-2 se presenta una lista de las integrinas conocidas y de los ligandos claves que se unen a ellas. Puesto que las clulas individuales pueden expresar varias integrinas diferentes en su superficie, dichas clulas tienen capacidad de enlazarse a distintos componentes extracelulares. En muchos casos, una combinacin de integrinas que reconocen diferentes dominios de un ligando extracelular puede ser la que determine el efecto de la MEC sobre la conducta de la clula. Por ejemplo, las clulas situadas en la capa inferior de la epidermis contienen las integrinas a^\, a^fii y a$\, las cuales pueden ayudar a unir estas clulas a componentes de la membrana basal subyacente (cuadro 7-2). La liberacin de estas clulas de la membrana basal, requerida para que se desplacen hacia la superficie de la piel, se correlaciona con la prdida de expresin de las tres integrinas. La mayor parte de las protenas extracelulares que se enlazan a las integrinas lo hacen debido a que contienen la
1 Una excepcin a esta arquitectura molecular es la cadena /?4, que tiene unos 1 000 aminocidos extra como parte de su dominio citoplsmico. Esta enorme adicin hace que las integrinas /?4 puedan extenderse a mucha mayor profundidad dentro del citoplasma (fig. 7-18).
248
CAPITULO 7 * Interacciones entre as clulas y su entorno
FIGURA 7-12. Experimento que demuestra la accin antiadherente de la tenascina. Antes de aadir las clulas, se aplicaron las protenas fbronectina y tenascina a la superficie del plato de cultivo, segn se escriben sus respectivos nombres. Aunque las clulas permanecieron a baja densidad sobre el plato, se concentraron sobre las partes que contenan fibronectina evitando los sitios con tenascina, que permanecen vacos. (Segn Ruth Chicjuet-Ehrismann, Curr. Opin. Cell Biol. 3:802, 1991.)
RGD
COOH
Fibronectina
Sitios para la unin de calcio

NH,
Cadena pesada de la subunidad a

s
Cadena ligera de la subunidad a
Intracelular
Conexiones con el citoesqueleto
FIGURA 7-13. Estructura y funciones de las integrinas. Esquema de un heterodmero integrina tal como reside en la superficie de las clulas. La masa de cada subunidad se localiza en el lado extracelular de la membrana. La subunidad b mostrada aqu contiene los sitios de enlace RGD que reconocen fibronectina y otros materiales extracelulares. Los iones calcio, requeridos para la actividad de enlace de integrinas, se unen a cuatro motivos enlazados a cationes sobre la subunidad a. Ambas subunidades atraviesan la bicapa de lpidos de la membrana corno una sola hlice a.
secuencia de aminocidos arginina-glicina-cido asprtico (o, en la nomenclatura abreviada de aminocidos, RGD}. Esta secuencia de tripptidos se presenta en los sitios de enlace de la clula de fibronectina, laminina y colgena, y de otras protenas extracelulares. En la figura 7-14 se muestra el dominio de enlace de la clula de fibronectina, con su asa que contiene RGD. El sitio de enlace de RGD sobre la molcula de integrina se indica en la figura 7-13. Como ya se mencion, muchas clulas se adhieren firmemente a un plato de cultivo recubierto con fibronectina. Si las clulas se aaden en presencia de un pptido sinttico que contiene la secuencia RGD, la clula ya no puede unirse al plato de cultivo; el pptido sinttico tiene capacidad para competir con xito con las secuencias RGD de las molculas de fibronectina por los sitios de enlace sobre las integrinas de la superficie celular. Se estima que casi la mitad de todas las integrinas contienen sitios de enlace de RGD (como las mostradas en la columna de la izquierda del cuadro 7-2). Por consiguiente, las protenas extracelulares especficas son capaces de enlazarse a varios miembros diferentes de la familia de las integrinas, y viceversa. Dada esta redundancia y el hecho de que la afinidad de las integrinas por sus ligandos puede variar segn condiciones locales, el tema de las interacciones integrina-ligando es complicado y todava no comprendido en su totalidad. El enlace de todos los ligandos a las integrinas, sea por secuencias RGD u otras secuencias, requiere la presencia de iones bivalentes, ya sea Mg2+ o Ca2+. Los sitios de enlace para cationes bivalentes sobre la subunidad a se indican en la figura 7-13. El descubrimiento de la importancia de la secuencia RGD en la actividad de la integrina plante la posibilidad de nuevos tratamientos para padecimientos que afectan la superficie celular. La formacin de un cogulo sanguneo (trombo) en un vaso no daado puede interrumpir el flujo de sangre a travs de rganos vitales y es una de las principales causas de ataque al corazn y accidente vascular cerebral. Uno de los primeros pasos en la formacin de un cogulo sanguneo es la agregacin de plaquetas, fragmentos celulares no nucleados que circulan en la sangre. La agregacin de plaquetas requiere la interaccin de una integrina especfica de plaquetas (anb/â) con protenas solubles de la sangre que contengan RGD, como el fibringeno y el factor de von Willebrand, que actan como uniones para mantener juntas a las plaquetas {fig. 7-15). Experimentos con animales indican que pptidos sintticos provistos de RGD pueden inhibir la coagulacin de la sangre y son agentes antitrombticos eficaces en el ser humano. Es evidente que estos agentes deben administrarse con sumo cuidado, puesto que pueden interferir con muchos otros procesos mediados por integrinas. Esto puede ilustrarse con una familia de toxinas presentes en el veneno de ciertas serpientes que contienen protenas con secuencias RGD. Estas toxinas actan al impedir el enlace a integrinas (por esa razn se les denomina desintegrinas). Adems de su papel en el enlace a materiales extracelulares y la transmisin de seales a travs de la membrana plasmtica, las integrinas tambin participan en la formacin de dos tipos- de estructuras adherentes especializadas: adherencias focales y hemidesmosomas.
CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno CUADRO 7-2. Clasificacin de los receptores de integrina segn el reconocimiento de las secuencias RGD RGD reconocidas Receptor de integrina Ligandos clave Fibronectina Fibronectina
V01 201
249
RGD no reconocidas Receptor de integrina Ligandos clave Colgena Colgena La mi nina Colgena La mi nina Fibronectina MACV Laminina
Fibronectina Leishmania Fibringeno
301
M02
401
601
IIfc03
Fibronectina Factor von Willebrand Vitronectina Fibringeno Fibronectina Factor von Willebrand Vitronectina Vitronectina
M02
ICAM-1 ICAM-2
Fibringeno ICAM-1 Fibronectina FUENTE: S.E. D'Souza, M.H. Ginsberg y E.F. PIow, Trenas in Biochem. Sci. 16:249, 1991.
Adherencias focales y hemidesmosomas: fijacin de clulas a su sustrato

Es mucho ms fcil estudiar la interaccin de las clulas con la parte inferior de un plato de cultivo que con una matriz extracelular de un animal. Por consiguiente, gran parte de nuestro conocimiento en esta rea se obtuvo del estudio de clulas que se adhieren in vitro a diferentes sustratos. Las etapas que ocurren durante la fijacin de una clula a la superficie del plato de cultivo se muestran en la figura 7-16. Al principio, la clula tiene forma esfrica, como generalmente ocurre en clulas suspendidas en medios acuosos. Una vez que la clula entra en contacto con el sustrato enva hacia afuera prolongaciones que forman uniones cada vez ms estables. Con el tiempo, las clulas se aplanan y extienden sobre s mismas hacia afuera del sustrato. La expansin se acompaa de un cambio espectacular en la organizacin del citoesqueleto, tal vez mediada por un mecanismo de seales transmembrana que comunica el citoplasma con el medio externo. Cuando los fibroblastos o las clulas epiteliales se propagan hacia la superficie inferior de un plato de cultivo, la parte de abajo de la clula no se comprime uniformemente contra el sustrato. En vez de ello, la membrana celular entra en estrecho contacto (casi 10 nm) con la superficie del plato slo en sitios discretos, dispersos, llamados contactos focales (o adherencias focales). En la regin de contacto focal, la membrana plasmtica contiene grupos de integrinas (con mayor frecuencia a^?i) que conectan el material extracelular que reviste el plato de cultivo con el sistema de microfilamentos del citoesqueleto que contiene actina (fig. 7-17).
FIGURA 7-14. Uno de los mdulos de una molcula de fibronectina que contiene el motivo RGD. Los tres aminocidos (arg-gli-asp) que constituyen el motivo {mostrado en amarillo) sirven como sitio de reconocimiento comn entre protenas extracelulares en los receptores de enlace sobre la superficie celular. El motivo RGD se sita en el vrtice de un asa del polipptido, sobresaliendo del mdulo. (Segn Alisan L. Main y cois. Cell 71:674, 992; con permiso de Cell Press.)
250
CAPITULO 7 Interacciones entre as clulas y su entorno
Pared del vaso sanguneo

Plaqueta
Agregacin de plaqueta Integrina

Ftbrmgeno
, Adherenci; de plaquet?
Sitio de lesin""
Receptor de plaquetas
(a)
2.5 pm
FIGURA 7-15. Los cogulos sanguneos se forman cuando las plaquetas se adhieren entre s a travs de puentes de fibringeno enlazados a las integrinas de las plaquetas. La presencia de pptidos RGD sintticos puede inhibir la formacin del cogulo sanguneo al competir con las molculas de fibringeno por los sitios de enlace RGD sobre las integrinas.
'(b)
2.5 pm
La presencia de contactos focales guarda relacin inversa con el movimiento de la clula sobre el sustrato; cuanto mayor sea el numero de contactos focales, menos movible ser la clula. Los contactos focales son estructuras adherentes caractersticas de clulas cultivadas adheridas a la superficie del plato de cultivo. En el interior del cuerpo se observan uniones firmes entre clulas y la matriz celular a nivel de la superficie basal de las clulas epiteliales, donde se unen a la membrana basal subyacente mediante una estructura adherente especializada denominada hemidesmosoma (fig. 7-18). Los hemidesmosomas consisten en una placa densa situada en la superficie interna de la membrana plasmtica con filamentos que corren al interior del citoplasma. A diferencia de los filamentos de los contactos focales, que contienen actina, los filamentos del hemidesmosoma son ms gruesos y contienen queratina. Los filamentos que contienen queratina se clasifican como filamentos intermedios, que sirven principalmente para funciones de apoyo; se distinguen de los microfilamentos ms delgados que contienen actina y cuya funcin es contrctil (los dos tipos de filamentos se estudian con detalle en el captulo 9). Los fi-
2.5 pm
-^ **r - - rî^p._ - , __ "** '--^jiTl" - \
2.5 pm
FIGURA 7-lJ. Pasos en el proceso de propagacin celular. Gammagrafa electrnica que muestra la morfologa de los fibroblastos de ratn en momentos sucesivos durante la unin y propagacin sobre el cubreobjetos de vidrio. Las clulas se fijaron despus de: a) 30 minutos, b) 60 minutos, c) dos.horas y d) 24 horas de la unin. (Segn /./. Rosen y LA. Culp, Exp. Cell Res. 107:141, 1977.)
CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas i/ su entorno
251
(a)
lamentos de queratina del contacto focal se unen a la matriz extracelular mediante integrinas que rodean a la membrana, incluyendo 0^4. La importancia de los hernidesmosomas se puede apreciar en una rara enfermedad, el pnfigo bullse, en el cual se producen anticuerpos que se enlazan a una protena presente en estas estructuras adherentes. Las enfermedades causadas por anticuerpos dirigidos contra nuestros propios tejidos se denominan enfermedades autoinmunitarias y son causa de una gran variedad de padecimientos. En casos de pnfigo hulloso, tos anticuerpos se enlazan a una protena (antgeno penfigoide hulloso) localizada en las placas de los hemidesmosomas. Esto causa que la capa inferior de la epidermis se separe de la membrana basal subyacente (y por lo tanto de la capa de tejido conectivo de la dermis). El paso de lquido al espacio situado debajo de la epidermis provoca graves ampollas en la piel.
7-3 Adherencia de clulas a otras clulas

El examen de un delgado corte transversal que pase por los principales rganos revela una compleja arquitectura que implica diversos tipos de clulas. La formacin de estos complicados patrones celulares tridimensionales dentro de los rganos en desarrollo sin duda depende principalmente de interacciones de tipo selectivo entre clulas similares y no similares. Las pruebas indican que las clulas pueden reconocer la superficie de otras clulas porque "saben" con cules deben interactuar y a cules deben ignorar. Es muy difcil estudiar las interacciones de adherencia que ocurren en las partes microscpicas de rganos minsculos conforme se desarrollan en el embrin. Los primeros intentos para aprender algo acerca de cmo las clulas se reconocen y adhieren entre s se llevaron a cabo al eliminar un rgano en desarrollo de un embrin, disociando el tejido para formar una suspensin de clulas nicas y determinando la capacidad de las clulas para reagruparse en cultivo. En experimentos donde se disociaron y mezclaron clulas de dos rganos diferentes en desarrollo, inicialmente se aglutinaron para formar una masa mixta. Sin embargo, con el tiempo, la clulas se desplazaron dentro del agregado y se "autoclasificaron", de modo que cada clula slo se adhiere a clulas de su mismo tipo (fig. 7-19). Un mtodo experimental diferente, ilustrado en la figura 7-20, a, tambin demuestra que las clulas de preferencia tienden a adherirse a otras clulas de su mismo tipo. En este estudio, clulas en suspensin marcadas con istopos radiactivos se aadieron a un plato de cultivo cuya superficie estaba cubierta por una monocapa de clulas, y se permiti que las clulas marcadas se asentaran sobre la monocapa durante cierto tiempo; a continuacin se lav el plato para liberarlo de clulas no adheridas y se midi la radiactividad producida por las clulas adheridas al plato. En experimentos de este tipo, generalmente se observa que el nmero de clulas marcadas adheridas al plato es mucho mayor s las clulas inmviles de la monocapa son del mismo tipo que las clulas en suspensin comparadas con clulas de diferente tipo (fig. 7-20, b).
2.5 yim
FIGLKA 7-17. Los contactos focales son sitios donde las clulas se adhieren a su sustrato, a) Este fibroblasto que se adhiere a un plato de cultivo revestido de fibronectina fue teido con anticuerpos fluorescentes para revelar la localizador de la integrina CL$I. Se observ que la integrina se localiza en pequeas placas que corresponden a los sitios de contacto focal, b) Aqu se muestra la superficie citoplsmica de un contacto focal en una clula cultivada de anfibio luego de procesar la superficie interna de la membrana por congelamiento rpido y "aguafuerte" profundo. Se observa que los haces de rnicrofilamentos se asocian a la superficie interna de la membrana en la regin de un contacto focal, (a: Segn William G. Crter, Elizabeth A. Wayner, load S. Bouchard y Pritinder Kaur, J. Cell Biol. 110:1389, 3990; b: segn Steven ]. Samuelsson, Paul ]. Luther, David W. Pumpliii, Robert j. Bloch, J. Cell Biol. 122:487, 1993; ambos con permiso de RockefeUer University Press.)
252
Filamentos intermedios Citoplasma Placa Membrana plasmtica
Espacio extracelular
Fibrillas de colgena
0.3 um
(b)
FIGURA 7-18. Los hemidesmosomas son sitios diferenciados de la superficie basal de las clulas epiteliales donde las clulas se fijan a la membrana basal subyacente, a) Micrografa electrnica de varios hemidesmosomas mostrando la placa densa sobre la superficie interna de la membrana plasmtica y los filamentos intermedios que se proyectan al interior del citoplasma, b) Diagrama que muestra los principales componentes de un hemidesmosoma. (a: Segn Douglas E. Kelly, J. Cell Biol. 28:51, 1966; con permiso de Rockefeller University Press.)
Poco se saba sobre la naturaleza de las molculas que median la adherencia entre clulas hasta el desarrollo de tcnicas para purificar protenas integrales de membrana y, ms recientemente, aislamiento y clonacin de los genes que codifican estas protenas. Hasta ahora se ha demostrado que cuatro distintas familias de protenas de membrana median la adherencia de una clula a otra: 1) selectinas; 2) ciertos miembros de la superfamilia de inmunoglobulinas (IgSF); 3) ciertos miembros de la superfamilia de las integrinas, y 4) cadherinas. Selectinas Durante e! decenio de 1960 se descubri que los linfocitos eliminados de ganglios linfticos perifricos, marcados con istopos radiactivos e inyectados de nuevo al cuerpo, retornaban a sus sitios de origen, fenmeno denominado "regreso a casa de los linfocitos". Posteriormente se observ que el regreso a casa poda estudiarse in vitro al permitir que los linfocitos se adhieran a cortes congelados de tejido linfoide. En estas condiciones experimentales los linfocitos se adhieren selectivamente al revestimiento endotelial de las vnulas (las venas ms pequeas) de los ganglios linfticos perifricos. La unin de linfocitos a vnulas poda impedirse con anticuerpos que se enlazan a una glucoprotena especfica sobre la superficie del linfocito. Este receptor de linfocitos se denomin LEU-CAM1 y posteriormente selectma-L. Las selectinas son una familia de glucoprotenas integrales de membrana que reconocen disposiciones especficas de grupos carbohidrato proyectados de la superficie de otras clulas y se unen a ellos. El nombre de este tipo de receptor de la superficie celular se deriva de la palabra "lecna", trmino que describe un compuesto capaz de enlazarse
a grupos carbohidrato especficos. Las selectinas poseen un pequeo dominio ctoplsmico, un dominio simple que rodea a la membrana, y un gran segmento extracelular que consta de algunos dominios separados, incluyendo el ms externo que acta como lectina (fig. 7-21, a). Se conocen tres selectinas: selectina E, que se expresa en las clulas endoteliales; selectina P, expresada sobre plaquetas y clulas endoteliales, y selectina L, que se expresa en todo tipo de leucocitos (glbulos blancos de la sangre). Estas tres selectinas reconocen un grupo similar de cuatro azcares (fig. 7-21, a,b) presente en los extremos de ciertas cadenas de carbohidratos de glucoprotenas o glucolpidos. El enlace de selectinas a sus ligandos carbohidrato depende de calcio. Como grupo, las seectinas median interacciones transitorias entre leucocitos circulantes y la pared vascular en sitios donde hay inflamacin y coagulacin. El papel de la selectina P se analiza en La perspectiva humana: Papel de la adherencia celular en la inflamacin y la metstasis. Inmunoglobulinas e integrinas Una de las piedras angulares en el conocimiento de la respuesta inmunolgica (pg. 62) fue el descubrimiento, en los aos 1960, de la estructura molecular de los anticuerpos de origen sanguneo (IgG). Se observ que las molculas de anticuerpos constan de una cadena de polipptidos compuesta de varios dominios similares. Cada dominio Ig, como se le llam, se compone de 70 a 110 aminocidos organizados en una estructura firmemente plegada que se muestra en las figuras 2-43 y 2-44. Con el tiempo, fue evidente que los dominios de tipo Ig se encuentran en gran variedad de protenas que en conjunto constituyen la superfamilia de las inmunoglubulinas, o IgSF. La mayor parte de los miem-
CAPTULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno
253
Ectodermo + mesodermo
100 pm
FIGURA 7-19. Demostracin experimental del reconocimiento clula a clula. Los tejidos de los Tg embrionarios se pueden disociar en clulas nicas tratando brevemente el tejido con una enzima proteoltica o eliminando los iones calcio del medio en el cual se encuentra suspendido el tejido. Cuando se disocian Clulas de1 dOS tipos de rganos embrionarios y despus se mezclan, las clulas de los dos rganos se agregan y luego se "autoclasifican" por asociacin con otras clulas del mismo tipo. AQU se muestran Jp.s jgsyjadp de dos experimentos de este tipo, a) En este experimento se disociaron en clulas aisladas y luego se volvieron a combinar las clulas de dos regiones del embrin temprano de un anfibio (ectodermo y mesodermo en etapa de gstrula). Al principio las clulas forman un agregado mixto, pero con el tiempo se clasifican. Las clulas ectodrmicas se desplazan hacia la superficie externa del agregado, sitio donde se localizan en el embrin,
y las clulas mesodrmicas se desplazan al interior, posicin que ocuparn en el embrin. A continuacin,
ambos tipos de clulas se diferencian en estructuras del tipo al que normalmente daran lugar, b) Micrografa con microscopio de luz que muestra los resultados de un experimento en el cual se mezclaron clulas precartilaginosas de un embrin de pollo con clulas del ventrculo cardiaco del mismo animal. Los dos tipos de clulas se han autoclasificado saliendo del agregado mixto; las clulas del corazn forman una capa en el lado externo de las clulas precartilaginosas. (a: Segn P.L. Townes y Johannes Holtfreter, J. Exp. Zool. 128:53, 1955; b: segn Malcolm S. Steinberg, J. Exp. Zool. 173:411, 1970.)
(a)
Clulas aisladas marcadas
incubacin -
OgÔ O A ' JLavado
=>
10 Capa celular 20 30 O 10 20 30 40 50 Minutos
(b)
FIGURA 7-20. Protocolo experimental para medir la adherencia de clula a clula, a) En este estudio se vierte sobre una capa de clulas una suspensin de clulas marcadas con istopos radiactivos. La tasa de adherencia se determina incubando las clulas a tiempos diferentes, lavando las clulas no adheridas y midiendo la radiactividad procedente de las clulas restantes unidas a la monocapa celular, b) Cintica de la adherencia de clulas a una monocapa del mismo tipo de clulas (lnea roja) o a clulas de tipo diferente (lnea azul). El experimento mostrado compara la interaccin de clulas de teratoma de ratn y clulas de rion de ratn en dos combinaciones recprocas, (b: Segn B.T. Walther, R. Ohman v S. Roseman, Proc. Nati. Acad. Sci. U.S.A. 70:1569, 1973.)
254
Qj Dominio estructural O Dominio parecido a EGF f~~1 Dominio parecido a lectina
Glucoprotena
(a)
FIGURA 7-21. Selectinas. Estas molculas de adherencia celular reconocen muchos carbohidratos especficos en los extremos de cadenas de oligosacridos, glucolpidos y glucoprotenas. a) Esquema de los tres tipos de selectinas y del carbohidrato ligando al cual se enlazan, b) Modelo del dominio selectina E de una lectina. Los residuos en amarillo son aqullos cuya mutacin disminuy de manera significativa el enlace de la protena con su ligando. El ligando (sLex) reconocido por la selectina E se muestra en color verde a un lado de la protena, orientada como si estuviera lista para enlazarse al dominio lectina de la protena. Los grupos rojos del ligando indican las fracciones carbohidrato que son cruciales para el enlace de la selectina E; estas incluyen los grupos carboxilo del cido silico, dos grupos hidroxilo de galactosa y tres grupos hidroxilo de fructosa. La barra representa 10 A. (i; Segn David V. Erbe y cois. J. Cell Biol. 129:224, 1992, cortesa de Laurence A. Laskey; con permiso de Rockefeller University Press.)
bros de las IgSF son protenas integrales de membrana presentes en la superficie de los linfocitos que participan en diferentes etapas de la funcin inmunolgica. Algunas de estas proteinas integrales median la adherencia clula-clula independiente de calcio. En realidad, el descubrimiento de dominios semejantes a Ig en molculas que participan en la adherencia celular en los invertebrados, animales que carecen de un sistema inmunolgico tpico, sugiere que originalmente las protenas similares a Ig evolucionaron a partir de mediadores de la adherencia celular y slo en forma secundaria adquirieron funciones como efectores del sistema inmunolgico de los vertebrados. La mayor parte de las molculas IgSF de adherencia celular median interacciones especficas de linfocitos con clulas (p. ej., macrfagos, otros linfocitos y clulas blanco) requeridas para la respuesta inmunolgica. Sin embargo, algunos miembros IgSF, como molculas de adherencia a clulas neurales (MACN) median la adherencia entre clulas no inmunolgicas, incluyendo clulas nerviosas y mus-
culares embrionarias. A partir del modelo de la molcula MACN mostrado en la figura 7-22, es evidente que igual que fibronectina y muchas otras protenas implicadas en la adherencia celular, las molculas IgSF para la adherencia de clulas poseen una estructura modular constituida por dominios individuales compartidos con otras protenas. Las molculas de adherencia a clulas neurales participan en diferentes etapas del desarrollo del sistema nervioso, incluyendo agregacin de clulas migrantes de la cresta neural para formar agregados que posteriormente se desarrollan como ganglios simpticos (fig. 7-10), interaccin estrecha entre clulas nerviosas y clulas de sostn que las rodean, y en la formacin de contactos sinpticos entre clulas nerviosas y sus clulas especficas. Por ejemplo, si se inyectan anticuerpos contra MACN en un embrin de pollo en desarrollo, se puede interrumpir cada uno de estos procesos. Diferentes tipos de protenas sirven como ligandos para las molculas IgSF de la superficie celular. Una protena IgSF sobre una clula puede enlazarse a la misma protena

COOH
255
Citoplasma
Citoplasma
FIGURA 7-22. Molculas de adherencia de clulas de la superfamilia Ig. Representacin esquemtica de la adherencia de clula a clula resultante de interacciones especficas entre dominios Ig de dos molculas de adherencia a clulas neurales que se proyectan desde la superficie de clulas vecinas. Cada molcula de adherencia a clulas neurales contiene un pequeo dominio citoplsmico, un segmento transmembrana, varios segmentos que recuerdan los segmentos repetidos observados en la fibronectina y seis dominios Ig situados en la porcin N terminal de la molcula.
cadherina P (placentaria). Estas cadherinas contienen un segmento extracelular relativamente grande que consta de cuatro dominios, un segmento nico transmembrana y un dominio citoplsmico nico. Las cadherinas se unen a clulas similares entre s y de manera preferencia! a la misma cadherina presente en la superficie de la clula vecina (fig. 7-23). Esta propiedad de autoasociacin se puede demostrar en clulas manipuladas por ingeniera gentica para que expresen una variedad de las diferentes cadherinas, y luego mezclar las clulas en diferentes combinaciones. Cuando se efecta este experimento, las clulas que expresan una especie de cadherina se adhieren preferencialmente a otras clulas que expresan la misma cadherina. La capacidad de las cadherinas para mediar la adherencia de clulas semejantes puede explicar los resultados de los primeros estudios, como el que se muestra en la figura 7-19, en el cual las clulas de agregados mixtos "se clasificaron" para formar agrupamientos de clulas de tipo similar. En realidad, las cadherinas pueden ser el factor aislado ms importante para mantener las clulas reunidas en tejidos firmemente cohesivos. El desarrollo embrionario se caracteriza por cambios en la expresin del gen, en la forma de la clula, en la motilidad celular, en la adherencia de clulas, y as sucesivamente. Las cadherinas desempean un papel clave en algunos de estos cambios. Por ejemplo, durante el desarrollo embrionario algunos sucesos morf ogenticos implican cambiar un grupo de clulas de un mesnquima (clulas laxas
Citoplasma
IgSF o a una diferente sobre otra clula. Por ejemplo, una molcula MACN sobre una clula puede enlazarse al mismo tipo de MACN sobre otra clula (fig. 7-22). Segn se describi antes, la mayor parte de las integrinas facilitan la adherencia de clulas con su sustrato, pero unas pocas integrinas median la adherencia de una clula con otra al enlazarse a protenas IgSF en clulas opuestas. Por ejemplo, la integrina a$\n la superficie de los leucocitos se une a la molcula de adherencia a clulas vasculares (MACV), una protena IgSF de la superficie de clulas endoteliales (fig. 7-28).
Cadlierinas
Las cadherinas son una familia de cuando menos 12 glucoprotenas relacionadas que median la adherencia celular dependiente de Ca2+. Los miembros de la familia de las cadherinas se pueden distinguir entre s por el tipo de clulas en las cuales se presentan; los miembros mejor estudiados son: cadherina E (epitelial), cadherina N (neural) y
Citoplasma FIGURA 7-23. Cadherinas y adherencia celular. Representacin esquemtica de dos clulas adheridas entre s como resultado de interacciones entre tipos similares de cadherinas proyectadas desde la membrana plasmtica de cada clula.
256
CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno Ectodermo
Endodermo Clulas mesenquimatosas migratorias
(a)
Ectodermo
Endodermo Somita {epitelio}
(W
Ectodermo
clulas mesodrmicas durante la etapa de gastrulacin. En condiciones tpicas las clulas se separan de una capa cohesiva en la superficie de la gstrula primitiva y vagan en regiones interiores como clulas mesenquimatosas (fig. 7-24, a). Despus de algn tiempo, muchas de estas mismas clulas adquieren propiedades adherentes y se ensamblan en un epitelio como los somitas formados a lo largo de la lnea media dorsal del embrin (fig. 7-24, b). A continuacin, en una etapa posterior, las clulas de ciertas partes del somita pierden su adhesividad y comienzan una vez ms a vagar como mesnquima (fig. 7-24, c) en las extremidades en desarrollo para formar msculo o cartlago, o abajo de la epidermis en desarrollo para formar tejidos drmicos. La agregacin de clulas en un epitelio, como los somitas, se correlaciona con la aparicin de cadherina N sobre la superficie de las clulas (fig. 7-24, d), una propiedad que debe promover la adhesividad mutua entre las clulas. En contraste, la dispersin de clulas a partir de un epitelio se correlaciona con la desaparicin de cadherina N (y la posible aparicin de integrinas que median la adherencia entre una clula y su matriz extracelular). La asociacin de clulas en tejidos se acompaa de la formacin de uniones especializadas clula-clula, donde las cadherinas desempean un papel importante. Uniones adherentes y desmosomas: fijacin de una clula a otras clulas Las clulas de ciertos tejidos, particularmente epitelios y msculo cardiaco, son notoriamente difciles de separar debido a que se mantienen firmemente unidas entre s por uniones adherentes especializadas. Hay dos tipos principales de uniones adherentes: uniones adherentes y desmosomas. Adems de estas uniones, las clulas epiteliales a menudo contienen otros tipos de uniones clula a clula localizadas a lo largo de su superficie lateral cerca de la luz apical (fig. 7-25). Considerada en conjunto, esta especie de superficie especializada se denomina complejo de unin intercelular. En los siguientes prrafos se describe la estructura y funcin de las dos uniones adherentes del complejo, en tanto que el anlisis de los otros tipos de uniones epiteliales (uniones apretadas y uniones de abertura) se consideran ms adelante en este captulo. Las uniones adherentes (o zonula adherens] se observan en varios sitios del cuerpo. Son particularmente comunes en epitelios como el que reviste el intestino, donde adoptan la forma de un "cinturn" que rodea a cada clula cerca de su superficie apical, enlazndola a sus vecinas. Las membranas plasmticas de una unin adherente estn separadas por un espacio de 20 a 35 nm, sitio donde se concentran molculas de cadherina (fig. 7-26, a). Estas clulas al parecer se mantienen juntas por uniones dependientes de calcio formadas entre los dominios extracelulares de molculas de cadherina que sirven de puente entre las brechas de clulas vecinas. El dominio citoplsmico de las molculas de cadherina de las uniones adherentes se une mediante miembros de una familia de protenas citoplsmicas, denominadas cateninas, con filamentos de actina del citoesqueleto (fig. 7-26, b). Por lo tanto, igual que las integrinas de un contacto
Endodermo
Clulas procedentes del mesnquima
85 pm
FIGURA 7-24. Cadherinas y la transformacin epitelial mesenquimatosa. a-c) Etapas en el desarrollo temprano de un embrin de pollo, a) Durante la gastrulacin, las clulas de la capa superior del embrin (epiblasto) emigran haca un surco situado en el cenro del embrin, una rosilla en el surco, y luego se desplazan lateralmente en forma de clulas mesenquimatosas al espacio situado por debajo del epiblasto. b) Algunas de estas clulas mesenquimatosas se renen en bloques de clulas epiteliales para formar los somitas. c) En la ltima etapa del desarrollo, una parte de la pared de cada somita se transforma en clula mesenquimatosa que emigra hacia varios tejidos perifricos, d) Seccin sagital que pasa por un embrin de pollo a nivel de los somitas. La parte anterior del embrin se muestra a la izquierda y la parte posterior a la derecha. El eje anteroposterior de un embrin de pollo funciona como lnea del tiempo para el desarrollo; ciertos sucesos ocurren primero por delante, como la formacin de los distintos somitas, luego en regiones por detrs. En esta fotografa se muestra la localizacin de la cadherina N mediante inmunofluorescencia. La formacin de un somita, que se observa progresivamente desde la porcin anterior hasta la posterior de un embrin, se correlaciona con la sntesis de cadherina N. (d: Segn Kohei Hatta, Shin Tagaki, Hajime Fujisawa y Masatashi Tkeichi, Dev. Biol. 120:218, 1987.)
principalmente no adhesivas) a un epitelio (capa celular organizada fuertemente adherente), o viceversa. Esta transicin mesnquima-epitelio se ilustra por el movimiento de
CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno Unin hermtica Unin adherente
257
FIGURA 7-25. Complejo de unin intercelular, a) Diagrama que muestra el complejo de unin sobre las superficies laterales cerca de la luz de una sola clula de epitelio columnar. Consta de una unin hermtica (zonula ocludens), una unin adherente (zonula adherens) y un desmosoma (macula adherens). Otros desmosomas y las uniones de abertura se localizan ms profundamente a lo largo de la superficie lateral de las clulas. El epitelio se apoya sobre una membrana basal. b) Micrografa electrnica de un complejo de unin entre dos clulas epiteliales del intestino de ratn. TJ, unin hermtica; AJ, unin adherente; D, desmosomas. (b: Segn Eveline E. Schneeberger, Am. J. Physiol. 262:1648, 1992.)
0.1 /m
258
FIGURA 7-26. Estructura de la unin adherente. a) Modelo esquemtico de la arquitectura molecular de una unin adherente. El dominio citoplsmico de la molcula de cadherina se conecta con los filamentos de actina del citoesqueleto mediante enlaces formados por protenas que incluyen las cateninas. b) Micrografa que muestra clulas epiteliales cultivadas en contacto entre s para formar una lmina semejante a un epitelio. Las clulas se fijaron y reaccionaron con anticuerpos a cadherina E (fluorescencia roja) y con anticuerpos a una de las cateninas (fluorescencia verde), que son protenas que unen la cola citoplsmica de las cadherinas con los filamentos de actina de! citoesqueleto. En las regiones donde ambos anticuerpos estn teidos las clulas se observan en color blanco. La imagen tridimensional se obtuvo inclinando las clulas de modo que pueda observarse la membrana plasmtica lateral. Los extremos apicales de las clulas estn marcados por uniones adherentes donde las concentraciones de cadherina y catenina son ms altas, (a; Segn S. Tsukita y cois. Curr. Opin. Cell Biol. 4:837,1992; b: cortesa de Inke S. Nathke y asan R. Swedlow.)
focal, las cadherinas de una unin adherente conectan el ambiente externo con el citoesqueleto intracelular. Los desmosomas (o maculae adherens) son uniones adherentes discoides (fig. 7-27, a) observadas en varios tejidos, pero ms notablemente en epitelios, donde se presentan en situacin basal respecto de las uniones adherentes (fig. 7-25). Las membranas plasmticas de un desmosoma estn separadas por 20 a 35 nm. La regin entre las clulas (desmoglea) est llena con un material ligeramente teido que se cree acta como "pegamento" de colgena viscosa. Las placas citoplsmicas densas sobre la superficie interna de la membrana plasmtica sirven como sitios de fijacin para filamentos intermedios en asa (no microlamentos, como en las uniones adherentes) que se extienden al interior del citoplasma (fig. 7-27, a,b). Estos filamentos intermedios abrazan toda la amplitud de la clula interconectando la superficie interna de los desmosomas situados sobre lados opuestos de la clula. Los desmosomas son particularmente abundantes en tejidos sujetos a esfuerzo mecnico, como la piel y el cuello uterino. La red de filamentos intermedios semeja una cuerda y suministra continuidad estructural y resistencia tensil a toda la capa de clulas. Las membranas plasmticas de un desmosoma contienen varios miembros de la familia de las cadherinas (desmoglenas y desmocolinas), que se cree conectan el material extracelular situado entre membranas plasmticas en aposicin con los filamentos intermedios de las placas citoplsmicas. La importancia de las cadherinas para mantener la integridad estructural de un epitelio se ilustra por una enfermedad autoinmunitaria (el pnfigo vulgar), en la cual se producen anticuerpos contra una de las desmoglemas, lla-
mados antgeno del pnfigo vulgar. La enfermedad se caracteriza por prdida de la adherencia de clula a clula en la epidermis y la presencia de grandes ampollas sobre la piel. Papel de los receptores de adherencia celular en las seales transmembrana En la figura 7-28 se presenta un resumen de muchos puntos tratados en pginas previas de este captulo. El esquema muestra cada uno de los cuatro tipos de molculas de adherencia celular analizados en secciones previas y sus interacciones con los materiales extracelular y citoplsmico. Uno de los papeles de las protenas integrales de membrana es transmitir informacin a travs de la membrana plasmtica, proceso conocido como seales transmembrana. Aunque este tema ser explorado con detalle en el captulo 15, podemos hacer notar que los cuatro tipos de receptores de adherencia celular ilustrados en la figura 7-28 tienen potencial para efectuar esta funcin. Por ejemplo, integrinas y cadherinas pueden transmitir informacin entre el medio extracelular y el citoplasma por su capacidad para formar enlaces con el citoesqueleto. La unin de una integrina con su ligando puede inducir varias respuestas dentro de una clula, incluyendo cambios del pH citoplsmico, concentracin de Ca2+, fosforilacin de protenas y expresin de genes. Estos cambios, a su vez, pueden alterar el potencial de crecimiento celular, la actividad migratoria o el estado de diferenciacin. La importancia de dichos receptores se puede ilustrar al desarrollar clulas epiteliales de glndula mamaria en ausencia de glucoprotenas extracelulares, como
259
Placa Filamentos intermedios Bicapa de lpidos
(W
0.1/*
FIGURA 7-27. Estructura de un desmosoma. a) Micrografa electrnica de un desmosoma de piel de salamandra, b) Modelo esquemtico de la arquitectura molecular de un desmosoma. (a: Segn Douglas E. Kelly. ]. Cell Biol. 28:51, 1966; con permiso de Rockefeller University Press.)
FIGURA 7-28. Revisin de las interacciones de la superficie celular. Se muestran cuatro tipos de interacciones de adherencia de clula a clula y dos tipos de interacciones entre clulas y sustratos extracelulares.
260
LA PERSPECTIVA HUMANA Papel de la adherencia celular en la inflamacin y la metstasis

La inflamacin es una de las respuestas primarias de los vertebrados a la infeccin. Cuando alguna parte del cuerpo se contamina con bacterias, como puede ocurrir luego de una herida punzocortante en la piel, el sitio lesionado se convierte en un imn para gran variedad de leucocitos; stos normalmente permanecen en el torrente sanguneo, pero ahora atraviesan la capa endotelial y las membranas bsales subyacentes que revisten las venas ms pequeas (vnulas) de la regin y penetran al tejido. Una vez en el tejido, los leucocitos atacan a los microorganismos invasores e ingieren los desperdicios. Aunque la inflamacin es una respuesta protectora, tambin produce efectos colaterales negativos como fiebre, hinchazn por acumulacin de lquido, enrojecimiento y dolor. Tambin puede desencadenarse una inflamacin inapropiada, como ocurre cuando se interrumpe el flujo de sangre a un tejido luego de un ataque al corazn o de un accidente vascular cerebral. Cuando se restablece el riego sanguneo al rgano, una onda destructiva recorre el tejido (proceso conocido como dao por reperfusin). Una respuesta inflamatoria excesiva tambin puede producir asma, sndrome de choque txico y sndrome de sufrimiento respiratorio. Gran parte de la investigacin se centra en preguntas como la siguiente: cmo se reclutan leucocitos en los sitios inflamados?; por qu detienen su flujo a travs de la corriente sangunea y se adhieren a la pared de los vasos?; cmo penetran en las paredes de los vasos?; cmo pueden suprimirse algunos efectos negativos de la inflamacin sin interferir en los aspectos benficos de la respuesta inflamatoria? Las respuestas a preguntas acerca de la inflamacin se han enfocado en tres tipos de molculas para la adherencia celular: selectinas, integrinas y molculas IgSF. En la figura PH 7-1 se muestra una cadena de acontecimientos propuestos para explicar lo que ocurre durante la inflamacin aguda. Una de las primeras etapas de la inflamacin se presenta conforme las paredes de las vnulas responden a los "llamados de ayuda" del tejido daado cercano (paso 1, fig. PH 7-1). Las clulas endoteliales que revisten estas vnulas se vuelven ms adhesivas para neutrfilos circulantes, un tipo de leucocito fagocitario que efecta un ataque rpido e inespecfico contra patgenos invasores. Este cambio de las propiedades de adherencia es mediado por el despliegue transitorio de selectinas P sobre la superficie de clulas endoteliales activadas en la regin daada (paso 2, fig. PH 7-1). Cuando los neutrfilos encuentran las selectinas forman adherencias transitorias que hacen lento su movimiento. En esta etapa se puede observar que las clulas "ruedan" lentamente a lo largo de la pared del vaso. Algunas compaas de biotecnologa estn tratando de desarrollar frmacos antiinflamatorios que acten al impedir el enlace de ligandos a selectinas. Los anticuerpos antiselectina tienen capacidad para interrumpir el "rodamiento" de los neutrfilos sobre superficies revestidas de selectina P in vitro y suprimir la inflamacin en animales. Se debe lograr un efecto bloqueador semejante utilizando carbohidratos sintticos que entren en competencia con ligandos carbohidrato sobre la superficie de los neutrfilos. Conforme los neutrfilos interactan con el endotelio de vnulas inflamadas, un proceso de activacin (desencadenado por un f osfolpido denominado factor activador de plaquetas,
O
Activacin endotelial Atrapamiento de neutrfilos Activacin de neutrfilos
O
Adherencia de neutrfilos
O
Invasin de neutrfilos
T - ICAM
| - Selectina
- Factor activador de plaquetas
- Integrina (no activada) \ ntegrina (activada)
FIGURA PH 7-1. Etapas en el desplazamiento de neutrfilos desde el torrente sanguneo durante la inflamacin. Estas etapas se describen en el texto.
261
producido por el endotelio) incrementa el enlace de integrinas ya situadas sobre la superficie del neutrfilo (paso 3, fig. PH 7-1). Las integrinas activadas se enlazan a molculas IgSF (ICAM)* sobre la superficie de las clulas endoteliales y causan que los neutrfilos detengan su rodamiento y se adhieran firmemente a la pared del vaso (paso 4, fig. PH 7-1). A continuacin, los neutrfilos unidos cambian su forma y se deslizan a travs de la capa endotelial (proceso denominado extravasacin) al interior del tejido daado (paso 5, fig. PH 7-1). Esta cascada de sucesos, que implica diferentes tipos de molculas para adherencia de clulas, garantiza que la unin de clulas sanguneas a la pared vascular y su penetracin subsecuente slo ocurra en sitios donde se requiera la presencia de leucocitos. La importancia de las integrinas en la respuesta inflamatoria se demuestra por una enfermedad rara denominada deficiencia de adherencia leucocitaria (DAL). Las personas con esta enfermedad no producen la subunidad fe que forma parte de algunas integrinas de leucocitos. En consecuencia, los leucocitos de estas personas no pueden adherirse a la capa endotelial de las vnulas, paso requerido para salir del torrente sanguneo. Estos pacientes sufren frecuentes infecciones bacterianas que ponen en riesgo su existencia, y que a veces son mortales. El mejor tratamiento de la enfermedad consiste en trasplante de medula sea que suministra al paciente las cepas celulares capaces de formar leucocitos normales. La administracin de anticuerpos contra la subunidad ^2 puede simular los efectos de DAL al interrumpir el movimiento de neutrfilos y de otros leucocitos hacia afuera de los vasos sanguneos. Estos anticuerpos han mostrado utilidad en la prevencin del dao por
* La presencia de molculas ICAM se puede emplear como indicador de reaccin inflamatoria en evolucin. Por ejemplo, la presencia de ICAM-1 en la bilis de pacientes a quienes se ha practicado trasplante heptico demuestra rechazo del nuevo rgano.
reperfusin luego de un ataque cardiaco. En el cncer, las clulas escapan de los mecanismos normales del cuerpo para controlar el crecimiento y proliferan de manera irregular. Si las clulas cancerosas permanecieran aisladas en una sola masa, como ocurre en condiciones tpicas, por ejemplo, el cncer de tiroides o algunos tipos de cncer cutneo, la mayor parte de los tumores cancerosos seran fciles de curar mediante extirpacin quirrgica del tejido enfermo. Sin embargo, casi todos los tumores malignos desprenden clulas capaces de salir de la masa tumoral primaria, penetrar a la corriente sangunea o los conductos linfticos e iniciar el crecimiento de tumores secundarios en otras partes del cuerpo. La propagacin de un tumor dentro del cuerpo se llama metstasis y es la razn de que el cncer sea una enfermedad tan devastadora. Se cree que las clulas metastticas (clulas cancerosas capaces de formar tumores secundarios) poseen propiedades especiales en la superficie celular no compartidas con la mayor parte de otras clulas del tumor. Las clulas metastticas deben ser menos adherentes que otras clulas para "liberarse" de la masa tumoral; tambin deben poder atravesar gran nmero de barreras, como paredes vasculares o la membrana basal que rodea a los tejidos, y ademas tambin deben ser capaces de invadir tejidos normales para formar colonias secundaras. Igual que los estudios de inflamacin descritos antes, los intentos para entender las bases moleculares de la metstasis se han enfocado en las protenas de la superficie celular que median la adherencia celular. En la produccin de metstasis se ha implicado a cambios en el nmero y tipo de diferentes molculas de adherencia celular, y por lo tanto a la capacidad de las clulas para adherirse a otras clulas o matrices extracelulares. Por ejemplo, la presencia de receptores capaces de unirse a laminina se correlaciona con la conducta metasttica del cncer mamario del ser humano y de las clulas de los melanomas: las clulas que se adhieren con mayor avi-
dez a las superficies revestidas con laminina muestran mayor potencial metasttico cuando se inyectan a ratones de laboratorio. Es de esperar que la presencia de receptores a laminina ayude a las clulas cancerosas a penetrar membranas bsales ricas en laminina. La incubacin de clulas de melanoma con fragmentos de laminina antes de inyectarlos, tratamiento que "amarra" a los receptores de la clula para laminina, reduce notablemente el nmero de tumores desarrollados en los animales husped. En contraste, las clulas malignas con frecuencia contienen un pequeo nmero de receptores para fibronectina (como la integrina ct^/i), propiedad que puede aumentar la capacidad de las clulas para desplazarse sobre su matriz extracelular. Cuando las clulas malignas se someten a manipulaciones de ingeniera gentica para expresar concentraciones mucho ms elevadas de integrinas a$\, disminuye mucho su capacidad para producir tumores en ratones. Cambios en la concentracin de cadherina pueden suministrar otra medida del potencial metasttico. En una investigacin de clulas tumorales epiteliales, cuanto mayor fue el nivel de expresin de cadherina E, menor el potencial metasttico de las clulas. Otros estudios sugieren que la prdida progresiva de cadherinas de la superficie de las clulas cancerosas conforme crecen en un tumor aumenta el nivel de malignidad de las clulas. Al parecer, la presencia de cadherina E favorece la adherencia de las clulas entre s, en tanto que la prdida de este receptor de la membrana favorece la dispersin de las clulas tumorales a sitios distantes. En realidad, cuando se obliga a las clulas malignas a expresar copias extra del gen cadherina E, reducen mucho su capacidad de causar tumores cuando se inyectan a animales husped. Al juntar los resultados de estos estudios se puede concluir que las molculas para adherencia celular desempean un papel importante en el avance de la enfermedad maligna. Aun no se determina si dichas molculas pueden ser objetivos tiles en la teraputica del cncer.
262
fibronectina y laminina. Estas clulas muestran un aspecto aplanado, indiferenciado y producen leche con muy poca protena. Cuando se aade laminina al cultivo esta protena se une a las integrinas situadas en la superficie de las clulas, estimula una transformacin de las clulas para diferenciarlas en clulas mamarias e induce un incremento 50 veces mayor en la produccin de protenas de la leche. Inversamente, los cambios en el citoplasma pueden generar seales transferibles al exterior a travs de la membrana plasmtica. Las demostraciones de seales "de adentro hacia afuera" provienen de estudios efectuados con integrinas cuya conformacin puede cambiar segn el estado fisiolgico de las clulas. Por ejemplo, las plaquetas de la sangre circulante normalmente no se unen a molculas de fibringeno en la sangre. Sin embargo, cuando se activan en un sitio de lesin vascular, las integrinas anbft situadas en la superficie de las plaquetas sufren un cambio de conformacin que aumenta su afinidad a fibringeno. Elenlace de fibringeno a integrinas activadas provoca agregacin de plaquetas y taponamiento de la herida (fig. 7-15). La formacin de placas de colesterol en la pared de una arteria tambin puede activar plaquetas y conducir a la formacin de un cogulo sanguneo capaz de obstruir una arteria coronaria y provocar ataque al corazn.
7-4 Uniones hermticas: sellado del espacio extracelular

Desde hace varios decenios los bilogos saben que cuando se colocan ciertos tipos de epitelio, como piel de rana o pared de la vejiga urinaria, entre dos compartimientos que contienen diferentes concentraciones de soluto, la difusin de iones o solutos de un compartimiento al otro a travs del epitelio es muy escasa. Dada la impermeabilidad de las membranas plasmticas no es sorprendente que los solutos no puedan difundir libremente a travs de las clulas de una capa epitelial, pero por qu estas sustancias no pueden atravesar los espacios situados entre las clulas? La razn se demostr en la poca de 1960 a 1970, cuando se describieron contactos especializados denominados uniones hermticas, formadas entre clulas epiteliales vecinas. Estas uniones ocurren en el extremo ms alejado del borde apical de los complejos de unin entre clulas epiteliales adyacentes (fig. 7-25). La figura 7-29, a, es una micrografa electrnica de una seccin efectuada a travs de una unin hermtica perpendicular a las membranas de clulas adyacentes. Se observa que las membranas adyacentes hacen contacto en puntos discontinuos en vez de fusionarse en una superficie amplia. Como se indica en el modelo de la figura 7-29, b, se cree que los puntos de contacto celular representan sitios donde las protenas integrales de dos membranas adyacentes se encuentran en el espacio extracelular. Recientemente se purific la protena integral de las uniones hermticas y se le denomin ocludina. El anlisis de fracturas por congelacin, que permite observar la cara interna de la membrana, muestra que las membranas plasmticas de la unin hermtica contienen fibras interconectadas (fig. 7-29, c) que corren paralelas entre s y con la superficie apical del epitelio. Las fibras (o
surcos en la cara opuesta de la membrana fracturada) corresponden a hileras de protenas integrales de membrana alineadas que pueden observarse en seccin transversal en las figuras 7-29, a y b. Las hileras de protenas de membrana forman una banda continua que rodea por completo la clula como un empaque, haciendo contacto por todos lados con las clulas vecinas (fig. 7-29, d). En consecuencia, las uniones hermticas son uniones ocluyentes; o sea, forman una barrera continua de impermeabilidad que sella el espacio extracelular sobre uno de los lados del epitelio en relacin con el otro lado. Las uniones hermticas con gran nmero de fibras tienden a establecer un mejor sellado en comparacin con las uniones de fibras escasas. La capacidad de las uniones hermticas para impedir el paso de molculas entre las clulas se puede demostrar sumergiendo un pedazo de tejido en un material electrnicamente denso, como el metal pesado lantano. Cuando se examina posteriormente el tejido en el microscopio electrnico, se observa que el lantano penetra entre las clulas pero slo hasta los bordes superior e inferior de las uniones hermticas (fig. 7-30). Las uniones hermticas que unen las clulas endoteliales de los capilares cerebrales forman la barrera hematoenceflica, que impide el paso de sustancias de la corriente sangunea al interior del tejido cerebral. La barrera hematoencefica protege al cerebro de la penetracin de solutos "indeseados", pero tambin evita el acceso de muchos frmacos al sistema nervioso central. Por consiguiente, uno de los objetivos de la industria farmacutica es desarrollar tcnicas para "abrir" las uniones hermticas del cerebro y permitir el paso de agentes teraputicos de peso molecular elevado. Es digno de mencionar que algunos iones pequeos e incluso molculas de agua no pueden penetrar ciertas uniones hermticas, pero en cambio las clulas del sistema inmunolgico capaces de penetrar a los tejidos inflamados (pgina 260) pueden atravesar capas epiteliales a travs de estas uniones. Se cree que estas clulas envan una seal que abre la unin, permitindoles el paso. Puesto que durante el paso de los leucocitos no disminuye la resistencia elctrica de la capa epitelial, se cree que las uniones hermticas deben abrirse alrededor de los leucocitos y mantener estrecho contacto con las clulas inmunolgicas que las atraviesan.
7-5 Uniones de abertura y plasmodesmosomas: mediacin de la comunicacin celular

Las uniones de abertura son sitios entre clulas animales especializadas para la comunicacin intercelular. Las micrografas electrnicas revelan que estas uniones de abertura son sitios donde las membranas plasmticas de clulas adyacentes se ponen en estrecho contacto entre s (a una distancia aproximada de 3 nm), pero no entran en'contacto directo. En vez de ello, la abertura entre las clulas es atravesada por "fibras" sumamente finas (fig, 7-31, a) que en realidad son "caeras" moleculares que pasan a travs de membranas plasmticas adyacentes y se abren en el cito-
CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno '"":".
263
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Molculas de soluto
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Protenas de membrana en la unin hermtica Espacio intercelular Citoplasma Protenas jte membrana en la unin hermtica Bicapa de lpidos
Citoplasma
Bicapa de lpidos
(b)
FIGURA 7-29- Uniones hermticas, a) Micrografa electrnica de un corte a travs de la regin apical de dos clulas epiteliales adyacentes que muestra en qu sitio las membranas plasmticas de las dos clulas se renen en puntos intermitentes en la unin hermtica, b) Modelo de unin hermtica que muestra los puntos intermitentes de contacto entre protenas integrales de dos membranas en aposicin. Cada uno de estos sitios de contacto se extiende en forma de una hilera de protenas dentro de las membranas formando una barrera que bloquea la penetracin de solutos en el espacio entre las clulas. c) Rplica de una fractura por congelacin que muestra la cara E de la membrana plasmtica de una de las clulas de una unin hermtica. Los surcos en a cara E permanecen luego de tirar de las protenas integrales de membrana desde la mitad de la misma. Cada surco representa una lnea continua de contacto entre las clulas (que aparecera como punto de contacto si la unin se hubiera cortado en seccin transversal, como en la parte a), d) Gammagrafa electrnica de la superficie apical de un epitelio que muestra la naturaleza circular de las uniones hermticas, (a: Cortesa de Daniel S. Friend; c: segn Phippa Claude y Daniel A, Goodenogh, ]. Cell Biol. 53:390, 1973; con permiso de Rockefeller University Press; d: cortesa de D. Tarn.)
plasma de clulas vecinas (fig. 7-31, b). Las uniones de abertura unen clulas de casi todos los tejidos de mamferos; las principales excepciones son el msculo esqueltico y la mayor parte del tejido nervioso. En comparacin con otras uniones intercelulares, las uniones de abertura muestran una composicin molecular simple; consisten casi en su totalidad de una protena integral de membrana denominada conexina. Las conexnas se agrupan dentro de la membrana plasmtica para formar un
complejo de mltiples subunidades denominado conexn, que rodea completamente la membrana (fig. 7-31, b). Cada conexn se compone de seis subunidades de conexina dispuestas alrededor de un agujero o anillo central de aproximadamente 1.5 nm de dimetro (fig. 7-31, c). Los conexones son ensamblados en algn punto despus que se sintetizan los polipptidos conexina en el retculo endoplsmico rugoso, pero antes de llegar a la membrana plasmtica (cap. 8). Las conexinas son miembros de una familia multignca;
264
0.2/im FIGURA 7-30. Las propiedades ocluyentes de una unin hermtica se revelan experimentalmente sumergiendo el tejido en una suspensin coloidal de un metal electrnicamente denso, el lantano, antes de fijacin. Se observa que el lantano penetra entre las clulas de este tejido epitelial de rata, pero no atraviesa a regin de la unin hermtica. (Cortesa de Eveline E. Schneeberger.)
cuando menos se ha aislado una docena de conexinas diferentes procedentes de distintos tejidos y tambin se han clonado sus genes. Algunas clulas sintetizan ms de un tipo de conexina, pero todava no se ha demostrado de manera concluyente si un solo conexn puede contener ms de un tipo de subunidad de conexina. Durante la formacin de las uniones de abertura, los conexones de membranas plasmticas de clulas opuestas se unen entre s a travs de interacciones de los dominios extracelulares de las subunidades de protena. Una vez alineados, los conexones de clulas adyacentes forman canales completos que conectan el citoplasma de una clula con el citoplasma de su vecina. A veces los conexones se agrupan en regiones especficas formando placas de uniones de abertura que se visualizan mejor en las rplicas de fracturas por congelacin (fig. 7-31, d).
Segn se analiza en La va experimental de este captulo, las uniones de abertura son sitios de comunicacin entre el citoplasma de clulas adyacentes. La existencia de comunicacin intercelular por uniones de abertura (CIUA) se manifiesta por el paso de corrientes inicas o de colorantes de bajo peso molecular, como fluorescena, desde una clula a sus vecinas (fig. 7-32). Las uniones de abertura de mamferos permiten la libre difusin de molculas con peso molecular aproximado a 1 000 daltons o menos. En contraste con los canales inicos altamente selectivos que conectan una clula con el medio externo (pg. 145), los canales de las uniones de abertura son notablemente no selectivos: si la molcula es lo bastante pequea, pasa a travs de la caera. Las uniones de abertura desempean un papel importante en el paso de corrientes inicas de una clula a sus vecinas, como se ilustra por ondas de excitacin que viajan a travs de los msculos cardiaco y liso. La contraccin del corazn de mamfero puede ser estimulada por un impulso elctrico generado en una pequea regin de tejido muscular especializado llamado nodulo sinoauricular, que acta como marcapaso del corazn. Los impulsos se propagan con rapidez a travs de las clulas que constituyen la pared del corazn, pasando de cada clula muscular cardiaca al interior de las clulas vecinas por medio de uniones de abertura que conectan las clulas. De igual manera, el flujo de corriente a travs de las uniones de abertura que conectan las clulas de msculo liso en la pared del esfago o del intestino genera ondas peristlticas coordinadas que se desplazan lentamente en direccin caudal a lo largo de la pared. El hecho de que las uniones de abertura puedan reunir gran nmero de clulas en ntimo contacto citoplsmico constituye en realidad un compartimiento gigantesco relacionado con molculas de tamao suficientemente pequeo para pasar a travs de los canales de comunicacin. Sera de esperar que esta condicin tuviese consecuencias fisiolgicas muy importantes, ya que algunas molculas reguladoras sumamente activas, como el AMP cclico y otros segundos mensajeros (cap. 15), son lo bastante pequeas para atravesar los canales de las uniones de abertura. Por consiguiente, se puede concluir que las uniones de abertura integran las actividades de clulas individuales de los tejidos en una unidad funcional capaz de responder de manera simultnea, aunque slo una parte de las clulas se expongan al estmulo directo. Las uniones de abertura tambin permiten la cooperacin metablica entre las clulas porque comparten metabolitos clave, como ATP, azcares fosfato, aminocidos y muchas coenzimas lo bastante pequeas para atravesar los conductos intercelulares. Plasmodesmosomas Las plantas carecen de uniones especializadas, como las observadas en tejidos animales, pero la mayor parte de las clulas vegetales se conectan entre s por medio de plasmodesmosomas (fig. 7-33), Los plasmodesmosomas son conductos citoplsmicos cilindricos, de 30 a 60 nm de dimetro, extendidos directamente entre clulas adyacentes a travs
265
0.15 pm
Citoplasma Partculas en la unin de tura (conexones)
Espacio intercelular
Citoplasma Conexn
Canal hidrfilo
Subunidad de conexina
FIGURA 7-31. Estructura de la unin de abertura, a) Micrograh'a electrnica de un corte a travs de una unin de abertura perpendicular al plano de las dos membranas adyacentes. El aspecto en cuentas de rosario de las membranas se debe a hileras de partculas intramembrana que sobresalen de la superficie de ambas membranas y hacen contacto en el espacio extracelular interpuesto, b) Modelo esquemtico de una unin de abertura que muestra la disposicin de seis subunidades de conexina para formar un conexn, el cual contiene el conducto central que conecta el citoplasma de las dos clulas adyacentes, c) Imagen de alta resolucin basada en difraccin ptica de una membrana aislada teida en negativo que contiene una placa de uniones de abertura (como se muestra en d). Se muestran las dimensiones relativas del anillo y del conexn y el empacamiento hexagonal de las unidades dentro de la placa, d) Rplica de fractura por congelacin de una placa de unin de abertura mostrando el gran
nmero de conexones y su alto grado de concentracin, (a: Segn Camilla Peracchia y Angela F. Dullhunty, J. Cell Biol. 70:419, 1976; con permiso de Rockefeller University Press; c: cortesa de Daniel Goodenough; d: cortesa de David Albertini.)
de la pared celular interpuesta. Los plasmodesmosomas estn revestidos de una membrana plasmtica y de ordinario contienen una varilla central densa, el desmotbulo, derivado del retculo endoplsmico Uso de las dos clulas en contacto. Igual que las uniones de abertura entre clulas
animales, los plasmodesmosomas sirven como sitios de comunicacin intercelular que unen a las clulas de un tejido vegetal para formar una unidad metablica. La va de paso entre clulas vegetales adyacentes presumiblemente se limita al estrecho espacio entre la superf-
266
(a)
FIGURA 7-32. Resultados de un experimento que demuestra el paso de solutos de bajo peso molecular a travs de las uniones de abertura. Micrografa en campo oscuro que muestra el paso de fluorescena desde una clula en la cual fue inyectada (X) a las clulas que la rodean. (Segn R. Azarnia y W.R. Loewenstein, J. Memb. Biol. 6:378, 1971.)
50 mm
ce externa del desmotbulo y la superficie interna de la membrana plasmtica. Estudios acerca del movimiento de colorantes inyectados desde una clula al interior de sus vecinas sugiere que, igual que las uniones de abertura, los plasmodesmosomas normalmente son impermeables a molculas mayores de unos 1 000 daltons. Sin embargo, infecciones por virus, como el virus del mosaico del tabaco, incrementan la permeabilidad de los plasmodesmosomas. Como resultado, las partculas virales intactas o sus cidos nucleicos pueden pasar entre las clulas, propagando la infeccin a travs de la planta.
V
(b)
^ Membrana plasmtica
FIGURA 7-33. Plasmodesmosomas. a) Micrografa electrnica de un corte a travs de un plasmodesmosoma del gametofito de un musgo. Se observa el desmotbulo, que consiste en una membrana continua con el RE del citoplasma en ambos lados de la membrana plasmtica, b) Dibujo esquemtico de un plasmodesmosoma. (a: Segn Lewis G. Tilney, Toad J. Cooke, Patricia S. Conney y Man/ S. Tilney, ]. Cell Biol. 112.740, 1992; con permiso de Rockefeller University Press.)
7-6 Paredes celulares

Como es de esperar, una membrana plasmtica de lpidos y protenas de unos 10 nm de espesor slo ofrece proteccin mnima al contenido celular. Por lo tanto, no es sorprendente que las clulas sean estructuras sumamente frgiles. Las clulas de casi todos los organismos diferentes de los animales estn envueltas en una capa externa protectora: los protozoarios tienen una cubierta externa engrosada, en tanto que bacterias, hongos y plantas tiene paredes celulares distinguibles. Restringiremos nuestro anlisis a la pared celular de las plantas. La pared de las clulas vegetales desempea numerosas funciones vitales. Confiere a las clulas su forma caracterstica (fig. 7-34, a); suministra apoyo mecnico a as clulas y, consideradas en conjunto, a toda la planta; protege a
las clulas contra desgaste mecnico, ingreso osmtico de agua y de patgenos; media las interacciones de clula a clula; y acta como barrera primaria a la penetracin de sustancias moleculares de gran tamao, aunque permite con rapidez el paso de molculas pequeas y de iones. Cuando se quita la pared celular de una clula vegetal cultivada tratndola con enzimas desdobladoras de la pared, como la celulasa, se libera la propia clula viviente denominada protoplasto. Como es de esperar, los protoplastos son sumamenete sensibles a cambios en su ambiente externo. En condiciones normales, las clulas vegetales estn rodeadas de lquidos hipotnicos, lo que aumenta su volumen hasta presionar contra la pared celular y ejercer presin por turgencia (pg. 144). En contraste, si se colocan protoplastos en medios ligeramente hipotnicos, se hinchan y se rompen.
267
45, proporciona el elemento fibroso de la pared celular. Las molculas de celulosa se organizan en microfibrillas (fig. 7-34, b), que confieren rigidez a la pared celular y suministran resistencia contra fuerzas tnsiles (tirn). Cada microfibrilla mide unos 10 nm de dimetro y se compone de un haz de 40 a 60 molculas de celulosa orientadas paralelamente y unidas entre s por puentes de hidrgeno. La pared celular est compuesta de capas donde las microfibrillas de capas adyacentes casi siempre se orientan en forma perpendicular entre s (fig. 7-34, b), no muy diferente a la organizacin de fibras de colgena en las capas del estroma corneal (fig. 7-4). Las molculas de celulosa se ensamblan en la superficie celular. Un complejo enzimtico integrado a la membrana plasmtica aade unidades de glucosa en el extremo de una molcula de celulosa en crecimiento (fig. 7-35, a,b). La orientacin de las microfibrillas en la superficie externa de la membrana plasmtica al parecer es determinada por la orientacin de los microtbulos corticales situados justo por debajo de la membrana plasmtica (fig. 7-35, b). En contraste con las microfibrillas de celulosa, los materiales de la matriz se sintetizan dentro del citoplasma (fig. 7-35, c) y se transportan a la superficie celular en vesculas secretorias. La matriz de la pared celular se compone de tres tipos de macromolculas: 1. Hemicelulosa, un polmero de la celulosa cuyos residuos de glucosa contienen cadenas laterales de otros azcares, principalmente xilosa (que constituye un xiloglucano). Las molculas de hemicelulosa se unen a la superficie de las microfibrillas de celulosa enlazndolas transversalmente en una red estructural compleja (fig. 7-34, b). 2. Pectinas, que son una clase heterognea de polisacridos con carga negativa que contienen cido galacturnico. Igual que los glucosaminglicanos de las matrices celulares animales, las pectinas forman un extenso gel hidratado que llena los espacios situados entre elementos fibrosos. Adems, el gel que contiene pectina acta como una criba molecular que determina el tamao de las molculas que pueden penetrar a la pared y llegar a la membrana plasmtica. Cuando algn patgeno ataca a una planta, los fragmentos de pectina liberados de la pared actan para estimular una respuesta defensiva de la clula vegetal. Las pectinas tambin constituyen la masa de la laminilla media, una capa que reside entre paredes celulares adyacentes y que sirve como cemento de unin. La pectina purificada se emplea comerciamente para dar consistencia de gel a compotas y gelatinas. 3. Protenas estructurales, que desempean un papel importante para determinar la arquitectura de la pared celular. Entre stas se incluyen protenas ricas en hidroxiprolina, protenas ricas en prolina y protenas ricas en glicina. El porcentaje de estos diferentes materiales en las paredes celulares es muy variable, y depende del tipo de planta, tipo de clula y etapa de la pared. Igual que las matrices extracelulares del tejido conectivo animal, las paredes de
100 nm
FIGURA 7-34. Pared de una clula vegetal, a) Micrografa electrnica de una clula vegetal rodeada por su pared celular, b) Micrografa electrnica que muestra los enlaces transversales de microfibrillas de celulosa y de hemicelulosa en la pared celular de una cebolla luego de extraer los polmeros no fibrosos de la pectina. (a.: Cortesa de W. Cordn WJwley; b: segn M.C. McCann, B. Wells y K. Roberts, J. Cell Sci. 96:329, 1990, con permiso de lite Compcmy ofBiologists Ltd.)
Las paredes de las clulas vegetales a menudo se comparan con materiales de construccin, como concreto reforzado con fibra de vidrio, porque contienen un elemento fibroso integrado en una matriz no fibrosa semejante a un gel. La celulosa, cuya estructura se describi en la pgina
268
las clulas vegetales son estructuras dinmicas que pueden modificarse en respuesta a cambios de las condiciones ambientales. Las paredes celulares se originan en una placa celular (descrita en la figura 14-33) situada entre el citoplasma de las clulas hijas recin formadas. Una vez generada la placa celular se secretan materiales en el espacio extracelular, donde se adsorben a las dos superficies de la placa para formar la pared celular, ms compleja, de las clulas adyacentes. Adems de suministrar apoyo mecnico y proteccin contra agentes extraos, la pared celular de una clula vegetal joven no diferenciada debe tener capacidad para crecer en igual proporcin con la clula a la cual rodea. Las paredes de clulas en crecimiento se denominan paredes primarias, y permiten una distensibilidad de la cual carecen las paredes secundarias ms gruesas presentes alrededor de la mayor parte de clulas vegetales maduras. El crecimiento de las paredes primarias ocurre por introduccin de materiales en la estructura de una pared ya existente. Las paredes secundarias tienen mayor contenido de celulosa y, en muchos casos, ms cantidad de lignina (polmero que contiene fenol y es el principal componente de la madera), prcticamente ausente en las paredes primarias. Por ejemplo, las paredes de clulas xileno contienen gran cantidad de lignina que suministra el apoyo estructural necesario para la translocacin de agua. La superficie externa de las paredes de clulas epidrmicas de las hojas contiene una sustancia crea que evita la prdida de agua y protege contra bacterias y hongos.
Microtbulo
Citoplasma
(b)
FIGURA 7-35. Sntesis de los materiales de la pared de una clula vegetal, a) Rplica de fractura por congelacin de la membrana de la clula de una alga mostrando la cara P con un grupo de rosetas organizadas en disposicin hexagonal. Se cree que estas rosetas representan las enzimas sintetizadoras de celulosa situadas dentro de la membrana plasmtica, b) Modelo de la acumulacin de fibrillas de celulosa. Se piensa que cada roseta forma una sola microfibrilla que se relaciona lateralemente con las microfibrillas de otras rosetas para formar una fibra cada vez mayor. Toda la disposicin de rosetas puede desplazarse lateralemente en la membrana conforme va siendo empujada por las molculas de celulosa que se alargan. Los estudios sugieren que a direccin del movimiento de las rosetas de la membrana es determinada por la orientacin de los microtbulos presentes en el citoplasma cortical por debajo de la membrana plasmtica (analizado en el captulo 9). c) Micrografa electrnica del complejo de Golgi de una clula de la cubierta de una raz perifrica con anticuerpos contra polmeros del cido galacturnico, uno de los principales componentes de la pectina. Este material, igual que las otras pectinas y la hemicelulosa, se ensambla en el complejo de Golgi. La barra representa 0.25 fim. (a: Segn T,H. Giddings, }r., D.L. BroweryL.A. Staehelin, J. Cell Biol. 84:332, 1980; c: segn Margaret Lynch y LA. Staehelin, J. Cell Biol. 118:477, 1991; todas con permiso de Rockefdler University Press.)
CAPITULO? Interacciones entre las clulas y su entorno
269
LA VIA E X P E R I M E N T A L
Papel de las uniones de abertura en la comunicacin intercelular

Segn la informacin presentada en el captulo precedente, se podra asumir que la transmisin sinptica siempre ocurre por liberacin a partir de la neurona presinptica de un transmisor qumico que se une a la superficie de la clula postsinptica. Este fue el punto de vista prevaleciente hasta el decenio de 1950, cuando Edwin Furshpan y David Potter, del University College, en Londres, encontraron una notable excepcin. Furshpan y Potter estaban estudiando la transmisin sinptica entre neuronas gigantes en la cuerda nerviosa del langostino. Observaron que una pequea despolarizacin subumbral inducida en la clula nerviosa presinptica causaba despolarizacin muy rpida {0.1 mseg) en la clula postsinptica.1'2 Si las clulas nerviosas se conectaban por sinapsis qumica, en el potencial de membrana no deba propagarse un cambio subumbral a la clula postsinptica, puesto que no es suficiente para estimular la liberacin de molculas de neurotransmisor. Aun si se liberaran molculas de neurotransmisor, posiblemente no induciran cambios tan rpidos en la clula postsinptica. Furshpan y Potter concluyeron que las dos clulas nerviosas estaban conectadas por una sinapsis de tipo diferente, una sinapsis electrotnica, en la cual las corrientes elctricas procedentes de la clula presinptica podan fluir directo a la clula postsinptica en el otro lado de la sinapsis. Se asumi que ese tipo de conexin de clula a clula, que permite el flujo de corriente entre clulas, era peculiar de clulas excitables como las neuronas y se especializaba en la comunicacin intercelular. A principio del decenio de 1960, Yoshinobu Kanno y Werner Loewenstein, de la Columbia University, estudiaban las propiedades de permeabilidad de la envoltura nuclear, el complejo membranoso que rodea al ncleo. Para determinar si los iones podan atravesar la envoltura nuclear analizaron fas grandes clulas que constituyen los tejidos epiteliales de las larvas de la mosca de la fruta (clulas que suministran los cromosomas gigantes tan tiles para estudios genticos). Estas clulas eran lo bastante grandes para permitir la penetracin de microelectrodos capaces de inducir y registrar corrientes inicas (fig. VE 7-1). Para su sorpresa, Kanno y Loewenstein observaron que cuando se inyectaban iones en el ncleo de una clula, el flujo de iones (medido como corriente elctrica) se propagaba dentro del citoplasma de la clula inyectada y tambin flua directo al interior del citoplasma de la clula adyacente. En realidad, el potencial registrado en la clula adyacente era casi tan grande como el de la clula donde originalmente se induca la corriente. Kanno y Loewenstein concluyeron que las clulas epiteliales de la glndula salival estaban elctricamente acopladas entre s, trmino que indica que los iones pueden fluir libremente de una clula a la otra a travs de uniones intercelulares de baja resistencia.3 Si los pequeos iones inorgnicos pueden pasar a travs de estas uniones entre las clulas vecinas, qu ocurre con sustancias de mayor tamao? Cuando se inyect un pequeo volumen de iones fluorescentes de fluorescena (peso molecular de 376 daltons) en el citoplasma de una clula mediante una micropipeta, la fluorescencia se difundi con rapidez hacia las clulas adyacentes hasta que toda la capa epitelial brillaba por la presencia del trazador (como en la figura 7-32). En contraste, de las clulas no se sali colorante fluorescente alguno hacia el medio externo, lo que indica que las molculas de fluorescena difundan directo del citoplasma de una clula al interior del citoplasma de las clulas adyacentes por me.dio de contactos permeables de clula a clula.4 Pronto se efectuaron observaciones similares en varios tipos diferentes de clulas epiteliales y mesenquimatosas, incluyendo las de varios mamferos; esto indica que tales uniones comunicantes estn muy ampliamente difundidas. El descubrimiento de que la clula contiene sitios en su superficie que permiten el libre intercambio de sustancias con las clulas vecinas desafi el concepto bien establecido de que las clulas eran unidades independientes completamente aisladas de su medio exterior. Los estudios de microscopa electrnica demuestran que la superficie de la clula est rodeada por una membrana plasmtica continua, pero la estructura de esta membrana se altera de alguna manera en las regiones donde las clulas hacen contacto con otras clulas. De otra manera, sera imposible para las sustancias desplazarse directo del citoplasma de una clula al interior de otra. En 1967, Jean Paul Revel y M. J. Karnovsky5 descubrieron uniones intercelulares que contienen canales entre clulas en estrecha aposicin. Las micrografas electrnicas de estas uniones mostraron una hendidura distinguible entre clulas adyacentes, lo que llev a los investigadores a darles el nombre de "uniones
FIGURA VE 7-1. Micrografa que muestra la instalacin de microelectrodos de registro en clulas vivientes del tbulo de Malpighi de una clula de insecto. (Cortesa de Werner R. Loewenstein.)
270
CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y sw entorno
nM 1000
750(a)
500-
250-
0[Ca2+j
(b)
10s
20s
FIGURA VE 7-2. Ondas de calcio inducidas por estimulacin mecnica en: a) un cultivo testigo de clulas de un glioma C6 de rata, y b) una clona de las mismas clulas mostradas en a, pero a la cual se le ha transfectado DNA conexina43. El DNA inyectado se transcribe y traduce en las clulas transfectadas y las molculas de la protena conexina se incorporan a la membrana plasmtica. Cuando se estimula mecnicamente una de las clulas no transfectadas hay muy poco paso de Ca2+ a sus vecinos; en contraste, cuando las clulas que expresan el gen conexina se estimulan mecnicamente, pasa una onda de Ca2* de una clula a otra a travs de las uniones de abertura formadas por la protena conexina43. (Segn Andrew C. Charles y cois. }. Cel Biol. 118:197, 1992; con permiso de Rockefdler University Press.)
de abertura" para distinguirlas de las uniones hermticas donde las clulas adyacentes entran en contacto directo. Se han efectuado varios estudios para saber ms acerca del tamao de los canales que conectan el citoplasma de clu-
las adyacentes. En el laboratorio de Loewenstein se probaron sondas fluorescentes unidas a pptidos de longitud variable. Se observ que molculas mayores de 1 200 daltons podan difundir entre las clulas de las glndulas salivales de larvas
Glioma
la)
(b)
FIGURA VE 7-3. a) Cuando una pequea masa de clulas de un glioma C6 se implant en el cerebro de una rata, las clulas se desarrollaron en una gran masa tumoral luego de dos semanas de crecimiento, b) Las mismas clulas que se han transfectado con DNA conexina43 y que se presume participan en a comunicacin intercelular a travs de las uniones de abertura se desarrollan en una masa tumoral mucho ms pequea durante un periodo similar. (Segn Christian C. Naus y cois. Cncer Res. 52:4210, 1992.)
271
de insectos.6 Segn estimaciones del tamao de estas molculas, los investigadores concluyeron que el dimetro interno del canal era alrededor de 10 a 15 A (1.0 a 1.5 nm), valor que concuerda estrechamente con el estimado por micrografa de alta resolucin de las uniones de abertura tomadas con microscopio electrnico.7
PAPEL DE LAS UNIONES DE ABERTURA EN EL CNCER

Una de las primeras cuestiones consideradas por Kanno y Loewenstein luego de su descubrimiento de los contactos intercelulares permeables fue si este mismo tipo de contacto estaba presente en las clulas cancerosas. Se saba que el ndice de crecimiento de las clulas normales era influido por estmulos procedentes de su ambiente. Tal vez uno de los factores que permitieron a las clulas cancerosas apartarse de los mecanismos de control del crecimiento que prevalece en las clulas normales era la prdida de su capacidad para recibir molculas reguladoras de sus clulas vecinas. Kanno y Loewenstein investigaron esta posibilidad midiendo_el flujo de corriente inica en tejido heptico normal en comparacin con el flujo entre clulas de varios tumores hepticos. Se pudo descubrir corriente inica que flua con rapidez entre las clulas del hgado normal de una rata, pero no hubo paso de corriente entre las clulas de ninguno de los tumores hepticos investigados.8 A partir de estos estudios iniciales se han analizado cientos de clulas cancerosas de diferente tipo en relacin con su capacidad para efectuar comunicacin intercelular por uniones de abertura. Se ha notado que los resultados iniciales de Loewenstein y Kanno siguen siendo vlidos para la mayor parte, pero no para todas las clulas cancerosas investigadas.Revisado en 9'10 No es sorprendente que no todas las clulas cancerosas muestren las mismas propiedades en relacin con la comunicacin intercelular por uniones de abertura. La conversin de una clula normal a clula maligna es un fenmeno de mltiples etapas que pueden ocurrir como resultado de cambios en una gran variedad de genes diferentes (captulo 16). Est claro que hay diferentes mecanismos por los cuales una clula puede perder el control del crecimiento. Algunos de estos mecanismos parecen implicar la prdida de la capacidad de las clulas para transmitir seales a travs de las uniones de abertura. En los tumores donde ocurre esto, a menudo hay prdida progresiva de comunicacin intercelular por uniones de abertura conforme la clula se maligniza cada vez ms.11 Adems, hay correlacin entre la prdida de comunicacin intercelular por uniones de abertura y el incremento del potencial metasttico de una poblacin de clulas.12 El potencial metasttico es una propiedad que requiere que las clulas cancerosas ignoren a las clulas adyacentes y avancen por s solas; por lo tanto, no es sorprendente que esta conducta requiera que una clula interrumpa sus vas de comunicacin con las clulas vecinas. Los datos obtenidos por correlacin entre una situacin (o sea, prdida de comunicacin intercelular por uniones de abertura) y otra (o sea, malignidad) quiz slo sean circunstanciales. La mejor prueba de una relacin causal directa entre las dos
situaciones proviene de estudios en los cuales se "obliga" a las clulas cancerosas a expresar protenas de unin de abertura (conexinas) por microinyeccin de molculas de DNA que codifican dichas protenas. Cuando a las clulas glioma C6, un tipo de clulas de tumor cerebral, se les inyecta DNA que codifica la protena conexina43, se incrementa de manera espectacular la comunicacin intercelular por uniones de abertura entre las clulas tumorales (fig. VE 7-2), con disminucin correspondiente de la tasa de divisin celular.13 De igual manera, cuando las clulas glioma C6 que se les ha transferido DNA que codifica conexina43 son implantadas en el cerebro de ratas adultas, generan tumores mucho ms pequeos que las clulas glioma a las cuales no se les ha transferido DNA (fig. VE 7-3).14 Estos datos apoyan el papel propuesto de comunicacin intercelular por uniones de abertura en el crecimiento de tumores cerebrales. Si los defectos en este tipo de unin desempean un papel en la formacin de tumores, entonces se deben obtener datos mediante mutaciones en genes que afectan la estructura y funcin de la unin de abertura. Con esta idea en mente, se han iniciado ahora estudios de deteccin de mutaciones de conexinas en tumores humanos.15
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272
CAPITULO 7 Interacciones entre ias clulas y su entorno
SINOPSIS
El espacio extracelular se extiende por fuera de la superficie externa de la membrana plasmtica y contiene varios materiales secretados que influyen en la conducta de las clulas. El glucocliz incluye porciones carbohidrato de glucoprotenas y glucolpidos de la membrana junto con protenas y polisacridos relacionados que protegen la clula y gobiernan sus interacciones con sustratos no vivientes y otras clulas. Los tejidos epiteliales se apoyan sobre una membrana basal que consta de una delgada red entretejida de materiales extracelulares. Varios tipos de tejido conectivo, incluyendo tendones, cartlago y el estroma corneal, contienen una matriz extracelular expansiva que confiere al tejido sus propiedades caractersticas, (p. 239). Los principales componentes de las matrices extrac chilares incluyen colgena, proteoglicanos y una variedad de protenas, como fibronectina, laminina y tenascinas. Cada protena de la matriz extracelular tiene una estructura modular compuesta de dominios que contienen sitios de enlace para unir una clula con otra y receptores sobre la superficie celular. Como resultado, estos diferentes materiales extracelulares interactan para formar una red interconectada unida a la superficie celular. La colgena consiste en protenas fibrosas muy abundantes que confieren a la matriz extracelular capacidad para resistir fuerzas de tensin. Los proteoglicanos constan de un ncleo de protena al cual se unen cadenas de glucosaminoglicanos con carga negativa. A su vez, los proteoglicanos individuales pueden juntarse en complejos masivos sumamente hidratados que sirven como material amorfo de empaque que llena el espacio extracelular (p. 241). Las integrinas son receptores de la superficie celular implicadas en interacciones dependientes de calcio entre las clulas y su sustrato. Las integrinas son protenas integrales de membrana heterodimricas cuyos dominios citoplsmicos pueden interacruar con los componentes del citoesqueleto y sus dominios extracelulares a veces contienen sitios de enlace para varios materiales extracelulares. Los materiales extracelulares que se enlazan a las integrinas lo hacen por enlace al rripptido RGD. El enlace de un ligando extracelular a una integrina puede enviar seales al interior de la clula y desencadenar cambios en las actividades celulares (p. 247). Las clulas se fijan a su sustrato por medio de sitios especializados en la superficie celular, como contactos focales y hemidesmosomas. Los contactos focales son sitios donde las clulas cultivadas se fijan a la superficie del plato de cultivo. La membrana plasmtica de un contacto focal contiene agrupamientos de integrinas cuyos dominios citoplsmicos estn unidos a microfilamentos del citoesqueleto que contiene actina. Los hemidesmosomas son sitios de unin de clulas in vivo a una membrana basal subyacente. En un hemidesmosoma, la membrana plasmtica contiene grupos de integrinas conectados a la membrana basal sobre su superficie externa y a filamentos intermedios que contienen queratina sobre la superficie interna (p. 249). La adherencia de clulas a otras clulas es mediada por varias familias distintas de protenas integrales de membrana: selectinas, integrinas, cadherinas y miembros de la superfamilia de inmunoglobulinas (IgSF). Las selectinas se enlazan a disposiciones especficas de grupos de carbohidratos que sobresalen de la superficie de otras clulas y median interacciones transitorias dependientes de calcio entre leucocitos circulantes y las paredes de los vasos sanguneos en sitios de inflamacin y coagulacin. Las molculas de adherencia celular de la superfamilia Ig son mediadoras de la adherencia clula a clula independiente de calcio, como se ejemplifica con molculas de adherencia a clulas neurales, que desempean un papel importante en el desarrollo del sistema nervioso. Una protena IgSF sobre una clula puede interactuar con una integrina o con la misma, o con otra protena IgSF de otra clula. Las cadherinas median la adherencia clula a clula dependiente de calcio al unirse a la misma especie de cadherina en la clula opuesta, y por lo tanto facilitan la formacin de tejidos compuestos de tipos similares de clulas. Las cadherinas pueden ser particularmente importantes durante el desarrollo embrionario, segn se puede ejemplificar por su papel en la conversin de clulas mesenquimatosas en epiteliales. Adems de su papel en la adherencia celular, todas estas protenas tienen potencial para actuar como intermediarias en las seales transmembrana (p. 251), La firme adherencia entre las clulas se facilita por la formacin de uniones adherentes especializadas y desmosomas. Las uniones adherentes rodean una clula cerca de su superficie apical, lo que permite el contacto entre la clula y todas sus vecinas que la rodean. Las membranas plasmticas de las uniones adherentes contienen ncleos de cadherinas que forman contactos adherentes entre s en el espacio extracelular situado entre la superficie de las clulas. Los dominios citoplsmicos de las cadherinas se unen por medio de protenas intermedias a los filamentos de actina del citoesqueleto. Los desmosomas son placas entre las clulas caracterizados por una concentracin de materiales extracelulares entre las membranas plasmticas y las placas citoplsmicas densas sobre la superficie interna de la membrana. Los desmosomas son sitios de concentracin de protenas integrales de la familia cadherina que se cree conectan el material extracelular situado entre las membranas plasmticas en aposicin con filamentos intermedios de iat, placas citoplsmicas (p. 256). Las uniones hermticas son sitios especializados de contacto que impiden la difusin de solutos entre las clulas a travs del epitelio. Una seccin transversal a travs de las uniones hermticas muestra que la superficie externa de las clulas adyacentes entra en contacto directo en sitios intermitentes. El examen de la membrana por fracturas por congelacin muestra los sitios que contienen hileras de partculas alineadas que forman fibras dentro de las membranas plasmticas de clulas adyacentes (p. 262), Uniones de abertura y plasmodesmosomas son sitios especializados de comunicacin entre clulas adyacentes en ani-
CAPITULO? Interacciones entre las clulas y su entorno
273
males y vegetales, respectivamente. Las membranas plasmticas de clulas adyacentes en la regin de la unin de abertura contienen canales formados en disposicin hexagonal de subunidades de conexina que forman un conexn. El conexn de una membrana se encuentra a la misma altura que el conexn de la membrana adyacente y forma un conducto central que conecta el citoplasma de una clula con el citoplasma de la clula adyacente. El conducto central de un conexn tiene un dimetro aproximado de 1.5 nm, que permite la difusin directa entre las clulas de sustancias hasta de unos 1000 datons. El paso de corrientes inicas a travs de las uniones de abertura desempea un papel crtico en numerosos procesos fisiolgicos, incluyendo la propagacin de la excitacin a travs del tejido muscular cardiaco y del tejido muscular liso en la pared del conducto digestivo. Los plasmodesmosomas son canales citoplsmicos cilindricos que se extienden entre clulas vegetales adyacentes directamente a travs de la pared celular interpuesta. Estos canales, que de ordinario contienen un tbulo
membranoso en forma de barra, permiten el libre paso de molculas de soluto de unos 1 000 datons o menos (p. 262). Las clulas vegetales estn rodeadas por una compleja pared celular compuesta de varios materiales secretados que le suministran apoyo mecnico y la protegen de influencias potencialmente nocivas. Las microfibrillas de celulosa, compuestas de haces de molculas de celulosa y secretadas por enzimas que residen dentro de la membrana plasmtica, proporcionan rigidez y resistencia a la traccin. Las molculas de hemicelulosa actan para entrelazar transversalmente a las fibras de celulosa, en tanto que las pectinas, una clase heterognea de polisacridos con carga negativa, forman un gel extensamente unido que llena los espacios situados entre los elementos fibrosos de las paredes celulares. Igual que la matriz extracelular de las clulas animales, las paredes de las clulas vegetales son estructuras dinmicas que pueden modificarse en respuesta a cambios en las condiciones ambientales (p. 266).
PREGUNTAS DE REPASO
1. Distinguir entre glucocliz, membrana basal y matriz extracelular de tejido cartilaginoso. 2. Contrastar el papel de colgena, proteoglicanos y fibronectina en el espacio extracelular. 3. Elaborar una lista de unas cuantas funciones de la matriz extracelular en tejidos animales. 4. Qu tipos de protena integral de membrana desempean un papel clave en la mediacin de interacciones entre la superficie celular y la matriz extracelular? Entre las superficies celulares de clulas vecinas? Cul de estas interacciones requiere la presencia de Ca2+ o Mg2+? 5. Cul es la diferencia entre el proteoglicano de la matriz cartilaginosa en cuanto a estructura y funcin, y el sindecano de la superficie celular? 6. Cmo puede una protena de la superficie celular participar tanto en a adherencia celular como en la transduccin de seales a travs de la membrana? 7. Distinguir entre un contacto focal y un hemidesmosoma; un hemidesmosoma y un desmosoma; un desmosoma y una unin adherente. 8. Qu tipo(s) de uniones intercelulares contienen filamentos de actina? Cules contienen filamentos intermedios? Cules contienen integrinas? Cules contienen cadherinas? 9. Qu datos nos suministra el anlisis de una fractura por congelacin acerca de la estructura de una unin, que no pueden obtenerse por el examen de cortes de tejido teidos? 10. Comparar la disposicin de las protenas integrales de membrana en la unin hermtica en comparacin con la unin de abertura. 11. En qu son similares los plasmodesmosomas y las uniones de abertura? En qu son diferentes? Se podra esperar que una protena de tamao moderado pase a travs del plasmodesmosoma? 12. Describir los componentes que constituyen la pared de una clula vegetal y el papel de cada uno en la estructura y funcin de la pared.
PREGUNTAS ANALTICAS
1. La adherencia de las clulas a menudo se puede impedir in vitro tratando las clulas con agentes especficos. Cul de las siguientes sustancias se podra esperar que impidiera la adherencia de clulas mediada por selectinas? Con la adherencia de clulas mediada por molculas de adherencia a clulas neurales? Las sustancias son tripsina, que digiere protenas; un pptido, que contiene RGD; neuraminidasa, que elimina cido silico de un oligosacrido; colagenasa, que digiere colgena; hialuronidasa, que digiere cido hialurnico; EGTA, que se enlaza a iones Ca2+ en el medio. 2. Qu sustancia se podra aadir a un cultivo para impedir la migracin de las clulas de la cresta neural? Para evitar el crecimiento de un axn? Para suprimir la adherencia de fibroblastos al sustrato? 3. En el texto se hizo notar que los ratones que carecen de un gen para fibronectina no sobreviven durante las primeras etapas del desarrollo embrionario. Mencione dos procesos que se interrumpen en esos embriones. 4. Cmo piensa usted que cambiaran las propiedades del cartlago si careciera de una matriz extracelular? Cmo afectara esto a las propiedades del estroma corneal, o a las propiedades de un tendn? 5. En qu son similares las matrices extracelulares de los animales y las paredes celulares de las plantas en cuanto a su estructura? 6. Ya se mencion que dos diferentes enfermedades por autoinmunidad, una que produce anticuerpos contra un componente de los hemidesmosomas y otra que produce
274
CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno cree usted que este tratamiento ayud a revelar la presencia de las uniones de abertura? Utilizando un procedimiento similar, en qu sera diferente una unin de abertura de una unin hermtica? 10. Por qu sera de esperar que disminuyendo la temperatura del medio en el cual crecen las clulas se afectara la capacidad de las mismas para formar uniones de abertura entre s? 11. Algunas de las uniones intercelulares ocurren como cinturones que abarcan a la clula, en tanto que otras ocurren como placas discretas. Cmo se correlacionan estos dos tipos de arreglos estructurales con las funciones de las respectivas uniones? 12. Proponer algn mecanismo que pueda explicar por qu el virus del mosaico del tabaco puede alterar la permeabilidad de un plasmodesmosoma. Cmo podra usted demostrar su proposicin? 13. Por qu piensa usted que las clulas animales pueden sobrevivir sin el tipo de paredes celulares que se observan en las clulas de casi todos los otros grupos de organismos?
anticuerpos contra un componente de los desmosomas, causan ampollas graves en la piel. Por qu se pensara que estas dos enfermedades tienen sntomas similares? 7. Cul de los diferentes tipos de molculas que median la adherencia celular es ms probable que se encargue de la especie de clasificacin mostrada por las clulas de la figura 7-19? Por qu? Cmo se podra demostrar esa conclusin? 8. FSH es una hormona hpofisaria que acta sobre las clulas foliculares del ovario para iniciar la sntesis de AMP cclico que estimula varios cambios metablicos. Normalmente, FSH no tiene efectos sobre clulas musculares cardiacas. Sin embargo, cuando se desarrollan juntas las clulas del folculo ovrico y las clulas musculares cardiacas en un cultivo mixto se observa que algunas clulas musculares cardiacas se contraen despus de aadir FSH al medio. Cmo puede explicarse esta observacin? 9. En la primera descripcin de uniones de abertura se emplearon tejidos sumergidos en una solucin de sales de lantano. Considerando el modelo de la figura 7-31, cmo
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CAPITULO

Interacciones entre las clulas y su entorno

7-1 El espacio extracelular

CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno

Estructura Fibrilar Fibrilar Fibrilar No fibrilar Fibrilar Fibrilar No fibrilar ? ? ? Fibrilar ?

CAPITULO 7 Interacciones entre !as clulas y su entorno

Fibronectina, laminilla y otras protenas de la MEC

CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno Acido hialurnico p

Protena central Condroitincosulfato

CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas \j su entorno

Citoplasma Filamento de actina

CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno

Sitio Sitio para el para el enlace de enlace de heparina fibrina

CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno Clulas de la cresta neural

7-2 Adherencia de clulas a sustratos no celulares

CAPITULO 7 * Interacciones entre as clulas y su entorno

Sitios para la unin de calcio

Cadena pesada de la subunidad a

Cadena ligera de la subunidad a

Conexiones con el citoesqueleto

Fibronectina Leishmania Fibringeno

Adherencias focales y hemidesmosomas: fijacin de clulas a su sustrato

CAPITULO 7 Interacciones entre as clulas y su entorno

Pared del vaso sanguneo

Agregacin de plaqueta Integrina

-^ **r - - r^i^p._ - , __ "** '--^jiTl" - \

CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas i/ su entorno

7-3 Adherencia de clulas a otras clulas

CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno

Filamentos intermedios Citoplasma Placa Membrana plasmtica

CAPTULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno

Clulas aisladas marcadas

Og^O O A ' JLavado

CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno

Qj Dominio estructural O Dominio parecido a EGF f~~1 Dominio parecido a lectina

CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno

CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno Ectodermo

Endodermo Clulas mesenquimatosas migratorias

Endodermo Somita {epitelio}

Clulas procedentes del mesnquima

CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno

CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno

Placa Filamentos intermedios Bicapa de lpidos

CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno

LA PERSPECTIVA HUMANA Papel de la adherencia celular en la inflamacin y la metstasis

- Factor activador de plaquetas

- Integrina (no activada) \ ntegrina (activada)

CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno

CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno

7-4 Uniones hermticas: sellado del espacio extracelular

7-5 Uniones de abertura y plasmodesmosomas: mediacin de la comunicacin celular

CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno '"":".

--: -r'. ".. . surcos

CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno

CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno

Citoplasma Partculas en la unin de tura (conexones)

CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno

7-6 Paredes celulares

CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno

CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno

CAPITULO? Interacciones entre las clulas y su entorno

Papel de las uniones de abertura en la comunicacin intercelular

CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y sw entorno

CAPITULO 7 Interacciones entre las clulas y su entorno

-^ r - - r^i^p._ - , __ " '--^jiTl" - \