UNIVERSIDAD PERUANA LOS ANDES

FACULTAD CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA PROFESIONAL DE TECNOLOGIA MDICA

ESPECIALIDAD DE: LABORATORIO CLINICO Y ANATOMIA PATOLOGICA

BANCO DE SANGRE Y NAT

UNIDAD DE EJECUCIONCURRICULAR: AUTOMATIZACIN EN LABORATORIO CLINICO Y ANATOMIA PATOLOGICA. DOCENTE: Lic. Andrs CANDELA ALUMNOS:

- GORA RAPRI, Cristhian Alin. - TORRES GARCIA, Scarlett Maziel.

HUANCAYO 2012-I

PRESENTACIN
En la presente monografa consta de tres fases bien definidas: 1. Exposicin de la teora clara y concreta manejada en un laboratorio clnico en la unidad de banco de sangre 2. Factores predeterminados con la donacin de sangre. 3. El sistema NAT. Con el fin de lograr el aprendizaje y la comprensin de conceptos como: el banco de sangre es cualquier organizacin dedicada a recolectar, almacenar, procesar y/o suministrar sangre humana para analizar las muestras recolectadas y separar a la sangre en sus componentes. Conocer aspectos referentes a la sangre que indispensable para vivir. Su papel es tan esencial que la disminucin de su volumen o la alteracin de alguna de sus funciones pueden poner en peligro la supervivencia del organismo; es decir, la sangre es sinnimo de vida porque no existe vida sin ella. Es imprescindible aportar al accidentado o al enfermo los elementos que le falten y recuperar la funcin alterada. Esta operacin se denomina transfusin sangunea. La donacin de sangre, gesto generoso y desinteresado, es hoy por hoy, la nica forma de salvar la vida o recuperar la salud para cualquier persona que sufra un dficit de componentes sanguneos. Regulado por un sistema llamado

PRONAHEBAS el cual establece su responsable, tanto en el mbito

pblico como privado, debe ser un mdico especialista en hematologa Hablaremos un captulo sobre las tcnicas de amplificacin de cidos nucleicos (NAAT) son fundamentales para las pruebas de ADN molecular, incluyendo el diagnostico clnico, pruebas ambientales, pruebas de alimentos y muchas otras aplicaciones.

BANCO DE SANGRE Y NAT

I.

OBJETIVOS: Determinar e identificar la automatizacin en el banco de sangre, donacin de sangre, sistema de afresis (mtodos tradicionales y NAT) y almacenamiento de los derivados de la sangre.

II.

MARCO TERICO: La Gerencia Ejecutiva de los Servicios de Banco de Sangre se reconoce como la mxima autoridad institucional. La Gerencia Ejecutiva designar un Comit de Calidad, que definir y documentar la poltica para que los Servicios de Banco de Sangre alcancen y mantengan calidad en la seleccin del donante, en la recoleccin de sangre, en el procesamiento de sangre, en el almacenamiento de sangre, en la distribucin de sangre, en las pruebas del receptor, en la transfusin de sangre y sus componentes y en la entrega de servicios (los que en este documento sern referidos como recoleccin, procesamiento y transfusin de sangre y componentes sanguneos, y servicios).La poltica de calidad describir los objetivos de calidad de los Servicios de Banco de Sangre y su compromiso con dicha calidad. La Gerencia Ejecutiva de los Servicios de Banco de Sangre asegurar que la poltica de calidad sea conocida, comprendida, implementada y mantenida por todos los niveles de los Servicios.

III.

DEFINICION: Es el establecimiento autorizado para obtener, recolectar, conservar, aplicar y proveer sangre humana, as como para analizar y conservar, aplicar y proveer componentes de la misma.

IV.

FUNCION DEL BANCO DE SANGRE La funcin del banco de sangre es determinar quin es el donador ideal y detectar las unidades infectantes. Tambien es el encargado de recibir a los donantes, procesar, almacenar y distribuir la sangre y sus componentes.

V.

DISPOSICIONES GENERALES Los disponentes alognicos de sangre y de sus componentes podrn corresponder a las categoras siguientes: Altruista. familiar. Los actos de disposicin de sangre y sus componentes para fines de transfusin autloga, podrn llevarse a cabo mediante los procedimientos siguientes: depsito previo hemodilucin preoperatoria aguda escate celular transoperatorio y posoperatorio.

VI.

ESQUEMATIZACIN EN BANCO DE SANGRE

1. Comprende : donacin de sangre sistema de afresis almacenamiento de los derivados de la sangre

2. ETAPA PRE-ANALITICA: Comprende de las pruebas preliminares donante-paciente

PRONAHEBAS (Programa Nacional de Hemoterapia y Banco de Sangre) Donante voluntario Donante reposicin Donante remunerado Donante autloga Paciente hemodependiente

3. SELECCION DEL DONADOR 3.1. Es candidato ideal para donar sangre si:

eres mayor de 18 aos pesas por lo menos 50 kg cuentas con buen estado de salud. 3.2. No eres candidato ideal SI:

hace tres das tuviste fiebre, infeccin, tomaste medicinas, alcohol o tuviste tu sangrado menstrual hace 45 das donaste sangre hace 6 meses te operaron o estuviste embarazada padeces ataques, moretes o sangrados espontneos, alta o baja presin no controlada, diabetes y recibes insulina, problemas del corazn, alergias graves o una infeccin actual has tenido enfermedades venreas usaste o usas drogas tuviste hepatitis has tenido los ojos amarillos, fiebre y orina oscura si tu o tu pareja recibieron sangre, tuvieron contacto con homosexuales, desconocidos o sexo servidoras has recibido quimioterapia para el tratamiento del cncer

4. PRINCIPIOS UTILIZADOS EN BANCO DE SANGRE Tradicionalmente se han utilizado para el fraccionamiento de la sangre, los mtodos manuales, que tienen como base la centrifugacin diferencial, la cual se sustenta en los diferentes pesos especficos de los componentes de la sangre. En los aos resientes se han usado mtodos semiautomatizados mediante los cuales se pueden obtener a partir de una sangre total, un concentrado eritrocitaria, un concentrado plaquetario y plasma rico en factores de la coagulacin. Para la separacin de las plaquetas se pueden utilizar el metodo de obtencin de buffy-coat o bien, mediante la separacin inicial de plasma rico en plaquetas. En la medida en que los mtodos tienden a ser semiautomatizados o automatizados se ahorran recursos, pero tienen adems la ventaja de lograr la estandarizacin de los procesos con mayor facilidad, esto se debe a que los equipos realizan algunas etapas en las cuales se limita la intervencin de los operarios y como consecuencia se reduce la variacin en el procedimiento.

Otro avance importante en el enfoque de la seguridad transfusional es la implementacin de los mtodos de leucorreduccion para la hemocomponentes. Con ellos se reducen la posibilidad de sensibilizar. Por ejemplo: Para las plaquetas que se optiene a partir de una mezcla de concentrados plaquetario unitarios (pool) se pueden considerar leucorreducidas cuando se han sometido a leucorreduccion, ya sea durante su obtencin ( filtros en lnea) o bien con el uso de filtros a pie de cama (filtros postalmacenamiento) con frecuencia las plaquetas obtenidas por una maquina de afresis de ltima generacin son leucorreducidas desde su obtencin, durante la separacin de los elementos celulares sanguneos. La unidad sangunea a transfundir deber contener menos de 5 x 1000000 leucocitos por unidad de acuerdo a los estndares de asociacin americana de sangre (AABB).

5. PRUEBAS PRETRANSFUSIONALES Son los procedimientos realizados por los servicios de transfusin o los bancos de sangre, previos a la transfusin con el fin de asegurar la seleccin adecuada de la unidad de sangre o los componentes a transfundirse. 5.1 AFRESIS PARA HEMOTERAPIA Y BANCO DE SANGRE La palabra afresis deriva del griego que significa remover o separar. Separar de manera selectiva el componente sanguneo que se desea, y retornar al donador o paciente el resto de los componentes sanguneos. La afresis teraputica se refiere a extraccin de elementos patolgicos. 5.1.1. VENTAJAS DE LA AFRESIS Las dosis teraputicas de plaquetas se obtiene de un solo donador (3x 1011), se disminuye el riesgo de aloinmunizacion y el riesgo de enfermedades infecciosas, es un producto leucorreducidas, (menos de 1x106), donadores de repeticin, recuperacin del donador alas 72 hrs., 5 das de vigencia de las plaquetas, se obtiene dobles concentrados eritrocitaria, tiempo, promedio de donacin 90 minutos y son productos de alta calidad. 5.1.2. TIPOS DE AFRESIS En funcin de los elementos sanguneos extrados: plaquetoferesis plasmaferesis eritrocitaferesis leucaferesis (granulocitos y linfocitos) recoleccin de clulas tallo.

5.1.3. COMPONENTES DE LOS EQUIPOS DE AFRESIS Y SEPARADORES SANGUNEOS centrifugas (flujo continuo y discontinuo) bombas peristlticas sistema ptico. Vlvulas-sensores de presin y volumen. Panel monitor (operador) Cmaras/ campanas/ cinturn de recoleccin y separacin.

ANEXOS: equipo estril desechable (bolsas, soluciones, etc.)

5.2. PRUEBA DE COOMBS

Es una prueba que busca anticuerpos que puedan fijarse a los glbulos rojos y causar su destruccin prematura (hemlisis).
5.2.1. FORMA EN QUE SE REALIZA EL EXAMEN La sangre se extrae tpicamente de una vena, por lo general de la parte interior del codo o del dorso de la mano. El sitio se limpia con un desinfectante (antisptico). El mdico envuelve una banda elstica alrededor de la parte superior del brazo con el fin de aplicar presin en el rea y hacer que la vena se llene de sangre. Luego, el mdico introduce suavemente una aguja en la vena y recoge la sangre en un frasco hermtico o en un tubo pegado a la aguja. La banda elstica se retira del brazo. Una vez que se ha recogido la muestra de sangre, se retira la aguja y se cubre el sitio de puncin para detener cualquier sangrado.

En bebs o en nios pequeos, se puede utilizar un instrumento puntiagudo llamado lanceta para punzar la piel y hacerla sangrar. La sangre se recoge en un tubo pequeo de vidrio llamado pipeta, en un portaobjetos o en una tira reactiva. Finalmente, se puede colocar un vendaje sobre el rea si hay algn sangrado. 5.2.2. PREPARACIN PARA EL EXAMEN No se requiere preparacin especial para este examen. 5.2.3. LO QUE SE SIENTE DURANTE EL EXAMEN Cuando se inserta la aguja para extraer la sangre, algunas personas sienten un dolor moderado, mientras que otras slo sienten un pinchazo o sensacin punzante. Posteriormente, puede haber una sensacin pulstil o se puede presentar una contusin en el sitio donde se insert la aguja. 5.2.4. RAZONES POR LAS QUE SE REALIZA EL EXAMEN Hay dos formas de realizar la prueba de Coombs: directa e indirecta. 5.2.4.1. LA PRUEBA DE COOMBS DIRECTA Se utiliza para detectar anticuerpos que ya se han fijado a la superficie de los glbulos rojos. Muchas enfermedades y frmacos (quinidina, metildopa y procainamida) pueden llevar a la produccin de estos anticuerpos. Estos anticuerpos algunas veces destruyen los glbulos rojos y causan anemia. Esta prueba algunas veces se lleva a cabo para diagnosticar la causa de anemia o ictericia. 5.2.4.2. LA PRUEBA DE COOMBS INDIRECTA Busca anticuerpos circulantes libres contra una serie de glbulos rojos estandarizados. Esta prueba indirecta slo se usa rara vez para diagnosticar una afeccin mdica y, con ms frecuencia, se utiliza para determinar si una persona podra tener o no una reaccin a una transfusin de sangre.

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5.2.5 VALORES NORMALES La falta de agrupacin de clulas (aglutinacin), indicando que no hay anticuerpos para los glbulos rojos, es lo normal. Los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre diferentes laboratorios. Hable con el mdico acerca del significado de los resultados especficos de su examen. 5.2.6. SIGNIFICADO DE LOS RESULTADOS ANORMALES Una prueba de Coombs directa anormal (positiva) significa que usted tiene anticuerpos que actan contra sus glbulos rojos, lo cual puede deberse a:

Anemia hemoltica autoinmunitaria sin otra causa Anemia hemoltica inducida por frmacos (muchos frmacos han sido asociados con esta complicacin) Eritroblastosis fetal (enfermedad hemoltica del recin nacido) Sfilis Reaccin a transfusin como la ocasionada por unidades de sangre cotejadas de manera impropia

Esta prueba tambin es anormal en algunas personas sin una causa clara, especialmente entre los ancianos. Hasta el 3% de las personas que estn hospitalizadas sin un trastorno sanguneo conocido tendrn un resultado anormal en la prueba de Coombs directa. Una prueba de Coombs indirecta anormal (positiva) significa que usted tiene anticuerpos que actuarn contra los glbulos rojos que el cuerpo asume como extraos. Esto puede sugerir la presencia de:

Anemia hemoltica autoinmunitaria o inducida por frmacos Eritroblastosis fetal (enfermedad hemoltica) Incompatibilidad sangunea (cuando se utiliza en bancos de sangre)

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5.2.7. CULES SON LOS RIESGOS Las venas y las arterias varan en tamao de un paciente a otro y de un lado del cuerpo a otro; por esta razn, puede ser ms difcil obtener una muestra de sangre de algunas personas que de otras. Otros riesgos asociados con la extraccin de sangre son leves, pero pueden ser:

Sangrado excesivo Desmayo o sensacin de mareo Hematoma (acumulacin de sangre debajo de la piel) Infeccin (un riesgo leve cada vez que se presenta ruptura de la piel)

5.3. PRUEBAS CRUZADAS Es una prueba inmunohematologica cuyo principio es la hemaglutinacin y su objetivo es evitar la destruccin intravascular de los hemates en un receptor. Incluirn pruebas de aglutinacin en medio salino, as como, en algn medio facilitador de la reaccin, rutinariamente se emplear la prueba de antiglobulina humana (prueba de Coombs), pudindose omitir cuando se tenga certeza que el receptor y el disponente carezcan de antecedentes propiciadores de aloinmunizacion. 5.3.1. LAS CONTROLES EN LA PRUEBA: Laspruebascruzadasdebernincluiruncontrolquepermitadetectarlapresenciadeauto anticuerpos. 5.3.1.1. DONACIN: Donantes universales:

Son los que tiene el grupo O negativo. Sus glbulos rojos no tienen antgenos por lo que los anticuerpos del receptor no pueden reaccionar.

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Receptor universal: Son las personas que tienen el grupo AB. Estas personas no poseen anticuerpos por lo que no rechazan la sangre trasfundida.

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5.4. DETERMINACION DEL GRUPO AOB

1. Colocar en la tarjeta una gota se suero anti-A, una de anti-B, una mezcla de anti-A y anti-B, y una gota de anti-D, cada una en su casilla correspondiente.

2. Pinchar la yema del dedo, previa desinfeccin con alcohol o agua oxigenada. Depositar una gotita de sangre en cada casilla y mezclar con los sueros.

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Observar el resultado e interpretar.

Tipificacin ABO:

Si sus glbulos sanguneos se pegan o aglutinan al mezclarse con: Suero ANTI-B, usted tiene sangre tipo A. SUERO ANTI-B, usted tiene sangre tipo B. SUERO ANTI-A y ANTI-B, entonces usted tiene sangre tipo AB. Si los glbulos sanguneos no se pegan o aglutinan cuando se agrega suero ANTI-A Y ANTI-B, usted tiene sangre TIPO O.

Los procesos son totalmente controlados, mecnicos y se pueden automatizar, para ello se desarrollo la siguiente tcnica:

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5.5. DETERMINACIN DEL GRUPO SANGUNEO CON TARJETAS DE GEL El sistema utilizado en inmunohematologia para investigar e identificar antgenos y anticuerpos antieritrocitarios. Es de tecnologa de microtipificacion en gel se basa en la separacin por tamao de los eritrocitos aglutinados, durante un proceso de centrifugacin en un gel poroso. Los eritrocitos van perdiendo elasticidad en sus membranas de forma que aglutinados grandes quedan atrapados en la zona superior y los pequeos quedan distribuidos a lo largo de la columna. Esta tcnica nos permite que estandaricemos la lectura de la reaccin antgenoanticuerpo con facilidad y repetitividad. As como la estandariza del uso de reactivos, tiempos y lecturas disminuyendo sustancialmente la influencia de la mano del operador.

5.5.1. DG Gel ABO/Rh (2D) Tarjeta de gel para la determinacin de los antgenos del sistema ABO, Rh (D) y determinacin de grupo srico. Cada tarjeta consta de 8 micropozos que contienen una solucin de gel con:

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- Anti-A monoclonal (clones 16243 G2 y 16247 E6) - Anti-B monoclonal (clon 9621 A8). - Anti-AB monoclonal (clones 16245 F11 D8, 16247 E6 y 7821 D9) - Anti-D monoclonal (clon P3x61)

El reactivo Anti-D, mezcla de monoclonales, detecta D dbiles y variantes parciales del antgeno D, incluyendo la variante DVI. - Con solucin tamponada de gel para realizar el control (ctl) - Con solucin tamponada de gel para realizar grupo inverso 5.5.2. VENTAJAS SOBRE LA METODOLOGA TRADICIONAL.

Los procesos son totalmente controlados y se pueden automatizar. La metodologa es simple y estandarizada para todas las reacciones. La lectura de los resultados es fcil, por ser las reacciones microscpicas y fijadas sobre el gel. La documentacin fotogrfica de los resultados obtenidos puede ser utilizada como instrumento legal o de consulta. Se reduce el nmero de manipulaciones aumentando la bioseguridad del operador. Es una microtcnica con una macrolectura. Hay trazabilidad desde el inicio de la prueba hasta la obtencin del resultado.

5.5.3. QUE PRUEBAS SE PUEDEN REALIZAR EN TARJETAS DE GEL.

Grupo sanguneo ABO directo e inverso y factor Rh Pruebas de compatibilidad sangunea. Coombs directo. Rastreo de anticuerpos irregulares. Identificacin de anticuerpos irregulares. Fenotipo de Rh Grupo sanguneo neonatal.

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5.6. OTRAS PRUEBAS: 5.7. Pruebas antiparasitarias Prueba de determinacin de anticuerpos Prueba de ELISA HEMODERIVADOS

Componentes de la sangre. Son las fracciones separadas de una unidad de sangre, como el plasma, albmina, gammaglobulina, concentrado de eritrocitos, plaquetas y factor VIII.

5.7.1. SANGRE TOTAL Unidad de sangre extrada con un anticoagulante y bolsa autorizados y no fraccionada. Contenido: Una unidad de sangre total (ST) contiene 450 mL de sangre ms aproximadamente 63 mL de solucin anticoagulante-conservadora, con lo que su volumen final est en torno a los 500 mL 5.7.2. Conservacin: La sangre total puede ser almacenada refrigerada entre 21 y 35 das dependiendo de la solucin conservante anticoagulante-utilizada. Durante la conservacin a 4 C las plaquetas y leucocitos dejan de ser funcionantes al cabo de pocas horas despus de la extraccin, y se produce una reduccin gradual de la viabilidad de los hematies. Los hematies conservados durante 5 semanas en CPD-A presentan una recuperacin media del 70%, la recuperacin mnima aceptable. Los niveles de factores V y VIII tambin descienden. La tasa de Factor VIII experimenta una disminucin del 50% a las 24 horas de la extraccin y el factor V queda reducido al 50% a lo 10-14 das.

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5.7.3. CONCENTRADOS DE HEMATIES: Componente obtenido tras la extraccin de aproximadamente 200 mL de plasma de una unidad de sangre total despus por centrifugacin. Son el componente sanguneo ms frecuentemente usado para incrementar la masa de clulas rojas 5.7.3.1. Contenido: Contiene los hematies correspondientes a una unidad de sangre total, ms unos 100 mL de plasma residual. 5.7.3.2. Conservacin: Cuando la sangre se recoge en bolsa que contienen CPD-A, estos concentrados pueden conservarse durante 35 das a 4 C. 5.7.3.3 REFRIGERADORAS: Las refrigeradoras del banco de sangre presentan las siguientes caractersticas de diseo fundamentales: Autonoma frigorfica: capacidad de mantener la temperatura entre +2 C y +6 C si hay corte de fluido. Un ventilador de refrigeracin Dispositivos de vigilancia de la temperatura. Revestimiento interior de la cmara resistente a los araazos (acero inoxidable y aluminio). Puerta delantera de cristal u otro material que permita al usuario ver el contenido de la cmara sin que ello afecte a la temperatura y cajones o estantes con correderas para depositar la sangre. 5.7.3.4. REFRIGERADORES PORTTILES PARA EL TRANSPORTE SANGRE Y LQUIDOS REFRIGERANTES DE

Deben contener bloques refrigerantes El refrigerante es una solucin eutctica que tiene una gran capacidad termo energtico y una gran estabilidad a su temperatura de cambio de estado, que tpicamente es de +16 C a +20C. El refrigerante se aloja en una doble bolsa sellada La refrigeracin ms eficaz se produce cuando la bolsa de refrigerante se halla en contacto directo con la unidad de sangre o de plaquetas.

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5.7.3.4 AGITADOR DE EXTRACCIN AUTOMTICA CON BALANZE Agitador de extraccin y balanza digital con corte por volumen que permite la automatizacin de las donaciones en bancos de sangre con el control y seguridad en el proceso Funcin: mezclar la sangre total extrada con el anticoagulante presente en la bolsa. Posee una rotacin continua y suave para evitar la lisis celular dentro de la bolsa de extraccin.

5.7.4. SANGRE DESLEUCOCITADA: Los pacientes que experimentan fuertes y/o reiteradas reacciones no hemolticas febriles a causa de las transfusiones suelen mejorar cuando se les transfunde hematies pobres en leucocitos. La denominacin "hematies pobres en leucocitos" se aplica a aquellos concentrados preparados segn un mtodo que reduce el contenido de leucocitos en el componente final a una cifra inferior a 5 x 108, reteniendo como mnimo el 80 % de los hematies originales. El nombre correcto para este componente es " hematies libres de leucocitos separados por (mtodo utilizado)". Entre los mtodos para eliminar leucocitos se encuentra la filtracin, la centrifugacin, y el lavado. La mayora de las reacciones provocadas por anticuerpos anti leucocitos dependen de la cifra de stos, por lo tanto, en muchos casos una reduccin del 50 % del nmero de leucocitos en una unidad de hematies evitar la reaccin. No obstante en algunos pacientes la eliminacin de ms del 95 % de los leucocitos puede no anular la respuesta febril.

5.7.5. HEMATIES CONGELADOS: Hematies congelados preferentemente antes de los 7 das postextraccin, utilizando crioprotector y conservados a temperatura inferior a - 80 C. Indicaciones: Los hematies pueden ser congelados utilizando tcnicas especiales de criopreservacin. Dichas tcnicas permiten periodos de conservacin de hasta 10 aos. Se trata de procedimientos caros; por tanto el uso de hematies congelados se recomienda en circunstancias especiales, entre las cuales destacan:

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Autotransfusin individuos pertenecientes a grupos sanguneos raros individuos con anticuerpos mltiples

5.7.6. PLASMA FRESCO CONGELADO Se define como PFC el plasma separado de la sangre de un donante y congelado a una temperatura inferior a -18 C en las 8 horas siguientes a la extraccin. Si se almacena a -30 C (mejor que a -18 C) el PFC tiene un periodo de caducidad de 12 meses. Pasado este tiempo, el nivel de Factor VIII puede haber disminuido en algunas unidades de tal manera que el plasma ya no sea ptimo para el tratamiento de pacientes con esta deficiencia. Si el PFC no se utiliza en el plazo de un ao, debe considerarse a partir de entonces y etiquetarse como PLASMA. El plasma con esta nueva denominacin tiene 4 aos ms de vida til si se conserva a -18 C o menos. 5.7.6.1. CONCENTRADOS DE PLAQUETAS:

Un concentrado de plaquetas corresponde a las plaquetas obtenidas de una unidad de sangre total por doble centrifugacin, o bien a partir de donantes por medio de procesos de afresis (plaquetoferesis), procedimiento por el cual el donante slo dona plaquetas. 5.7.6.2. CONTENIDO: Los concentrados de plaquetas contienen aproximadamente 6 x 109 plaquetas, lo que representa el 60-80 % de las contenidas en una unidad de sangre total, en un volumen reducido de plasma (50-70 mL). Conservacin: Segn la bolsa de plstico utilizada las plaquetas son viables durante 5 das o ms si se mantienen a 22 C sometidas a una agitacin horizontal constante 5.7.6.3. CONGELADORES DE PLASMA

Los congeladores de plasma no precisan estar conectados a un generador elctrico de reserva, ya que los congeladores suelen mantener una temperatura inferior a la coagulacin durante ms de 24 horas siempre que no se abra con frecuencia.
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Estos congeladores estn especialmente diseados para conservar el plasma, estn equipados con un mecanismo interno de refrigeracin por ventilador que distribuye el aire de forma homognea en el interior del equipo y entorno a los dispositivos de vigilancia de la temperatura. En un diseo ideal, tras abrir la puerta frontal, cada estantera se puede abrir de forma independiente, conservando as la temperatura. El aislamiento de estos equipos es ms espeso que el de los congeladores domsticos convencionales, lo cual ayuda a mantener la temperatura por debajo de -35C 5.7.6.4. AGITADORES DE PLAQUETAS Conservacin de plaquetas a una temperatura de entre 20C y 24C Las plaquetas deben mantenerse en agitacin continua para que conserve su viabilidad y propiedad adhesin El agitador de plaquetas puede encajarse en el interior de una incubadora que mantenga la temperatura deseada, o bien colocarse como unidad autnoma en una habitacin climatizada a una temperatura de entre 20C y 24C. Es indispensable para la vigilancia del agitador una alarma que alerte de los fallos de movimiento. 5.7.6.5. DESCONGELADORES DE PLASMA Un descongelador de plasma consiste fundamentalmente en un bao a 37C o bien dirigiendo un chorro de agua caliente hacia la unidad de plasma. Se tarda unos 15 minutos en realizar la descongelacin, de -30C a 0C. El descongelador de plasma produce un plasma descongelado uniforme y de calidad para transfusiones y otros usos.

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VII.NAT A. DEFINICION Nucleic Acid Amplification Technology, permite la amplificacin y deteccin directa de cidos nucleicos virales, para la reduccin del riesgo de transmisin. La tecnologa NAT es utilizada como complemento a los ensayos de deteccin serolgica, de gran valor en Bancos de Sangre. B. CONCEPTOS: Este sistema, denominado anlisis de cidos nucleicos (NAT, por sus siglas en ingls) permite detectar incluso las infecciones ms recientes por virus de sida o hepatitis B y C, entre otros, y de este modo se evita el contagio a travs de transfusiones. El riesgo de transmisin de los virus de mayor relevancia clnica VIH y VHC (hepatitis C) a travs de la sangre es muy bajo con los anlisis serolgicos realizados habitualmente en los bancos de sangre, pero es la tecnologa de deteccin de cidos nucleicos (NAT) la que nos permite acercarnos al buscado riesgo cero, gracias a la deteccin directa de los virus en el perodo de ventana serolgico. C. TECNICAS CEQUIMAP : Desarrollo un mtodo cualitativo directo basado en la tcnica de transcripcin reversa acoplada a la reaccin en cadena de la polimerasa en tiempo real (RT-PCR en tiempo real) que permite identificar la presencia de los ARNs especficos correspondientes a los virus de VIH-1 y VHC. En muestras de donantes de sangre voluntarios. La aplicacin de ambas metodologas contribuye a aumentar la seguridad transfusional. COBAS AmpliScreen (Roche) Diagnostics Metodologa empleada: PCR (Reaccin en cadena de la Polimerasa)

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1. AMPLIFICACION 2. DENATURACION 3. HIBRIDACION 4. CONJUGACION 5. CATALIZIS DEL SUBSTRATO

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D. MATERIALES Y MTODOS: El mtodo NAT desarrollado consta de tres etapas, en la primera se purifica el ARN viral, en la segunda la enzima transcriptasa reversa sintetiza ADN complementario (cADN) utilizando como molde ARN. En la tercera y ltima etapa los procesos de amplificacin y deteccin ocurren de manera simultnea (PCR en tiempo real). Los oligonucletidos y sondas de VIH y VHC fueron diseados para amplificar regiones conservadas del genoma viral que nos permiten detectar diferentes genotipos de los virus de inters. La realizacin de cada ensayo incluye controles que son analizados en paralelo con las muestras y que nos permiten establecer la validez de los resultados obtenidos y monitorear todo el proceso, detectando contaminaciones, inhibiciones y posibles errores. El material de partida es plasma, que se analiza en minipooles de 6 o de manera individual. E. RESULTADOS OPTENIDOS E INTERPRETAR: Se analizaron 1362 mini-pooles de muestras de donantes, de los cuales 6 fueron reactivos para VIH-1 y 4 para VHC. Luego se realiz el anlisis individual de las 6 muestras que componan cada mini-pool, identificando cual era la muestra positiva. Todas las muestras reactivas fueron luego confirmadas serolgicamente.

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CONCLUSIONES

El banco de sangre en un laboratorio clnico cumple un rol importante para prevenir,tratar,diagonosticar y mejorar la calidad de vida, usando herramientas que por el pasar del tiempo e lograron ser automatizadas sobre todo su papel desempeara en la parte pre-analtica antes de cualquier hemoterapia o transfusin sangunea, y para la deteccin de mltiples enfermedades se realizara un montn de mtodos en caso de los virus que poseen cidos nucleicos para su identificacin se utilizara un metodo avanzado llamado NAT: La seguridad transfusional constituye la principal preocupacin de los Bancos de Sangre que colectan, procesan y distribuyen los componentes sanguneos para el tratamiento de los pacientes que los necesiten. Es por ello que CEQUIMAP y el Banco de Sangre de la UNC decidieron emprender el desarrollo de un mtodo NAT para la deteccin de los virus de VIH-1 y VHC, con el objeto de disminuir el perodo de ventana serolgico. Consideramos que nuestro mtodo ha tenido un desempeo adecuado tanto en sensibilidad, especificidad y robustez, como en obtencin de los resultados en tiempo til. Hasta el momento tras analizar 8171 donaciones no hemos detectado ningn donante en perodo ventana. Este resultado no es sorprendente ya que en EEUU tras analizar 40 millones de donaciones empleando las pruebas NAT para VIH y VHC, el rendimiento de las mismas es de: 1 caso cada 3 millones de donaciones para VIH y 1 caso cada 270000 donaciones para VHC. Seguridad Transfusional Mejoramiento en la seleccin de donantes. Mtodos de inactivacin viral. Aparicin de mtodos de tamizajemas sensibles. Incorporacin de sistemas de control de calidad de procesos.

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