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PRESENTAN:
25 DE SEPTIEMBRE DE 2013
Reacciones febriles
Son un conjunto de reacciones de aglutinacin directa, que sirven como su nombre lo indica para diagnosticar enfermedades que cursan con fiebre Salmonella (Fiebre Tifoidea) Brucelosis (fiebre ondulante, fiebre de Malta) Rickettsiosis (Fiebre Q, fiebre manchada de las montaas rocallosas).
Utilidad
Los antgenos febriles se usan para detectar anticuerpos en el suero del paciente contra la Salmonella, Brucella y Rickettsias (reaccin cruzada con Proteus OX-19). El informe del resultado de la prueba se hace tomando en consideracin la dilucin ms alta que se observe en la reaccin positiva.
Fundamento
Estas reacciones se basan en el hecho de que cuando el organismo humano es invadido por agentes infecciosos, responde produciendo anticuerpos aglutinantes contra ellos los cuales se ponen de manifiesto al entrar en contacto el anticuerpo con el anticuerpo especifico. El titulo del anticuerpo depende del tipo y curso de la enfermedad. Para que los resultados tengan un valor diagnstico el ttulo de ellos debe aumentar. Los antgenos bacterianos suspendidos en solucin fisiolgica interactan con los Ac especficamente inducidos durante el contacto de la bacteria con el sistema inmunolgico. En este caso se demostrar la presencia o ausencia de aglutininas in vitro, lo cual ser fcilmente detectable
Preparacin de la muestra:
1. Se colocan 5ml de sangre obtenida por puncin venosa en un tubo de ensayo limpio y seco sin anticoagulante. 2. Se deja coagular la sangre, se desprende el coagulo, se centrifuga la muestra a 2000rpm durante 10 min, se extrae el suero y lo colocamos en otro tubo seco.
Prueba cualitativa
Se utiliza una placa de vidrio con excavaciones, que se marcan adecuadamente segn el antgeno que se vaya a estudiar en cada espacio. Con una pipeta serolgica 0.2ml se colocan en cada una de las excavaciones de la placa 0.04 ml del suero problema (una gota). A cada excavacin con suero se le agrega una gota de cada uno de los Ag febriles. Mezclar en cada excavacin el suero y el Ag con un aplicador de madera. Oscilar la placa durante 4 minutos y observar.
OX-19
Bp
Resultados
Positivo: dan aparicin de grumos. Significa paciente con infeccin actual, reciente o pasada. Negativo: Paciente en estado muy temprano de la infeccin o no infectado.
Prueba cuantitativa
Cuando el suero problema presenta reacciones positivas con algn antgeno, se repite la tcnica descrita empleando el antgeno correspondiente, frente a una serie de diluciones del suero.
Con pipeta graduada de 0.1 ml, medir respectivamente en la excavaciones de la placa: 0.02, 0.01, 0.005 ml de suero.
Agregar una gota de Ag frente al cual presento aglutinacin y proseguir de mismo modo que para la prueba cualitativa. Anotar la cantidad mnima de suero (dilucin) que manifiesta aglutinacin franca.
Resultados
Las cantidades empleadas de suero corresponden a las siguientes diluciones:
Mililitros de suero
0.08 0.04 0.02 0.01
Dilucin
1:20 1:40 1:80 1:160
0.005
1:360
El titulo de suero para el antgeno utilizado corresponde a la dilucin mas alta en la que se observa la reaccin positiva franca
Interpretacin
El informe del resultado de la prueba se hace tomando en consideracin la dilucin ms alta que se observe en la reaccin positiva. En tifoideas los anticuerpos llegan a tener ttulos diagnsticos hasta los 8 das despus de la fiebre.
A. B.
C. D. E. F.
Anotar el antgeno correspondiente en la placa de vidrio. Depositar en cada cuadro 0.04ml de suero del paciente para cada uno de los antgenos que se vayan a utiliza. A cada gota de suero aadir una gota de cada antgeno. Mezclar con un aplicador limpio ( utilizar un aplicador para cada antgeno. Agitar suavemente la placa por rotacin (120 r.p.m) durante 2-3 minutos. Observar la aglutinacin con ayuda de una lmpara.
Interpretacin
Reportar el resultado, empleando la recproca de la dilucin ms alta que presenta aglutinacin. Grado de aglutinacin. 100% ++++ Sedimentacin de los grumos y el sobrenadante claro. 75% +++ grumos sedimentados casi totalmente y sobrenadante claro. 50% ++ sedimentacin marcada y sobrenadante ligeramente claro. Negativo. Ninguna evidencia de aglutinacin, sobrenadante idntico al control.
FALSOS POSITIVOS
Vacunacin previa Efecto de antibiticos Detalles clnicos Estadios de la enfermedad Antibioticoterapia temprana Utilizacin de corticosteroides Medicin temprana de anticuerpos (primera semana) Portadores crnicos
bibliografa
http://www.cecyt15.ipn.mx/polilibros/inmuno/Cap 3/PAGINAS/febriles.html www.authorstream.com/ cyrlab.com.mx/Portals/0/Insertos www.laboratoriomicsa.com/Febriles www.biolabo.fr/pdfs/noticesSP