1. Isolasi Bakteri a. Telah tersedia sampel dalam media padat sebelumnya yang ditanam dengan teknik penanaman bakteri.

b. Memijakkan ose dan tunggu sampai dingin, kemudian mengambil satu ose suspensi sampel (mengambil satu koloni sampel dengan ose) yang telah terlebih dahulu sudah dipersiapkan. c. Menggoreskan ose pada permukaan Nutrien Agar, dimulai dari bagian pinggir cawan petri, secara tidak terputus ose digoreskan kekiri dan kekanan sampai seluas luas permukaan media. d. Memijarkan(membakar) ose lagi, menunggu sampai dingin, sambil posisi cawan Petri diputar sedikit kearah kri (lawan jarum jam). Menggoreskan ose ini dengan awal goresan menyilang goresan pertama. Melakukan demikian seterusnya untuk goresan ketiga dan keempat. Memperhatikan ose harus dipijarkan setiap akan digunakan untuk menggores, untuk mengurangi kontaminasi. e. Menginkubasikan pada suhu 37oC selama 18 24 jam. f. Memilih dari masing masing tipe koloni satu koloni untuk digunakan dalam pewarnaan bakteri.