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Comentario
Y puedes checar la determinacin del punto isoelctrico de una proteina por mtodos
espectrofotomtricos. Est muy bien explicado el procedimiento bsico:
http://quimica.unp.edu.ar/grado/qa2/2003...
Punto isoelctrico
El punto isoelctrico es el pH al que un polianflito tiene carga neta cero. El concepto es
particularmente interesante en los aminocidos y tambin en las protenas. A este valor de
pH la solubilidad de la sustancia es casi nula.
Para calcularlo se deben utilizar los pKa.
(Los pKa a considerar para esta ecuacin,en una tabla de pH, son los que contienen a
la especie qumica con carga igual a cero, cuando tienen ms de un pKa).
Las molculas complejas, tales como las protenas, se combinan con los iones
hidrgeno y con otros iones presentes en la disolucin, dando lugar a la carga neta de
la molcula. A la concentracin de ioneshidrgeno, o al pH, para el cual la
concentracin del ion hbrido de una protena es mxima y el movimiento neto de
las molculas de soluto en un campo elctrico es prcticamente nulo, se le denomina
punto isoelctrico.
Los aminocidos pueden existir como sal interna, llamada zwitterin. Esto ocurre
porque un electrn del oxgeno del grupo carboxilo es atrado por el
grupo amino NH2 (ya que al nitrgeno le sobraban dos electrones de valencia) que
est en posicin alfa y quedando este como grupo amonaco NH3+.
proteinas
En medios cidos fuertes, tanto el grupo amino como el grupo cido se encuentran
protonados y el aminocido tiene la siguiente forma:
PUNTO ISOELECTRICO
El punto isoelctrico es el pH al que una sustancia anftera tiene carga neta cero. El concepto es
particularmente interesante en los aminocidos y tambin en las protenas. A este valor de pH la
solubilidad de la sustancia es casi nula. Para calcularlo se deben utilizar los pKa.
(Los pKa a considerar para esta ecuacin,en una tabla de pH, son los que contienen a la especie
qumica con carga igual a cero, cuando tienen ms de un pKa).
Las molculas complejas, tales como las protenas, se combinan con los iones hidrgeno y con
otros iones presentes en la disolucin, dando lugar a la carga neta de la molcula. A la
concentracin de iones hidrgeno, o al pH, para el cual la concentracin del ion hbrido de una
protena es mxima y el movimiento neto de las molculas de soluto en un campo elctrico es
prcticamente nulo, se le denomina punto isoelctrico.
Los aminocidos pueden existir como sal interna, llamada zwitterin. Esto ocurre porque el
protn del grupo carboxilo es abstrado por el grupo amino NH2 que est en posicin alfa y
quedando este como grupo amonio NH3+
Ejemplo
pH isoelctrico de la tirosina.El pH isoelctrico de la tirosina se calcula de la siguiente forma:
1.- Se escriben los equilibrios cido base empezando por la forma protonada. El grupo cido es el
primero en perder el protn, despus lo pierde el amino y por ltimo el alcohol, que es el menos
cido de los tres.
2.- Buscamos la forma neutra, aquella que tiene igual nmero de cargas positivas y negativas, y
nos fijamos en los valores de pKa de los equilibrios que la forman y la descomponen, pKa1 y
pKa2.
3.- El pI se calcula como media de estos dos pKas.
pI = (2.2 + 9.1)/2 = 5.7Como puede observarse el grupo hidroxilo no afecta al clculo del pH
isoelctrico.
http://www.quimicaorganica.net/quimica-organica/aminoacidos/ph-isoelectrico/aminoacidospH-isoelectrico.htm
Obtenido de "http://es.wikipedia.org/wiki/Punto_isoel%C3%A9ctrico"