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PRACTICA 6

REGENERACION EN PLANARIAS Dugesia sp.


INTRODUCCIN
Las planarias son organismos planos bilaterales acelomados del filum platelmintos. Se
caracterizan por la presencia de un conjunto de clulas mesodrmicas que son
originadas del endodermo y ocupan el espacio comprendido entre la epidermis y la
gastrodermis. La boca es originada a partir del blastoporo, estructura que se presenta al
inicio del desarrollo embrionario temprano durante la gastrulacin. Estn ligeramente
cefalizados con un cerebro bilobulado en la parte anterior del cuerpo. Tienen una red
nerviosa sinptica que tienden a concentrarse en cordones nerviosos laterales con
varias conexiones transversas. Posee fotorreceptores que estn unidos al cerebro y
estn agrupados en dos cavidades oculares que poseen clulas pigmentadas o
llamadas tambin manchas oculares. Presenta quimiorreceptores concentrados en
surcos ciliados en las aurculas. Su aparato digestivo posee una boca central en la
parte ventral, una faringe libre y un tubo digestivo (entern) con una rama anterior y dos
posteriores. La faringe es una estructura muscular que generalmente se extiende por
fuera del cuerpo del individuo para alcanzar el alimento y succionarlo. Son
hermafroditas, as que cada organismo posee tanto ovarios como testculos, pero no
ocurre la autofecundacin. Hay reproduccin sexual con cpula, recepcin y
almacenamiento de espermatozoides por cada uno de los individuos que luego sern
utilizados en la fecundacin cuando el ovocito logre la madurez. Sin embargo, la
reproduccin asexual es mucho mas frecuente y generalmente el individuo adulto se
adhiere fuertemente a un sustrato e inicia el proceso estiramiento hasta que se
fracciona en dos partes. Cada una de las partes regenera la mitad faltante con lo cual
dan origen a dos individuos completamente constituidos (Fig 1). Este tipo de
reproduccin es llamado fisin.

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Figura 1. Regeneracin de la cabeza de la mitad posterior del cuerpo. Izquierda:


Observe la presencia de las dos manchas oculares aun sin haber adquirido la cabeza el
tamao total. Derecha: Regeneracin terminada de la regin anterior.
La regeneracin es considerada como la reactivacin del desarrollo en la vida
postembrionaria para restablecer tejidos perdidos y supone la sustitucin del tejido por
otro igual que conserva la estructura y funcionalidad del original; es una caracterstica
propia de numerosos invertebrados y de algunas estructuras de ciertos vertebrados
adultos, principalmente anamniotas (peces y anfibios).
Hay tres mecanismos principales de regeneracin: morfalaxis, regeneracin
compensatoria y epimorfosis. Morfalaxis consiste en el restablecimiento del patrn que
exista anteriormente pero toma como punto de partida los tejidos existentes o sea que
parte de los tejidos viejos se transforman en aquellos que se han perdido y se
caracteriza por poco divisin mittica. Regeneracin compensatoria consiste en el
aumento en nmero de clulas hasta lograr equilibrar en volumen el tejido perdido,
estas las clulas continan conservando su diferenciacin an al encontrase en este
proceso altamente proliferativo. Este tipo de regeneracin se evidencia en el hgado de
los mamferos y no se presenta la formacin del blastema de regeneracin tpico de la
epimorfosis. Epimorfosis consiste en la formacin de un grupo de clulas no
diferenciadas llamado blastema que con una continua actividad proliferativa genera las

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estructuras perdidas. Con el tiempo estas clulas llegan a ser especificadas en cada
uno de los tejidos de la parte corporal perdida inicialmente. El blastema se forma por
desdiferenciacin de las estructuras adultas y es generalmente un tejido no pigmentado
que se forma debajo del epitelio.
Es conocido desde los aos 1700 que las planarias presentan regeneracin completa
de sus estructuras perdidas y actualmente podemos clasificar dicho mecanismo como
epimorfosis. Hay varios modelos propuestos para explicar los procesos por medio de
los cuales se forman o crean los patrones especficos (FORMACIN DE PATRONES) y
como se encuentra la informacin necesaria para crear esos patrones y formas
(INFORMACION POSICIONAL). Los dos modelos a conocer son: a. Modelo de
gradiente por difusin y b. Modelo de coordinacin Polar.
El Modelo de gradiente por difusin asume que la informacin posicional es
establecida por un gradiente de una sustancia qumica llamada morfgeno. Las clulas
pueden conocer sus posiciones al detectar los niveles de concentracin del morfgeno
y ellas pueden conocer su polaridad al detectar la direccin del gradiente (Fig. 2). Se
cree que las clulas responden formando diferentes estructuras segn los diferentes
umbrales

Figura 2. Modelo de gradiente por difusin para explicar el mecanismo


de la informacin posicional de las clulas de planaria.
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El Modelo de coordinacin polar intenta explicar la regeneracin en tres dimensiones
y propone que las clulas reconocen su posicin con respecto al todo. Se sugiere la
existencia de dos sistemas de informacin, uno que de la informacin a lo largo del eje
longitudinal o sea antero-posterior y otro que indique la posicin dentro del un sistema
circular de orientacin en cada regin del cuerpo dando informacin sobre los ejes
dorso-ventral y derecha-izquierda simultneamente. Se propone que la informacin no
se difunde como un morfgeno sino que se determina con la presencia de molculas
encontradas en la superficie de las clulas. (Fig. 3)

Figura 3. Modelo de coordinacin polar propuesto por French, Bryant y Bryant (1976).
A. Informacin posicional con respecto al eje antro-posterior. B. Informacin posicional
circular.
OBJETIVOS
a. Reconocer la estructura anatmica bsica de individuos acelomados.
b. Identificar las etapas regenerativas por las cuales pasa la planaria dentro del
mecanismo de regeneracin epimrfica.

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MATERIALES Y REACTIVOS
2 Estereoscopios

Microscopio

Portaobjetos sin y con cavidad (horadadas)

Agua destilada

Pipeta Pasteur

Caja Petri

Hgado (alimento de planarias)

Bomba aireadora

Acuarios Termmetro

Cuchilla nueva

Pincel delgado

Papel milimetrado

Hielo o pila de gel refrigerante


PROCEDIMIENTO
A. Reaccin a estmulos
Registre como el individuo responde a los factores ambientales luz, oscuridad,
temperatura, tcto, molculas qumicas (alimento) de la siguiente manera:
1. Coloque la planaria en el centro de una caja Petri con agua destilada y observe en el
estereoscopio. Describa como es su desplazamiento y despus de un corto periodo de
tiempo sin realizar seguimiento, registre cual es la tendencia de ubicacin espacial
dentro de la caja.
2. Ubique la planaria en el centro de la caja petri y registre el comportamiento que
presenta al aproximar la luz de la lmpara.
3. Utilice un pincel de cerdas suaves para realizar estmulos tractiles en la parte
anterior, posterior y lateral del cuerpo del inidividuo. Determine como responde al tacto
y segn estos comportamientos proponga donde podra estar la mayor concentracin
de receptores tctiles.
4. Coloque debajo de la caja Petri, donde se encuentra su planaria, una cantidad
suficiente de hielo o pila de gel. Observe como se comporta el individuo a medida que
disminuye la temperatura. Retire el hielo y registre el cambio de conducta que presenta

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el individuo. Realice una tabla en paralelo donde reporte el cambio de comportamiento,
segn temperatura y tiempo, tome como punto de partida la temperatura ambiente.
5. Coloque un trozo de hgado en el lado opuesto de donde se encuentra el individuo y
con la ayuda de una pipeta pasteur genere una corriente de agua que fluya desde el
hgado hasta la planaria. Observe la respuesta a este estmulo a temperatura ambiente.
B. Morfologa
1. Realice su propio esquema donde identifique las diferentes regiones corporales:
anterior, posterior, dorsal, ventral, cabeza, boca, aurculas, manchas oculares, cavidad
de las manchas oculares (Fig. 4).

Figura 4. Regiones corporales de la planaria, vista dorsal.


2. Coloque una planaria en un portaobjetos horadado, adicione agua destilada la
cantidad necesaria para llenar la cavidad y cubra con otro portaobjetos liso (sin
cavidad). De esta manera podr observar tanto la superficie dorsal como la ventral.
3. Lleve al estereoscopio y posteriormente al microscopio la placa para identificar la
forma, ubicacin y coloracin de estructuras como la faringe, poro genital, sistema

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nervioso, aparato digestivo. Determine si son visibles los ovarios, testculos, bulbo
copulatorio y atrio genital (Fig. 5 y 6).

Figura 5. Esquema de la anatoma interna de la planaria, vista dorsal (Gilbert, S. 2005).

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Figura 6. Aspectos morfolgicos externos ventrales de la planaria de ro Dugesia sp.


Arriba: vista dorsal; Abajo: vista ventral. Note en ambas la exposicin de la farige.
C. Regeneracin
1. Realice un corte transversal de un planaria en la zona comprendida entre la cabeza y
la faringe. Utilice un individuo que se encuentre temporalmente inmovilizado para mayor
facilidad. Realice presin de manera uniforme a lo largo del corte para lograr superficies
uniformes.

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2. Observe los dos sectores del cuerpo de la planaria y describa lo que sucede
inmediatamente despus del corte (Fig. 7). Cmo ocurre el cierre de la herida?
Descrbalo. Cunto tiempo le toma a la planaria este proceso?

Figura 7. Aspecto externo de las reas donde se realiz el corte transversal del
individuo. Ariba: cierre de la herida en la regin anterior. Abajo: cierre de herida en la
regin posterior.
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3. Contine con la observacin de los dos fragmentos y describa cmo ocurre y cunto
tiempo le toma a la planaria completar el proceso de cicatrizacin. Registre la
temperatura ambiental del da del experimento en el laboratorio. Identifique el
blastema.
4. Coloque los fragmentos de la planaria en un recipiente con 200 ml de agua destilada
y un aireador.
5. Tome otra planaria y realice dos cortes transversales en la misma regin corporal del
experimento anterior. Observe el proceso de cierre de la herida de los fragmentos,
esquematice y describa lo que ocurre. Coloque en un recipiente con agua destilada los
fragmentos obtenidos y recuerde colocarle un aireador.
5. Realice por dos semanas el seguimiento diario de su experimento de regeneracin el
cual consiste en:
a. Realizar esquemas de cada uno de los fragmentos
b. Registrar las medidas de longitud de cada fragmento
c. Cambiar el agua a diario con la respectiva eliminacin de las secreciones
producidas por el individuo adheridas al recipiente.
d. Limpiar con agua destilada la piedra del aireador utilizando el mtodo de
friccin.
NOTA: Se le recomienda no alimentar a los individuos durante su regeneracin ni usar
agua tratada para consumo humano durante el experimento ya que el cloro es txico
para estos organismos.
Cada grupo debe entregar al final del seguimiento de regeneracin de las planarias un
informe de los progresos registrados. No olvide graficar e interpretar los datos de
crecimiento obtenidos. Recuerde argumentar lo observado durante el proceso.

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