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2
Inst. de Ciencias Farmacuticas y Recursos Naturales Juan de Dios Guevara, Facultad de Farmacia y Bioqumica, UNMSM.
Inst. de Investigacin de Qumica, Biologa, Microbiologa y Biotecnologa Marco Antonio Garrido Malo, Facultad de
Farmacia y Bioqumica, UNMSM. 3 Servicio Nacional de Sanidad Agraria. 4 Instituto Nacional de Innovacin Agraria.
RESUMEN
Con el fin de sustituir los insecticidas qumicos usados en el cultivo del algodonero por sustancias incuas
que permitan un manejo integrado de plagas con fundamento ecolgico, se investigaron y colectaron 40 especies vegetales con propiedades biocidas, las que fueron clasificadas taxonmicamente en el Museo de Historia
Natural de la Universidad Nacional Mayor de San Marcos. Entre las especies ms relevantes por sus propiedades insecticidas tenemos: Tephrosia cinerea (sacha barbasco), Artemisia absinthium (ajenjo), Ryania speciosa (riania), Cissampelos grandifolia (lega), Datura Stramonium (chamico), Hura crepitans (catahua), Schinus
molle (molle), Annona cherimola (chirimoya), Annona muricata (guanbana o graviola), Tagetes patula (marigold), Tanacetum parthenium (santa mara), Chromolaena laevigata (sacha huaca), Clibadium asperum (huaca),
Lonchocarpus nicou (barbasco del monte), Lonchocarpus spicif lorus (yumanasa) Centropogon cornutus (arco
sacha), Erythrina berteroana (amasisa chica), Erythrina edulis (pajuro), Erythrina ulei (amasisa), Melia azedarach L. (rbol del Neem) y Agave americana (maguey). De la corteza y hojas de estas especies se obtuvieron
extractos acuosos liofilizados que fueron evaluados en su composicin qumica, perfiles cromatogrfico y espectrofotomtrico UV/Visible; bioactividad frente a los nauplios de Artemia salina y bioensayos a nivel de laboratorio y de campo. Entre las plagas investigadas figuran: Aphis gossypii , Bemisia tabaci y Dysdercus peruvianus . Los
extractos de L. nicou , A. americana L., H. crepitans y C. grandifolia mostraron resultados significativos tanto a
nivel de laboratorio como en los cultivos de algodonero en el campo, siendo su toxicidad: (CL50 39), (CL50 64)
y (CL50), respectivamente.
Palabras clave: Algodonero, extracto liofilizado, biocida, plagas, bioensayos, parcela, Artemia salina
SUMMARY
To study extracts of the cotton biocides it has collected more than thirty species of plants, which were
classified taxonomically in the Natural History Museum of the Universidad Nacional Mayor de San Marcos, between species that are considered relevant for its insecticidal properties we have the following species: Tephrosia
cinerea (sacha barbasco), Artemisia absinthium (wormwood), Ryania speciosa (riania), Cissampelos grandifolia
(legia), Datura stramonium (chamico), Hura crepitans (catahua), Schinus molle (molle), Annona cherimola
(chirimoya), Annona muricata (guanabana or graviola), Tagetes patula (Marigold), Tanacetum parthenium (santa maria), Chromolaena laevigata (sacha huaca), Clibadium asperum (huaca), Lonchocarpus nicou (Mount mullein), Lonchocarpus spicif lorus (yumanasa), Centropogon cornutus (arco sacha), Erythrina berteroana (small
amasisa), Erythrina edulis (pajuro), Erythrina ulei (amasisa), Melia azedarach (Neem tree) y Agave americana
(maguey). Lyophilized extracts were evaluated chemical composition, chromatographic and spectrophotometric profile, their behavior against Artemia salina , biocide bioassays in the laboratory and field level. Among
the pests that were investigated are includes: Aphis gossypii , Bemisia tabaci , Dysdercus peruvianus . Extracts of
A. americana L., H. crepitants and C. grandifolia showed significant results both at the level of the laboratory
and in the cotton crop in the field.
Key words: Cotton, freeze-dried extract, biocide, pests, laboratory bioassays, field, A. saline.
I N T RO D U CC I N
34
Perfil cromatogrfico
M AT E R I A L Y M T O D O S
El estudio se ha realizado segn el contrato de adjudicacin de recursos no reembolsables del Programa de Ciencia y Tecnologa de la
Presidencia del Consejo de Ministros FINCYT
PIBAP, con la Universidad Nacional Mayor de
San Marcos como entidad ejecutora y la empresa ECOTRAD en calidad de entidad colaboradora. Para el desarrollo del proyecto Catlogo de
plantas biocidas del algodonero, en el nterin
del desarrollo del proyecto, fue necesario establecer dos convenios, con el Instituto Nacional
de Investigacin Agraria (INIA) y con el Servicio
Nacional de Sanidad Agraria (SENASA).
La clasificacin taxonmica de las especies
biocidas se realiz en el Museo de Historia Natural
35
Duracin en das
Aphis gossypii
Estado ninfal
Longevidad adulto hembra
Ciclo total
Anthonomus vestitus
Incubacin
Estado larval
Pupa
Adulto
Desarrollo de huevo a adulto
Ciclo total
Dysdercus peruvianus
Incubacin
Estado ninfal
Longevidad adulto
Desarrollo de huevo a adulto
Ciclo total
Heliothis virescens
Incubacin
Estado larval
Pupa
Longevidad adulto
Desarrollo de huevo a adulto
Ciclo total
Bemisia tabaci
Incubacin
Estado ninfal
Longevidad adulto hembra
Longevidad adulto macho
Desarrollo de huevo a adulto
Ciclo total en hembras
Ciclo total en machos
24
28
52
3-4
7-12
3-7
3-5
13-23
16-28
7-9
32-36
25-28
39-48
64-76
Blanco
3-4
22-33
8-10
25-27
33-47
58-74
DBCA
Maguey, catahua y lega
Rotebiol (rotenona)
Maguey 1,71 g/L
Catahua 2,85 g/L
Lega 2,85 g/L
Agua
10
16
8
5
26
34
31
36
Nombre cientfico
y comn
Saponinas (EsteroiTriterpenoides
dales, triterpenoides y
y esteroides
aza-esteroidales)
libres
+++
+++
++
+++
+
+
++
+++
++
++
++
++
++
++
+
++
+
+
+
+
+
+
+
+
+
++
++
+
+
+
+
-
troladores biolgicos, las poblaciones permanecieron intactas, lo cual constituye una ventaja
con relacin a los insecticidas no naturales.
Taninos
+
-
+
++
++
+++
++
+
+++
+
+
-
Quinonas
(Naftoquinonas y
Antraquinonas)
Alcaloides
Flavonoides
+
++
++
++
++
++
++
-
+ trazas
+
+
+++
+ trazas
+++
++
++
++
++
+++
++
++
+
+
-
+
+++
+++
+
+
+
+++
++
++
++
+++
+
++
++
++
+
+
+++
patible con la salud del agricultor que los manipula y con la vida de la especie vegetal, por lo
cual consideramos que no debe utilizarse otros
solventes.
Las bases de la quimiotaxonoma son tiles para ampliar el espectro de plantas biocidas.
Es posible que la mayora de especies del gnero
Lonchocarpus contenga rotenona, que es la molcula prototipo con actividad altamente biocida; por lo tanto, no es difcil deducir que otras
leguminosas del gnero Tephrosia , tambin contengan el isof lavonoide rotenona.
A. salina ha demostrado que el extracto
acuoso de Lonchocarpus nicou es muy txico
al igual que Hura crepitans (CL50 39) y Agave
americana (CL50 64). Como consecuencia de
la investigacin aparece la hiptesis de que los
nauplios de A. salina sirven como indicador para
determinar la actividad biocida de las especies
vegetales.
La crianza de insectos, as como las investigaciones del efecto biocida a nivel de laboratorio, son sensibles al mtodo operatorio; intervienen un gran nmero de variables, lo cual explica
por qu solamente se ha trabajado con algunas
especies vegetales y con los insectos ms comu-
DISCUSIN
Los extractos liofilizados conservan sus
propiedades qumicas, entre estas, la composicin qumica, estimada por cromatografa en
capa delgada y demostrada al compararla con un
extracto acuoso recientemente preparado.
El uso de los nombres comunes de las especies vegetales produce confusin en el empleo o estudio de stas; existen nombres comunes que corresponden a dos o tres especies
diferentes, por lo que se requiere clasificarlas
sistemticamente.
El hecho de haber establecido los perfiles
espectrofotomtricos UV/Vis y cromatogrficos,
induce a manejar las plantas biocidas con el criterio de controlar la calidad. Todos los extractos
acuosos son diferentes, por lo que es necesario
tratarlos con la misma exigencia usada en los
controles para los frmacos y medicamentos.
Se ha elegido el agua como nico solvente
para la preparacin de extractos, por ser com-
37
Nombre vulgar
Huaca
Sachahuaca 1
Nogal
Amasisa
Lega
Molle
Santa Mara
rbol del Neem
Trtago
Sacha Barbasco
Phaseolus
Catahua
Sachahuaca 2
Chirimoya
Pajuro
Amasisa chica
Mua
Eucalipto
Toronja
Sachahuaca
Nombre cientfico
Clibadium sp
Chromolaena laevigata
Juglans neotropica
Erythrina ulei
Cissampelos grandifolia
Schinus molle
Tanacetum parthenium
Melia azedarach
Ricinus communis
Tephrosia cinerea
Phaseolus vulgaris
Hura crepitans
Clibadium sp. 1
Annona cherimola
Erythrina edulis
Erythrina berteroana
Minthostachys mollis
Eucalyptus globulus
Citrus paradisi
Chromolaena laevigata
Nombre vulgar
Huaca
Sachahuaca 1
Chamico
Amasisa I
Lega
Paico
Santa Mara
rbol del Neem
Tartago
Sacha Barbasco
Phaseolus
Catahua
Sachahuaca 2
Chirimoya
Barbasco del Monte
Pltano del monte
Laurel rosa
Hojas de papaya
Toronja
Anona
Guanbana
mg de
fluoroglucinol/g
de liofilizado
75,67
49,02
26,99
23,85
21,97
49,71
43,64
23,10
30,42
23,25
23,25
62,12
57,94
37,00
24,90
31,27
53,31
62,09
29,32
61,42
Nombre vulgar
Huaca
Nogal
Amasisa
Lega
Molle
Santa Mara
rbol del Neem
Tartago
Sacha barbasco
Phaseolus
Sachahuaca 2
Chirimoya
Pajuro
Arco sacha
Mua
Eucalipto
Toronja
Sachahuaca
Nombre cientfico
Clibadium sp
Juglans neotropica
Erythrina ulei
Cissampelos grandifolia
Schinus molle
Tanacetum parthenium
Melia azedarach
Ricinus communis
Tephrosia cinerea
Phaseolus vulgaris
Clibadium sp. 1
Annona cherimola
Erythrina edulis
Centropogon cornutus
Minthostachys mollis
Eucalyptus globulus
Citrus paradisi
Chromolaena laevigata
mg de quercetina/
g de liofilizado
16,65
11,2
8,57
5,5
11,09
10,36
2,16
3,87
2,83
2,33
8,64
6,07
4,86
5,35
9,81
12,46
7,07
18,33
% de Alcaloides Totales
(mg de alcaloides / 100 g de liofilizado)
0,053 mg% expresados en harmalina.
0,053 mg% expresados en harmalina.
0,71 mg% expresados en escopolamina.
0,66 mg% expresados en erisodina
0,18 mg% expresados en nicotina.
0,040 mg% expresados en anabasina.
0,14 mg% expresados en piperina.
Cantidad no significativa.
0,020 mg% expresados en ricinina.
0,080 mg% expresados en 1-Desoximanojirimicina
0,056 mg% expresados en n-metil-agmantina.
0,04 mg% expresados en ricinina.
0,053 mg% expresados en harmalina.
0,25 mg% expresados es isocompalmina
0,1 mg% expresados en 1-Desoximanojirimicina.
1,37 mg% expresados en isocompalmina.
Cantidad no significativa.
0,040 mg% expresados en nicotina.
0,081 mg% expresados en Hordenina.
0,10 mg% expresados en O-metilmoschatolina.
2,43 mg% expresados en isocompalmina.
Nombre cientfico
Clibadium sp
Chromolaena laevigata
Datura stramonium
Erythrina ulei
Cissampelos grandifolia
Chenopodium ambrosioides
Tanacetum parthenium
Melia azedarach
Ricinus communis
Tephrosia cinerea
Phaseolus vulgaris
Hura crepitans
Clibadium sp. 1
Annona cherimola
Lonchocarpus nicou
Porcelia nitidifolia
Nerium oleander
Carica papaya
Citrus paradisi
Rollinia mucosa
Annona muricata
38
Concentracin
(mg/ml)
0,00 (H2O d)
5
10
25
50
1 Hora
%M
Sig.
0,00
a
0,00
a
0,00
a
0,00
a
4,17
b
2 Horas
%M
Sig.
0,00
a
0,00
a
0,00
a
3,33
a
8,33
b
4 Horas
%M
Sig.
0,00
a
0,00
a
3,70
a
7,50
b
15,83
b
8 Horas
%M
Sig.
0,00
a
4,17
a
7,87
a
11,67
b
19,17
b
Promedio en una misma lnea vertical seguidos por la misma letra minscula no difieren significativamente a p=0,05.
Prueba de Tukey. MINITAB 15 Sig. = Significancia, %M = Porcentaje de Mortalidad H2Od = agua destilada
Concentracin
(mg/ml)
0,00 (H2Od)
5
10
25
50
1 Hora
%M
Sig.
0,00
a
3,33
a
3,70
a
7,41
a
14,07
b
2 Horas
%M
Sig.
0,00
a
3,33
a
3,70
b
18,52
ab
35,56
b
4 Horas
%M
Sig.
0,00
a
10,37
b
15,74
a
29,63
b
35,56
b
8 Horas
%M
Sig.
0,00
a
17,04
b
19,91
ab
29,63
a
39,26
ab
12 Horas
%M
Sig.
0,00
a
17,04
b
23,61
a
37,04
ab
50,00
b
Promedio en una misma lnea vertical seguidos por la misma letra minscula no difieren significativamente a p=0,05.
Prueba de Tukey. MINITAB 15 Sig. = Significancia, %M = Porcentaje de Mortalidad H2Od = agua destilada
Concentracin
(mg/ml)
0,00 (H2Od)
5
10
25
50
1 Hora
%M
Sig.
0,00
a
6,67
a
7,04
a
15,37
a
19,70
b
4 Horas
%M
Sig.
0,00
a
13,33
a
32,22
a
39,91
b
48,48
b
8 Horas
%M
Sig.
0,00
a
30,00
a
50,00
b
59,81
b
61,52
ab
12 Horas
%M
Sig.
0,00
a
46,67
a
70,74
a
78,06
a
80,91
b
Promedio en una misma lnea vertical seguidos por la misma letra minscula no difieren significativamente a p=0,05.
Prueba de Tukey. MINITAB 15 Sig. = Significancia, %M = Porcentaje de Mortalidad H2Od = agua destilada
Concentracin
(mg/ml)
0,00 (H2Od)
3,75
7,50
15,00
30,00
24 Horas
%M
Sig.
0,00
a
31,11
b
43,52
b
70,37
a
78,15
a
36 Horas
%M
Sig.
0,00
a
58,89
ab
75,93
ab
92,56
b
100,00
a
24 Horas
%M
Sig.
0,00
a
63,33
a
77,78
b
89,26
b
93,64
ab
36 Horas
%M
Sig.
-
12 Horas
%M
Sig.
0,00
a
0,00
a
0,00
a
0,00
a
0,00
a
24 Horas
%M
Sig.
0,00
a
0,00
a
0,00
a
0,00
a
0,00
a
36 Horas
%M
Sig.
0,00
a
0,00
a
0,00
a
0,00
a
0,00
a
48 Horas
%M
Sig.
0,00
a
0,00
a
0,00
a
0,00
a
0,00
a
60 Horas
%M
Sig.
0,00
a
0,00
a
0,00
a
0,00
a
0,00
a
Promedio en una misma lnea vertical seguidos por la misma letra minscula no difieren significativamente a p=0,05.
Prueba de Tukey. MINITAB 15 Sig. = Significancia, %M = Porcentaje de Mortalidad H2Od = agua destilada
Concentracin
(mg/ml)
0,00 (H2Od)
3,75
7,50
15,00
30,00
12 Horas
%M
Sig.
0,00
a
0,00
a
0,00
a
0,00
a
36 Horas
%M
Sig.
0,00
a
0,00
a
6,66
b
0,00
a
48 Horas
%M
Sig.
0,00
a
0,00
a
6,66
b
0,00
a
60 Horas
%M
Sig.
0,00
a
0,00
a
6,66
b
0,00
a
Promedio en una misma lnea vertical seguidos por la misma letra minscula no difieren significativamente a p=0,05.
Prueba de Tukey. MINITAB 15 Sig. = Significancia, %M = Porcentaje de Mortalidad H2Od = agua destilada
39
12 Horas
%M
Sig.
0,00
a
7,87
b
15,74
b
20,00
ab
23,33
b
72 Horas
%M
Sig.
0,00
a
0,00
a
0,00
a
0,00
a
0,00
a
72 Horas
%M
Sig.
0,00
a
0,00
a
13,33
b
0,00
a
Concentracin
(mg/ml)
0,00 (H2O d)
3,75
7,50
15,00
30,00
12 Horas
%M
Sig.
0,00
a
6,66
b
0,00
a
0,00
a
24 Horas
%M
Sig.
0,00
a
6,66
b
0,00
a
0,00
a
36 Horas
%M
Sig.
0,00
a
6,66
b
0,00
a
20,00
b
48 Horas
%M
Sig.
0,00
a
6,66
b
0,00
a
33,33
b
60 Horas
%M
Sig.
0,00
a
6,66
b
0,00
a
40,00
b
Promedio en una misma lnea vertical seguidos por la misma letra minscula no difieren significativamente a p=0,05.
Prueba de Tukey. MINITAB 15 Sig. = Significancia, %M = Porcentaje de Mortalidad H2Od = agua destilada
Concentracin
(mg/ml)
0,00 (H2O d)
3,75
7,50
15,00
30,00
12 Horas
%M
Sig.
0,00
a
0,00
a
0,00
a
0,00
a
26,66
b
24 Horas
%M
Sig.
0,00
a
0,00
a
0,00
a
6,66
a
26,66
b
36 Horas
%M
Sig.
0,00
a
0,00
a
0,00
a
10,37
b
33,33
b
48 Horas
%M
Sig.
0,00
a
0,00
a
0,00
a
11,42
b
46,66
b
60 Horas
%M
Sig.
0,00
a
0,00
a
0,00
a
30,83
ab
53,33
b
Promedio en una misma lnea vertical seguidos por la misma letra minscula no difieren significativamente a p=0,05.
Prueba de Tukey. MINITAB 15 Sig. = Significancia, %M = Porcentaje de Mortalidad H2Od = agua destilada
Lonchocarpus
nicou
26,95
21,34
21,34
21,13
20,66
16,62
Chromolaena
laevigata
55,35
52,97
43,20
32,99
27,43
26,52
CL 50 (mg/ml)
Schinus molle
181,94
73,92
53,41
53,41
42,64
42,64
Cissampelos
grandifolia
NSPD
NSPD
77,79
47,07
40,12
35,26
Erythrina
berteroana
NSPD
NSPD
3236,66
3236,66
3236,66
1706,42
72 Horas
%M
Sig.
0,00
a
6,66
b
0,00
a
46,66
b
72 Horas
%M
Sig.
0,00
a
0,00
a
0,00
a
37,50
ab
53,33
b
Hura crepitans
NSPD
NSPD
NSPD
NSPD
NSPD
NSPD
El control de calidad de los extractos liofilizados debe incluir los perfiles espectrofotomtricos UV/Vis y cromatogrficos.
pecies botnicas estudiadas conservan sus propiedades biocidas, que a su vez dependen de la
composicin qumica conformada por f lavonoides, alcaloides, saponinas y terpenos. No existe
un modelo de molcula a la cual atribuir la propiedad biocida; debera investigarse el mecanismo del efecto insecticida para tratar de relacionar la estructura con la actividad biolgica.
El estudio de la actividad biocida a nivel
de laboratorio y de campo implica el control de
un gran nmero de variables en reas especializadas; por lo tanto, exige una participacin
multidisciplinaria para afianzar el progreso de
la agricultura orgnica.
Entre las especies biocidas que han mostrado resultados expectantes por sus propiedades
plaguicidas en favor del algodonero se encuentran: Agave americana , Lonchocarpus nicou ,
Hura crepitans y Cissampelos grandifolia .
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