Datos, clculos y resultados

Sustancia

Cromatografa de columna
Para la separacin de una mezcla
de tintes se utiliz la tcnica de
cromatografa de columna,
utilizando como solventes etanol y
agua, como fase estacionaria se
utiliz almina los datos obtenidos
mediante este mtodo se muestran
en la siguiente tabla:
Sustancia

Color

Etanol

Incoloro

Azul de
metileno

Azul
oscuro

Fluorescen
a

Verde

Agua

Incoloro

Descripci
n
Solvente
usado para
hacer bajar
el azul de
metileno
en la
columna
Componen
te que bajo
primero en
la columna
Segundo
component
e en bajar
Solvente
usado para
hacer bajar
la
fluorescen
a en la
columna

Tabla 1. Resultados
cromatografa de columna
Cromatografa de capa delgada
Con el fin de calcular el valor de Rf
para los compuestos y su velocidad
relativa frente al disolvente, se
utiliz el mtodo de cromatografa
de capa delgada, los datos
obtenidos fueron:

Distancia re
Etanol-agua (110)
3.5
3.4
0.0
0.0

Mezcla de tintes
Fluorescena
Azul de metileno
Sustancia pura (azul de
metileno)
Tabla 2. Resultados
cromatografa de capa delgada.
Para calcular el valor Rf de cada
compuesto se utiliz la siguiente
ecuacin:
Rf =

Distancia delcompuesto
(1)
Distancia del disolvente

El denominador de esta ecuacin es

constante para las diferentes
mezclas de disolventes:

Etanol-Agua
1-10
10-1
Tabla 3. Distancias recorridas por
los disolventes en las diferentes
capas.
Teniendo en cuenta estas
distancias, procedemos a calcular
los valores de Rf para cada
compuesto:
10 Etanol-1Agua

Mezcla de tintes
3.7
Rf =
=0.925
4

Fluorescena
3.7
Rf =
=0.925
4

Distancia

Azul de metileno
2
Rf = =0.5
4

Compuesto puro
0.2
Rf =
=0.05
4

10 Agua 1Etanol

Mezcla de tintes
3.5
Rf =
=0.875
4

Fluorescena
3.4
Rf =
=0.85
4

Azul de metileno
0
Rf = =0
4

Compuesto puro
0
Rf = =0
4

Anlisis de resultados
La cromatografa en columna y en
capa fina solo difieren en el medio
de soportar el adsorbente. En
ambas tcnicas se emplea almina
(Al2O3) o gel de slice (cido silcico,
(SiO2.H2O) como fase estacionaria,
y una fase mvil orgnica. 1 Debido a
que las dos tcnicas de separacin
se diferencian por sus fases
mviles, se observa que en la
cromatografa de columna la
adsorcin,
debida
a
fuerzas
intermoleculares entre el adsorbente
y el soluto, para el caso de la

separacin con almina se observa

que es ms eficaz ya que la almina
es el ms activo de los dos
absorbentes, es decir, es el que
retiene con mayor fuerza a los
compuesto, por lo cual es utilizada
para
separar
compuestos
relativamente apolares tales como
hidrocarburos, haluros de alquilo,
teres, aldehdos y cetonas 4 Una
gran
diferencia
entre
la
cromatografa de columna y la de
capa delgada consiste en la
facilidad con la que cada una de
estas se desarrolla, para el caso de
cromatografa de columna la fase
mvil se hace caer , es decir la
fuerza motriz es la gravedad,
mientras que en capa delgada la
accin capilar del absorbente hace
que el disolvente pueda subir.
Entre ms polar sea un compuesto,
ms fuertemente se adsorbe en la
fase estacionaria, por lo que su
migracin a lo largo de ella es
menor,
siendo
eludo
ms
lentamente por la fase mvil, que
los compuestos menos polares. De
este modo, la separacin selectiva
de los componentes de una
muestra, por cromatografa, se debe
a las diferencias en la migracin de
los componentes individuales a lo
largo de la fase estacionaria.
Algunos de los errores que
intervienen en las medidas para la
separacion de los compuestos se le
pueden atribuir en gran parte a la
longitud de la columna y de las
placas, debido a que la fase
estacionaria es de un tipo de
absorbente solido, por lo cual se
necesita que interaccion de manera
rpida con la fase mvil, ya que al
ser
absorbentes
gruesos
su
superficie es menor que en un
absorbente fino y los puntos de

contacto con la fase mvil son

reducidos, otra desventaja de que el
absorbente sea grueso es que los
disolventes se mueven rpidamente
a traves de estos lo que da un
menor tiempo de interaccion para
las fuerzas en cada caso.
Solucin al cuestionario
1.

Explique por qu y cmo

se separan los compuestos
de la mezcla de tintes?

La separacin de los compuestos

de tintes se debe a que la especie
que migra de ltima, lo hace porque
es ms fuertemente retenida que la
otra y por tanto se retrasa durante el
proceso de migracin.
Los compuestos de la mezcla de
tintes se separan, porque tiene
diferentes velocidades de migracin
y se van aislando cada vez ms,
hasta completar la separacin a
medida que se les pase cantidades
suficientes de fase mvil a travs de
la columna, hasta lograr que cada
uno
de
los
componentes
individuales llegue al final para
recogerlos por separado.2
2. Que es la cromatografa de
columna seca y cmo se
desarrolla?
Fue una tcnica descrita por Loev y
Goodman, la cual consiste en
rellanar una columna clsica de
cromatografa con adsorbente, sin
ayuda de ningn solvente, sea que
en vez de usar varios volmenes de
disolvente la cromatografa de
columna seca finaliza cuando el
solvente alcanza el fondo de la
columna al usar un solo volumen de
disolvente. Este mtodo ofrece
algunas ventajas como el grado y la
velocidad de separacin.

Para el montaje de la cromatografa

de columna seca se inicia
rellenando un columna de vidrio o
preferiblemente un tubo de nylon
con almina seca o slice gel seca,
la adicin de este se hace sin la
presencia de ningn disolvente y
tratando de disminuir al mximo los
espacios que puedan quedar al
adicionarse el adsorbente. El
tamao de la columna se escoge
dependiendo de la dificultad para
separar la muestra, entre ms difcil
ms grande ha de ser la columna.
Posteriormente se adiciona la
muestra en el tope del absorbente,
se adiciona el solvente eluyente
hasta que este alcance el fondo de
la
columna
resultando
un
cromatograma que es revelado con
una lmpara de UV observando
zonas
del
absorbente
correspondiente a los compuestos
separados. La columna de nylon se
marca con una pluma y se corta con
un cuchillo cada zona, luego se
pueden extraer los compuestos
contenidos en el absorbente con
metanol, ter o el solvente
adecuado. 3
3. Cul es el desarrollo
mltiple y el desarrollo
bidimensional de la CCD?
La cromatografa de capa delgada
posee un poder mximo de
resolucin en una regin especfica.
En
separaciones
difciles
la
resolucin puede incrementarse por
desarrollo mltiple. En esta tcnica
despus del primer desarrollo la
placa se remueve de la cmara, se
deja secar y se desarrolla otra vez
en el mismo solvente. Estas
separaciones son ideales para
compuestos con Rf menores de 0,5,
el desarrollo bidimensional se utiliza
para separar mezclas que contienen

muchos
componentes
diferentes propiedades.3

con

de cromatografa de columna
y cromatografa de capa
delgada, se observ que la
separacin de las mezclas de
colorantes como este caso,
depende de las fuerzas
intermoleculares generadas
al entrar en contacto con una
fase estacionaria como la
silica gel y/o almina, como
tambin depender en gran
parte de la naturaleza del
eluyente.

4. En qu consiste la CCD
preparativa?
La cromatografa de capa delgada
preparativa se usa para purificar
suficiente cantidad de una sustancia
ligeramente no voltil para un uso
posterior, ms que para anlisis de
la misma.
5. Qu es una resina de
intercambio aninica? Y
una resina catinica?
Las resinas catinicas son aquellas
que poseen cargas negativas e
interaccionan con cargas positivas,
Las resinas aninicas poseen
cargas positivas e interaccionan con
cargas negativas, entre las resinas
aninicas se encuentran los grupos
amino, -NH2 y amino sustituidos.
6. Indique algunas de las
aplicaciones
de
la
cromatografa de adsorcin
en columna.
Se utiliza para hallar la
concentracin de trazas en
las muestras, para separacin
de iones interferentes en
anlisis clsico, separacin
de componentes de una
sntesis orgnica, separacin
de colorantes, separacin e
identificacin de hioscina y
de
morfina,
desmineralizacin del agua,
preparacin de disoluciones
patrn y disolucin de
sustancia insolubles.4

La adsorcin fue ocasionada

debido a interacciones entre
las molculas de la fase
estacionaria y las de la fase
mvil, actan fuerzas de
atraccin tales como dipolodipolo, puentes de hidrogeno
y fuerzas de Van der Waals

Es posible concluir que entre

los dos procedimientos de
separacin es ms eficaz la
cromatografa de columna ya
que por capa delgada
obtenemos
informacin
acerca
del
tipo
de
componentes de la mezcla,
pero
mediante
columna
obtenemos
informacin
cuantitativa
de
cada
componente, en conclusin
la capa delgada solo sirve
para monitorizar lo que se va
separando de la columna.

Bibliografa
1. Qumica orgnica
experimental, H. Dupont
Durst, George W, Editorial
Revert, S.A. pp 79-80

Conclusiones

Segn
los
resultados
obtenidos usando las tcnica

2.

Galagovsky L., Qumica

Orgnica:
Fundamentos

terico prcticos para el

laboratorio. 5. Buenos Aires:
editorial EUDEBA; 1996. 203206pp.
3. JARAMILLO
L.M.
Fundamentos
de
la
separacin y purificacin de
compuestos orgnicos por
mtodos de distribucin entre
fases, Cali. Departamento de

Qumica, Universidad
valle; 1987. 84-86pp.

del

4. [Pgina Web] http://www.pceiberica.es/instrumentos-demedida/instrumentoslaboratorios/cromatografia.ht

m [Consultada el 12 de
diciembre de 2015, 04:30pm].