UNIVERSIDAD TECNICA DE

MANABI
FACULTAD DE CIENCIAS DE LA
SALUD - ESCUELA LAB.
CLINICO
Autores:

ZAMORA ARON
ZAMBRANO
JONATHAN
ALVIA HENRY
GUADALUPE
CALDERON
MURILLO OSCAR
BARREIRO HILLARY

CATEDRATICA:

Dra. MAYRA
PARRAGA

 SECUENCIACIN DE ADN
EXPRESIN DE GENES CLONADOS
DETECCION DE ACIDOS NUCLEICOS Y
PROTENAS
Amplificacin de ADN con la reaccin
en cadena de la polimerasa.

PALABRAS CALVES

ADN
ADN pPlimerasa
Clonacin
Gen
PCR

GLOSARIO

Secuenciacin: accin de secuenciar

PCR: reaccin en cadena de la polimerasa. Tcnica
que amplifica segmentos especficos de ADN en un
laboratorio.
ADNc: (ADN complementario). es una hebra
deADNde doble cadena una de las cuales
constituye
una
secuencia
totalmente
complementaria del ARN mensajero a partir del cual
se ha sintetizado.

SECUENCIACION DE
ADN
La clonacin molecular
de
un
fragmento
individual
de
ADN
permite es aislamiento
de
las
grandes
cantidades de material
gentico necesarias para
su estudio detallado.

EXPRESIN DE GENES
CLONADOS

ADEMS DE PERMITIR
LA DETERMINACION
DE LA SECUENCIA DE
NUCLETIDOS DE LOS
GENES, Y POR TANTO
DE LA SECUENCIA DE
AMINOCIDOS DE LAS
PROTENAS
CODIFICADAS, LA
CLONACIN
MOLECULAR HA
PROPORCIONADO
NUEVAS
POSIBILIDADES EN LA
OBTENCIN DE
GRANDES
CANTIDADES DE
PROTENAS PARA SU
CARACTERIZACIN
ESTRUCTURAL Y
FUNDIONAL.

MUCHAS
PROTENAS DE
INTERS ESTN
PRESENTES A
MUY BAJA
CONCENTRACIN
EN CLULAS
EUCARIOTICAS Y
POR TANTO NO
PUEDEN
PURIFICARSE EN
CANRIDADES
SIGNIFICATUICAS
POR TCNICAS
BIOQUMICAS
CONVENCIONALE
S.

DETECCIN
DE CIDOS
NUCLEICOS Y
PROTENAS

El advenimiento de la clonacin molecular ha

permitido el aislamiento y caracterizacin de genes
individuales procedentes de clulas eucariotas. La
compresin del papel de los genes en el interior
celular, sin embargo, requiere del anlisis de la
organizacin intracelular y de la expresin de los
genes individuales y de las protenas que codifican.
En esta seccin, los procedimientos bsicos
empleados para la deteccin de cidos nucleicos y
protenas especficos son analizados. Estas tcnicas
son importantes para un amplia variedad de
estudios, incluyendo el mapeo de genes a
cromosomas, el anlisis de la expresin gnica, la
localizacin de protenas en rganos subcelulares.

AMPLIFICACIN DE ADN CON

LA REACCIN EN CADENA DE
POLIMERASA (PCR)
La clonacin molecular permite producir y aislar
grandes cantidades de ADN. Ya que gracias al
PCR que es una tcnica de biologa molecular se
puede conseguir una gran amplificacin de
fragmentos del ADN, multiplicarlo varias veces y
obtener un resultado.

PROCESO DE AMPLIFICACIN DEL ADN POR PCR

El material de partida puede ser un fragmento de ADN clonado o una
mezcla de molculas de ADN.
A partir de esta mezcla es posible simplificar una regin especfica de
ADN, siempre que se conozca la secuencia de nucletidos de dicha
regin, para poder disear los cebadores que comiencen la sntesis de
ADN.
La reaccion empieza calentando el ADN diana a altas temperaturas lo
cual separa las hebras. Se desciende la temperatura para que los
cebadores se emparejen con la secuencia complementaria de ADN.
La ADN polimerasa utiliza los cebadores para sintetizar. Una nueva
hebra complementaria.

Si
Si se
se conoce
conoce suficientemente
suficientemente
una
una secuencia
secuencia de
de un
un gen
gen de
de
modo
que
puedan
modo
que
puedan
especificarse
especificarse cebadores,
cebadores, la
la
amplificacin
por
PCR
amplificacin
por
PCR
proporciona
proporciona un
un mtodo
mtodo muy
muy
poderoso
poderoso de
de deteccin
deteccin de
de
pequeas
cantidades
de
pequeas
cantidades
de
molculas
molculas especificas
especificas de
de ADN
ADN
o
o de
de ARN
ARN en
en una
una mezcla
mezcla
compleja
compleja de
de otras
otras molculas.
molculas.

Esta
sensibilidad
tan
extraordinaria ha hecho de la PCR
una tcnica importante para una
diversidad
de
aplicaciones
incluyendo el anlisis de la
expresin gnica en clulas y
tejidos