Professional Documents
Culture Documents
DETERMINARII
GRUPELOR
SANGUINE
DIN
SISTEMUL
OAB
AGLUTINOGENULUI
0(D
Fig.
109. Determinarea
Seruri
test OAB
Am
em
ABcm
test (metoda Beth-Vincent).
test B (III) Tn partea stinga a lamei (Tn dreapta celui care face determinarea).
Practic, am pus pe lama Tn partea dreapta aglutinine a si p, Tn mijloc aglut i n i n a p si Tn stTnga aglutinina a.
Cu a j u t o r u l unei pipete Pasteur sau al unei baghete de sticla, se pune
cite o picatura din sTngele pe care Tl cercetam (recoltat din vena si pastrat
Tntr-o eprubeta), ITnga fiecare picatura de ser-test, avTnd g r i j a ca picatura
de sTnge so fie de 10 on mai mica (aproximativ),
deck picatura de ser-test. A p o i ,
cu col^ul unei lame curate se omogenizeaza serurile-test cu picaturile respective de sTnge, schimbmd Tnsa de fiecare data coltul lamei omogenizatoare.
Prin aceasta p r o p o r t i e Tntre ser si hematii 1/10 se o b t i n e un amestec corect
de ser si hematii. ( O cantitate prea mare de e r i t r o c i t e inhiba reac^ia
de aglutinare, iar o cantitate prea mica face ca reactia sa nu poata fi observata
< u ochiul liber.)
In cazul cind, p e n t r u d e t e r m i n a r e , se foloseste sTnge p r o v e n i t din pulpa
degetului, se procedeaza asemanator, cu singura deosebire ca picatura de
'.Tnge nu se mai depune pe lama cu seruri-test, ci p r i n t r - o simpla stergere
a pulpei degetului cu cTte un colt al lamei omogenizatoare se colecteaza pe
n n d o cantitate suficienta de sTnge, p e n t r u fiecare picatura de ser-test.
Daca Tn loc de lama omogenizatoare se foloseste o bagheta de sticla, se
procedeaza ca si cu lama, atTt atunci cTnd sTngele de cercetat se afla Tn e p r u beta, cTt si cTn'd el este recoltat d i r e c t din pulpa d e g e t u l u i . De fiecare data
Insa bagheta se clateste intr-un vas cu apa si se sterge cu vata sau tifon. U t i lizarea baghetei este, dupa un oarecare e x e r c i t i u , m u l t mai expeditiva. In
cele ce v o m discuta ne v o m referi numai la pozitia dreapta sau stinga a lamei
ile sticla, nu a celui care executa.
METODA
J
Hematii
test
JX
Hematii
test
Picaturi
deser
de cercetat R E.Z
SIMONIN
8
METODA
DE
DETERMINARE
A AGLUTININELOR
(Simonin)
0(1)
11)]. 110.
U L
TAJ
A IF)
Determinarea
grupelor
sanguine
o o
A 3 (IF)
B(M)
cu ajutorul
hematiilor
test
(metoda
Simonin).
IACTORUL
Rh
Factorul Rhesus (Rh) este un aglutinogen legat de e r i t r o c i t , care se deta;,caza Tn cadrul mozaicului aglutinogenic al hematiei ca o e n t i t a t e serologica
bine definita.
233
Factorul Rh este facut astazi raspunzator de o serie de manifestari m o r bide la nou-nascuti, manifestari care, pma la descoperirea sa, erau puse pe
seama b o l i l o r cronice de care suferisera sau se presupune ca suferisera p a r i n t i i .
Posesorii de factori Rh se numesc Rh-pozitivi iar cei care nu poseda fact o r u l Rh se numesc Rh-negativi. Factorul Rh exista la europeni Tn p r o p o r t i e
de 8 5 % .
METODA
BETH-VINCENT
0(1)
A(M)
ooo
mo
of/3
13
METODA
SIMONIN
A< este fapte arata i m p o r t a n t a practica pe care o are determinarea factoRh la mama si la cei ce urmeaza sa primeasca transfuzii.
Aglutininele sistemului Rh fiind anticorpi care apar numai p r i n i z o i m u n i irea i n d i v i z i l o r Rh-negativi poarta numele de anticorpi a n t i - R h .
Serul-test anti-Rh. Factorul Rh se d e t e r m i n a cu a j u t o r u l serului-test a n t i - R h .
'.crul-test anti-Rh ( D ) se prepara din sTngele f e m e i l o r R h ( D ) , serul cu
r l mai larg spectru anti-Rh negativ, izoimunizate la factorul Rh, care au
INIIII
A
B
MAMK
TATA
PLACENTA
oc
B(m)
AB(W
Fig. 111. Tabhu general al rezultatului
determinarilor
de
grup prin metodele Beth-Vicent si Simonin. (Se recomanda ca un
astfel de tablou, marit si colorat, sa existe Tn fiecare punct de
transfuzie sau laborator unde se determina grupele sanguine.)
Alfa (a) Beta (S); ser hemotest 0 (I); Beta (B); ser hemotest A (II): alfa (oc);
ser hemotest B (III). A : eritrocite test A (II); B: eritrocite-test B (III).
COPIL
Fig.
112.
Fenomenul
de izoimunizare
prin
sarcina.
DETERMINARII
FACTORULUI
Rh
(D)
PE
LAMA
D e t e r m i n a r e a factorului Rh se face Tn camera umeda, p e n t r u a se Tmpiedica uscarea picaturii, fapt care ar f n n a producerea aglutinarii sau ar genera
i n t e r p r e t a r i false.
Citirea rezultatelor.
Se scoate din t e r m o s t a t cutia Petri care c o n f i n e lama
de d e t e r m i n a t (sau placa cu godeuri) si se Tnclina usor, cu o miscare circulars
si de balansare. Daca globulele de cercetat sTnt Rh-pozitiv, apar g r u n j i de
aglutinare TncepTnd de la marginea picaturii (crenelarea marginii). Daca g l o b u lele sTnt Rh-negativ, picatura ramasa nu contine g r u n j i (aglutinate) si este
mobila.
C i t i r e a se realizeaza numai comparativ cu reactia m a r t o r cu globule rosii
Rh-pozitiv si Rh-negativ. Dupa ce ochiul a fost suficient exersat, picaturile
m a r t o r pot sa nu mai fie necesare decTt Tn caz de d u b i u , deci se poate u t i liza o singura picatura de ser anti-Rh, care se amesteca pe lama cu hematiiletest pe care le cercetam.
Deseori, determinarea factorului R h (D) p r i n metoda obisnuita nu este
posibila, TntrucTt acest factor este a c o p e r i t " . Pentru a fi d e s c o p e r i t " si a ft
pus Tn evidenta este nevoie sa utilizam f e r m e n t i p r o t e o l i t i c i . Cei mai recomandabil f e r m e n t este papaina. Tehnica este cea descrisa mai sus, dar pe
lama pe care am pus serul anti-Rh si sTngele caruia Ti cercetam factorul Rh,
adaugam o picatura de s o l u t e de papaina 1 % .
0
Fig.
113.
Determinarea
factorului
Rh pe
lama:
1. lama de sticla pe care se face determinarea; 2. cutie Petri tn care se realizeaza ,,camera umeda".
Este necesara camera umeda pentru ca lama se pune la termostat, unde trebuie sa stea 30 de minute.
Daca n-ar fi tn mediu (camera) umed, sTngele si aerul s-ar usca si nu am mai putea avea un rezultat
corect; 3. htrtie de filtru (umezita cu apa); 4. suportul lamei (bagheta de.sticla Tndoita); M: martor
pozitiv; m : martor negativ pentru controlarea calitatii serului anti-Rh. in cazul tn care determinarea se face Tn serie pe mai multe lame nu este nevoie dectt de un singur martor pozitiv si de
un martor negativ, prin care controlam, pentru determinarea respective, calitatea serului Rh.
x ser test anti-Rh, plus eritrocite de determinat, care arata ca eritrocitele stnt Rh negativ.
X aer test anti-Rh, plus eritrocite de determinat, care arata ca eritrocitele sTnt Rh pozitiv.
l
P R O B E L E DE C O M P ATI BI LIT A T E S E R O L O G I C A
D O N A T O R U L U I SI C E L A L P R I M I T O R U L U I
DINTRE
SlNGELE
(izoimunizare). In acest caz nu se face transfuzia, TncercTndu-se c o m p a t i b i l i tatea cu sTngele din alt flacon.
Daca picatura apare clarS, cu acelasi aspect ca si eel avut Tnainte ca lama
sa fie introdusa la t e r m o s t a t , sTngele este compatibil si se poate transfuza.
Aceasta proba se va executa o b l i g a t o r i u la orice transfuzie de sTnge (114).
b. Proba de compatibilitate
in vivo, care se numeste si proba de compatibilitate biologica (proba Oehlecker), constituie o verificare Tn plus a felului Tn
On
Compatibilitate
a
'A
Incompatibilitete
2
Fig.
J
directa
majora
in v i t r o pe lama
(Jeanbrau).
1. cutie Ptri in care se realizeaza camera umeda. o. lama de sticla; b. hlrtie de filtru; c. suport
pentru lama (bagheta de sticla tndoita).
Rezultatul: 2. compatibilitate; 3. incompatibilitate.
238
,i'.,i cum am spus prin efectuarea corectS si atenta a p r o b e l o r de compatibil i t a t e in vitro si in vivo.
Rezultatele o b t i n u t e la determinSrile de g r u p dau posibilitatea sS se
(imoascS cui se va administra sTngele. D i n tabelul cuprins Tn figura 115 se
I onstata ca sTngele 0 (I) poate fi transfuzat si la persoane d i n celelalte grupe,
pentru cS nu are pe hematii nici un antigen, asa TncTt hematiile introduse
nu sTnt aglutinate (distruse) de aglutininele care (eventual) ar exista Tn sTngele
Fig.
115.
Compatibilitate
intre
grupe.
Donator
Prim/tor
EXECUTAREA
UNEI T R A N S F U Z I I
DE
Materialele
necesare pentru transfuzia indirecta. In transfuzia de acest fel
se folosesc flacoane de sTnge conservat si t r u s e de transfuzie (perfuzie).
La nivelul u n i t a t i l o r terapeutice (punctele de transfuzie) este necesar sa
existe totdeauna un numar de t r u s e gata sterilizate, p e n t r u a putea fi u t i l i zate. AstSzi se folosesc truse de perfuzie din material plastic, care se prepara Tn fabrici speciale, se livreaza sterile, si care se utilizeaza o singura data.
Avantajul acestor t r u s e constS nu numai Tn faptul ca personalul spitalului este
scutit de o munca anevoioasa si care ia foarte m u l t t i m p , dar mai ales Tn faptul ca acest gen de truse ofera o buna securitate actului de transfuzie. T r u sele care se confectioneaza, se asambleaza si se sterilizeaza Tn spital, pot sa
nu fie totdeauna corect realizate, sa nu se curete perfect Tn i n t e r i o r u l t u b u l a t u r i i , ceea ce poate d e t e r m i n a incidente sau chiar grave accidente posttransfuzionale.
Trusele de transfuzie din material plastic sTnt de doua f e l u r i :
t r u s e p e n t r u administrarea de sTnge conservat si plasma (fig. 116) si
truse p e n t r u administrarea de solutii e l e c t r o l i t i c e : ser fiziologic, ser
glucozat, d e x t r a n etc. (fig. 117).
Aceste t r u s e se livreaza sterile, de catre fabrica producStoare, Tn pungi
din material plastic. Executarea transfuziilor (perfuziilor) cu a j u t o r u l l o r este
foarte simplS. Tehnica de folosire va fi descrisS mai jos. Pentru ca este posibil ca Tn unele spitale, u n e o r i , sa nu existe t r u s e din plastic, este necesar
sa se cunoasca si tehnica de pregatire si utilizare a t r u s e l o r confectionate
Tn spital.
Se considers ca suficientS o trusa la 20 de paturi de spital. T r e b u i e
subliniat cS farS Tntregul s o r t i m e n t de piese al acestor t r u s e nu pot fi
executate corect transfuziile cu flaconul RCT (flaconul p e n t r u recoltare,
conservare, transfuzie existent astazi Tn uz Tn t o a t e spitalele).
Trusa de transfuzie (perfuzie) confectionatS Tn spital, necesarS p e n t r u
sistemul de recoltare, conservare, transfuzie (RCT) este alcatuitS d i n : dispozitivul de perfuzie, dispozitivul de i n t r a r e a serului Tn flacon si trusa anexa.
Ea contine urmatoarele categorii de piese (fig. 118 A ) .
a) piese de cauciuc; b) piese de sticla; c) piese de m e t a l ; d) inventar moale.
Piesele de cauciuc sTnt urmStoarele:
1 un t u b de cauciuc, lung de 800 m m , cu d i a m e t r u l de 6/9;
2 un t u b de cauciuc lung de 250 m m , cu diametrul de 6/9;
3 _
t u b de cauciuc, lung de 200 m m , cu diametrul de 6/9;
4 un t u b de cauciuc, lung de 50 cm, cu diametrul de 6/9.
Piesa nr. 1 reprezintS o parte din dispozitivul de perfuzie; piesa nr. 2 repre-inta o parte din dispozitivul de i n t r a r e a serului Tn flacon; piesa nr. 3 r e p r e / i n t a legStura d i n t r e t r o c a r - f i l t r u si p i c u r a t o r ; piesa nr. 4 reprezintS legStura d i n t r e t u b u l de c o n t r o l si amboul acului de perfuzie.
Piesele de sticla sTnt u r m a t o a r e l e :
1. un t u b de sticlS de 50/7 m m , cu oliva la un capat;
u
241