DETERMINACIÓN DE TRANSAMINASAS

1. INTRODUCCIÓN

Las transaminasas o amino transferasas son enzimas que catalizan la transferencia de un grupo amino
de un aminoácido a un cetoácido (reacción de transaminación), requieren de un grupo prostético: el
fosfato de piridoxal para su acción catalítica. Niveles bajos se detectan en pacientes dializados o con
deficiencia de vitamina B6.

Existen transaminasas de interés clínico ya que los valores de sus concentraciones en suero son
empleados como indicadores de enfermedades cardíacas o hepáticas.

Las transaminasas se encuentran presentes en todos los tejidos pero en altas concentraciones en hígado,
músculo esquelético, riñón, glóbulos rojos y corazón. Su aumento se asocia con enfermedades que
afectan dichos tejidos, tales como: hepatitis, cirrosis, infarto del miocardio, etc.

GOT

GPT

L - aminoácido 1 Cetoácido 1 L - aminoácido del Cetoácido del

cetoácido 1 aminoácido 1

Fosfato de piridoxal: es una coenzima derivada de la Vitamina B6 (piridoxina) cuya función es la

transferencia de grupos amino en la reacción de transaminación. Por ejemplo el alfa – cetoglutarato
recibe el grupo amino del fosfato de piridoxal para formar glutamato.

2. FUNDAMENTO

La determinación de la transaminasa glutámico oxalacética o aspartato aminotransferasa (GOT) se basa

en la siguiente reacción:

GOT

L – aspartato + alfa – cetoglutarato Glutamato + Oxalacetato

Fosfato de
piridoxal

+ NH2

La determinación de la transaminasa glutámico pirúvica o alanina aminotransferasa (GPT) se basa en la

siguiente reacción:

GPT
L – alanina + alfa – cetoglutarato Glutamato + Piruvato
Fosfato de
piridoxal

+ NH2

Reacción química de coloración

medio alcalino
Oxalacetato o Piruvato + 2,4 – dinitrofenilhidrazina Hidrazona
(cromógeno)

3. PROCEDIMIENTO

Tubo Blanco Tubo GOT Tubo GPT

Sustrato para 500 µl 500 µl ---
GOT/corazón
Sustrato para --- --- 500 µl
GPT/hígado

Incubar por 3 minutos a 37ºC.

Agua destilada 100 µl --- ---
Muestra (suero) --- 200 µl 100 µl

Incubar por 30 minutos a 37ºC

Rvo. de color 500 µl 500 µl 500 µl

Incubar por 20 minutos a temperatura ambiente

NaOH 0,4N 5 ml 5 ml 5 ml

Leer las absorbancias en el espectrofotómetro a λ= 505 nm.

4. RESULTADOS

ABS GOT = 0.052

ABS GPT = 0.044
ABS BLANCO = 0.000

Determinar la actividad de las transaminasa por interpolación de las absorbancias obtenidas en la curva
de calibración.

5. VALORES DE REFERENCIA

GOT = 5 U/I – 40 U/I

GPT = 5 U/I – 45 U/I

6. IMPORTANCIA CLÍNICA

Los niveles aumentados de GPT pueden indicar:

- Alcoholismo
- Anemia hemolítica
- Cáncer de hígado
- Cirrosis
- Distrofia muscular
- Enfermedades renales agudas
- Enfermedades musculares primarias.
- Enfermedad de Wilson
- Hepatitis viral
- Infecciones víricas (mononucleosis, ...)
- Intervenciones de cirugía cardiaca
- Isquemia hepática
- Medicamentos tóxicos del hígado
- Necrosis hepática
- Pancreatitis aguda
- Traumatismos musculares

Los niveles aumentados de GOT pueden indicar:

- Alcoholismo
- Anemia hemolítica
- Colestasis (obstrucción de vía biliar)
- Cirrosis
- Enfermedades muculares
- Hepatitis
- Infecciones víricas (mononucleosis, ...)
- Infarto de miocardio
- Intervenciones de cirugía cardiaca
- Isquemia hepática
- Medicamentos tóxicos del hígado
- Pancreatitis aguda
- Tumor hepático