Copyright © Grupo Ars XXI de Comunicación, S.L. Periodontology 2000 (Ed Esp), Vol.
l. 20, 2008, 70-79 Copyright © Blackwell Munksgaard
PERIODONTOLOGY 2000 (Ed Esp)
ISSN 1695-1808
Citocinas y factores inflamatorios
que regulan la producción
de inmunoglobulinas en la periodontitis
agresiva
HARVEY A. SHENKEIN, SUZANNE E. BARBOUR Y JOHN G. TEW
Entre los aspectos destacables de los procesos biológicos
que se producen en la periodontitis agresiva se incluye la pro-
ducción de concentraciones muy elevadas de anticuerpos sé-
ricos reactivos frente a un número limitado de agentes pató-
genos periodontales, así como el aumento en la concentración
de inmunoglobulina (IgG) presente en el suero de dichos pa-
cientes. Varios investigadores han encontrado valores eleva-
dos de anticuerpos específicos frente a Actinobacillus acti-
nomycetemcomitans y Porphyromonas gingivalis, así como
una concentración alta de IgG, especialmente IgG2, en suero.
La importancia de IgG2 en la respuesta de anticuerpos frente
a los agentes periodontopatógenos, así como las característi-
cas exclusivas de los procesos inmunitarios en los que inter-
viene esta inmunoglobulina, en comparación con el al resto
de inmunoglobulinas humanas, han centrado el interés de
nuestro grupo de investigación durante muchos años. El in-
tento de esta revisión es, por lo tanto, resumir los datos de
nuestros laboratorios acerca del papel de las citocinas y los
mediadores inflamatorios en la regulación de IgG2, y descri-
bir el modo en el que los procesos biológicos característicos
de la periodontitis agresiva pueden contribuir a dicha res-
puesta. Es conveniente revisar, en primer lugar, los datos so-
bre la naturaleza de las respuestas de anticuerpos y los fac-
tores que modifican estas respuestas en los pacientes con
periodontitis agresiva, y luego resumir los estudios que exa-
minan los mecanismos exclusivos por los que dichos pacientes
pueden producir altas concentraciones de IgG2.
IgG2 en la enfermedad humana
Existen cuatro subclases de IgG, que se diferencian por su
distribución en el suero, sus propiedades biológicas, y el tipo
de antígenos responsable de su inducción. IgG2 es el segundo
subtipo más abundante de IgG en el suero humano. Desde
un punto de vista funcional, los complejos inmunitarios que
contienen IgG2 son relativamente ineficaces para activar la
vía clásica del complemento, pero son los más eficaces para
activar la vía alternativa (57). Además, en su interacción con
los receptores Fc de los leucocitos, dichos complejos se unen
con mayor afinidad a variantes alotípicas del receptor FcγRIIa
70
PERIODONTOLOGY 2000
ISSN 0906-6713
(CD32) (65, 90). La importancia de la IgG2 en la enfermedad
está subrayada por los estudios que han puesto de manifiesto
el aumento en la susceptibilidad a enfermedades en algunos
pacientes con deficiencias en IgG2. Se ha descrito que los ni-
ños con deficiencia en dicha inmunoglobulina experimentan
neumonías o sinusitis recurrentes, así como infecciones in-
vasivas por Haemophilus influenzae tipo b o meningitis neu-
mocócica (72, 73). Además, se ha observado que los niños con
dichas deficiencias presentan menor concentración sérica de
anticuerpos frente al polisacárido capsular de H. influenzae
tipo b, tanto antes de la inmunización con dicho antígeno
como después de ésta (88). Se ha informado que en ciertos
grupos étnico, como los indios Eskimos, Navajos y Apache, la
vacuna frente a esta bacteria fracasa e, incluso, produce un
aumento de la susceptibilidad a las infecciones. En los Nava-
jos, el fracaso en la formación de anticuerpos efectivos frente
a H. influenzae tipo b es el resultado de una deficiencia en el
reordenamiento V-J en una variante polimórfica del gen A2Vk
(27). De este modo, las respuestas defectuosas de IgG2 como
resultado de una deficiencia en dicho anticuerpo, por altera-
ciones funcionales en la unión al antígeno, o un descenso en
la afinidad por el receptor Fc pueden conducir a un aumento
de la susceptibilidad a la infección bacteriana.
Estudios sobre la asociación entre
respuestas de anticuerpos específicos
y estado clínico de los pacientes
con periodontitis agresiva
Se ha publicado un gran número de estudios de las res-
puestas de anticuerpos frente a los agentes periodontopa-
tógenos, así como muchas revisiones excelentes. Para los
propósitos de esta revisión, nos centraremos en los estudios
que nos condujeron a examinar el control de la respuesta
de IgG2 y su producción en los pacientes con periodontitis
agresiva. Los estudios iniciales de Ranney et al. (67) acerca
de las relaciones entre la respuesta de anticuerpos frente a
A. actinomycetemcomitans y la situación clínica condujo a
la hipótesis de que la presencia de dicho anticuerpo en este
 Citocinas y factores inflamatorios que regulan la producción de inmunoglobulinas en la periodontitis agresiva
tipo de pacientes protege frente a la pérdida de inserción
periodontal. La evaluación de la presencia o la ausencia de
un anticuerpo precipitante que reaccionaba con cepas Y4 y
N27 de esta bacteria demostró que los pacientes con perio-
dontitis agresiva que presentaban anticuerpos precipitantes
mostraban un número y una proporción menores de dien-
tes con pérdida de inserción grave (≥ 5 mm) o moderada (≥
2 mm). Además, dichos anticuerpos se hallaban presentes
en mayor medida en los pacientes con la enfermedad loca-
lizada, en comparación con los pacientes con periodontitis
generalizada. En un estudio posterior, se evaluó la concen-
tración de anticuerpos séricos frente a 25 cepas cultivadas
de forma común a partir de la placa subgingival, medidas
con radioinmunoanálisis, en 99 pacientes con periodontitis
agresiva, y se examinó su asociación con la pérdida de in-
serción (33). Se observó que 11 de las cepas se asociaban de
forma positiva o negativa con los niveles de inserción. Tras
la corrección en función del índice de placa y la edad, se ha-
lló una fuerte correlación inversa entre la pérdida de inser-
ción y la concentración de anticuerpos frente a A. acti-
nomycetemcomitans y P. gingivalis, tanto en los pacientes
con periodontitis agresiva localizada como en aquellos con
la forma generalizada. Además, la combinación de anti-
cuerpos reactivos frente a ambas bacterias fue más favora-
ble con respecto a la pérdida de inserción en la periodonti-
tis agresiva. En un estudio posterior sobre el valor de la
concentración de anticuerpos en la predicción o la diferen-
ciación del diagnóstico periodontal, Gunsolley et al. (36) ob-
servaron que la respuesta de anticuerpos frente a cinco
cepas bacterianas (A. actinomycetemcomitans cepas Y4 y
N27, P. gingivalis, Fusobacterium nucleatum y Eubacterium
brachy) podía distinguir los pacientes con periodontitis agre-
siva localizada, periodontitis agresiva generalizada, perio-
dontitis crónica y salud periodontal. Sin embargo, el grupo
con periodontitis agresiva generalizada era tanto clínica
como inmunológicamente heterogéneo; un grupo de pa-
cientes con la pérdida de inserción mayor no presentaba an-
ticuerpos reactivos frente a los cinco microorganismos. Es-
tos resultados sugerían en gran medida que un anticuerpo
reactivo con los agentes periodontopatógenos, especial-
mente con A. actinomycetemcomitans y P. gingivalis, podía
proteger de una progresiva pérdida de inserción a los pa-
cientes con una periodontitis agresiva existente.
La aparente importancia de los anticuerpos reactivos con
A.actinomycetemcomitansy P.gingivalisen la protección frente
a la progresión de la periodontitis en pacientes con una en-
fermedad agresiva ya existente condujo a una exploración ex-
haustiva de los antígenos implicados en la inducción de la
respuesta, así como de la naturaleza de los anticuerpos pro-
ducidos. Basándose en el aparente efecto protector de una
elevada concentración de anticuerpos, los estudios llevados
a cabo por Califano et al. (12-14) buscaban definir los antí-
genos de A. actinomycetemcomitans que inducían dichas res-
puestas. Los primeros estudios definieron este antígeno en la
cepa Y4 de dicha bacteria como el carbohidrato específico del
serotipo. Estudios posteriores desvelaron que un antígeno glu-
cídico era el inmunodominante en los serotipos b y c de esta
especie. Posteriormente, se encontró que dichos antígenos
glucídicos formaban parte del antígeno O del lipopolisacá-
rido (LPS) de A. actinomycetemcomitans.
La naturaleza de la respuesta a anticuerpos frente a estos
antígenos fue explorada por Lu et al. (55), que determinaron
las respuestas por isotipo y subclase en la periodontitis agre-
siva frente al antígeno glucídico inmunodominante de la cepa
Y4 (serotipo b). Utilizando un análisis de western blot con di-
lución limitante, determinaron que la respuesta dominante
frente al serotipo b de A. actinomycetemcomitans era de tipo
IgG frente al carbohidrato inmunodominante identificado por
Califano et al. (12-14). Además, se ha demostrado que en la
respuesta de tipo IgG predominaba el subtipo IgG2, con con-
centraciones de este anticuerpo de 65,7 µg/ml, que supera-
ban en gran medida la concentración media de IgG1 de 8,8
µg/ml. Estudios posteriores de Califano et al. (15) examina-
ron la respuesta de anticuerpos frente a antígenos glucídicos
específicos del serotipo de P. gingivalis. Demostraron que los
pacientes con periodontitis agresiva generalizada, así como
con la forma crónica, producían una respuesta elevada de an-
ticuerpos séricos de tipo IgG2 frente a uno o más de los an-
tígenos K1 a K6, específicos de serotipo.
También se han estudiado las relaciones entre la respuesta
de anticuerpos (específicamente, la respuesta IgG2) frente a
factores de virulencia antigénicos específicos, así como los
parámetros clínicos. Puesto que se había encontrado pre-
viamente que los anticuerpos frente a A. actinomycetemco-
mitans se asociaban con una menor pérdida de inserción en
la periodontitis agresiva, y dado que la respuesta dominante
de anticuerpos frente a esta bacteria se dirigía frente a la frac-
ción glucídica específica de serotipo del antígeno O, Califano
et al. (10) exploraron el impacto de los anticuerpos reactivos
con el LPS de esta especie sobre la pérdida de inserción en
pacientes con periodontitis agresiva generalizada. En primer
lugar, demostraron que los pacientes con la mayor concen-
tración de anticuerpos séricos reactivos frente a una prepa-
ración antigénica con células completas de A. actinomyce-
temcomitans tenían menos pérdida de inserción que aquellos
con concentraciones intermedias o bajas. Además, observa-
ron que el subtipo de pacientes con esta enfermedad que
presentaba la concentración más elevada de anticuerpo frente
al LPS del serotipo b también tenía menos pérdida de inser-
ción que aquellos con concentraciones intermedias o bajas,
y que este agrupamiento de los pacientes era similar al defi-
nido por la respuesta frente a las preparaciones celulares
completas. Además, la avidez del anticuerpo frente al LPS fue
mayor en los pacientes con la concentración más elevada del
anticuerpo. Puesto que la mayor parte de los anticuerpos per-
tenecen a la subclase IgG2, estos datos respaldan un papel
protector de IgG2 en la periodontitis agresiva generalizada.
Resulta interesante señalar que se llevaron a cabo estudios
adicionales para explorar el papel de la respuesta de anti-
cuerpos frente a dos factores de virulencia más de A. acti-
nomycetemcomitans, la leucotoxina y la hemaglutinina (9,
11). En la respuesta frente a la leucotoxina predominó IgG1,
mientras que frente a la hemaglutinina el predominio fue
principalmente de IgG1 e IgG3. En ambos casos, estas res-
puestas sólo se asociaron débilmente o nada con las con-
centraciones de inserción.
En resumen, estos estudios sugieren un papel importante
de los anticuerpos reactivos frente a antígenos glucídicos en
la respuesta a los agentes periodontopatógenos A. actinomy-
cetemcomitans y P. gingivalis durante la periodontitis agresiva.
Además, también sugieren que la respuesta de tipo IgG2, tí-
pica frente a los antígenos glucídicos, puede ser importante
en la respuesta inmunitaria protectora de la periodontitis agre-
siva.
71
Schenkein et al.

Concentración sérica de IgG
en la periodontitis agresiva
En función de los resultados obtenidos en cuatro pacien-
tes con elevación de IgG frente a la cepa Y4 de A. actinomy-
cetemcomitans, Wilson y Hamilton (91) fueron los primeros
en sugerir que los pacientes con periodontitis agresiva loca-
lizada y anticuerpos elevados también muestran alta con-
centración de IgG2 en suero. Además, Ling et al. (54) encon-
traron que IgG2 predominaba en la respuesta de anticuerpos
frente a todos los antígenos de A. actinomycetemcomitans. El
predominio de la respuesta de anticuerpos IgG2 en la perio-
dontitis agresiva localizada y la sugerencia de que los pacientes
con esta enfermedad podrían presentar fundamentalmente
una respuesta excesiva de anticuerpos frente a carbohidratos
llevaron a Lu et al. (56) a medir la concentración sérica de las
subclases de IgG en 719 pacientes con diversos diagnósticos
periodontales. Se obtuvieron dos resultados interesantes en
este estudio. En primer lugar, se advirtió que dentro de cada
grupo de diagnóstico periodontal (salud, periodontitis cró-
nica, periodontitis agresiva localizada, periodontitis agresiva
generalizada), existía una influencia racial sobre las concen-
traciones de inmunoglobulinas, de modo que los individuos
de raza negra mostraban concentraciones de IgG2 significa-
tivamente superiores a las de los individuos de raza blanca.
Además, cuando los grupos de diagnóstico periodontal se
ajustaron según la raza (negra o blanca), los pacientes con
periodontitis agresiva localizada presentaron una concentra-
ción sérica claramente superior de IgG2. Los sueros de pa-
cientes negros con esta enfermedad tenían concentraciones
de IgG2 casi 1.400 µg/ml superiores a las de los individuos
negros sanos desde un punto de vista periodontal. Esta rela-
ción se mantuvo sólo para la subclase IgG2. Resulta intere-
sante señalar que se ha informado una relación similar en
una población taiwanesa con periodontitis agresiva (17). Tiene
especial importancia el hecho de que la concentración de an-
ticuerpos IgG2 específicos frente a A. actinomycetemcomitans
(aproximadamente 50-100 µg/ml) en pacientes con perio-
dontitis agresiva localizada no es suficiente para justificar esta
diferencia, lo que sugiere que existe una diferencia más fun-
damental en la producción de inmunoglobulinas en la pe-
riodontitis agresiva.
Factores que modifican la respuesta
y la concentración sérica de anticuerpos
IgG2: raza, genes y tabaquismo
Es crucial resumir los resultados de estudios sobre el im-
pacto de la raza, la predisposición genética y el tabaquismo
sobre la producción de anticuerpos e inmunoglobulinas en
los pacientes con periodontitis, ya que dichos factores influ-
yen tanto en el diseño de los estudios sobre periodontitis agre-
siva como en la interpretación de sus resultados. En un estu-
dio con miembros de familias extensas que presentaban
periodontitis agresiva, Gunsolley et al. (35) observaron que
las concentraciones de anticuerpos específicos reactivos frente
al serotipo b de A. actinomycetemcomitans no sólo seguían
un patrón familiar (es decir, o todos los miembros de la fa-
milia mostraban tendencia a tener anticuerpos elevados frente
a dicha bacteria o ninguno de ellos tenía esa tendencia), sino
que también la raza determinaba si los miembros de la fa-
milia producían o no anticuerpos frente a este antígeno.
Resulta interesante señalar que tanto la prevalencia de anti-
cuerpos reactivos frente a la cepa Y4 de A. actinomycetemco-
mitans como la concentración media de anticuerpos entre in-
dividuos de una misma categoría diagnóstica se vieron
influidas de forma significativa por la raza. Los pacientes blan-
cos producían concentraciones muy bajas de anticuerpos, con
baja prevalencia de respuestas, mientras que los individuos
negros producían una respuesta potente. Dentro de las fami-
lias con periodontitis agresiva, incluso los individuos de raza
negra sin periodontitis producían con mayor frecuencia con-
centraciones superiores de anticuerpos frente a dicha bacte-
ria. Un estudio posterior con gran cantidad de respuestas de
anticuerpos frente a diversas bacterias demostró que esta re-
actividad de anticuerpos en función de la raza en la perio-
dontitis agresiva generalizada y en individuos sanos de estas
familias era exclusiva para los serotipos b y c de A. actinomy-
cetemcomitans, y sólo una pequeña parte de las otras bacte-
rias (dos cepas de Treponema socranski frente a las cuales la
respuesta global de anticuerpos fue bastante baja) (34). Tal
como se señaló anteriormente, el estudio publicado por Lu et
al. (56) indicaba que las concentraciones séricas de IgG1, IgG2
e IgG3 también eran en su totalidad significativamente más
altas en los individuos de raza negra que en los de raza blanca.
Estos resultados sugieren un impacto importante de la raza
sobre la respuesta de anticuerpos IgG2 y la producción de in-
munoglobulinas, y obligan a incorporar en el diseño de estu-
dios la agrupación de los individuos según la raza, al analizar
los factores biológicos que influyen en estas respuestas.
Estos resultados nos llevaron a explorar el potencial here-
ditario de las concentraciones séricas de IgG2 en familias con
periodontitis agresiva. Tanto los estudios que empleaban aná-
lisis genéticos de segregación (59) como los que efectuaban
análisis de los componentes la varianza (24) indicaban que
existía una influencia sustancial de la herencia en las con-
centraciones séricas de IgG2 en estas familias. Estos resulta-
dos sugirieron la hipótesis de que los pacientes con perio-
dontitis agresiva podrían tener predilección genéticamente
determinada por una respuesta elevada o reducida de anti-
cuerpos IgG2 antibacterianos, independientemente de su
riesgo de padecer la enfermedad. Además, estos estudios su-
gieren que es probable que los factores biológicos que rigen,
en particular, la respuesta de IgG2 se encuentren bajo una in-
fluencia genética considerable que podría ser exclusiva de los
pacientes con periodontitis agresiva localizada (que produ-
cen grandes cantidades de IgG2 en suero).
El tabaquismo constituye otro factor que influye en el es-
tado clínico periodontal, así como en la concentración de in-
munoglobulinas y anticuerpos. Estos efectos del tabaquismo
son complejos, puesto que pueden ser específicos de la raza
y del diagnóstico periodontal. Por ejemplo, hemos observado
que, al igual que en la periodontitis crónica, los pacientes con
periodontitis agresiva generalizada que fuman muestran una
pérdida de inserción de mayor extensión y gravedad, aunque
esto no es así en la forma agresiva localizada (71). Se llevaron
a cabo nuevos estudios para explorar los efectos del taba-
quismo sobre las concentraciones de cada subclase de in-
munoglobulina (66). En concordancia con dichos efectos so-
bre los parámetros clínicos de la periodontitis agresiva, se
observó que la concentración sérica de IgG2 era significati-
vamente inferior en los subgrupos de pacientes fumadores,

72
 Citocinas y factores inflamatorios que regulan la producción de inmunoglobulinas en la periodontitis agresiva
tanto de raza negra como de raza blanca, lo cual no sucedía
con las otras subclases de IgG, ni en pacientes con perio-
dontitis agresiva localizada. Además, en grupos de pacientes
fumadores y no fumadores con periodontitis agresiva gene-
ralizada ajustados según la raza, se observó que las concen-
traciones de anticuerpos frente al serotipo b de A. actinomy-
cetemcomitans eran significativamente menores en los
fumadores (84). Estos estudios ponen de manifiesto la fuerte
asociación existente entre el tabaquismo, la concentración de
anticuerpos (e inmunoglobulinas) y el estado clínico perio-
dontal, que es más evidente cuando se tiene en cuenta la raza
en el diseño del estudio.
Exploración in vitro de la producción
de inmunoglobulinas en la periodontitis
agresiva
Los estudios previamente citados sentaron las bases para
la exploración de la producción in vitro de inmunoglobulinas
por parte de los leucocitos procedentes de pacientes con pe-
riodontitis agresiva. La hipótesis subyacente era que debería
ser reproducible en un cultivo de tejidos la capacidad que tie-
nen los pacientes con periodontitis agresiva localizada de pro-
ducir in vivo cantidades elevadas de inmunoglobulinas, en
especial de IgG2. Además, la comprobación de este fenómeno
in vitro podría permitir investigar la producción elevada de
IgG2 a nivel celular y molecular. Puesto que interesaba ex-
plorar los efectos de tipos celulares aislados procedentes de
los pacientes con periodontitis agresiva localizada sobre la
respuesta de los leucocitos derivados de individuos perio-
dontalmente sanos, se empleó el mitógeno pokeweed (PWM),
o mitógeno de fitolaca, un activador policlonal de linfocitos
B que estimula la producción de inmunoglobulinas en culti-
vos de células con complejo mayor de histocompatibilidad
(MHC) incompatible.
En los experimentos iniciales, se compararon los efectos
del PWM sobre la producción in vitro de IgG2 por células de-
rivadas de pacientes de raza negra con periodontitis agresiva
localizada y de individuos de raza blanca periodontalmente
sanos. En todo el intervalo de dosis estimulatoria del PWM,
se demostró que los leucocitos de sangre periférica de los pa-
cientes con la enfermedad citada producían concentraciones
significativamente superiores de IgG2, en comparación con
los de los individuos sanos (92). Estudios posteriores en los
que también se incluyeron pacientes (de raza negra) con pe-
riodontitis agresiva localizada con un ajuste por raza pusie-
ron de manifiesto que la máxima dosis estimulatoria del PWM
inducía una producción de IgG2 que reproducía de forma sus-
tancial los valores relativos hallados en suero, es decir, las cé-
lulas de los individuos periodontalmente sanos de raza negra
producían concentraciones de IgG2 intermedias entre las pro-
ducidas por individuos sanos de raza blanca y las producidas
por pacientes de raza negra con dicha enfermedad. De este
modo, este sistema parecía ser apropiado para responder in-
terrogantes acerca del impacto de la periodontitis agresiva lo-
calizada y de la raza sobre la producción de IgG2.
Se ha llevado a cabo una serie de experimentos para defi-
nir el tipo celular entre los leucocitos de sangre periférica que
podría estar dirigiendo el aumento de la producción de IgG2
(92). Cuando se mezclaron linfocitos T y B procedentes de in-
dividuos de raza blanca con monocitos de otros individuos
blancos periodontalmente sanos, individuos negros sanos o
pacientes de raza negra con periodontitis agresiva localizada,
se advirtió que sólo se producían concentraciones elevadas
de IgG2 cuando los monocitos de los pacientes (de raza ne-
gra) se incluían en el cultivo. De este modo, los monocitos pa-
recían ser los responsables de dirigir la producción de altos
valores de IgG2 en los cultivos de leucocitos de los pacientes
con periodontitis agresiva localizada. Experimentos posterio-
res han demostrado que el origen de los linfocitos T y B no
influía en la producción de IgG2. Nuevos experimentos, en
los que los monocitos estaban separados físicamente de los
linfocitos por una membrana que no permitía el contacto en-
tre células en cultivos polarizados (sistema Transwell®) o en
los que el medio de cultivo derivado de los pacientes con pe-
riodontitis agresiva localizada era sustituido por los propios
monocitos, demostraron que ciertos factores solubles deri-
vados de los monocitos de los pacientes con este tipo de pe-
riodontitis eran responsables de la notable elevación de IgG2
desencadenada en el cultivo tisular. De hecho, la adición de
grandes cantidades de dichos monocitos a los cultivos de lin-
focitos de individuos periodontalmente sanos inducía una
producción creciente de IgG2.
De esta forma, estos experimentos pusieron de manifiesto
que los monocitos derivados de pacientes con periodontitis
agresiva localizada parecían producir factores solubles en cul-
tivo que estimulaban la producción de concentraciones ele-
vadas de IgG2. Este resultado estableció las bases para la de-
finición de las rutas moleculares por las que los pacientes con
periodontitis agresiva localizada producen elevadas concen-
traciones séricas de IgG2.
Regulación de IgG2 por citocinas
La subclase IgG2 de inmunoglobulina es única, por el he-
cho de que su producción es estimulada por citocinas de tipo
1 que se asocian con linfocitos T colaboradores de tipo Th1
(48, 83). Sin embargo, debe apreciarse que varios tipos celu-
lares, entre los que se incluyen los linfocitos T CD8, linfocitos
citolíticos naturales (natural killer cells, células NK), células
dendríticas y macrófagos, fabrican citocina de tipo 1 (49, 61).
Las observaciones de que la inmensa mayoría de los anti-
cuerpos que reaccionan de forma específica con A. acti-
nomycetemcomitans y P. gingivalis en pacientes con perio-
dontitis agresiva es de tipo IgG2 (15, 55, 91) y de que el suero
de estos pacientes contenía aproximadamente un 25 % más
de IgG2 que el de los controles (56) condujeron a experimentos
que determinaran qué células y/o qué citocinas favorecen esta
desviación en la producción de citocinas. Se ha demostrado
que la concentración de las diferentes subclases de IgG pro-
ducidas por los leucocitos humanos de sangre periférica es-
timulados con PWM se asemeja a las concentraciones séri-
cas, y esto fue confirmado en nuestro estudios (29, 92).
Utilizando este sistema con PWM, en el cual los linfocitos T
y B se estimulan de forma policlonal, no tuvimos que man-
tener la compatibilidad del MHC, y los linfocitos T (y/o mo-
nocitos) de un individuo proporcionaron ayuda o actividad
accesoria a los linfocitos B de otro individuo. El empleo de
este sistema con PWM nos permitió determinar que los mo-
nocitos de pacientes con periodontitis agresiva eran diferen-
tes y estimulaban la respuesta elevada de IgG2, mientras que
los linfocitos T y B se comportaban de forma normal (92).
73
Schenkein et al.
Además, los monocitos pudieron ser separados de los linfo-
citos T y B mediante un sistema Transwell®, y aquellos deri-
vados de pacientes con periodontitis agresiva podían au-
mentar la producción de IgG2, por lo que la capacidad de
atravesar una membrana Transwell® hizo pensar en las cito-
cinas (92). El uso de anticuerpos neutralizantes específicos de
citocinas indica que la actividad de las citocinas de tipo 1 in-
terleucina 6 (IL-6), IL-12 e IL-18 son importantes para la pro-
ducción de IgG2 (48, 50, 83). Por el contrario, los anticuerpos
reactivos con IL-10 e IL-4, las clásicas citocinas de tipo 2, no
tuvieron efecto inhibidor. IL-12 e IL-18 se relacionan de forma
estrecha con el estímulo de la producción de interferón γ (IFN-
γ), y éste se asocia con el cambio hacia la subclase IgG2 (1).
Tal como se esperaba, los anticuerpos frente a IFN-γ blo-
queaban la respuesta de IgG frente a A. actinomycetemcomi-
tans, lo que confirmó la importancia de esta citocina de tipo
1 (83). De este modo, puede esperarse que el aumento en la
producción de IL-12 e IL-18 por los monocitos de los pacientes
con periodontitis agresiva estimule la producción de IgG2.
Los monocitos también son productores importantes de la
citocina proinflamatoria IL-1, que es inducida cuando los mo-
nocitos se encuentran con bacterias. Los genes que regulan
la producción de IL-1 influyen en el riesgo de padecer perio-
dontitis agresiva y crónica, y se sabe que IL-1 influye en la
producción de inmunoglobulinas en el sistema de ratón (7,
23, 52). En los pacientes con periodontitis agresiva, el geno-
tipo de IL-1 en la población se desvía hacia la producción de
concentraciones aumentadas de IL-1 (23). Estas observacio-
nes condujeron a la hipótesis de que IL-1α, IL-1β y el anta-
gonista del receptor de IL-1 (IL-1RA) pueden ayudar a regu-
lar la respuesta de IgG2 en seres humanos. Para explorar este
aspecto, se estimularon cultivos de leucocitos humanos de
sangre periférica con PWM. Se manipularon las concentra-
ciones disponibles de IL-1 en los cultivos, y se monitorizó el
efecto sobre la producción de IgG2. El bloqueo del receptor
de IL-1 con IL-1RA o la neutralización de IL-1α o IL-1β con
anticuerpos específicos redujeron de modo acusado la pro-
ducción de IgG2 (50-70 %) (42). Es de destacar que la adición
de IL-1α no compensaba la IL-1β neutralizada, ni la adición
de IL-1β compensaba la IL-1α neutralizada, lo que sugiere
que las dos monocinas tienen papeles independientes en la
estimulación de IgG2. Además, la combinación de anticuer-
pos anti-IL-1α y anti-IL-1β fue más inhibitoria que cada an-
ticuerpo por separado, y la combinación de ambas citocinas
parecía funcionar de forma aditiva en la estimulación de IgG2.
Además de todo esto, los leucocitos de sangre periférica pro-
cedentes de pacientes con periodontitis agresiva localizada
con concentraciones elevadas de IgG2 presentaban también
una concentración elevada de IL-1‚ (42). De este modo, la pro-
ducción de las citocinas proinflamatorias IL-1α e IL-1β pa-
rece tener un papel crucial y no redundante en la generación
y la regulación de respuestas potentes de IgG2. No se cono-
cen los mecanismos que participan en la estimulación de la
producción de IgG2 por IL-1β, pero no es probable que sean
consecuencia de la ocupación de un simple receptor. IL-1RA,
IL-1α e IL-1β ocupan el receptor de IL-1 pero presentan efec-
tos diferentes sobre la producción de inmunoglobulinas. Un
nonapéptido VQGEESNDK en la posición 163-171 de la IL-1β
se asocia con su capacidad adyuvante en el sistema de ratón,
y probablemente se trate de una señal intracelular desenca-
denada en los linfocitos B tras la ocupación del receptor (7).
Una segunda señal de este tipo puede ser responsable de fa-
74
vorecer la producción de IgG en el sistema humano. También
debería señalarse que tanto IL-1α como IL-1β son importan-
tes para una respuesta óptima de IgG1 en el ser humano, y
que el impacto de estas citocinas no es específico de la sub-
clase (observaciones no publicadas).
Papel de las células dendríticas, linfocitos
citolíticos naturales, citocinas
y mediadores lipídicos en la respuesta
de anticuerpos específicos frente a
P. gingivalis y A. actinomycetemcomitans
Hemos encontrado que los monocitos de los pacientes con
periodontitis agresiva localizada favorecen la producción de
IgG2 y que ésta está mediada, al menos en parte, por facto-
res solubles (92). Cuando se compararon los monocitos de los
pacientes con los de los individuos sanos al comienzo del cul-
tivo, fue evidente que las células adheridas de los individuos
con periodontitis y de los individuos sanos eran indistingui-
bles morfológicamente. Sin embargo, tras 4-5 días, la fre-
cuencia de células con características morfológicas de célula
dendrítica era de aproximadamente el doble en los cultivos
de los pacientes, en comparación con los de los individuos
sanos (6). Hemos deducido que la diferenciación de los mo-
nocitos de los pacientes con periodontitis agresiva localizada
hacia células dendríticas (células dendríticas derivadas de mo-
nocitos) podría ser una consecuencia de las agresiones mi-
crobianas asociadas con la enfermedad. Sin embargo, el he-
cho de que se observe una propensión a diferenciarse hacia
células dendríticas en los monocitos derivados de los pacientes
con periodontitis cuya enfermedad es aparentemente inac-
tiva aboga en contra de esta posibilidad (6). La hipótesis más
atractiva sobre la desviación de la diferenciación de los mo-
nocitos hacia células dendríticas en estos pacientes es que di-
cho proceso es controlado por genes asociados con la enfer-
medad, como IL1 (para IL-1), acerca de los cuales se sabe que
influyen en el desarrollo de dichas células dendríticas (40).
Las células dendríticas son el tipo más potente de célula
presentadora de antígenos, y pueden favorecer respuestas in-
munitarias potentes. Hemos descubierto que las células den-
dríticas derivadas de monocitos procedentes de individuos pe-
riodontalmente sanos, generadas empleando IL-4 y factor
estimulante de colonias de granulocitos y macrófagos (GM-
CSF), potenciaban de forma selectiva la producción de IgG2
en el sistema del PWM, lo que sugiere que la diferenciación
de los monocitos en la periodontitis agresiva localizada hacia
células dendríticas podría explicar los valores elevados de IgG2
en los pacientes con esta enfermedad (6). Las células dendrí-
ticas pueden preactivar con exclusividad a los linfocitos T vír-
genes, y entre los efectos de la preactivación se incluye la po-
larización de dichos linfocitos T vírgenes hacia los tipos Th1 o
Th2 (revisado en 3). Las células dendríticas, incluidas las de
Langerhans y las de la dermis, se encuentran en cantidad ele-
vada en el tejido gingival, y se han hallado células dendríticas
maduras CD83+ en los tejidos gingivales de pacientes con pe-
riodontitis (44, 46). Además, en la periodontitis se han identi-
ficado en el tejido gingival células dendríticas dérmicas (que
presentan similitudes con las derivadas de monocitos) aso-
ciadas con linfocitos T, lo que sugiere la activación de los lin-
focitos T está mediada por las células dendríticas (44). Ha-
 Citocinas y factores inflamatorios que regulan la producción de inmunoglobulinas en la periodontitis agresiva
llazgos recientes han señalado que la relación entre las célu-
las dendríticas y los agentes patógenos desempeña un papel
importante en la desviación de las respuestas hacia los tipos
Th1 o Th2, y que esto está determinado en gran medida por
los receptores tipo Toll (TLR) presentes sobre las células den-
dríticas ocupados por el agente patógeno (69). Se sabe que los
agonistas de TLR-4 estimulan la producción de IL-12, mien-
tras que, por el contrario, la estimulación de TLR-2 puede fa-
vorecer el desarrollo de una respuesta Th2 (69). Además, las
células dendríticas son potentes estimuladoras de los linfoci-
tos citolíticos naturales (células NK), y estas últimas constitu-
yen el tipo celular más abundante que produce IFN-γ en el ra-
tón, tras la exposición al lipopolisacárido (LPS) (31, 89).
Estas relaciones conocidas entre LPS, TLR-4, células den-
dríticas y células NK nos condujeron a un estudio de las ci-
tocinas producidas como consecuencia de las interacciones
existentes entre las células derivadas de los monocitos y A.
actinomycetemcomitans. Esta bacteria inducía a dichas célu-
las a producir IL-12, y la adición de la bacteria y de células
dendríticas a cultivos de leucocitos de sangre periférica favo-
recía concentraciones elevadas de IFN-γ en el plazo de 24 ho-
ras (49). La citocina de tipo 2 IL-4 no fue detectable bajo es-
tas condiciones, aunque fue evidente la producción de IL-10
derivada de las células dendríticas. Con un acusado contraste
respecto a las células dendríticas derivadas de monocitos, los
macrófagos estimulados con A. actinomycetemcomitans, pre-
parados a partir de los mismos monocitos, carecían de la ca-
pacidad de inducir valores detectables e IL-12 o IFN-γ. La in-
teracción de las células dendríticas con la bacteria, que
conducía a la producción de IL-12, se seguía de una rápida
producción de IFN-γ en los cultivos de leucocitos de sangre
periférica en sólo 24 horas (49). La observación de que la pro-
ducción de IFN-γ era alta en sólo 24 horas condujo a estudios
para determinar si las células NK producían IFN-γ. La reduc-
ción de células NK de los leucocitos de sangre periférica dis-
minuyó IFN-γ alrededor de 2/3, lo cual fue atribuible a las cé-
lulas CD8+ (49). Se sabe que ciertos antígenos microbianos
estimulan la producción de IL-12, y que ésta es crucial para
la inducción óptima de la producción de IFN-γ por las célu-
las NK (89). Los estudios con un anticuerpo neutralizante anti-
IL-12 confirmaron que IL-12 es crucial para que las células
dendríticas estimuladas con A. actinomycetemcomitans in-
duzcan la producción temprana de IFN-γ; también demos-
traron que el bloqueo de TLR-4 inhibía la producción de am-
bas citocinas de tipo 1 (49). Esta rápida respuesta de IFN-γ
también sugiere que la estimulación con dicha bacteria fa-
vorece la diferenciación de los precursores T colaboradores
en efectores de tipo Th1 (49).
Los LPS de las bacterias gramnegativas parecen ser im-
portantes en la patogenia de la enfermedad periodontal (20).
Los estudios con anticuerpos neutralizantes frente a TLR-4
indican que este receptor es importante en la ruta que con-
duce a la producción de IL-12 por las células dendríticas de-
rivadas de monocitos tras la estimulación con el LPS de A. ac-
tinomycetemcomitans. Además, la óptima respuesta temprana
de IFN-γ inducida en los leucocitos de sangre periférica por
las células dendríticas derivadas de monocitos estimulados
por dicha bacteria también dependía de TLR-4 (49). Estos re-
sultados concuerdan con la idea de que el LPS es un compo-
nente significativo en la inducción de la producción temprana
de IFN-γ por A. actinomycetemcomitans y que la interacción
entre LPS y TLR-4 en las células dendríticas inicia la ruta que
lleva a la producción de IFN-γ por parte de las células NK. Se
advirtió que A. actinomycetemcomitans y su LPS eran más po-
tentes que Escherichia coli o su LPS para provocar la induc-
ción de IL-12 e IFN-γ en las células dendríticas. La capacidad
de que las células dendríticas estimuladas con A. actinomy-
cetemcomitans induzcan a las células NK a producir de forma
rápida IFN-γ sin IL-4 detectable sugiere su potencial para des-
viar las respuestas hacia el tipo Th1 (49). Deducimos que la
interacción entre las células dendríticas y las células NK puede
explicar la presencia de citocinas asociadas al tipo Th1 en el
líquido crevicular gingival de pacientes con periodontitis agre-
siva localizada, así como las concentraciones elevadas de IgG2
reactiva frente a A. actinomycetemcomitans en el suero y en
el líquido crevicular gingival de estos pacientes. Sin embargo,
también es de interés que la producción prolongada de cito-
cinas de tipo Th1 en localizaciones con inflamación crónica
se haya asociado con daño tisular (8, 18, 19, 81). De este modo,
la respuesta inmunitaria dirigida por las células dendríticas
frente a A. actinomycetemcomitans podría ayudar a inducir
respuestas inmunitarias adaptativas, las que podrían tener
tanto efectos destructivos como protectores.
Los estudios mencionados sugieren con fuerza que las cé-
lulas dendríticas y las células NK desempeñan papeles fun-
damentales en las respuestas de IgG2 halladas en el suero y
líquido crevicular gingival de los pacientes con periodontitis
agresiva localizada. No obstante, es evidente que el PWM no
sirve de modelo para la presentación de antígenos o para la
numerosas interacciones intercelulares que tienen lugar en
los centros germinales de los tejidos linfoides secundarios,
donde las respuestas humorales se refinan y se inician las res-
puestas de memoria (revisado en 58, 87). Las respuestas de
IgG específicas en cultivos de leucocitos humanos de sangre
periférica rara vez son impresionantes, y se informa con fre-
cuencia que el resultado está representado por células for-
madoras de anticuerpos en las que se detectan pequeñas can-
tidades de anticuerpos producidos por células individuales.
Las bajas concentraciones de IgG específica inducidas por
agentes periodontopatógenos, incluido A. actinomycetemco-
mitans, en los cultivos de leucocitos de sangre periférica han
hecho que los estudios de la regulación de dichas respuestas
sean complicados (86). Hemos deducido que el uso de célu-
las dendríticas foliculares podría ayudar a recrear el micro-
entorno de un centro germinal y facilitar los estudios in vitro
de las respuestas de IgG frente a microorganismos bucales, al
potenciar las respuestas específicas. Tras la exposición in vivo
para provocar una respuesta de memoria, los anticuerpos per-
sistentes de inmunizaciones previas convierten de forma casi
instantánea el inmunógeno en complejos antígeno-anti-
cuerpo. Estos complejos inmunitarios son transportados a los
centros germinales, donde quedan atrapados por las células
dendríticas foliculares (79, 80). Los complejos inmunitarios
activan la vía del complemento y los fragmentos C3b y C4b
se unen de forma covalente a las células dendríticas folicula-
res por medio de enlaces tio-éster, de modo que dichas célu-
las que llevan los complejos inmunitarios se marcan de forma
intensa con anticuerpos reactivos frente a estos componen-
tes del complemento (87). El componente C3b situado sobre
las células dendríticas foliculares se degrada para dar lugar a
iC3b, C3d o C3dg, y estos fragmentos son ligandos (CD21L)
del receptor 2 del complemento o CD21. La unión de CD21
del complejo correceptor del linfocito B con CD21L de las cé-
lulas dendríticas derivado del complemento libera una cose-
75
Schenkein et al.
ñal crucial que aumenta de forma drástica las señales libera-
das por la unión del antígeno al receptor del linfocito B (BCR)
(87). Además, la unión de la fracción Fc de la inmunoglobu-
lina de los complejos antígeno-anticuerpo al FcγRII de las cé-
lulas dendríticas foliculares reduce la señalización de ITIM
(motivos de inhibición de inmunorreceptores basados en ti-
rosina) en los linfocitos B, lo cual puede suceder si se permite
que los complejos inmunitarios se entrecrucen con BCR y Fc-
γRII de los linfocitos B (4). De este modo, las células dendrí-
ticas foliculares de las zonas claras de los centros germinales
reducen una señal negativa sobre los linfocitos B. En cultivo,
los linfocitos se agrupan en torno a las células dendríticas fo-
liculares y crean un microentorno similar al centro germinal
con linfocitos B específicos, células dendríticas foliculares uni-
das a complejos de inmunoglobulinas, y linfocitos T especí-
ficos. Las células dendríticas foliculares de estas agrupacio-
nes proporcionan el antígeno que se unirá al BCR y el CD21L
que se unirá a CD21 del complejo correceptor de los linfoci-
tos B, así como el antígeno de los cuerpos recubiertos con
complejos inmunitarios (icosomas) para que los linfocitos B
lo procesen y lo presenten para obtener la ayuda necesaria
de los linfocitos T (80, 87).
Para examinar de forma más exhaustiva la hipótesis de que
las citocinas de tipo 1 y la IL-1 desempeñan papeles funda-
mentales en la estimulación de las respuestas de IgG2 en los
pacientes con periodontitis agresiva localizada, se llevaron a
cabo estudios que empleaban A. actinomycetemcomitans
como el principal antígeno en estos pacientes. El uso de cé-
lulas dendríticas foliculares que ayudaran a recrear el micro-
entorno del centro germinal potenció de forma significativa
la respuesta de anticuerpos específicos frente a dicha bacte-
ria. Se determinó que IL-1α, IL-1β, IL-12 e IFN-γ eran impor-
tantes, en conjunto, para una producción óptima de IgG frente
a A. actinomycetemcomitans, lo que confirma y amplía los re-
sultados obtenidos empleando el PWM (83). La prostaglan-
dina E2 (PGE2) también era crucial para la respuesta de IgG2
específica frente a esta bacteria, y se sabe que los monocitos
de los pacientes con periodontitis agresiva localizada produ-
cen grandes cantidades de este mediador en respuesta al LPS
(74). Aunque se sabe que PGE2 polariza las respuestas hacia
el tipo Th2, encontramos que aumenta, en vez de inhibir, la
producción de IFN-γ y que la adición de éste hizo que no fuera
necesaria PGE2 para provocar una respuesta IgG2 (82).
Además de A. actinomycetemcomitans, los pacientes con
periodontitis agresiva localizada producen concentraciones
elevadas de IgG2 frente a antígenos específicos de serotipos
de P. gingivalis (15). La respuesta frente a serotipos de A. ac-
tinomycetemcomitans en estos pacientes es generalmente
frente al serotipo b, y una cepa representativa de este sero-
tipo es adecuada para definir esta respuesta inmunodomi-
nante elevada de IgG2. Por el contrario, se necesitaron seis
serotipos diferentes de P. gingivalis para documentar la res-
puesta elevada de IgG2 frente a esta bacteria, y los estudios
serológicos que empleen una o pocas cepas de esta bacteria
perderán la respuesta inmunodominante de IgG2 específica
frente a los serotipos importantes de P. gingivalis (15). Ade-
más, la capacidad de las células dendríticas de captar P. gin-
givalis y producir IL-12 es débil en comparación con la ca-
pacidad frente a A. actinomycetemcomitans o E. coli, lo que
plantea la cuestión del mecanismo implicado en la produc-
ción de IFN-γ para que se produzca el cambio hacia IgG2 (49).
El LPS de P. gingivalis es complejo y, con frecuencia, no pro-
76
duce estimulación a través de TLR-4 de forma eficaz (22). Se
sabe que las fimbrias de esta bacteria estimulan la captación
por las células dendríticas y la inducción de IL-12 (45), y se
obtuvo cierta producción de IL-12 p70 por parte de estas cé-
lulas con nuestra cepa fimbriada, aunque la respuesta de IL-
12 en estas células siguió siendo moderada (49). Dado que P.
gingivalis no parece ser un potente inductor de tipo Th1, esto
condujo a plantear preguntas acerca del origen del IFN-γ ne-
cesario para la inducción de IgG2 específica frente a dicha
bacteria. Se utilizó PCR (reacción en cadena de la polimerasa)
cuantitativa en tiempo real para analizar la respuesta de IL-
12 en las células dendríticas, y se observó que la estimulación
de estas células con P. gingivalis no aumentaba la expresión
de IL-12 p35, aunque sí la expresión de IL-12 p40 (50). Sin
embargo, al administrar IFN-γ a las células dendríticas, el cual
puede obtenerse de las células NK, aumentaba de forma des-
tacable la expresión de IL-12 p35 en dichas células estimula-
das por P. gingivalis, y se obtuvo una respuesta potente de IL-
12 p70 (50). En resumen, la inducción óptima del ARNm de
p35 en las células dendríticas parece requerir la preactivación
con IFN-γ, además del contacto con el agente patógeno. Ade-
más, se observó que las células dendríticas estimuladas con
P. gingivalis inducían la producción de grandes cantidades de
IFN-γ por parte de las células NK (49). Además, esta respuesta
de IFN se producía en los primeros días del cultivo, momento
en el cual IFN-γ desempeña un papel en el estímulo de la pro-
ducción de IgG2 (82). Más importante aún, los estudios de las
respuestas de IgG2 específicas frente a P. gingivalis, en nues-
tro modelo de centro germinal in vitro, han revelado que la
producción de IgG2 era casi suprimida por la eliminación de
células NK de los leucocitos de sangre periférica (50). Parece
que las células NK aportan el IFN-γ necesario para inducir la
IgG2 específica frente a esta bacteria en el líquido crevicular
gingival y en el suero de los pacientes. El posible papel de las
células NK en la inducción de esta respuesta de IgG2 repre-
senta de nuevo otro ejemplo de cómo el sistema inmunitario
innato puede regular la expresión de la inmunidad adapta-
tiva. En resumen, nuestros datos indican que las células den-
dríticas estimuladas con P. gingivalis interactúan con las cé-
lulas NK para producir concentraciones elevadas de IFN-γ, y
que éste estimula la producción de IL-12 por parte de las cé-
lulas dendríticas. Dado que las células NK requieren IL-12
para una producción óptima de IFN-γ, parece que la interac-
ción P. gingivalis-célula dendrítica-célula NK puede dar lugar
a una activación recíproca y a un aumento en la producción
de citocinas tanto por parte de las células dendríticas como
por parte de las NK. En la figura 1 se resumen estas relacio-
nes en el modelo de trabajo ilustrado.
Regulación de IgG2 por mediadores
lipídicos
Tal como se ha señalado previamente, existen mediadores
solubles derivados de los monocitos que estimulan la pro-
ducción de IgG2; en particular, aquellos monocitos proce-
dentes de pacientes con periodontitis agresiva localizada son
fuentes especialmente ricas de estas moléculas. Además de
las proteínas representadas por las citocinas, como IL-6, IL-
12 e IL-18 (todas ellas asociadas con respuestas de tipo Th1
y producción de IgG2, como se mencionó anteriormente), los
monocitos también producen mediadores lipídicos bioacti-
 Citocinas y factores inflamatorios que regulan la producción de inmunoglobulinas en la periodontitis agresiva
CD40L
Linfocito B IFN-γ Linfocito
Th1
IgG2 IFN-γ
Opsonina específica
de carbohidratos
g Célula NK
Aa/P
CD
Il-12, IL-18
Fig. 1. Modelo de trabajo que ilustra la participación de las células
dendríticas (CD) y los linfocitos citolíticos naturales (natural killer
cells, NK) en la regulación de la producción de IgG2 específica de se-
rotipo y reactiva con Actinobacillus actinomycetemcomitans (Aa) y
Porphyromonas gingivalis (Pg). La interacción de Aa y Pg con las cé-
lulas dendríticas da lugar a la producción de interleucina 12 (IL-12)
e IL-18, que favorece la producción de interferón γ (IFN-γ) por parte
de las células NK. El IFN-γ derivado de las células NK aumenta aún
más las citocinas de tipo 1 por parte de las células dendríticas e in-
teractúa con los linfocitos B para estimular la producción de IgG2.
Las células dendríticas también interactúan con los linfocitos T co-
laboradores (Th) para estimular la respuesta Th1, la cual proporciona
ligando de CD40 (CD40L) y más IFN-γ, necesario para estimular a los
linfocitos B para que fabriquen la alta cantidad de IgG2 que reacciona
con los antígenos glucídicos específicos de serotipo de Aa y Pg.
vos que activan típicamente a las células por medio de su
unión a receptores acoplados a la proteína G. Entre los me-
diadores lipídicos más abundantes derivados de los monoci-
tos se encuentran los prostanoides, en especial PGE2 y el leu-
cotrieno C4, así como el factor activador de las plaquetas
(PAF), un análogo de la fosfatidilcolina. Utilizando el sistema
de activación policlonal con PWM, hemos puesto de mani-
fiesto los papeles de PGE2 y PAF en la respuesta de IgG2 (43).
PGE2 aumentaba la producción de IgG2 por parte de los leu-
cocitos procedentes de individuos periodontalmente sanos,
estimulados con PWM, pero no de aquellos derivados de los
pacientes con periodontitis agresiva localizada, presumible-
mente porque los monocitos de estos individuos ya están pre-
activados para secretar grandes cantidades de PGE2 (74). Los
efectos de PGE2 eran selectivos para IgG2 al ser añadidos a
los leucocitos de individuos sanos de control. Sin embargo,
PGE2 restauraba la producción tanto de IgG1 como de IgG2
en leucocitos de individuos sanos tratados con indometacina,
un inhibidor de ciclooxigenasa que bloquea la síntesis de to-
dos los prostanoides, lo que sugiere que este mediador lipí-
dico tiene efectos sobre la producción de anticuerpos, tanto
específicos de IgG2 como inespecíficos. Los efectos específi-
cos sobre IgG2 de PGE2 se relacionan con toda probabilidad
con la inducción de IFN-γ, una citocina de tipo Th1 que es
esencial para alcanzar una respuesta óptima de IgG2 (48, 51).
Los leucocitos estimulados con PWM producen tanto PGE2
como IFN-γ, de modo que la producción de este último se re-
trasa con respecto a la de aquélla en 1-2 días (82). La indo-
metacina suprime la producción de IFN-γ en un 30-75%, y di-
cha producción se restaura parcialmente con 10 nM de PGE2.
Resulta importante señalar que tanto PGE2 como IFN-γ res-
tauran la producción de IgG2 en los leucocitos tratados con
indometacina. Aún no se ha identificado la diana de PGE2 ni
la fuente de IFN-γ, pero es probable que sean células de tipo
Th1. La producción de IFN-γ en cultivos estimulados con PWM
alcanza su máximo al cabo de 2-3 días aproximadamente, una
cinética compatible con la respuesta inmunitaria adaptativa
y con la activación de células Th1. Tal como se ha señalado
anteriormente, PGE2 restaura tanto la producción de IgG1
como de IgG2 en los leucocitos tratados con indometacina,
lo que indica que este mediador lipídico también tiene efec-
tos inespecíficos sobre la producción de anticuerpos. Es pro-
bable que estos efectos sean mediados a través de la induc-
ción de la citocina de tipo Th2 IL-4, que es esencial para el
desarrollo y el cambio de isotipo de los linfocitos B (16, 28,
37, 85). De hecho, hemos demostrado que tanto IL-4 como
IFN-γ son esenciales para la generación de transcritos γ2 de
la línea germinal en linfocitos B vírgenes (1). En conjunto,
esos estudios ilustran la importancia de PGE2 para una res-
puesta óptima de anticuerpos IgG2. Dadas las concentracio-
nes elevadas de PGE2 en los tejidos de pacientes con perio-
dontitis agresiva localizada (21, 63, 64) y la propensión de los
monocitos derivados de dichos tejidos a producir PGE2 (74),
estos estudios también proporcionan una explicación de la
concentración elevada de anticuerpos IgG2 que se observa en
estos individuos.
Se requiere también un segundo mediador lipídico, PAF,
para generar respuestas óptimas de IgG2 en el sistema esti-
mulado con PWM. PAF (1-O-alquil-2-acetil-sn-glicero-3-fos-
focolina) es un fosfolípido proinflamatorio que se sintetiza
principalmente en monocitos, leucocitos polimorfonucleares
(PMN) y células endoteliales a través de una ruta de remo-
delación (41, 70, 76). PAF actúa sobre una serie de células a
través de un receptor acoplado a la proteína G (39), e induce
diversos procesos biológicos, desde la adhesión celular, la di-
ferenciación, la angiogénesis y la neurotransmisión, hasta
efectos sobre la biología reproductiva y cardíaca, alergia y sep-
sis, entre otros. PAF induce a los monocitos de pacientes con
periodontitis agresiva localizada a producir las citocinas aso-
ciadas a una respuesta Th1 IL-12 e IL-18 (1), las cuales actúan
posteriormente sobre las células Th1 para producir IFN-γ. PAF
también actúa directamente sobre los linfocitos para estimu-
lar el IFN-γ (1). Dado el papel esencial de IFN-γ en la respuesta
de IgG2, predijimos que los antagonistas del receptor de PAF
podrían suprimir la producción de IgG2. De hecho, el anta-
gonista CV3988 suprimía la producción de IgG2 estimulada
por el PWM de forma dependiente de la concentración, y las
concentraciones de IgG2 se reducían en más de 90 % en los
cultivos tratados con 25 µM de CV3988 (43). Por el contrario,
el PAF exógeno inducía la producción de IgG2 y dicha in-
ducción era selectiva, ya que PAF no tenía efecto sobre la pro-
ducción de IgG1. PGE2 revertía parcialmente los efectos de
CV3988. Estos datos sugieren que PAF puede encontrarse en
una posición previa en la ruta que conduce hacia la produc-
ción de IgG2, hipótesis que está respaldada por la observa-
ción de que PAF estimula a los monocitos para que secreten
PGE2 (5). Como alternativa, puesto que tanto PAF como PGE2
estimulan la producción de IFN-γ (2, 82), la PGE2 exógena po-
dría sustituir a PAF en los cultivos tratados con CV3988.
Las concentraciones de IgG2 son elevadas en los pacientes
con periodontitis agresiva localizada. Dichos individuos pre-
sentan una concentración de IgG2 aproximadamente el 35 %
más elevada que la de los individuos periodontalmente sanos,
ajustados por raza (55, 66). Dada la necesidad de PGE2 y PAF
77
Schenkein et al.
para generar respuestas óptimas de anticuerpos IgG2, esta ob-
servación conduce a la hipótesis de que las concentraciones
de PGE2 y PAF son elevadas en individuos con periodontitis
agresiva localizada. Dicha hipótesis está respaldada por la ob-
servación de que PAF y PGE2 exógenos aumentan la produc-
ción de IgG2 por leucocitos de individuos sin periodontitis,
pero no tienen ningún efecto sobre las células de pacientes
con periodontitis agresiva localizada, presumiblemente por-
que se encuentra elevada la producción endógena de ambos
mediadores en estos cultivos (43). De hecho, Offenbacher et
al. (21, 63, 64, 74) han descrito de forma amplia las concen-
traciones elevadas de PGE2 presentes en células y tejidos de
los individuos con periodontitis agresiva localizada, señalando
que los monocitos derivados de estos tejidos son hipersensi-
bles ante el LPS y producen grandes cantidades de PGE2. Ade-
más, las concentraciones de PAF se encuentran elevadas en la
periodontitis agresiva localizada y en otras enfermedades pe-
riodontales (26, 30, 60, 62, 68). Las concentraciones de PAF es-
tán determinadas tanto por la síntesis como por el catabo-
lismo de este lípido bioactivo. En un trabajo reciente, hemos
demostrado que tanto los neutrófilos en reposo como aque-
llos activados por ionóforo derivados de pacientes con perio-
dontitis agresiva localizada sintetizan más PAF que los de in-
dividuos con periodonto sano (75). Aunque los monocitos
también producen PAF, es poco probable que contribuyan
–mediante un aumento en la síntesis– a la elevada concen-
tración de este factor en los individuos con la enfermedad ci-
tada, ya que la producción de PAF es similar en los monoci-
tos en reposo derivados de pacientes y controles sanos, y los
monocitos de pacientes que se han activado con ionóforo pro-
ducen menos PAF que los derivados de individuos sanos. Ade-
PMN
Linfocito
Th1
PAF IL-12
IL-18
PAFAH
ito
oc
on
M
ito
oc
on
M
Fig. 2. Modelo de inducción de IgG2 por el factor activador de las pla-
quetas (PAF) y la prostaglandina E2 (PGE2). En la periodontitis agre-
siva localizada, los leucocitos producen grandes cantidades de los
mediadores lipídicos PAF y PGE2. Los dos lípidos se unen a recepto-
res acoplados a la proteína G y favorecen la producción de interfe-
rón γ (IFN-γ), una citocina de tipo Th1 necesaria para la producción
de IgG2. Además, PGE2 favorece la producción de IL-4, una citocina
78
más de producir PAF, los monocitos también son la fuente de
la acetilhidrolasa de PAF (PAFAH), la fosfolipasa que catabo-
liza a PAF (77, 78). La expresión y la secreción de esta enzima
aumentan de forma drástica cuando los monocitos se dife-
rencian en macrófagos (2, 25). Resulta interesante señalar que
los monocitos derivados de pacientes con periodontitis agre-
siva localizada se diferencian hacia células dendríticas, las cua-
les son potentes presentadoras de antígenos con un metabo-
lismo lipídico exclusivo (6). Aunque la expresión de PAFAH
también aumenta cuando los monocitos se diferencian hacia
células dendríticas, la inducción es menos potente y la secre-
ción de PAFAH es unas 17 veces menor en estas células que
en los macrófagos (2). Esta observación ha sugerido que las
concentraciones de PAFAH pueden ser menores en los mo-
nocitos con periodontitis agresiva localizada que en los deri-
vados de individuos sanos, hipótesis que hemos confirmado
en cuanto al grado de actividad (2) y de expresión (R. Griffiths
et al., resultados sin publicar). Una baja concentración de PA-
FAH se relaciona con una mayor acumulación de PAF (2, 75).
Tal como se ha descrito anteriormente, PAF estimula las cito-
cinas de tipo Th1 y el IFN-γ necesario para la producción de
IgG2. De este modo, podemos predecir que la orientación de
la diferenciación del monocito hacia el fenotipo de una célula
dendrítica en los individuos con periodontitis agresiva locali-
zada tiene importantes consecuencias para la respuesta de
IgG2, ya que da lugar a bajas concentraciones de PAFAH, lo
que implica un aumento en las concentraciones de PAF e IFN-
γ y, por lo tanto, el incremento en la producción de IgG2. Nues-
tros estudios preliminares señalan que, en la periodontitis agre-
siva generalizada, los monocitos también se diferencian en
células dendríticas y expresan bajas concentraciones de PA-
IFN-γ
Linfocito El anticuerpo
B IgG2
PGE2 controla la
enfermedad
IL-4
Linfocito
Th2
de tipo Th2 que actúa de forma sinérgica con IFN-γ para desenca-
denar la producción de IgG2 por parte de los linfocitos B. Los anti-
cuerpos IgG2 reconocen los antígenos glucídicos de los organismos
patógenos bucales, opsonizan estos microorganismos y favorecen su
destrucción, lo que reduce la gravedad de la enfermedad periodon-
tal.PAFAH: acetilhidrolasa del factor activador de las plaquetas; PMN:
leucocitos polimorfonucleares; Th: linfocito colaborador.
 Citocinas y factores inflamatorios que regulan la producción de inmunoglobulinas en la periodontitis agresiva
FAH (R. Griffiths et al., resultados sin publicar), observaciones
que son fascinantes, dadas las altas concentraciones de anti-
cuerpos IgG2 que se observan también en la circulación de
este subgrupo de pacientes con periodontitis agresiva (66).
La figura 2 presenta nuestro modelo actual para la induc-
ción de IgG2 por PAF y PGE2. Ambos lípidos son producidos
por leucocitos activados y se presentan en concentraciones
elevadas en pacientes con periodontitis agresiva localizada.
Además, ambos inducen IFN-γ, la citocina de tipo Th1 que es
esencial para la producción de IgG2. Además de ello, PGE2 es-
timula la producción de IL-4 por las células de tipo Th2. IFN-
γ e IL-4 actúan de forma sinérgica para inducir el cambio de
isotipo hacia la cadena pesada γ2, un requisito para la pro-
ducción de IgG2.
Tanto PAF como PGE2 son lípidos proinflamatorios que pue-
den exacerbar la enfermedad periodontal. Además, PGE2 fa-
vorece la resorción ósea (53), que también contribuye al de-
sarrollo de la enfermedad. Nuestros estudios indican que los
anticuerpos IgG2 son protectores, ya que el título de IgG2 se
correlaciona de forma inversa con la gravedad de la enferme-
dad (10, 34, 56). De este modo, proponemos que PAF y PGE2
se consideren como «hojas de doble filo» en el contexto de la
enfermedad periodontal, ya que ambos favorecen la progre-
sión de la enfermedad e inducen anticuerpos para reducir su
gravedad. El desafío es distinguir los mecanismos molecula-
res asociados con la respuesta protectora de los asociados a la
respuesta proinflamatoria de estos lípidos bioactivos, ya que
esto puede permitir delimitar los mecanismos protectores y
plantear estrategias para controlar la enfermedad.
Además de PAF y PGE2, es posible que, en la periodontitis
agresiva localizada, los leucocitos produzcan otros mediado-
res lipídicos aún no conocidos que regulen la respuesta de
anticuerpos IgG2. Por ejemplo, se sabe que, en esta enfer-
medad, los leucocitos PMN sintetizan grandes cantidades de
leucotrieno B4 y lipoxina A4, lípidos bioactivos que tienen ac-
tividad proinflamatoria y antiinflamatoria, respectivamente
(32, 47). Se ha demostrado recientemente que la resolvina E1,
un derivado del ácido eicosapentaenoico, reduce la inflama-
ción y la pérdida ósea en un modelo animal de periodontitis
(38). Es probable que IFN-γ participe en la inducción de IgG2
por otros mediadores lipídicos proinflamatorios. Será espe-
cialmente importante determinar si IgG2 es inducido por lí-
pidos antiinflamatorios, ya que dichas moléculas permitirían
dos mecanismos de protección frente a la periodontitis: la re-
ducción de la inflamación y la inducción de anticuerpos pro-
tectores IgG2.
Agradecimientos
El trabajo citado en este artículo ha sido financiado por las
subvenciones DE 13102 y DE 015980 del National Institute of
Dental Research.
Periodontology 2000, Vol. 45, 2007, 113-127
Bibliografía disponible en la versión electrónica
de la revista: www.ArsXXI.com/PERIO
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Citocinas y factores inflamatorios
que regulan la producción de
inmunoglobulinas en la periodontitis
agresiva
Harvey A. Schenkein, Suzanne E.
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