Introduccin a la Espectroscopa de Absorcin Molecular Ultravioleta, Visible e Infrarrojo Cercano

Ing. Carlos Brunatti Lic. Ana Mara Martn

Introduccin Desde hace muchos aos se ha usado el color como ayuda para reconocer las sustancias qumicas; al reemplazar el ojo humano por otros detectores de radiacin se puede estudiar la absorcin de sustancias, no solamente en la zona del espectro visible, sino tambin en ultravioleta e infrarrojo. Se denomina espectrofotometra a la medicin de la cantidad de energa radiante que absorbe un sistema qumico en funcin de la longitud de onda de la radiacin, y a las mediciones a una determinada longitud de onda. La teora ondulatoria de la luz propone la idea de que un haz de luz es un flujo de cuantos de energa llamados fotones; la luz de una cierta longitud de onda est asociada con los fotones, cada uno de los cuales posee una cantidad definida de energa. Transmitancia

La figura muestra un haz de radiacin paralela antes y despus de que ha pasado a travs de una capa de solucin que tiene un espesor de b cm y una concentracin c de una especie absorbente. Como consecuencia de interacciones entre los fotones y las partculas absorbentes, la potencia del haz es atenuada. La transmitancia T de la solucin es entonces la fraccin de la radiacin incidente transmitida por la solucin: T= I I0

La transmitancia se expresa a menudo como porcentaje: %T = I 100 I0

Absorbancia La absorbancia A de una solucin se define mediante la ecuacin: A = log T = log I0 I

La mayor parte de los trabajos analticos se realizan con soluciones de manera que vamos a desarrollarla relacin que existe entre la concentracin de la solucin y su capacidad de absorber radiacin. 1

Medicin de Transmitancia y Absorbancia La transmitancia y la absorbancia se miden en un instrumento llamado espectrofotmetro, la solucin del analito se debe contener en algn recipiente transparente, tubo o celda. Prdidas por dispersin en la solucin Haz incidente Haz emergente Prdidas por reflexin en interfases Como se ve en la representacin, ocurre reflexin en las interfases: aire-pared, tanto como en la pared-solucin. La atenuacin del haz resultante es sustancial. Adems, la atenuacin de un haz puede ocurrir por dispersin de las molculas grandes y a veces por absorcin de las paredes del recipiente. Para compensar estos efectos, la potencia del haz transmitido por la solucin del analito es comparada comnmente con la potencia del haz transmitido por una celda idntica que contiene solamente solvente. Una absorbancia experimental que se aproxima mucho a la absorbancia verdadera se obtiene con la ecuacin. A = log I solvente I solucin

Los espectrofotmetros, estn a menudo, equipados con un dispositivo que tiene una escala lineal que se extiende de 0 a 100%. De manera de hacer tal instrumento de lectura directa en porcentaje de transmitancia, se efectan dos ajustes preliminares, llamados 0%T y 100%T. El ajuste del 0%T se lleva a cabo mediante un cierre mecnico del detector. El ajuste de 100%T se hace con el cierre abierto y el solvente en el camino de la luz. Normalmente el solvente est contenido en una celda que es casi idntica a las que contienen las muestras. 2

Cuando la celda del solvente es reemplazada por la celda que contiene la muestra, la escala da la transmitancia porcentual. Los instrumentos actuales poseen un sistema electrnico que realiza la operacin matemtica y da la respuesta directamente absorbancia. Tambin hay que hacer una calibracin previa con el solvente o blanco. Aspectos Cuantitativos de las Mediciones de Absorcin Ley de Beer Consideremos un bloque de materia absorbente (slido, lquido o gas). Un haz de radiacin monocromtica paralelo con intensidad I0 llega al bloque perpendicular a la superficie; luego pasa a travs de la longitud b del material, que contiene n partculas absorbentes (tomos, iones o molculas), la intensidad del haz disminuye a I como resultado de la absorcin. Consideremos ahora una seccin transversal del bloque que tiene un rea S (X x Y) y un espesor infinitesimal dx. Dentro de esta seccin hay dn partculas absorbentes; asociada a cada partcula podemos imaginar una superficie en que ocurrir la captura del fotn. Esto es, si un fotn alcanza una de esas reas por casualidad, ocurrir inmediatamente la absorcin. El rea total de esas superficies de captura dentro de la seccin se designa ds; la relacin del rea de captura al rea total es ds/S. En un promedio estadstico, esta relacin representa la probabilidad para la captura de fotones dentro de la seccin. La intensidad del haz que entra en la seccin, Ix es proporcional al nmero de fotones por cm2 y por segundo, y dIx representa la cantidad removida por segundo dentro de la seccin, la fraccin absorbida es entonces -dIx/Ix y esta relacin tambin es la probabilidad promedio por captura. El trmino tiene signo negativo para indicar que la intensidad del haz disminuye. dI x ds = Ix S

Recordemos que ds es la suma de las reas de captura para cada partcula dentro de la seccin; puede ser por eso proporcional al nmero de partculas ds = dn; siendo dn el nmero de partculas dentro de la seccin y una constante de proporcionalidad, que se puede llamar seccin transversal de captura. Considerando las ecuaciones e integrando de 0 a n
n dn dI x = I0 I 0 S x I

Queda - ln I n = I0 S

Luego de convertir los logaritmos a base 10 e invirtiendo la fraccin para cambiar de signo, se obtiene:

log

I0 n = I 2,303 S

Siendo n el nmero total de partculas dentro del bloque. La seccin transversal S se puede expresar en trminos del volumen del bloque en cm3 y su longitud b en cm, entonces S = V/b Sustituyendo en la ecuacin anterior, da: log I0 n b = I 2,303 V

Se nota que n/V tienes las unidades de concentracin (esto es nmero de partculas por cm3), se puede convertir a moles por litro. El nmero de moles es n partculas 6,02 10 23 partculas/mol y c expresado en mol/l: c= Combinando: log I 0 6,02 10 23 b c = I 2,303 1000 1000 cm 3 / l n mol 6,02 10 23 V[cm 3 ]

Finalmente, las constantes de esta ecuacin se pueden reunir en una nica constante: log I0 = bc = A I

Absortividad y Absortividad Molar La absorbancia es directamente proporcional a la longitud del camino b a travs de la solucin y la concentracin c de la especie absorbente. Estas relaciones se dan como: A = abc Siendo a una constante de proporcionalidad llamada absortividad. La magnitud de a depender de las unidades empleadas para b y c. A menudo b es dada en trminos de cm y c en gramos por litro, entonces la absortividad tiene unidades de lg1cm1. Cuando la concentracin se expresa en moles por litro y la longitud de la celda en centmetros, la absortividad se llama absortividad molar, se designa como y tiene unidades de lmol1cm1, entonces la absorbancia es: A = bc

Curva de Calibracin Denominamos espectro de una sustancia a la representacin de absorbancia (A) en funcin de longitud de onda (),este grfico presenta ondulaciones con mximos y mnimos. Para hacer las determinaciones cuantitativas se elige, en general, la longitud de onda correspondiente a un mximo, pues el error de medicin es mnimo y la sensibilidad mxima. Para verificar el cumplimiento de la ley de Beer, se debe realizar la curva de calibracin; absorbancia (A) en funcin de concentracin (c), para lo cual se preparan soluciones de la sustancia de concentraciones conocidas y se mide la absorbancia a la longitud de onda elegida.

Si es vlida la ley de Beer, para esa sustancia a esas concentraciones, la relacin debe ser una recta, que pase por el origen de los ejes cartesianos; a menudo se observan desviaciones debidas a diversos factores.

Aplicaciones de la Ley de Beer a Mezclas La ley de Beer tambin se aplica a una solucin que contiene ms de una clase de sustancia absorbente. Siempre que no haya interaccin entre las varias especies, la absorbancia total para un sistema multicomponente est dada por: A = A1 + A2 + A3 + ........... + An = 1 b c1 + 2 b c2 + 3 b c3 + ......... + n b cn

Indicando los subndices 1,2, .. n, las especies absorbentes. Limitaciones a la Aplicabilidad de la Ley de Beer Se encuentran pocas excepciones a la generalizacin que la absorbancia est relacionada linealmente a la longitud del camino ptico. En cambio, las desviaciones de la proporcionalidad directa entre la absorbancia medida y la concentracin, para b constante, son ms frecuentes. Estas desviaciones son fundamentales y representan limitaciones reales de la ley. Algunas ocurren como una consecuencia de la manera en que las mediciones de absorbancia se hacen, o como un resultado de cambios qumicos asociados con cambios en la concentracin. Otras ocurren a veces como desviaciones instrumentales. Limitaciones Propias de la Ley de Beer La ley de Beer es exitosa en describir el comportamiento de absorcin de soluciones diluidas solamente; a concentraciones altas (generalmente mayores que 0,01 M), la distancia promedio entre las especies responsables de la absorcin est disminuida hasta el punto que cada una afecta la distribucin de cargas de sus vecinas. Esta interaccin, a su vez, puede alterar la habilidad de las 7

especies para absorber en una longitud de onda de radiacin. Debido a que la extensin de la interaccin depende de la concentracin, la ocurrencia de este fenmeno provoca desviaciones de la relacin lineal entre absorbancia y concentracin. Un efecto similar se encuentra a veces en soluciones que contienen altas concentraciones de otras especies, particularmente electrolitos. La proximidad de iones a la especie absorbente altera la absortividad molar de la ltima por atracciones electrostticas, este efecto se disminuye por dilucin. Se encuentran algunas excepciones entre ciertos iones o molculas orgnicas grandes, que presentan interacciones significativas a concentraciones debajo de 0,01 M. Desviaciones de la ley de Beer tambin surgen porque es dependiente del ndice de refraccin de la solucin; entonces, si cambios de concentracin provocan alteraciones en el ndice de refraccin de la solucin, se observan desviaciones de la ley. Desviaciones Qumicas Aparentes Surgen cuando un analito se disocia, se asocia, o reacciona con el solvente para producir un producto teniendo un espectro de absorcin diferente del analito. Por ejemplo CrO42- en funcin del pH va a absorber diferente. Desviaciones Instrumentales Aparentes con Radiacin Policromtica Se observa una adhesin estricta a la ley de Beer solamente cuando la radiacin es monocromtica verdadera; esta observacin es otra informacin del carcter limitante de la ley. El uso de radiacin que est restringida a una longitud de onda simple es raro porque los elementos que aislan porciones de la salida de una fuente continua producen una banda mas o menos simtrica de longitudes de onda alrededor de la deseada. La derivacin siguiente muestra el efecto de la radiacin policromtica de la ley de Beer. Consideremos un haz que consiste de dos longitudes de onda y . Suponiendo que la ley de Beer se aplica estrictamente para cada una de estas individuales, se puede escribir para A = log I 0 = b c I o I 0 = 10 b c I I = I 10 b c 0

Igualmente para A = log I 0 = b c I o I 0 = 10 b c I I = I 10 b c 0

Cuando una medida de absorbancia se realiza con una radiacin compuesta por ambas longitudes de onda, la intensidad del haz emergente de la solucin viene dada por (I + I) y la del haz procedente del solvente por (I0 + I0). Por lo tanto, la absorbancia medida Am de la muestra es: A m = log (I + I ) (I + I ) 0 0 0 0 = log = log (I + I ) - log (I 10 b c + I 10 b c ) 0 0 0 0 b c + I) 10 10 b c ) (I (I 0 + I0

De manera que la absorbancia medida es un rango (error de medicin instrumental). Es conveniente hacer las mediciones en un mximo del espectro, para tener mayor sensibilidad y menor error. 8

Tipos Generales de Instrumentos Para Mediciones de Absorcin Molecular Ver en libros de texto de Anlisis Instrumental esquemas de equipos de simple haz y de doble haz. Titulaciones Fotomtricas Las mediciones fotomtricas o espectrofotomtricas se pueden emplear para localizar el punto de equivalencia de una titulacin, siempre que el analito, el reactivo o el producto de la titulacin absorban radiacin. Alternativamente un indicador absorbente puede proveer el cambio necesario de absorbancia para la ubicacin del punto final. Curvas de Titulacin Una curva de titulacin fotomtrica es un grfico de absorbancia, corregida por cambios de volumen, como una funcin del volumen del titulante. Si se eligen las condiciones adecuadamente, la curva consistir de dos regiones de lneas rectas con pendientes diferentes, una que ocurre al comienzo de la titulacin y la otra ubicada ms all de la regin del punto de equivalencia; se toma el punto final como la interseccin de las porciones lineales extrapoladas. A A A

1 A A

2 A

1: Analito no absorbe; reactivo titulante absorbe; producto no absorbe. A = P = 0, T > 0 2: Analito no absorbe; reactivo titulante no absorbe; producto absorbe. A = T= 0, P > 0 3: Analito absorbe; reactivo titulante no absorbe; producto no absorbe. T = P = 0, A > 0 4: Analito absorbe; reactivo titulante absorbe; producto no absorbe. A > P > 0, T = 0 5: Analito no absorbe; reactivo titulante absorbe; producto absorbe. A = 0, T > P >0 6: Analito no absorbe; reactivo titulante absorbe; producto absorbe. A = 0, P > T >0

Bibliografa Qumica Analtica Cuantitativa, Day and Underwood. Qumica Analtica, Skoog and West. Anlisis Instrumental, Douglas R. Skoog and Donald M. West.

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