FACULTAD DE FARMACIA Y BIOQUIMICA

INFORME DE PRCTICA TEMA: dosaje etlico

CURSO: toxicologa i

DOCENTE: rojas Villacorta mara elena

CICLO: VIII

Alumna: AVALOS mEREGILDO HERMIN LECCA DEL AGUILA GABRIELA RICCER CUEVA ROSSMARY VILLANUEVA YEP KATHERINE

TRUJILLO 2011

DOSAJE ETLICO

I. INTRODUCCION El alcohol, vocablo derivado del rabe ALKUL significa originariamente lo ms fino, el ms delicado polvo, el cosmtico de ojos. Su nombre qumico es el de alcohol etlico (etanol) (C2H5OH). En adelante, siempre que hablemos de alcohol nos referiremos al etanol que se presenta en condiciones normales de presin y temperatura como un lquido incoloro e inflamable con un punto de ebullicin de 78C. El alcohol es un lquido incoloro, que quema al paladar, con un peso especfico de 0.79 (1 vol. % =0.8 gr%), y un punto de ebullicin de 78.3. El alcohol suele obtenerse por fermentacin de azcares, disociados en alcohol y CO2, por accin de levaduras. En su produccin tcnica, el alcohol se obtiene de la fcula, residuos de carbohidratos de la produccin azucarera (melaza) o a partir de sulfuros alcalinos desprendidos en la fabricacin de la celulosa. El alcohol es energticos: 1 gr. Contiene 29,6 Kj. (Kilo joule), que es igual 7,07 Kcal. (1) II.- FARMACOCINTICA DEL ALCOHOL. El alcohol se forma de modo endgeno en el organismo humano, aunque desde luego, en cantidades muy reducidas. Se estima que la mxima alcoholemia basal es de 0,015 0/00, estos valores son tan bajos, que caen dentro del espectro del procedimiento y pueden ser, por ello despreciados. El alcohol se absorbe relativamente de prisa por las mucosas, la absorcin ms lenta ocurre a nivel de la mucosa gstrica y la ms rpida a nivel de la mucosa del intestino delgado. Tras su administracin oral, el alcohol se absorbe en un 20% aproximadamente a travs del estmago y el resto pasa por el intestino delgado. Todo aquello que retrasa el vaciado gstrico demora tambin la absorcin del alcohol ingerido. Pequeas cantidades de alcohol pueden ser ya absorbidas al cabo de 10 minutos.- Un fuerte consumo de tabaco y determinadas especies fuertes determinan el retraso de la absorcin (inhibicin de la motilidad gstrica, pilorospasmo.

La absorcin depende de la concentracin del alcohol: los alcoholes ms concentrados se absorben ms de prisa que los de menor concentracin. En cualquier caso, la pared muscular del estmago ve limitada su funcin por la accin de lquidos cuya concentracin supere 5%, con lo cual se demora el vaciado gstrico. Con el estmago lleno, especialmente despus de una comida rica en grasas, desciende considerablemente la velocidad de absorcin.-Dosis muy elevadas de alcohol provocan mediante el pilorospasmo, el retraso del vaciado gstrico. III.-DISTRIBUCIN DEL ALCOHOL. Una vez absorbido, el alcohol es distribuido desde la corriente sangunea y por difusin a travs de los tejidos. Cuando todos los tejidos estn bien vascularizados, sobreviene la rpida distribucin (difusin) dentro del agua total del organismo, lo que determina la cada acelerada de la alcoholemia (cada de difusin). La distribucin del alcohol en cada uno de los tejidos individualmente considerados vara mucho, y depende sobre todo de su contenido acuoso. Esto slo es vlido para la fase postabsortiva. Durante la fase de absorcin, desempea un papel considerable el grado de irrigacin de cada rgano. La concentracin hemtica de alcohol alcanza su punto mximo a los 30-60 minutos de su administracin oral. A continuacin, la distribucin se realiza de forma relativamente rpida y regular por todo el organismo. El alcohol atraviesa la placenta, lo que posibilita su paso al torrente circulatorio del feto. A los 60-90 minutos de la ltima ingesta de alcohol ha terminado su distribucin por todo el cuerpo, desde ste momento, la concentracin de alcohol en sangre se corresponde ampliamente con la de los tejidos. Esta depende de: La cantidad de alcohol. La velocidad de absorcin. El peso corporal o de la cantidad de agua del organismo. La cantidad de eliminacin del alcohol.

El contenido alcohlico del cerebro se corresponde fundamentalmente con la alcoholemia. El ascenso y descenso de la concentracin alcohlica en el lquido siguen, con cierta demora, a los correspondientes en sangre, la concentracin alcohlica ms alta tiene lugar en la corteza cerebral. La concentracin enlica en el hgado es especialmente baja esto se debe al elevado contenido heptico de alcohol deshidrogenasa (ADH). La concentracin de alcohol en orina no guarda ninguna relacin constante con la alcoholemia. Durante la fase de absorcin, es ms baja que en sangre. En la

fase de eliminacin, el alcohol urinario es superior a la alcoholemia, desempeando factores adicionales como: la diuresis y en el momento de la ltima miccin. (3) IV.- METABOLISMO DEL ALCOHOL. El alcohol ingerido produce sobre el organismo una accin DEPRESORA del Sistema Nervioso Central, aunque la opinin corriente sostiene que a pequeas dosis dicho frmaco es un estimulante nervioso pues aumenta la actividad del sujeto, esa opinin es errnea puesto que estudios cuidadosos han demostrado que el alcohol es un depresor y que la aparente estimulacin se debe a la LIBERACIN de los Centros Inferiores por depresin de los Centros Corticales superiores, que normalmente ejercen una influencia inhibidora sobre los primeros, en una palabra, se trata de una parlisis del freno. El efecto txico del alcohol, est en relacin directa por: Sexo de la persona. Edad de la persona. Cantidad de alcohol ingerido. Presencia de alimentos en el estmago de la persona que ha ingerido. Concentracin de alcohol en la bebida que se ha ingerido. Tiempo en consumirse una cantidad especfica de etanol.

La ingestin excesiva de alcohol durante periodos prolongados conduce a carencias en la nutricin y en otras necesidades orgnicas, lo cual complica por la aparicin de trastornos psquicos, complicaciones somticas o la aparicin de conflictos en sus relaciones interpersonales, sus funciones sociales y laborales. Desarrollndose un alcoholismo crnico en dicho sujeto, con la diferencia especial que en estos casos pueden llegar a desarrollarse secuelas morbosas tales como: Hepatopatas. Hepatitis alcohlicas. Cirrosis hepticas. Pancreatopatas. Miocardiopatia alcohlica, etc.

V.-DOSAJE ETILICO.- Concepto. El dosaje etlico es el procedimiento qumico que determina concentracin de alcohol por litro de sangre, expresada en gr/Lt, conocida como ALCOHOLEMIA. Si se sobrepasa el nivel de alcoholemia, que en el Per se ha fijado legalmente en 0,5 g/l (cinco decigramos de alcohol por litro de sangre), se infringe la Ley. El dosaje etlico es una pericia toxicolgica indispensable para demostrar que los accidentes han ocurrido a consecuencia de la ingesta de alcohol. La toma

de muestras (sangre, orina y otros) debe hacerse en el menor tiempo posible, a fin de obtener resultados que se ajusten a la realidad. Para la prueba de dosaje etlico, se puede utilizar sangre, humor vtreo, vsceras etc. El humor Vtreo es una muestra muy utilizada en la evaluacin de la concentracin de alcohol en casos de autopsia, por tener una concentracin cercana a la sangre. El anlisis cuali-cuantitativo de alcohol etlico en sangre constituye en la actualidad una de las prcticas ms utilizadas en el mbito de laboratorios forenses alrededor del mundo. En los ltimos decenios el alcohol ha sido investigado en una gran variedad de matrices biolgicas, tanto convencionales como no convencionales. Hemos podido confirmar en la literatura internacional su anlisis en sangre, orina, contenido estomacal y pared estomacal, humor vtreo, fluido cerebroespinal, saliva, aliento, sudor, msculo, hgado (lbulo izquierdo y derecho), cerebro, pulmn, corazn, rin (izquierdo y derecho) bilis, y testculos. Sin embargo, la interpretacin de los guarismos hallados permanece an bajo debate en la mayora de las muestras mencionadas, cuando debe determinarse si un individuo estuvo bajo los efectos del alcohol previo al bito. La toma de muestra es, en nuestra opinin, el factor ms importante que se debe considerar, habindose comprobado en nuestro medio ser fuente de la mayor parte de los errores que se cometen a la hora de interpretar el dato analtico. Muchos toxiclogos forenses continan repitiendo con insistencia el adagio: el resultado de un anlisis solo puede ser tan bueno como el tipo y estado de la muestra recibida. Probablemente la alcoholemia es la determinacin mejor conocida y muchos autores sugieren su determinacin inicial. No obstante, en revisiones recientes, algunos expertos opinan que la investigacin en otras matrices puede conducir a una mejor interpretacin sobre el real grado de impregnacin en un individuo, pudindose detectar situaciones (especialmente en casos postmortales) que llevaran a una errnea conclusin si solo se dispone de datos de una sola matriz. (4)

II. OBJETIVOS Determinar la presencia de alcohol etlico mediante la prueba cualitativa. Determinar la Alcoholemia, mediante la prueba cuantitativa.

III. MATERIALES Y REACTIVOS PROCEDIMIENTO CUANTITATIVO a) b) Material de laboratorio Bao mara Frascos de vidrio Pipeta semiautomtica Tips (puntos de micro pipeta) Soporte para muestras Reactivos H2SO4 Q.P. KMnO4 K2CrO7 H2O destilada

PROCEDIMIENTO CUALITATIVO a) Materiales de laboratorio Frasco de 30 ml, de color blanco, con rosca Caitas de plstico descartable (sorbetes) Pipeta de 10 ml b) Reactivos cido sulfrico N/3 Permanganato de potasio N/10

IV. METODO Y FUNDAMENTO CUANTITATIVO Mtodo Schefftel: modificado Mezcla oxidante: Sulfocromica Oxidante
3C2H5OH + 2K2Cr2O7 + 8H2SO4

H2SO4 CC. Amarillo K2CrO7 Naranja

3CH3COOH + 2Cr2 (SO4)3 + 2K2SO4 + 11H2O
Complejo coloreado

Fundamento: El anlisis se basa en la accin oxidante de la mezcla sulfocromica (K2Cr2O7--- H2SO4) sobre el alcohol etlico con formacin de cido actico y sulfato crmico, cuyo color vara del amarillo al verde en forma proporcional a la concentracin de alcohol etlico presente en la muestra, es medido en el espectrofotmetro o en el fotocolormetro a 420nm de longitud de onda o con filtro azul respectivamente.

CUALITATIVO Fundamento: Se basa en la oxidacin del etanol a cido actico, por accin de la mezcla oxidante KMnO4 y H2SO4. La reaccin se aprecia visualmente por la decoloracin de la solucin violeta de permanganato debida a la formacin de sulfatos de Mn y K.

V. PROCEDIMIENTO PROCEDIMIENTO CUANTITATIVO A. Realizar la curva de calibracin Curva de calibracin Sol. Madre:
4g100mL

4g/100ml

1mL

X1mL 4g100mL X2mL 4g100mL

X= 0.04g/100mL

4g

100ml

2mL

X= 0.08g/100mL

0.04g/1000mL 0.4g/ 1L

3mL

X3mL 4g100mL X4mL 4g100mL X5mL

X= 0.12g/100mL

4mL

X= 0.16g/100mL

5mL

X= 0.2g/100mL

1mL o 0,4 0,8

3mL 0,12 0,16

5mL 2,0 2,4

7mL 2,8 3,2

9mL 3,6

10mL 4,0 g/L

B. Preparacin de la solucin madre Densidad del alcohol: D= 0.79/ml D=W V 0.79 = 4g V V = 4g 0.79 V = 5.06mL 5.1mL (alcohol)

5.1mL (Alcohol)

94.9mL (Agua)

Solucin Madre

C. Preparacin Sulfocromica : 1L = 1000mL Pesar: 4.262g de K2CrO7. 500mL H2O Agregar: 500mL H2SO4 CC. Solo queremos 10mL de sol. Sulfocromica 0.04262g de K2CrO7 en 5mL de H2O ms 5mL de H2SO4

Solucin Sulfocromica

1. En 6 fiolas colocar: 1 fiola..1mL sol. Madre + 99mL H2O 2 fiola..3mL sol. Madre + 97mL H2O 3 fiola..5mL sol. Madre + 95mL H2O 4 fiola..7mL sol. Madre + 93mL H2O 5 fiola..9mL sol. Madre + 91mL H2O 6 fiola..10mL sol. Madre + 90mL H2O 2. 3. 4. 5. En 6 frascos colocar 1mL de sol. Sulfocrmica En un soporte colocar 100ul de muestra de cada fiola Se realiza. 1 frasco blanco + 100ul H2O Luego llevar a bao mara todos los frascos a 90 x 10 15min.

PROCEDIMIENTO CUALITATIVO (a) cido sulfrico N/3 (b) Permanganato de potasio N/10 El reactivo (a) se prepara mezclando lentamente y por partes, 125ml de cido sulfrico Q.P. sobre 250ml de agua destilada refrigerada; esto aproximadamente para unas 200 pruebas y una duracin de seis meses. El reactivo (b) deber ser de reciente preparacin; se hace disolviendo 0.31605 g, en 100 ml de agua destilada, esto para unas 400pruebas aproximadamente, y una duracin mxima de dos meses. TECNICA En un frasco de 30 ml limpio y seco, colocar 2cc. Del reactivo (a) y aadirle II gotas del reactivo (b); agitar el frasco hasta que todo el lquido se torne violceo. Enseguida hacer soplar por la caita, burbujeando por un minuto, hasta por tres veces consecutivas. Debe evitarse que se coloque saliva en el frasco, porque puede dar falso el examen.

VI. RESULTADOS PROCEDIMIENTO CUANTITATIVO Despus que se retir los frascos del bao mara se observ:
Blanco 1mL 3mL 5mL 7mL 9mL 10mL

Azul Verdoso

El resultado nos dio una coloracin azul verdosa en el frasco donde estuvo ms incrementado los valores de alcohol etlico. Esto significa que hay una formacin de sulfato cromoso (color azul verdoso), en forma proporcional a la concentracin de alcohol existente en la muestra problema, la cual es susceptible de ser medida por cualquiera de los mtodos fotomtricos.

PROCEDIMIENTO CUALITATIVO Si la solucin de color violeta intensa se decoloro completamente el resultado es positivo, dando indicios que si existe ebriedad en la persona a analizar.

VII. DISCUSIN

PROCEDIMIENTO CUANTITATIVO. a.- Ventajas. Esta prueba se caracteriza por su sensibilidad, es decir mediante el Mtodo de Schefftel Modificado se puede medir concentraciones mnimas de alcohol. Esta prueba permite la utilizacin de cualquier fluido orgnico (saliva, sangre, orina, humor vtreo). Este procedimiento es de bajo costo, comparando con los mtodos biolgicos para determinar alcohol. b.- Desventajas. Este mtodo tiene el inconveniente de ser un anlisis ciego, es decir que no se puede distinguir entre alcohol etlico y otras sustancias con radical OH, como por ejemplo el alcohol metlico. Requiere de profesionales experimentados, porque los resultados pueden dar cantidades excesivas (8 gr/Lt), lo cual demuestra que es una muestra contaminada, porque no existe organismo que pueda tolerar dichas concentraciones de alcohol etlico.

PROCEDIMIENTO CUALITATIVO La realizacin de esta prueba es sumamente efectiva y contundente, ha sido demostrada por cromatografa de gases y fotocolorimetria; pero hay que tener cuidado de ciertas consideraciones como son: La de impedir que se introduzca dentro del frasquito saliva, ya que puede decolorar la solucin dando lugar a falsos positivos o interpretaciones errneas.

VIII. CONCLUSIONES Se determin la presencia de alcohol etlico mediante la prueba cualitativa. Se determin la presencia de alcohol mediante la prueba cuantitativa.

BIBLIOGRAFIA

1. Wamba Z., Ferrari L.A, Nieto RR, Arado MG, Colangelo CH, Nardo C, Sredcoff N and Stoichevich S. Incidence of drugs of abuse and alcohol in suicides occurred in the province of Buenos Aires in 1994, 1995 and 1996. Proceedings of 35thTIAFT Meeting. University of Padova. Pp.638641 (1997). 2. Ferrari L.A. Alcohol etlico: Aspectos toxicolgicos forenses, clculos retrospectivos y modificaciones postmortem. Bol. Asoc. Toxicol. Argent. 63, 9-15 (2004). 3. The Time Evolution of Drugs in the body, Journal of Chemical Education. 4. Manuel Litter. Tratado de farmacologa. 4ta Edicin. El Ateneo.1971.