CITOMEGALOVIRUS

HISTORIA
Fue descrito inicialmente en 1900 por Ribbert catalogndolo como un protozoario (Entamoeba mortinatalium). 1920 Goodpasture postulo la etiologa viral . Fue aislado en cultivos de tejido en 1956 .

1960 Weller : Citomegalovirus.

1970 y 1980 : se le dio el rol de patgeno importante.

CITOMEGALOVIRUS
CLASIFICACIN. FAMILIA: Herpesviridae SUBFAMILIA: Betaherpesvirinae GNERO: Cytomegalovirus NOMBRE OFICIAL: Herpes virus humano 5 NOMBRE COMN: Citomegalovirus

Clasificacin de Herpes

CITOMEGALOVIRUS
CARACTERISTICAS BIOLOGICAS De lento crecimiento Produce en la clula efecto citomeglico Permanece latente en glndulas secretoras y rin. Se replica in vitro solo en fibroblastos humanos. Virus tiene ciclo reproductivo largo

ESTRUCTURA VIRAL: Semejante al resto de los herpes virus, siendo el de mayor tamao.

PROTEINAS DEL CMV.

Codifica unas 230 protenas ,aunque solo unas pocas estn identificadas.

DNA polimerasa Fosfotransferasa( fosforila a Ganciclovir) Protenas estructrales Nucleoprotenas Protenas que regulan e inhiben la respuesta inmune.

ESTRUCTURA
Glicoproteina G-H

MECANISMO
Ciclo biolgico Entrada por endocitosis dentro de la clula (se desconoce la protena que interacta, pero son receptores especficos). Retirada de cubierta lipoproteica y cpside en el citoplasma, quedando el virin con su ADN dentro. Transporte del DNA y nucleoprotenas al ncleo celular. Produccin de DNA polimerasa viral. Replicacin viral: se transcribe el ADNviral a ARN, y en el citoplasma se codifican las protenas del virus, que ensamblan dando como resultado los nuevos CMV.

TRANSMISIN
puede ser:

fetal

perinatal

respiratoria

sexual

trasfusiones de sangre

a travs de secreciones cervicales y por la leche materna

semen y secreciones cervicales

trasplante de rganos.

EPIDEMIOLOGIA
- Infeccin congnita - perinatal En nios Asintomtica - Subclnica Adultos sanos: M.Inf. similar Trasplantados Inmunodeprimidos SIDA

CUADRO CLINICO EN NIOS

En los neonatos se manifiesta por inmadurez del sistema inmunolgico, infecciones oportunistas por la prescripcin de esteroides o trasmisin transversal despus de la rotura prematura de membranas

La diseminacin del citomegalovirus produce necrosis focal, con inflamacin mnima de todos los rganos, los ms afectados son: las glndulas salivales, el rin, los pulmones, el hgado y el intestino. En los pulmones provoca neumona intersticial, con edema intralveolar y membranas hialinas.

INFECCINCONGNITA. Ocurre en 1 a 3 % de todas las gestaciones a nivel mundial. Desarrollan sintomatologa: slo 25% de los nios infectados

M ANIFESTACIONES CLNICAS: Hepatoesplenomegalia, ictericia, exantema petequial, microcefalia Afectacin del oido interno, alteraciones motoras, Coriorretinitis y microcalcificaciones cerebrales

CUADRO CLINICO EN ADULTOS

INMUNOCOMPETENTE

* asintomtico o * s. Mononuclesico (la > frecuente tras neonato)

similar a mononucleosis infecciosa,< faringoamigdalitis y adenopatas. Raras complicaciones, similares a la M.I. INMUNODEPRIMIDOS
colitis, hepatitis, neumona, lceras digestivas, retinitis, rechazo. (1-6 m. Postrasplante)

 Hay que sospechar el CMV si un paciente: tiene sntomas de mononucleosis infecciosa pero tiene resultados negativos en las pruebas para la mononucleosis y el virus de EpsteinBarr, y muestra signos de hepatitis, pero tiene resultados negativos en las pruebas de la hepatitis A, B y C.

DIAGNOSTICO
Primoinfeccin: * Dx: Acs. tipo IgM (tras 4 s. primoinfeccin)
* Acs. IgG (persisten muchos aos)

Reinfeccin: muchas limitaciones:

en inmunocompetentes no se producen Acs. IgM en inmunodeprimidos se producen Acs. IgG.

Actualmente la tcnica dx. mejor es la deteccin

del Ag del virus pp65, en leucocitos de sangre; y PCR del DNA viral en sangre o LCR (si hay afectacin del SNC )

PRUEBAS DE DETECCION
ELISA MEIA Inmunofluorescencia la hemaglutinacin indirecta y la aglutinacin en ltex. PCR Cultivos celulares

PRUEBAS DE DETECCION

DIAGNOSTICO
La muestra puede tomarse
orina, saliva, lquido de lavado bronquial, sangre perifrica y biopsia de tejidos

CMV solo crece en cultivo de fibroblastos humanos en 4 a 6 semanas.

Hallazgo histolgico: Clula citomeglica en ojo de buho.

CULTIVO
El primer procedimiento desarrollado fue el aislamiento por cultivo convencional (CC) en fibroblastos de origen humano crecidos en tubos. Es un mtodo lento, ya que puede demorar hasta seis semanas en detectarse el efecto citoptico (ECP). Este procedimiento fue posteriormente mejorado mediante el cultivo
rpido en shell vial (SV) que consiste en la centrifugacin de la muestra sobre monocapas de fibroblastos crecidas en cubreobjetos. Este mtodo combina el aislamiento ms la deteccin del antgeno temprano p72 por inmunofluorescencia a las 24 y 48 hs de cultivo, antes de la aparicin del ECP. Esto represente una enorme ventaja para definir conductas teraputicas, constituyendo el mtodo de eleccin en muchos laboratorios que consideran al SV como ms sensible que el CC.

 Determinacin de antigenemia pp65 y de la deteccin del genoma por mtodos moleculares. Estos ltimos permiten obtener resultados positivos ms rpidamente que el aislamiento por cultivo y presentan ventajas tcnicas, por lo que se emplean actualmente en el diagnstico en inmunocomprometidos junto con el aislamiento.

CMV IgM
Prueba ELISA para la deteccion de ac .IgM contra citomegalovirus. 1ero: Ser recubre con CMV antigenos. En la 1era etapa de Incubacion : Los ac .contra CMV se fijan a los antigenos inmovilizados. Al final los componentes excesivos son eliminados por lavado. 2da etapa: Se aade el conjugado Anti-IgM (marcados con peroxidasa) formacion de inmunocomplejos , lavar. 3era etapa : Aadir el sustrato ,se forma un color azul que pasa a amarillo despues de parar la reaccion. La intensidad de color es directamente proporcional a la cantidad de anticuerpos anti-CMV IgM presentes en la muestra.
Nota : El buffer de dilucin contiene anti IgG humana para prevenir interferencia de factor reumatoideo y competencia IgG especifica presente en la muestra .

Tcnica: ELFA
El procedimiento se basa en la determinacin inmunoenzimtica de las inmunoglobulinas en suero por tcnica ELFA (Enzyme Linked Fluorescent Assay). Para los anlisis correspondientes se emple el Sistema VIDAS() y los kits correspondientes (VIDAS( ) CMV IgG y VIDAS() CMV IgM). Estos kits permiten medir cuantitativamente las IgG/IgM anti-CMV en suero humano. Tras la etapa de pipeteo de la muestra los anticuerpos presentes (IgG IgM, segn corresponda) van a fijarse al antgeno CMV de la pared interna del cono (fase slida). En las etapas de lavado se eliminan los componentes no fijados. El anticuerpo monoclonal humano (anti-IgG anti-IgM, segn corresponda) marcado con fosfatasa alcalina es aspirado y expulsado dentro del cono y se va a fijar a las IgG IgM anti-CMV humanas fijadas en la pared del cono. En una nueva etapa de lavado se vuelven a eliminar los componentes no fijados. En la etapa final, el sustrato (4-Metil-umbeliferil fosfato) es aspirado y despus expulsado en el cono; el enzima del conjugado cataliza la reaccin de hidrlisis de este sustrato en un producto (4-Metilumbeliferona) cuya fluorescencia emitida es medida a 450 nm. La fluorescencia emitida medida es directamente proporcional a la presencia de inmunoglobulinas anticitomegalovirus en sangre. Resultado positivo un ndice: igual o superior a 4 Ua/mL para la IgG e igual o superior a 0,07 Ua/mL para la IgM

 La deteccion de Ac.especificos para IgM recientes o reactivada . FALSOS POSITIVOS : Inducidos por factor reumatoide ,ac anti nucleares y otros factores.

TRATAMIENTO
Se dispone de frmacos con actividad anti-CMV como el

ganciclovir

el foscarnet

el valaciclovir

Lo mas eficaz para prevenir este tipo de virus es el:

Lavado de manos

GANCICLOVIR :Es un nuclesido anlogo de la guanosina,similar al aciclovir. CMV

fosforila el frmaco mediante fosfotransferasa, y las ulteriores fosforilaciones se llevan a cabo por enzimas celulares. Por tanto slo acta en clulas infectadas.

TRATAMIENTO

Ganciclovir-TP (trifosfato) es un potente inhibidor de la DNA-polimerasa del CMV, impidiendo o enlenteciendo la elongacin de la cadena de DNA VALGANCICLOVIR:Es un ster de ganciclovir con buena biodisponibilidad por va oral. FOSCARNET:es un pirofosfato con capacidad para unirse directamente a la DNA polimerasa de los herpesvirus incluyendo CMV. Se trata de una inhibicin competitiva reversible, por lo que las concentraciones de Foscarnet deben permanecer altas en todo momento. Hay cepas resistentes a este antiviral, pero la resistencia no es cruzada con Ganciclovir

PROFILAXIS
Utlizacin de rganos y productos sanguneos de donantes seronegativos en receptores seronegativos - Inmunizacin pasiva con inumnoglobulinas en trasplantados - Aciclovir o ganciclovir en trasplantes de rganos slidos mdula sea. - Vacunas en estudio (no disponibles)

GRACIAS