QU ES? Material a estudiar: observacin de la piel luego de la colocacin de un lazo interrumpiendo la circulacin venosa.

Descripcin de la prueba: se mantiene elevada la presin en un miembro por un perdo de 5 minutos, con un lazo o un manguito inflable. Luego se realiza el recuento de las petequias (pequeas manchas hemorrgicas en un crculo de 5 cm de dimetro). Tiempo insumido al paciente: 5 a 10 minutos. Finalidad: determinar la fragilidad de las paredes capilares, estimar la tendencia a la hemorragia. Ayuda a reconocer la trombocitopenia. Preparacin previa: no es necesaria. No repetir en el mismo miembro antes de los 7 das. Resultados: Valores normales: ninguna petequia o hasta diez petequias en un rea de 5 cm. Escala para informar el nmero de petequias: 0 a 10 = 1+ 10 a 20 = 2+ 20 a 50 = 3+ 50 o ms petequias = 4+ Valores aumentados: pueden indicar coagulacin intravascular difusa, disminucin del fibringeno, disminucin de la protrombina, deficiencia de factor VII, trombocitopenia, tromboastenia, enfermedad de Von Willebrand, deficiencia de vitamina K. Y puede estar asociado a afecciones no relacionadas con los trastornos de la coagulacin como: escarlatina, hipertensin, diabetes, gripe, sarampin, escorbuto. Confiabilidad de los resultados: buena. Medicamentos que pueden alterar los resultados: Corticoesteroides.

LABORATORIO DE ANALISIS CLINICOS. Nombre: Tiempo de coagulacin y tiempo de sangrado Objetivo: El alumno determinar el tiempo de sangrado y coagulacin para verificar los valores normales y la importancia de su determinacin en la eficiencia global del mecanismo de coagulacin. MATERIAL Lancetas estriles Papel filtro u otro papel absorbente Tubos de ensaye Cronmetro Jeringa Torundas de algodn Bao mara a 37 C Introduccin: TIEMPO DE COAGULACIN DE LA SANGRE COMPLETA. Esta prueba suministra un indicio aproximado de la eficacia global del mecanismo intrnseco de la coagulacin. Se encuentran tiempos prolongados en la hemofilia clsica y en la deficiencia del factor IX durante la hemorragia. La prueba carece de valor para las insuficiencias ligeras de distintos factores, por que basta una cantidad pequea de trombina para producir un cogulo de fibrina. Es menos til para las anomalas de las ultimas etapas de la coagulacin (factores V, X o II), pues dichas etapas son rpidas en comparacin con las primeras. La coagulacin requiere solamente un pequeo nmero de plaquetas normales, por lo tanto, el tiempo de coagulacin es normal en la prpura trombocitopnica. METODO DE LEE Y WHITE. 1.-Se extrae sangre venosa con una jeringa de vidrio limpia y seca, utilizando una aguja gruesa (nm. 18 19). La puncin debe ser perfecta, pues la contaminacin con linfa modifica los resultados. Se pone en marcha un crongrafo en cuanto la sangre penetra en la jeringa, pues en este momento inicia la coagulacin sangunea. 2.-Se retira la aguja y se pone 1ml de sangre en cuatro tubos de ensayo secos, qumicamente limpios de 10X1cm, colocados en una gradilla en bao Mara a 37oC. 3.-3minutos despus, y reduciendo al mnimo el tiempo que los tubos se encuentren fuera del agua, se les inclina uno por uno cada 30 segundos (en el laboratorio utilizamos un aplicador de madera que introducimos en el tubo para evitar sacarlos, envs de estarlos inclinando). Se evita la agitacin, que podra prolongar el tiempo de coagulacin. Este corresponde al momento en que resulta posible invertir los tubos sin que se derrame su contenido (en nuestra practica es el momento en el que al sacar el aplicador aparece un hilillo de fibrina).Se anota separadamente el tiempo de coagulacin de cada tubo, y la cifra definitiva es el promedio de los cuatro resultados Cifras normales de este mtodo de 4 a 10 minutos. Con las modificaciones de clase es de 3 a 6 minutos. TIEMPO DE SANGRADO. Un tiempo de sangrado normal indica una retraccin normal de los capilares, y la existencia de un nmero suficiente de plaquetas, con actividad normal. El tiempo de sangrado se prolonga en la insuficiencia del factor VII; aumenta en la prpura trombocitopnica y suele ser un poco mayor en la prpura no trombocitopnica y la trombastemnia de Glanzmann. SUSTANCIAS: Etanol

Puede presentarse un ligera prolongacin del tiempo de sangrado cuando existen insuficiencias pronunciadas de otros factores.

METODO DE IVY PARA EL TIEMPO DE SANGRADO. 1.-Se pone alrededor del brazo un manguito de esfigmomanmetro, con la que se ejerce una presin 40mm de Hg, que debe permanecer igual durante toda la prueba. 2.-Utilizando una lanceta se hacen a intervalos cortos tres punciones (entre 2.5 y 3mm de profundidad) a lo largo de la cara flexora del antebrazo, evitando las venas visibles o las lesiones cutneas. Se echa a andar el cronmetro. 3.-A intervalos de medio minuto, utilizando papeles filtro distintos, se seca cuidadosamente cada gota de sangre con el papel evitando tocar la piel; el punto final es cuando el disco de papel ya no absorbe sangre. Se toma la media de los tres tiempos. El tiempo normal es entre 2 y 6 minutos mxima 7. En clase es de 3 minutos. CONCLUSIONES.-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------

NOMBRE DEL ALUMNO:__________________________SEM. Y GPO.____________ FECHA DE REALIZACIN:_________________________

________________________________ firma del maestro

LABORATORIO DE ANALISIS CLINICOS. Nombre de la prctica: Determinacin de TP y TPT. Objetivo: El alumno realizar la determinacin de TP y TPT como un medio para evaluar el sistema de coagulacin de un paciente. Material: Pipeta Pasteur Tubo con citrato de sodio al 3.8% Tubos de ensayo de 12X75 . Pipeta automtica de 0.1 ml. Pipeta automtica de 0.2 ml. Bao Mara a 37 C . Introduccin: TIEMPO DE PROTROMBINA Es la mejor prueba de sondeo para anormalidades de la va extrnseca. Mide la activacin del factor X por el factor tisular y el complejo del factor VIIa, tambin las reacciones restantes de la va comn. Mide los factores I, II, V, VII y X. El TP es una determinacin analtica que se efecta antes de una intervencin quirrgica para determinar problemas hemorrgicos potenciales; un TP prolongado es indicativo de un nivel disminuido de uno o ms factores del sistema extrnseco cuya causa puede deberse a trastornos hereditarios de la coagulacin, deficiencia de vitamina K, enfermedad heptica o a la administracin de medicamentos. SIMPLASTIN EXCEL. Es un reactivo de tromboplastina tisular (cerebro de conejo) que contiene iones de calcio y estabilizantes en un tampn adecuado, se utiliza en la prueba monofsica modificada del tiempo de protombina. El principio de esta prueba es que esta sustancia es sensible a las deficiencias del sistema extrnseco de la coagulacin. No es sensible a las deficiencias del sistema intrnseco ni a las disfunciones de las plaquetas. No se puede utilizar para controlar la terapia con heparina. Para reconstruir el contenido del reactivo debe de coincidir la s etiquetas del vial y el diluyente, agitar enrgicamente para asegurar su rehidratacin completa, antes de utilizarlo se debe de volver a mezclar. Se debe conservar (cerrado hermticamente) a 2-8oC durante mximo 4 das. El diluyente contiene estabilizantes y preservativos para garantizar la sensibilidad y estabilidad del producto, contiene azida sdica (NaN 3) como conservante. Nota: Cuando se vierta por el desage hay que hacer fluir gran cantidad de agua ya que forman azidas metlicas que cuando estn altamente concentradas en las tuberas metlicas pueden resultar explosivas. Preparacin de la muestra: se aaden nueve partes de sangre a una de anticoagulante (citrato de sodio), se mezclan, se centrifugan y se separa el plasma de las clulas y se realiza la prueba antes de 4 horas desde la extraccin. PROCEDIMIENTO DE ENSAYO. PROCEDIMIENTO MANUAL PARA DETERMINACIN DE TP 1.-Preincubar a 37oC un volumen suficiente de Simplastin Excel (0.2ml/prueba). Evitar evaporacin y no mantenerlo a 37oC destapado por ms de 60. 2.-Rotular el tubo de ensayo con todos los datos. 3.-Pipetear 0.1ml de muestra al tubo apropiado. 4.-Incubar cada muestra a 37oC durante 2-3. Sustancias: Reactivo para TP. Reactivo para TPT. Plasma citratado CaCl2 al 0.025M

5.-Pipetear 0.2ml de reactivo para TP y simultneamente poner el cronmetro en marcha hasta la deteccin del cogulo. 6.- Anotar el tiempo transcurrido en segundos. Se debe emplear material exclusivo de vidrio o plstico limpio ya que se requiere la mxima garanta de ejecucin y se debe hacer por duplicado. El intervalo normal es de 10-14 segundos. Pero cada laboratorio debe establecer sus propios valores de control y precisin en base al mtodo empleado y a las propias condiciones operarias. TIEMPO DE TROMBOPLASTINA PARCIAL Esta es la prueba de eleccin para descubrir anormalidades en la va intrnseca. La prueba mide todos los factores excepto VII y XIII. AUTOMATED APTT. Es un reactivo de factor plaquetario 3 (fosfolpidos de cerebro de conejo), conteniendo un activador particulado (slice micronizada) y un tampn (cidoN-2 hidroxietilpipeazida-N-2 estanolsulfnico) apropiado. Se utiliza en determinacin de tiempo de tromboplastina parcial activada, se usa para la valoracin de los factores del sistema intrnseco, tiene especial sensibilidad para la presencia de heparina lo que la hace muy til para le control de la teraputica anticoagulante por heparina. Para su reconstruccin se utiliza el volumen indicado de agua destilada en el vial, se agita vigorosamente hasta que se completa la hidratacin y suspencin de las partculas de slice; antes de usarlo se debe agitar de nuevo y una vez reconstituido anotar su fecha de caducidad de una semana a la fecha realizada. Preparacin de la muestra: en un tubo limpio poner una parte de citrato de sodio al 3.8% , aadir nueve partes de muestra, centrifugar y separar el plasma, las pruebas deben completarse dentro de las 4 horas siguientes a la obtencin de la muestra. TCNICA MANUAL PARA LA DETERMINACIN DE TTP 1.-Calentar a 37oC un volumen suficiente de CaCl2 0.025M. 2.-Rotular un tubo de ensayo con todos los datos y realizar la prueba por duplicado. 3.-Dispersar 0.1ml de plasma a su tubo correspondiente y aadir 0.1ml de automated APTT. 4.-Incubar a 37oC durante 5. 5.-Inmediatemente despus aadir 0.1ml de solucin de CaCl2, simultaneamente poner el cronmetro en marcha y determinar la formacin del coagulo. 6.-Anotar el tiempo en segundos. Cada laboratorio debe establecer sus normales para est prueba. NORMALES: TP=10-14 SEG. . TPT=25-43 SEG. CONCLUSIONES: ________________________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________________________ __________________________________ NOMBRE DEL ALUMNO:__________________________SEM. Y GPO.____________ FECHA DE REALIZACIN:_________________________

___________________________ VoBo del maestro LABORATORIO DE ANALISIS CLINICOS I Nombre: determinacin de fibringeno. Objetivo: El alumno realizar la determinacin del fibringeno como una tcnica ms que valora el sistema de coagulacin de un individuo. Material: Capilares azules. Mechero de Bunsen. Bao Mara. Pipeta Pasteur. Perilla de seguridad Tubos de ensayo. Tubo con citrato de sodio 3.8%. Introduccin: El fibringeno es una globulina grande, pertenece a l grupo de protenas fibrilares. Las cifras normales de este en plasma oscilan entre 200 y 500 mg por 100ml (en promedio 300 mg). Por exposicin a la trombina el fibringeno pierde dos pptidos, quedando un monmero de fibrina que se polimerizan a base de puentes de hidrgeno, el reforsamineto final de la fibrina polimerizada se debe al factor XIII (factor estabilizador de la fibrina), que crea enlaces covalentes dentro del polmero de fibrina. El fibringeno aumenta en sangre en varios estados como: inflamacin mieloma mltiple, nefrosis, embarazo. El fibringeno de la sangre puede disminuir en los trastornos que se acompaan del paso a la circulacin de grandes cantidades de tromboplastina tisular, que produce la transformacin generalizada del fibringeno en fibrina sin trombosis local. El tejido placentario, la decidua y el tejido pulmonar son muy ricos en tromboplastina tisular; los cuadros clnicos de disminucin de fibringeno (fibrinogenopenia) son: a) obsttricos: aborto incompleto, retencin de restos placentario etc. b) consecutivos a intervencin sobre el pulmn: decorticacin por engrosamiento de la pelura, extirpacin de un tumor, etc. c) transfusin de sangre incompatible. d) quemaduras extensas. e) cncer de prstata. f) sndromes trombohemoliticos microangiopticos Estos casos pueden producirse hemorragias mortales si la cifra sangunea de fibringeno no se restablece mediante transfusin de concentrados de fibringeno. En el sndrome de fibrinogenopenia adquirida disminuyen al mismo tiempo las plaquetas y los factores V y VIII. Fibrinogenopenia congnita: Esta enfermedad se hereda como un rasgo recesivo no ligado al sexo. No es raro que los padres sean consanguneos, en esta la insuficiencia no es absoluta. Es probable que la enfermedad se traduzca por sangrado anormal de las heridas que tocan a los grandes vasos: al nacimiento, por el cordn umbilical; ms tarde, despus de traumatismos u operaciones. Habitualmente el sangrado de los vasos pequeos es normal en estos casos, es combatido por la vasoconstriccin y trombos de plaquetas. Sustancias: plasma citratado

Sin embargo en algunos casos de fibrinogenopenia congnitas los cortes y traumatismos ligeros pueden producir pueden producir hemorragias rebeldes. El fibringeno en suero fisiolgico por va intravenosa, es ms eficaz que la sangre fresca completa para combatir el sangrado en los fibrinogenopnicos. El tiempo de coagulacin de la sangre completa y el tiempo de protombina resulta prolongados; pero el tiempo de sangrado, la prueba del torniquete y las pruebas de produccin de tromboplastina resultan normales. El tiempo de trombina se prolonga y la retraccin del cogulo es inadecuada. En una hemorragia por fibrinogenopenia se encuentran cifras plasmticas inferiores a 100 mg por 100ml (habitualmente menos de 80mg por 100ml). Todos estos resultados son correspondientes al la fibrinogenopenia. El fibringeno es producido por el hgado y en las enfermedades hepticas graves puede disminuir ligeramente su concentracin en plasma, aunque este descenso raras veces basta para producir hemorragia. De hecho las enfermedades hepticas menores pueden aumentar el fibringeno en plasma. Puede presentarse un descenso rapidsimo del fibringeno plasmtico hasta cifras de hemorragia, en la atrofia amarilla aguda, bien sea por toxemia gravdica o por intoxicacin con tetracloruro de carbono, cloroformo o fsforo. Cerca del 75 por 100 del fibringeno inyectado abandona la circulacin al cabo de seis das. Desarrollo: 1.-Tomar la muestra de sangre venosa y colocarla en un tubo con citrato de sodio al 3.8% (tubos vacutainer azules). 2.- Centrifugarla durante 5 y separar el plasma en un tubo seco y limpio 3.-Llenar las un capilar seco (azul) y sellar por un lado, evitando que la muestra se queme. 4. Centrifugar como si se tratara de un hematocrito 5.-sellar el otro extremo del capilar y llevarlo a incubar a 58 C durante 15 minutos Procura que el agua del bao mara cubra la muestra. 6.- Transcurrido el tiempo de incubacin, poner en la microcentrifuga durante 5 . 7.-Con una regla medir el total de la muestra y lo que corresponde al fibringeno (precipitado blanco) en mm, con stos datos realizar el siguiente clculo:. Altura del fibringeno en mm _______________________________X 100 ( 48.3) = mg/ dl Altura total del plasma en mm Conclusiones:

______________________________________________________________________ NOMBRE DEL ALUMNO:__________________________SEM. Y GPO.____________ FECHA DE REALIZACIN:________________________

___________________________ VoBo del maestro