Universidad Privada Norbert Wiener

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD ESCUELA ACADEMICO PROFECIONAL DE TECNOLOGIA MDICA LABORATORIO CLINICO YANATOMIA PATOLOGICA

Asignatura: Bioquimica II

Seccin: LC5N1

Semestre: 2011-II

ALUMNO: Bautista Borda Carlos Daniel

DOCENTE: Cesar Augusto Plasencia Vega

2011

BIOQUIMICA CLINICA II

Universidad Privada Norbert Wiener I. INTRODUCCION: MARCOTEORICO La bilirrubina es un pigmento biliar de color amarillo rojizo que resulta del metabolismo de la hemoglobina. Dicho metabolismo inicia con la descomposicin de los glbulos rojos y luego es transportada por la albmina en la sangre hasta el hgado.

La bilirrubina es poco soluble en agua. Es sensible a la luz y se descompone en presencia de sta. Cuando la bilirrubina se conjuga en el hgado con cido glucurnico, da origen a la llamada bilirrubina conjugada o directa, la cual es excretada en la bilis por el hgado y almacenada en la vescula biliar o transferida directamente al intestino delgado.

La bilirrubina es descompuesta posteriormente por bacterias en los intestinos, contribuyendo al color caracterstico de las heces. Un pequeo porcentaje de estos compuestos es reabsorbido por el cuerpo y finalmente excretado a travs de la orina.

La bilirrubina no conjugada recibe tambin el nombre de bilirrubina indirecta. Cuando se eleva la bilirrubina, la piel y los tejidos adquieren un color amarillo denominado ictericia.

Los exmenes de bilirrubina total (directa ms indirecta), sirven para determinar si una persona padece alguna enfermedad heptica (elevacin de la bilirrubina no conjugada) o un problema de la vescula biliar (elevacin de la bilirrubina conjugada).

Este examen se realiza en el contexto de otras pruebas hepticas como: GOT, GPT, GGT, fosfatasa alcalina y el paciente no debe consumir alimentos en las 4 horas anteriores al examen.

Los valores normales de bilirrubina son los siguientes: Bilirrubina directa (0,1 a 0,3 mg/100 ml); Bilirrubina indirecta (menor de 1,0 mg/ml); Bilirrubina total (0,3 a 1,0 mg/100 ml).

Los resultados del examen pueden verse afectados por el uso de algunos antibiticos, diurticos, anticonceptivos orales, esteroides anablicos, entre otros. Los barbitricos, cafena y penicilina tambin disminuyen las mediciones de bilirrubina.

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Universidad Privada Norbert Wiener METABOLISMO DE LA BILIRRUBINA:

Sndromes asociados a hiperbilirrubinemia

Hiperbilirrubinemia no conjugada o indirecta: o Sndrome de Gilbert o Sndrome de Crigler-Najjar Hiperbilirrubinemia conjugada o directa: o Sndrome de Dubin-Johnson o Sndrome de Rotor
o

La bilirrubina es un pigmento que se forma por la degradacin de la hemoglobina de los glbulos rojos muertos. Esta degradacin se produce en el hgado y estos pigmentos se almacenan en la vescula biliar formando parte de la bilis (es desechada por el intestino grueso

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II.

PROCEDIMIENTO a) BILIRRUBINA TOTAL: REACTIVOS Conservados entre 2 y 8 C., estables hasta la fecha de caducidad indicada en la etiqueta. Preparacin reactivo de trabajo: Agregar al momento de utilizar, por cada 1 ml. de reactivo DMSO, 1 gota de reactivo nitrito de sodio (o 0.05 ml.), mezclar. Estable por 24 horas protegido de la luz. Composicin reactivo de trabajo: Acidosulfanlico30 mM HCl165 mM DMSO 5000 mM Nitrito de sodio 0.50 mM

MUESTRAS: Utilizar suero o plasma libre de hemlisis. Realizar el ensayo dentro de un plazo no mayor a las 2 horas, en caso contrario refrigerar la muestra entre 2 y 8 C., o bien congelar a -20 C. para perodos ms largos. Conservar protegidas de la luz.

Rango Referencial: - Bilirrubina total: 0.1 1.2 mg/dl

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TECNICA:

Blanco Directa Total ml 0.1 0.1 0.1 Suero ml 1.2 1.2 ---Agua ml ------1.2 Acelerador ml 0.1 ------Reactivo sulfanilico ml ---0.1 0.1 Diazorreactivo Mezclar e incubar por 5 minutos a T ambiente (20 - 25). Leer las absorbancias a 530 nm llevando a cero el instrumento con un blanco de agua destilada, la bilirrubina directa debe leerse exactamente a los 2 minutos.

ABS Blanco Bilirrubina directa Bilirrubina total 0.028 0.044 0.068

Para obtener las concentraciones de bilirrubina total o directa, debe realizarse una curva de calibracin o bien utilizar un Standard de concentracin conocida o calibrador VALTROL-C (cdigo 210-130), con el cual se procede en la forma descrita para las muestras en la tcnica de bilirrubina total. El factor o la curva obtenidos con el reactivo para determinacin de bilirrubina total son vlidos para la determinacin de bilirrubina directa, se recomienda verificar su validez con cada nuevo kit. Blanco Standar ml 0.1 0.1 Suero ml 1.2 ---Agua ml ---1.2 Acelerador ml 0.1 ---Reactivo sulfanilico ml ---0.1 Diazorreactivo Mezclar e incubar por 5 minutos a T ambiente (20 - 25). Leer las absorbancias a 530 nm llevando a cero el instrumento con un blanco de agua destilada

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III.

RESULTADOS

FACTOR =

Concentration Standard. Abs. Standard - Abs. Blanco Standard

Bilirrubina Directa (mg/dl) = FACTOR x (Directa - Blanco) Bilirrubina Total (mg/dl) = FACTOR x (Total - Blanco)

Concentracin de stndar Bilirrubina Total: 22.4 mg/dl Bilirrubina Directa: 7.88 mg/dl

Factor por Bilirrubina total: I= 20.4/0.596 = 37.58 Factor por Bilirrubina directa: I= 7.88 / 0.596= 13.22 Determinacin de bilirrubinas: Total: 37.58 *(0.068 0.028) = 1.50 mg/dl Directa: 13.22* (0.044 0.028) = 0.21 mg/dl

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Universidad Privada Norbert Wiener TEMAS DE INTERES.

La ictericia en el Recin Nacido (RN), la mayor parte de las veces es un hecho fisiolgico, causada por una hiperbilirrubinemia de predominio indirecto secundario a inmadurez heptica e hiperproduccin de bilirrubina (Bb), cuadro benigno y autolimitado, que desaparece generalmente antes del mes de edad. Constituye uno de los fenmenos clnicos ms frecuente durante el periodo neonatal y es la causa ms comn de reinternacin en salas de cuidados de RN durante las primeras dos semanas de vida, para fototerapia y, en no pocas oportunidades, para exanguinotransfusin. Aproximadamente el 60 a 70% de los neonatos maduros y 80% y ms de los neonatos inmaduros se muestran clnicamente ictricos, su temprano reconocimiento y la instauracin de una teraputica adecuada, son tareas habituales para el Neonatlogo y el Pediatra. Los procedimientos diagnsticos tienden a diferenciar las Ictericias Fisiolgicas de las Ictericias No Fisiolgicas. Este enfoque incluye recabar correctamente los antecedentes familiares, los del embarazo y parto, el estado y caractersticas del RN, las horas de aparicin de la Ictericia, el ritmo de ascenso, la edad gestacional y la patologa agregada. Todo esto nos dar una mayor definicin del riesgo a fin de actuar correctamente. Existe controversia sobre las posibles consecuencias de la ictericia neonatal y sobre el momento en que se debe iniciar su tratamiento.

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El kernicterus, ictericia nuclear o encefalopata neonatal bilirrubnica es una complicacin neurolgica grave causada por la elevacin de los niveles normales de bilirrubina en la sangre del neonato. Se debe a la accin directa de la bilirrubina indirecta libre sobre el sistema nervioso central, inhibiendo varios procesos bioqumicos muy importantes, como la fosforilacin oxidativa de las mitocondrias y la sntesis proteica. El primer factor importante es el papel que juega la barrera hematoenceflica, cuya eficacia depende de:

La liposolubilidad de las sustancias. El tamao: la bilirrubina unida a la albmina, tal como viaja en sangre, no la traspasa. El estado de la barrera, que puede estar ms permeable si est daada (por ejemplo, por hipoxia). La edad del individuo; as, slo el neonato es susceptible de sufrir este cuadro.

La predileccin de la bilirrubina indirecta sobre el sistema nervioso central se debe a su alto contenido en lpidos, la escasez de tejido adiposo en el recin nacido, as como los bajos niveles de albmina en el lquido interneuronal.

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Universidad Privada Norbert Wiener IV. BIBLIOGRAFIA 1. Nelson, D.L. y Cox, M.M. (2005). Lehninger Principios de Bioqumica. 4 edicin. Ed. Omega. 2. Mathews, C.K., Van Holde, K.E. y Ahern KG (2002). Bioqumica. 3 edicin. Ed. Addison Wesley/Pearson Education. Madrid. 3. McKee, T. y McKee J. R. (2003). Bioqumica. La base molecular de la vida. 3 edicin. Ed. McGraw-Hill 4. Koolman, J. y Rohn, KH (2004). Bioqumica. Texto y atlas. 3 edicin. Ed. Mdica Panamericana

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