Manual de Reactivovigilancia

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO
VERSIN: 01
Pgina 1 de 153
MANUAL DE REACTIVOVIGILANCIA
Fecha: NOVIEMBRE/2011
Tabla de contenido
1. 2. 3. 4. 5. INTRODUCCIN .................................................................................................... 4 OBJETIVOS ........................................................................................................... 5 JUSTIFICACION ..................................................................................................... 6 DEFINICIONES....................................................................................................... 7 ESPECIFICACIONES DE EQUIPOS Y REACTIVOS ........................................... 14 5.1.1 EQUIPO CB 350i:............................................................................................ 15 5.1.2 Reactivos usados en el rea de Qumica Clnica ............................................ 16 5.1.2.1 Glicemia enzimtica AA .............................................................................. 16 5.1.2.2 PCR ultrasensible ....................................................................................... 18 5.1.2.3 C3 ................................................................................................................. 20 5.1.2.4 C4 ................................................................................................................. 22 5.1.2.5 Albmina AA ............................................................................................... 24 5.1.2.6 Protenas Totales AA .................................................................................. 26 5.1.2.7 Proti U/LCR .................................................................................................. 27 5.1.2.8 LDH Para la determinacin de lactato deshidrogenasa en suero, plasma y lquido cefalorraqudeo ....................................................................................... 30 5.1.2.9 Ca-Color Arsenazo III AA ............................................................................ 32 5.1.2.10 Fosfatemia UV AA ..................................................................................... 34 5.1.2.11 Fer-color AA .............................................................................................. 36 5.1.2.12 Mg-color AA............................................................................................... 39 5.1.2.13 Fer-color/ Transferrina .............................................................................. 41 5.1.3. PRUEBAS DE PERFIL RENAL ..................................................................... 43 5.1.3.1 Creatinina cintica AA ................................................................................ 43 5.1.3.2 Urea UV cintica AA.................................................................................... 46
Elabor: Dayibeth Geney Ortiz Katina Rivera Olave Fecha: Noviembre/2011 Revis: Dra. Karina Viloria Barragn Coordinadora de Laboratorio Fecha: Noviembre/2011 Aprob:
5.1 REA DE QUMICA CLNICA .................................................................................. 14
Fecha: Noviembre/2011
VERSIN: 01
Pgina 2 de 153
5.1.3.3 Uricostat enzimtico AA ............................................................................. 49 5.1.4. PRUEBAS DE PERFIL LIPDICO .................................................................. 51 5.1.4.1 HDL Colesterol AA ...................................................................................... 51 5.1.4.2 Colestat enzimtico AA .............................................................................. 54 5.1.4.3 TG Color AA ................................................................................................ 56 5.1.5. PRUEBAS DE PERFIL CARDIACO .............................................................. 58 5.1.5.1 CK-NAC AA ................................................................................................. 58 5.1.5.2 CK-MB AA.................................................................................................... 60 5.1.6. PRUEBAS DE PERFIL PANCREATICO ....................................................... 64 5.1.6.1 Lipasa AA .................................................................................................... 64 5.1.6.2 Amilasa 405 AA ........................................................................................... 66 5.1.7. PRUEBAS DE PERFIL HEPATICO ............................................................... 68 5.1.7.1 Bilirrubina Total AA .................................................................................... 68 5.1.7.2 Bilirrubina Directa AA ................................................................................. 71 5.1.7.3 GPT (ALT) UV AA ........................................................................................ 72 5.1.7.4GOT (AST) UV AA ........................................................................................ 74 5.1.7.5 -G-test cintica AA .................................................................................... 77 5.1.7.6 ALP 405 AA ................................................................................................. 79 5.1.7.7 RapidLab 348............................................................................................... 82 5.2 REA DE INMUNOENSAYOS .................................................................................. 83 5.2.1. I M M U L I T E 1000 ................................................................................... 84 5.2.2. Cortisol .......................................................................................................... 85 5.2.3. Ferritina ......................................................................................................... 89 5.2.4. Turbo HCG..................................................................................................... 93 5.2.5. PSA Libre....................................................................................................... 97 5.2.6. T3 Libre ........................................................................................................ 102 5.2.7. T3 Total ........................................................................................................ 106
VERSIN: 01
Pgina 3 de 153
5.2.8. T4 Libre ........................................................................................................ 110 5.2.9. T4 Total ........................................................................................................ 112 5.2.10. Troponina I ................................................................................................ 115 5.2.11. TSH Tercera Generacin .......................................................................... 117 5.3 REA DE HEMATOLOGA ..................................................................................... 121 5.3.1. ANALIZADOR DE HEMATOLOGA ............................................................. 122 5.3.2. PRUEBAS DE COAGULACIN ................................................................... 125 5.3.3. TIEMPO PARCIAL DE TROMBOPLASTINA ACTIVADA REACTIVO: APTTest ................................................................................................................. 127 5.3.4. HEMOCLASIFICACIN ............................................................................... 129 5.3.5. PRUEBAS ANTIGLOBULINA (COOMBS) DIRECTA O INDIRECTA .......... 132 5.4 REA DE INMUNOLOGA ...................................................................................... 134 5.4.1. PROTEINA C REACTIVA (PCR) .................................................................. 135 5.4.2. V.D.R.L Suspensin antignica estabilizada para realizar la prueba VDRL modificada (USR) de deteccin de sfilis ............................................................ 136 5.4.3. R.A. ARTRITEST .......................................................................................... 137 5.4.4. Prueba rpida para la deteccin cualitativa de Gonadotropina corinica humana (hCG) ....................................................................................................... 139 5.4.5. DETERMINACIN DE ANTI-HCV ................................................................ 141 5.4.6. DETERMINACIN DE ANTIGENO DE SUPERFICIE DE HEPATITIS B HBsAg ............................................................................................................................... 143 5.4.7. PRUEBA ANTI-TP Syphilis 3.0 ................................................................... 145 5.4.8. HIV-1/HIV-2 TEST ........................................................................................ 146 5.4.9. DENGUE IgG/IgM ........................................................................................ 148 5.4.10. ANTIGENOS BACTERIANOS .................................................................... 150 6. BIBLIOGRAFIA .................................................................................................. 153
Elabor: Dayibeth Geney Ortiz Katina Rivera Olave Fecha: Noviembre/2011
Revis: Dra. Karina Viloria Barragn Coordinadora de Laboratorio Fecha: Noviembre/2011
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 4 de 153
1. INTRODUCCIN
El programa de Reactivovigilancia est definido como el conjunto de actividades que tienen por objeto la identificacin y la cualificacin de los efectos adversos serios e indeseados producidos por la utilizacin de Reactivos para Diagnostico In Vitro, as como la identificacin de los factores de riesgo asociados a estos efectos, con base en la evaluacin de los problemas relacionados con el fin de determinar la frecuencia, gravedad e incidencia de los mismos para prevenir su aparicin. El Laboratorio de la Clnica del Cesar en base a sus polticas de calidad, implementa el programa de Reactivovigilancia de acuerdo a la demanda de exmenes diagnsticos y por ende a la utilizacin de los Reactivos de Diagnostico in vitro, con el objetivo de mejorar la capacidad de la empresa para satisfacer las necesidades de sus usuarios en lo referente a la atencin con exmenes mdicos, con el cual se pretende identificar factores de riesgo, control y cuantificacin de los mismos. El presente manual incluye desde las generalidades sobre los equipos usados actualmente en el Laboratorio de la Clnica del Cesar, hasta las condiciones de almacenamiento, estabilidad, intervalos biolgicos de referencia de cada Reactivo para Diagnstico In Vitro empleado en los diferentes exmenes de laboratorio.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 5 de 153
2. OBJETIVOS
2.1 Objetivo General El objetivo principal del programa es mejorar la proteccin de la salud y la seguridad de pacientes y usuarios, mediante la reduccin y control del riesgo que se produzca o se repita un incidente adverso asociado al uso de los Reactivos de Diagnostico IN VITRO comercializados en el territorio colombiano. 2.2 Objetivos Especficos Generar los mecanismos para recolectar, evaluar y gestionar informacin sobre incidentes adversos o riesgos de incidentes adversos asociados a Reactivos de Diagnostico IN VITRO en el Laboratorio de la Clnica del Cesar Ltda. Detectar oportunamente los Reactivos de Diagnostico IN VITRO comercializados en el territorio nacional que generen riesgo de incidentes adversos. Adoptar medidas para la prevencin de incidentes con Reactivos de Diagnostico IN VITRO. Implementar medidas de control y seguimiento a los casos detectados Orientar al personal del Laboratorio en los conocimientos y herramientas necesarias para la realizacin de los reportes de incidentes adversos a dispositivos mdicos.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 6 de 153
3. JUSTIFICACION
El Instituto Nacional de Vigilancia de Medicamentos y Alimentos INVIMA, dentro del marco de su plan estratgico global, y amparados bajo el Decreto 1290 de 1994, Articulo 4, donde le confiere al INVIMA Impulsar y dirigir en todo el pas las funciones pblicas de control de calidad, vigilancia sanitaria y vigilancia epidemiolgica de los efectos adversos de los productos de su competencia y el Articulo 24 del Decreto 3770 de 2004, el cual dispone el diseo de un Programa de Reactivovigilancia, el INVIMA viene desarrollando el Programa Nacional de Vigilancia Epidemiolgica Postmercado de Dispositivos Mdicos y Reactivos de Diagnostico In-Vitro (Tecnovigilancia y Reactivovigilancia). El laboratorio de la Clnica del Cesar, en desarrollo de su poltica de calidad integrada y especialmente dirigida a la gestin de calidad, seguridad y proteccin de recursos, implementa el plan de Reactivovigilancia con el cual se pretende dar mejor uso a los Reactivos de Diagnostico in vitro en cuanto a condiciones almacenamiento para garantizar la fiabilidad de los diagnsticos requeridos por el cuerpo mdico para los pacientes que ingresan a la institucin.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 7 de 153
4. DEFINICIONES
Para efectos de la aplicacin del manual de Reactivovigilancia se adoptan las siguientes definiciones: Buenas prcticas de manufactura de reactivos de diagnstico in vitro: Es el conjunto de normas, procesos y procedimientos tcnicos cuya aplicacin debe garantizar la produccin uniforme y controlada de cada lote de los reactivos de diagnstico in vitro, de conformidad con las normas de calidad y los requisitos legalmente exigibles para su comercializacin. Certificado de Capacidad de Almacenamiento y/o Acondicionamiento (CCAA): Es el documento que emite el INVIMA, en el que se certifica el cumplimiento de las condiciones higinicas, tcnicas, locativas y de control de calidad por parte del establecimiento que almacene y/o acondicione los reactivos de diagnstico in vitro. Esta certificacin tendr una vigencia de cinco (5) aos y estar sujeta a la vigilancia y control por parte del INVIMA. Certificado de Cumplimiento de las Buenas Prcticas de Manufactura de Reactivos de Diagnstico in vitro (BPM): Es el documento expedido por el INVIMA en el cual se certifica que el establecimiento fabricante cumple con las Buenas Prcticas de Manufactura de los reactivos de diagnstico in vitro. Esta certificacin tendr una vigencia de cinco (5) aos y estar sujeta a la vigilancia y control por parte del INVIMA. Concepto tcnico de las condiciones sanitarias: Es el documento expedido por el INVIMA, en el que consta el cumplimiento de las condiciones higinicas, tcnicas, locativas, de dotacin, de recursos humanos y de control de calidad que garantizan el buen funcionamiento del establecimiento fabricante, as como la capacidad tcnica y la calidad de los productos que all se elaboran, el cual regir
VERSIN: 01
Pgina 8 de 153
hasta tanto se certifique el Cumplimiento de las Buenas Prcticas de Manufactura de Reactivos de Diagnstico In vitro (BPM).
Envase primario: Es aquel recipiente o elemento en contacto directo con el sistema de envase que estando en unin con el contenido, lo protege de la contaminacin y cambios fsicos durante su vida til. Envase secundario: Es el recipiente o elemento del sistema de empaque, que contiene en su interior al envase primario y lo protege de la contaminacin y cambios fsicos durante su transporte y almacenamiento. Equipo para diagnstico: Instrumentos, equipos o aparatos, mecnicos, elctricos, electrnicos o lgicos (hardware o software) utilizados, entre otros, con fines de diagnstico qumico, biolgico, inmunolgico, que permiten la lectura objetiva de las muestras y el adecuado registro de soporte. Inserto: Es cualquier material impreso o grfico que acompae al reactivo de diagnstico in vitro, el cual contiene instrucciones generales de uso, almacenamiento, componentes, precauciones y toda la informacin necesaria para el uso seguro y adecuado del reactivo. Reactivo de diagnstico in vitro: Es un producto reactivo, calibrador, elaborado en material de control, utilizado slo o en asociacin con otros, destinado por el fabricante a ser utilizado in vitro para el estudio de muestras procedentes del cuerpo humano, incluidas las donaciones de sangre, rganos y tejidos, principalmente con el fin de proporcionar informacin relacionada con : Un estado fisiolgico o patolgico. Una anomala congnita. La determinacin de la seguridad y compatibilidad con receptores potenciales. La Supervisin de medidas teraputicas.
Revis: Dra. Karina Viloria Barragn Coordinadora de Laboratorio Fecha: Noviembre/2011 Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 9 de 153
Reactivo de diagnstico in vitro alterado: Se entiende que un producto o reactivo de diagnstico in vitro se encuentra alterado cuando: Se halla sustituido, sustrado total o parcialmente o reemplazado, los elementos constitutivos que forman parte de la composicin oficialmente aprobada o cuando se le hubieren adicionado sustancias que puedan modificar sus efectos o caractersticas fsico-qumicas. Presente transformaciones en sus caractersticas fsico-qumicas, microbiolgicas o funcionales. El contenido no corresponda al autorizado o se hubiere sustrado del original total o parcialmente. De acuerdo con su naturaleza no se encuentre almacenado o conservado con las debidas precauciones.
Reactivo de diagnstico in vitro fraudulento: Se entiende por producto o reactivo de diagnstico In vitro fraudulento cuando: Fuere elaborado por un laboratorio o establecimiento que fabrique, almacene o acondicione y no cumpla con las Buenas Prcticas de Manufactura (BPM) o con el Certificado de Capacidad de Almacenamiento y/o Acondicionamiento (CCAA) de acuerdo con las disposiciones vigentes o que no las estn implementando de acuerdo con el plan gradual sealado en el presente decreto. No provenga del titular de los registros sanitarios de que trata el presente decreto, del laboratorio o establecimiento fabricante o del importador, o del distribuidor, o del que almacene o acondicione que se encuentren autorizados por la autoridad sanitaria competente. Utilice envase o empaque diferente al autorizado. Fuere introducido al pas sin cumplir con los requisitos tcnicos y legales establecidos en este decreto.
VERSIN: 01
Pgina 10 de 153
La marca presente apariencia o caractersticas generales de un producto legtimo y oficialmente aprobado, sin serlo. No est amparado con registro sanitario.
Reactivo de diagnstico hurfano: Son los Reactivos de Diagnstico In Vitro potenciales, en los cuales no existe un inters de comercializacin por parte de los laboratorios productores, ya que su desarrollo no presenta un incentivo econmico a pesar de poder satisfacer necesidades de salud. Reactivo de diagnstico in vitro rpido: Son aquellos reactivos de diagnstico In vitro que no requieren entrenamiento especializado para su utilizacin, no utilizan equipos complejos para su montaje y cuya interpretacin y lectura es visual arrojando resultados cualitativos que se observan ya sea por intensidad de color, aglutinacin o formacin de anillos, entre otros, destinados por el fabricante para ser utilizados directamente por el usuario. Reactivo de diagnstico in vitro para investigacin: Cualquier reactivo para el diagnstico in vitro destinado para llevar a cabo investigaciones efectuadas en un entorno cientfico y que no tienen como fin su comercializacin. Registro sanitario: Es el acto administrativo expedido por el INVIMA, mediante el cual se autoriza previamente a una persona natural o jurdica para producir, comercializar, importar, exportar, envasar o procesar un reactivo de diagnstico in vitro. Rotulado: Es toda la informacin adherida sobre el producto realizada en forma impresa, escrita o grfica o de cualquier otro tipo, producida por el fabricante que acompaa al envase primario o secundario del reactivo de diagnstico in vitro. Clasificacin de los reactivos de diagnstico in vitro: La clasificacin de los reactivos de diagnstico in vitro se debe basar en el riesgo sanitario, Categora III (alto riesgo), Categora II (mediano riesgo) y Categora I (bajo riesgo), teniendo en
VERSIN: 01
Pgina 11 de 153
cuenta el conocimiento, entrenamiento, tecnologa, anlisis e impacto del resultado, de acuerdo con lo siguiente: Categora III: Incluyen los siguientes reactivos de diagnstico in vitro: Usados para el tamizaje de enfermedades transmisibles en donantes de sangre, componentes sanguneos y dems tejidos y rganos para trasplante. Usados para asegurar compatibilidad inmunolgica de sangre y dems tejidos y rganos para trasplante. Usados para diagnstico de enfermedades transmisibles de alto riesgo de peligrosidad para la vida en la poblacin general colombiana, incluyendo las pruebas rpidas.
Categora II: Incluye los reactivos de diagnstico in vitro que estn relacionados con las siguientes reas: Biologa Molecular. Endocrinologa. Txico-Farmacologa. Qumica sangunea. Hematologa. Inmunologa. Microbiologa. Coproparasitologa. Coagulacin. Gases sanguneos. Uroanlisis. Clulas de rastreo de Inmunohematologa. Pruebas de autodiagnstico y autocontrol.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 12 de 153
Categora I: Incluye los siguientes reactivos de diagnstico in vitro: Medios de cultivo. Componentes de reposicin de un estuche. Materiales colorantes. Soluciones diluyentes, tampones y lisantes. Soluciones de lavado. La Categora II incluye todos los reactivos de diagnstico in vitro que no estn especficamente relacionados en las Categoras I o III. Reglas de clasificacin de los reactivos de diagnstico in vitro: La clasificacin de los reactivos diagnstico in vitro se realizar de acuerdo con las siguientes reglas: I. Clasificacin de los reactivos de diagnstico in vitro respecto de los agentes transmisibles: Para la clasificacin de los reactivos de diagnstico in vitro respecto de los agentes transmisibles se aplicarn las reglas 1 y 2 con las cuales se obtiene informacin sobre el estado de enfermedad o el estado inmune de individuos con respecto a agentes transmisibles. Estos Reactivos de diagnstico in vitro se utilizan para diversos propsitos, tales como tamizaje, diagnstico o manejo del paciente. En el contexto del sistema de clasificacin basado en el riesgo, el trmino "agente transmisible" se refiere a agentes infecciosos convencionales tales como bacterias, virus, hongos y protozoos as como a priones. No incluye rasgos genticos. Regla 1: Reactivos de diagnstico in vitro utilizados para el tamizaje de donantes con respecto a agentes transmisibles: Se clasifican como Categora III los reactivos de diagnstico in vitro utilizados para detectar la presencia o exposicin a un agente transmisible en la sangre, componentes de la sangre, derivados de la sangre, tejidos u rganos para determinar su seguridad para transfusin o trasplante.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 13 de 153
Regla 2: Reactivos de diagnstico in vitro utilizados para determinar el estado inmune y el estado y manejo de la enfermedad con respecto a agentes transmisibles Se clasifican como Categora III: Los reactivos de diagnstico in vitro para detectar la presencia o la exposicin a un agente transmisible que cause una enfermedad peligrosa para la vida y exista alto riesgo de propagacin en la poblacin colombiana. Los reactivos de diagnstico in vitro para detectar la presencia o la exposicin a un agente transmisible que cause una enfermedad congnita que sea peligrosa para la vida de la descendencia del individuo infectado. II. Clasificacin de los reactivos de diagnstico in vitro para aplicaciones diferentes a la deteccin de agentes transmisibles: para la clasificacin de los reactivos de diagnstico in vitro utilizados para la determinacin de grupos sanguneos o tipificacin de tejidos se aplica la regla 3. Regla 3: Reactivos de diagnstico in vitro para tipificacin inmunolgica en transfusiones y trasplantes: Se clasifican como categora III los reactivos de diagnstico in vitro utilizados para la tipificacin bsica (Anti A, Anti B, Anti AB y D) o de tejidos para asegurar la compatibilidad inmunolgica de la sangre, los componentes sanguneos, los tejidos u rganos para transfusin o trasplante. Regla 4: Cuando las reglas del 1 al 3 no se apliquen al reactivo de diagnstico In - Vitro este ser clasificado como de clase I o II segn el caso: Siempre que un kit contenga varios reactivos de diagnstico in vitro ser clasificado de acuerdo con el reactivo con ms alto riesgo.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 14 de 153
5. ESPECIFICACIONES DE EQUIPOS Y REACTIVOS
5.1 REA DE QUMICA CLNICA
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 15 de 153
5.1.1 EQUIPO CB 350i:
CARACTERSTICAS TCNICAS: Dispensacin: Dos brazos dispensadores para muestras y reactivos Precalentamiento de reactivo y deteccin de lquido por censado electrnico Capacidad de dilucin de sueros y orinas Repeticin automtica o a pedido de muestras patolgicas o hiperactivas Reactivos: 80 posiciones disponibles para mono o birreactivos Identificacin por cdigos de barra Posibilidad de utilizar cuatro diferentes tamaos de frascos (10, 20, 50 y 80ml) Refrigeracin regulada por sistema Peltier Muestras: Posibilidad de utilizar tubos primarios o copas Tubos de 5 7 o 10 ml. Copas de 0,5 ml 52 posiciones para muestras de rutina o STAT, 26 para standars y controles Sensor de deteccin de nivel de lquido Identificacin positiva por cdigos de barra
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 16 de 153
Interfase del usuario: Software Windows 2000 Pro, para una sencillo manejo del usuario Pantalla touch screen Representacin grfica del volumen de los reactivos Capacidad para almacenar hasta 500 tests de qumica, inmunonoqumica y tests calculados
5.1.2 Reactivos usados en el rea de Qumica Clnica 5.1.2.1 Glicemia enzimtica AA

Mtodo colorimtrico para la determinacin de glucosa plasmtica en muestras de suero, plasma u orina. Reactivos Provistos Standard*: solucin de glucosa 100 mg/dl (1 g/l). A. Reactivo A: solucin conteniendo glucosa oxidasa (GOD), peroxidasa (POD), aminofenazona (4-AF), buffer fosfatos pH 7,0 y 4-hidroxibenzoato en las siguientes concentraciones: GOD (microbiana): 10 kU/l POD (rbano): 1 kU/l 4-AF: 0,5 mmol/l Reactivos no provistos Calibrador A plus de Wiener lab. Precauciones: Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro". Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de qumica clnica. Todos
Fosfatos: 100 mmol/l, pH 7,0 Hidroxibenzoato: 12 mmol/l
VERSIN: 01
Pgina 17 de 153
los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. Estabilidad e instrucciones de almacenamiento: Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No mantener a temperaturas elevadas durante lapsos prolongados. Indicios de inestabilidad o deterioro de los reactivos: Durante el uso, el Reactivo A puede colorearse ligeramente no afectando su funcionamiento siempre que se procese un Blanco con cada lote de determinaciones y un Standard peridicamente. Desechar cuando las lecturas del Blanco sean superiores a 0,160 D.O. Mtodo de control de calidad Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas de glucosa, con cada determinacin. Valores de Referencia: Tipo de muestra Suero o plasma Orina al azar Orina de 24 horas LCR
IBR (mg/dL) Adultos: 74 - 106 Nios: 60 100 Neonatos: 1 da: 40 60 Mayor a 1 da: 50 - 80 1 - 15 < 0,5 g/24 hrs Nios: 60 - 80 Adultos: 40 - 70
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 18 de 153
* Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia, teniendo en cuenta sexo, edad hbitos alimenticios y otros factores.
5.1.2.2 PCR ultrasensible

Mtodo inmunoturbidimtrico con ltex para la determinacin cuantitativa de protena C reactiva (PCR) FUNDAMENTOS DEL METODO La PCR presente en la muestra, es capaz de aglutinar las partculas de ltex recubiertas con anticuerpos anti-PCR. La turbidez causada por la aglutinacin de las partculas de ltex es proporcional a la concentracin de PCR en la muestra y Puede ser medida espectrofotomtricamente. REACTIVOS PROVISTOS A. Reactivo A: solucin de buffer glicina. B. Reactivo B: suspensin de partculas de ltex, recubiertas con anticuerpos anti-PCR. REACTIVOS NO PROVISTOS PCR Calibrador en serie Turbitest AA de Wiener lab. Solucin fisiolgica.
INSTRUCCIONES PARA SU USO Reactivos Provistos: listos para usar. Los reactivos deben ser homogeneizados varias veces por inversin suave, antes de usar.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 19 de 153
PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnstico in vitro. Todas las muestras de pacientes deben manipularse como si fueran capaces de transmitir infeccin. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de qumica clnica. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar. MATERIAL REQUERIDO (no provisto) Analizador automtico capaz de medir absorbancias a 570 nm. CONDICIONES DE REACCION Parmetros generales para analizadores automticos: Segn la sensibilidad y rango de medicin requeridos podr emplearse una de las siguientes adaptaciones: alta sensibilidad o standard. CALIBRACION El mtodo ha sido estandarizado frente al European Reference Material, ERMDA470 (BCR-470) - IRMM (Institute for Reference Materials and Measurements). Para calibrar la adaptacin PCR alta sensibilidad deben usarse los calibradores 1, 2, 4, 5, 6 y 7 y para calibrar la adaptacin PCR standard deben usarse los calibradores 1, 3, 5, 6, 7 y 8 del PCR Calibrador en serie Turbitest AA. METODO DE CONTROL DE CALIDAD Control Inmunolgico o PCR Control N Turbitest AA. Los Controles son procesados de la misma manera que las muestras.
VERSIN: 01
Pgina 20 de 153
VALORES DE REFERENCIA Adultos y nios: 0 - 5 mg/l * Se aconseja efectuar dos o ms determinaciones peridicas para seguir el desarrollo de la enfermedad. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Se recomienda realizar una recalibracin completa, cuando se cambia de lote de reactivo o cuando el control de calidad as lo determina. Para un correcto seguimiento del control de calidad, se recomienda incluir 2 controles con distinto nivel de PCR (por ejemplo: PCR Control N y Control Inmunolgico Turbitest AA). En el curso de procesos inflamatorios la PCR puede alcanzar niveles 1000 a 2000 veces ms elevados que el nivel normal. Se recomienda diluir las muestras 1:5 1:10 en solucin fisiolgica en caso de obtener resultados elevados o de sospechar procesos inflamatorios severos. Para preservar la integridad de los reactivos debe evitarse todo tipo de contaminaciones, empleando para la medicin nicamente micropipetas perfectamente limpias y secas. Niveles elevados de PCR son inespecficos y no deben ser interpretados sin una historia clnica completa del paciente. En la evaluacin de PCR como factor de riesgo de enfermedad cardiovascular los valores obtenidos deben ser siempre comparados con valores previos.
5.1.2.3 C3
Mtodo inmunoturbidimtrico para la determinacin del componente C3 del complemento
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 21 de 153
FUNDAMENTOS DEL METODO La protena C3 del complemento reacciona con el anticuerpo especfico anti-C3 formando inmunocomplejos insolubles. La turbidez provocada por estos inmunocomplejos es proporcional a la concentracin de C3 en la muestra y puede medirse espectrofotomtricamente. REACTIVOS PROVISTOS A. Reactivo A: solucin fisiolgica tamponada, pH 7,35 0,10. B. Reactivo B: anticuerpo monoespecfico anti-C3. REACTIVOS NO PROVISTOS Solucin fisiolgica. Calibrador Protenas nivel alto Turbitest AA de Wiener lab. PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro". Todas las muestras de pacientes deben manipularse como si fueran capaces de transmitir infeccin. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de qumica clnica. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Una vez que los frascos han sido abiertos, deben ser conservados hermticamente cerrados en refrigerador. No congelar. Micropipetas y pipetas capaces de medir los volmenes indicados.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 22 de 153
METODO DE CONTROL DE CALIDAD Control Inmunolgico nivel 1 Turbitest AA. Control Inmunolgico nivel 2 Turbitest AA. El Control se procesa de la misma manera que las muestras. VALORES DE REFERENCIA Adultos y nios: 90 - 180 mg/dl (0,9 - 1,8 g/l). LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO La turbidez y la presencia de partculas en las muestras, pueden interferir con la prueba. Por lo tanto, las partculas que puedan resultar de una coagulacin incompleta, o de una desnaturalizacin de las protenas, deben ser removidas por centrifugacin antes de proceder a su ensayo. Las muestras que presentan absorbancias superiores al calibrador ms alto de la curva de calibracin, debern ser diluidas y ensayadas nuevamente. La concentracin de C3 para dichas muestras se obtiene multiplicando el resultado obtenido por el factor de dilucin correspondiente.
5.1.2.4 C4
Mtodo inmunoturbidimtrico para la determinacin del componente C4 del complemento FUNDAMENTOS DEL METODO La protena C4 del complemento reacciona con el anticuerpo especfico anti-C4 formando inmunocomplejos insolubles. La turbidez provocada por estos inmunocomplejos es proporcional a la concentracin de C4 en la muestra y puede medirse espectrofotomtricamente.
VERSIN: 01
Pgina 23 de 153
REACTIVOS PROVISTOS A. Reactivo A: solucin fisiolgica tamponada, pH 7,35 0,10. B. Reactivo B: anticuerpo monoespecfico anti-C4. REACTIVOS NO PROVISTOS Solucin fisiolgica. Calibrador Protenas nivel alto Turbitest AA de Wiener lab.
PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro". Todas las muestras de pacientes deben manipularse como si fueran capaces de transmitir infeccin. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de qumica clnica. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Una vez que los frascos han sido abiertos, deben ser conservados hermticamente cerrados en refrigerador. No congelar. METODO DE CONTROL DE CALIDAD Se recomienda el uso de Control Inmunolgico nivel 1 o Control Inmunolgico nivel 2 Turbitest AA de Wiener lab. El Control es procesado de la misma manera que las muestras. VALORES DE REFERENCIA Adultos y nios: 10 - 40 mg/dl (0,1 - 0,4 g/l).
VERSIN: 01
Pgina 24 de 153
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO La turbidez y la presencia de partculas en las muestras, pueden interferir con la prueba. Por lo tanto, las partculas que puedan resultar de una coagulacin incompleta, o de una desnaturalizacin de las protenas, deben ser removidas por centrifugacin antes de proceder a su ensayo. Las muestras que presentan absorbancias superiores al calibrador ms alto de la curva de calibracin, debern ser diluidas y ensayadas nuevamente. La concentracin de C4 para dicha muestra se obtiene multiplicando el resultado obtenido por el factor de dilucin correspondiente.
5.1.2.5 Albmina AA
Mtodo colorimtrico para la determinacin de albmina en suero FUNDAMENTOS DEL MTODO La albmina reacciona especficamente (sin separacin previa) con la forma aninica de la 3,3',5,5'-tetrabromo cresolsulfonftalena (BCF). El aumento de absorbancia a 625 nm respecto del Blanco de reactivo, es proporcional a la cantidad de albmina presente en la muestra. REACTIVOS PROVISTOS Reactivo A: solucin de BCF 0,3 mmol/l, buffer acetato 0,1 mol/l y polioxietiln lauril ter 0,9 g/l. REACTIVOS NO PROVISTOS Calibrador A plus / Proti 2 Suero Patrn de Wiener lab.
VERSIN: 01
Pgina 25 de 153
PRECAUCIONES El reactivo es para uso diagnstico "in vitro". Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de qumica clnica. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivo Provisto: es estable a temperatura ambiente hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. METODO DE CONTROL DE CALIDAD Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas de albmina, con cada determinacin. VALORES DE REFERENCIA Se determin el contenido de albmina en suero de personas sanas, de ambos sexos, con alimentacin mixta normal y edades entre 17 y 40 aos. Se obtuvieron los siguientes rangos: Albmina: 3,5 a 4,8 g/dl Relacin A/G: 1,2 a 2,2 IBR (g/dL) 3,5 a 4,8 1,2 a 2,2
Albumina Relacin A/G
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 26 de 153
5.1.2.6 Protenas Totales AA

Mtodo colorimtrico para la determinacin de protenas totales en suero FUNDAMENTOS DEL METODO Los enlaces peptdicos de las protenas reaccionan con el in cprico en medio alcalino, para dar un complejo color violeta con mximo de absorcin a 540 nm, cuya intensidad es proporcional a la concentracin de protenas totales en la muestra. REACTIVO PROVISTO Reactivo A: complejo EDTA/Cu 13 mmol/l en hidrxido de sodio 875 mmol/l y alquil aril politer (AAP). REACTIVO NO PROVISTO Calibrador A plus / Proti 2 Suero Patrn de Wiener lab. PRECAUCIONES El Reactivo Provisto es para uso diagnstico "in vitro". El Reactivo A es irritante. R36/38: irrita los ojos y la piel. S24/25: evitar el contacto con los ojos y la piel. S26: en caso de contacto con los ojos, lvense inmediata y abundantemente con agua y acdase a un mdico. S28: en caso de contacto con la piel, lvese inmediata y abundantemente con agua. S37/39: usar guantes adecuados y proteccin para los ojos/la cara. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de anlisis clnicos. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 27 de 153
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivo Provisto: es estable a temperatura ambiente hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. METODO DE CONTROL DE CALIDAD Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas de protenas totales, con cada determinacin. VALORES DE REFERENCIA Se determin el contenido de protenas totales en suero de personas sanas, de ambos sexos, con alimentacin mixta normal y edades entre 17 y 40 aos. Se obtuvieron los siguientes rangos: IBR (g/dL) 6,1 A 7,9 1,2 a 2,2
Protena Totales Relacin A/G
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Puede usarse plasma como muestra, pero el resultado de la proteinemia estar incrementado en 0,2 g/dl debido a la presencia de fibringeno, que no est considerado dentro de la definicin de Protenas Totales.
5.1.2.7 Proti U/LCR

Mtodo colorimtrico cuantitativo para la determinacin de protenas en orina y lquido cefalorraqudeo
VERSIN: 01
Pgina 28 de 153
FUNDAMENTOS DEL MTODO Las protenas presentes en la muestra reaccionan en medio cido con el complejo Rojo de Pirogalol-Molibdato originando un nuevo complejo coloreado que se cuantifica espectrofotomtricamente a 600 nm. REACTIVOS PROVISTOS A. Reactivo A: solucin estabilizada de Rojo de Pirogalol 0,1 mmol/l, molibdato de sodio 0,1 mmol/l en buffer succinato 50 mmol/l. S. Standard: solucin de albmina 100 mg/dl (1,0 g/l). REACTIVOS NO PROVISTOS Agua destilada. Solucin fisiolgica.
PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro". Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de anlisis clnicos. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. El Reactivo A debe protegerse de la luz.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 29 de 153
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS Cuando el espectrofotmetro ha sido llevado a cero con agua destilada, lecturas de absorbancia a 600 nm del Reactivo A superiores a 0,250 D.O. o inferiores a 0,030 D.O. son indicio de deterioro del mismo. METODO DE CONTROL DE CALIDAD Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Proti U/LCR Control 2 niveles) con concentraciones conocidas de protenas, con cada determinacin. VALORES DE REFERENCIA Orina 24 de horas Orina al azar LCR IBR (mg/dL) 30 140 mg/24 hrs hasta 160 mg/24 horas en embarazadas 25 15 45 en persona sanas. En personas de ms de 60 aos, este rango se extiende hasta 60 mg/dl.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Proteger el Reactivo A de la luz. El material empleado debe estar libre de tensioactivos, caso contrario se obtendrn valores discordantes.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 30 de 153
5.1.2.8 LDH Para la determinacin de lactato deshidrogenasa en suero, plasma y lquido cefalorraqudeo
FUNDAMENTOS DEL MTODO La velocidad de formacin de NADH es directamente proporcional a la actividad cataltica de la LDH y se determina midiendo el aumento de la absorbancia a 340 nm. Las concentraciones del ensayo estn optimizadas de acuerdo a los procedimientos de referencia para la medicin de la actividad cataltica de las enzimas a 37oC descriptos por la Federacin Internacional de Qumica Clnica (IFCC) REACTIVOS PROVISTOS A. Reactivo A: solucin de metilglucamina (MEG) 400 mM y lactato 61 mM; pH 9,4 a 37oC. B. Reactivo B: solucin conteniendo NAD 61 mM. REACTIVOS NO PROVISTOS Calibrador A plus de Wiener lab. Solucin fisiolgica (NaCl 9 g/l).
PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro". Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de qumica clnica. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 31 de 153
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Una vez abiertos, no deben permanecer destapados ni fuera del refrigerador por perodos prolongados. Evitar contaminaciones. Proteger de la luz directa. CALIBRACIN El mtodo LDH-L fue estandarizado frente a la frmula original del IFCC usada como referencia. El Calibrador A plus es procesado de la misma manera que las muestras y a partir de l se calcula el factor correspondiente. Se recomienda usar calibracin a dos puntos despus de cambiar lote de reactivo y cuando el control de calidad lo requiera. METODO DE CONTROL DE CALIDAD Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con actividades conocidas de lactato deshidrogenasa, con cada determinacin. VALORES DE REFERENCIA IBR (U/I) 135 240 120 - 300 240 - 600
Adultos Nios (2 15 aos) Recin nacidos (4 a 20 das) LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Las muestras de plasma deben ser centrifugadas previamente a realizar el ensayo. Para preservar la integridad de los reactivos deben evitarse todo tipo de
VERSIN: 01
Pgina 32 de 153
contaminaciones, empleando perfectamente limpias y secas.
para
la
medicin
nicamente
micropipetas
METODO DE CONTROL DE CALIDAD Se recomienda utilizar Standatrol S-E 2 niveles de Wiener lab, como material de control de calidad, ya que con controles de otras marcas comerciales pueden obtenerse valores diferentes al rango especificado, dado que los mismos dependen del mtodo o sistema utilizado.
5.1.2.9 Ca-Color Arsenazo III AA

Mtodo colorimtrico directo para la determinacin de calcio en suero, plasma y orina FUNDAMENTOS DEL MTODO El calcio reacciona con arsenazo III dando un complejo de color azul que se mide foto colorimtricamente a 650 nm. REACTIVOS PROVISTOS A. Reactivo A: solucin de arsenazo III 100 mg/l y 8-hidroxiquinolina sulfonato 1,4 g/l en buffer Tris 100 mM, pH 8,5. S. Standard*: solucin de calcio 10 mg/dl. REACTIVOS NO PROVISTOS Agua destilada o desionizada. Calibrador A plus de Wiener lab. Cuando se emplea la tcnica automtica. Puede tambin emplearse en calibracin de tcnicas manuales.
VERSIN: 01
Pgina 33 de 153
INSTRUCCIONES PARA SU USO Standard: cada vez que se use, transferir una cantidad en exceso a un tubo limpio y pipetear de all el volumen necesario, descartando el sobrenadante. PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro". Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de anlisis clnicos. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10C) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Evitar la exposicin prolongada del Reactivo A a la luz directa. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS La turbidez o decoloracin del Reactivo A indica deterioro del mismo, mientras que absorbancias del blanco mayor a 1,200 D.O. a 650 nm, son indicio de contaminacin con calcio. En ambos casos, desechar. METODO DE CONTROL DE CALIDAD Si la muestra a ensayar es suero, procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas de calcio, con cada determinacin. En el caso de muestras de orina, utilizar un control con base de orina.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 34 de 153
VALORES DE REFERENCIA Muestra Suero Orina LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO A longitudes de onda inferiores a 650 nm, pueden encontrarse lecturas de Blanco superiores a 1,200 D.O. que no afectan los resultados. Contaminaciones: el material a utilizar debe estar rigurosamente limpio, libre de calcio y de toda traza de anticoagulante. Para ello aconsejamos lavar con detergentes no inicos (Noin de Wiener lab.) o cidos minerales diluidos, efectuando varios enjuagues con agua destilada. Se aconseja separar pipetas y tubos para uso exclusivo de esta determinacin. IBR (mg/dL) 8,5 10,5 Hasta 300 mg/24 hrs (dieta normal)
5.1.2.10 Fosfatemia UV AA
Mtodo UV para la determinacin de fsforo inorgnico (Pi) en suero, plasma u orina FUNDAMENTOS DEL MTODO El fsforo inorgnico (Pi) reacciona en medio cido con el molibdato para dar un complejo fosfomolbdico que se mide espectrofotomtricamente a 340 nm. REACTIVOS PROVISTOS Reactivo A: solucin de molibdato de amonio 2 mmol/l en cido sulfrico 1%. Standard*: solucin estabilizada de fosfatos equivalente a 4 mg/dl de fsforo inorgnico.
VERSIN: 01
Pgina 35 de 153
REACTIVOS NO PROVISTOS Calibrador A plus de Wiener lab. PRECAUCIONES Los Reactivos son para uso diagnstico "in vitro". El Reactivo A es corrosivo. R34: provoca quemaduras. S24/ 25: evitar el contacto con los ojos y la piel. S26: en caso de contacto con los ojos, lvense inmediata y abundantemente con agua y acdase a un mdico. S28: en caso de contacto con la piel, lvese inmediata y abundantemente con agua. S37/39: usar guantes adecuados y proteccin para los ojos/la cara. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de anlisis clnicos. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Los Reactivos Provistos son estables a temperatura ambiente hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS Cuando el espectrofotmetro ha sido llevado a cero con agua destilada, la lectura de absorbancia del Reactivo A no debe ser superior a 0,500 D.O. En caso contrario, desechar. METODO DE CONTROL DE CALIDAD Si la muestra a ensayar es suero, procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas de fsforo, con
VERSIN: 01
Pgina 36 de 153
cada determinacin. En el caso de muestras de orina, utilizar un control con base de orina.
VALORES DE REFERENCIA Muestra Suero o plasma Orina LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Todo el material de vidrio usado (incluso en la recoleccin de muestra) debe estar libre de fosfatos. Se recomienda, para su limpieza, usar Noion de Wiener lab. Para lograr una mejor performance en los resultados, se recomienda procesar un Blanco de Muestra con cada determinacin, reemplazando el Reactivo por solucin fisiolgica. Este procedimiento es indispensable en el caso de muestras turbias, ictricas, lipmicas o hemolizadas. La absorbancia del Blanco de Muestra debe restarse de la obtenida para el Desconocido para efectuar los clculos. Adultos Nios (2 15 aos) IBR (mg/dL) 2,5 5,6 4-7 0,3 1 g/24 hrs
5.1.2.11 Fer-color AA
Mtodo colorimtrico directo para la determinacin de hierro en suero o plasma FUNDAMENTOS DEL MTODO El hierro srico se libera de la unin con su protena transportadora especfica, la transferrina, en buffer acetato pH 4,5 y en presencia de un reductor, el cido ascrbico. Posteriormente reacciona con el reactivo de color, piridil bis-fenil triazina sulfonato (ferrozina) dando un complejo color magenta, que se mide a 560 nm.
VERSIN: 01
Pgina 37 de 153
REACTIVOS PROVISTOS A. Reactivo A: solucin de acetato 150 mmol/l para pH 4,5, conteniendo uanidina. B. Reactivo B: cido ascrbico. C. Reactivo C: solucin estabilizada de ferrozina. Standard: solucin de iones Fe (III) equivalente a 100 ug/dl. Concentraciones finales Acetato: 150 mmol/l, pH 4,5 Ferrozina: 0,2 mmol/l Acido ascrbico: 0,03 mol/l Guanidina: 4,0 mol/l REACTIVOS NO PROVISTOS Calibrador A plus de Wiener lab. Agua bidestilada.
INSTRUCCIONES PARA SU USO Reactivo de Trabajo: transferir al vial de Reactivo B la cantidad de Reactivo A indicada en el rtulo. Colocar fecha de preparacin. PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro". Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de qumica clnica. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente.
VERSIN: 01
Pgina 38 de 153
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos: son estables a temperatura ambiente (< 25oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Reactivo de Trabajo: es estable durante 3 meses a partir de la fecha de su preparacin conservado en refrigerador (2-10oC) o 10 das a temperatura ambiente (18-25oC). INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS Variaciones en las lecturas de Blancos de Reactivos y/o Standard, indican contaminaciones ocasionales (agua, material de vidrio, etc.). Un aumento en el valor de los Blancos indicar una contaminacin con hierro. METODO DE CONTROL DE CALIDAD Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas de hierro, con cada determinacin. VALORES TEORICOS Hombres Mujeres IBR (g/dL) 65 a 175 50 a 170
VALORES DE REFERENCIA En un grupo de 20 mujeres y 20 varones sanos, con edades oscilando entre los 18 y 51 aos, se hall un rango de 55 a 175 ug/dl* con los siguientes promedios: IBR (g/dL) 114,6 103,3
Hombres Mujeres
VERSIN: 01
Pgina 39 de 153
*Valores de referencia extrados de archivos de Wiener lab.
5.1.2.12 Mg-color AA
Mtodo colorimtrico directo para la determinacin cuantitativa de magnesio en lquidos biolgicos FUNDAMENTOS DEL MTODO El magnesio, en medio alcalino, reacciona con el xylidyl blue formando un complejo de color prpura cuya intensidad es proporcional a la concentracin de Mg presente en la muestra. La incorporacin del complejante EGTA al reactivo elimina la interferencia de los iones calcio. REACTIVOS PROVISTOS A. Reactivo A: solucin de xylidyl blue 0,1 mM y EGTA 0,04 mM en buffer Tris 0,2 M, pH 11,3. Standard*: solucin de magnesio 3 mg/dl. REACTIVOS NO PROVISTOS Calibrador A plus de Wiener lab. cuando se emplea la tcnica automtica. Puede tambin emplearse en calibracin de tcnicas manuales. Agua destilada.
INSTRUCCIONES PARA SU USO Standard: cada vez que se use, transferir una cantidad en exceso a un tubo limpio y pipetear de all el volumen necesario, descartando el remanente.
VERSIN: 01
Pgina 40 de 153
PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro". No ingerir. Evitar el contacto con piel y ojos. En caso de derrame o salpicaduras, lavar con abundante agua la zona afectada. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de qumica clnica. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos: son estables a temperatura ambiente (< 25oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Es importante cerrar perfectamente el frasco de Reactivo A una vez utilizado. Standard: en ocasiones puede presentar una ligera coloracin amarillenta que no afecta la correcta funcionalidad del mismo. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS La discoloracin o disminucin de pH del Reactivo A indican deterioro del mismo. En tal caso desechar. La formacin de precipitado o turbidez en el Standard, es indicio de deterioro. En tal caso desechar. METODO DE CONTROL DE CALIDAD Si la muestra a ensayar es suero, procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas de magnesio, con cada determinacin. En el caso de muestras de orina, utilizar un control con base de orina.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 41 de 153
VALORES DE REFERENCIA Muestra Suero o plasma Orina LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO El Standard no debe ser empleado en analizadores automticos, slo debe usarse en calibracin de tcnicas manuales. Para evitar contaminaciones con magnesio se deben emplear tubos y cubetas plsticas descartables o material de vidrio rigurosamente limpio, libre de magnesio y de cualquier traza de anticoagulantes. Para esto se recomienda lavar el material de vidrio con detergentes no inicos (Noin de Wiener lab.) y enjuagar con cidos minerales diluidos, efectuando por ltimo varios enjuagues con agua destilada. Se recomienda utilizar pipetas y tubos de uso exclusivo para esta determinacin. IBR (mg/dL) 1,7 a 2,5 60 a 210 mg/24 hrs
5.1.2.13 Fer-color/ Transferrina

Mtodo colorimtrico para la determinacin de la Capacidad Total de Fijacin de Hierro (TIBC) del suero FUNDAMENTOS DEL MTODO La transferrina o protena transportadora especfica del hierro, se determina por su actividad fisiolgica de captar Fe (III) a pH mayor que 7,2 donde la transferrina se satura en presencia de Fe (III) en exceso. El remanente de Fe (III) no ligado se elimina totalmente por coprecipitacin con carbonato de magnesio.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 42 de 153
El hierro unido a la transferrina se libera y determina colorimtricamente segn la tcnica de Fer-color o Fer-color AA. La cantidad de Transferrina se expresa como los microgramos de Fe (III) con que est saturada. REACTIVOS PROVISTOS A. Reactivo A: solucin estabilizada de Fe (III). B. Reactivo B: carbonato de magnesio granulado. REACTIVOS NO PROVISTOS Fer-color o Fer-color AA de Wiener lab. Agua destilada. PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro". Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de anlisis clnicos. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Los Reactivos Provistos son estables a temperatura ambiente hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Reactivo B: el frasco debe volver a taparse inmediatamente despus de retirar las porciones necesarias para el momento. VALORES DE REFERENCIA La literatura registra los siguientes rangos de valores para Transferrina y Saturacin de la Transferrina en personas normales:
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 43 de 153
Transferrina (TIBC) Saturacin de la Transferrina
250-400 ug/dl 20-55%.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO La agitacin insuficiente producir valores falsamente aumentados de Transferrina. La concentracin de Fe (III) del Reactivo A es 10 veces mayor que la del Standard. Por lo tanto, no debe medirse este reactivo con la misma micropipeta que se utilice para el Standard y los Desconocidos. Caso contrario se introducen fuertes contaminaciones que invalidan los resultados. Adems, como la medida exacta de esta solucin no es crtica, puede usarse para tal fin una pipeta de 1 ml.
5.1.3. PRUEBAS DE PERFIL RENAL 5.1.3.1 Creatinina cintica AA

Mtodo cintico para la determinacin de creatinina en suero, plasma u orina FUNDAMENTOS DEL METODO La creatinina reacciona con el picrato alcalino (reaccin de Jaffe) produciendo un cromgeno rojo. La velocidad de esta reaccin, bajo condiciones controladas, es una medida de la concentracin de creatinina de la muestra puesto que se comporta como una reaccin cintica de primer orden para la creatinina. Por otra parte, se ha demostrado que los cromgenos no-creatinina que interfieren en la mayor parte de las tcnicas convencionales, reaccionan dentro de los 30 segundos de iniciada la reaccin. De manera que entre los 30 segundos y los 5
VERSIN: 01
Pgina 44 de 153
minutos posteriores al inicio de la reaccin, el incremento de color se debe exclusivamente a la creatinina.
REACTIVOS PROVISTOS A. Reactivo A: solucin de cido pcrico 12,7 mmol/l y laurilsulfato de sodio 8,4 mmol/l. B. Reactivo B: solucin de borato 53 mmol/l e hidrxido de sodio 970 mmol/l. Standard*: solucin de creatinina 20 mg/l. REACTIVOS NO PROVISTOS Calibrador A plus de Wiener lab. INSTRUCCIONES PARA SU USO Reactivo A: listo para usar. A baja temperatura puede presentar turbidez o sedimento. En tal caso, colocar en bao de agua a 37oC unos minutos antes de usar. Reactivo de Trabajo: de acuerdo al volumen de trabajo, mezclar cuatro partes de Reactivo A y una parte de Reactivo B. Rotular y fechar. A baja temperatura puede presentar turbidez o sedimento. En tal caso, colocar en bao de agua a 37oC unos minutos antes de usar. PRECAUCIONES El kit es para uso diagnstico "in vitro". Reactivo B: irritante. R36/38: irrita los ojos y la piel. S24/25: evitar el contacto con los ojos y la piel. S26: en caso de contacto con los ojos, lvense inmediata y
VERSIN: 01
Pgina 45 de 153
abundantemente con agua y acdase a un mdico. S28: en caso de contacto con la piel, lvese inmediata y abundantemente con agua. S37/39: usar guantes adecuados y proteccin para los ojos/la cara. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de anlisis clnicos. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos: son estables a temperatura ambiente (menor a 25oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Reactivo de Trabajo: premezclado y en envase plstico, es estable una semana a temperatura ambiente. En analizadores automticos que emplean Reactivo de Trabajo nico (premezclado), referirse a las adaptaciones especficas de cada analizador. Evitar la exposicin prolongada al aire, manteniendo el frasco bien tapado cuando no sea utilizado. METODO DE CONTROL DE CALIDAD Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas de creatinina, con cada determinacin. VALORES DE REFERENCIA Muestra Hombre Suero o plasma Mujer Hombre Orina Mujer Hombre Depuracin de creatinina Mujer
Elabor: Dayibeth Geney Ortiz Katina Rivera Olave Fecha: Noviembre/2011 Revis: Dra. Karina Viloria Barragn Coordinadora de Laboratorio Fecha: Noviembre/2011
IBR (mg/L) 7 - 13 6 - 11 14 - 26 mg/Kg/24 hs 11 - 20 mg/Kg/24 hs 94 - 140 ml/min/1,73 m2 72 - 110 ml/min/1,73 m2

Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 46 de 153
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Causas de resultados errneos son: Temperatura: si bien la temperatura de reaccin admite una variacin entre 22 y 28oC, una diferencia entre la temperatura de incubacin del Standard respecto de las muestras disminuye la precisin del mtodo. Tiempo de lectura: ligeras variaciones en la medicin del tiempo afectan notablemente la exactitud del mtodo. Las lecturas debern realizarse exactamente a los 30 segundos luego de haber mezclado la muestra con el reactivo y a los 5 minutos (4 minutos 30 segundos luego de la primera lectura).
5.1.3.2 Urea UV cintica AA

Para la determinacin de urea en suero, plasma u orina REACTIVOS PROVISTOS Standard*: solucin de urea 0,60 g/l (equivalente a 28,04 mg/dl de BUN). A. Reactivo A: solucin conteniendo buffer Good pH 7,6, 2- oxoglutarato, ureasa y glutamato deshidrogenasa (GLDH). B. Reactivo B: solucin conteniendo NADH. Concentraciones finales Buffer Good: 250 mmol/l
VERSIN: 01
Pgina 47 de 153
2-Oxoglutarato: 7,5 mmol/l NADH: 0,28 mmol/l Ureasa (Jack bean): 5000 U/l GLDH (microbiana): 800 U/l
REACTIVOS NO PROVISTOS Calibrador A Plus de Wiener lab. INSTRUCCIONES PARA SU USO Reactivos A y B: listos para usar. Estos pueden usarse separados o como Reactivo nico mezclando 4 partes de Reactivo A + 1 parte de Reactivo B (ej.: 4 ml Reactivo A + 1 ml Reactivo B).
PRECAUCIONES Los Reactivos son para uso diagnstico "in vitro". Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de anlisis clnicos. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Una vez abiertos, no deben permanecer destapados y fuera del refrigerador durante lapsos de tiempo prolongados. Evitar contaminaciones. Reactivo nico (premezclado): en refrigerador (2-10oC) es estable 30 das a partir del momento de su preparacin.
VERSIN: 01
Pgina 48 de 153
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS La turbidez es indicio de deterioro de los Reactivos. Cuando el espectrofotmetro ha sido llevado a cero con agua, lecturas de Absorbancia del Blanco inferiores a 1,000 D.O. (a 340 nm) son indicio de deterioro del mismo. METODO DE CONTROL DE CALIDAD Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas de urea, con cada determinacin.
VALORES DE REFERENCIA Suero o plasma 0,10 0,50 g/L (4,7 - 23,4 mg/dl como BUN) Normalmente, la eliminacin de urea est sujeta a grandes variaciones dependientes de la dieta. Por trmino medio, y con una dieta mixta corriente, se excretan unos 30 g en 24 horas, con oscilaciones comprendidas entre 20 g y 40 g.
Orina
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Para preservar la integridad de los reactivos debe emplearse material volumtrico perfectamente limpio y seco.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 49 de 153
5.1.3.3 Uricostat enzimtico AA

Para la determinacin de cido rico en suero, plasma u Orina REACTIVOS PROVISTOS Standard*: solucin de cido rico 10 mg/dl. A. Reactivo A: solucin conteniendo buffer Good pH 7,8 y la sal sdica de 3,5 diclorohidroxibenceno sulfnico (DHS). B. Reactivo B: solucin conteniendo buffer Good pH 7,8, 4-aminofenazona (4AF), uricasa (UOD), peroxidasa (POD), y ferrocianuro de potasio. Concentraciones finales Buffer Good: 50 mmol/l UOD: 200 U/l POD: 1000 U/l 4-AF: 0,10 mmol/l Ferrocianuro de potasio: 6 umol/l DHS: 2,0 mmol/l REACTIVOS NO PROVISTOS Calibrador A Plus de Wiener lab. INSTRUCCIONES PARA SU USO Reactivos A y B: listos para usar. Estos pueden usarse separados o como Reactivo nico mezclando 4 partes de Reactivo A + 1 parte de Reactivo B (ej. 4 ml Reactivo A + 1 ml Reactivo B).
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 50 de 153
PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro". No ingerir. Evitar el contacto con la piel y los ojos. En caso de derrame o salpicaduras, lavar con abundante agua la zona afectada. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de anlisis clnicos. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Una vez abiertos, no deben permanecer destapados y fuera del refrigerador durante lapsos prolongados. Evitar contaminaciones. Reactivo nico (premezclado): en refrigerador (2-10oC) es estable 1 mes a partir de la fecha de su preparacin. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS La dificultad en obtener los valores de los controles dentro del rango asignado (ej. Standatrol S-E 2 niveles) es indicio de deterioro de los Reactivos. En tal caso, desechar. La turbidez es indicio de deterioro de los Reactivos. Desechar cuando las lecturas del Blanco sean > 0,200 D.O. o las lecturas del Standard sean anormalmente bajas. METODO DE CONTROL DE CALIDAD Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas de cido rico, con cada determinacin.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 51 de 153
VALORES DE REFERENCIA Se analizaron con Uricostat enzimtico AA lquida, 120 muestras de individuos de ambos sexos, con edades comprendidas entre 20 y 45 aos, provenientes de la ciudad de Rosario (Argentina), sin sntomas de gota, nefropata gotosa, nefrolitiasis por uratos o cualquier otra enfermedad aparente. Se encontr que el 95% de los resultados cubrieron los siguientes rangos:
Muestra Suero o plasma Orina Hombres Mujeres
IBR (mg/dL) 2,5-6,0 2,0-5,0 250 a 750 mg/24 horas
5.1.4. PRUEBAS DE PERFIL LIPDICO 5.1.4.1 HDL Colesterol AA

Mtodo colorimtrico sin precipitacin para la determinacin de HDL-colesterol en suero o plasma FUNDAMENTOS DEL MTODO El presente, es un mtodo homogneo que emplea dos reactivos. En la primera etapa de la reaccin, se solubiliza y consume el colesterol libre o unido a protenas distintas de la HDL en una reaccin que involucra a colesterol oxidasa (CHO), peroxidasa (POD) y N-etil-N-(2-hidroxi-3-sul-fopropil)-3-toluidina disdica (TOOS) dando lugar a un producto no coloreado. En una segunda etapa, un detergente solubiliza especficamente las HDL. El HDL-colesterol es liberado para reaccionar con colesterol esterasa (CHE), colesterol oxidasa y TOOS, dando un producto coloreado:
VERSIN: 01
Pgina 52 de 153
REACTIVOS PROVISTOS A. Reactivo A: solucin de colesterol oxidasa (< 1000 U/l), peroxidasa (< 1300 U/l) y N-etil-N-(2-hidroxi-3-sulfopropil)-3- toluidina disdica (TOOS) (< 1 mM), en buffer de Good, con estabilizante y conservante apropiados. B. Reactivo B: solucin de detergente (< 2%), colesterol esterasa (< 1500 U/l) y 4-aminoantipirina (4-AAP) (< 1 mM), en buffer de Good, con estabilizante y conservante apropiados. Calibrador: suero humano liofilizado conteniendo lipoprotenas de diversos tipos incluyendo HDL. La concentracin es variable lote a lote. REACTIVOS NO PROVISTOS Agua destilada. INSTRUCCIONES PARA SU USO Calibrador: reconstituir con el volumen de agua destilada indicado en el rtulo. Tapar el vial y dejar en reposo durante 5 minutos. Ayudar a la disolucin rotando el vial suavemente, evitando la formacin de espuma. No agitar. PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro". No pipetear con la boca, el Calibrador ha sido examinado para HBsAg, HCV y anticuerpos contra HIV 1/2, encontrndose no reactivo. No obstante, debe procesarse como si se tratara de material infectivo.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 53 de 153
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar. Una vez abiertos los reactivos son estables durante 3 semanas en refrigerador (2-10oC). Una vez reconstituido, el Calibrador es estable 1 semana en refrigerador (2-10oC) o 1 mes congelado (20oC), evitando descongelar y volver a congelar. CALIBRACION El Calibrador debe procesarse junto con las muestras y en la misma forma que stas. Las concentraciones del Calibrador se encuentran alrededor de los niveles de decisin mdica y son variables lote a lote. Ingresar el valor de concentracin del calibrador cada vez que se cambie de lote. METODO DE CONTROL DE CALIDAD Standatrol S-E 2 niveles. VALORES DE REFERENCIA Los valores esperados de HDL colesterol son los siguientes: IBR (mg/dL) 30 - 70 30 - 85
Varones Mujeres
El panel de expertos del National Cholesterol Education Program (NCEP) provee los siguientes valores de HDL colesterol: Adultos: 40 - 60 mg/dl Valores mayores de 40 mg/dl se consideran recomendables y los que se encuentren por encima de 60 mg/dl se han considerado como protectivos. Por el
VERSIN: 01
Pgina 54 de 153
contrario, valores de HDL colesterol por debajo de 40 mg/dl se consideran como ndice significativo de riesgo de enfermedad cardaca coronaria. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO No deben emplearse anticoagulantes que contengan citrato. No exponer los reactivos a la luz. Conservar los reactivos de acuerdo a las instrucciones. En caso de muestras con concentraciones de triglicridos mayores a 1200 mg/dl, diluir las mismas con solucin fisiolgica.
5.1.4.2 Colestat enzimtico AA

Mtodo enzimtico para la determinacin de colesterol en suero o plasma REACTIVOS PROVISTOS Standard*: solucin de colesterol 2 g/l. Reactivo A: solucin conteniendo colesterol esterasa (CHE), colesterol oxidasa (CHOD), peroxidasa (POD), 4- aminofenazona (4-AF) y buffer Good, conteniendo fenol y colato de sodio, en las siguientes concentraciones: CHE: 100 U/l CHOD: 100 U/l POD: 1000 U/l 4-AF: 0,2 mmol/l Good: 50 mmol/l Fenol: 15 mmol/l Colato de sodio: 0,2 mmol/l REACTIVOS NO PROVISTOS Calibrador A plus de Wiener lab.
VERSIN: 01
Pgina 55 de 153
PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro". Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de qumica clnica. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No mantener a temperaturas elevadas durante lapsos prolongados. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS Lecturas del Blanco superiores a 0,160 D.O. son indicio de deterioro de los reactivos. En tal caso desechar. MATERIAL REQUERIDO (no provisto) Micropipetas y pipetas para medir los volmenes indicados. METODO DE CONTROL DE CALIDAD Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas de colesterol, con cada determinacin. VALORES DE REFERENCIA El panel de expertos del National Cholesterol Education Program (NCEP) provee los siguientes valores de colesterol: IBR (g/L) Deseable Moderadamente alto Elevado < 2,00 2,00 - 2,39 2,40
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 56 de 153
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Los reductores disminuyen la respuesta de color mientras que los oxidantes colorean el Reactivo A aumentando los Blancos. Los detergentes, metales pesados y cianuros son inhibidores enzimticos. No emplear el Standard en analizador automtico debido a la distinta tensin superficial con respecto al suero, dada por el disolvente empleado en su preparacin. Se recomienda realizar una recalibracin semanal o cada vez que se obtengan valores fuera del rango aceptable de los controles (Standatrol S-E 2 niveles).
5.1.4.3 TG Color AA
Mtodo enzimtico para la determinacin de triglicridos en suero o plasma REACTIVOS PROVISTOS A. Reactivo A: solucin conteniendo buffer Good (pH 6,8), clorofenol, lipoprotein lipasa (LPL), glicerol kinasa (GK), glicerol fosfato oxidasa (GPO), peroxidasa (POD), adenosina trifosfato (ATP) y 4-aminofenazona (4-AF). Standard: solucin de glicerol 2,26 mmol/l (equivale a 2 g/l de triolena). Concentraciones finales Buffer Good: 50 mmol/l; pH 6,8 Clorofenol: 2 mmol/l Lipoprotein lipasa: 800 U/l GK: 500 U/l GPO: 1500 U/l POD: 900 U/l ATP: 2 mmol/l 4-AF: 0,4 mmol/l
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 57 de 153
REACTIVOS NO PROVISTOS Calibrador A plus de Wiener lab. para la tcnica automtica. PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro". Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de anlisis clnicos. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC) y al abrigo de la luz hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No mantener a temperaturas elevadas durante lapsos prolongados. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS El Reactivo A puede presentar una coloracin rosada que no afecta su funcionamiento. Lecturas del Blanco superiores a 0,250 D.O. o lecturas del Standard anormalmente bajas, son indicios de deterioro del Reactivo A. En tal caso, desechar. METODO DE CONTROL DE CALIDAD Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas de triglicridos, con cada determinacin.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 58 de 153
VALORES DE REFERENCIA El panel de expertos del National Cholesterol Education Program (NCEP) provee los siguientes valores de Triglicridos: IBR (g/L) < 1,50 2,00 - 4,99 2,00 5,00
Deseable Moderadamente elevado a elevado Elevado Muy elevado LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO
Los reductores disminuyen la respuesta de color, mientras que los oxidantes colorean el Reactivo A aumentando los Blancos. Las contaminaciones con glicerol producen resultados falsamente aumentados.
5.1.5. PRUEBAS DE PERFIL CARDIACO 5.1.5.1 CK-NAC AA

Mtodo UV optimizado (IFCC) para la determinacin de Creatina Kinasa (CK) en suero o plasma REACTIVOS PROVISTOS A. Reactivo A: solucin de buffer imidazol. B. Reactivo B: solucin de componentes conteniendo creatina fosfato y componentes reactivos en cantidades suficientes para las siguientes concentraciones finales:
VERSIN: 01
Pgina 59 de 153
Imidazol: 100 mmol/l; pH 6,7 creatina fosfato: 30 mmol/l ADP: 2 mmol/l Glucosa: 20 mmol/l NADP: 2 mmol/l Hexoquinasa: 2500 U/l glucosa-6-fosfato deshidrogenasa: 2000 U/l acetato de magnesio: 10 mmol/l AMP: 5 mmol/l di-(adenosina-5') pentafosfato: 10 umol/l N-acetilcistena: 20 mmol/l INSTRUCCIONES PARA SU USO Reactivos Provistos: Estos pueden usarse separados o como Reactivo nico, mezclando 5 partes de Reactivo A con 1 parte de Reactivo B (ej.: 5 ml Reactivo A + 1 ml Reactivo B). PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro". Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de anlisis clnicos. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Una vez abiertos, no deben permanecer fuera del refrigerador por perodos prolongados. Evitar contaminaciones. Reactivo nico (premezclado): estable 20 das en refrigerador (2-10oC) a partir de la fecha de su preparacin.
VERSIN: 01
Pgina 60 de 153
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS Cuando el espectrofotmetro ha sido llevado a cero con agua destilada, lecturas de absorbancia del Reactivo nico > 0,800 D.O. (a 340 nm) son indicio de deterioro del mismo. METODO DE CONTROL DE CALIDAD Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con actividades conocidas de creatina kinasa, con cada determinacin.
VALORES DE REFERENCIA Temperatura Hombres Mujeres 25C 80 70 IBR (U/I) 30C 130 110 37C 195 170
5.1.5.2 CK-MB AA
Mtodo UV para la determinacin de la isoenzima MB de Creatina Kinasa en suero o plasma mediante anticuerpos anti CK-M FUNDAMENTOS DEL MTODO El mtodo se basa en la inhibicin especfica de las subunidades CK-M con anticuerpos anti CK-M. Los anticuerpos inhiben tanto la isoenzima MM como las subunidades M correspondientes a CK-MB. Las subunidades B se determinan mediante el empleo de un sistema reactivo basado en una tcnica analtica optimizada por la IFCC, con N-acetilcistena como activador, adicionado de anticuerpos anti CK-M.
VERSIN: 01
Pgina 61 de 153
REACTIVOS PROVISTOS A. Reactivo A: solucin de buffer imidazol. B. Reactivo B: solucin conteniendo creatina fosfato, anticuerpos anti-CK M y componentes reactivos en cantidades suficientes para las siguientes concentraciones finales: Imidazol: 100 mmol/l; pH 6,7 creatina fosfato: 30 mmol/l ADP: 2 mmol/l Glucosa: 20 mmol/l NADP: 2 mmol/l Hexoquinasa: 2500 U/l glucosa-6-fosfato deshidrogenasa: 2000 U/l acetato de magnesio: 10 mmol/l AMP: 5 mmol/l di-(adenosina-5') pentafosfato: 10 umol/l N-acetil cistena: 20 mmol/l Anticuerpos capaces de inhibir 1000 U/l de CK-M. Control: vial conteniendo CK-MB de origen humano, liofilizada (ver tabla adjunta para valor terico). REACTIVOS NO PROVISTOS Solucin fisiolgica (cloruro de sodio 9 g/dl). Agua destilada. INSTRUCCIONES PARA SU USO Reactivos Provistos: estos pueden usarse separados o como Reactivo nico, mezclando 5 partes de Reactivo A con 1 parte de Reactivo B (ej.: 5 ml Reactivo A + 1 ml Reactivo B).
VERSIN: 01
Pgina 62 de 153
Control: abrir el vial teniendo la precaucin de no perder material. Reconstituir con el volumen de agua destilada indicado en el rtulo. Tapar y esperar 5 minutos. Disolver el contenido completamente por inversin del vial. El Control de CK-MB reconstituido se trata de la misma manera que una muestra desconocida. PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro". El Control ha sido examinado para antgeno de superficie del virus de hepatitis B, virus de hepatitis C y anticuerpos contra HIV 1/2, encontrndose no reactivo. No obstante, las muestras y el Control deben manipularse como si fueran capaces de transmitir infeccin. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de qumica clnica. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Una vez abiertos, no deben permanecer fuera del refrigerador por perodos prolongados. Evitar contaminaciones. Reactivo nico (premezclado): estable 20 das en refrigerador (2-10oC) a partir del momento de su mezclado. Control reconstituido: estable 3 das refrigerado (2-10oC), 2 das a 25oC o 3 meses congelado (-20oC). No congelar y descongelar repetidamente. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS Cuando el espectrofotmetro ha sido llevado a cero con agua destilada, lecturas de absorbancia del Reactivo nico superiores a 0,500 D.O. (a 340 nm) son indicio de deterioro del mismo.
VERSIN: 01
Pgina 63 de 153
METODO DE CONTROL DE CALIDAD Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Control CK-MB) con actividades conocidas de CK-MB, con cada determinacin. VALORES DE REFERENCIA IBR (U/I) Temperatura Valores 25C 10 30C 16 37C 25
INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS Se tiene alta probabilidad de dao de miocardio si se cumplen simultneamente las siguientes condiciones: La actividad de CK total excede los siguientes rangos normales: IBR (U/I) Temperatura 25C 30C 37C Hombres 10 - 80 15 - 130 24 195 Mujeres 10 70 15 - 110 24 - 170 Si se sospecha dao de miocardio y los valores se encuentran por debajo del rango normal, existe la posibilidad de un infarto reciente. En este caso debe repetirse la determinacin luego de 4 horas. A. La actividad de CK-MB excede los valores normales. B. El porcentaje de CK-MB se encuentra entre el 6-20% del valor de CK total. Si el porcentaje es menor al 6% es probable que haya dao del msculo esqueltico. Si el porcentaje supera el 20% del valor total de CK se puede sospechar de la presencia de una forma macro de CK (CK atpica) que no es inhibida por los anticuerpos anti CK-M.
VERSIN: 01
Pgina 64 de 153
La presencia de CK atpica puede determinarse por: a) Persistencia por ms de 48 horas (la CK-MB decae aproximadamente a las 3048 horas de iniciado el infarto). b) Estabilidad frente al tratamiento de la muestra a 40oC durante 20 minutos. c) Anlisis electrofortico (se obtiene una banda entre las isoenzima MM y MB). LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Muestras con actividad CK total que supera las 1000 U/l deben diluirse con solucin fisiolgica. El resultado obtenido debe multiplicarse por la dilucin efectuada.
5.1.6. PRUEBAS DE PERFIL PANCREATICO 5.1.6.1 Lipasa AA

Mtodo cintico para la determinacin de lipasa en suero y plasma FUNDAMENTOS DEL METODO La lipasa hidroliza el sustrato definido 1,2-O-dilauril-rac-glicerol-3-glutrico-(6metilresorufina)-ster para liberar cido glutrico-metilresorufina ster, compuesto inestable que se descompone espontneamente liberando un compuesto coloreado (metilresorufina) que se mide a 570 nm. La velocidad de aparicin de color es directamente proporcional a la actividad enzimtica.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 65 de 153
REACTIVOS PROVISTOS Reactivo A: buffer de Goods 50 mmol/l, pH 8,0, con colipasa y sales biliares. Reactivo B: solucin de 1,2-O-dilauril-rac-glicerol-3-glutrico-(6-metilresorufina)ster (sustrato de la lipasa) en buffer tartrato 10 mmol/l.
REACTIVOS NO PROVISTOS Calibrador A plus de Wiener lab. Solucin fisiolgica (NaCl 9 g/l).
PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro". Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de anlisis clnicos. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Proteger de la luz. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS El Reactivo A es un lquido lmpido. Si presenta alguna turbiedad, no debe ser utilizado. El Reactivo B es una microemulsin levemente opalescente de color naranja. Si presenta una coloracin netamente rojiza, debe descartarse.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 66 de 153
CALIBRACION El Calibrador A plus es procesado de la misma manera que las muestras y a partir de l se calcula el factor correspondiente. Ingresar el valor de concentracin del calibrador, cada vez que se cambie de lote. METODO DE CONTROL DE CALIDAD Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con actividades conocidas de lipasa, con cada determinacin. VALORES DE REFERENCIA Adultos: 13 - 60 U/l (37oC) LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO No pipetear con la boca. Se recomienda utilizar Standatrol S-E 2 niveles de Wiener lab. como material de control de calidad, ya que con controles de otras marcas comerciales pueden obtenerse valores diferentes al rango especificado dado que los mismos dependen del mtodo o sistema utilizado. Es importante evitar la contaminacin por arrastre en cubetas y agujas cuando se han utilizado para determinaciones de triglicridos, colesterol y HDL y LDL colesterol. Para ello, se recomienda emplear los programas de limpieza adicionales que se indican en cada analizador. Es conveniente realizar la determinacin de lipasa en forma independiente de los otros ensayos.
5.1.6.2 Amilasa 405 AA

Mtodo cintico a 405 nm para la determinacin de amilasa en suero, plasma u orina. Sustrato CNPG3
VERSIN: 01
Pgina 67 de 153
FUNDAMENTOS DEL METODO La -amilasa hidroliza el sustrato definido 2-cloro-pnitrofenil--D-maltotrisido (CNP-G3) para liberar 2-clorop-nitrofenol (CNP), formndose 2-cloro-nitrofenil-Dmaltsido (CNP-G2), maltotriosa (G3) y glucosa. El CNP absorbe a 405 nm y la velocidad de aparicin del color es directamente proporcional a la actividad enzimtica. REACTIVOS PROVISTOS Reactivo A: solucin conteniendo CNP-G3 2,25 mmol/l, cloruro de calcio 5 mmol/l, cloruro de sodio 70 mmol/l, tiocianato de potasio 900 mmol/l y buffer MES pH 6, 100 mmol/l. PRECAUCIONES El Reactivo A es para uso diagnstico "in vitro". R20/21/22: nocivo por inhalacin, por ingestin y en contacto con la piel. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de anlisis clnicos. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivo Provisto: estable en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS El Reactivo A puede presentar una coloracin amarillenta que no afecta su funcionamiento. Cuando el espectrofotmetro ha sido llevado a cero con agua
VERSIN: 01
Pgina 68 de 153
destilada, las lecturas de absorbancia del Reactivo A superiores a 0,500 D.O. (a 405 nm) son indicio de deterioro del mismo. METODO DE CONTROL DE CALIDAD Si la muestra a ensayar es suero, procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con actividades conocidas de amilasa, con cada determinacin. VALORES DE REFERENCIA IBR (U/I) Temperatura Suero Orina al azar 25C Hasta 84 Hasta 455 30C 100 540 37C 125 680
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO No pipetear con la boca. Constituye una causa de resultado errneo la contaminacin del Reactivo A con saliva, dada la elevada actividad amilsica de la misma. En tal caso, descartar el Reactivo. Evitar el contacto con elementos de goma (tapones, contratapas) que deterioran el Reactivo A.
5.1.7. PRUEBAS DE PERFIL HEPATICO 5.1.7.1 Bilirrubina Total AA

Mtodo DPD para la determinacin de bilirrubina total en suero o plasma
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 69 de 153
FUNDAMENTOS DEL MTODO La bilirrubina indirecta, unida a la albmina, es liberada por un tensioactivo. La bilirrubina total reacciona con la sal de diclorofenildiazonio (DPD) formando un azocompuesto de color rojo en solucin cida. REACTIVOS PROVISTOS Reactivo A: solucin acuosa conteniendo cido clorhdrico 150 mmol/l y tensioactivo. Reactivo B: solucin acuosa conteniendo sal de diclorofenildiazonio 1,5 mmol/l en cido clorhdrico 150 mmol/l. REACTIVOS NO PROVISTOS Calibrador A plus de Wiener lab. INSTRUCCIONES PARA SU USO Reactivos Provistos: antes de utilizar, mezclar por inversin. El Reactivo B puede presentar una ligera turbidez que no afecta su reactividad.
PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro". Los reactivos son corrosivos. R34: provoca quemaduras. S24/25: evitar el contacto con los ojos y la piel. S26: en caso de contacto con los ojos, lvense inmediata y abundantemente con agua y acdase a un mdico. S28: en caso de contacto con la piel, lvese inmediata y abundantemente con agua. S37/39: usar guantes adecuados y proteccin para los ojos/la cara. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de anlisis clnicos. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente.
VERSIN: 01
Pgina 70 de 153
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. METODO DE CONTROL DE CALIDAD Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas de bilirrubina total, con cada determinacin. VALORES DE REFERENCIA Bilirrubina total en suero o plasma: IBR (mg/dL) Hasta 10 Nacidos a termino < 20 14 - 87 34 - 115 15 - 120 Prematuros < 20 < 80 < 120 < 160
Adultos Recin nacidos Sangre de cordn Hasta las 24 horas Hasta las 48 horas Del 3 al 5 da
Los valores comienzan luego a disminuir para alcanzar el nivel promedio del adulto al mes del nacimiento. En los prematuros, los niveles tardan ms en alcanzar la normalidad, dependiendo del grado de inmadurez heptica. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO La accin de la luz, tanto sobre las muestras como sobre las soluciones standard, es capaz de destruir en una hora hasta el 50% de la bilirrubina presente.
VERSIN: 01
Pgina 71 de 153
5.1.7.2 Bilirrubina Directa AA

Mtodo DPD para la determinacin de bilirrubina directa en suero o plasma FUNDAMENTOS DEL MTODO La bilirrubina directa reacciona con la sal de diclorofenildiazonio (DPD) formando un azocompuesto de color rojo en solucin cida. REACTIVOS PROVISTOS A. Reactivo A: solucin acuosa conteniendo cido clorhdrico 17 mmol/l. B. Reactivo B: solucin acuosa conteniendo sal de diclorofenildiazonio 0,4 mmol/l en cido clorhdrico 17 mmol/l. REACTIVOS NO PROVISTOS Calibrador A plus de Wiener lab. INSTRUCCIONES PARA SU USO Reactivo B: este reactivo puede presentar una ligera tonalidad pardusca que no afecta su reactividad. PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro". Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de anlisis clnicos. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente.
VERSIN: 01
Pgina 72 de 153
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. METODO DE CONTROL DE CALIDAD Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con concentraciones conocidas de bilirrubina directa, con cada determinacin. VALORES DE REFERENCIA Bilirrubina directa en suero o plasma: Adultos: hasta 2 mg/l LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO La accin de la luz, tanto sobre los sueros como sobre las soluciones standard, es capaz de destruir en una hora hasta el 50% de la bilirrubina presente.
5.1.7.3 GPT (ALT) UV AA

Mtodo UV optimizado (IFCC) para la determinacin de alanina aminotransferasa (GPT/ALT) en suero o plasma REACTIVOS PROVISTOS A. Reactivo A: solucin de buffer TRIS pH 7,5 conteniendo Lalanina. B. Reactivo B: solucin conteniendo 2-oxoglutarato, nicotinamida adenina dinucletido reducido (NADH) y lactato deshidrogenasa (LDH).
VERSIN: 01
Pgina 73 de 153
Concentraciones finales TRIS: 100 mmol/l; pH 7,5 L-alanina: 500 mmol/l NADH: 0,18 mmol/l LDH: 1,5 U/l 2-oxoglutarato: 15 mmol/l INSTRUCCIONES PARA SU USO Reactivos Provistos: estos pueden usarse separados o como Reactivo nico, mezclando 4 partes de Reactivo A con 1 parte de Reactivo B (ej.: 4 ml Reactivo A + 1 ml Reactivo B). PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro". Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de anlisis clnicos. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Una vez abiertos, no deben permanecer fuera del refrigerador por perodos prolongados. Evitar contaminaciones. Reactivo nico (premezclado): estable 2 meses en refrigerador (2-10oC) a partir de la fecha de su preparacin.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 74 de 153
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS Cuando el espectrofotmetro ha sido llevado a cero con agua destilada, lecturas de absorbancia del Reactivo nico inferiores a 0,900 D.O. o superiores a 1,800 D.O. (a 340 nm) son indicio de deterioro del mismo. VALORES DE REFERENCIA IBR (U/I) 30C Hasta 29 Hasta 22
Temperatura Hombres Mujeres
25C Hasta 22 Hasta 17
37C Hasta 41 Hasta 31
METODO DE CONTROL DE CALIDAD Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con actividades conocidas de GPT, con cada determinacin. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Absorbancia inicial baja: cuando una vez agregado el suero la primera lectura (tiempo 0) es inferior a 0,900 D.O., estando el Reactivo B en condiciones, indica una muestra con muy alta actividad de GPT (que consume el NADH an antes de esta lectura) o con una concentracin de cetocidos endgenos particularmente elevada. En este caso, repetir la determinacin con muestra diluida con solucin fisiolgica y multiplicar el resultado por la dilucin efectuada.
5.1.7.4GOT (AST) UV AA
Mtodo UV optimizado (IFCC) para la aminotransferasa (GOT/AST) en suero o plasma
Elabor: Dayibeth Geney Ortiz Katina Rivera Olave Fecha: Noviembre/2011 Revis: Dra. Karina Viloria Barragn Coordinadora de Laboratorio Fecha: Noviembre/2011
determinacin
Aprob:
de
aspartato
VERSIN: 01
Pgina 75 de 153
REACTIVOS PROVISTOS A. Reactivo A: solucin de buffer TRIS pH 7,8 conteniendo Laspartato. B. Reactivo B: solucin conteniendo 2-oxoglutarato, nicotinamida adenina dinucletido reducido (NADH), malato deshidrogenasa (MDH) y lactato deshidrogenasa (LDH). Concentraciones finales TRIS: 100 mmol/l; pH 7,8 L-aspartato: 200 mmol/l NADH: 0,18 mmol/l MDH: 400 U/l LDH: 600 U/l 2-oxoglutarato: 12 mmol/l INSTRUCCIONES PARA SU USO Reactivos Provistos: estos pueden usarse separados o como Reactivo nico, mezclando 4 partes de Reactivo A con 1 parte de Reactivo B (ej.: 4 ml Reactivo A + 1 ml Reactivo B). PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro". Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de anlisis clnicos. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 76 de 153
Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Una vez abiertos, no deben permanecer fuera del refrigerador por perodos prolongados. Evitar contaminaciones. Reactivo nico (premezclado): estable 2 meses en refrigerador (2-10oC) a partir de la fecha de su preparacin. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS Cuando el espectrofotmetro ha sido llevado a cero con agua destilada, lecturas de absorbancia del Reactivo nico inferiores a 0,900 D.O. o superiores a 1,800 D.O. (a 340 nm) son indicio de deterioro del mismo. VALORES DE REFERENCIA Temperatura Hombres Mujeres 25C Hasta 18 Hasta 15 IBR (U/I) 30C Hasta 25 Hasta 21 37C Hasta 38 Hasta 32
METODO DE CONTROL DE CALIDAD Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con actividades conocidas de GOT, con cada determinacin. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Absorbancia inicial baja: cuando una vez agregado el suero la primera lectura (tiempo 0) es inferior a 0,900 D.O., estando el Reactivo B en condiciones, indica una muestra con muy alta actividad de GOT (que consume el NADH an antes de esta lectura) o con una concentracin de cetocidos endgenos particularmente elevada. En este caso, repetir la determinacin con muestra diluida con solucin fisiolgica y multiplicar el resultado por la dilucin efectuada.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 77 de 153
5.1.7.5 -G-test cintica AA

Mtodo (Szasz modificado) para la determinacin de -glutamil transferasa en suero o plasma. Sustrato recomendado por la IFCC. REACTIVOS PROVISTOS A. Reactivo A: solucin de buffer Tris conteniendo glicilglicina. B. Reactivo B: solucin de L--glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida. Concentraciones finales Buffer Tris: 100 mmol/l; pH 8,5 L--glutamil-3-carboxi-4-nitroanilida: > 2,9 mmol/l Glicilglicina: 100 mmol/l REACTIVOS NO PROVISTOS Solucin fisiolgica (NaCl 9 g/l). INSTRUCCIONES PARA SU USO Reactivos Provistos: estos pueden usarse separados o como Reactivo nico, mezclando 4 partes de Reactivo A con 1 parte de Reactivo B (ej.: 4 ml Reactivo A + 1 ml Reactivo B). PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro". Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de anlisis clnicos. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente.
VERSIN: 01
Pgina 78 de 153
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Reactivo nico (premezclado): estable 4 semanas en refrigerador (2-10oC). Proteger de la luz. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS Cuando el espectrofotmetro ha sido llevado a cero con agua destilada, lecturas de absorbancia del Reactivo nico superiores a 1,300 D.O. son indicio de deterioro del mismo. METODO DE CONTROL DE CALIDAD Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con actividades conocidas de -glutamil transferasa, con cada determinacin. VALORES DE REFERENCIA IBR (U/I) 30C 8 - 38 5 - 25
Temperatura Hombres Mujeres
25C 6 - 28 4 - 18
37C 11 - 50 7 - 32
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 79 de 153
5.1.7.6 ALP 405 AA

Mtodo cintico optimizado (DGKC y SSCC) a 405 nm, para la determinacin de fosfatasa alcalina FUNDAMENTOS DEL MTODO La fosfatasa alcalina (ALP o monoster ortofosfrico fosfohidrolasa, EC. 3.1.3.1.) hidroliza al p-nitrofenilfosfato (p-NFF), que es incoloro, produciendo fosfato y pnitrofenol a pH alcalino. La velocidad de aparicin del anin p-nitrofenolato (amarillo) a 405 nm, es proporcional a la actividad enzimtica de la muestra. REACTIVOS PROVISTOS A. Reactivo A: solucin de buffer DEA (dietanolamina), conteniendo sales de magnesio. B. Reactivo B: solucin conteniendo p-nitrofenil fosfato (p-NFF). Concentraciones finales DEA: 1,0 mol/l Mg: 0,5 mmol/l p-NFF: 10 mmol/l INSTRUCCIONES PARA SU USO Reactivos Provistos: estos pueden usarse separados o como Reactivo nico, mezclando 4 partes de Reactivo A con 1 parte de Reactivo B (ej.: 4 ml Reactivo A + 1 ml Reactivo B).
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 80 de 153
INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS Cuando el espectrofotmetro es llevado a cero con agua destilada, lecturas de absorbancia del Reactivo nico (premezclado) superiores a 0.900 D.O. son indicio de deterioro del mismo. PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro". Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de qumica clnica. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos: son estables en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Una vez abiertos, no deben permanecer destapados y fuera del refrigerador por perodos prolongados. Evitar contaminaciones. Reactivo nico (premezclado): estable 1 mes en refrigerador (2-10oC) a partir de la fecha de su preparacin. METODO DE CONTROL DE CALIDAD Procesar 2 niveles de un material de control de calidad (Standatrol S-E 2 niveles) con actividades conocidas de fosfatasa alcalina, con cada determinacin. VALORES DE REFERENCIA En adultos normales (edades entre 20 y 60 aos) se observan los siguientes rangos: IBR (U/I) Temperatura 25C 30C 37C Adultos 40 190 45 - 213 65 - 300
VERSIN: 01
Pgina 81 de 153
Debido al proceso osteoclstico, la isoenzima sea se encuentra aumentada en la niez y adolescencia (hasta los 18 aos, aproximadamente) proporcionando valores de fosfatasa alcalina ms elevados que en los adultos. En condiciones normales se consideran los siguientes valores lmites: IBR (U/I) 30C Hasta 450
Temperatura Nios y adolescentes
25C Hasta 400
37C Hasta 645
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Los anticoagulantes comunes (tales como EDTA disdico, oxalato, citrato o fluoruro) producen inhibicin de la actividad de fosfatasa alcalina. El reactivo puede colorearse en presencia de trazas de soluciones de limpieza a base de hipoclorito. Asegurarse de enjuagar abundantemente con agua desmineralizada todo el material que pueda estar en contacto con hipoclorito, incluyendo las agujas y conexiones de los analizadores, cuando se emplea la tcnica automtica.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 82 de 153
5.1.7.7 RapidLab 348
El diseo totalmente automatizado de los analizadores RapidLab 348 proporciona resultados rpidos y fiables. Diseo compacto que cabe en cualquier lugar. Sistema de sobremesa que ahorra espacio y cubre todas las necesidades de anlisis. Requiere pocos minutos de mantenimiento cada semana. Electrodos Ready Sensor de larga duracin disminuye por disminuyen al mnimo el mantenimiento. Las caractersticas de conectividad de los analizadores RapidLab facilitan el control y la monitorizacin remotos mediante el sistema de administracin de informacin RapidComm.
ESPECIFICACIONES DE DESEMPEO Parmetros medidos, rango de medicin y unidades pH: 6.001 - 8.000 pCO2: 5.0 - 250.0 mmHg pO2: 0.0 - 749.0 mmHg - pAtm : 400 - 825 mmHg Temperatura de medicin: 37.0C +/- 0.15C Volumen de Muestra: 60 a 85 uL Tiempo de respuesta: 45 a 120 segundos; en promedio menos de 60 segundos.
VERSIN: 01
Pgina 83 de 153
5.2 REA DE INMUNOENSAYOS
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 84 de 153
5.2.1. I M M U L I T E 1000
El sistema de Inmunoensayo por quimioluminiscencia del IMMUITE1000 est diseado para un uso sencillo, confiable, de gran desempeo y con una total integracin de la operatividad. A travs del mundo, los sistemas IMMUITE han sido escogidos para varios tipos de pruebas de inmunoensayo demostrando su plataforma flexible y su amplio men de posibilidades. ESPECIFICACIONES: Temperatura de operacin: 18 30C Luminmetro: Tubo fotomultiplicador de Conteo de Fotones Computadora: PC integrada con tarjeta madre Intel 815EEA2LU con su video y acceso a red. Disco duro 10 MB, procesador Intel Pentium III; 700 MHz, RAM 265 MB, CD ROM drive, disco Flexible de 3.5 Interfase de usuario: Sistema Operativo Microsoft Windows 2000, monitor de 15 pantalla plana con touch screen, trackball, y teclado pequeo. Impresora: impresora externa de inyeccin de tinta o laser Capacidades de interfase: LIS conforme a ASTM E1394 y ASTM E 1381, redes via Ethernet (10Base y 10Bsae2) o puerto AUI, modem V 34 . 56K.
VERSIN: 01
Pgina 85 de 153
Requirimiento de energa: 100 VAC, 110 VAC, 220 VAC, 6 Amp, 50/60 Hz lnea dedicada Dimensiones: ancho 114cm, alto 47cm y profundidad 63cm
5.2.2. Cortisol
Utilidad del anlisis: Para su uso en el diagnstico in vitro con los analizadores IMMULITE e IMMULITE 1000 para la medicin cuantitativa del Cortisol (hidrocortisona, Compuesto F) en suero. Est estrictamente indicado para su uso en diagnstico in vitro como ayuda en la valoracin clnica del status adrenal. Referencia: LKCO1 (100 tests), LKCO5 (500 tests) Cdigo del Test: COR Cdigo de Color: Rosa Obscuro Principio del anlisis El IMMULITE/IMMULITE 1000 Cortisol es un inmunoensayo enzimtico Quimioluminiscente competitivo en fase slida. Ciclos de incubacin: 1 30 minutos Advertencias y precauciones Para uso diagnstico in vitro.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 86 de 153
Reactivos Mantener a 28C. Desechar de acuerdo con las normas aplicables. Siga las precauciones universales y manipule todos los componentes como si fueran capaces de transmitir agentes infecciosos. Los materiales derivados de sangre humana han sido analizados y son negativos para sfilis; para anticuerpos frente al HIV 1 y 2; para el antgeno de superficie de hepatitis B y para los anticuerpos de hepatitis C. Se ha usado Azida sdica, en concentraciones menores de 0,1 g/dl, como conservante. Para su eliminacin, lavar con grandes cantidades de agua Para evitar la constitucin de residuos de azidas metlicas, potencialmente explosivas, en las caeras de cobre y plomo. Sustrato quimioluminiscente: evite la contaminacin y exposicin a la luz directa del sol. Agua: Use agua destilada o desionizada. MATERIALES SUMINISTRADOS Los componentes representan un juego completo. Las etiquetas incluidas en la caja son necesarias para el ensayo. Unidades de anlisis de Cortisol: (LCO1) Cada unidad etiquetada con cdigo de barras contiene una bola recubiertas con anticuerpos policlonales de conejo anti-cortisol. Estable a 28C hasta la fecha de Caducidad. LKCO1: 100 unidades. LKCO5: 500 unidades. Espere a que las bolsas de las unidades de anlisis alcancen la temperatura ambiente antes de abrirlas. bralas cortando por el extremo superior, dejando el
VERSIN: 01
Pgina 87 de 153
borde del cierre de cremallera intacto. Vuelva a cerrar las bolsas hermticamente para protegerlas de la humedad. Vial de Reactivo de Cortisol (LCO2) Con cdigos de barras. 7,5 ml de fosfatasa alcalina (de intestino de ternera) conjugada con cortisol en solucin tampn, con conservante. Guardar tapado y refrigerado: estable a 28C hasta la fecha de caducidad. Se recomienda utilizarlo antes de que pasen 30 das despus de abrirlo cuando se guarda segn lo indicado LKCO1: 1 juego. LKCO5: 5 juegos Ajustadores de Cortisol (LCOL, LCOH): Dos viales (bajo y alto) 3 ml cada uno de cortisol en suero humano procesado, con conservante. Estable a 28C durante 30 das despus de abrirse, o hasta 6 meses (alicuotados) a 20C. LKCO1: 1 juego. LKCO5: 2 juegos Componentes del kit que se suministran por separado Diluyente de muestra de Cortisol (LCOZ): Para la dilucin manual de las muestras de los pacientes. Un vial conteniendo 25 ml de suero humano tratado libre de Cortisol, con conservante. Estable a 28C durante 30 das despus de abrirse, o hasta 6 meses (alicuotados) a 20C. LSUBX: Sustrato quimioluminiscente LPWS2: Lavado de sonda LKPM: Kit de limpieza de sonda LCHx-y: Soportes de recipientes de muestras (con cdigos de barras) LSCP: Recipientes de muestras (desechables) LSCC: Tapas para los recipientes de muestras (opcionales) CON6: control multiconstituyente de tres niveles.
VERSIN: 01
Pgina 88 de 153
Tambin necesarios: Pipetas de transferencia de muestras; agua destilada o desionizada; controles. Intervalo de ajuste recomendado: 2 semanas. Muestras de Control de calidad: Use controles o pools de suero con dos niveles diferentes, como mnimo, de cortisol (bajo y alto). Valores Esperados Los siguientes valores de normalidad se han obtenido de la bibliografa para los Niveles de cortisol circulante as como para los resultados de las pruebas de Estimulacin y supresin.
Estos lmites han de considerarse slo como una gua. Cada laboratorio deber Establecer sus propios intervalos de referencia.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 89 de 153
Limitaciones Los resultados de cortisol circulante pueden ser falsamente elevados en las muestras obtenidas de pacientes que estn siendo tratados con prednisolona o prednisona (convertida a prednisolona in vivo). Por ello, se deber tener cuidado al Realizar determinaciones de cortisol en pacientes que se encuentren bajo tratamiento con estos corticosteroides sintticos estructuralmente relacionados. Los anticuerpos heteroflicos en el suero humano pueden reaccionar con las inmunoglobulinas de los componentes del ensayo provocando interferencias con los inmunoanlisis in vitro. Las muestras de los pacientes que frecuentemente estn expuestos a animales o a productos sricos animales pueden presentar este tipo de interferencia que potencialmente ocasione un resultado anmalo. Estos reactivos han sido formulados para minimizar el riesgo de interferencia, no obstante, pueden darse interacciones anmalas entre sueros conflictivos y los componentes del ensayo. Con fines de diagnstico, los resultados obtenidos con este ensayo siempre deben ser usados en combinacin con el examen clnico, la historia mdica del paciente y cualquier otro dato clnico relevante Intervalo de calibracin: 150 g/dl (281 380 nmol/l). Sensibilidad: 0,2 g/dl (5,5 nmol/l). Precisin: Las muestras fueron procesadas por cuadriplicado durante 5 das, en cuatro tandas de trabajo por da, para un total de 20 tandas y 80 replicados.
5.2.3. Ferritina
Utilidad del anlisis: Para el diagnstico in vitro con los analizadores IMMULITE e IMMULITE 1000 para la medicin cuantitativa de Ferritina en suero, como ayuda en el diagnstico clnico de la sobrecarga o deficiencia de hierro.
VERSIN: 01
Pgina 90 de 153
Referencia: LKFE1 (100 tests), LKFE5 (500 tests) Cdigo del Test: FER Cdigo de Color: Aqua Principio del anlisis IMMULITE/IMMULITE 1000 Ferritina es un ensayo inmunomtrico con dos sitios de unin, quimioluminiscente en fase slida. Ciclos de incubacin: 1 30 minutos. Advertencias y Precauciones Para uso diagnstico in vitro. REACTIVOS Mantener a 28C. Desechar de acuerdo con las normas aplicables. Siga las precauciones universales y manipule todos los componentes como si fueran capaces de transmitir agentes infecciosos. Los materiales derivados de sangre humana han sido analizados y son negativos para sfilis; para anticuerpos frente al HIV 1 y 2; para el antgeno de superficie de hepatitis B y para los anticuerpos de hepatitis C. Se ha usado Azida sdica, en concentraciones menores de 0,1 g/dl, como conservante. Para su eliminacin, lavar con grandes cantidades de agua para evitar la constitucin de residuos de azidas metlicas, potencialmente explosivas, en las caeras de cobre y plomo. Sustrato quimioluminiscente: evite la contaminacin y exposicin a la luz directa del sol. Agua: Use agua destilada o desionizada.
VERSIN: 01
Pgina 91 de 153
MATERIALES SUMINISTRADOS Los componentes representan un juego completo. Las etiquetas de cdigo de barras son necesarias para el ensayo. Unidades de anlisis de Ferritina (LFE1): Cada unidad etiquetada con cdigo de Barras contiene una bola recubierta de anticuerpos monoclonales murino antiFerritina. Estable a 28C hasta la fecha de caducidad. LKFE1: 100 unidades. LKFE5: 500 unidades. Espere a que las bolsas de las unidades de anlisis alcancen la temperatura ambiente antes de abrirlas. bralas cortando por el extremo superior, dejando el borde del cierre de cremallera intacto. Vuelva a cerrar las bolsas hermticamente para protegerlas de la humedad. Vial de Reactivo de Ferritina (LFE2): Con cdigos de barras. 7,5 ml de fosfatasa alcalina (de intestino de ternera) conjugada con anticuerpos policlonales de cabra anti-ferritina en solucin tampn, con conservante. Guardar tapado y refrigerado: estable a 28C hasta la fecha de caducidad. Se recomienda utilizarlo antes de que pasen 30 das despus de abrirlo cuando se guarda segn lo indicado. LKFE1: 1 vial. LKFE5: 5 viales. Ajustadores de Ferritina (LFEL, LFEH): Dos viales (bajo y alto) de ferritina en una matriz de protena humana, con conservante. Cada vial contiene 2,5 ml. Estable a 28C durante 30 das tras su apertura. No congelar. LKFE1: 1 juego. LKFE5: 2 juegos.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 92 de 153
COMPONENTES DEL KIT QUE SE SUMINISTRAN POR SEPARADO: Diluyente de muestra de Ferritina (LFEZ): Para la dilucin manual de las muestras de los pacientes. Un vial conteniendo 25 ml de ferritin-libre de una matriz proteica humana, con conservante. Estable a 28C durante 30 das despus de abrirse o hasta 6 meses (alicuotados) a 20C. LSUBX: Sustrato quimioluminiscente LPWS2: Lavado de sonda LKPM: Kit de limpieza de sonda LCHx-y: Soportes de recipientes de muestras (con cdigos de barras) LSCP: Recipientes de muestras (desechables) LSCC: Tapas para los recipientes de muestras (opcionales) Tambin necesarios: Pipetas de transferencia de muestras; agua destilada o desionizada; controles. Muestras de Control de Calidad: Utilizar controles o pooles de sueros con al menos dos niveles diferentes de ferritina (bajo y alto). Valores esperados Los siguientes valores fueron obtenidos en un estudio hecho con el IMMULITE Ferritin, utilizando donantes de sangre aparentemente saludables quienes no hubieran donado sangre por un ao antes del estudio Rango 95% central Hombres: 28 397 ng/ml Mujeres: 6 159 ng/ml
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 93 de 153
LIMITACIN Los anticuerpos heteroflicos en el suero humano pueden reaccionar con las inmunoglobulinas de los componentes del ensayo provocando interferencias con los inmunoanlisis in vitro. Las muestras de los pacientes que frecuentemente estn expuestos a animales o a productos sricos animales pueden presentar este Tipo de interferencia que potencialmente ocasione un resultado anmalo. Estos reactivos han sido formulados para minimizar el riesgo de interferencia, no obstante, pueden darse interacciones anmalas entre sueros conflictivos y los componentes del ensayo. Con fines de diagnstico, los resultados obtenidos con este ensayo siempre deben ser usados en combinacin con el examen clnico, la historia mdica del paciente y cualquier otro dato clnico relevante. Intervalo de calibracin: Hasta 1 500 ng/ml. Sensibilidad: 1,5 ng/ml.
5.2.4. Turbo HCG

Utilidad del anlisis Para su uso en el diagnstico in vitro con los analizadores IMMULITE e IMMULITE 1000 para la medicin cuantitativa de gonadotropina corinica humana (HCG) en suero, plasma EDTA o heparina, as como ayuda en la deteccin de la gestacin. Referencia: LSKCG1 (100 tests), LSKCG5 (500 tests) Cdigo del Test: RHC Cdigo de Color: Agua
VERSIN: 01
Pgina 94 de 153
FUNDAMENTO DEL MTODO IMMULITE/IMMULITE 1000 Turbo HCG es un ensayo inmunomtrico con dos sitios de unin, quimioluminiscente en fase slida. Ciclos de incubacin: 1 6 minutos. Dilucin de muestras con niveles elevados: Todas las muestras que se prevea que vayan a tener niveles por encima del intervalo de calibracin del ensayo debern diluirse antes del ensayo. ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES Para uso diagnstico in vitro. REACTIVOS Mantener a 28C. Desechar de acuerdo con las normas aplicables. Siga las precauciones universales y manipule todos los componentes como si fueran capaces de transmitir agentes infecciosos. Los materiales derivados de sangre humana han sido analizados y son negativos para sfilis; para anticuerpos frente al HIV 1 y 2; para el antgeno de superficie de hepatitis B y para los anticuerpos de hepatitis C. Se ha usado Azida sdica, en concentraciones menores de 0,1 g/dl, como conservante. Para su eliminacin, lavar con grandes cantidades de agua para evitar la constitucin de residuos de azidas metlicas, potencialmente explosivas, en las caeras de cobre y plomo. Sustrato quimioluminiscente: evite la contaminacin y exposicin a la luz directa del sol. Agua: Use agua destilada o desionizada.
VERSIN: 01
Pgina 95 de 153
MATERIALES SUMINISTRADOS Los componentes representan un juego completo. Las etiquetas de cdigo de barras son necesarias para el ensayo. Unidades de Reaccin de HCG Turbo (SCG1): Cada unidad etiquetada con cdigo de barras contiene una bola recubierta de anticuerpos monoclonales murinos anti- HCG. Estable a 28C hasta la fecha de caducidad. LSKCG1: 100 unidades. LSKCG5: 500 unidades. Espere a que las bolsas de las unidades de anlisis alcancen la temperatura ambiente antes de abrirlas. bralas cortando por el extremo superior, dejando el borde del cierre de cremallera intacto. Vuelva a cerrar las bolsas hermticamente para protegerlas de la humedad. Vial de Reactivo de HCG Turbo (SCG2): Con cdigo de barras. 7,5 ml de fosfatasa alcalina (de intestino de ternera) conjugada a un anticuerpo policlonal anti- HCG de oveja en buffer, con conservante. Guardar tapado y refrigerado: estable a 28C hasta la fecha de caducidad. Se recomienda utilizarlo antes de que pasen 30 das despus de abrirlo cuando se guarda segn lo indicado. LSKCG1: 1 vial. LSKCG5: 5 viales. Ajustadores de HCG (LCGL, LCGH): Dos viales (bajo y alto) de HCG liofilizada en una matriz de suero humano libre de HCG, con conservante. Reconstituya cada vial con 3,0 ml de agua destilada o desionizada 30 minutos, como mnimo, antes de su uso. Mezcle por agitacin o inversin suave hasta que se haya disuelto completamente el material liofilizado. Estable a 28C durante 30 das despus de la reconstitucin, o hasta 6 meses (alicuotados) a 20C. LSKCG1: 1 juego LSKCG5: 2 juegos
VERSIN: 01
Pgina 96 de 153
Componentes del kit que se suministran por separado: Diluyente de muestra de HCG (LCGZ, LCGZ4): Para la dilucin manual de las muestras de los pacientes. Un vial compuesto de suero humano libre de HCG, con conservante. Estable a 28C durante 30 das despus de abrirse, o hasta 6 meses (alicuotados) a 20C. LCGZ: 25 ml. LCGZ4: 100 ml LSUBX: Substrato quimioluminiscente LPWS2: Lavado de sonda LKPM: Kit de limpieza de sonda LCHx-y: Soportes de recipientes de muestras (con cdigos de barras) LSCP: Recipientes de muestras (desechables) LSCC: Tapas para los recipientes de muestras (opcionales) CON6: control multiconstituyente de tres niveles Tambin necesario: Pipetas de transferencia de muestras; agua destilada o desionizada; controles. MUESTRAS DE CONTROL DE CALIDAD Usar controles o pools de muestras con dos niveles diferentes, como mnimo, de HCG (bajo y alto). LIMITACIONES Se debern descartar las condiciones neoplsicas trofoblsticas y no trofoblsticas antes de informar los resultados. La medicin exclusiva de HCG no permite distinguir entre el embarazo ectpico y el embarazo normal. Los sujetos normales no embarazados pueden tener elevaciones pequeas de HCG. Los anticuerpos heteroflicos en el suero humano pueden reaccionar con las inmunoglobulinas de los componentes del ensayo provocando interferencias con
VERSIN: 01
Pgina 97 de 153
los inmunoanlisis in vitro. Las muestras de los pacientes que frecuentemente estn expuestos a animales o a productos sricos animales pueden presentar este tipo de interferencia que potencialmente ocasione un resultado anmalo. Estos reactivos han sido formulados para minimizar el riesgo de interferencia, no obstante, pueden darse interacciones anmalas entre sueros conflictivos y los componentes del ensayo. Con fines de diagnstico, los resultados obtenidos con este ensayo siempre deben ser usados en combinacin con el examen clnico, la historia mdica del paciente y cualquier otro dato clnico relevante. Intervalo de calibracin: Hasta 1 000 mIU/ml (WHO 3rd IS 75/537). Sensibilidad: 3,3 mIU/ml.
5.2.5. PSA Libre

Utilidad del anlisis Para el uso diagnstico in vitro con el Analizador IMMULITE 2500 para la medicin cuantitativa del antgeno prosttico especfico libre, no acomplejado (PSA), es decir el PSA no unido a -antiquimotripsina u otras protenas transportadoras, en suero. Referencia: L5KPF2 (200 tests) Cdigo del Test: fPS Cdigo de Color: Gris Claro La concentracin de PSA Libre para un espcimen determinado con diferentes ensayos puede variar debido a las diferencias en el mtodo de ensayo y a la especificidad de los reactivos. Los resultados emitidos por un laboratorio deben incluir la identidad del ensayo utilizado. Los valores de PSA obtenidos con diferentes ensayos no son intercambiables. Antes de cambiar de mtodo, el laboratorio debe confirmar los valores de los pacientes que se estn monitorizando seriadamente.
VERSIN: 01
Pgina 98 de 153
FUNDAMENTO DEL MTODO IMMULITE 2500 PSA Libre es un ensayo inmunomtrico quimiolumiscente secuencial en fase slida. La fase slida (bola) est recubierta con un anticuerpo monoclonal de ratn frete a PSA especfico para PSA libre (no complejado). La muestra del paciente es incubada con la bola durante el primer ciclo en el cual el PSA libre presente en la muestra se une al anticuerpo monoclonal especfico frente a PSA libre que recubre la bola. El suero no unido es eliminado mediante lavado y centrifugacin. El anticuerpo policlonal de cabra anti-PSA conjugado con fosfatasa alcalina (de intestino de ternera) del reactivo es aadido en el segundo ciclo y se une al PSA libre de la bola para formar un complejo de anticuerpos tipo sndwich. El conjugado enzimtico no unido es entonces eliminado mediante lavado y centrifugacin. Finalmente, es aadido el sustrato quimioluminiscente a la Bola y la seal es generada de manera proporcional a la cantidad de enzima unida. Incubacin: 60 minutos. ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES Para uso diagnstico in vitro. REACTIVOS: Mantener a 28C. Desechar de acuerdo con las normas aplicables. Seguir las precauciones universales y manipular todos los componentes como si fueran capaces de transmitir agentes infecciosos. Los materiales derivados de sangre humana han sido analizados y son negativos para sfilis; para anticuerpos frente al HIV 1 y 2; para el antgeno de superficie de hepatitis B y para los anticuerpos de hepatitis C. Se ha usado Azida sdica, en concentraciones menores de 0,1 g/dl, como conservante. Para su eliminacin, lavar con grandes cantidades de agua
VERSIN: 01
Pgina 99 de 153
para evitar la constitucin de residuos de azidas metlicas, potencialmente explosivas, en las caeras de cobre y plomo. Substrato quimioluminiscente: Evitar la contaminacin y exposicin a la luz directa del sol. Agua: Usar agua destilada o desionizada. MATERIALES SUMINISTRADOS: Los componentes representan un juego completo. Las etiquetas incluidas en la caja son necesarias para el ensayo. Cartucho de bolas de PSA Libre (L2PF12): Con cdigos de barras. 200 bolas, recubiertas con anticuerpo monoclonal de ratn anti-PSA especfico para PSA libre (no acomplejada). Estable a 28C hasta la fecha de caducidad. L5KPF2: 1 cartucho. Vial de Reactivo de PSA Libre (L2PFA2): Con cdigos de barras. 11,5 ml de una Solucin tampn de protena en una matriz, con conservante. 11,5 ml de fosfatasa alcalina (intestino de ternera) conjugada con un anticuerpo policlonal de cabra anti-PSA especfico para PSA, en una solucin tampn con suero humano y conservante. Estable a 28C hasta la fecha de caducidad. L5KPF2: 1 vial. Antes de usar, cortar la parte superior de la etiqueta en la perforacin, sin daar el cdigo de barras. Quitar el precinto del orificio del vial; encajar la cubierta deslizante en las rampas de la tapa del reactivo.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 100 de 153
Ajustadores de PSA Libre (LPFL, LPFH): Dos viales (bajo y alto) liofilizados de PSA Libre en una solucin tampn, con conservante. Reconstituya cada vial con 3,0 ml de agua destilada o desionizada. Mezcle por agitacin o inversin suave hasta que se haya disuelto completamente el material liofilizado. Estable a 28C durante 30 das despus de la reconstitucin o hasta 6 meses (alicuotados) a 20C. L5KPF2: 1 juego Antes de hacer un ajuste, colocar las etiquetas a las alcuotas apropiadas (suministradas con el kit) sobre tubos de ensayo, de forma tal que los cdigos de barras puedan ser ledos por el lector. Componentes del kit que se suministran por separado: Multidiluyente 2 (L2M2Z L2M2Z4): Para la dilucin en el equipo de las muestras de pacientes. Un vial de un concentrado listo para su uso de una matriz proteica no humana con conservantes. Conservacin: 30 das (despus de su apertura) a 28C o 6 meses (alicuotados) a 20C. L2M2Z: 25 ml L2M2Z4: 55 ml Se suministran etiquetas con cdigos de barras para usarse con este diluyente. Antes de uso, colocar la etiqueta con el cdigo de barras en un tubo de ensayo de 16 X 100 mm, as los cdigos de barras pueden ser identificados por el lector del instrumento. L2M2Z: 3 etiquetas L2M2Z4: 5 etiquetas L2SUBM: Substrato quimioluminiscente L2PWSM: Lavado de sonda L2KPM: Kit de limpieza de sonda
VERSIN: 01
Pgina 101 de 153
LRXT: Tubos de reaccin (desechables) L2ZT: 250 Tubos del Diluyente de la Muestra (16 100 mm) L2ZC: 250 Tapones del Tubo del diluyente de la muestra TMCO: control multiconstituyente de tres niveles. Tambin necesarios: Agua destilada o desionizada; tubos de ensayo; controles. LIMITACIONES Las concentraciones de PSA en suero no debern interpretarse como una prueba absoluta de la presencia o ausencia de una enfermedad maligna. La prediccin de la repeticin de una enfermedad maligna deber basarse en una completa evaluacin clnica del paciente, que tambin puede incluir determinaciones seriadas de PSA en suero. Las muestras debern obtenerse antes de una biopsia, prostatectoma o masaje prosttico. La expresin de PSA puede verse alterada por el tratamiento hormonal para el cncer de prstata. Consecuentemente, la obtencin de un resultado bajo de PSA, despus de un tratamiento para cncer prosttico que incluye una terapia hormonal, puede no reflejar correctamente la presencia de una enfermedad residual o recurrente. La precisin de los ensayos de PSA libre no puede evaluarse determinando la recuperacin de PSA libre aadida a muestras de suero, debido a que la formacin de complejos entre la PSA libre y las protenas que se unen a PSA, que Estn presentes en el suero normal (-antiquimiotripsina y 2-macroglobulina), generalmente causarn recuperaciones errneamente bajas. Algunas personas tienen anticuerpos contra protenas de ratn que puede interferir en los inmunoensayos que emplean anticuerpos derivados de ratones. En particular, las muestras de los pacientes que han recibido preparaciones de anticuerpos monoclonales de ratn para el diagnstico o tratamiento, pueden contener anticuerpos humanos anti-ratn (HAMA). Estas muestras pueden mostrar Resultados errneos en dichos ensayos.
VERSIN: 01
Pgina 102 de 153
Las muestras de los pacientes que frecuentemente estn expuestos a animales o a productos sricos animales pueden presentar este tipo de interferencia que potencialmente ocasione un resultado anmalo. Estos reactivos han sido formulados para minimizar el riesgo de interferencia, no obstante, pueden darse interacciones anmalas entre sueros conflictivos y los componentes del ensayo. Con fines de diagnstico, los resultados obtenidos con este ensayo siempre deben ser usados en combinacin con el examen clnico, la historia mdica del paciente y cualquier otro dato clnico relevante. Intervalo de calibracin: Hasta 25 ng/ml Sensibilidad: 0,02 ng/ml.
5.2.6. T3 Libre
Utilidad del anlisis: Para el diagnstico in vitro usado con el Analizador IMMULITE 2000, para la medicin cuantitativa de T3 libre en suero, como Una ayuda para la evaluacin clnica del estado tiroideo. Nmeros de Catlogo: L2KF32 (200 tests) L2KF33M (3 000 tests) L2KF36 (600 tests) L2KF36M (6 000 tests) Cdigo Del Test: FT3 Color: Agua FUNDAMENTO DEL MTODO Inmunoensayo competitivo basado en un anlogo. Ciclos de incubacin: 2 30 minutos
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 103 de 153
ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES Para uso diagnstico in vitro. REACTIVOS Mantener a 28C. Desechar de acuerdo con las normas aplicables. Siga las precauciones universales y manipule todos los componentes como si fueran capaces de transmitir agentes infecciosos. Los materiales derivados de sangre humana han sido analizados y son negativos para sfilis; para anticuerpos frente al HIV 1 y 2; para el antgeno de superficie de hepatitis B y para los anticuerpos de hepatitis C. Se ha usado Azida sodica, en concentraciones menores de 0,1 g/dl, como conservante. Para su eliminacin, lavar con grandes cantidades de agua para evitar la constitucin de residuos de azidas metlicas, potencialmente explosivas, en las caeras de cobre y plomo. Substrato quimioluminiscente: Evitar la contaminacin y exposicin a la luz directa del sol. Agua: Usar agua destilada o desionizada. MATERIALES SUMINISTRADOS Los componentes representan un juego completo. Las etiquetas incluidas en la caja son necesarias para el ensayo. Cartucho de bolas de T3 Libre (L2F312): con cdigos de barras. 200 bolas, recubiertas con anticuerpo monoclonal murino anti-T3. Estable a 28C hasta la Fecha de caducidad. L2KF32: 1 cartucho. L2KF33M: 15 cartuchos. L2KF36: 3 cartuchos. L2KF36M: 30 cartuchos.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 104 de 153
Vial de reactivo de T3 Libre (L2F3A2): Con cdigos de barras. 18,5 ml de un anlogo de T3 marcado con un ligando en solucin tampn, con conservante. 11,5 ml de fosfatasa alcalina (de intestino de ternera) conjugada con un anti-ligando en solucin tampn. Estable a 28C hasta la fecha de caducidad. L2KF32: 1 vial. L2KF33M: 15 viales. L2KF36: 3 viales. L2KF36M: 30 viales. Antes de usar, cortar la parte superior de la etiqueta en la perforacin, sin daar el Cdigo de barras. Quitar el precinto del orificio del vial; encajar la cubierta deslizante en las rampas de la tapa del reactivo. Ajustadores de T3 Libre (LF3L, LF3H): Dos viales (bajo y alto) de T3 libre liofilizada en suero humano procesado, con conservante. Reconstituir cada vial, Aadiendo 4,0 ml de agua destilada o desionizada. Estable a 28C durante 30 das despus de la reconstitucin, o hasta 6 meses (alicuotados) a 20C. L2KF32: 1 juego. L2KF33M: 3 juegos. L2KF36: 2 juegos. L2KF36M: 4 juegos. Antes de hacer un ajuste, colocar las etiquetas a las alcuotas apropiadas (suministradas con el kit) sobre tubos de ensayo, de forma tal que los cdigos de barras puedan ser ledos por el lector Componentes del kit que se suministran por separado: L2SUBM: Substrato quimioluminiscente L2PWSM: Lavado de sonda L2KPM: Kit de limpieza de sonda LRXT: Tubos de reaccin (desechables) CON6: control multiconstituyente de tres niveles Tambin necesarios: Agua destilada o desionizada; tubos de ensayo; controles.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 105 de 153
Muestras de Control de Calidad: Utilizar controles o pooles de sueros con al menos dos niveles diferentes de T3 libre (bajo y alto). Valores Esperados Adultos eutiroideos: 1,8 4,2 pg/ml LIMITACIONES El ensayo de T3 libre sirve principalmente para verificar la presencia de hipertiroidismo, y tiene un valor muy limitado para el hipotiroidismo. Puede haber algo de superposicin entre los rangos eutiroideos e hipertiroideos. La interpretacin de los resultados de T3 libre se ve complicada por una variedad de drogas que pueden afectar la unin de la T3 a las protenas transportadoras de la hormona tiroidea. En varias enfermedades no tiroideas, la evaluacin del estado tiroideo se hace especialmente difcil. Debido a que algunos pacientes que pertenecen a esta categora pueden sufrir un hipotiroidismo primario concomitante o un hipotiroidismo secundario compensatorio, en este contexto se ha recomendado el inmunoensayo de TSH como un test de verificacin. En algunas condiciones raras, asociadas con variaciones extremas en la capacidad de unin de la albmina como la hipertiroxinemia disalbuminmica familiar (FDH) los ensayos directos de la hormona tiroidea libre pueden dar resultados engaosos. Los anticuerpos circulantes contra T3 y los inhibidores de la unin de la hormona pueden interferir con el ensayo. Se ha determinado que la heparina tiene efectos sobre las hormonas tiroideas libres tanto in vivo como in vitro. Por ello, no se debern obtener muestras durante la administracin de este anticoagulante o inmediatamente despus de la misma. Debido a que la dilucin altera el equilibrio entre la T3 libre y la T3 unida a protenas, no se puede esperar que el ensayo mantenga la linealidad durante la dilucin. Consiguientemente, no se deber intentar diluir las muestras que den resultados altos de T3 libre. En particular, cualquier muestra que d un resultado mayor al lmite superior del rango de calibracin del ensayo deber informarse
VERSIN: 01
Pgina 106 de 153
como tal. Los anticuerpos heteroflicos en el suero humano pueden reaccionar con las inmunoglobulinas de los componentes del ensayo provocando interferencias con los inmunoanlisis in vitro. Las muestras de los pacientes que frecuentemente estn expuestos a animales o a productos sricos animales pueden presentar este tipo de interferencia que potencialmente ocasione un resultado anmalo. Estos reactivos han sido formulados para minimizar el riesgo de interferencia, no obstante, pueden darse interacciones anmalas entre sueros conflictivos y los componentes del ensayo. Con fines de diagnstico, los resultados obtenidos con este ensayo siempre deben ser usados en combinacin con el examen clnico, la historia mdica del paciente y cualquier otro dato clnico relevante. Rango de Calibracin: 1,0 40 pg/ml (1,5 61 pmol/l). Sensibilidad: 1,0 pg/ml (1,5 pmol/l).
5.2.7. T3 Total
UTILIDAD DEL ANLISIS: Para su uso en el diagnstico in vitro con los analizadores IMMULITE e IMMULITE 1000 para la medicin cuantitativa de la triiodotironina total circulante (T3) en suero, como ayuda en la valoracin clnica del status tiroideo. Referencia: LKT31 (100 tests), LKT35 (500 tests) Cdigo del Test: T3 Cdigo de Color: Violeta
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 107 de 153
Principio del anlisis El IMMULITE/IMMULITE 1000 T3 Total es un inmunoensayo enzimtico quimioluminiscente competitivo en fase slida. Ciclos de incubacin: 1 30 minutos. ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES Para uso diagnstico in vitro. REACTIVOS Mantener a 28C. Desechar de acuerdo con las normas aplicables. Siga las precauciones universales y manipule todos los componentes como si fueran capaces de transmitir agentes infecciosos. Los materiales derivados de sangre humana han sido analizados y son negativos para sfilis; para anticuerpos frente al HIV 1 y 2; para el antgeno de superficie de hepatitis B y para los anticuerpos de hepatitis C. Se ha usado Azida sodica, en concentraciones menores de 0,1 g/dl, Como conservante. Para su eliminacin, lavar con grandes cantidades de agua para Evitar la constitucin de residuos de azidas metlicas, potencialmente explosivas, en las caeras de cobre y plomo. Sustrato quimioluminiscente: evite la contaminacin y exposicin a la luz directa del sol. Agua: Use agua destilada o desionizada. MATERIALES SUMINISTRADOS Los componentes representan un juego completo. Las etiquetas de cdigo de barras son necesarias para el ensayo.
VERSIN: 01
Pgina 108 de 153
Unidades de anlisis de T3 Total (LT31): Cada unidad etiquetada con cdigo de Barras contiene una bola recubierta de anticuerpos monoclonales murinos anti-T3. Estable a 28C hasta la fecha de caducidad. LKT31: 100 unidades. LKT35: 500 unidades. Vial de reactivo de T3 Total (LT32): Con cdigo de barras. 7,5 ml de fosfatasa alcalina (de intestino de ternera) conjugada con T3, con conservante. Guardar tapado y refrigerado: estable a 28C hasta la fecha de caducidad. Se recomienda utilizarlo antes de que pasen 30 das despus de abrirlo cuando se guarda segn lo indicado. LKT31: 1 vial. LKT35: 5 viales. Ajustadores de T3 Total (LT3L, LT3H): Dos viales (bajo y alto) de 2,0 ml cada uno, de T3 en suero humano tratado, con conservante. Estable a 28C durante 30 das despus de abrise, o hasta 6 meses (alicuotados) a 20C. LKT31: 1 juego. LKT35: 2 juegos. Componentes del kit que se suministran por separado: Diluyente de muestra de T3 Total (LT3Z): Para la dilucin manual de las muestras de los pacientes. Un vial (25 ml) de suero humano tratado libre de T3, con conservante. Estable a 28C durante 30 das despus de abrise, o hasta 6 meses (alicuotados) a 20C. LSUBX: Sustrato quimioluminiscente LPWS2: Lavado de sonda LKPM: Kit de limpieza de sonda LCHx-y: Soportes de recipientes de muestras (con cdigos de barras) LSCP: Recipientes de muestras (desechables)
VERSIN: 01
Pgina 109 de 153
LSCC: Tapas para los recipientes de muestras (opcionales) CON6: control multiconstituyente de tres niveles Tambin necesario: Pipetas de transferencia de muestras; agua destilada o desionizada; controles. Muestras de Control de calidad: Use controles o pools de muestras con dos Niveles diferentes, como mnimo, de T3 (bajo y alto). Valores esperados 81 178 ng/dl (1,2 2,7 nmol/l) LIMITACIONES Muchos factores fisiolgicos, farmacolgicos, patolgicos y genticos afectan la interpretacin de los resultados del T3 total. Ms del 20% de los pacientes con enfermedad no tiroidea que estn crticamente enfermos tienen bajos niveles de T3 total en suero. El plasma EDTA tiene un efecto en la medicin de la T3 en el ensayo. Los anticuerpos heteroflicos en el suero humano pueden reaccionar con las inmunoglobulinas de los componentes del ensayo provocando interferencias con los inmunoanlisis in vitro. Las muestras de los pacientes que frecuentemente estn expuestos a animales o a productos sricos animales pueden presentar este Tipo de interferencia que potencialmente ocasione un resultado anmalo. Estos reactivos han sido formulados para minimizar el riesgo de interferencia, no obstante, pueden darse interacciones anmalas entre sueros conflictivos y los componentes del ensayo. Con fines de diagnstico, los resultados obtenidos con este ensayo siempre deben ser usados en combinacin con el examen clnico, la historia mdica del paciente y cualquier otro dato clnico relevante. Intervalo de calibracin: 40600 ng/dl (0,619,2 nmol/l) Sensibilidad: 35 ng/dl (0,54 nmol/l)
VERSIN: 01
Pgina 110 de 153
5.2.8. T4 Libre
UTILIDAD DEL ANLISIS Para el diagnstico in vitro con los Analizadores IMMULITE e IMMULITE 1000 para la medida cuantitativa de tiroxina no unida a protenas (T4 libre) en suero. Est estrictamente indicado para su uso en diagnstico in vitro como ayuda en la valoracin clnica del estado tiroideo. Referencia: LKF41 (100 tests), LKF45 (500 tests) Cdigo del Test: T4F Cdigo de Color: Gris Claro Principio del anlisis: Inmunoensayo competitivo con anlogos. Ciclos de incubacin: 2 30 minutos. ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES Para uso diagnstico in vitro. REACTIVOS Mantener a 28C. Desechar de acuerdo con las normas aplicables. Siga las precauciones universales y manipule todos los componentes como si fueran capaces de transmitir agentes infecciosos. Los materiales derivados de sangre humana han sido analizados y son negativos para sfilis; para anticuerpos frente al HIV 1 y 2; para el antgeno de condiciones fisiolgicas diferentes, como el embarazo, el uso de anticonceptivos orales y la terapia con estrgenos, siendo los niveles de T4Total elevados mientras que los de T4 Libre permanecen normales. Al contrario, pacientes con una glndula tiroidea no funcional y niveles alterados
VERSIN: 01
Pgina 111 de 153
de TBG pueden mostrar niveles normales de T4 total, enmascarando la enfermedad. Mientras que unos niveles anormales de T4 Total pueden deberse Tanto a una funcin anormal del tiroides como a una variacin en la concentracin de las protenas transportadoras (fisiolgica o patolgica), los niveles de T4 Libre se correlacionan mejor con el status tiroideo que los niveles de T4 Total. LIMITACIONES La interpretacin de los resultados de T4 libre se ve complicada por una variedad de drogas, ya que estas pueden afectar la unin de T4 a las protenas transportadoras de la hormona tiroidea o interferir con su metabolismo a T3. La evaluacin del estado tiroideo se hace especialmente difcil en las enfermedades no tiroideas severas. Debido a que algunos pacientes de esta categora pueden sufrir de hipotiroidismo primario concomitante o de hipotiroidismo secundario compensatorio, se ha recomendado el inmunoensayo de TSH como un test ratificador en este contexto. En algunas condiciones poco comunes que estn asociadas con variaciones extremas en la capacidad de unin de la albmina a la T4 como la hipertiroxinemia desalbuminmica familiar (FDH) los ensayos directos para hormona libre pueden dar resultados engaosos. Los anticuerpos circulantes contra T4 y los inhibidores de la unin a la hormona pueden interferir. Se ha informado que la heparina tiene efectos in vivo e in vitro sobre los ensayos de T4 libre. Por ello, no se debern recoger muestras durante o poco despus de administrar este anticoagulante. Debido a que la dilucin altera el equilibrio entre la T4 libre y la T4 unida a protenas, no se puede esperar que el ensayo mantenga la linealidad durante la dilucin. Consiguientemente, no se deber intentar diluir las muestras que den resultados altos de T4 libre. En particular, cualquier muestra que d un resultado mayor al lmite superior del rango de calibracin del ensayo deber informarse como tal. Los anticuerpos heteroflicos en el suero humano pueden reaccionar con las inmunoglobulinas de los componentes del ensayo provocando interferencias con
VERSIN: 01
Pgina 112 de 153
los inmunoanlisis in vitro. Las muestras de los pacientes que frecuentemente estn expuestos a animales o a productos sricos animales pueden presentar este tipo de interferencia que potencialmente ocasione un resultado anmalo. Estos reactivos han sido formulados para minimizar el riesgo de interferencia, no obstante, pueden darse interacciones anmalas entre sueros conflictivos y los Componentes del ensayo. Con fines de diagnstico, los resultados obtenidos con este ensayo siempre deben ser usados en combinacin con el examen clnico, la historia mdica del paciente y cualquier otro dato clnico relevante. Intervalo de calibracin: 0,3 6 ng/dl (3,9 77,2 pmol/l). Sensibilidad: 0,3 ng/dl
5.2.9. T4 Total
UTILIDAD DEL ANLISIS Para su uso en el diagnstico in vitro con los analizadores IMMULITE e IMMULITE 1000 para la medicin cuantitativa de tiroxina total circulante (T4) en suero, como ayuda en la valoracin clnica del estado tiroideo. Referencia: LKT41 (100 tests), LKT45 (500 tests) Cdigo del Test: TT4 Cdigo de Color: Azul Claro PRINCIPIO DEL ANLISIS El IMMULITE/IMMULITE 1000 T4 Total es un inmunoensayo enzimtico quimioluminiscente competitivo en fase slida. Ciclos de incubacin: 1 30 minutos.
VERSIN: 01
Pgina 113 de 153
ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES Para uso diagnstico in vitro. Materiales Suministrados Los componentes representan un juego completo. Las etiquetas de cdigo de barras son necesarias para el ensayo. Unidades de anlisis de T4 (LT41): Cada unidad etiquetada con cdigo de barras contiene una bola recubierta de anticuerpos monoclonales murinos anti-T4. Estable a 28C hasta la fecha de caducidad. LKT41: 100 unidades. LKT45: 500 unidades Vial de reactivo de T4 (LT42): Con cdigo de barras. 7,5 ml de fosfatasa alcalina (de intestino de ternera) conjugada con T4, con conservante. Guardar tapado y refrigerado: estable a 28C hasta la fecha de caducidad. Se recomienda utilizarlo antes de que pasen 30 das despus de abrirlo cuando se guarda segn lo indicado. LKT41: 2 viales. LKT45: 10 viales. Ajustadores de T4 (LT4L, LT4H): Dos viales (bajo y alto), cada uno con 2,0 ml de T4 en suero humano procesado, con conservante. Estable a 28C durante 30 das despus de abrirse, o hasta 6 meses (alicuotados) a 20C. LKT41: 1 juego. LKT45: 2 juegos.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 114 de 153
Componentes del kit que se suministran por separado Diluyente para muestras de T4 (LT4Z): Para la dilucin manual de las muestras de los pacientes. Un vial (25 ml) de concentrado de suero humano libre de T4, con conservante. Estable a 28C durante 30 das despus de abrise, o hasta 6 meses (alicuotados) a 20C. LSUBX: Sustrato quimioluminiscente LPWS2: Lavado de sonda LKPM: Kit de limpieza de sonda LCHx-y: Soportes de recipientes de muestras (con cdigos de barras) LSCP: Recipientes de muestras (desechables) LSCC: Tapones para los recipientes de muestras (opcionales) CON6: control multiconstituyente de tres niveles. Tambin necesarios: Pipetas de transferencia de muestras; agua destilada o desionizada; controles. MUESTRAS DE CONTROL DE CALIDAD: Use controles o pools de muestras con dos niveles diferentes, como mnimo, de T4 (bajo y alto). LIMITACIONES Muchos factores fisiolgicos, farmacolgicos, patolgicos y genticos afectan la interpretacin de los resultados de T4 total. Ms del 20% de los pacientes con enfermedad no tiroidea que estn crticamente enfermos tienen bajos niveles de T4 total en suero. El plasma EDTA tiene un efecto en la medicin de la T4 en el ensayo. Los anticuerpos heteroflicos en el suero humano pueden reaccionar con las inmunoglobulinas de los componentes del ensayo provocando interferencias con los inmunoanlisis in vitro
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 115 de 153
5.2.10. Troponina I
UTILIDAD DEL ANLISIS: Para su uso en el diagnstico in vitro con los analizadores IMMULITE e IMMULITE 1000 para la cuantificacin de Troponina I en suero, plasma con EDTA o heparinizado, como ayuda en el diagnstico del infarto agudo de miocardio (IAM). Nmeros de Catlogo: LKTI1 (100 tests), LKTI5 (500 tests) Cdigo del Test: TPI Color: Gris claro PRINCIPIO DEL ANLISIS Troponina I es un ensayo inmunomtrico quimioluminiscente en fase slida y conjugado enzimtico. La fase slida (bola) est recubierta con anticuerpo monoclonal murino anti-Troponina I. La fase lquida consiste en fostasa alcalina (intestino bovino) conjugada con anticuerpo policlonal de cabra anti-Troponina I. La muestra del paciente y el reactivo se incuban junto con la bola recubierta durante 30 minutos. Durante este tiempo, la Troponina I de la muestra forma complejos sndwich entre el anticuerpo murino anti-Troponina de la bola y el anticuerpo policlonal de cabra anti- Troponina I marcado enzimticamente del reactivo. La muestra del paciente y el conjugado enzimtico no unido se eliminan mediante lavados por centrifugacin. Finalmente, se aade el sustrato quimioluminiscente en la unidad de reaccin que contiene la bola y la seal generada es proporcional a la enzima unida. Ciclos de incubacin: 1 30 minutos. Tiempo hasta el primer resultado: 42 minutos ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES Para uso diagnstico in vitro.
VERSIN: 01
Pgina 116 de 153
MATERIALES SUMINISTRADOS Los componentes representan un juego completo. Las etiquetas incluidas en la caja son necesarias para el ensayo. Unidades de anlisis de Troponina I (LTI1): Cada unidad marcada con un cdigo de barras contiene una bola de poliestireno recubierta con anticuerpo monoclonal murino anti-troponina I. Estable a 28C hasta la fecha de caducidad. LKTI1: 100 unidades. LKTI5: 500 unidades. Vial de reactivo de Troponina I (LTI2): Con cdigos de barras. 7,5 ml de fosfatasa alcalina (de intestino de ternera) conjugado a anticuerpo policlonal de oveja anti-troponina I, en una solucin tampon, con conservante. Guardar tapado y refrigerado: estable a 28C hasta la fecha de caducidad. Se recomienda utilizarlo antes de que pasen 30 das despus de abrirlo cuando se guarda segn lo indicado. LKTI1: 1 vial. LKTI5: 5 viales. Ajustadores de Troponina I (LTIL, LTIH): Dos viales (bajo y alto) de troponina I liofilizada en una matriz de suero no humano, con conservante. 30 minutos, como mnimo, antes de su uso: Reconstituya cada vial con 3,0 ml de agua destilada o desionizada. Mezclar mediante inversin o agitacin suave hasta que el material liofilizado est completamente disuelto. Dejar reposar durante 30 minutos y utilizar inmediatamente, o alicuotar y congelar. Estable a 20C durante 2 meses (alicuotados) despus de la reconstitucin. LKTI1: 1 juego. LKTI5: 2 juegos.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 117 de 153
Componentes del kit que se suministran por separado Diluyente de Troponina I (LTIZ): Para la dilucin manual de las muestras de los pacientes. Un vial 25 ml que contiene una matriz de suero no humano, libre de Troponina I. Estable a 28C durante 30 das despus de abrirse, o hasta 6 meses (alicuotados) a 20C. LSUBX: Substrato quimioluminiscente LPWS2: Lavado de sonda LKPM: Kit de limpieza de sonda LCHx-y: Soportes de recipientes de muestras (con cdigos de barras) LSCP: Recipientes de muestras (desechables) LSCC: Tapas para los recipientes de muestras (opcionales) CCCM: Un Mdulo Control del Marcador cardiaco de suero no humano, de dos niveles, que contiene Troponina I como uno de los tres constituyentes. Tambin necesario: Pipetas de transferencia de muestras; agua destilada o desionizada; controles. Muestras de Control de Calidad: Utilizar controles o pooles de sueros con al menos dos niveles diferentes de Troponina I (bajo y alto).
5.2.11. TSH Tercera Generacin

UTILIDAD DEL ANLISIS: Para su uso en el diagnstico in vitro con los analizadores IMMULITE e IMMULITE 1000 para la medicin cuantitativa de tirotropina (TSH) en suero, en la valoracin clnica del status tiroideo.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 118 de 153
Referencia: LKTS1 (100 tests), LKTS5 (500 tests) Cdigo del Test: TSH Cdigo de Color: Rojo PRINCIPIO DEL ANLISIS IMMULITE/IMMULITE 1000 TSH Tercera Generacin es un ensayo inmunomtrico con dos sitios de unin, quimioluminiscente en fase slida. Ciclos de incubacin: 1 60 minutos. ADVERTENCIAS Y PRECAUCIONES Para uso diagnstico in vitro. MATERIALES SUMINISTRADOS Los componentes representan un juego completo. Las etiquetas de cdigo de barras son necesarias para el ensayo. Unidades de anlisis de TSH (LTS1): Cada unidad etiquetada con cdigo de barras contiene una bola recubierta con anticuerpos monoclonales murinos antiTSH. Estable a 28C hasta la fecha de caducidad. LKTS1: 100 unidades. LKTS5: 500 unidades. Vial de Reactivo de TSH (LTS2): Con cdigos de barras. 7,5 ml de fosfatasa alcalina (de intestino de ternera) conjugada con anticuerpos policlonales de cabra anti-TSH en solucin tampn, con conservante. Guardar tapado y refrigerado: estable a 28C hasta la fecha de caducidad. Se recomienda utilizarlo antes de que pasen 30 das despus de abrirlo cuando se guarda segn lo indicado.
VERSIN: 01
Pgina 119 de 153
LKTS1: 1 vial. LKTS5: 5 viales. Ajustadores de TSH (LTSL, LTSH): Dos viales (bajo y alto) liofilizados de TSH humana en una matriz de suero/tampn. Reconstituir cada vial aadiendo 4,0 ml de agua destilada, y mezclar suavemente por inversin: Estable a 28C durante 30 das despus de la reconstitucin o hasta 6 meses (alicuotados) a 20C. LKTS: 1 set. LKTS5: 2 sets. Componentes del kit que se suministran por separado Diluyente de muestra de TSH (LTSZ): Para la dilucin manual de las muestras de los pacientes. Un vial conteniendo 25 ml de una matriz de suero/tampn libre de TSH. Estable a 28C durante 30 das despus de abrise, o hasta 6 meses (alicuotados) a 20C. LSUBX: Sustrato quimioluminiscente LPWS2: Lavado de sonda LKPM: Kit de limpieza de sonda LCHx-y: Soportes de recipientes de muestras (con cdigos de barras) LSCP: Recipientes de muestras (desechables) LSCC: Tapas para los recipientes de muestras (opcionales) CON6: control multiconstituyente de tres niveles LTGCM: Mdulo de Control de IMMULITE TSH Tercera Generacin Tambin necesarios: Pipetas de transferencia de muestras; agua destilada o desionizada; controles. Muestras de Control de Calidad: Utilizar controles o pooles de sueros con al menos dos niveles diferentes de TSH (bajo y alto). Valores esperados Eutirodeo: 0,4 4 IU/ml. Hipertiroideo: < 0,01 IU/ml. Hipotiroideo: 7,1 a >75 IU/ml
VERSIN: 01
Pgina 120 de 153
LIMITACIONES El ensayo no est indicado para su uso con muestras sanguneas de neonatos en papel para Screening neonatal.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 121 de 153
5.3 REA DE HEMATOLOGA
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 122 de 153
5.3.1. ANALIZADOR DE HEMATOLOGA

BC-3000 PLUS
INFORMACIN DE CONTACTO Fabricante: Shenzhen Mindray biomedical electronics co., ltda. Direccin: Mindray Building, keji 12th road Sout, Hi-tech industrial park, Nanshan, Shenzhen 518057 R.P. china Tel: +8675526582479 26582888 Fax: +86 75526582934 26582500 IMPORTADO POR: DISTRIQUIMICOS ALDIR SAS PBX: (571) 211 6545 EXT. 117 Bogot, COLOMBIA
SHENZHEN MINDRAY BIO-MEDICAL ELECTRONICS CO., LTDA
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 123 de 153
REACTIVOS, CONTROLES Y CALIBRADORES Puesto que el analizador, los reactivos (diluyente, detergente, lisante, limpiador de sonda y limpiador E-Z), controles y calibradores son componentes de un sistema, la ejecucin del sistema depende de la integridad combinada de todos los componentes. Solo debe utilizar los reactivos especficos de Mindray, que se han formulado especficamente para el sistema fluidico o el analizador, con el objetivo de proporcionar un rendimiento ptimo del sistema. No utilice el analizador con reactivos de varios proveedores. En tal caso, puede que el analizador no se ajuste al rendimiento que se especifica en el manual y no proporcione resultados fiables. Cada uno de los paquetes de reactivos debe examinarse antes de utilizarlo. Inspeccione el paquete para comprobar que no hay signos de fuga o humedad. Es posible que se ponga en peligro la integridad del producto en paquetes que hayan sufrido daos. Si hay pruebas evidentes de que ha habido una fuga o de que no se ha manipulado correctamente, no utilice el reactivo. NOTA Cuando haya cambiado el diluyente, detergente o lisante, efectu una ejecucin de fondo para ver si los resultados cumplen los requisitos. Preste atencin a las fechas de caducidad y al nmero de das que los reactivos se mantendrn estables con el recipiente abierto. Asegrese de no utilizar reactivos caducados. Despus de instalar un nuevo recipiente de reactivos, djelos reposar durante un tiempo antes de utilizarlo.
DILUYENTE El diluyente se ha concebido para cumplir los siguientes requisitos:
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 124 de 153
Diluir las muestras sanguneas Proporcionar a las clulas sanguneas un entorno parecido al del plasma sanguneo. Mantener el volumen celular de cada glbulo rojo y trombocito durante el recuento y la porcin de ajuste del ciclo de medicin. Proporcionar un medio conductor para el recuento de glbulos rojos, glbulos blancos y trombocito por el mtodo de la impedancia
LISANTE El lisante se ha concebido para cumplir los siguientes requisitos: Romper las paredes de los glbulos rojos, liberar hemoglobina de la clula y reducir el tamao de detritos celular a nivel que no interfieran con el recuento de leucocitos. Convertir la hemoglobina en un complejo cuya absorcin venga determinada por la concentracin de hemoglobina.
DETERGENTE El detergente se ha concebido para enjuagar los baos y tubos de medida, con el objetivo de proporcionar la formacin de menisco adecuada en los tubos de medida y mantenerla durante cada ciclo de medicin. LIMPIADOR E-Z El limpiador E-Z (enzimtico) es una solucin limpiadora isotnica basadas en enzimas y un agente humidificador que se ha concebido para limpiar las lneas fludicas y los baos.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 125 de 153
LIMPIADOR DE SONDAS Es una solucin limpiadora alcalina que se ha concebido para limpiar las lneas fludicas, aberturas y baos. CONTROLES Y CALIBRADORES Los controles son productos de sangre completa preparados comercialmente, que se utilizan para comprobar que el analizador funciona correctamente. Estn disponibles en los niveles bajo, normal y alto. El uso diario de todos los niveles comprueba el funcionamiento del analizador y asegura la obtencin de resultados fiables. Los calibradores son productos de sangre completa preparados comercialmente, que se utiliza para calibrar el analizador. Debe adquirir los controles y calibradores de Mindray o de distribuidores autorizados de Mindray
5.3.2. PRUEBAS DE COAGULACIN

TIEMPO DE PROTROMBINA Reactivo: Soluplastin Casa Comercial: Wiener lab. Group UTILIDAD DIAGNOSTICO El fenmeno de la coagulacin puede desencadenarse por una va extrnseca (lesin tisular) o por una va intrnseca (contacto de la sangre con epitelios distintos del vascular normal). La determinacin del Tiempo de Protrombina o Tiempo de Quick es una prueba global para evaluar la coagulacin extrnseca, siendo sensible a: factor II o protrombina, factor V o proacelerina,
VERSIN: 01
Pgina 126 de 153
factor VII o proconvertina y factor X o Stuart-Prower. Por lo tanto la determinacin se aplica a: Estudios de rutina en los anlisis prequirrgicos Deteccin de alteraciones en los niveles de uno o ms factores involucrados en la va extrnseca. control de la teraputica con anticoagulantes orales.
VALORES DE REFERENCIA El rango de valores obtenidos en pacientes normales oscila entre: Tiempo de Protrombina o Tiempo de Quick: 10 - 14 seg Porcentaje de Actividad Protrombnica: 70 - 100%
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios intervalos o valores de referencia. Para pacientes bajo tratamiento con antivitaminas K se ha establecido un rango teraputico que se pueda expresar como: Porcentaje de Actividad Protrombnica: 25 - 35% R.I.N.: 2,4 - 2,5
REACTIVO PROVISTO: Soluplastin: viales conteniendo tromboplastina de cerebro de conejo, cloruro de calcio para una concentracin final de 0,0125 mol/l y cloruro de sodio para una concentracin final de 0,1 mol/l. REACTIVO NO PROVISTO: Agua bidestilada o desionizada. PRECAUCIONES El reactivo es para uso diagnstico "in vitro".
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 127 de 153
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Soluplastin provisto: estable en refrigerador (2-10C) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Soluplastin reconstituido: en refrigerador (2-10C), es estable 5 das a partir del momento de su reconstitucin.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Otras causas de resultados errneos son: Extraccin defectuosa de sangre venosa. Las variaciones en la relacin anticoagulante/muestra o en la concentracin de citrato utilizada afectan los Tiempos de Quick por lo que se recomienda controlar la dosis de anticoagulante empleada al tomar la muestra La pre-incubacin en el 2o paso del PROCEDIMIENTO no debe exceder los 10 minutos indicados como lmite mximo.
Por otra parte, es conveniente que el reactivo reconstituido se retire del refrigerador inmediatamente antes de iniciar la prueba y vuelva a guardarse al finalizarla, ya que la exposicin por varias horas a temperatura ambiente en forma reiterada, deteriora el reactivo produciendo el alargamiento de los tiempos de protrombina.
5.3.3. TIEMPO PARCIAL DE TROMBOPLASTINA ACTIVADA REACTIVO: APTTest

CASA COMERCIAL: Wiener lab. Group UTILIDAD DIAGNOSTICO El tiempo de tromboplastina parcial activada (APTT), es una prueba sensible a la deficiencia de actores pro-coagulantes del plasma as como a la presencia de ciertos inhibidores de la coagulacin.
VERSIN: 01
Pgina 128 de 153
Sirve para detectar anormalidades en la va intrnseca de la coagulacin, como son los factores necesarios para la formacin del activador intrnseco de la protrombina, o sea los factores VIII, IX, XI y XII. Tambin detecta deficiencias severas de los factores II, V, X y fibringeno, no siendo as con los trastornos plaquetarios, las deficiencias de los factores VII y XIII ni los problemas vasculares. La rapidez, sencillez y reproducibilidad de la prueba la hacen muy adecuada para el control de la teraputica anticoagulante por heparina. Tambin permite la identificacin rpida de hemoflicos en potencia, a fin de poder someterlos a tratamientos preventivos prequirrgicos y evitar problemas hemorrgicos. VALORES DE REFERENCIA El intervalo de valores observados en individuos normales oscila entre 33-48 segundos. Se considera fuera de lo normal valores que difieran en ms de 6 segundos de un plasma control. Es recomendable que cada laboratorio procese un plasma control con cada lote de reactivos empleado y que correlacione los valores obtenidos para los pacientes con el de dicho plasma, haciendo constar estos resultados en el informe. REACTIVOS PROVISTOS Reactivo APTT: viales conteniendo cefalina con tierra de diatomeas como activador particulado. Cloruro de Calcio: solucin de cloruro de calcio 0,025 mol/l. REACTIVOS NO PROVISTOS Agua bidestilada o desionizada. PRECAUCIONES El reactivo es para uso diagnstico "in vitro".
VERSIN: 01
Pgina 129 de 153
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivos Provistos: estables en refrigerador (2-10C) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. Reactivo APTT: una vez reconstituido es estable durante 14 das en refrigerador o 30 das congelado (-20C). El congelado y descongelado slo puede realizarse una vez. Por esto se recomienda dividirlo en porciones, de acuerdo a las necesidades de trabajo. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO El mecanismo de la coagulacin involucra una serie de reacciones enzimticas que pueden ser influenciadas por toda condicin que afecte a los sistemas enzimticos en general, razn por la cual se deben observar las mismas precauciones metodolgicas. Debe tenerse en cuenta que variaciones en la relacin anticoagulante/ muestra o en la concentracin de citrato utilizada afectan los tiempos de tromboplastina parcial activada, por lo que se recomienda controlar la dosis de anticoagulante empleada al tomar la muestra.
5.3.4. HEMOCLASIFICACIN
REACTIVO: Anti-A monoclonal, Anti-B monoclonal Anti-AB monoclonal CASA COMERCIAL: Wiener lab. Group UTILIDAD DIAGNOSTICO A comienzo del siglo pasado, Landsteiner descubri que los individuos podan ser agrupados en A, B, AB u O de acuerdo a la presencia (grupos A, B, o AB) o ausencia (grupo O) de antgenos fuertemente inmunognicos en la superficie de los glbulos rojos. Tambin demostr la existencia de anticuerpos (aglutininas)
VERSIN: 01
Pgina 130 de 153
dirigidos contra los antgenos A y B y que el suero de un individuo no contiene Anticuerpos para el antgeno presente en sus propios glbulos rojos pero s contra los que no posee. Actualmente se han identificado subgrupos de los grupos A y B. Todas estas observaciones revelaron la importancia de la compatibilidad ABO en la prctica transfusin REACTIVOS PROVISTOS Anti-A, Anti-B o Anti-AB monoclonal: reactivos preparados a partir de anticuerpos monoclonales de Clase IgM secretados por lneas celulares de hibridoma de ratn en una solucin tamponada Conteniendo 1 g/l de azida sdica como conservante. Los clones involucrados y la coloracin de cada producto se detallan en la siguiente tabla: Nombre de la Lnea (s) Celular (es) Color Producto Anti-A BIRMA-1 Azul Anti-B LB-2 Amarillo Anti-AB BIRMA-1/ES-4/ES-15 Incoloro Estos antisueros se caracterizan por su alta potencia, avidez y especificidad. Al no ser de origen humano, no existen riesgos de infeccin por HIV, HBV o HCV. REACTIVOS NO PROVISTOS De acuerdo a la tcnica empleada puede requerirse adicionalmente: Solucin fisiolgica Solucin fisiolgica tamponada con buffer fosfatos (PBS) Ph 7,0 0,2Solucin fisiolgica de baja fuerza inica (LISS)
PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro" y est estrictamente reservado para uso profesional por personal calificada con comprobada
VERSIN: 01
Pgina 131 de 153
competencia en inmunohematologia. No utilizar los reactivos fuera de la fecha de vencimiento. La azida sdica es txica. R22: nocivo por ingestin. La azida puede reaccionar con las caeras de plomo o cobre generando compuestos explosivos. Al eliminar el reactivo, se debe dejar correr grandes cantidades de agua. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de qumica clnica. Todos los reactivos y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar. Perodos prolongados de almacenamiento a temperaturas fuera de este rango pueden acelerar la prdida de la actividad delos reactivos. Evitar los cambios trmicos repetidos y limitar a lo estrictamente necesario la exposicin de los reactivos a temperatura ambiente. En estas condiciones de uso y conservacin, los reactivos, despus de su apertura, son estables hasta la fecha de expiracin indicada en la caja. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS Desechar los reactivos cuando se observe contaminacin de los mismos. Si bien la azida de sodio se adiciona como bacteriosttico, se recomienda inspeccionar los reactivos visualmente antes de usarlo. No deben utilizarse si presentan turbidez. Los reactivos no deben utilizarse si presentan precipitados o partculas.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 132 de 153
5.3.5. PRUEBAS ANTIGLOBULINA (COOMBS) DIRECTA O INDIRECTA

REACTIVO: Suero Anti-humano (poliespecfico) (Anti-IgG policlonal + antiC3d monoclonal) CASA COMERCIAL: Wiener lab. Group REACTIVO PROVISTO Suero Anti-humano (poliespecfico): mezcla de anti-IgG policlonal (producido por inmunizacin de conejos con IgG humana purificada) con anti-C3d monoclonal obtenido por cultivo de lnea celular BRIC-8 de hibridoma murino secretoras de IgM. El reactivo contiene colorante verde (que no afecta las propiedades del reactivo) y 1 g/l de azida sdica como conservante. REACTIVOS NO PROVISTOS Reactivos para la determinacin de grupos sanguneos.
De acuerdo a la tcnica a emplear puede requerirse adicionalmente: Solucin fisiolgica. Buffer fosfato (PBS) pH 7,0 0,2. Solucin fisiolgica de baja fuerza inica (LISS).
PRECAUCIONES El Reactivo Provisto es para uso diagnstico "in vitro" y est destinado a uso profesional por personal calificado con comprobada competencia en inmunohematologia. No utilizar el reactivo fuera de la fecha de vencimiento. La azida sdica es txica. R22: nocivo por ingestin. La azida puede reaccionar con las caeras de plomo o cobre generando compuestos explosivos. Al eliminar el reactivo, se debe dejar correr grandes cantidades de agua. Utilizar los reactivos guardando las precauciones habituales de trabajo en el laboratorio de qumica
VERSIN: 01
Pgina 133 de 153
clnica. El reactivo y las muestras deben descartarse de acuerdo a la normativa local vigente. ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO El Reactivo Provisto es estable en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar ni exponer a temperaturas elevadas. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Desechar el reactivo si se observa contaminacin del mismo. No debe utilizarse si presenta turbidez, presencia de partculas o precipitado.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 134 de 153
5.4 REA DE INMUNOLOGA
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 135 de 153
5.4.1. PROTEINA C REACTIVA (PCR)

VALORES DE REFERENCIA Hasta 6 mg/l. Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia. REACTIVOS PROVISTOS Reactivo de Ltex: suspensin de partculas de ltexpoliestireno sensibilizadas con anticuerpos anti-PCR. Control Negativo: dilucin de suero negativo. Control Positivo: dilucin de suero positivo. REACTIVOS NO PROVISTOS Solucin fisiolgica. PRECAUCIONES Los Reactivos Provistos son para uso diagnstico "in vitro". Los controles han sido ensayados para HIV y HBV, encontrndose no reactivos. No obstante deben ser empleados como si se tratara de material infectivo ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Los Reactivos Provistos son estables en refrigerador (2-10oC) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS La auto-aglutinacin del Reactivo de Ltex es indicio de deterioro del mismo. En tal caso desechar. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Tiempos de reaccin mayores de dos minutos pueden producir reacciones falsamente positivas por efectos de secado de los reactivos.
VERSIN: 01
Pgina 136 de 153
5.4.2. V.D.R.L Suspensin antignica estabilizada para realizar la prueba VDRL modificada (USR) de deteccin de sfilis
CASA COMERCIAL: Wiener lab. Group REACTIVOS PROVISTOS Antgeno: suspensin acuosa de antgeno de cardiolipina y lecitina purificados, en buffer fosfatos con cloruro de colina y EDTA de acuerdo a las indicaciones de la O.M.S. REACTIVOS NO PROVISTO Solucin fisiolgica (para la prueba semicuantitativa). Solucin de cloruro de sodio 10 g/dl (para la tcnica en lquido cefalorraqudeo). ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Antgeno: estable en refrigerador (2-10C) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar. PRECAUCIONES El Reactivo es para uso diagnstico "in vitro". INTERPRETACION DE LOS RESULTADOS Reactivo: presencia de floculacin. No reactivo: ausencia completa de floculacin. Prueba semicuantitativa: el ttulo estar dado por la inversa de la ltima dilucin que se observe reactiva.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 137 de 153
METODO DE CONTROL DE CALIDAD Para controlar la calidad del sistema procesar un Control Positivo (suero seguramente reactivo) y un Control Negativo (suero seguramente no reactivo) utilizndolos de la misma forma que las muestras. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Resultados falsamente positivos pueden ser observados en individuos con cuadros patolgicos diversos como hepatitis, influenza, brucelosis, lepra, malaria, asma, tuberculosis, cncer, diabetes y enfermedades autoinmunes. Estos casos no son muy comunes y generalmente presentan reacciones con ttulos bajos y una historia clnica que no coincide con las caractersticas de sfilis. Es imprescindible por estos motivos ante toda prueba cualitativa reactiva realizar la prueba semicuantitativa. Resultados falsamente negativos pueden observarse cuando se presenta el fenmeno de prozona. Por este motivo se recomienda repetir la prueba en suero diluido 1:5 con solucin fisiolgica para verificar el resultado. Si en estas condiciones se observa floculacin la muestra es reactiva. A pesar de las ventajas de este mtodo, sus resultados al igual que los de cualquier prueba serolgica, slo constituyen un dato auxiliar de diagnstico que debe corroborarse con la historia clnica del paciente.
5.4.3. R.A. ARTRITEST

CASA COMERCIAL: BioSystems REACTIVOS PROVISTOS Reactivo de Ltex: suspensin de partculas de ltex poliestireno de 0,20 micrones de dimetro, que tienen adsorbidas molculas termoagregadas de gammainmunoglobulina o fraccin II de Cohn. Control Positivo: dilucin de suero positivo. Equivale a 2 (+). Control Negativo: dilucin de suero negativo.
VERSIN: 01
Pgina 138 de 153
REACTIVO NO PROVISTO Reactivo Precipitante (para el ensayo de la fraccin globulnica): sulfato de amonio 211,5 g/l en CINa 5,15 g/l. Solucin fisiolgica.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Reactivo de Ltex y Controles (Positivo y Negativo): estables en refrigerador (210C) hasta la fecha de vencimiento indicada en la caja. No congelar PRECAUCIONES Los reactivos son para uso diagnstico "in vitro". Los controles han sido ensayados para HIV y HBV encontrndose inactivos. No obstante, deben ser empleados como si se tratara de material infectivo. VALORES DE REFERENCIA No estn claramente establecidos. Se consideran patolgicos valores superiores a 20-30 UI/ml. INDICIOS DE INESTABILIDAD O DETERIORO DE LOS REACTIVOS La auto aglutinacin del Reactivo de Ltex es indicio de deterioro del mismo, en tal caso desechar.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 139 de 153
5.4.4. Prueba rpida para la deteccin cualitativa de Gonadotropina corinica humana (hCG)
CASA COMERCIAL: ORGENICS UTILIDAD DIAGNOSTICO La prueba utiliza una combinacin de anticuerpos incluyendo un anticuerpo monoclonal hCG. El anlisis se lleva a cabo acondicionando muestras de orina o suero al pocillo de la muestra del dispositivo de la prueba, y observando la formacin de lneas coloreadas. REACTIVOS: el dispositivo de prueba contiene partculas de anti-hCG y anti-hCG en la membrana de cobertura. REACTIVO PROVISTO Cassettes de pruebas Goteros de muestra desechables Inserto incluido.
REACTIVO NO PROVISTO Envase para la obtencin de muestras. Temporizador.
VALORES ESPERADOS Se esperan resultados negativos en mujeres saludables no embarazadas y en hombres saludables. Las mujeres embarazadas saludables tienen presencia de hCG en sus muestras de orina y suero. La cantidad de hCG variara mucho con el periodo gestacional y entre individuos. El cassette para la deteccin del embarazo (orina/suero) de BetaScreen tiene una sensibilidad de 25 mlU/ml, y es capaz de detectar un embarazo tan pronto como 1 da despus de la amenorrea.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 140 de 153
PRECAUCIONES El reactivo es para uso diagnstico "in vitro". No usar despus de la fecha de vencimiento. El dispositivo de prueba debe permanecer sellado en el empaque hasta su uso Todas las muestras se deben considerar potencialmente peligrosas y se deben manipular del mismo modo que un agente infeccioso. Despus de la prueba. El dispositivo de prueba se debe desechar en un contenedor adecuado para riesgos biolgicos.
ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO El kit se puede almacenar a temperatura ambiente o refrigerarse (4 -30C). Este cassette es estable hasta la fecha de vencimiento impresa en el empaque sellado. El cassette debe permanecer en el empaque sellado hasta su uso. NO CONGELAR. No usar despus de la fecha de vencimiento. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO La prueba de embarazo en cassette (orina/suero) de betaScreen es una prueba cualitativa, por lo tanto, ni el valor cuantitativo ni la tasa de incremento en hCG se puede determinar por medio de la prueba. Las muestras de orina muy diluidas, como las que indican un peso especfico bajo, no contienen niveles representativos de hCG. Si se sigue sospechando de un embarazo, se debe recolectar a las 48 horas, la primera orina de la maana y analizarla. Pueden ocurrir resultados falsos negativos cuando los niveles sricos de hCG estn por debajo del nivel de sensibilidad de la prueba. Si se sigue sospechando de un embarazo, se debe obtener una muestra de suero 48 horas despus y analizarlas. Se encuentran niveles muy bajos de hCG (menores 50mlU/ml) en muestras de orina o suero poco tiempo despus de la implantacin. Sin embargo, debido a un nmero significativo de interrupciones de embarazos durante el
VERSIN: 01
Pgina 141 de 153
primer trimestre por causas naturales, un resultado dela prueba que es dbilmente positivo, se debe confirmar a las 48 horas despus con una nueva prueba. Un sin nmero de condiciones diferentes al embarazo, incluyendo enfermedad trofoblstica y ciertos neoplasma no trofoblsticos como tumores testiculares, cncer de prstata, cncer de seno y cncer de pulmn causan elevacin de los niveles de hCG. Por lo tanto, la presencia de hCG en muestras de orina o suero no deben ser usadas para diagnosticar un embarazo a menos que estas condiciones se hayan descartado. Como cualquier anlisis que utilice anticuerpos de ratn, existe la posibilidad de interferencia por anticuerpos humanos anti ratn (HAMA) en la muestra. Las muestras de pacientes que recibieron preparaciones con anticuerpos monoclonales para diagnostico o terapias pueden contener HAMA. Tales muestras pueden producir resultados falsos positivos o falsos negativos.
5.4.5. DETERMINACIN DE ANTI-HCV

CASA COMERCIAL: STANDARD DIAGNOSTIC, INC. UTILIDAD DIAGNOSTICO La prueba SD BIOLINE HCV es inmunocromatogrfica (rpida) para detectar en forma cualitativa los anticuerpos especficos para el HCV, en suero, plasma o sangre total humana. La prueba SD BIOLINE HCV contiene una tira de membrana, la cubierta con antgeno de captura recombinante HCV en la regin prueba. La protena A el conjugado dorado coloidal y la muestra de desplaza a lo largo de la membrana cromatogrficamente hacia
cual es prede banda de suero que se la regin de
VERSIN: 01
Pgina 142 de 153
prueba (T) formando una lnea visible en la medida en que el complejo de partculas dorada anticuerpo- protena A se combina con alto grado de sensibilidad y especificidad. REACTIVOS: El kit de prueba SD BIOLINE HCV contiene los siguientes elementos para realizar el ensayo. Dispositivo de prueba individualmente empacado en bolsa de aluminio con un desecante. Diluyente del ensayo Instrucciones de uso.
PRECAUCIONES, ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Los dispositivos de prueba debern almacenarse de 1-30C. No almacenar en refrigeracin El dispositivo de prueba es sensible a la humedad al igual que el calor Realizar la prueba de inmediato despus de retirar el dispositivo de prueba de la bolsa de papel de aluminio. No utilizar el producto despus de fecha de vencimiento La vida til del kit de se encuentra indicada en la parte de atrs del empaque No utilizar el kit de prueba si la bolsa est daada o sello est roto. No reutilizar el dispositivo de prueba.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Un resultado negativo no excluye la posibilidad de infeccin con HCV se requieren otras pruebas clnicamente disponibles si obtienen resultado cuestionables. Como ocurre con todos los test de diagnsticos, el diagnstico clnico no debe basarse en resultados en una sola prueba, sino que debe ser hecho por el medico luego de haberse evaluado todos los hallazgos clnicos y de laboratorio.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 143 de 153
ADVERTENCIA Para uso de diagnstico in- vitro solamente No ingerir alimentos ni fumar mientras se manipulan las muestras. Utilizar guantes protectores mientras se manipulan las muestras. Lavarse las manos completamente despus de la manipulacin de muestras. Evitar salpicaduras y formacin de aerosoles. Descontaminar y manejar todas las muestras, kit de reaccin y materiales potencialmente contaminados como si fueran infecciosos, todo dentro de un recipiente de biopeligrosidad. Anticoagulantes tales como heparina, EDTA y Citrato de Sodio no afectan los resultados de la prueba. El uso de muestras hemolizadas, que contiene factor reumatoide, lipemicas o ictricas pueden llevar a la obtencin de resultados de prueba errneos.
5.4.6. DETERMINACIN DE ANTIGENO DE SUPERFICIE DE HEPATITIS B HBsAg

CASA COMERCIAL: STANDARD DIAGNOSTIC, INC. UTILIDAD DIAGNOSTICO La prueba SD BIOLINE HBsAg es un inmunoensayo cromatogrfico para la determinacin cualitativa del antgeno de superficie de hepatitis B en plasma o en suero. Esta prueba est diseada para uso profesional como ayuda en el diagnstico de hepatitis B. la prueba SD BIOLINE HBsAG en muestras de plasma o suero con un alto grado de sensibilidad. La sensibilidad de la prueba es de 1ng/ml (ad/ay) utilizando el control de laboratorio. REACTIVOS PROVISTO El kit de prueba SD BIOLINE HBsAg contiene los siguientes tems para realizar el ensayo.
VERSIN: 01
Pgina 144 de 153
Tira de prueba de SD BIOLINE HBsAg Instrucciones para el uso
PRECAUCIONES, ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO SD BIOLINE HBsAg deben mantenerse a temperatura de ambiente. La tira de prueba sensible tanto la humedad como el calor. Realice la prueba inmediatamente despus de haber sacado la tira de prueba de la bolsa de papel aluminio. No la use despus del tiempo de expiracin. LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Un resultado negativo no excluye la posibilidad de infeccin con HBV se requieren otras pruebas clnicamente disponibles si obtienen resultado cuestionables. Como ocurre con todos los test de diagnsticos, el diagnstico clnico no debe basarse en resultados en una sola prueba, sino que debe ser hecho por el medico luego de haberse evaluado todos los hallazgos clnicos y de laboratorio.
ADVERTENCIA Para uso de diagnstico in- vitro solamente No ingerir alimentos ni fumar mientras se manipulan las muestras. Utilizar guantes protectores mientras se manipulan las muestras. Lavarse las manos completamente despus de la manipulacin de muestras. Evitar salpicaduras y formacin de aerosoles. Descontaminar y manejar todas las muestras, kit de reaccin y materiales potencialmente contaminados como si fueran infecciosos, todo dentro de un recipiente de biopeligrosidad.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 145 de 153
5.4.7. PRUEBA ANTI-TP Syphilis 3.0

CASA COMERCIAL: STANDARD DIAGNOSTIC, INC. UTILIDAD DIAGNOSTICO La prueba SD BIOLINE Syphilis 3.0 es un ensayo inmunocromatogrfico en fase slida para la deteccin cualitativa de anticuerpos de todos los isotipos (IgG, IgM,IgA) contra Treponema Pallidum (TP) esta prueba est destinada para uso profesional como ayuda en el diagnstico de sfilis. REACTIVOS PROVISTO El equipo de la prueba SD BIOLINE Syphilis contiene los siguientes elementos para realizar la prueba. Dispositivo de prueba SD BIOLINE Syphilis 3.0: 1 tira incluye antgenos Treponema pallidum recombinantes Diluyente para la prueba Pipeta capilar Instrucciones de uso
PRECAUCIONES, ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO SD BIOLINE Syphilis 3.0 deben mantenerse a temperatura de ambiente. El dispositivo de prueba sensible tanto la humedad y al calor. Realice la prueba inmediatamente despus de extraer el dispositivo del envase. No la use despus del tiempo de expiracin.} No utilice el equipo de prueba si el envase est daado o roto
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO La prueba SD BIOLINE Syphilis 3.0 solamente indicara la presencia de anticuerpos TP en la muestra y no se debe utilizar como nico criterio para el diagnstico de la infeccin por TP
VERSIN: 01
Pgina 146 de 153
Como toda las pruebas de diagnstico, cada resultado se debe interpretar junto a otra informacin clnica a la que el medico pueda acceder. Si el resultado es negativo y los sntomas clnicos persisten, se recomienda realizar pruebas adicionales que utilicen otros mtodos clnicos. Un resultado negativo no excluye en algn momento la posibilidad de infeccin con TP.
5.4.8. HIV-1/HIV-2 TEST

CASA COMERCIAL: STANDARD DIAGNOSTIC, INC. UTILIDAD DIAGNOSTICO El kit de VIH 3.0 SD BIOLINE es una prueba rpida, cualitativa para la deteccin de anticuerpos para todos los tipos (IgM, IgG, IgA) especfica a HIV-1 incluyendo subtipo-0 y HIV-2 simultneamente en suero humano, plasma o en sangre total. REACTIVOS PROVISTO El kit de prueba SD BIOLINE VIH 3.0 contiene los siguientes elementos para realizar el ensayo. Dispositivo de prueba empacado individualmente con un secante
VERSIN: 01
Pgina 147 de 153
Diluyente para la prueba Pipeta capilar Instrucciones de uso
PRECAUCIONES, ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Los dispositivos de prueba deben ser almacenados de 1-30C. No refrigerar. El dispositivo de prueba sensible tanto la humedad y al calor. Realice la prueba inmediatamente despus de extraer el dispositivo del envase. No la use despus del tiempo de expiracin. No utilice el equipo de prueba si el envase est daado o roto
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Aun cuando un resultado positivo indique infeccin con virus HIV1 o HIV2, se puede hacer un diagnstico de SIDA solo en forma clnica, es decir si el individuo satisface la definicin de caso para el SIDA segn criterios de los centros para el control de la enfermedad. Para muestras con resultados positivos en repetidas oportunidades, deben realizarse pruebas complementarias ms especficas. La prueba inmunocromatogrfica por s sola no se puede utilizar para diagnostica SIDA incluso si hay presencia de anticuerpos contra HIV1/HIV2 en la muestra del paciente. Un resultado negativo en un momento dado no descarta la posibilidad de infeccin por HIV1/HIV2. La muestra puede contener niveles bajos de anticuerpos para HIV1/HIV2 ADVERTENCIA Para uso de diagnstico in- vitro solamente No ingerir alimentos ni fumar mientras se manipulan las muestras. Utilizar guantes protectores mientras se manipulan las muestras. Lavarse las manos completamente despus de la manipulacin de muestras.
VERSIN: 01
Pgina 148 de 153
Evitar salpicaduras y formacin de aerosoles. Descontaminar y manejar todas las muestras, kit de reaccin y materiales potencialmente contaminados como si fueran infecciosos, todo dentro de un recipiente de biopeligrosidad. Anticoagulantes tales como heparina, EDTA y Citrato de Sodio no afectan los resultados de la prueba. El uso de muestras hemolizadas, que contiene factor reumatoide, lipemicas o ictricas pueden llevar a la obtencin de resultados de prueba errneos.
5.4.9. DENGUE IgG/IgM

CASA COMERCIAL: STANDARD DIAGNOSTIC, INC. UTILIDAD DIAGNOSTICO La prueba rpida de IgG/IgM de dengue est diseada para detectar y diferenciar simultneamente anticuerpos de IgM/IgG, contra virus de dengue en suero, plasma y sangre total humana. Con esta prueba tambin se puede detectar 4 serotipos de dengue si se emplea una mezcla de protenas envueltas de dengue recombinante. La superficie de la tira de la prueba SD BIOLINE de IgG/IgM De dengue lleva tres lneas pre-cubiertas: lnea G (lnea de prueba de IgG de dengue), la lnea M(lneas de pruebas de IgM de dengue) y la lnea C de control. REACTIVOS PROVISTO El kit de dengue IgG/IgM SD BIOLINE contiene los siguientes elementos para realizar el ensayo. Dispositivo de prueba empacado individualmente con un secante. cada tira contiene un conjugado dorado (como componente principal): virus de dengue recombinante envoltura protenica coloide dorado (1+/0.2 ug) la lnea de prueba G (como componente principal): anti IgG humana monoclonal de ratn (5+/1ug) lnea de prueba M (como componente principal) anti IgM humana monoclonal de ratn (5+/1ug). Lnea de control como componente principal: anti dengue IgG de conejo (2,5+/0,5ug).
VERSIN: 01
Pgina 149 de 153
Diluyente para la prueba Pipeta capilar Instrucciones del kit
PRECAUCIONES, ESTABILIDAD E INSTRUCCIONES DE ALMACENAMIENTO Los dispositivos de prueba deben ser almacenados a temperatura ambiente. No refrigerar. El dispositivo de prueba sensible tanto la humedad y al calor. Realice la prueba inmediatamente despus de extraer el dispositivo del envase. No la use despus del tiempo de expiracin. No utilice el equipo de prueba si el envase est daado o roto Los componentes del kit han sido sometidos a pruebas de control de calidad como unidad estndar de lote. No mezcle los componentes de diferentes nmeros de lote. El diluyente del ensayo contiene baja concentracin de azida de sodio como. Preservativo. La azida sodica es toxica y debe manejarse con sumo cuidado para evitar ingerirlo y tener contacto en la piel.
LIMITACIONES DEL PROCEDIMIENTO Esta prueba detecta la presencia de anticuerpos contra el dengue en la muestra y no se debe emplear como criterio nico para diagnosticar infeccin de virus de dengue. Es comn la reactividad cruzada serolgica en el grupo flavivirus (virus del dengue, encefalitis de san Luis, encefalitis japonesa, virus del Nilo occidental, fiebre amarilla) Si el resultado de la prueba es negativo y persisten los sntomas clnicos se recomiendan realizar pruebas complementarias de seguimiento empleando otros mtodos clnicos.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 150 de 153
5.4.10. ANTIGENOS BACTERIANOS

CASA COMERCIAL: SPINREACT PRICIPIO DEL METODO Los antgenos bacterianos son una tcnica de aglutinacin en porta y tubo para la deteccin y semicuantificacin de anticuerpos anti-Salmonella, Brucella Y Proteus en suero humano. Los reactivos, suspensiones bacterianas, coloreadas y estandarizadas, aglutinan en presencia del anticuerpo homlogo en las muestras ensayadas. COMPOSICIN DE LOS REACTIVOS Antgenos bacterianos: suspensiones de Salmonella, Brucellas Y Proteus en tampn glicina, pH:8,2 azida sodica 0,95 g/dl Controles suero animal. Azida sodica 0,95 g/dl
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 151 de 153
CALIBRACIN No existe referencial internacional para la estandarizacin de la sensibilidad de estos reactivos, por lo que se utiliza control interno constituido por un suero animal que contiene anticuerpos frente a cada uno de los antgenos citados anteriormente y que ha sido titulado con reactivos comerciales de calidad reconocida. PREPARACIN Y ESTABILIDAD Antgenos bacterianos: listo para el uso. Agitar suavemente antes de usar. Controles listo para el uso
INDICADORES DE DETERIORO DE LOS REACTIVOS Presencia de partculas y agregados. Todos los componentes del kit son estables hasta la fecha de caducidad indicada en el envase cuando se mantienen viales bien cerrados a 2-8C y se evita la contaminacin durante su uso. No congelar.
CONTROL DE CALIDAD Se recomienda utilizar el control positivo y negativo para controlar la funcionalidad de los reactivos, as como modelo de comparacin para la interpretacin de los resultados. VALORES DE REFERENCIA Son indicativos de infeccin reciente Salmonellas: ttulos >= 1/8 (anticuerpos somticos) y >= 1/160 (anticuerpos flagelares) Brucellas: ttulos >1/80 Proteus: ttulos de OX19 > 1/80, OX2 > 1/20 y OXK > 1/80 El nivel normal de anticuerpos febriles vara ampliamente segn los diferentes pases y comunidades. Es recomendable que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.
VERSIN: 01
Pgina 152 de 153
INTERFERENCIAS Bilirrubina (20mg/dl), hemoglobina (10mg/dl) y factores reumatoides (300 Ul/ml) no interfieren. LIMITACIONES DEL METODO
Las infecciones recientes, la inmunodepresin, el efecto prozona (brucelosis) y la terapia como antibitico, puede ocasionar falsas negatividades. Una elevada proporcin de individuos normales da resultados positivos con los antgenos de Proteus, especialmente en el ensayo de aglutinacin en porta. Un ttulo inferior a 1/160, no debe considerarse negativo.
Aprob:
VERSIN: 01
Pgina 153 de 153
6. BIBLIOGRAFIA
http://www.hospitalcaicedo.gov.co/archivo%20pdf/manual%20de%20tecnovig ilancia.pdf http://www.minproteccionsocial.gov.co/Normatividad/RESOLUCI%C3%93N% 200132%20DE%202006.pdf http://www.minproteccionsocial.gov.co/Normatividad/DECRETO%203770%20 DE%202004.PDF http://www.wiener-lab.com.ar/wienerw/vademecum.vsp http://www.ricdiagnostica.com/documentos/INMULITE%201000.pdf http://sky2.ch/Doc/I2500.pdf http://www.medical.siemens.com/webapp/wcs/stores/servlet/ProductDisplay~ q_catalogId~e_-105~a_catTree~e_100001,1023069,1016115~a_langId~e_105~a_productId~e_172940~a_storeId~e_10001.htm http://www.medical.siemens.com/webapp/wcs/stores/servlet/ProductDisplay~ q_catalogId~e_-111~a_catTree~e_100001,1023065,1015817~a_langId~e_111~a_productId~e_172962~a_storeId~e_10001.htm http://www.ricdiagnostica.com/documentos/RAPIDLAB%20248-348.pdf http://www.mindray.com/es/homepage/index.html http://spanish.aconlabs.com/ http://www.aconlabs.com/default.html http://www.empresario.com.co/labsar/ http://www.catalogodelasalud.com/LABORATORIOS-SARLTDA/15231007_1_4.aspx
Aprob:

Manual de Reactivovigilancia

Uploaded by

Document Information

Original Title

Copyright

Available Formats

Share this document

Share or Embed Document

Sharing Options

Did you find this document useful?

Is this content inappropriate?

Copyright:

Available Formats

Manual de Reactivovigilancia

Uploaded by

Copyright:

Available Formats

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO

5.1 REA DE QUMICA CLNICA .................................................................................. 14

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO

Elabor: Dayibeth Geney Ortiz Katina Rivera Olave Fecha: Noviembre/2011

Revis: Dra. Karina Viloria Barragn Coordinadora de Laboratorio Fecha: Noviembre/2011

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO

Elabor: Dayibeth Geney Ortiz Katina Rivera Olave Fecha: Noviembre/2011

Revis: Dra. Karina Viloria Barragn Coordinadora de Laboratorio Fecha: Noviembre/2011

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO

Elabor: Dayibeth Geney Ortiz Katina Rivera Olave Fecha: Noviembre/2011

Revis: Dra. Karina Viloria Barragn Coordinadora de Laboratorio Fecha: Noviembre/2011

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO

Elabor: Dayibeth Geney Ortiz Katina Rivera Olave Fecha: Noviembre/2011

Revis: Dra. Karina Viloria Barragn Coordinadora de Laboratorio Fecha: Noviembre/2011

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO

Elabor: Dayibeth Geney Ortiz Katina Rivera Olave Fecha: Noviembre/2011

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO

Elabor: Dayibeth Geney Ortiz Katina Rivera Olave Fecha: Noviembre/2011

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO

Elabor: Dayibeth Geney Ortiz Katina Rivera Olave Fecha: Noviembre/2011

Revis: Dra. Karina Viloria Barragn Coordinadora de Laboratorio Fecha: Noviembre/2011

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO

Elabor: Dayibeth Geney Ortiz Katina Rivera Olave Fecha: Noviembre/2011

Revis: Dra. Karina Viloria Barragn Coordinadora de Laboratorio Fecha: Noviembre/2011

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO

Elabor: Dayibeth Geney Ortiz Katina Rivera Olave Fecha: Noviembre/2011

Revis: Dra. Karina Viloria Barragn Coordinadora de Laboratorio Fecha: Noviembre/2011

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO

5. ESPECIFICACIONES DE EQUIPOS Y REACTIVOS

5.1 REA DE QUMICA CLNICA

Elabor: Dayibeth Geney Ortiz Katina Rivera Olave Fecha: Noviembre/2011

Revis: Dra. Karina Viloria Barragn Coordinadora de Laboratorio Fecha: Noviembre/2011

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO

5.1.1 EQUIPO CB 350i:

Elabor: Dayibeth Geney Ortiz Katina Rivera Olave Fecha: Noviembre/2011

Revis: Dra. Karina Viloria Barragn Coordinadora de Laboratorio Fecha: Noviembre/2011

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO

5.1.2 Reactivos usados en el rea de Qumica Clnica 5.1.2.1 Glicemia enzimtica AA

Fosfatos: 100 mmol/l, pH 7,0 Hidroxibenzoato: 12 mmol/l

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO

Revis: Dra. Karina Viloria Barragn Coordinadora de Laboratorio Fecha: Noviembre/2011

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO

5.1.2.2 PCR ultrasensible

Elabor: Dayibeth Geney Ortiz Katina Rivera Olave Fecha: Noviembre/2011

Revis: Dra. Karina Viloria Barragn Coordinadora de Laboratorio Fecha: Noviembre/2011

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO

Elabor: Dayibeth Geney Ortiz Katina Rivera Olave Fecha: Noviembre/2011

Revis: Dra. Karina Viloria Barragn Coordinadora de Laboratorio Fecha: Noviembre/2011

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO

Elabor: Dayibeth Geney Ortiz Katina Rivera Olave Fecha: Noviembre/2011

Revis: Dra. Karina Viloria Barragn Coordinadora de Laboratorio Fecha: Noviembre/2011

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO

Albumina Relacin A/G

Elabor: Dayibeth Geney Ortiz Katina Rivera Olave Fecha: Noviembre/2011

Revis: Dra. Karina Viloria Barragn Coordinadora de Laboratorio Fecha: Noviembre/2011

APOYO DIAGNOSTICO Y TERAPEUTICO LABORATORIO CLINICO