METODO PARA LA VALIDAR TECNICAS VOLUMETRICAS EN 5 FASES Omar A Valencia Qco, David Gmez Qco, Programa de Qumica, Facultad

de Ciencias Bsicas y Tecnologas, Universidad del Quindo. Avenida Bolvar calle 12 Norte Armenia, Laboratorio ALISCCA Ltda Cr 13 #15-50 Pereira. organicomar@yahoo.es Abstract In this article we suggest a method for the validation of volumetric tactics based on the use of a five (5) steps method, tests made for a single operator, test of unknown samples, test of true samples, identification of the rudeness of the method and collaboration tests. Resumen En este artculo se propone la metodologa para la validacin de tcnicas volumtricas por medio de cinco (5) fases, anlisis realizados por un operador, anlisis de muestras desconocidas preparadas por otro operador, anlisis de matrices reales, identificacin de robustez y ensayos de colaboracin. Key words: validation, rudeness, accuracy, volumetric method. INTRODUCCION Un laboratorio qumico analtico debe tener como propsito principal, la produccin de resultados de calidad excelentei. Este propsito, solo se puede lograr mediante el establecimiento de mtodos desarrollados. bien La definidos documentados validacin es y y la apropiadamente (precisin), (rango exactitud (porcentaje etc. de Este david4116@gmail.com

recuperacin), incertidumbre, linealidad dinmico lineal) ivv, articulo propone un mtodo compuesto de cinco (5) fases que se complementan entre si para validar con un alto nivel de complejidad cualquier mtodo de anlisis volumtrico. PROCEDIMIENTO Antes de comenzar la FASE 1, se debe implementar y documentar apropiadamente las metodologas de las tcnicas a validar, se debe calibrar y recalibrar el material volumtrico clase tipo A, la balanza analtica, se deben revisar los certificados de los patrones

confirmacin por anlisis y suministro de evidencia objetiva de que se cumplen los requisitos particulares para el uso especifico de una metodologaii,iii. Se logra al determinar atributos del mtodo como: lmite de deteccin, lmite de cuantificacin, reproducibilidad

primarios a utilizar durante la validacin, la calidad del agua destilada y/o desionizada. FASE 1 CARACTERISTICAS DE UN OPERADOR Esta parte del procedimiento de la validacin requiere la determinacin del lmite de deteccin, el sesgo del mtodo, el error sistemtico, y la precisin obtenida por el nico operadorvi. Se usa en un rango de concentraciones que debe ser comprendida desde muy bajas (importante para determinar el limite de deteccin inferior) hasta concentraciones altas preferiblemente ligeramente por encima del limite establecido en normas o decretos en caso que exista. Esta fase se desarrolla analizando

diferentes tipos de error inducido por la preparacin de los lotes o exceso de confianza del operador al conocer el volumen a gastar de valorante para cada lote. Es por esta razn que la siguiente fase se centra en muestras desconocidas preparadas por otro operador (el cual llamaremos operador 2).1* FASE 2 ANLISIS DE MUESTRAS PREPARADAS OPERADOR Esta fase del requiere por procedimiento el anlisis a otro de de POR OTRO

validacin estndares

preparados

diferentes operador, cada lote

concentraciones analista. Se

donde el valor es desconocido por el analiza desconocido siguiendo el procedimiento estndar para el mtodo. En esta fase se realizan dos (2)

diariamente un (1) lote de muestra durante 6 das, obteniendo as como mnimo seis (6) lotes de concentraciones escogidas. Cada lote debe estar compuesto por siete (7) repeticiones. Para la determinacin de la precisin del mtodo se recomienda preparar un nico lote de concentracin similar a la presente en una muestra natural del analito determinado con el mtodo, Para el anlisis de este lote se debe hacer 20 repeticiones. Al realizar esta fase, el desarrollo del mtodo puede verse sometido a

repeticiones de cada lote, (tres (3) en caso de obtener diferencias marcadas entre ambas repeticiones). Esta operacin debe realizarse durante seis (6) das, el operador 2 que preparo los lotes no puede transmitir las concentraciones preparadas al operador principal hasta finalizado el lote seis (6).

La fase uno ( 1), fase dos (2) y robustez fase cuatro (4) de este articulo se basan en lo propuesto en el standar methods 20th Edition.

En

esta

fase

se

eliminan

los

bajas y cuatro (4) de concentraciones altas. En esta fase las observaciones

inconvenientes presentados en la fase 1 (errores en la preparacin de estndares y exceso de confianza), y se conoce la certeza que tiene el mtodo por medio del % de recuperacin de estndares. Sin embargo una matriz real del analito puede verse afectada por muchos factores, que pueden alterar o no la respuesta del mtodo como el resultado, es por esta razn que la fase tres (3) se basa en el anlisis de matrices reales de alta y baja concentracin del analito determinado por el mtodo. FASE TRES (3) ANALISIS DE

realizadas por el operador ayudan a encontrar posibles debilidades en la tcnica. Lo cual hace necesario la fase cuatro (4) para determinar la robustez de la tcnica, y as conocer como pequeos cambios en el procedimiento pueden afectar los resultados. FASE CUATRO (4) ROBUSTEZ En esta fase se estudia la capacidad del procedimiento inafectado deliberadas por para variaciones permanecer pero los en pequeas,

MATRICES REALES En esta fase el operador debe analizar matrices reales de baja
vii

parmetros del mtodo. Estos datos proporcionaran una indicacin de su fiabilidad durante su uso normal. Para la realizacin de esta fase se recomienda seleccionar los puntos crticos del procedimiento, estos puntos comnmente son: adicin de soluciones buffers, ajustes de pH, cantidad de indicador adicionada, adicin de eliminadores de interferencias. Una vez se seleccionan los pasos a variar se analiza un (1) lote en donde cada volumen o segn sea el caso, ser alterado levemente mientras el resto del procedimiento matrices. permanece constante. Esta informacin se analiza por medio de y alta

concentracin del analito , teniendo en cuenta los puntos crticos donde el mtodo elimina interferencias, ya que al analizar muestras de alta concentracin es posible que estas presenten alteraciones en el punto final de la tcnica**. En esta fase cada matriz equivale a un (1) lote y debe ser analizada por duplicado, en total se recomiendan ocho (8) lotes, cuatro (4) de concentraciones
*

* La Fase tres (3) se basa en lo propuesto en el Protocolo estandarizacin mtodos analticos del IDEAM 1999

Una robustez apropiadamente conducida puede crtico, probar as como los los pasos pasos del del procedimiento en los cuales el rigor es procedimiento donde pequeas

matrices reales, el operador no debe conocer cuales lotes son de estndares y cuales son muestras reales durante los anlisis. Comparando los resultados del laboratorio externo con los del operador se determina el la porcentaje precisin para de del concordancia precisin reales. Con esta ultima fase se conoce la magnitud de los errores de tipo sistemtico que tienden a propagarse y del entre

variaciones son permisibles. Tanto en la fase 1 como 2, el mtodo que se esta validando se encuentra sujeto a errores sistemticos propios del ambiente de trabajo. En la fase cinco (5) ensayos de colaboracin, se eliminan estos errores por medio de un operador externo. FASE CINCO (5) ENSAYOS DE

mtodo para estndares preparados y la mtodo matrices

afectar la fase uno (1) y la fase dos (2) de la validacin. DISCUSION DEL METODO Es imprescindible resaltar la importancia de realizar la fase 1, la fase 2 y el de analista varios prepara tipos, y analiza dado los los que ensayos de colaboracin. En la fase uno estndares y esto puede llevar a errores inconscientemente el analista al conocer la concentracin del estndar puede tender a buscar el valor del volumen que esta gastando en la valoracin perdiendo as objetividad e imparcialidad en el anlisis. Situacin que la fase dos corrige, ya que cuando otro analista prepara el estndar y no revela su concentracin hasta que el analista principal ya ha terminado las valoraciones, se evita el exceso de

COLABORACION Consiste estndares en analizar muestras a de

preparados

diferentes

concentraciones dentro de los lmites de deteccin hallados en la fase 1, en otros laboratorios en donde la tcnica ya fue validada. Y conjuntamente analizar muestras naturales de diferentes rangos de concentracin. En esta fase cada matriz enviada por el laboratorio externo es considerada un lote, a cada lote se le debe realizar dos (2) repeticiones, (tres (3) en caso de obtener diferencias marcadas entre ambas repeticiones). Se deben realizar un total de 12 lotes en das diferentes, donde seis (6) lotes deben provenir de estndares preparados, y (6) deben ser

confianza y se recupera la imparcialidad y objetividad del anlisis as como su capacidad de tomar decisiones. Sin embargo puede que exista una fuente de error desconocida por ejemplo un porcentaje de pureza del estndar menor al ptimo, con este tipo de situaciones la fase uno no podra determinar la causa del problema y la preparacin del estndar por otro analista tampoco. Es por esto que se realizan ensayos de colaboracin permitiendo con otros y laboratorios, evaluar el conocer

Este

articulo

propone

un

mtodo

compuesto de cinco (5) fases que se complementan entre si para validar con un alto nivel de complejidad cualquier mtodo de anlisis volumtrico. RECOMENDACIONES Se recomienda utilizar este mtodo para las validaciones de mtodos volumtricos. AGRADECIMIENTOS Agradecimientos al Ms Gonzalo

funcionamiento del mtodo estudiando la precisin, nivel de sesgo y porcentaje de concordancia con otros mtodos ya validados.

Hernndez del laboratorio de aguas de la Universidad del Quindo. Agradecimientos a la Unidad operativa de salud publica seccional Risaralda el seor Hernando Osorio.

CONCLUSION

BIBLIOGRAFIA

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ii

Pagina de internet http://www.ministeriodesalud.go.cr/protocolos/guiavalidacionmetodosanaliticos.pdf visitada el da 20 de febrero de 2008, 4:00 pm (hora Colombia).

iii

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iv

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v

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vi

Analtica cuarta edicin.

Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater 20th Edition, section 1040 B.

vii

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