OBJETIVO GENERAL

Identificar la importancia que tiene la presencia de las protenas en especial la de la albmina. Cuantificar los niveles de albmina en suero y analizarlos en funcin de los parmetros establecidos. Cuantificar los niveles de protenas totales presentes en suero y analizarlos en funcin de los parmetros establecidos.

INTRODUCCION TEORICA:
LAS PROTEINAS Estas son macromolculas compuestas por carbono, hidrgeno, oxgeno y nitrgeno. La mayora tambin contienen azufre y fsforo. Las mismas estn formadas por la unin de varios aminocidos, unidos mediante enlaces peptdicos. El orden y disposicin de los aminocidos en una protena depende del cdigo gentico, ADN, de la persona.

Las protenas constituyen alrededor del 50% del peso seco de los tejidos y no existe proceso biolgico alguno que no dependa de la participacin de este tipo de sustancias. FUNCIONES:

Ser esenciales para el crecimiento. Las grasas y carbohidratos no las pueden sustituir, por no contener nitrgeno. Proporcionan los aminocidos esenciales fundamentales para la sntesis tisular. Son materia prima para la formacin de los jugos digestivos, hormonas, protenas plasmticas, hemoglobina, vitaminas y enzimas. Funcionan como amortiguadores, ayudando a mantener la reaccin de diversos medios como el plasma. Actan como catalizadores biolgicos acelerando la velocidad de las reacciones qumicas del metabolismo. Son las enzimas. Actan como transporte de gases como oxgeno y dixido de carbono en sangre. (hemoglobina). Actan como defensa, los anticuerpos son protenas de defensa natural contra infecciones o agentes extraos. Permiten el movimiento celular a travs de la miosina y actina (protenas contrctiles musculares). Resistencia. El colgeno es la principal protena integrante de los tejidos de sostn.

Energticamente, las protenas aportan al organismo 4 Kcal de energa por cada gramo que se ingiere. Las protenas son clasificables segn su estructura qumica en:

Protenas

simples:

Producen

solo

aminocidos

al

ser

hidrolizados.

Albminas y globulinas: Son solubles en agua y soluciones salinas diluidas (ej.: lactoalbumina de la leche). Glutelinas y prolaninas: Son solubles en cidos y lcalis, se encuentran en cereales fundamentalmente el trigo. El gluten se forma a partir de una mezcla de gluteninas y gliadinas con agua. Albuminoides: Son insolubles en agua, son fibrosas, incluyen la queratina del cabello, el colgeno del tejido conectivo y la fibrina del coagulo sanguneo. Protenas conjugadas: nucleoprotenas. Son las que contienen partes no proteicas. Ej.:

Protenas derivadas: Son producto de la hidrlisis. En el metabolismo, el principal producto final de las protenas es el amonaco (NH3) que luego se convierte en urea (NH2)2CO2 en el hgado y se excreta a travs de la orina. ESTRUCTURA Es la manera como se organiza una protena para adquirir cierta forma. Presentan una disposicin caracterstica en condiciones fisiolgicas, pero si se cambian estas condiciones como temperatura, pH, etc. pierde la conformacin y su funcin, proceso denominado desnaturalizacin. La funcin depende de la conformacin y sta viene determinada por la secuencia de aminocidos. Para el estudio de la estructura es frecuente considerar una divisin en cuatro niveles de organizacin, aunque el cuarto no siempre est presente. Conformaciones o niveles estructurales de la disposicin tridimensional:

Estructura primaria. Estructura secundaria. Estructura terciaria. Estructura cuaternaria.

ALBMINA EN SUERO La albmina es una protena producida por el hgado. El examen de albmina en suero mide la cantidad de esta protena en la parte lquida y transparente de la sangre. Forma en que se realiza el examen Se necesita una muestra de sangre. Para obtener informacin sobre cmo se hace este examen, ver: venopuncin . La muestra de sangre se coloca en una mquina, llamada centrfuga, la cual gira y separa las clulas de la parte lquida de la sangre (suero). Preparacin para el examen El mdico le dir si necesita dejar de tomar cualquier tipo de frmacos que puedan afectar el examen. Los frmacos que pueden aumentar las mediciones de albmina incluyen esteroides anablicos, andrgenos, hormona del crecimiento e insulina. Razones por las que se realiza el examen Este examen ayuda a determinar si un paciente sufre una enfermedad heptica o una enfermedad renal o si el cuerpo no est absorbiendo suficiente de protena. La albmina ayuda a transportar muchas molculas pequeas en la sangre, incluyendo bilirrubina, calcio, progesterona y medicamentos. Juega un papel importante para impedir que el lquido de la sangre se filtre hacia los tejidos. Dado que la albmina es producida por el hgado, su disminucin en el suero puede ser un signo de enfermedad heptica. Esto tambin puede ocurrir debido a enfermedad renal, que permite que la albmina escape hacia la orina. La disminucin de la albmina tambin tiene su explicacin por desnutricin o por una dieta baja en protenas. Valores normales

El rango normal es de 3.4 a 5.4 gramos por decilitro (g/dL). Nota: los rangos de los valores normales pueden variar ligeramente entre diferentes laboratorios. Hable con el mdico acerca del significado de los resultados especficos de su examen. Significado de los resultados anormales

Los niveles de albmina por debajo de lo normal pueden indicar: Ascitis Quemaduras (extensas) Glomerulonefritis Enfermedad heptica, como hepatitis, cirrosis o necrosis hepatocelular Sndromes de mal absorcin (como enfermedad de Crohn, espre o enfermedad de Whipple) Desnutricin Sndrome nefrotico

PROCEDIMIENTOS EXPERIMENTALES:
EQUIPOS Y REACTIVOS
Tubos de ensayo Pipetas graduadas Espectrofotmetro

Reactivo de biuret

Agua destilada

Cocinilla

Reactivo de BCG Aguja

Estndar de Protenas totales 1g. Alcohol 70%

Estndar de albmina 2,8g% Algodn

PROCEDIMIENTO:

1. Extraccin de la muestra: la muestra ser extrado por puncin venosa del antebrazo, previa sepsis de la zona a extraer, se dejar en reposo por 15 minutos luego se centrifugar por 10 minutos a 3 500 rpm.

2. Preparacin de la muestra: Para protenas totales: Coger 0,1 mL de suero y agregar 0,9 mL de agua destilada. Para albminas: Se trabajara con suero puro.

3. Determinacin de protenas totales: Preparar la siguiente batera: Tubos mL Suero diluido mL St protena 1g% mL agua destilada mL Biuret Bl --0,5 1,0 St -0,2 0,5 1,0 MP 0,2 -0,5 1,0

a. Homogenizar y llevar a bao mara a 37C por 10 minutos.

TUBOS St MP Blanco

TEMPERATURA

TIEMPO

Incubar a 37C

10 min.

b. Leer a 540nm en el espectrofotmetro. TUBOS St MP Blanco ABSORBANCIA 0,306 0,224 0,068

c. La reaccin es lineal hasta una concentracin de 15g/dL d. Determinar la concentracin mediante la siguiente formula [ ] [ ]
( ) ( )

e. Halar el factor de dilucin

CALCULOS PREVIOS

Restar la lectura de absorbancia del tubo blanco a la lectura de absorbancia de las muestras restantes.

MUESTRA ABSORBANCIA St MP 0,306 0,224

RESTAR La lectura de absorbancia del tubo blanco es decir 0,068

RESULTADO 0,238 0,156

Determinar la concentracin mediante la formula [ ] [ ]

( ) ( )

4. Determinacin de albmina: preparar la siguiente batera. Tubos mL Suero mL St albmina 2,8g% mL agua destilada mLReactivo BCG Bl ---2,0 St -0,1 -2,0 MP 0,1 --2,0

a. Homogenizar y leer a 625 nm. en el espectrmetro. TUBOS St MP Blanco ABSORBANCIA 0,312 0,507 0,00

b. La reaccin es lineal hasta una concentracin de 8g/dL c. Determinar la concentracin mediante la siguiente formula [ ] [ ]
( ) ( )

DISCUSION DE RESULTADOS
Los resultados fueron: Protenas totales: 6,55g% Albmina: 4,55g%

Estos resultados se encuentran dentro de los valores de referencia, los cuales son: - Protenas totales: 6-8 g/dL - Albmina: 3,50- 5,00 g/dL Sin embargo los resultados nos dan ndices relativamente bajos, esto se puede deber a un mal pipeteo o contaminacin de los tubos de muestra.

CONCLUSIONES
El reactivo de Biuret utilizado en la determinacin de las protenas totales reacciona en medio lcali formando compuestos tetracordinados entre los enlaces peptidicos de las protenas lo que se evidenciar en las muestras con un color violceo. El rectivo de BCG utilizado en la determinacin de la albumina no reacciona qumicamente con dicha protena, nicamente se une a sta y genera una coloracin verde. .Los valores de protenas por debajo de los normales puede deberse a problemas como malnutricin, quemaduras y hemorragias. Los valores de protenas en suero por encima de los normales pueden deberse a enfermedades inflamatorias crnicas o enfermedades infecciosas crnicas.

CUESTIONARIO
1. Cul es el fundamento de la reaccin de Biuret? El reactivo de Biuret contiene CuSO4 en solucin acuosa alcalina (gracias a la presencia de NaOH o KOH), ste es de color azul. La reaccin se basa en la formacin de un compuesto de color violeta, debido a la formacin de un complejo de coordinacin entre los iones Cu2+ y los pares de electrones no compartidos del nitrgeno que forma parte de los enlaces peptdicos. Es decir determina la presencia de protenas 2. Cul es la relacin normal entre albmina / protenas totales? Las protenas totales menos la albmina es igual a las globulinas. Las protenas sricas, Protenas Totales (PT) y Albmina (Alb) son de valor potencial para ser utilizadas como indicadoras del estado nutricional. Valores normales: Protenas totales Albmina : : 6-8 g/dl 3-5 g/dl

La relacin entre la albmina con las protenas totales oscila entre: 0,5 -0,625 g/dl.

3. Cul es la funcin de la albmina?

Mantenimiento de la presin onctica. Transporte de hormonas tiroideas. Transporte de hormonas liposolubles. Transporte de cidos grasos libres. (Esto es, no esterificados) Transporte de bilirrubina no conjugada. Transporte de frmacos y drogas. Unin competitiva con iones de calcio. Control del pH. Funciona como un transportador de la sangre y lo contiene el plasma

BIBLIOGRAFIA
Stryer,L 1985 Bioqumica. Editorial Reverte S. A. Barcelona Espaa Bohinski,R C.1991 Bioqumica Addison-Wesley Iberoamericana S.A. Wilmington, Delaware. Devlin, T, M, 1997. Libro de aplicaciones clnicas. Edicicion 3 Reverte S. A. p.p.169 Gonzales J.M. 1990 Bioqumica clnica. Edicion Mc Graw-Hill Intermericana de Espaa. p.p.745 Murray, Robert y OTROS; Harper Bioquimica Ilustrada. Edicion 16. p.p.126