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Enterobactrias Taxonomia Phylum: Proteobacteria Classe: -Proteobacteria Ordem: Enterobacteriales Famlia: Enterobacteriaceae - bacilos Gram (-) - aerbicos e facultativos

- oxidase (-) - catalase (+) Caractersticas principais - no esporulados - usualmente mveis - fermentativos Metabolismo do cido pirvico

Os membros da famlia Enterobacteriaceae podem metabolizar o cido pirvico a cido frmico e outros produtos: fermentao do cido frmico O cido frmico pode ser convertido a H2 e CO2 hidrogenoliase frmica HCOOH CO2 + H2 pela

H dois tipos de fermentao do cido frmico:


o

Fermentao cida mista (E. coli, Salmonella, Proteus e outros gneros) excreo de etanol mistura complexa de cidos . actico . lctico . succnico

. frmico

CO2 + H2 (1 : 1)

o Fermentao butanodiol (Enterobacter, Serratia, Erwinia

e algumas espcies de Bacillus) 2-3-butanodiol etanol cidos (pequena quantidade): actico, lctico, succnico e frmico

CO2 + H2 (5 : 1)

Classificao A famlia integra 47 gneros e mais de 300 espcies Os gneros mais importantes do ponto de vista mdico e veterinrio o Escherichia o Salmonella o Proteus o Klebesiella o Shigella o Yersinia Habitat As enterobactrias tm uma distribuio ubiquitria o So potencialmente patognicas o ou so espcies no patognicas. Muitas das enterobactrias fazem parte da flora normal do tracto digestivo. Algumas espcies de vida livre, ocorrem no solo e na gua. A contaminao fecal da gua indicada pela presena de Escherichia coli. Espcies de Klebsiella (incluindo K. pneumoniae), Enterobacter e Citrobacter tm sido recuperados a partir de legumes.

Modo de infeco e transmisso quase sempre por ingesto Os fomitos so especialmente importantes. Algumas infeces so endgenas.

Patogenicidade As manifestaes clnicas e trocas patolgicas parcialmente o resultado da aco das endotoxinas. so

As enterotoxinas de E. coli so importantes nas enfermidades diarreicas. Salmonella e Shigella so francamente patognicas. Proteus, Serratia, Klebsiella e Enterobacter na maior parte dos casos so oportunistas o produzem enfermidade em certas condies trauma nos tecidos (mastites) feridas debilitantes malnutrio.

Escherichia coli

Faz parte da flora normal do tubo digestivo dos mamferos e aves, onde assume o estatuto de comensal recuperada a partir de uma grande variedade de infeces em muitas espcies animais o como agente primrio o como agente secundrio Os jovens animais so particularmente mais susceptveis, e as infeces urinrias as mais frequentes. Constituio antignica O mosaico antignico de E. coli definido por uma srie de determinantes: o O parede celular o F fmbrias o H flagelar o K cpsula

E. coli 0157. Micrografia por transmisso electrnica. O157 refere-se ao tipo de antignio de E. coli que, neste caso, basedo na estructura molecular precisa do polissacardeo Oespecifico no LPS da parede celular.

Desenho esquemtico da membrana exterior duma bactria Gram-negativa

Toxignese Endotoxinas o provocam fenmenos de hipersensibilidade Citotoxinas necrozantes Verotoxinas Enterotoxinas o LT termolbil o ST termoestvel

Estirpes enteropatognicas Conhecem-se 6 categorias de E. coli, do ponto de vista patognico: o enterotoxignicas (ETEC) o enteropatognicas (EPEC) o enteroinvasivas (EIEC) o enterohemorrgicas (EHEC) o enteroagregativas (EHEC) o necrotoxignicas (NTEC)

Factores de virulncia de E. coli i solada de infeces fora do intestino Factor de virulncia Patognese Plasmdeo col V -Codifica para o siderforo (aerobactina) para a quelao do Fe -Aumenta a resistncia bacteriana ao soro Hemolisina -Danifica as clulas do hospedeiro; -Liberta o Fe dos glbulos vermelhos Enteroquelina -quela o Fe para a absoro bacteriana Antignio K1 -Impede a fagocitose -Bloqueia a ligao do factor C3b P-pili -Permitem a ligao s clulas do tracto urinrio, especialmente nos rins Pili tipo 1 - Permitem a ligao (1) ao epitlio da bexiga, (2) aos resduos de D-manose

em vrias clulas

Estirpes ETEC o Das seis categorias, a mais importante causadora de diarreia em vitelos, borregos e leites o As enterotoxinas juntamente com os antignios fimbriares so os factores de virulncia mais destacveis identificados em ETEC o Duas enterotoxinas, uma termostvel (ST) e outra termolbil (LT), so produzidas pelas estirpes ETEC, ambas plasmdeodependentes a LT estimula a adenilciclase, que converte ATP em AMP-cclico (AMPc). O AMPc induz a excreo de Cl- e inibe a absoro de Na+ (de modo semelhante toxina colrica), provocando uma grande perda de fluidos. A ST activa a guanilciclase, que converte GTP em GMP cclico (GTPc). Induz a excreo de electrlitos e gua para o lumen intestinal diarreia lquida caracterstica o As culturas K88 de ETEC esto normalmente associadas com a diarreia primria em suinos eas culturas K99 de ETEC com a diarreia primria em vitelos A letra K refere-se, normalmente aos antignios de superfcie, designadamente de natureza fmbrica o A colonizao do intestino delgado pelas estirpes enterotoxignicas de E. coli depende de certas estruturas fmbricas. Estirpes EPEC o Por definio, so serogrupos reconhecidos como causadores de sndromes diarreicos em humanos o Nos animais, estas estirpes ligam-se s clulas epiteliais do intestino e destroem as microvilosidades.

Estirpes EIEC o Podem penetrar no epitlio intestinal, principalmente naquele do Intestino grosso, provocando diarreias lquidas o Os factores de virulncia cromossmica e plasmdica Estirpes EHEC
o Tambm

so

de

informao

so designadas verotoxignicas (VTEC).

como

E.

coli

o Mais de 57 sertipos isolados no Homem e animais o Colonizam a mucosa intestinal de uma forma ntima Apagam as microvilosidades o As fmbrias so de informao plasmdica o Produzem verotoxinas tipo I e II tambm designadas toxinas shigelides tipo I e II activas contra clulas vera e HeLa o Colonizam o epitlio do intestino e destroem as microvilosidades o No so enteroinvasivas o O sortipo O157:H7 o mais importante associado no Homem com colite hemorrgica sindrome urmico e hemorrgico mortes nos Estados Unidos por consumo de hamburgers podem estar presentes no tubo digestivo dos bovinos Estirpes EAEC o Provocam diarreias em humanos

o Nunca foi evidenciada a sua presena como agentes patognicos em animais domsticos

Estirpes NTEC o Provocam diarreias Homem Vitelos Borregos Suinos o Produzem citotoxinas necrosantes CNF1 e CNF2 NTEC2 isoladas apenas em vitelos

Doenas causadas por E. coli - colibaciloses

A designao colibacilose um termo geral que denota uma infeco por E. coli o caracterizada por um ou mais dos seguintes sintomas: diarreia enterite septicmia ou bacterimia

colibaciloses o colibacilose dos recm-nascidos o doena dos edemas (suinos) o diarreia do ps-desmame (suinos) Salmonella

Contrariamente a outras enterobactrias, com a excepo de Yersinia, as Salmonellae so parasitas intracelulares obrigatrios As estirpes invasivas

o so fagocitadas pelos macrfagos, e espalhadas pelo sistema linftico, pela corrente sangunea ou por ambos o Conhecem-se 3 formas principais de salmonelose em humanos: febres entricas septicmia gastroenterite As formas observadas em animais so: o septicmias hiperagudas o enterites agudas o enterites subagudas o enterites crnicas. As salmonellae so actualmente agrupadas em uma nica espcie o Salmonella enterica S. enterica subdivide-se em sete subespcies com base em caractersticas bioqumicas diferenciais o enterica o salamae o arizonae o diarizonae o houtenae o indica o bongori

A quase totalidade (99,7 %) de Salmonellae isoladas no Homem e animais pertencem subespcie enterica

As estirpes das outras subespcies so sobretudo encontradas o em animais poiquilotrmicos o no meio ambiente o s muito excepcionalmente esto implicadas em distrbios da sade animal e humana Doenas provocadas por Salmonella Factores de virulncia o geralmente aceite que a endotoxina (lipopolissacardeo) de Salmonella contribui fortemente para a patognese

o Outros factores de virulncia esto naturalmente associados e que contribuem para a instalao da doena fmbrias de adeso produo de colicinas enterotoxinas citotoxinas porinas siderforos Salmonelloses o Salmonella typhi responsvel pela febre tifide em humanos o S. dublin provoca infeces severas em vitelos o S. cholerasuis, provoca enterites em suinos o S. abortus-bovis, provoca abortos em bovinos o S. abortus-ovis, provoca abortos em ovinos o S. gallinarum, provoca infeces intestinais agudas em galinhas e pers o S. pullorum, provoca severas infeces em pintos

Isolamento e Cultura

As Enterobactereaceae crescem bem nos meios de cultura ordinrios

Os laboratrios dispoem de meios selectivos que favorecem o crescimento de alguns gneros. Colheita de material para laboratrio Tecidos, fezes ou material intestinal so normalmente utilizados para as culturas As colnias das vrias enterobactrias cultivadas em agrsangue so muito semelhantes no aspecto, com umas poucas excepes As colnias nos meios selectivos, no entanto, mostram considerveis diferenas entre os gneros.

Identificao

Depois de observar o tipo e o nmero de colnias, vrias so inoculadas em agar Kligler ( sugar iron agar) o meio utilizado para verificar a fermentao de lactose, glucose e a produo de H2S e gs o um meio inclinado que inoculado primeiro por picada profunda e depois por estria na superfcie inclinada e incubado 18 horas a 37 o C o Obtm-se as seguintes reaces: 1 Superfcie alcalina (vermelho) e fundo cido (amarelo) s fermentao da glucose 2 Superfcie cida (amarelo) e fundo cido (amarelo) lactose fermentada; glucose fermentada 3 Enegrecimento ao longo da linha de picada ou fundo: produo de H2S 4 Bolhas de gs no agar: algumas enterobactrias fermentativas produzem gs, enquanto muitas outras no Estas reaces juntamente com as designadas por IMVIC (indol, metil red, Voges-Proskauer acetil metil carbinol, utilizao de citrato) e outras reaces acessrias, identificam os principais gneros.

BIBLIOGRAFIA CARTER, G. R., M. M. GHENGAPPA and A. W. ROBERTS, 1995. Essentials of Veterinary Microbiology. 5th Edition, Williams & Wilkins. COSTA, P. C. D. F. M., 1999. Aspectos da interaco das microfloras cecais com as infeces por Salmonella sp. em frangos. Dissertao de Mestrado. Universidade de Trs-os-Montes e Alto Douro. EUZBIE, J. P., 1998. Dictionnaire de BcteriologieVtrinaire. Socit de Bcteriologie Systmatique et Vtrinaire.

PRESCOTT, HARLEY & KLEIN, 2002. Microbiology, 5th edition. McGraw Hill. QUINN, P. J., M. E. CARTER, B. MARKEY and G. R. CARTER, 1994. Clinical Veterinary Microbiology. Wolfe.

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