You are on page 1of 7

CULTUra Y FrMaCoS

La naturaleza qumica de la transmisin sinptica, un largo camino hacia el neurotransmisor


Dr. Jess Miguel Hernndez Guijo
A lo largo de la historia cientfica, y ms concretamente en el rea biosanitaria, uno de los captulos mas llamativos y atractivos ha sido el progresivo esclarecimiento de los procesos que median la transmisin sinptica y que llev al descubrimiento de los neurotransmisores.

Wilhelm His

A lo largo de las siguientes pginas vamos a hacer un pequeo recorrido histrico por los acontecimientos ms relevantes en esta rea; se fechan entre 1875 y 1975. Todo comenz con dos importantes controversias: la primera concerniente a la morfologa neuronal, si las neuronas son entidades celulares discretas e independientes o forman parte de un gran sincitio; y la segunda, si la transmisin sinptica es de naturaleza elctrica o qumica. A finales del siglo XIX, Luigi Galvani descubri la electricidad animal (1791) como la defini Volta en 1792, La existencia de una electricidad animal real e inherente. Emil du Bois-Reymond, quien descubri el potencial de reposo en 1877, analiz en profundidad la posibilidad de que la transmisin neuromuscular fuera de naturaleza elctrica. Concluy que si el flujo de corriente fuera la responsable de la transmisin sinptica debera activar tambin ciertas fibras musculares anexas a las directamente inervadas. A partir de esta y otras consideraciones propuso que la transmisin sinptica podra tener naturaleza qumica: una secrecin estimuladora en forma de amonio, cido lctico o alguna otra sustancia poderosamente estimulante, o el fenmeno es de naturaleza elctrica.

Arthur Van Gehuchten

Heinrich W.G. Waldeyer

reticularistas, en contra de los defensores de la teora celular o neuronal a favor de la neurona como unidad independiente con lmites definidos por membrana vean las prolongaciones dendrticas y axonales como una continuidad de las de otras clulas punto de vista originado a partir de las observaciones de Gerlach en 1872, quien interpret las redes de fibras como anastomosis de prolongaciones neuronales-. Este captulo morfolgico no sera definitivamente aclarado hasta la aplicacin de la microscopa electrnica a los tejidos neuronales a mediados del siglo XX. En ausencia de esas pruebas directas, Wilhelm His, van Gehuchten, Waldeyer, Retzius y especialmente Santiago Ramn y Cajal fueron capaces de obtener diferentes evidencias a favor de la doctrina neuronal que formul Waldeyer en 1891 -las neuronas son desde un punto de vista estructural, funcional, desarrollo y patologa, entidades independientes-. Waldeyer plasm esta teora sobre las pruebas objetivas demostradas por His, Klliker, Retzius, van Gehuchten y Cajal, acuando el trmino neurona. Los estudios de His y Foro evidenciaron la individualidad de las neuronas. Gudden en 1870 observ que cuando un nervio se corta, la atrofia neuronal resultante est restringida y no se extiende e involucra a neuronas vecinas como sera de esperar si las clulas fueran fsicamente continuas. Cajal, que inici sus estudios completamente ignorante de las contribuciones previas de His y Forel, utiliz el mtodo descrito por Golgi en 1873. Este mtodo, basado en la impregnacin con sales de cromo, marcaba slo el 1% de las clulas en la regin de inters, posibilitando el estudio morfolgico de celulas nerviosas individuales, aisladas de sus vecinas. Adems, las clulas marcadas se impregnaban en su totalidad, pudien-

Coordinado por Dr. Jess Miguel Hernndez Guijo Instituto Tefilo Hernando. Dpto. de Farmacologa y Teraputica. Facultad de Medicina. Universidad Autnoma de Madrid. Av. Arzobispo Morcillo 4. 28029 Madrid. jesusmiguel.hernandez@uam.es

La teora reticular imperante frente al empuje de la teora neuronal


A final del siglo XIX, ms de 40 aos despus de que Schleinden y Schwann (1839) formularan la teora celular las clulas son la unidad estructural y funcional de los tejidos y rganos-, los neuroanatomistas todava se cuestionaban si esta teora era aplicable al sistema nervioso. As, los

- 50 -

volumen

6 n 1 |

marzo

2008

ActuAlidAd en FArmAcologA y terAputicA

cultura y frmacos

Magnus Gustaf Retzius

Santiago Ramn y Cajal

Rudolph Albert von Klliker

do as visualizarse el cuerpo celular, axones y proyecciones dendrticas. Con esta metodologa concluy en 1888 que la terminacin axonal de las neuronas finaliza libremente sobre la superficie de otras clulas y que el sitio de interaccin con la clula diana no es continuo ni parte de una red difusa. En su monografa Neuronismo o reticularismo? publicada despus de su muerte, Cajal resume un extenso cuerpo de evidencias descriptivas y experimentales, acumuladas a lo largo de los aos, en favor de la teora neuronal. Hasta 1888 Cajal publicaba sus estudios en espaol, en revistas de circulacin muy limitada, y autofinanciadas, lo que dificultaba enormemente la difusin y el conocimiento de sus resultados por la comunidad cientfica. Pero en 1889 asisti al congreso de la Sociedad Anatmica Alemana en Berln y atrajo la atencin de Klliker lder de los anatmicos europeos- quien le anim a traducir sus trabajos al francs y al alemn. Klliker era unos de los defensores de la teora reticularista, la cual abandon para abrazar la teora neuronal, como dijo Cajal: con la flexibilidad de un hombre joven adaptndose al nuevo concepto de contacto e independencia morfolgica en las neuronas. Cajal reestableci el principio de polarizacin dinmica, inicialmente articulado por van Gehuchten, por el cual la seal en una neurona fluye en una direccin nica y predecible, desde las dendritas al cuerpo celular, al axn y de este a la terminal presinptica donde contacta con otras neuronas o clulas efectoras. Tambin formul el principio de conectividad especfica, por el cual las neuronas no conectan indiscriminadamente con otras, slo con ciertas dianas postsinpticas. Charles Sherrington, quien acu el trmino sinpsis en 1897, persuadi a la Royal Society para invitar a Cajal a impartir la Croonian Lecture en 1894, dando as el espaldarazo definitivo a la reputacin de Cajal, quien posteriormente, a partir de la publicacin de su Histologie du Systme Nerveux de lHomme et des Verbrs (1909, 1911), ser considerado como uno de los pilares fundamentales de la neurociencia. Sherrington estudi los reflejos espinales, demostr el flujo unidireccional de la informacin a travs de aferencias a la motoneurona espinal que integra y transmite al msculo. Postul la existencia de lo que hoy conocemos como retraso sinptico. Afirm que la interaccin entre las entradas de informacin y la motoneurona puede involucrar muchas sinapsis; centr as la idea que cada fibra aferente slo causa un pequeo efecto sobre la motoneurona y que se precisa la sumacin, tanto espacial como temporal, de muchas aferencias para causar la descarga de la motoneurona. Pero Sherington hizo un descubrimiento fundamental; observ que

no todas las sinapsis son excitadoras, tambin hay sinapsis inhibidoras, algo muy destacable si consideramos que ni Cajal ni sus contemporneos consideraron esta posibilidad. Sherrington postul el principio de inervacin recproca, por el cual el reflejo de excitacin de motoneuronas que activan un grupo de msculos est siempre acompaado por la inhibicin de las motoneuronas que inervan el grupo de msculos antagonistas (1908). Algunos cientficos precedentes ya haban consideraron este mecanismo fisiolgico (Charles Bell en 1834 es sus estudios sobre contraccin y relajacin muscular; Weber estudiando el nervio vago en 1845; y Friedrich Goltz en cuyo laboratorio de Estrasburgo Sherrington inici sus estudio sobre el sistema nervioso- en 1874 en estudios con perros espinales. Pero fue Sherrington quien vio la independencia fisiolgica de este proceso y adems lo puso en el contexto de la transmisin sinptica y la accin integradora de los reflejos.

El concepto de receptor postsinptico toma cuerpo


A la par que Sherrington desarrollaba sus trabajos, en Cambridge, J. Newport Langley, en sus estudios con ganglio autnomo perifrico, obtuvo la primera evidencia concluyente a favor de la naturaleza qumica de la transmisin sinptica. Langley recibi una muestra de un alcaloide extrado de las hojas de una planta australiana; observ que la accin de este alcaloide era idntica a la de la nicotina al aplicarlo al ganglio cervical superior de gatos anestesiados, causaba retraccin de la membrana nictitante, dilatacin de la pupila y piloereccin. Inicialmente Langley acept que el efecto de nicotina, curare y atropina era sobre la conduccin nerviosa, y que el axn preganglionar y la clula ganglionar eran continuos. Pero cambi su modo de pensar cuando descubri que la aplicacin de nicotina sobre el ganglio produca los mismos efectos que una breve estimulacin de las fibras preganglionares, incluso cuando el ganglio haba sido completamente denervado, por lo que la accin de la nicotina deba ser directa sobre la clula ganglionar. A esta misma conclusin lleg en 1905 cuando seccion el nervio de los msculos de la pata del pollo y la inyeccin de nicotina caus contraccin muscular, que a su vez fue bloqueada por curare. Tambin observ que ni la nicotina ni el curare previenen la contraccin evocada por la estimulacin elctrica directa del msculo por lo que el efecto de tales sustancias se deba ejercer sobre una sustancia receptora y el impulso nervioso no pasara del nervio al msculo como una descarga elctrica, sino a partir de la

ActuAlidAd en FArmAcologA y terAputicA

mArzo

2008 |

volumen

1 |

- 51 -

cultura y frmacos

Camillo Golgi

secrecin de una sustancia especial al final del nervio, afirm Langley en 1906. Haba nacido la teora de los receptores. Descubri en 1907 que un msculo inervado produce contraccin slo cuando se aplica nicotina directamente a la regin cercana a la terminacin nerviosa -evidencia de la localizacin de los receptores nicotinicos para acetilcolina-, y cmo despus de varios das tras la denervacin, esta sensibilidad receptorial se haba extendido a lo largo de toda la membrana muscular -en ausencia de inervacin se produce una distribucin homognea del receptor nicotnico por toda la superficie celular-. Previamente a los estudios de Langley, en 1895 Oliver y Schffer describieron cmo una inyeccin intravenosa de un extracto de glicerol de la glndula adrenal produca un marcado incremento de la presin arterial. Al mismo tiempo Szymonowicz hizo esta observacin, pero encontr que si se cortaba el nervio vago, ese extracto de la mdula adrenal tambin produca un marcado incremento de la frecuencia cardaca. Despus del aislamiento y purificacin de la adrenalina, y la identificacin de su estructura qumica por el japons Jokichi Takamine, un estudiante de Langley, T. R. Elliott, examin sus efectos sobre tejidos perifricos inervados por el sistema nervioso simptico. Demostr que los efectos de la adrenalina eran muy similares a los observados por la estimulacin de fibras postglaglionares y que la degeneracin de las fibras simpticas no tena efectos sobre la accin de la adrenalina, por lo que concluy en 1904 que el impulso en los nervios simpticos conduce a la liberacin de una pequea cantidad de adrenalina o compuesto relacionado. Dale, que introdujo el trmino colinrgico, acu tambin el de adrenrgico para describir la liberacin en neuronas postganglionares de una sustancia similar a la adrenalina. La adrenalina se aisl de extractos de mdula adrenal y la similitud de sus efectos con los de la estimulacin de nervios simpticos postganglionares condujo a la errnea creencia de que el neurotransmisor liberado por las terminaciones simpticas era adrenalina. En 1910, Barger y Dale ya dijeron que la accin de noradrenalina se aproximaba ms a la del nervio simptico que la adrenalina. La idea en favor de la adrenalina persisti hasta 1946 cuando Ulf von Euler demostr que noradrenalina y no adrenalina era el principal componente aislado de los nervios simpticos de mamferos. En 1961 Hertting y Axelrod demostraron que noradrenalina marcada era captada por los nervios simpticos y liberaba cuando eran estimulados. Posteriormente, en 1967, Brown y Gillespie demostraron la liberacin de noradrenalina endgena tras la estimulacin de nervios simpticos.

El protagonismo de la acetilcolina
Inspirado en los estudios de Elliott, Walter E. Dixon centr su atencin en la accin inhibidora del nervio vago sobre el corazn. Extrajo el corazn de un perro mientras era inhibido por la estimulacin del vago, hizo un extracto del tejido miocrdico y lo aplic sobre un corazn de rana que estaba latiendo. Dixon concluy que dicho corazn era claramente inhibido por algn factor presente en el extracto, compuesto activo que nunca lleg a purificar. Postul en 1906 que la estimulacin parasimptica acta a travs de la liberacin de una sustancia cuyo efecto imita al la del alcaloide natural muscarina. Curiosamente, en un congreso de la British Medical Association celebrado en Toronto en 1906, donde Dixon expuso sus descubrimientos, Reid Hunt describi los estudios desarrollados para aislar agentes que enlentecen el corazn y disminuyen la presin sangunea; mostr una veintena de derivados de colina que tenan estos efectos de los cuales el ms potente era la acetilcolina. Ni Dixon, ni Hunt, ni ninguno de los asistentes fueron capaces de ver la conexin existente entre ambos descubrimientos. Otro de los estudiantes de Langley, e ntimo amigo de Elliott, fue Henry Dale, un estudioso de las aminas simpatomimticas aisladas por su colega George Barber. Dale evalu sus efectos sobre la presin sangunea y sobre varios rganos y tejidos; identific la 1-aminoetilcatecol, posteriormente conocida como noradrenalina, como un potente agente vasopresor. Tambin inici una serie de estudios sobre los alcaloides del cornezuelo de centeno; y junto con Arthur Ewins, aislaron componentes del mismo encontrando fracciones que tenan una accin similar a la muscarina y estaban asociadas con la colina; y sus propiedades fisicoqumicas sugirieron a Dale que podra tratarse de acetilcolina (1914). En 1920, y no en 1921 como inicialmente fue fechado, Otto Loewi descubri un principio activo al que denomin vagusstoff. Loewi describi as la historia de este descubrimiento: the night before Easter Sunday of that year I awoke, turned on the light, and jotted down a few notes on a tiny slip of paper. Then I fell asleep again; it occurred to me at six oclock in the morning that during the night I had written down something most important, but I was unable to decipher the scrawl. The next night, at three oclock, the idea returned. It was the design of an experiment to determine whether or not the hypothesis of chemical transmission that I had uttered seventeen years ago was correct. I got up immediately, went to the laboratory, and performed a simple expe-

Charles Sherrington

J. Newport Langley

- 52 -

volumen

1|

mArzo

2008

ActuAlidAd en FArmAcologA y terAputicA

cultura y frmacos

T. R. Elliot

Walter E. Dixon

Henry Dale

riment on a frog heart according to the nocturnal design. Posteriormente, en 1953 dio ms detalles al respecto: I went to the laboratory at three oclock in the morning and at five oclock the chemical transmission of nervous impulse was proved. En realidad, Loewi realiz una serie de experimentos a lo largo de varios das. Estos consistieron en aislar dos corazones de rana y perfundir cada uno con solucin fisiolgica. Mediante la estimulacin del nervio vago en uno de los corazones se produjo la inhibicin de este; el fluido procedente del mismo lo transfiri al segundo corazn donde observ una acusada disminucin de la fuerza de contraccin y la frecuencia cardiaca. Hoy podemos decir que Loewi tuvo la fortuna de su lado tanto por la eleccin del modelo animal como por el periodo de desarrollo de los experimentos. El nervio vago de la rana contiene fibras estimuladoras e inhibidoras, pero en invierno predominan las inhibidoras, y los experimentos de Loewi se realizaron en febrero-marzo. Adems, el contenido en colinesterasa en el corazn de la rana es muy bajo, comparado con el de los mamferos, con lo que el neurotransmisor liberado se mantena activo durante ms tiempo, favorecido tambin por las bajas temperaturas del laboratorio. Loewi justific sus resultados argumentando que el efecto de la sustancia transmisora se traduca en una salida de potasio, como previamente haban sugerido Howell y Duke en 1908. Wilhelm Feldberg, siendo estudiante de medicina en Berln estuvo trabajando durante sus vacaciones en el Instituto de Fisiologa de la Universidad y qued fascinado por el libro de Langley sobre el sistema nervioso autnomo. Su mentor, Schilf, le envi a trabajar a Cambridge junto a Langley, pero este falleci a los pocos meses. Durante los siguientes dos aos en Cambridge estudi en profundidad los artculos de Langley, y en 1927 regres a Berln. Pero como aconteci con otros grandes cientficos, durante la purga juda ejercida por los nazis perdi su puesto acadmico. Afortunadamente fue invitado por Dale a trabajar en el National Institute for Medical Research en Londres donde desarrollaron abundantes estudios sobre la acetilcolina. En 1933 Feldberg y Otto Krayer, con controles adecuados, demostraron que la estimulacin del nervio vago en el perro liberaba una sustancia similar a la acetilcolina, y se poda prevenir su degradacin por la acetilcolinesterasa con eserina. Esto fue slo el inicio de una larga serie de experimentos que llevaron a Feldberg y Krayer a describir el papel de la acetilcolina como neurotransmisor. Dale denomin muscarnicas a las acciones de la acetilcolina caracterizadas por un retraso entre la estimulacin elctrica del nervio y la respues-

ta del rgano inervado, respuesta que era perdurable y persistente y con un retorno gradual a la actividad basal del mismo. Dale describi una segunda clase de accin colinrgica, a la que denomin nicotnica, que se evidenciaba nicotnica en presencia de atropina. Describi esta accin en la mdula adrenal, las neuronas preganglionares del simptico y parasimptico, en msculo esqueltico y en las electroplacas del pez elctrico. A diferencia de la anterior, esta accin era muy rpida, y esta misma rapidez no la haca convincente para una transmisin sinptica de naturaleza qumica. Esta transmisin nicotnica haba sido intuida previamente por Bernard y otros cientficos quienes mostraron como el curare bloqueaba la transmisin neuromuscular. En esta lnea, uno de los pasos principales los dieron Feldberg y Mintz en 1933 cuando encontraron que la transmisin en la mdula adrenal era colinrgica; y al ser las clulas cromafines de la mdula adrenal homlogas a neuronas simpticas y estar inervadas por fibras simpticas preganglionares postularon que las fibras que hacen sinapsis en los ganglios simpticos seran tambin de naturaleza colinrgica; confirmado en 1934 por Feldberg y Gaddum en ganglio cervical superior. Junto a Dale en 1934, Feldberg demostr que la acetilcolina era el mediador de los efectos del nervio vago en el estmago. En 1936 Dale, Feldberg y Vogt demostraron que la estimulacin de las fibras motoras conduca a la liberacin de acetilcolina. En 1936, Brown, Dale y Feldberg fueron capaces de imitar la actividad motora en un msculo con la inyeccin de acetilcolina en la arteria que irriga el msculo gastrocnemio, en modo similar a lo que acontece despus de la estimulacin nerviosa. En 1939, junto a Fessard, Feldberg encontr que los nervios que inervan las electroplaca en la raya elctrica, el torpedo, liberaban acetilcolina; y la aplicacin directa de esta al rgano elctrico produce descargas elctricas, potenciadas por la eserina.

La impliciacin de los movimientos inicos en el efecto del neurotransmisor


A estas alturas, para los farmaclogos ya era obvio que la transmisin sinptica en el sistema nervioso perifrico era de naturaleza qumica; el siguiente paso era probar si esto era cierto en el sistema nervioso central. Muchos fisilogos an eran escpticos y estaban a favor de una transmisin elctrica sobre la base que la accin nicotnica era demasiado rpida para ser un proceso qumico. John Eccles, discpulo

ActuAlidAd en FArmAcologA y terAputicA

mArzo

2008 |

volumen

1 |

- 53 -

cultura y frmacos

Otto Loewi

John Eccles

de Sherrington, fusion y compatibiliz ambos conceptos postulando que en la sinapsis nicotnica existe una excitacin inicial rpida mediada por corriente elctrica procedente de la neurona presinptica que fluye a la clula postsinptica, y que est acompaada de una accin residual prolongada, mediada por la acetilcolina. Pero una serie de acontecimientos obligaron a reconsiderar esta idea, como fue el anlisis cuantitativo de la cantidad de corriente que una neurona presinptica podra inyectar en la clula postsinptica, o el descubrimiento del potencial de placa (EPP, endplate potential) que luego se hizo extensivo a otras muchas sinapsis. En 1938 Gpfert y Schaefer descubrieron que la llegada de un potencial de accin a la terminal presinptica no conduca directamente a la iniciacin de un potencial de accin en la fibra muscular postsinptica. Al igual que Eccles y OConnor, observaron que el potencial de accin de la clula muscular no surge directamente de la lnea de base sino que est precedido por un pequeo y lento potencial transitorio. Es el denominado potencial de placa, un potencial electrotnico producido por una corriente subumbral. Igualmente importante fue el descubrimiento por Kuffler del retraso sinptico -como sugiri Sherrington- entre el potencial de accin en la terminacin y el inicio del potencial de placa. Ambos fenmenos se describieron en una gran variedad de sinapsis. Bernard Katz y Alan Hodgkin concluyeron en 1949 que la fase de ascenso del potencial de accin se deba a un incremento de la permeabilidad al Na+; y posteriormente, en 1952, junto a Huxley y empleando tcnicas de fijacin de voltaje analizaron las corrientes de Na+ y K+ durante el potencial de accin. Junto a Paul Fatt observaron que el potencial de placa es de mayor magnitud cuando el electrodo de registro se posiciona cerca de la unin neuromuscular, y viceversa a medida que se aleja de dicho punto, concluyendo que est generado por una corriente de entrada confinada a la placa neuromuscular que se extiende pasivamente desde esta a lo largo de la fibra muscular. Postularon la existencia de un fenmeno de difusin extrasinptico que limita la unin al receptor as como la presencia en la membrana basal de acetilcolinesterasa. Sugirieron que los mecanismos implicados en estos potenciales se deben a la conductancia no selectiva para Na+, K+ y Cl-. Descubrieron que el valor del potencial de membrana postsinptico determina la amplitud y el signo del potencial de placa, lo que indicaba que la fuente responsable para la corriente de placa deba de estar localizada en la membrana postsinptica. En 1960 A. Takeuchi y N. Takeuchi demostraron que la liberacin de

acetilcolina en la placa neuromuscular incrementa la permeabilidad a Na+ y K+ pero no a Cl-. En los aos 50, Eccles y sus colaboradores observaron que las actividad inhibidora sobre las motoneuronas causaba una hiperpolarizacin en estas sin ningn tipo de despolarizacin asociada como sera de esperar en caso de transmisin elctrica, lo que les llev a abandonar sin reservas la trasmisin elctrica en las sinapsis inhibidoras. En 1953, Fatt y Katz asociaron esta hiperpolarizacin con un incremento de conductancia a Cl- y K+. Se aceptaba que la acetilcolina es un neurotransmisor excitador en varias regiones del sistema nervioso perifrico y tiene accin inhibidora en otras dianas como el corazn, pero haba una considerable reticencia a aceptar que pudiera ejercer como neurotransmisor a nivel central. Feldberg y sus colaboradores, con una amplia serie de evidencias experimentales a lo largo de la dcada de los 50, contribuyeron notablemente a acabar con esa resistencia. Junto a Marthe Vogt describi como la distribucin de la acetilcolinesterasa est restringida a ciertos ncleos cerebrales y al asta anterior de la mdula espinal. En estudios posteriores demostraron la presencia de neuronas colinrgicas en los ncleos basales que suministran las aferencia colinrgicas a la corteza cerebral y al hipocampo, la liberacin de acetilcolina en diferente regiones del cerebro, la presencia de receptores para acetilcolina en los puntos de finalizacin de las fibras colinrgicas y la liberacin de acetilcolina por estimulacin qumica o elctrica en rodajas de cerebro. En 1954, Fatt y Katz en estudios realizados en sinapsis de invertebrados, sorprendentemente y cuando ya se afianz la naturaleza qumica de la transmisin sinptica, demostraron la existencia de la transmisin elctrica. En esta sinapsis la latencia era extremadamente corta e incluso en muchos casos la corriente puede fluir en ambas direcciones sin ningn tipo de rectificacin. Bennett, Pappas y Nakajima obtuvieron unas pruebas morfolgicas a favor de esta transmisin, la existencia de lo que posteriormente se denomin gap junctions uniones en hendidura.

Wilhelm Feldberg

En busca de los mecanismos responsables de la liberacin del neurotransmisor


Una vez aceptada la naturaleza qumica de la mayora de las sinapsis y conocidos los mecanismos inicos que generaban los potenciales postsinpticos excitadores e inhibidores, la atencin se centr en los mecanismos por los cuales se liberaba el neurotransmisor. Fatt y

- 54 -

volumen

1|

mArzo

2008

ActuAlidAd en FArmAcologA y terAputicA

cultura y frmacos

Otto Krayer

Katz en 1951 registrando en la placa neuromuscular observaron la existencia de pequeos potenciales despolarizantes espontneos en ausencia de estimulacin presinptica. Estos potenciales espontneos remedan, en versin miniatura, los potenciales de placa (EPPs), tanto en su curso temporal como en la sensibilidad a frmacos. Descubrieron que la frecuencia de los mEPPs se incrementa tras la despolarizacin de la terminal presinptica y desaparecen despus de cortar y degenerar el axn presinptico, y que la eliminacin del Na+ extracelular eliminaba tanto el EPP como el mEPP. En 1954 del Castillo y Katz observaron que la reduccin del calcio extracelular solo disminuye el tamao de los EPPs sin tener efecto sobe el tamao de mEPPs y descubrieron que el EPP es un mltiplo de mEPP. A partir de estas observaciones postularon la hiptesis quantal -el neurotransmisor, almacenado en paquetes submicroscpicos dentro de la clula, es liberado desde la terminacin axonal en paquetes discretos a los que denominaron quanta en un mecanismo todo o nada-. Almacenados en lo que seran las vesculas sinpticas, descubiertas al mismo tiempo por Palay y Palade, y de Robertis y Bennett, en 1955. Del Castillo, Katz y Miledi, con una serie de evidencias experimentales (1954-1965), postularon que las vesculas podran acumular los neurotransmisores a muy altas concentraciones, y que seran liberados en un proceso exocittico, una liberacin probabilstica, en la cual la membrana vesicular se fusiona con la presinptica y descarga su contenido en la hendidura sinptica; proceso espontneo que puede producirse en ausencia total de potenciales de accin. Katz y Miledi, en 1965, observaron que tras la despolarizacin que sigue a un potencial de accin, en la terminacin nerviosa se abren canales de Ca2+ y se incrementa la conductancia al mismo, el Ca2+ entra en la terminal, y con cierto retraso desde la llegada del potencial de accin se produce la liberacin del neurotransmisor. Rodolfo Llins y sus colaboradores, en 1972, demostraron que ese retraso en la liberacin del neurotransmisor se debe al tiempo que requieren los canales de Ca2+ para abrirse y el Ca2+ entrar y disparar la secrecin.

nptico de la sinapsis, lo que supuso la evidencia final inequvoca de la doctrina neuronal. El examen de la terminal presinptica permiti apreciar la existencia de innumerables vesculas, a las que Katz y del Castillo reconocieron como las organelas que almacenan los cuantos de neurotransmisor. En los aos 70, Heuser y sus colaboradores aplicando la microscopia de criofractura, observaron la fusin individual de las vesculas con la membrana plasmtica. En la dcada de los 50 ya se aceptaba que para que una molcula se considerara un neurotransmisor deba de cumplir los criterios siguientes: -la enzima involucrada en su sntesis debe estar presente en la neurona presinptica; -la molcula se debe liberar tras la estimulacin de la fibra presinptica; -su efecto cuando se aplica a la clula postsinptica debe imitar lo que acontece durante la transmisin sinptica normal; -debe de presentarse un mecanismo que termine la accin del neurotransmisor. A estos criterios se le aadi uno ms, que a nivel postsinptico se presente un receptor apropiado para la molcula en cuestin. Inicialmente slo la acetilcolina y la noradrenalina cumplan esos criterios, pero en las siguientes dos dcadas se acumularon gran cantidad de evidencias a favor de mltiples neurotransmisores, desde aminocidos como glutamato y GABA a aminas como dopamina o serotonina y diferentes neuropptidos. Con la aceptacin de la naturaleza qumica de la transmisin sinptica se tomaron como dogma dos aseveraciones: 1) Dale postul en 1935 que una neurona libera un solo tipo de neurotransmisor en todas sus terminaciones sinpticas; y 2) una neurona tiene el mismo efecto en todas sus dianas postsinpticas. Pero en la dcada de los 60 se evidenci que una neurona, colinrgica en este caso, puede tener una accin excitadora en una neurona diana e inhibidora en otra, el efecto depende del receptor postsinptico y no del neurotransmisor liberado; y en la dcada de los 70, Hkfet y sus colegas demostraron la co-liberacin de neurotransmisores en una misma neurona. El descubrimiento de la naturaleza qumica de la transmisin sinptica ha estado ntimamente asociado a los neurotransmisores acetilcolina y noradrenalina. Pero otros neurotransmisores tambin han tenido su papel en este largo camino. En 1950, Eugene Roberts y Jorge Awapara descubrieron simultneamente la presencia de cido gamma-aminobutrico (GABA) en el cerebro y determinaron su mecanismo de sntesis desde el acido glutmico; pero su papel funcional permaneci poco claro durante mu-

Bernard Katz

Alan Hodgkin

Consideraciones finales

Al mismo tiempo que se desarrollaban los estudios de Katz y sus colaboradores, bilogos celulares y neuroanatomistas como George Palade y Keith Porter pusieron a punto la microscopa electrnica desarrollada en Alemania durante los aos 30- aplicada a tejidos neuronales. Esto permiti la primera visualizacin de la discontinuidad estructural del componente pre- y postsi-

ActuAlidAd en FArmAcologA y terAputicA

mArzo

2008 |

volumen

1 |

- 55 -

cultura y frmacos

Andrew Huxley

chos aos. En 1953 Florey obtuvo una fraccin a partir de extractos de cerebro con un potente efecto inhibidor, purificado e identificado como GABA por Blazemore y Elliott en 1958. En 1966 Otsuka demostr como el GABA se libera al estimular nervios inhibidores, y si se aplica en corteza cerebral reproduce la accin de las neuronas inhibidoras locales como demostraron en 1966 Krnjevic y Schwartz. Aprison y Werman demostraron en 1965-1970 la existencia de otro neurotransmisor inhibidor, abundante en las interneuronas inhibidoras de las motoneuronas, la glicina. En 1950, Watkins, Curtis y Phillis descubrieron que el aminocido glutamato es el mayor neurotransmisor excitador en el cerebro, y al igual que aspartato tiene una fuerte actividad excitadora. Posteriormente Jeffrey Watkins sintetiz y analiz una gran variedad de estructuras anlogas a glutamato y aspartato, entre ellas el nmetil-D-aspartato (NMDA) y al compararlo con otros anlogos como el acido kanico propuso la existencia de mltiples receptores para glutamato, a uno de los cuales denomino receptor de NMDA. Herman Blaschko en 1939 describi la ruta biosinttica de adrenalina y noradrenalina desde el aminocido tirosina, donde la dopamina es un intermediario crtico. En los aos 50 Alvid Carlsson apreci una marcada diferencia en la distribucin regional de dopamina y noradrenalina, tanto en tejido perifrico como central, que le llev a sugerir el papel como neurotransmisor de dicha molcula. Con el desarrollo de los mtodos fluorescentes, Dahlstrom y Fuxe en 1964 delimitaron la localizacin de las neuronas que contienen dopamina; entre ellas se observ que las proyecciones del estriado a la sustancia negra tenan un inters particular porque la prdida de clulas en la sustancia negra es la evidencia principal de la enfermedad de Parkinson. Oleb Hornykiewicz sugiri

en 1973 que la prdida de dopamina desde el estriado puede estar detrs de los efectos extrapiramidales de esta enfermedad y abog por la administracin de L-dopa para prevenirlos. Betty Twarog en 1953 descubri elevadas concentraciones de serotonina en el cerebro -inicialmente aislada en las plaquetas-, y un ao despus, Amin, Crawford y Gaddum observaron que estaba especialmente concentrada en el sistema lmbico y en el hipotlamo. Su papel funcional no empez a esclarecerse hasta los aos 80. Desde la descripcin del primer neuropptido, la sustancia P, por von Euler y Gaddum en 1931, se descubrieron otros muchos. Todos ellos cumplen unas caractersticas comunes: en sus sitios de liberacin estn siempre asociadas a un neurotransmisor convencional, su accin es lenta y persistentes y sus receptores son pptidos de siete dominios transmembrana acoplados a protenas G cuya accin intracelular esta mediada por segundos mensajero. En 1970 ya era evidente que la mayora de los neurotransmisores no slo activaban receptores ionotrpicos o acoplados a canales inicos para dar una respuesta rpida sino que tambin pueden interaccionar con receptores metabotrpicos con siete dominios transmembrana, acoplados a protenas G, que producen una respuesta lenta y persistente. En definitiva, podemos comprobar cmo el llegar a los conocimientos actuales en el campo de los neurotransmisores y la transmisin sinptica, de incuestionable aplicabilidad en neuropsicofarmacologa, ha sido un largo camino, plagado de un gran esfuerzo desarrollado durante muchos aos por innumerables grupos de investigacin para llegar a una meta comn, probar la naturaleza qumica de la transmisin sinptica.

Jos del Castillo

Ricardo Miledi

- 56 -

volumen

1|

mArzo

2008

ActuAlidAd en FArmAcologA y terAputicA

You might also like