MANUAL DE PARASITOLOGIA DEL LABORATORIO CLINICO Departamento: Parasitologia. ELABORO. REVISO T.L.Q Veronica Meneses Baltazar Q.F.

B Perla Albarrn Orta Fecha de aprobacin: Fecha de revisin: Cdigo: PA 010 Hoja: 1 de 30 AUTORIZO Q.F.B Perla Albarrn Orta Reviso No. 0 (NUEVO)

INDICE Introduccin...................................................................................... Parasitismo........................................................................................ Coproparasitoscopico Seriado.......................................................... Coprolgico Funcional..................................................................... Caractersticas Organolepticas Macroscpicas................................. Examen Macroscpico...................................................................... Examen Microscpico (Citologa de Moco Fecal)........................... Examen Qumico.............................................................................. Amiba en Fresco............................................................................... DIAGRAMAS. Diagrama de Coproparasitoscipoco Seriado. Diagrama de Coprolgico Funcional Diagrama de Amiba en Fresco 0 (NUEVO) No. de Revisin Q,F.B. PERLA A. ALBARRAN ORTA Nombre del Registrador

PGINA.

Fecha de emisin.

ESTA INFORMACION ES CONFIDENCIAL Y PARA USO EXCLUSIVO DE DIAGNOSTICO INTEGRAL.

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INTRODUCCION. El parasitismo es una modalidad de asociacin que ha evolucionado con bastante xito; los organismos que han optado por esta forma de vida tienen, en general un potencial bitico mayor. Incluso su argumenta que existen ms parsitos, como especies y como individuos, en relacin a seres de vida libre, ya que son raros los ltimos que no albergan una o ms especies de parsitos. La prevaleca de las parasitosis est estrechamente vinculada a diferenciales climticos, fenmenos demogrficos y al desarrollo socioeconmico de las diferentes zonas del planeta. No es de extraar que los protozoos y helmintos patgenos sean parte de la vida cotidiana en los trpicos, sin ser privativos de ellos. PARASITISMO. Para comprender esta asociacin es necesario comprender los factores ecolgicos para relacionarlos con la poblacin de organismos parasitarios, considerndolos como centro de un ecosistema, al que denominaremos microsistema microambiente. Por otro lado, el husped (en medicina, el hombre) es considerado como substrato endobitico en relacin con los parsitos. Existen diversos tipos de parasitismos. Cuando el parsito no penetra en el husped; pero si se alimenta de l, como lo hacen algunos hematfagos, se le conoce como ectoparsito. Un ectoparsito puede serlo en forma intermitente, cuando se acerca al husped para alimentarse y lo abandona, tan solo para volver al mismo y otro husped en su siguiente ingesta; y en cuando lo haga durante todo su ciclo biolgico o en una etapa del mismo, ser permanente (piojos) o temporal (miasis, puliasis). El endoparsito: es el que penetra en el husped. Por el lugar o localizacin en el husped se caracteriza como parsito de intestino o cavidades, o bien parsito tisular, siendo este ltimo intra - o extracelular, segn se encuentre dentro ( virus, Neisseria gonorrhoeae, Histoplasma Capsulatum, Plasmodium vivax, etc ) o fuera de clula (Clostridium perfringens, Entamoeba histolytica). Es parsito obligado cuando no tiene capacidad de vivir fuera de esta condicin, Leishmania donovani. Pagina 2 de 30

El parsito accidental: es aquel que siendo normalmente un organismo de vida libre, se encuentra accidentalmente en un husped, pero puede sobrevivir en estado parasitario. El parsito facultativo: es el que puede tener uno a varios ciclos de vida libre, siempre y cuando se encuentre en un ambiente favorable; como el Strongyloides stercoralis. Los parsitos proceden de organismos de vida libre, en muchos casos conservan an la morfologa semejantes aquellos; aunque se hayan operado cambios importantes acordes con su ecologa actual ( anatmicos, qumicos y fisiolgicos ); comprendiendo as los cambios evolutivos conceptos como: Parsito Monognico: Es aquel que presenta alteraciones en su multiplicacin. Parsito Heterogenico: Es aquel que presenta variantes en su multiplicacin: como tener reproduccin sexual y asexual (Plasmodium, Toxoplasma). Parsito Dignico: Presenta varios estadios de multiplicacin larval (Trematodos). En cuando al nmero de huspedes el parsito puede ser monoxeno o heteroxeno, segn parasiten uno o varios huspedes (dos ms), respectivamente. Parsito estenoxeno: Es aquel cuya selectividad de husped es tan marcada que en muchos ejemplos, ste no tolera o acepta ms que una especie, sin la cul el parsito desaparecera (especies humanas de Plasmodium). Parsito Eurgeno: Cuya selectividad es tan amplia, es el que puede adaptarse y sobrevivir en una gama muy extensa de especies de huspedes como Trichinella spiralis. En algunos parsitos, la especificidad del husped les obliga a no aceptar cualquier especie, ya que stos no tienen la capacidad para establecerse en un husped extrao, sea que fallen los factores de ataque o sobren los de defensa del husped. Otros en cambio no discriminan al husped, pues son capaces de vencer cualquier barrera que las distintas especies de husped les antepongan. Pagina 3 de 30

Los parsitos tambin pueden tener especificidad de tejidos y no gustar ms que de un rgano especifico; aunque aceptan cualquier cosa, y lo mismo es un rgano que otro; por esta razn se localizan slo en una o en cualquier regin del husped. En cuando a los huspedes, estos pueden ser definitivos, intermediarios especifico, inespecfico (accidental o tangencial) y espurio. Un husped definitivo es aquel que alberga al parsito madura y le facilita la reproduccin sexual. El hombre es husped definitivo de Taenia saginata , el husped intermediario, por el contrario, es aquel que alberga las formas maduras de un parsito y facilita la reproduccin asexual cuando sta la tiene ( l hombre para Plasmodium ). Husped Especfico: Es aquel que rene las condiciones ptimas para el desarrollo y establecimiento de un parsito. Husped Inespecfico: Es aquel que aunque no rene las condiciones ptimas para un parsito, si le permite sobrevivir al menos temporalmente o todo un ciclo biolgico. Husped Espurio: Por no ser adecuado, resulta ser un husped falso, que tan solo permite la entrada del mismo, pero el invasor est destinado a morir dentro del husped. Cuando la relacin husped parsito presenta variantes, debe considerarse a la poblacin de parsitos como un deme. Un deme es una poblacin natural dentro de las especies de un parsito; existen distintos tipos de deme como: Nosodeme: Hay variantes clnicas en las manifestaciones patolgicas provocadas por una misma especie; estas variante patolgicas pueden presentarse segn la distribucin geogrfica; por ejemplo el Kala Azar, presenta variantes clnicas entre los tipos hindes, mediterrneos, sudans, chinos y americanos; as pues , se puede decir que Leishmania donaban (protozoo causante de la enfermedad ) tienen cinco nosodemes. Los Serodemes; Son variantes inmunolgicas (sexolgicas) que pueden tener una especie de parsito. Actualmente son muy importantes para la clasificacin de las especies de Leishmania. Pagina 4 de 30

Cuando el parsito se comporta en forma indistinta dentro de las diversas especies de husped que puede parasitar, a esta poblacin la describiremos como xenodeme. Cuando existen diferencias anatmicas, fisiolgicas o sexolgicas de una especie segn su distribucin geogrfica, utilizamos el trmino topodeme. Portador es aquel que tiene una infeccin sin manifestaciones clnicas, ya sea porque sta sea ligera o como resultante de la inmunidad por exposiciones previas, pero l es incapaz de eliminar al parsito. El portador por lo tanto sirve de fuente de infeccin.

NOMBRE: COPROPARASITOSCOPICO SERIADO. FUNDAMENTO. Las enfermedades parasitarias contribuyen de forma importante a los problemas mdicos, econmicos y sociales existentes en el mundo. El diagnostico de las enfermedades parasitarias se establecen de ordinario por la demostracin morfolgica de los parsitos o la respuesta inmune a ellos. El diagnostico correcto requiere que: a) El mdico considere que un parsito puede ser la causa de la enfermedad. b) Se obtengan las muestras adecuadas y se transporten de modo correcto al laboratorio. c) El laboratorio examine de modo competente los especimenes. d) Los resultados del laboratorio sean debidamente comunicados al medico. e) Estos resultados sean interpretados de forma correcta y aplicados al cuidado del paciente. Es importante tener un conocimiento bsico del ciclo natural de la enfermedad para fijar el enfloque diagnstico. Los parsitos pueden causar enfermedad clnica cuando sus formas diagnosticas todava no estn presentes en el sitio usual. Pagina 5 de 30

El ciclo vital de los parsitos puede ser simple, como en la ameba y las lombrices, o complejo, como en la mamalaria y la esquistosomiasis. Si existen distintos huspedes, el husped definitivo alberga la etapa sexual del ciclo vital, y los huspedes intermediarios los estadios asexuados. Un husped reservorio es el que es distinto al hombre que puede ser parasitado por los mismos estadios del parsito que el hombre y sirve con ello de fuente de infeccin. El hombre constituye el husped accidental de algunos animales. La transmisin de las enfermedades parasitarias est influida con frecuencia por las costumbres sanitarias, de vivienda diettica , culinaria y social. Adems factores geogrficos, como lagos y ros, clima y altitud, pueden desempear un papel importante. Los esfuerzos de control estn dirigidos a romper el ciclo vital en uno o distintos puntos, por ejemplo, eliminando un husped, destruyendo el reservorio de infeccin, asegurando el suministro de agua depurada o desarrollando medios sanitorios de eliminacin de las heces. PREPARACIN. El paciente debe llevar al laboratorio tres muestras de heces fecales (excremento) de tres das alternados, por ejemplo Lunes, Mircoles y Viernes; no es necesario que el paciente se encuentre en ayuno, sino cuando el acostumbre a tenga ganas de obrar. La muestra debe llevarla al laboratorio de preferencia una diaria en caso de que el paciente no pueda o viva lejos se le pedir que mantenga las muestras en refrigeracin hasta las tres muestras y las lleve al laboratorio. Se le pedir al paciente que la cantidad de muestra sea semejante a una canica o una nuez de castilla, y que tome las muestras en frasco de vidrio (nescaf o gerber) de boca ancha y con cierre hermtico. Esto se le proporcionara por el laboratorio, junto con un frasco pequeo que contenga de 5 a 10 ml de formol al 10%. Comentndole al paciente que en el momento que obtenga la muestra le coloque el lquido del frasco pequeo y cierre bien el frasco de vidrio. Pagina 6 de 30

MATERIAL. Almacn: - Vasos de vidrio. Mueble junto a la tarja: - Aplicadores de madera. - Abate lenguas de plstico. - Pipetas pasteur. Cajn No. 5: - Copropack. - Tubos de ensayo Cajn No. 2: - Laminillas. - Cubreobjetos. REACTIVOS. Mueble gris: - Formol al 10%. - Sulfato de Zinc 33%. Cajn No. 2: - Lugol 1:3. Tarja: - Cloro al 2%. EQUIPO. Microscopio. Centrifuga. Pagina 7 de 30

PROCEDIMIENTO. 1.- Las muestras deben de procesarse diario, es decir conforme van llegando al laboratorio, y por separado. En los casos en que el paciente lleve las tres muestras juntas, estas se procesaran inmediatamente y por separado. 2.- Identificar frascos, tubos y lminas con la muestra a examinar. 3.- Agitar bien la muestra y con ayuda de un aplicador de madera suspender completamente las heces. (El formol nos ayuda a fijar las muestras a estudiar). 4.- Tamizar en el copropack con ayuda de un abate lenguas de plstico, colocar el filtrado en un tubo de ensayo. 5.- Centrifugar a 1500 rpm durante 2 min. 6.- Decantar y desecharlo en cloro al 2%. 7.- Agregar Sulfato de Zinc al 33% hasta la tercer parte del tubo de ensayo, agitando con un aplicador de madera. 8.- Centrifugar a 1500 rpm durante 2 min. 9.- Colocar los tubos en una gradilla para que no se muevan. Llenar el tubo con sulfato de Zinc hasta formar un meisco, dejar reposar durante 10 minutos. 10.- Colocar en un portaobjetos una gota de reactiv de lugol 1:3, en cada extremo del portaobjetos. 11.- Con un cubreobjetos tomar la gota del menisco superior. 12.- Colocar el cubreobjetos con la gota del material a estudiar en un extremo del portaobjetos donde se haya colocado la gota del reactivo de lugol 1:3 Pagina 8 de 30

13.- Decantar y desechar en cloro al 2%. 14.- En el fondo quedara el sedimento a estudiar. 15.- Transferir una gota del sedimento con una pipeta pasteur al extremo contrario del portaobjeto donde se haya colocado la otra gota de reactivo de lugol 1:3, cubrir con un cubreobjeto. 16.-Examinar las dos preparaciones completas con objetivo de 10X. Pasar a objetivo de 40X para mayor observacin. 17.- Reportar en el programa de Microsoft Word, en mis documentos, archivo titulado CPS-POS: En caso de que exista la presencia de parsitos. CPS-NEG: Si no existe presencia de parsitos. 18.- Los resultados se registran en la bitcora No. , en la seccin de coproparasitologa. CALIBRACION. Esta aplica para el microscopio y la centrifuga (ver bitcora de equipos). RESULTADOS Y VALORES DE REFERENCIA. La presencia de algunas formas parasitarias, ya sea quiste, huevecillo y/o larvas se considera una muestra positiva. El valor de referencia no existe, sin embargo, no deben existir formas parasitarias en el ser humano. BIBLIOGRAFIA. Atlas Color de Parasitologia Clnica, ZAMAN. Internet Goggle (*).

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BLASTOCYSTIS HOMINIS.

STRONGYLOIDES STERCORALIS.

GIARDIA LAMBLIA

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NOMBRE: COPROLOGICO FUNCIONAL (Diagnostica la etiologa quimiofuncional.) FUNDAMENTO. El examen de las heces es til en la deteccin temprana de hemorragias ocultas, carcinomas, para detectar esteatorreas o problemas de mala absorcin, infecciones bacterianas o parasitarias, infestacin parasitaria, colitis ulcera, ictericia obstructiva y otros padecimientos. El adulto sino defeca por termino medio con una frecuencia variable de dos a tres veces a la semana, siendo la media comn de una vez al da. Las heces tienden a ser blandas y voluminosas cuando se sigue una dieta alta en vegetales, escasa y seca con comidas en que se ingiere mucha carne. Dos tercios del peso de las heces corresponden a su contenido en agua y un tercio se puede atribuir a bacterias, material indigerible, tal como la celulosa, y a clulas de descamacin. PREPARACIN. Se le pide al paciente que lleve al laboratorio una muestra de excremento (debe ser una evacuacin completa), con una dieta mnimo de tres das sin ingerir carnes rojas y sus derivados (chorizos, embutidos, etc.), antes de su estudio. NO COMER: coliflor, pepinos betabel, meln y toronja. La muestra ser recolectada en un frasco de vidrio de boca ancha con cierre hermtico el cul puede ser proporcionado por el laboratorio o bien en un (frasco de nescaf mediano de preferencia). MATERIAL: Mueble gris junto a la tarja. Solucin Salina. Pipetas Pasteur. Pagina 11 de 30

Almacn. Caja petri de vidrio.

Cajn No. 2. Portaobjetos. Cubreobjetos.

Cajn No. 5. Tubos de ensayo.

REACTIVO. En la bandeja verde junto a la tarja. cido actico glacial 1:3. cido actico al 10%. Reactivo de saathoff

Cajn No. 2. Lugol

Puerta No. 4. Tiras reactivas para EGO. Hema Screen.

Mueble gris junto a la tarja. Agua destilada.

EQUIPO. Microscopio.

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PROCEDIMIENTO. Este estudio comprende los siguientes puntos: A) CARACTERES ORGANOLEPTICOS MACROSCOPICOS. 1.- Cantidad: Debe ser una evaluacin completa. La cantidad varia con la alimentacin, la dieta en carnes, quesos, leche, arroz, papas fritas y pan blanco, produce menor cantidad que la dieta vegetariana, adems la cantidad depende del grado de integridad funcional digestiva. 2.- Consistencia: Por lo normal son moldeadas y blandas. Pero existen: a). Acuosas (como agua). b). Blandas (diarrea). c). Pastosa (fibrosa) d). Dura (estreimiento). 3.- Forma: Si la consistencia es normal las heces semejan a un cilindro que se repliega sobre si mismo conservando su forma. La superficie presenta depresiones y relieves, ejemplos de algunas formas:

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4.- Color: La coloracin parda habitual se deben a urobilina y estercobilina, el color es segn la alimentacin: a). Lactantes (amarillo canario). b). Carnvoros. (Castao oscuro caf). c). Vegetarianos. (Verdoso). d). Pan o papas. (Amarillentas). e). Blanco grisceo. (Cenizas), ictericias obstructivas, hepatitis, ingestin de barrio (peptobismol). f). Amarillentas con matices esteatorrea, (diarrea de fermentacin, insuficiencia pancretica) 5.- Olor. Tiene un olor en particular debido a ciertos productos aromticos originados en el intestino por la accin de microorganismos de fermentacin o de putrefaccin que actan sobre hidratos de carbono y protenas. B). EXAMEN MACROSCOPICO. Se efecta una dilucin de las heces fecales con solucin fisiolgica (solucin salina) en una caja petri. Se les observa colocando el recipiente de vidrio sobre un fondo blanco o negro de esta forma se apreciaran los restos alimenticios de carne, fcula o tejido conjuntivo que a veces se confunde con moco, para distinguir entre tejido conjuntivo y moco se agregan unas gotas de cido actico glacial 1:3, y se observa al microscopio, colocando en un portaobjetos con una pipeta de pasteur una gota de la dilucin y cubriendo con un cubreobjetos; el tejido conjuntivo se aclara, mientras que el moco se hace ms compacto. CARACTERISTICAS DEL MOCO: La presencia de este indica irritacin o inflamacin del intestino principalmente el colon. Mezclado con las heces, aspecto brillante procede del intestino delgado. Moco visible proviene del colon. Transparente: como catarro alrgico (colon irritable), estrs. Opaco con clulas epiteliales: proceso inflamatorio agudo. Moc sanguinolento: neoplasma, amebas o bactrias. Moc sanguinolento y pus: colitis ulcerosa, carcinoma, desinteria basilar, diverticulitis aguda o tubrculos intestinales.

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Los restos de fcula se aprecian de color violceo cuando se agregan unas gotas de lugol, las grasas se identifican con facilidad en la prueba de dilucin porque forma una capa oleosa en la superficie. C).EXAMEN MICROSCOPICO (CITOLOGIA DE MOCO FECAL). Se efecta una dilucin de las heces fecales con solucin fisiolgica (solucin salina) en una caja petri. 1.- Fibras musculares: Se practica colocando entre portaobjetos y cubreobjetos una gota de dilucin fecal con ayuda de una pipeta pasteur y una gota de lugol. La observacin macroscpica revela la presencia de fibras musculares con diversos grados de digestin (se presentan en forma de cilindros con estras longitudinales y transversales de color amarillo o anaranjado). Fibras vegetales: Se caracterizan por ser de doble pared, contienen clorofila y poseen un canal central muy marcado (se observan como resortes o espirales). 2.- Parsitos: Se recomienda la observacin microscpica de una gota de suspensin de excremento en solucin salina, colocada entre portaobjetos y cubreobjetos. 3.- Clulas: Se prctica colocando una gota de dilucin fecal entre portaobjetos y cubreobjetos, se reporta la presencia de clulas epiteliales en cruces las cuales indican irritacin. 4.- Leucocitos: Se observan agregando una gota de cido actico al 10% (o lquido de turk), mas una gota de materia fecal, se realiza una suspensin en un tubo de ensaye. Su presencia indica infeccin bacteriana. Si hay ms de 10 leucocitos por campo debe realizarse una diferencial de la muestra fecal por medio de la tcnica de Wrigth (ver manual de Hematologa ), y se debe diferenciar entre Polimorfonucleares (PMN) y Mononucleares (MN). Mayor cantidad de PMN la infeccin es causada por bacterias, mayor cantidad de MN la infeccin es viral. Tambin se reportan los eritrocitos. Pagina 15 de 30

INTERPRETACIN. En condiciones normales, las heces no suelen contener clulas epiteliales, ni leucocitos, ni eritrocitos. Es fcil apreciar la presencia de leucocitos. En la deposicin mucosa de los que sufren alergia intestinal se observa un exceso de eosinfilos. La presencia de clulas epiteliales es un indicador de irritacin gastrointestinal. La presencia de clulas epiteliales, eritrocitos y bacterias se reporta en cruces de la siguiente manera: ABUNDANTES (+++) MODERADAS (++) ESCASAS (+) La presencia de leucocitos se encuentra asociada con moco y se observa en diferentes enfermedades intestinales. Se observa un predominio de PMN en amibiasis aguda, shigelosis, colitis, tambin se observan macrfagos y MN con gran predominio en fiebre tifoidea. Los PMN y MN se reportan contando en total 100 clulas. 5.- Cristales: Se realiza colocando una gota de dilucin fecal entre portaobjeto y cubreobjetos, agregando una gota de lugol. Cristales de Oxalato de Calcio: Normal y aumentada su presencia en insuficiencia gstrica. Cristales de Colesterol: Clculos vesiculares. Cristales de Hamatoidina: Agujas amarillas, se presentan en grupos, aparecen despus de hemorragias. Cristales de Charcot Leyden: Presentes en amibiasis, diarreas por Isospora belli, son cristales octadricos alargados, producidos por la degradacin de eosinfilos.}

D). EXAMEN QUMICO. 1.- pH: La apreciacin de la reaccin de las heces se hace con papeles indicadores de pH. El valor normal es de 6.9 a 7.2, no es valida la determinacin si el paciente est en tratamiento con antibiticos orales. El pH de las heces es un dato orientador sobretodo en diarreas infantiles, cuando es cido es de origen bacteriano. Pagina 16 de 30

2.- Grasas: Se realiza una dilucin de la muestra fecal con solucin salina, se toma 1.0 ml. Ms una gota de reactivo de Saathoff en un tubo de ensayo, se agita y se coloca una gota de la suspensin entre portaobjeto y cubreobjeto y se lee al microscopio, se observan gotas rojas, de 2 a 3 por campo son de grasas neutras y es normal. Ms de 3 gotas por campo son patolgicas. Lo cul puede deberse a: Transito acelerado, deficiencia enzimtica en absorcin. PREPARACIN DEL REACTIVO DE SAATHOFF. 1. Sudan III 2 gramos 2. Alcohol 96 10 ml. 3. cido actico glacial 90 ml. NOTA: Los reactivos para preparar el reactivo se Saathoff se encuentran en el almacn. 3.-Azcares reductores: Se realiza una dilucin del excremento 1:2 con agua destilada y mezclar. Transferir 15 gotas de esta suspensin a un tubo de ensayo y adicionar tableta de Clinitest, las cuales reaccionan con una cantidad suficiente de cualquier sustancia reductora de las heces como glucosa, lactosa, sacarosa, maltosa, etc. La interpretacin de los resultados es la siguiente: Se considera normal la presencia de 0.25gr/100 ml o menos de sustancia reductora; de 0.25 a 0.5 gr/100ml se considera sospechoso, por encima de 0.5gr/100ml se interpreta como indicativo de cantidades anormales de azcar. NOTA: Las heces de los nios con intolerancia a los azucares son generalmente acuosas, y quienes tienen intolerancia a la lactosa, son generalmente cidas. 4. Sangre Oculta: Se debe someter al paciente a una alimentacin constituida por leche, smola, fideo y huevo. La prueba se realiza empleando el equipo de Heema Screen, es una prueba en placa para la deteccin cualitativa de sangre oculta. El Hema Screen est compuesto de un papel impregnado de guaiaco encerrado en una tarjeta, con lo que se permite la aplicacin de la muestra en un lado y el desarrollo e interpretacin al reverso.

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El Hema Screen, est basado en la oxidacin de los compuestos fenoliticos presentes en el guanaco con la produccin de compuestos quinonas de color azul. Debido a su similitud con los grupos proteicos de la peroxidasa, la porcin hematina de la molcula de hemoglobina puede funcionar en una manera pseudoenzimtica, catalizando la oxidacin del guaiaco. NOTA: La reaccin de color ocurrir despus de 30 segundos. El Hema Sceen incluye un lado para el monitoreo, el cul proporciona un sistema de control de calidad para cada prueba. PROCEDIMIENTO. 1. Abra la tapa frontal, utilizando un extremo del aplicador, colecte una pequea cantidad de muestra. Aplique una capa muy delgada en la ventana 1. 2. Utilice el otro extremo del aplicador para obtener una segunda muestra a partir de una porcin diferente de la muestra de heces. Aplicar una capa muy delgada en la ventana 2. 3. Permitir que las muestras se sequen al aire, despus cierre la cubierta. 4. Habr la ventana perforada en la parte trasera de la placa. 5. Aplicar dos gotas de revelador Hema Screen en la parte trasera de las ventanas 1 y 2. 6. lea el resultado despus de 30 segundos y antes de 2 minutos. 7. Registre los resultados cualquier traza de color azul, dentro o fuera del margen de la muestra, indica un resultado positivo para sangre oculta. POSITIVO: INDICA UN COLOR AZL. NEGATIVO. UN COLOR INCOLORO FUENTES DE ERROR. Falsos positivos: la peroxida de frutas y vegetales crudos. Falsos negativos: la ingestin de ac. Ascrbico (Vit. C) en altas dosis.

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NOTA: Los medicamentos orales (como aspirina. Indometacina, reserpina, fenilbutazona, corticosteroides), y el consulmo fuerte de alcohol puede causar irritacin o sangrado del tracto intestinal y deben ser descontinuados por siete das antes y durante el periodo de la prueba. CALIBRACIN. Esta aplica para el microscopio y la centrifuga (ver bitcora de equipos). RESULTADOS Y VALORES DE REFERENCIA. Todos los parmetros del estudio de Coprolgico funcional se reportan en cruces siempre y cuando sea positivo, de acuerdo a la siguiente tabla y criterio del analista. CRITERIO ABUNDANTE MODERADO ESCASO CRUCES 4 3a2 1

Los resultados se reportan en el programa Microsoft Word en mis documentos archivo titulado coprolog. Los resultados se registran en la bitcora No. , en la seccin de Coproparasitologia. VALORES DE REFERENCIA. No aplica. BIBLIOGRAFIA. - IOVINE E. ATILIO SELVA A. El laboratorio en la Clnica Metodologa Analtica, Fisiologa e Interpretacin Semiolgica.3 Edicin. Ed. Panamericana. Cap. 13

- TODO-SANFORD. Diagnostico Clnico por Laboratorio, 6 Edicin, Ed Salvat. Cap 17. Pagina 19 de 30

- KOLMER J. A. BOERNER Ed. Interamericana S.A.

F.

Mtodos

de

Laboratorio

Clnico

CRYPTOSPORIDIUM PARVUM

CYCLOSPORA CAYETANENSIS

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TAENIA SAGINATA

TRICHURIS TRICHUIRA.

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ISOSPORA BELLI

NOMBRE: AMIBA EN FRESCO. FUNDAMENTO. El diagnostico de la amebiasis se realiza demostrando la presencia de trofozoitis o quistes de Entamoeba Histolytica . Los quistes resisten condiciones adversas (pero no la ebullicin). Son las formas infectantes para el hombre porque aguantan la acidez gstrica. Esta acidez los rompe y dan origen a trofozoitos. Llegan a la luz del colon e invaden la pared. Se reproducen por divisin binaria. Salen con las materias fecales en forma de quiste inmaduros (1 ncleo) o maduros (4 ncleos), pasando previamente por prequiste. AMEBIASIS. Se denomina as a la infeccin por Entamoeba Histolytica, se le distingue de las otras amebas por: cariosoma central y cromatina en grnulos uniformes y regulares. Parsito cosmopolita: Los mejores transmisores son las personas asistomaticas que eliminan el parsito en sus materias fecales. Esta forma de amebiasis es la ms frecuente La diseminacin se produce por:

a). Manipulaciones de alimentos comos servicio domstico o cocineros de restaurantes. b). Mala alimentacin de excretas, regados de hortalizas de aguas contaminadas, moscas y cucarachas. Pagina 22 de 30

PATOGENIA. Depende de: - Que la cepa sea patgena. - Las sustancias txicas que libera: enzimas y citotxicas. - Asociacin bacteriana, sin la cul tal vez sea imposible la invasin. - Estado inmunolgico del husped. - Factores nutricionales: la abundancia de hierro facilita la invasin. PATOLOGIA. Los trofozoitos invaden mucosa del colon. Se multiplican llegando a la submucosa. Destruyen tejidos en forma horizontal y se sobre infecta con bacterias provocando microabscesos. Puede haber perforacin y vuelco del contenido colonico a la cavidad peritoneal con produccin de peritonitis sptica y qumica. Es la causa ms comn de muerte.

CLINICA. Amebiasis asintomtica: No invasiva, el examen coprolgico revela quistes y es la forma de mayor importancia epidemiolgica. Amebiasis intestinal invasiva aguda: Hay gran cantidad de evacuaciones, gran pujo, tenesmo, cada vez se elimina menos materia fecal hasta ser solo moco sanguinolento (esputo rectal), sin fiebre y puede complicarse, pasar a la cronicidad o curarse. En caso de amebiasis intestinal aguda, se debern buscar a los trofozoitos en una serie al menos de tres muestras sucesivas de materia fecal mediante examen directo, las muestras sern obtenidas de evacuaciones recientemente emitidas ( frescas), sin ser sometidas a cambios bruscos de temperatura, por que es posible que se licen los trofozoitos y no se observe nada.

Amebiasis intestinal invasiva crnica: Colitis sin desinteria, dolor abdominal, diarrea, moco, pujo y tenesmo. Pagina 23 de 30

Colitis amebiana fulminante: Fiebre alta, hemorragia masiva, sensibilidad abdominal, se trata con colectoma y tratamiento quimioterpico intenso.

DIAGNOSTICO DIFERENCIAL. 50% de las diarreas son por Rotavirus y Escherichia coli. 25 % por Salmonella, Shigella, Vibrio y Campilobacter. 25 % por Entamoeba, Giardia, Balantidium, Schistosoma y trichuris. A esta hay que diferenciarla fundamentalmente de la desinteria bacteriana o Shigelosis: Que casi siempre presenta fiebre, piocitos en materia fecal y coprocultivo que confirma el diagnostico. TRATAMIENTO. Amebicidad orales de accin luminar: para formas crnicas (Diyodohidroxiquinolona). Amebicidas de accin tisular: efectivos para las (Metronidazol, Tindazol). asintomaticas, agudas, formas invasivas

PREPARACIN. Este estudio se realiza en nios menores de 1 ao, por las condiciones de la toma de la muestra. El paciente debe presentarse al laboratorio. No es necesario que el paciente se encuentre en ayuno. El paciente debe de evitar purgantes

MATERIAL. Mueble beige del cubilo de toma de muestra. - Hisopos de algodn estriles. Cajn No. 5 - Tubos de ensayo. Cajn No. 2 - Portaobjetos.

Cubreobjetos. Pagina 24 de 30

REACTIVOS. Mueble gris junto a la tarja - Solucin de formol al 10% Puerta 2 compartimiento A. - Colorante de azul de metileno. EQUIPO. Microscopio.

PROCEDIMIENTO. 1. La muestra se toma directamente del recto del paciente por medio de rotacin delicada, para lo cul se emplea un hisopo estril de algodn delgado, o una cucharilla rectal introduciendo unos cinco centmetros en el recto del lactante esto se debe realizar solamente una vez, es decir no se debe de estar metiendo y sacando el hisopo. 2. El hisopo se coloca en un tubo de ensayo con 2 o 3 ml, de solucin salina estril a 37C. 3. Posteriormente se coloca un poco en el portaobjetos, se coloca el cubreobjetos y se observa de inmediato al microscopio. 4. Lo que se busca es la presencia de trofozoitos de E. histolytica estos son mviles, la identificacin se realiza diferenciando a los trofozoitos de los macrfagos, los trofozoitos presentan pseudpodos hilinos, son ms grandes que los macrfagos. 5. Tambin se puede utilizar formol al 10%, se introduce el hisopo en el tubo y observar al microscopio agregando una gota de azul de metileno, los trofozoitos se tien de color azul. 6. Reportar en el programa de Microsoft Word, en mis documentos archivo titulado AMIBA. 7. Los resultados obtenidos se registran en la bitcora No. en la seccin de coproparasitologia. CALIBRACIN. Esta aplica para el microscopio (ver bitcora de equipos).

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RESULTADOS. Presencia de trofozoitos y/o quiste se reporta la muestra como POSITIVA. Ausencia de trofozoitos y/o quiste se reporta como NEGATIVA.

VALOR DE REFERENCIA. No aplica. BIBLIOGRAFIA. Internet Goggle. ENTAMOEBA HISTOLYTICA. TROFOZOITO TROFOZOITO

PREQUISTE

QUISTE

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DIAGRAMA No: 1 COPROPARASITOCOPICO SERIADO Se requiere que el paciente colecte tres muestras de excremento del tamao de una canica de das alternos

Llevar las muestras al laboratorio, en caso de llevarlas todas juntas es necesario refrigerarlas

Procesar las muestras por separado.

Identificar frascos y laminillas.

Transferir 1 2 gr. de heces a un vaso de plstico y agregar 10 ml. De formol al 10 %

Suspender las heces y fijar mnimo 30 minutos.

Tamizar en el cocropack y colocar en un tubo de ensayo.

Centrifugar a 1500 rpm. durante dos minutos , decantar

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Agregar sulfato de zinc al sedimento a la mitad del tubo y centrifugar a 1500 rpm. durante dos minutos

Llenar el tubo con sulfato de zinc y dejar reposar por 10 minutos.

Colocar en una laminilla una gota de lugol y con un cubreobjetos tomar una gota del menisco suprior.

Decantar y del sedimento tomar una gota y agregarle una gota de lugol y colocar un cubreobjetos.

Observar las dos preparaciones en el objetivo 10x y reportar en CPS- POS o CPS -NEG

Registrar los resultados en la bitcora 1 en la seccin de coproparasitologa.

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DIAGRAMA No. 2 COPROLGICO FUNCIONAL

Llevar una muestra de excremento debe de ser una evacuacin completa y no haber ingerido carnes rojas y de vitamina C o cido acetil como mnimo tres das antes de tomar la muestra, cuidando que no haya contaminacin con las heces.

Realizar estudio macroscopico: cantidad, consistencia, forma, color restos alimenticios, fcula, tejido conjuntivo, moco. Diluir las heces en solucin salina en una caja Petri.

Realizar estudio microscpico: fibras musculares, vegetales, grasas, clulas epiteliales, leucocitos, azucares reductores, sangre oculta en heces, pH.

Reportar resultados en Coprologico y registrar los resultados en la bitcora No.1

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DIAGRAMA No. 3 AMIBA EN FRESCO

Este estudio es para nios generalmente, se toma la muestra del recto por rotacin delicada con un hisopo estril o una cucharilla rectal slo una vez.

Colocar el hisopo en un tubo de ensayo con 2 o 3 ml. Solucin salina.

Colocar el hisopo en un tubo de ensayo con 2 o 3 ml de formol al10%

Rotar el hisopo en una laminilla y observar al microscopio

Colocar una gota del tubo, y una gota de azul de metileno en un portaobjetos y observar al microscopio Buscar la presencia de trofozoitos los cuales se tien de color azul

Buscar la presencia de trofozoitos los cuales son mviles.

Reportar en el programa AMIBA y registrar los resultados en la bitcora No. 1

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