UTILIZAO DE PLASMA RICO EM PLAQUETAS (PRP) NO TRATAMENTO DE TENDINITE EM EQUINOS

MEIRELLES, Marcela Gonalves1; PAGANELA, Julio Csar1; DOS SANTOS, Carlos Anselmo1; AMARAL, Lorena Alvariza2; NOGUEIRA, Carlos Eduardo Wayne3.
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Acadmico (a) do curso de Medicina Veterinria da Universidade Federal de Pelotas - UFPel; Mestranda pelo Programa de Ps-graduao em Veterinria - FV - UFPel; 3Professor Adjunto da Faculdade de Medicina Veterinria UFPel. marcela_meirelles1@yahoo.com.br

1. INTRODUO Com a intensificao da utilizao de equinos para diferentes atividades, principalmente s ligadas a rea esportiva, ocorreu um aumento nas afeces que acometem a espcie, particularmente do aparelho locomotor. As leses musculoesquelticas em equinos tem uma relao importante no comprometimento e limitao do desempenho atltico. A tendinite apresenta uma alta incidncia em cavalos atletas e responsvel por prejuzos econmicos decorrentes dos gastos com tratamentos, suspenso do treinamento e competies por longos perodos, e em alguns casos, incapacidade de retornar atividade fsica (MAIA, 2008). O principal desafio no tratamento das tendinites est relacionado ao perodo necessrio para a reparao tecidual, que associado aos mtodos teraputicos tradicionais, pode levar meses ou anos para completa cicatrizao da leso, alm do alto ndice de recidivas. Tem sido proposto a utilizao do plasma rico em plaquetas (PRP) na reparao de afeces tendo-ligamentosas em equinos. O PRP uma fonte de fcil aquisio e baixo custo, atua na reparao tecidual, devido a presena de diversos fatores de crescimento presentes nos grnulos plaquetrios (MAIA & SOUZA, 2009). O objetivo deste trabalho avaliar a utilizao do PRP ativado no tratamento de tendinite aguda e crnica no tendo do msculo flexor digital profundo (TFDP) e tendo do msculo flexor digital superficial (TFDS) em equinos, mediante avaliao clnica e ultrassonogrfica.

2. METODOLOGIA O estudo foi realizado em cinco equinos machos, da raa PSI, entre 4 e 6 anos de idade. Foi conduzido exame clnico geral e especfico do aparelho locomotor e com auxlio da avaliao ultrassonogrfica diagnosticou-se tendinite aguda e crnica do TFDS e TFDP, com diferentes graus de leso entre os casos, conforme descrito nas tabelas 1 e 2. Aps o diagnstico da leso foi institudo terapia intra - lesional com PRP guiada por ultrasson. Para o preparo do PRP foi coletado 80 mL de sangue autlogo em tubos vaccutainer contendo citrato de sdio a 3,8% e avaliado a concentrao plaquetria. A amostra foi centrifugada primeiramente a 1200rpm durante 5min. Aps, foi eliminado dois teros da frao superior do plasma e aspirou-se a linha leucocitria. Foi feita uma segunda centrifugao a 1200rpm

por 5min, e novamente aspirada a linha leucocitria. Foi realizada a avaliao da concentrao de plaquetas no plasma. Para a ativao do PRP, foi adicionado gluconato de clcio a 10% na proporo de 5% em relao ao PRP, no momento da aplicao. A avaliao clnica e ultrassonogrfica das leses foram realizadas semanalmente durante 3 meses, para acompanhamento da resoluo do processo inflamatrio e cicatrizao tendnea.
Tabela 1: Exame clnico especfico do sistema locomotor Equino I II III IV V Membro acometido MAD MAE MAD MAE e MAD MAE Carter agudo crnico agudo agudo agudo Grau de Claudicao Sensibilidade IV II II III II presente ausente presente presente presente Calor presente ausente presente presente presente Edema presente ausente presente presente presente

MAE: membro anterior esquerdo, MAD: membro anterior direito.

Tabela 2: Avaliao ultrassonogrfica dos equinos com tendinite Equino I II III IV V Estrutura TFDS TFDP TFDS TFDP e TFDS TFDS Regio* 3A 3A 2A 2B a 3A 2B a 3A Percentual de rea lesada 90% 25% 30% 25% 55% Tipo de leso difusa focal focal focal focal

* SMITH et al. (1994). TFDS: tendo flexor digital superficial, TFDP: tendo flexor digital

3. RESULTADOS E DISCUSSO A concentrao plaquetria obtida no PRP variou de 290.000 a 375.000 plaquetas/mL entre os animais. O PRP derivado do sangue total, contendo entre trs a cinco vezes mais plaquetas que os nveis fisiolgicos. Segundo ANITUA et al. (2004), concentraes superiores a 300.000 plaquetas/ mL so suficientes para o preparo do PRP. SCHNABEL et al. (2007), em estudo in vitro com fragmentos do TFDS de equinos, demonstraram eficincia do PRP em concentrao mdia de 395.000 plaquetas/ mL. Em todos os casos foi realizada somente uma aplicao de PRP, conforme relatado em estudo realizado por ARGUELES et al.(2008), no qual foi utilizado apenas uma aplicao de PRP nas leses tendneas induzidas, sendo esta suficiente para o processo de reparao. Normalmente as plaquetas esto no estado inativo (EVERTS et al., 2006). De acordo com CARMONA et al. (2007), a ativao das plaquetas pode ser realizada por agentes fisiolgicos (trombina, tromboxano, fator ativador de

plaquetas, ADP, colgeno, seretonina e epinefrina) e farmacolgicos, como o cloreto de clcio e os anlogos de endoperxido cclico. Nesse estudo foi utilizado o gluconato de clcio na proporo de 5%, para a ativao plaquetria. Acredita-se que esse agonista desencadeia seus efeitos por meio da interao com receptores localizados na membrana plasmtica das plaquetas (BLOCKMANS et al., 1995). MAIA (2008), ressalta que a ativao das plaquetas deve ser realizada prximo ao momento da aplicao teraputica, de forma a assegurar uma adequada concentrao dos fatores de crescimento na leso. Aps duas semanas da aplicao intra - lesional de PRP, houve reduo da claudicao, do edema, da sensibilidade e do calor local. Esses fatores indicam diminuio do processo inflamatrio e doloroso, conforme relatado por MAIA (2008), em um estudo onde induziu experimentalmente tendinite do TFDS em seis equinos, e aps a administrao teraputica de PRP observou menor intensidade de variveis clnicas, como edema e dor palpao, e portanto, maior conforto e bem estar para o animal durante o perodo de recuperao da tendinite. Na avaliao ultrassonogrfica dos equinos III e IV observou-se aps trs semanas da aplicao de PRP, melhora da ecogenicidade e paralelismo das fibras tendneas. Nos animais I e V, que apresentavam maior grau de ruptura do TFDS, aps cinco semanas decorrentes do tratamento, as leses apresentavam-se mais ecognicas e com paralelismo de fibras colgenas. No entanto, no equino II, apesar de apresentar menor intensidade nas variveis clnicas (edema, sensibilidade palpao e calor ausentes), bem como menor percentual de ruptura (25% de rea lesada) em relao aos casos I e V, observou-se maior perodo para incio da reparao da estrutura tendnea, em torno da stima semana ps tratamento. Sugerimos que esta cicatrizao tardia ocorreu por se tratar de uma leso crnica. Aps quatro semanas todos eqinos iniciaram exerccio fsico gradativo e controlado, com objetivo de melhorar a condio fsica pr-treinamento, alm de auxiliar na reparao tendnea. Resultados semelhantes ao nosso estudo foram descritos por ARGUELLES et al. (2005), onde observaram aps tratamento com aplicao intralesional de PRP, reduo na severidade da claudicao e melhora na imagem ultrassonogrfica das estruturas envolvidas em sete eqinos acometidos de tendinite ou desmite. Alguns animais retornaram as atividades fsicas aps dois meses de tratamento. De acordo com DINATO et al. (2001) e EVERTS et al., (2006), o PRP atua na modulao e acelerao dos processos cicatriciais, sendo esses efeitos decorrentes dos fatores de crescimento contidos nos alfa grnulos plaquetrios. Dentre estes fatores, destacam-se o fator de crescimento de transformao beta (TGF-), fator de crescimento epidermal (EGF), fator de crescimento vascular endotelial (VEGF), fator de crescimento semelhante a insulina (IGF-I) e citocinas, que agem sinergicamente, estimulando a angiognese, melhorando o acesso de clulas inflamatrias para a rea de leso, assim modulando a resposta inflamatria e reparao tecidual. Os fatores de crescimento tambm tem sido avaliados quanto sua capacidade em melhorar a mitognese e sntese de matriz extracelular, como colgeno do tipo I e III, que so importantes em todas as fases de cicatrizao tendnea. Em adio a seus efeitos anablicos, os fatores de crescimento

promovem o down regulate de catablicos degradando citocinas como as interleucinas e metaloproteinases (FORTIER, 2009). CONCLUSES A utilizao de PRP no tratamento de tendinite aguda e crnica do TFDS e TFDP demonstrou melhora clnica e ultrassonogrfica na reparao tendnea de equinos. REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS ARGUELLES, D. et al. Clinical experiences with platelet-rich plasma as a treatment of tendon and ligament injuries in the horse. In: ANNUAL SCIENTIFIC MEETING, 16., 2005, Dublin, Ireland. Proceedings... Dublin: European College of Veterinary Surgeons, p.217-222, 2005. ARGUELLES, D. et al. Autologous platelet concentrates as a treatment for musculoskeletal lesions in five horses. Veterinary Record, London, v.162, n.7, p.208-211, 2008. ANITUA, E.; ANDIA, I.; ARDANZA, B.; NURDEN, A.T. Autologous platet source of proteins for healing and tissue regeneration. Thombosis and Haemostasis, v.91, n.1, p-4-15, 2004. BLOCKMANS, D. et al. Platelet activation. Blood Reviews, v.9, n.3, p.143-156, 1995. CARMONA, J.U. et al. Autologous platelet concentrates as a treatment of horses with osteoarthiritis: a preliminary pilot clinical study. Journal of Equine Veterinary Science, Fort Collins, v.27, n.4, p.167-170, 2007. DINATO, C.J. et al. Plasma rico em plaquetas. In: DINATO C.J.; POLIDO D.W. Implantes osseointegrados: cirurgia e prtese. So Paulo: Artes Mdicas, p.315-342, 2001. EVERTS, P.A.M. et al. Platelet-rich plasma and platelet gel: a review. Journal of ExtraCorporeal Technology, Bloomsburg, v.38, n.2 p.174-187, 2006. MAIA L. Plasma rico em plaquetas no tratamento de tendinite em eqinos: avaliao clnica, ultrasonogrfica e histopatolgica. 2008. 78f. Dissertao (Mestrado em Medicina Veterinria) Curso de Ps-graduao em Medicina Veterinria, Universidade Federal de Viosa. MAIA, L.; SOUZA, M. V. Componentes Ricos em plaquetas na reparao de afeces tendo-ligamentosas e osteo-articulares em animais. Cincia Rural, v. 39, n.4, p. 1270-1286, 2009. MISHRA, A.; PAVELKO, T. Treatment of chronic elbow tendinosis with buffered platet-rich-plasma. American Journal of Sports Medicine, v. 34, n.11, p. 1774-1778, 2006. SCHNABEL, V.L et al. Platelet Rich Plasma (PRP) enhanced anabolic gene expression patterns in flexor digitorum superficialis tendons. Journal of Orthopaedic Research, Hoboken, v.25, n.2, p.230-240, 2007. SMITH, R. K.; JONES, R. et al. The cross-section areas of normal equine digital flexor tendons determined ultrassonografically. Equine Veterinary Journal, v. 26, p. 460-465, 1994.