AMINOCIDOS Y PROTENAS Jos Enrique Candelo 1245560, Juan Sebastian Ramirez 1242944 Universidad del Valle.

Facultad de Ciencias Naturales y Exactas. Laboratorio de Qumica Orgnica General. Santiago de Cali, Colombia. 29 de mayo del 2013 enriquelopez94@hotmail.com, juanseradi@hotmail.com 1. Abstract. To analyze the behavior and effects that can cause heat and some substances to amino acids and proteins, is taken as the model amino acid amino acetic acid, which was subjected to a series of reactions, the first to determine the acidity of the amino acids and forming a second complex salt amino acetic acid. For proteins was taken as a model the egg white and yolk, these two solutions were subjected to several reactions to see how the new process of denaturing, to give answer to this mystery became coagulation of albumin, protein precipitate heavy metals , xantoproteica reaction, biuret reaction and color reaction of formaldehyde to protein. Key word: amino acid, Proteins, egg while, yolk, denaturing, reactions. 2. Objetivos. Observar las reacciones qumicas de los aminocidos. Realizar una comparacin entre las reacciones qumicas que efecta la clara de huevo, con las que efecta la yema. Observar el comportamiento de las protenas en presencia de sustancias acidas, con temperaturas altas y con sales. Realizar anlisis del pH de las protenas 3. Procedimiento experimental. La prctica se inicio a las 9:30 a un temperatura ambiente de 27 C, antes de comenzar las respectivas reacciones de la practica se hizo primero el montaje para realizar el filtrado y el montaje del bao mara, una vez hecho esto se inicio con las respectivas reacciones de la prctica, las cuales se realizaron para analizar las reacciones efectos, que pueden ocurrir en los aminocidos y protenas

se realizaron reacciones

las

siguientes

Acidez de aminocidos. Se tomo 1 tubo de ensayo, en el se adiciono 0.1 ml de solucin al 2% de acido aminoactico y posteriormente se adiciono lentamente solucin acuosa de tornasol. Formacin de una sal compleja de acido aminoctico. Se tomo un tubo de ensayo posteriormente en l se coloco 0.3 g de acido aminoactico adicionalmente se le agrego 5 mL de agua y 1 g de oxido de cobre (II) pulverizado. Una vez realizado este proceso se hirvi durante varios min una vez hecho este proceso se filtro al vacio, con el fin de extraer el exceso de oxido de cobre (II), se coloco el filtrado en una capsula de porcelana, para luego evaporar en el bao mara hasta la obtencin de cristales, despus se dejo enfriar y se hizo la filtracin para obtener la cantidad de cristales que se formo. Coagulacin de albumina. Se tomaron 5 tubos de ensayo y en cada uno se adiciono 1 mL de yema de huevo, al primer tubo de ensayo se le adiciono temperatura, utilizando el termmetro para observar la temperatura a la cual coagulo la yema. En el segundo tubo de ensayo se le adiciono 4 mL de etanol. Al tercer tubo de ensayo se le aadi unas gotas de acido clorhdrico

concentrado, al quito tubo se le adiciono unas gotas de acido ntrico y al quito tubo de ensayo se aadi una solucin concentrada de hidrxido de sodio. Este mismo procedimiento se llevo a cabo con la clara. Precipitacin de metales pesados. protenas con

Se tomaron tres tubos de ensayo, posteriormente cada uno se le adiciono 1.0 mL de solucin de yema. Al primer tubo de ensayo se le adiciono gota a gota solucin de sulfato de cobre (II) al 5%. Al segundo tubo de ensayo se le adiciono solucin al 5% de acetato de plomo (II) y Al tercer tubo de ensayo se le adiciono solucin al 5% de cloruro de mercurio. Este mismo procedimiento se llevo a cabo con la clara. Reaccin de xantoproteica. Se tomo un tubo de ensayo, y se adiciono 1 mL de yema, mezclada con 0.6 ml de acido ntrico concentrado luego se hizo una solucin alcalina, aadindole hidrxido de sodio. Este mismo procedimiento se llevo a cabo con la clara. Reaccin de biuret. Se tomo un tubo de ensayo en el cual se mezclo, 1 ml de solucin de yema de huevo y 1.0 mL de solucin de

hidrxido de sodio y 10 gotas se solucin al 2% de sulfato de cobre (II) Reaccin coloreada del formaldehido para protenas Se tomo un tubo, en el cual se mezclo 0.2 mL de solucin de yema de huevo y una gota de solucin diluida de formaldehido, posteriormente se le agrego con cuidado acido sulfrico concentrado, hasta que se formo una capa separada en el fondo del tubo. Este mismo procedimiento se llevo a cabo con la clara.

parte acida de un aminocido la tiene el grupo amino y la bsica el ion carboxilato. [5]

Figura 1. Equilibrio aminocido. [5]

acido-base

en

un

4. Resultados y discusin. Acidez de los aminocidos

Tabla 1. Prueba de acides del acido aminoactico.
Acido aminoactico. El acido aminoactico era de color transparente y liquido. Fenolftalena. Resultado.

Cuando un aminocido se encuentra en medio acido (pH bajo), ambos, el grupo amino y el grupo carbonilo se encuentran protonados (catin en la figura 2). Por otro lado cuando el aminocido se encuentra en medio bsico (pH alto), ste tendr una carga neta negativa, la cual es soportada por resonancia (anin en la figura 2). Cuando el aminocido se encuentra en sustancias con pH neutro, el aminocido de encuentra en estado zuitterion, o sea que no posee carga neta. [6]

La fenolftalena es de color transparente y liquida.

Al agregar 3 gotas de fenolftalena al acido aminoactico, la mezcla no cambia de color, y al agregarle un pedacito de papel tornasol, ste tampoco cambia de color.

Figura 2. Estado de acidez o basicidad de los aminocidos. [6]

La basicidad de un ion carboxilato o de una mina, muestra que los aminocidos son iones dipolo o tambin conocido como zwitterion, donde el grupo carboxilo est como ion carboxilato y el grupo amino esta protonado. Lo que quiere decir que la

Formacin de una sal compleja de acido aminoactico. Se realizo una sal compleja a partir de 1g oxido de cobre (II) y 0.3g acido aminoacetico (glicina) y 5 ml de agua

y posteriormente se le adiciono calor, descrita por la siguiente reaccin

de H2Oen un tubo de ensayo, se obtuvo un color oscuro similar al negro. Cuando se expuso a calor se empez a tornarse un color azul rey, lo cual sera [Gly-Cu]+ con la formacin de un precipitado de color negro, arriba y abajo en el tubo de ensayo. Este precipitado que se obtuvo inicialmente fue un exceso de oxido de cobre (CuO), por consiguiente el filtrado que se le aplico fue para extraer ese exceso de cobre, luego el filtrado obtenido se coloco en la capsula porcelana y se le adiciono calor all se formaron los cristales los cual eran [Cu-Gy2] bis-glicinato- Cu II 1, luego se peso para encontrar el porcentaje de rendimiento el cual : Peso de la capsula + el filtrado 35.7543 g Peso de la capsula 35.4895 g Peso del filtrado 0.2648 g % de error

Figura 1. Reaccin para formacin una sal compleja a partir de una protena.

Primero que todo la glicina ejerce un efecto reductor con una gran efecto protector, de compuestos con eficiente capacidad de reduccin, en nuestro caso por iones Cpricos y por esto disminuye la generacin de radicales hidroxilos es probable que esto ocurri por la formacin del complejo construido de glicina y cobre, de tal manera que no se dispondra de cu, para oxidar cierto tipo de compuestos reductores como por ejemplo acido ascrbico y formacin de radicales hidroxilos Sea demostrado segn chemical de Exchange que la glicina ligada a Cu II, puede formar un complejo [GlyCu]+ cuyo pico de mxima absorcin son los 732 nm, mientras que el complejo [Cu-Gly2] tiene un pico mximo 624 nm1. Por consiguiente se ha sugerido que se forme un complejo de bis-gliceirato-Cu II, que tendra una estructura tetracoordinada planar, en la cual las molculas de agua estara excluidas de las posiciones axiales del cobre. [1] Retomando la parte experimental al adicionarse glicina + CuO y los 5 ml

=0.5541
Figura 2. Calculo de gramos tericos de la protena.

% Que fue razonable ya que hubieron perdidas al momento del filtrado que

no pasaron por completo a la capsula de porcelana Para la siguiente etapa del experimento hay que tener en cuenta

las protenas que constituyen la yema del huevo.

Paso 1.1. Calentamiento de la yema.

Coagulacin de la yema y de la clara. La principal protena de la yema es la vitelina. Adems la yema de huevo contiene: - FOSFIVITINA (4%): es una protena con grandes cantidades de fsforo, rica en serina (30%), no contiene cistena y fija fcilmente el hierro. - LIPOVITELINA (68%): es una protena alta en azufre, lipoprotena de alta densidad (HDL) rica en cistena. Presenta un 20% de lpidos (dos tercios de fosfolpidos y uno de colesterol, lpidos neutros y triglicridos). - LIPOVITELENINA (16%): es una lipoprotena de baja densidad pobre en cistena. Presenta un 88% de lpidos (un tercio de fosfolpidos y dos de lpidos neutros y colesterol). Existen restos glucdicos, hexosas y cido neuramnico. - LIVETELINA (10%): protenas globulares alfa, beta, gamma. - OVOVITELINA: rica en aminocidos fosforilados y azufrados. Coagula por accin de la quimosina. Coagulacin de la albumina. [4]

Se agrego 1 mL de solucin de yema y se le adiciono calor y se coloco un termmetro para registrar la temperatura de coagulacin, inmediatamente no se obtuvieron resultados algunos, pero a medida que la temperatura subi se observo que empez a coagular y cuando se alcanzo una temperatura de 72 C coagulo.

Figura 3 Calentamiento de la yema

Lo que sucedi desde el punto de vista qumico fue una desnaturalizacin de la protena, la cual segn bioqumica de los procesos metablicos dice que una protena normal de hasta 37 C la protena conserva su estabilidad activa, sin embargo cuando la temperatura se elevo por encima de los 40 y 50 C la protena se vuelve inestable e inactiva. [2]

Teniendo presente este argumento, cuando se le suministro calor al 1 mL de yema, hasta llegar a los 72 C, en ese momento las protenas de la yema se haban desnaturalizado, ya que se observo la coagulacin. La coagulacin en las protenas es un proceso irreversible ya que el calor acta en la protena desordenando y destruyendo su estructura secundaria y terciaria, la cual se evidencia ,mediante el desordenamiento de la estructura helicoidal caracterstica de este tipo de protenas puesto que, existe ruptura en los enlaces de hidrogeno, esto se puede observar en el siguiente esquema

En este caso al 1 mL de yema contenida en el tubo de ensayo se le adiciono 4 mL de etanol, lo que se obtuvo fue una solucin de yema coagulada pero aun con algunas zonas liquidas, es decir no presento una total coagulacin debido a que se presenta la siguiente reaccin.

Figura 6 reacciones de adicin de etanol

Como se pudo observar, se genera un ster lo que corresponde a los cogulos que se pudieron notaron en la mezcla, siendo la desnaturalizacin y la parte liquida que se observo, estara compuesta de agua y un poco de exceso de etanol. [6]
Paso 1.3. Adicin de HCl a la yema

Figura 4 proceso de desnaturalizacin de protenas

Paso 1.2. Adicin de etanol a la yema

Cuando se adiciono unas gotas HCl en el tubo de ensayo que contena 1 mL de solucin de yema, inicialmente se percibi un cambio, en la solucin daba un color verde claro tenue, cuando ms gotas fueron llegando al sistema, se noto un verde ms opaco y se presento coagulacin.

Figura 4 adicin de etanol a la yema

degradada, pero esta clase de desnaturalizacin por pH acido puede ser reversible o irreversible [2].
Paso 1.4. Adicin de HNO3 a la yema

En esta se agrego 1 mL de solucin de crema y se le adiciono 3 gotas de HNO3 (acido ntrico) dando como resultado un amarillo color crema

Figura 7 adicion de acido clorhidrico

Lo que ocurri fue el acido clorhdrico aumenta la concentracin de protones del medio disminuyendo el pH, de esa manera cambia las cargas de los grupo ionizables, que permitan la organizacin de la protena de la yema de huevo, generando un ataque en la estructura terciaria as como tambin afecta las uniones de los puentes de hidrogeno de la estructura secundaria cuya ecuacin es la siguiente:

Figura 9 adicin de HNO3

Lo ocurrido desde el punto de vista qumica, se dio por la sustitucin del grupo (NO2) en el anillo aromtico ya que este tipo de reacciones se caracteriza por dar una coloracin amarilla

Figura 8 reaccin de acido clorhdrico con solucionde yema

De esta manera se provoca una desnaturalizacin debido a que el acido clorhdrico al tener un pH inferior a 1, como el pH al que se expuso la protena de la yema fue muy extremo, queda desactivada y

Figura 10 reaccin del HNO3 Paso1. 5. Adicin NaOH a la yema

En el tubo de ensayo se adiciono 1 mL de solucin de yema y NaOH, se

observo que no coagul inicialmente pero al cabo de unos minutos de dejarse en reposo, coagulo.

huevo, la cual es semitransparente.

etanol, el cual es lquido e incoloro.

1 mL de clara de huevo, la cual es semitransparente.

4 gotas de cido clorhdrico, el cual el incoloro y liquido.

Figura 11 adicin de NaOH

Lo que ocurri fue la formacin de una sal, que proviene del acido carboxlico la protena, el Na desplazo al hidrogeno de este grupo, la cual es de carcter acido dando as la formacin de un carboxlico, en la siguiente reaccin podemos ver lo ocurrido

1 mL de clara de huevo, la cual es semitransparente.

4 gotas de cido ntrico, ste es de color amarillo traslucido y liquido. 4 gotas de hidrxido de sodio, el cual es tranparente y es lquido.

1 mL de clara de huevo, la cual es semitransparente.

a la clara se formaron tres fases, la inferior era la clara, la del medio era un segmento coagulado de clara, y la de arriba era el etanol. Inmediatamente el acido clorhdrico toca la clara de huevo, sta reacciona y empieza a coagularse y a volverse blanca. Al igual que con cido clorhdrico, el cido ntrico inmediatamente hace que la clara se coagule y se vuelva blanca. Cuando se agreg el hidrxido de sodio a la clara, se formo una emulsin, la cual no cambio de color.

La clara del huevo de gallina est compuesta por distintos componentes, entre ellos agua, protenas, minerales, lpidos, etc. Figura 12 reaccin de NaOH

Paso 2. Coagulacin de la clara por distintos factores. Tabla 2. Observaciones de la coagulacin de la clara de huevo en por distintos factores.
Clara de huevo. Sustancia Agregada. Calor. Resultado de la reaccin. Al calentar la clara, al principio no cambia nada, aproximadamente a los 83 C se empieza a coagular y cambia a un color blanco. Cuando se agreg el etanol

1 mL de clara de huevo, la cual es semitransparente.

1 mL de clara de

4 gotas de

En la parte protenica est compuesto bsicamente por ovoalbmina con protenas globulares que la hacen

fcilmente desnaturalizable al exponerla a calor, o ciertas sustancias qumicas. La ovoalbmina tiene un 3.5% de azucares como la d-manosa y un aminoazcar que es la glucosamina. [7] Las protenas en la clara se encuentran en una proporcin de 54% ovoalbmina, 12% ovotransferina o conoalbumina, 11% ovomucoide, 3.5% lisozima y 1.5% ovomucina. [8] Cuando una protena no ha estado expuesta a cambio alguno, su estructura tridimensional (secundaria, terciaria o cuaternaria) se encuentra intacta, o sea que presenta una estructura nativa. El termino desnaturalizacin de las protenas se da cuando la protena ha perdido su estructura tridimensional y solo queda la cadena polipeptidica reducida a un polmero estadstico. La estructura nativa y desnaturalizada solo tiene en comn la estructura primaria, eso quiere decir, la secuencia de aminocidos. [9]

desnaturalizantes. Unos de los agentes fsicos es el calor, representado por un aumento de temperatura, lo cual genera mayor agitacin molecular. Dicha agitacin puede ser tanta que hace que las interacciones dbiles que mantiene la estructura tridimensional se rompen sin posibilidad de volver a formarse. En los agentes qumicos estn todos los que son capaces de romper interacciones dbiles. Por ejemplo los detergentes, los cuales rompen las interacciones hidrofobicas del interior de la protena globular, de igual manera trabajan los solventes orgnicos, soluciones salinas concentradas los extremos de pH. [10]

Precipitacin de metales pesados.

protenas

con

Se tomaron 2 tubos de ensayo, en el cual a uno de ellos se le adiciono 1 ml de yema y unas gotas de sulfato de cobre (CuSO4). Al otro tubo de ensayo con 1 mL de yema se hizo reaccionar con acetato de plomo, el cual se adiciono gota a gota de manera lenta
Paso 1.1. Adicin de Sulfato de cobre con la yema.

Figura 3. Estado nativo y desnaturalizado de una protena. [9]

Los agentes que generan la desnaturalizacin de las protenas son conocidos como agentes

Se tomo el primer tubo de ensayo con 1 mL de yema y se le adiciono gota a gota sulfato de cobre, tomando una coloracin verde viche.

en el sulfato de cobre, se desprende el cobre como Cu+2 dejando originando el anin sulfato cargada negativamente, una vez ocurrido esto el Cu+2 se une al O negativo que se formo del acido carboxlico, pero aun falta un electrn para estabilizarse, situacin por la cual necesita unirse a otra protena en la cual sucede lo mismo, formando
Figura 12 adicin de metales pesados

Los metales pesados tienen el efecto de precipitar protenas creando enlaces (cross-linkings) entre los grupos amino libres y los grupos carboxilo libres. Detecta la presencia de protenas. Incluyen Zn2+, Fe3+, Cu2+, Sb3+, Ag1+, Cd2+, and Pb2+ . Entre los metales, Hg2+, Cd2+, y Pb2+ tienen una alta toxicidad. Estos pueden causar serios daos a las protenas (especialmente enzimas) desnaturalizndola. [5]

Figura 14 producto de bis glicinsto

La coloracin verde fue que en el medio quedo Cu+2 el cual posee un color verdoso. Lo que sucedi con los hidrgenos, se enlazaron con el anin sulfato formado acido sulfrico H2SO4
Paso 1.2. Adicin de plomo con la yema.

Se adiciono gota a gota acetato de plomo (Pb) en el segundo tubo de ensayo con 1ml, dio como resultado una solucin menos espesa y de color amarillo opaco

Figura 13 reaccin de sulfato de cobre

Lo que ocurri fue que el sulfato de cobre interacta con el acido carboxlico desprendiendo un hidrogeno del oxigeno lo cual sucede por ser un alcohol primario, una vez se carga el oxigeno negativamente,

cobre (II), la cual es de color azul claro. 4 gotas de solucin diluida al 5% de acetato de plomo, la cual es de color tranparente.

1 ml de clara de huevo, la cual es semitransparente.

coagular y se volvi de un color entre verde claro y azul con trozos blancos Cuando el acetato de plomo se une con la clara, sta se medio coagula con un color blanco.

Figura 15 reaccin de plomo con solucin de yema

Lo que sucedi fue muy similar a la reaccin que se hizo con Sulfato de cobre, pero aqu se formo el ion de acido actico (CH3OO-) que en este caso fueron 2 iones de acido actico ya que se encontraban unidos a l Pb, convirtindose en Pb2+, de esa manera interacta con el grupo carboxlico de la protena de la siguiente manera

Al igual de muchas protenas tambin son desnaturalizadas por metales pesados, ejemplo de esta es la conoalbumina la cual forma complejos con cationes metlicos divalentes y trivalente como el hierro, cobre, entre otros, haciendo que esta se vuelva ms termoestable. [7]

Reaccin de Xantoproteica
Paso 1. Reaccin con la yema

Figura 16 reaccion de yema con el ace

Paso 2. Precipitacin de la clara con metales pesad Tabla 3. Observaciones de la reaccin de la clara con algunas con metales pesadas.
Clara de huevo. Sal con metal pesado. 4 gotas de solucin diluida al 5% de sulfato de Resultado de la unin. Cuando se le agrego el sulfato de cobre a la clara, sta se empez a

En esta reaccin se aadi 1 mL de yema de huevo en el tubo de ensayo posteriormente se le aadi 0.5 mL de acido ntrico (HNO3) se observo que la solucin de yema comenzaba a coagular, luego se le adiciono (NaOH) y se observo que la reaccin era exotrmica debido a que libero calor, femndose unas manchas en la parte inferior del tubo.

1 ml de clara de huevo, la cual es semitransparente.

OH- se encuentra en el medio formando agua, posteriormente al adicionarle la base se genera una reaccin exotrmica ya que interacta con el OH y genera una hidrlisis y el entra el Na + con el oxigeno femndose oxido de sodio y este hidrogeno que sali protonado, se une con el oh formando agua
Figura 17 adicin de (HNO3) y (NaOH) a la solucin de yema Paso 2. Reaccin con la clara Tabla 4. Observaciones de la reaccin xantoproteica.
Clara de huevo. 1 ml de clara de huevo, la cual es semitrans parente. Acido ntrico. 12 gotas de acido ntrico el cual es transparente y liquido. Hidrxido de sodio. 4 gotas de hidrxido de sodio el cual es un liquido incoloro Resultado de la reaccin. Al agregarle el acido ntrico a la clara de huevo, sta empez a coagularse blanco con un poquito de amarillo y al calentar se termino de coagular, cuando se le agrego el hidrxido de sodio, donde hizo contacto, se tio de un color caf-naranja.

Esta reaccin se usa para detectar la presencia de protenas solubles en una solucin. Se realiza mediante el uso de HNO3 concentrado que, en presencia de protenas o aminocidos con restos aromticos torna la solucin de un color amarillo oscuro. Esto ocurre mediante la siguiente reaccin

Figura 18 ecucion de la reaccin de (HNO3) (NaOH) y solucin de yema

Lo que ocurre cuando se le adiciona el HNO3, recordemos que el OH por ser el dueo del anillo es un desactivante y estos orientan a orto y para, como podemos observar en la reaccin solo pueden haber dos posibilidades de orto y ninguna de para, ya que se encuentra ocupado, se genera una nitracin cuando entra el NO2, al anillo se desprende un hidrogeno del anillo aromtico, saliendo como H+ y se une con el

La reaccin xantoproteica es debida a la formacin de un compuesto aromtico nitrado que es de color amarillo, el cual se da cuando ciertas protenas son tratadas con acido ntrico concentrado. Dicha prueba arroja resultados positivos a protenas compuestas con aminocidos que poseen grupos aromticos en su estructura, principalmente con la tirosina. Esto si al realizar la prueba se neutraliza con

un alcalino la mezcla cambia a un naranja oscuro. [11] Reaccin de biuret.

Paso 1. Con la yema

precipitado blanquecino puede ver a continuacin

cmo

Prueba Biuret: La prueba Biuret es una prueba general para protenas, no especifica. Cuando una protena reacciona con sulfato de cobre (II) (color azul) se forma como respuesta positiva un complejo color violeta.

Figura 17 imagen de la reaccin de biuret

Figura 19 mecanismo de la reaccin de biret

La prueba Biuret trabaja para cualquier tipo de compuesto que posea uno o ms de los grupos siguientes:

Cuando una protena o un poli pptido se hacen reaccionar con sulfato de cobre en solucin alcalina se produce un color caracterstico purpura o violeta; el c olor se debe a un complejo que resulta al unirse el cobre con los tomos de nitrgeno de los enlaces pepiticos. Esta reaccin nos sirve para diferenciar las protenas y pptidos de los aminocidos y su utilidad principal es la de seguir el proceso de hidrlisis proteica, la reaccin ser negativa cuando la hidrolisis se completa.

Figura 21 reaccin de solucin de yema con NaOH en un medio acido Figura 17 radicales en protenas que permiten la reaccin de Biuret Paso 2. Con la clara. Tabla 5. Observaciones de la reaccin de biuret.
Clara de huevo. 1 ml de clara de Hidrxido de sodio. 20 gotas de Sulfato de cobre. 4 gotas de solucin Resultado de la reaccin. Al agregar el hidrxido de sodio a la clara

En nuestro caso al agregarle 1 mL hidrxido de sodio y varias gotas de sulfato de cobre se observo coagulacin y la fonacin de un

huevo, la cual es semitransparente.

hidrxido de sodio al 10 %, el cual es un lquido incoloro.

de sulfato de cobre al 2%, la cual es de color azul claro.

no se genera coagulacin, y al agregar el sulfato de cobre, la mezcla cambia de color a violeta, al exponer la mezcla a calor se fue oscureciendo y la clara se desaparece y se forma un precipitado negro.

.
Figura 17 imagen de la reaacion de formaldehido

La reaccin de biuret es realizada nicamente por protenas y pptidos y no por los aminocidos ya que para que esta suceda es necesario el encale polipeptidico (- CO- NH -), el cual es destruido para liberar los aminocidos. Cuando una protena o un pptido se pone en contacto con un lcali concentrado, este forma una sustancia de alta complejidad llamada biuret. Por dicha razn es que cuando agregamos el reactivo de sulfato de cobre a las protenas, se forma un precipitado con coloracin violeta. [12] Reaccin coloreada de formaldehido para protenas.
Paso 1. Con la yema

La reaccin se puede ver en la siguiente ecuacin:

Figura 17 reacion de formaldehido con la protena de la yema en un medio acido

Esta reaccin se da por la adicin del ataque del grupo amino, este posee electrones libres y a su vez el carbonilo del formaldehido posee una carga positiva, esto provoca que se rompa el doble enlace del carbono con el oxigeno, quedando este con una carga negativa por lo tanto al protonarlo con el acido sale en forma de agua mientras que le grupo amino se desprende de su protn p ara formar un doble enlace con el carbono.
Paso 2. Con la clara. Tabla 6. Observaciones de la reaccin coloreada del formaldehido para protenas.
Clara de huevo. 0.2 ml de FormalDehido. 4 gotas Acido sulfrico. 4 gotas de Resultado de la reaccin. Al agregar el formaldehido a la

En esta ltima prueba al adicionar las gotas de formaldehido no se observo un cambio notable en la mezcla, al adicionarle las 3 gotas de H SO Se formo un precipitado blanco

clara de huevo, la cual es semitransparente.

de formaldehido diluido, ste es un liquido tranpare nte.

acido sulfrico concentra do, el cual es liquido e incoloro.

clara, sta empieza a coagularse, cuando se adiciona el acido sulfrico la mezcla cambia a naranja, mas donde el acido hace contacto.

5.2. Por qu el acido ntrico concentrado tie la piel humana de amarillo? Qu sucede en esta reaccin? El acido ntrico tie la piel de color amarillo al contacto, debido a una reaccin con la Cistena presente en la queratina de la piel (Oxidacin).

Esta reaccin se genera por el ataque al grupo amino, ya que ste posee electrones libres y el carbonilo de la fenolftalena posee carga positiva, generando que se rompa el doble enlace (C=O) haciendo que el oxigeno quede con carga negativa, por lo tanto al protonarlo con el acido sale como agua, mientras el grupo amino desprende su protn para formar un doble enlace con el carbono. [13]

5.3. Describa el ensayo de la reaccin coloreada del formaldehido para protena. Los grupos aminos primarios tienen la cualidad de reaccionar favorablemente con el formaldehido, lo cual generara un compuesto acido, que puede ser analizado volumtricamente teniendo en cuenta que para lograrlo debe utilizarse un indicador adecuado; procedimiento de la misma manera que si se estuviese analizando un acido ordinario. Un ensayo 0.2ml de la solucin problema (aminocido), a este le aade una gota de ma diluido, a esta mezcla posteriormente se le adiciona cuidadosamente una solucin de acido sulfrico concentrado, observando la formacin de un precipitado en la parte inferior del tubo; luego se agita el tubo obteniendo una reaccin en la cual se observa la coloracin del aminocido, la cual obedece a la siguiente reaccin. La coloracin producida en eta reaccin puede ser provocada

5. Respuestas al cuestionario. 5.1. En qu consiste la prueba del milln? Cuales protenas dan positiva a esta prueba? Y cul es la reaccin qumica fundamental? Esta reaccin da positiva con las protenas que contienen el aminocido tirosina. El reactivo de Milln se prepara disolviendo mercurio y nitrito mercurioso. Cuando se calienta este reactivo con una protena que contenga tirosina, como en la clara de huevo de gallina, se forma un precipitado blanco que luego pasa a rojo, rojo parduzco o rojo ladrillo.

tambin por metilenicas.

las

combinaciones

sodio y varias gotas de solucin al 10% de sulfato de cobre, esta mezcla se agito y se calent luego se vio la aparicin de una coloracin violeta. Con lo anterior se puede decir que esta reaccin est dada solo por aquellas sustancias cuyas molculas contienen dos grupos carbamino (-COOH, NH2) unidos directamente o travs de un solo tomo de carbono o nitrgeno.

5.4. Qu es una protena globular? Las protenas fibrosas misiones estructurales en los organismos y por tanto son muy abundantes y esenciales para el mismo. Sin embargo, la gran mayora de las funciones celulares la llevan a cabo protenas globulares. Su nombre se debe a que sus cadenas polipeptidicas se pliegan sobre si misma de manera compacta. La gran variedad de plegamientos diferentes que encontramos en las protenas globulares refleja la variedad de funciones que realizan esta protena. A pesar de esta enorme variedad de plegamientos diferentes podemos encontrar una serie de motivos y principios comunes. La estructura terciaria de una protena es el modo en el cual se pliega la cadena polipeptidica. La complejidad que presenta la estructura terciaria de las protenas hace que se distinguen subestructuras dentro de esta. En la imagen diferentes re presentaciones de la estructura terciaria de la mioglobina. Experimentalmente se coloco un 1ml de ovoalbmina en un tubo de ensayo y a este sele adiciono 1 ml de solucin del 10% de hidrxido de

5.5. Qu es un punto isoelctrico de una protena? Las protenas cuentan con una

propiedad

denominada

capacidad

amortiguadora, esta propiedad se debe a la existencia de:

Grupos ionizables de las cadenas laterales de los aminocidos Asp, Glu, Lys, Arg, His, Tyr, Cys.

Grupos COOH y NH2 terminales Por este motivo, las protenas poseen un considerable poder amortiguador en una amplia zona de pH. Aunque cada AA tiene unos grupos ionizables con unas constantes de ionizacin (pKa) dichas caractersticas, el constantes valor de

puede

verse

ligeramente modificado por el entorno proteico. El grupo imidazol del AA histidina es el principal responsable

del

poder

amortiguador

de

las

protenas a pH fisiolgico, ya que su pKa est prximo a 7. Cuando el pH es bajo, los grupos ionizables estn protonados, y la carga neta de la protena es de signo positivo. Cuando el pH es alto, los grupos ionizables estn 5.6. Escriba la formula de los

siguientes

aminocidos:

alanina,

leucina, valina, prolina, fenilalanina, triptofano, cristena, arginina,

histidina, tirosina
Tabla 1. Estructura de algunos aminocidos.

desprotonados, y la carga neta es de signo negativo. Entre ambas zonas, habr un pH en el cual la carga neta de la protena es nula. Es el pH isoelctrico o punto isoelctrico, y es caracterstico de cada protena (Tabla de la izquierda). A valores de pH por debajo del pH isoelctrico la carga neta de la protena es positiva, y a valores de pH por encima del pH isoelctrico, la carga neta de la protena es negativa. La mayora de las protenas

Alanina

Leucina

Valina

Prolina

intracelulares tienen carga negativa, ya que su pH isoelctrico es menor que el pH fisiolgico (que est prximo a 7). Se llaman protenas cidas a aquellas que tienen un punto isoelctrico bajo (como la

Fenilalanina

Triptofano

pepsina), y protenas bsicas a las que tienen un punto isoelctrico alto (como las histonas). [14]

Cristena

Arginina

Histidina

Tirosina

6. Conclusiones. Las protenas se desnaturalizan y precipitan, perdiendo su estructura secundaria, terciaria o cuaternaria, en presencia de sustancias con pHs extremos, a temperaturas elevada. La yema coagula de color amarillo, mientras que la clara lo hace de color blanco. La clara posee protenas con aminocidos que tienen en su estructura grupos aromticos, a diferencia de la yema. El pH de los aminocidos es neutro es su estado natural o en solventes con pH neutro por estar estado zuitterion. Las protenas precipitan o se desnaturalizan en presencia de metales pesados.

7. Referencias [15]
1- Hattori, T., Toraishi, T. Tsuneda, T., Nagasaki, S., Tanaka, S. Chemical exchange reaction of glycinatecopper(II) complex in water: Atheoretical study. J. Phys. Chem. A. Publication Date (Web): October 26, 2005 Copyright 2005 American Chemical Society 2- Bioqumica de los procesos metablicos Editorial Reverte elo, Virginia; Cuamatzi, Oscar 2a edicin, pag 98 3- http://alimentos.org.es/proteinasyema-huevo (23/05/2013) 4- Qumica organica editorial universidad estatal a distancia ,ao

5.7. Cmo se determina la presencia de azufre en las protenas? Los aminocidos azufrados o sea que tiene un tomo de azufre en so estructuras son dos, el cistena y la metionina, son conocidos por generar un precipitado de sulfuro de plomo de color gris oscuro o negro, cuando se hacen reaccionar con acetato de plomo en medio alcalino. [16]

de edicin 2006 edicin acua arias pag 413

de flora

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141516-

17-

419&sa=X&ei=GHSlUdCQC6X10gGJn 4CQBw&sqi=2&ved=0CDkQ6AEwAw #v=onepage&q=reaccion%20colorea da%20del%20formaldehido%20para %20proteinas&f=false(25/05/2013) http://www.ehu.es/biomoleculas/pr oteinas/prot2.htm (25/05/2013) http://www.divulgacion.ccg.unam.m x/webfm_send/8575 (25/05/2013) http://books.google.com.co/books?i d=dAbMDrXcTHsC&pg=PA97&lpg=P A97&dq=como+identificar+aminoaci dos+azufrados&source=bl&ots=ZC_d RnIquE&sig=tB2lNOW_ulE_ETJRmSY8TA_7tY&hl=es419&sa=X&ei=BYelUaigO8rH0AHUJg &sqi=2&ved=0CDkQ6AEwAg#v=onep age&q=como%20identificar%20amin oacidos%20azufrados&f=false (26/05/2013) Gua de laboratorio de qumica orgnica aminocidos y protenas Norma LQO-26