OBJETIVOS

Extraer los cidos nuclecos de una muestra proteica Determinar la importancia de cada uno de los procesos para la extraccin del ADN. Reconocer el ADN vegetal que se extraiga en la prctica Aprender un procedimiento vlido para la extraccin de ADN en los vegetales. FUNDAMENTO TEORICO ACIDOS NUCLEICOS Son molculas constituidas por C, H, O, N y P, que se relacionan con la conservacin del material gentico de los organismos, es el componente qumico primario de los cromosomas y el material del que los genes estn formados, se componen de un pequeo grupo de unidades monomericas denominadas nucletidos, unidos mediante enlaces covalentes fosfodiester ADN El cido desoxirribonucleico (ADN) es un tipo de cido nucleico, una macromolcula que forma parte de todas las clulas ya que contiene la informacin gentica usada en el desarrollo y el funcionamiento de los organismos vivos conocidos y de algunos virus, y es responsable de su transmisin hereditaria. Desde el punto de vista qumico, el ADN es un polmero de nucletidos, es decir, un poli nucletido, un polmero es un compuesto formado por muchas unidades simples conectadas entre s, como si fuera un largo tren formado por vagones, en el ADN, cada vagn es un nucletido, y cada nucletido, a su vez, est formado por un azcar (desoxirribosa), una base nitrogenada (que puede ser adeninaA, timinaT, citosinaC o guaninaG) y un grupo fosfato que acta como enganche de cada vagn con el siguiente, es el componente qumico primario de los cromosomas y el material del que los genes estn formados.

EXTRACCION DE ADN La extraccin de ADN de una muestra celular se basa en el hecho de que los iones salinos son atrados hacia las cargas negativas del ADN, permitiendo su disolucin y posterior extraccin de la clula, para esto se necesita romper las clulas mediante un detergente, vacindose su contenido molecular en una disolucin tampn en la que se disuelve el ADN, el tampn contiene ADN y todo un surtido de restos moleculares: ARN, carbohidratos, protenas y otras sustancias en menor proporcin, aqu sucede que las protenas asociadas al ADN, de gran longitud, se habrn fraccionado en cadenas ms pequeas y separado de l por accin del detergente, slo queda, por tanto, extraer el ADN de esa mezcla de tampn y detergente, para lo cual se utiliza alcohol puro. La extraccin de ADN requiere una serie de etapas bsicas. 1. En primer lugar tienen que romperse la pared celular y la membrana plasmtica para poder acceder al ncleo de la clula. 2. A continuacin debe romperse tambin la membrana nuclear para dejar libre el ADN. 3. Por ltimo hay que proteger el ADN de enzimas que puedan degradarlo y para aislarlo hay que hacer que precipite en alcohol. El ADN es soluble en agua, pero cuando se encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interfase entre el alcohol y el agua, adems de permitirnos ver el ADN, el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los cuales son dejados en la solucin acuosa. MATERIALES Y REACTIVOS Muestra vegetal acelga Agua destilada Cloruro de sodio Bicarbonato sdico Alcohol isopropilico Lauril sulfato de sodio Mortero Tubo de ensayo Varilla de vidrio Centrifugadora

 PROCEDIMIENTOS 1. El docente preparo el tampn con los siguientes reactivos: 120ml de agua destilada 1,5 NaCl 5g NaHCO3 5ml de lauril sulfato de sodio 2. Con la ayuda de un mortero trituramos la acelga con un poco de agua, para asi romper las clulas. Hasta que quedo con un aspecto de caldo. 3. Mezclamos en un tubo de ensayo aprox. 5ml del caldo de acelga triturada con 10 ml del tampn, y agitamos por aproximadamente 2minutos. 4. Luego vaciamos el contenido en otro tubo de ensayo desechamos la espuma y las partes mas grandes que quedaron de la acelga. 5. Colocamos el tubo de ensayo con el caldo en una centrifugadora por 5 min. 6. Despues del centrifugado pusimos 5ml del caldo en un tubo de ensayo y agregamos 5ml de alcohol isopropilico, con mucho cuidado poniendo el tubo en posicin inclinada. 7. Quedando el alcohol encima como flotando sobre el tampn, introducimos la varilla al tubo de ensayo movimos ligeramente sin mezclar y luego sacamos la varilla, observando fragmentos de ADN a manera de copos de nieve. RESULTADOS Luego de todo el proceso, pudimos evidenciar la presencia de fragmentos de ADN en el caldo, a manera de copos de nieve