UNIVERSIDAD NACIONAL FEDERICO VILLARREAL

FACULTAD DE OCEONOGRAFA, PESQUERA Y CIENCIAS ALIMENTARIAS

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ESCUELA PROFESIONAL DE INGENIERA EN ACUICULTURA

CALIDAD DE AGUA
ING. WALTER ZAMBRANO

MONOGRAFA
TEMA: BIOENSAYOS EN ALGAS

AO. TERCERO

INTEGRANTES. PARCCO AHUIRIMA VIVIANA

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Qu existe que no pueda considerarse venenoso? Todas las cosas son venenosas y nada carece de veneno. Solamente la dosis determina la toxicidad de una sustancia.

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RESUMEN Los bioensayos acuticos pueden aplicarse a un amplio rango de programas. pero, es de suma importancia el conocer todas las etapas que existe en el proceso de seleccin a fin de disear programas que se acercarn efectivamente a los objetivos. Dentro del presente observaremos los pasos que debemos tener en cuenta en el. Proces de Seleccin, discute el rol que juegan los objetivos del programa en los procesos de seleccin. Se presentan las ventajas y desventajas de la misma. Se presenta una serie de preguntas y cmo las respuestas afectan a los procesos de seleccin. Organismos de Bioensayo, trata acerca de cada uno de los grupos principales de organismos y su adecuacin a varios tipos de bioensayos. Se hacen recomendaciones especficas en los casos en que es posible hacerlo. Se presenta adems las especies ms usadas o ms recomendables para los bioensayos. Palabras clave: Bioensayo, ventajas, desventajas, seleccin.

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ABSTRACT

Aquatic bioassays can be applied to a wide range of programs. but it is very important to know all the stages that exist in the selection process to design programs that effectively closer to the objectives.

In this observe the steps we must take into account in the. Selection process, discusses the role played by the program objectives in the selection process. Presents the advantages and disadvantages of only .Se presents a series of questions and how responses affect the selection process. Bioassay agencies, deals with each of the major groups of organisms and their adaptation to various types of bioassays. Specific recommendations are made where it can be done. Keywords: Bioassay, advantages, disadvantages, selection.

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INTRODUCCION

Como finalidad del presente es determinar y conocer los pasos previos al bioensayo y durante el bioensayo, conocer adems el comportamiento de las especies frente a un contaminante. Los ensayos de biotoxicidad han adoptado una importancia creciente en la evaluacin de la toxicidad potencial de muestras medioambientales. Estos ensayos aspiran a la prediccin realista del comportamiento de de las especies frente a contaminantes. Dentro de la acuicultura resulta de importancia conocer dichos bioensayos debido a que las microalgas comprenden el nivel trfico mas importante dentro de la cadena y dentro de cultivos resulta una fuente muy importante en cuanto a alimentacin se trata. Como se presenta en el presente informe para realizar el bioensayo con algas existen ciertos parmetros que debemos tomar en cuenta para obtener resultados certeros. Adems debemos conocer cul es la forma de vida el ciclo de reproduccin para llevar un control adecuado como la tasa de duplicacin entre otros. Mtodo Materiales. Internet Libros

Procedimiento.-

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Recolectar de diversas fuentes la informacin necesaria en este caso se hizo uso de fuentes con internet y libros. Esto con la finalidad de buscar amplia informacin y no limitarnos a solo un autor.

Capitulo 1

BIOENSAYO EN ALGAS En los sistemas continentales, el principal auttrofo est constituido por plantas microscpicas que se encuentran suspendidas en el agua y se denomina fitoplacton.a este grupo pertenecen diferentes categoras taxonmicas de algas: diatomeas dinoflagelados y algas verdes. Dado que las algas verdes don productores primarios de los ecosistemas acuticos cualquier efecto nocivo sobre esta comunidad podr generar alteraciones en la estructura y el funcionamiento del sistema. su uso como organismos de prueba de ensayos de toxicidad permite evaluar no solo el efecto de sustancias xenobioticas sino prever cambios potenciales que puedan ocurrir en el ecosistema, por ello se recomienda que en todo estudio toxicolgico se incluyan estudios con estos organismos adems su relativa simplicidad y posibilidad de observar efectos subletales los hacen indispensables en estudios de control ambiental . La eleccin de estos organismos como especie de pruebas tiene ventajas y desventajas que deben analizarse previamente.

1. La seleccin de organismos para bioensayos debe basarse en:

los objetivos del programa toxicolgico,

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la informacin disponible sobre los posibles organismos, las caractersticas de las especies, las instalaciones y equipo del laboratorio, el nivel de capacitacin de los tcnicos.

Los bioensayos acuticos pueden aplicarse a un amplio rango de programas. Sin embargo, es importante entender claramente todas las facetas del proceso de seleccin a fin de disear programas que se acercarn efectivamente a los objetivos. 2. Proceso de seleccin Esta seccin discute los objetivos para los estudios toxicolgicos y cmo ellos influyen en el proceso de seleccin, en particular, ya sea que se seleccionen organismos estndares criados en el laboratorio o indgenos recolectados en el campo. Organismos criados en el laboratorio para bioensayos Organismos recolectados en el campo para bioensayos

A) Organismos criados en el laboratorio para bioensayos A.1.Ventajas

Disponibilidad en forma inmediata de organismos aclimatados, saludables, que han sido criados bajo las mismas condiciones.

La respuesta de los organismos para bioensayos a la sustancia txica est influenciada por factores tales como su edad (los animales jvenes son usualmente ms sensibles), dieta (los animales bien alimentados brindan respuestas ms consistentes), presin (los organismos
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alterados o presionados son ms sensibles) y condiciones fsicas como temperatura, luz y el nivel de oxgeno disuelto en el agua. Los organismos para bioensayos que se cultivan en el laboratorio representan una fuente predecible de organismos de prueba de una edad conocida. El uso de condiciones estndares de laboratorio y de alimentacin asegurar que todos los organismos de prueba respondern a las sustancias txicas en una forma similar con el paso del tiempo. Esta es una caracterstica importante cuando se comparan los resultados de diferentes laboratorios. A.2.Desventajas

Muchos organismos con ciclos complejos de vida o informacin insuficiente sobre su cultivo no pueden ser cultivados en el laboratorio. Por lo tanto, la variedad de organismos est ms limitada cuando se usan los que han sido criados en el laboratorio.

Los requerimientos de cultivo para organismos acuticos varan sustancialmente, an entre especies estrechamente relacionadas. Es necesario conocer el alimento ptimo, la temperatura, el ciclo de luz y el agua a fin de mantener cultivos continuos en el laboratorio. Esta informacin requiere de aos de investigacin. Aunque muchas algas, invertebrados y especies de peces se han usado como organismos para bioensayos, slo existe informacin disponible sobre algunas especies, que permite un cultivo satisfactorio de laboratorio.

Falta de representatividad a las condiciones y organismos en la comunidad a ser probada.

El aspecto negativo de los organismos estndares criados en el laboratorio es que ellos no son necesariamente representativos de la comunidad acutica o de las condiciones de salud
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de los organismos de cada lugar. Por lo tanto, si el objetivo es estudiar un efluente especfico o la descarga a un ro o lago, entonces deben considerarse los organismos recolectados en el campo como una alternativa. B) Organismos recolectados en el campo para bioensayos Hay circunstancias en las que los organismos recolectados en el campo son apropiados. Las siguientes son algunas preguntas que necesitan hacerse antes de decidir usar los organismos recolectados directamente de un ro o un lago.

Puede recolectarse el organismo directamente del campo? Esto ocurre en poblaciones grandes, mono especficas?

Estn los organismos disponibles durante todo el ao o slo durante ciertas estaciones?

Es el organismo sensible al manejo durante su recoleccin y transporte al laboratorio?

Se adaptar el organismo al agua del laboratorio o se necesita un abastecimiento de agua fresca diariamente desde el campo?

B.1.Ventajas

El ms representativo de la comunidad impactada por el efluente. Se puede seleccionar una especie importante en una comunidad especfica.

Las pruebas de microcosmos conteniendo muchas especies puede prepararse fcilmente.

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Se pueden desarrollar exmenes con varias especies en la misma cmara de prueba. Los organismos que son compatibles, tales como caracoles, almejas, peces y plantas acuticas pueden incluirse en la misma cmara de prueba, permitiendo un estudio simultneo de efectos mltiples.

B.2.Desventajas

La alta presin y mortalidad frecuentemente estn asociadas con los procedimientos de recoleccin y transferencia. Muchos organismos pueden morir antes o durante la prueba y otros pueden ser inusualmente sensibles a sustancias txicas como resultado de la presin asociada con los procedimientos de recoleccin y transferencia. Las muertes en los controles pueden invalidar la prueba.

La disponibilidad de los organismos puede estar limitada. Muchas especies no abundan durante todo el ao o tienen varios cambios en su ciclo de vida.

La edad, salud y condiciones de cultivo de los organismos son desconocidas. No existe manera de obtener organismos "estandarizados" del campo y frecuentemente hasta la edad es desconocida.

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3. Criterios generales de seleccin El primer paso es hacerse cada una de las siguientes preguntas.

Existe suficiente informacin sobre la historia de vida del organismo? Sobre las tcnicas de cultivo? Sobre los procedimientos de bioensayos? Los organismos acuticos frecuentemente tienen ciclos de vida y requerimientos de cultivo y de manejo complejos. El desarrollo de esta informacin es una tarea larga que frecuentemente requiere aos de investigacin. Es muy recomendable que se consideren slo aquellos organismos de los que se tiene informacin suficiente en cada una de estas reas. Las especies con informacin limitada sobre cultivo y procedimientos de prueba deben evitarse. Es apropiado el ciclo de vida de los organismos a los objetivos y diseo? El diseo de los bioensayos tiene que ser cuidadosamente considerado en el contexto del ciclo de vida del organismo. La mayora de protocolos de bioensayos agudos y crnicos requieren organismos jvenes o recin nacidos. Sin embargo, algunos protocolos, tales como la prueba de crecimiento de ostras, se aplican a organismos adultos. Asimismo, para pruebas crnicas que involucran reproduccin, el tiempo requerido para la reproduccin del organismo es un factor clave.

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El bioensayo es para toxicidad en agua o en sedimentos? Para sedimentos, es el objetivo determinar las sustancias txicas que se filtrarn hacia el agua superficial o las sustancias txicas que pueden acumularse en los organismos bnticos? Los sedimentos pueden servir como fuentes de sustancias txicas para el agua superficial o para los organismos bnticos que viven en los sedimentos. Las sustancias txicas que se mueven desde los sedimentos hacia el agua superficial pueden ser determinados preparando lixiviados del sedimento para bioensayos. Tambin pueden ser de preocupacin las sustancias txicas que estn estrechamente ligadas a los sedimentos y que pueden ser bioconcentradas en organismos bentnicos, particularmente cuando stos son un componente importante de una cadena alimenticia que resulta en la exposicin humana. 4. Seleccin de especies 4.1Algas Las algas representan un componente importante de cualquier comunidad acutica porque son el primer eslabn en la cadena alimenticia. Una sustancia txica no necesita ser directamente txica a los peces y otros animales acuticos para impactar severamente sobre la salud de un sistema acutico. 4. 2. Ventajas y desventajas de las algas como organismos de prueba 4.1.1Ventajas

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Existen sustancias qumicas txicas para las algas tales como los herbicidas que pueden reducir la productividad del agua receptora, pero que no afectarn a los peces ni a los invertebrados.

Se detectar la presencia de nutrientes que pueden incrementar la eutrofizacin y resultar en la muerte de los peces y los invertebrados.

La prueba de algas ayudar a determinar cules descargas son los principales contribuyentes de nutrientes y eutrofizacin. Los nutrientes estimularn el crecimiento de algas en el cuerpo receptor y resultarn en condiciones indeseables y toxicidad para los peces a travs de los bajos niveles de oxgeno disuelto cuando el exceso de algas muere. Existe informacin adecuada sobre cultivos y procedimientos de pruebas para muchas especies estndares.

Los requerimientos de equipo y de espacio no son amplios ni costosos. Una prueba completa crnica generalmente requiere slo de cuatro das. Las tcnicas de cultivo y de pruebas son fciles de aprender.

La capacitacin necesaria sobre las tcnicas de cultivo es relativamente mnima y puede ser aprendida frecuentemente de manuales y otra literatura, aunque es siempre preferible una capacitacin "prctica" dada por un tcnico experimentado. 4.1.2 Desventajas Las sustancias qumicas que slo son txicas para animales no sern detectadas por algas.

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La numeracin de las algas en las soluciones de prueba al final del perodo de prueba pueden ser largas y requerir tanto como un da completo para su realizacin.

Criterios para la seleccin de especies de algas 4.1.3Caractersticas Las especies "ideales" de algas para bioensayos deben tener las siguientes caractersticas: Ser representativas de un eslabn importante en la cadena alimenticia Muchas especies de algas verdes y diatomeas son alimento para el zooplancton y, por lo tanto, son apropiadas para bioensayos. Otras especies, tales como el alga filamentosa azul- verde, no son una buena fuente de alimento para organismos superiores en la cadena alimenticia y frecuentemente son indeseables debido a los problemas de sabor, olor y subproductos que son txicos para los animales. Disponibilidad en cultivo puro El aislamiento de un cultivo puro del agua natural requiere de mucho tiempo y habilidad. Se recomienda una especie proveniente de un laboratorio de abastecimiento algal.
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Las algas crecern en una clula simple o en pequeos grupos de clulas

suspendidos en el agua. La preparacin de las algas para la prueba requiere de una

suspensin uniforme de las clulas algales. Las formas filamentosas o las colonias grandes de clulas no pueden prepararse fcilmente en una suspensin uniforme. Asimismo, el conteo microscpico, una forma comn de determinar el crecimiento algal, no es posible con formas filamentosas. Adems, las especies que crecen adheridas a superficies no son tan deseables como las especies que crecen flotando libremente en el agua.

Suficiente informacin sobre requisitos para el crecimiento de nutrientes. Las especies de algas varan en sus requisitos para cultivos, tales como nutrientes, temperatura, luz y aeracin. Estos requisitos se establecen a travs de pruebas exhaustivas y los de muchas especies ya son conocidos. Se deben evitar las especies de las que no se tiene tal informacin. Fcilmente cultivables a temperatura ambiental. Las especies algales que requieren soluciones complejas de nutrientes o condiciones especiales de temperatura y luz complicarn innecesariamente el bioensayo. Asimismo, deben evitarse las especies con perodos de descanso o ciclos complejos de vida. Preferentemente, las especies de prueba deben mantenerse en una fase vegetativa de crecimiento por perodos indefinidos de tiempo, cuando se les abastece de solucin fresca de nutrientes regularmente. Capaz de crecer en cultivos de agar

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Los cultivos puros de algas pueden frecuentemente mantenerse por un ao o ms en cultivos de agar dentro de un refrigerador oscuro. Las especies que se adaptan a estas condiciones son deseables como un abastecimiento inmediato de cultivo puro y pueden mantenerse siempre listas con poco esfuerzo.

5. Recomendaciones para las especies de prueba Los ensayos algales se recomiendan adems de otras pruebas para consumo de oxgeno, tales como DBO si la eutrofizacin es un problema en el cuerpo de agua receptor. Selenastrum capricornutum, es un alga verde unicelular, usada extensamente para trabajo de bioensayos y de la que existe considerable informacin sobre sus caractersticas de crecimiento y sus mtodos de cultivo. Tambin es apropiada como alimento para invertebrados tales como Daphnia y, por lo tanto, puede tener un doble propsito en el laboratorio. La U.S. EPA (1985) proporciona los mtodos de cultivo y de prueba. Cualquier especie que tenga las caractersticas requeridas puede usarse como un organismo de prueba. Muchas algas verdes y diatomeas han sido usadas satisfactoriamente, aunque hay una tendencia a preferir las algas verdes. Una especie regional puede ser ms representativa de las poblaciones naturales que el Selenastrum capricornutum.

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6. Principales grupos de algas utilizadas en pruebas de toxicidad. En forma general para la evaluacin de txicos en ambientes acuticos se utilizan especies del grupo de las clorfitos o algas verdes. Entidades internaciones tales como ISO. OMS, OECD, USEPA Y ASTM recomiendan la utilizacin de especies de este grupo por su amplia distribucin y sensibilidad . las especies mas usadas en bioensayos se presentan en el siguiente cuadro.

Teniendo en cuenta lo anterior al seleccionar las algas para pruebas de toxicidad deber contar con: Alagas en cultivo puro. Informacin sobre requerimientos nutricionales. Fcilmente cultivables a temperatura ambiente. Capaces de crecer en medios de cultivos. Dentro de las algas verdes, la especie ms utilizada es Selenastrum capricornutum cuyo nombre fue cambiado recientemente a Pseudokirchneriella supcapitata esta alga es

unicelular y se ah usado en bioensayos extensos, razn por la cual existe considerable informacin sobre sus caractersticas de crecimientos y mtodos de cultivo.
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Praton de crecimiento de microalgas. Un medio con los requerimientos nutricionales y ambientales ptimos para en el crecimiento de microalgas unicelulares es similar al de un cultivo bacteriano bajo condiciones estaticas.las algas utilizan los nutrientes presentes atraves de una ordenada. Compleja e interrelacionada serie de vas metablicas biocinticas para producir nuevo material o biomasa. Estos procesos metablicos permiten que los organismos aumente su tamao y despus de un periodo de tiempo la clulas se dividan y la poblacionaumente.la velocidad de crecimiento depender de la composicin y naturaleza fsica del medio y la capacidad de los organismos para sintetizar nueva biomasa. (Segn: M. Das. M.Baes. 2004)

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Organismos utilizados como especies de prueba de bioensayo.

Recomendaciones En general, es preferible utilizar organismos criados en el laboratorio en vez de los recolectados en el campo porque los exmenes estandarizados requieren de un

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abastecimiento siempre disponible de organismos en buena salud provenientes de cultivos de condiciones conocidas y constantes. Los bioensayos hechos en el laboratorio usando organismos recolectados en el campo han sido menos satisfactorios, con muy pocas excepciones. Los organismos recolectados en el campo son ms satisfactorios cuando el laboratorio est cerca al lugar de recoleccin y el abastecimiento de agua desde all est siempre disponible.

BIBLIOGRAFIA
http://www2.ine.gob.mx/publicaciones/libros/573/cap6.pdf http://www.bvsde.paho.org/bvsaca/fulltext/manual/parte2.pdf http://www.bvsde.paho.org/eswww/fulltext/publica/orimuest/omnanx51.html

Pruebas de toxicidad acutica: fundamentos y mtodos. Autor: Mara Consuelo Das Baes.Martha C. Bustos Lpez. Editorial: Universidad Nacional de Colombia Primera edicin 2004 Bogot-Colombia

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