OS AGENTES BIOLGICOS

NDICE
Assunto Pgina
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
21
22
23
24
25
26
27
28
29
30
31
32
33
34
35
36
37
38
ntroduo
Classificao dos agentes patognicos
Tamanho de clulas sang. e de alguns micro organismos
Vrus
Bactrias
Protozorios
Fungos
Helmnteos
Artrpodes
Derivados animais e vegetais
Doenas ocupacionais provocadas agentes biolgicos
Brucelose
Carbnculo
Ttano
Tuberculose
Hepatite B
Anquilostomase
Leishmaniose
Leptospirose
Avaliao dos agentes biolgicos
As vias de ingresso
Amostragem por sedimentao
Amostragem em meio lquido
Amostragem por filtrao
Amostragem por impactao
Coletor de Andersen
Coletor de fenda
Coletor RCS(Sistema Centrfugo Reuter)
Sistema SAS(Sistema de Ar Superficial)
Tcnicas de amostragem em superfcies
Organizao da amostragem ambiental
Grupos de risco em relao ao tipo de laboratrio
Medidas de controle
Esterilizao por vapor
Desinfetantes qumicos
Compostos de cloro desinfetantes
Legislao brasileira sobre agentes biolgicos
Bibliografia
1
INTRODUO
Os trabalhadores das reas: Hospitalar, Farmacutica, Alimentcia, Agro-pecuria,
Matadouros, Cemitrios, reas de Pesquisa e outras atividades, esto expostos
aos agentes biolgicos por contato direto ou por contato indireto atravs de
materiais e meios contaminados.
Os agentes biolgicos aqui considerados so: os micro organismos como virus,
bactrias, protozorios, fungos, e os parasitas, artrpodes e derivados animais e
vegetais.
VRUS
BACTRAS
PROTOZOROS
FUNGOS
ARTRPODES
PARASTAS(Helmnteos)
DERVADOS ANMAS E VEGETAS
CLASSIFICAO DOS AGENTES PATOGNICOS
Segundo a Diretiva 90/679 da CEE, os agentes patognicos so classificados pr
grupo de risco de 1 a 4 conforme sua periculosidade
CARACTERSTICAS DO AGENTE
GRUPO DE RISCO
! " #
FCL DE PROVOCAR UMA DOENA NO SI$ SI$ SI$
A DOENA SE PROPAGA FCLMENTE NO SI$ SI$
A DOENA SE PROPAGA FCLMENTE E NO
SE CONHECE UM TRATAMENTO EFCAZ.
NO SI$
Em relao ao grau de exposio a agentes patognicos, duas situaes devem
ser consideradas:
1) As tarefas no exigem a manipulao de microorganismos, porm provvel
que existam no ambiente de trabalho( hospitais, matadouros, tneis, etc)
2
2) O trabalho consiste em manipulao ou emprego de
microorganismos(processos de fermentao, diagnsticos mdicos, trabalhos de
pesquisa e investigao)
TA$AN%O DE C&LULAS SANGUNEAS
E DE ALGUNS $ICRO'ORGANIS$OS(

FAGCTO : 20 microns
LNFCTO : 10 microns
GLBULO VERMELHO : 8 microns
BACTRA : 1 - 3 microns
RCKETSA : 0,3 - 1 microns
3
VRUS : 0,03 - 0,3 microns
)IRUS
So as formas mais simples de vida, de tamanho muito pequeno, sendo
constitudos por material gentico, ADN e RDN e uma cobertura proteica.
Seu ciclo vital passa necessariamente por um hospedeiro, isto , para se
reproduzir precisa penetrar em algum ser vivo.
O vrus infecta o ser vivo injetando seu material gentico nas clulas do
hospedeiro. Uma vez dentro da clula, o material gentico interfere no
desenvolvimento das clulas do hospedeiro e se serve da estrutura biolgica da
clula para fazer cpias de si mesmo em nmero suficiente para romper as
paredes celulares ficando deste modo em liberdade para infectar novas clulas.
Nossa principal defesa natural contra os virus a formao de anticorpos das
clulas B, produzidos pela medula ssea. Uma outra substncia natural eficaz o
nterferon, que interfere na susceptibilidade das clulas ao virus e que apenas
recentemente foi produzido comercialmente. Poucas drogas mostram-se teis no
tratamento de um nmero limitado de vrus. Atualmente a principal terapia a
preveno atravs da imunizao, que induz a formao de anticorpos no
organismo antes que o vrus ataque. Os vrus causadores do cncer, ou
relacionados a ele, tem sido objeto de extensa pesquisa.
Dentre as doenas provocadas por virus (viroses) encontramos:
)IROSES
Resfriado comum
Gripe
Pneumonia
Psitasicose
Rubola
Sarampo
Herpes (herpes zorster)
Varicela
Varola
Febre Aftosa
Enterovirose
Raiva
Hepatite
Febre Amarela
Febre Hemorrgica
Caxumba
Tracoma
Arboviroses
Citomegalia
4
BACT&RIAS
So organismos pequenos, porm maiores que os vrus, sendo capazes de viver
em um meio adequado sem passar por um hospedeiro intermedirio, sendo em
grande parte patognicos.
So capazes de liberar esporos, que so formas de vida resistentes s condies
adversas, podendo resistir durante anos s condies de alta temperatura, seca,
falta de nutrientes, e recuperando seu estado normal e sua capacidade infectante
ao entrar em contato com um meio adequado para seu desenvolvimento.
As bactrias so estruturas bem maiores que os vrus e podem apresentar quatro
formatos:
- arredondadas *+o+os,
- bastonetes retos *-a+i.os,
- bastonetes curvos */i-0i1o,
- bastonetes helicoidais *2s3i0i.os,
Dois grupos de drogas so utilizados para tratar infeces bacterianas:
-a+t20iostati+os (evita a multiplicao das bactrias)
anti-i4ti+os (que rompe a membrana celular ou altera o
metabolismo das bactrias, resultando na sua morte
Os antibiticos desenvolvidos em meados do sculo 20, tem se provado eficazes
contra uma srie de infeces bacterianas, anteriormente incurveis. Alguns tipos
de imunizao tambm so eficazes.
B A C T & R I A S
Estreptococias
Doena Reumtica
Endocardite nfecciosa
Estafiloccias
Septicemia
Pneumonias Bacteriana
Tuberculose Pulmonar
Lepra
Difteria
Coqueluche
Shigeloses
Salmoneloses
Febre Tifide
Enterite
Brucelose
Listeriose
Peste
Clera
Ttano
Meningite meningococ.
Carbnculo
Botulismo
nfeces Hospitalares
PROTO5O6RIOS
5
So organismos unicelulares, sendo alguns deles parasitas dos vertebrados.
Seu ciclo vital complexo, necessitando em alguns casos de vrios hospedeiros
para completar seu desenvolvimento.
A transmisso de um hospedeiro a outro geralmente feita atravs de insetos.
Os protozorios embora microscpicos, so maiores que as bactrias e possuem
uma estrutura celular mais evoluda.. As Amebas, causadoras da disenteria
amebiana pertencem a esse grupo. Os protozorios no so afetados por
antibiticos na concentrao usualmente letal para as bactrias.. Alguns como o
agente causador da malria, apresentam um ciclo de vida bastante complexo.
Algumas doenas provocadas por protozorios:
PROTO5O6RIOS
Doena de Chagas
Doena do Sono
Amebase
Malria

Toxoplasmose
Leishmaniose
Giardiose
FUNGOS
So formas complexas de vida que apresentam estrutura vegetativa denominada
miclio.
Esta estrutura vegetativa surge da germinao de suas clulas reprodutoras ou
esporos.
Felizmente pouqussimos fungos infestam os seres humanos e aqueles que o
fazem geralmente colonizam a superfcie (pele, unhas e cabelos), causando
doenas como p de atleta, tinha e sapinhos. Entretanto existem diferenas
geogrficas: nas Amricas, por exemplo existem muitos fungos invasivos
causadores de doenas como a pneumonia.
%EL$NTEOS
So animais pluricelulares com ciclos vitais complexos e com diversas fases de
desenvolvimento, sendo freqente cada uma dessas fases de
desenvolvimento(ovo-larva-adulto) em diferentes hspedes (animais/homens) e
6
cuja transmisso de um hospedeiro a outro se realiza por diferentes vetores
(fezes/gua/alimentos/insetos/roedores)
Os Vermes parasitas afetam o intestino humano de vrias maneiras, e em alguns
casos migram para outros rgo do corpo, podendo causar grandes cistos ou
inchao dos membros, como na elefantase. Nesse grupo incluem-se nematides,
ancilstomos, lombrigas e solitrias.
ARTRPODES
So organismos pluricelulares com ciclos vitais complexos e com diversas fases
de desenvolvimento(ovo-larva-ninfa-adulto) que podem ser completadas em
diversos hspedes sendo transmitidas por vrios vetores.
Alguns espcies so endoparasitas, outras no penetram no corpo, podendo
causar efeitos adversos atravs de toxinas inoculadas.
Os Artrpodes, como piolhos, pulgas e caros, infestam os seres humanos e
atuam como vetores de outros patgenos, como causadores de tifo e peste.
De uma forma geral chamamos de parasitas os artrpodes, Protozorios e
Vermes e podem provocar as seguintes doenas:
P A R A S I T A S

Espiroquetas
Leptospirose
Sfilis
Bouba

Helmintos
Ancilostomase
Ascaridase
Tenase

Cisticercose
Esquistossomose
Oxiurase
Tricocefalose
DERI)ADOS ANI$AIS OU )EGETAIS
Estes derivados exercem efeitos do tipo alrgico ou irritante, podendo atacar
principalmente a pele e as vias respiratrias.
Substncias antgenas(antibiticos, protenas, enzimas, polisacardeos)
Micotoxinas
Derivados drmicos
Plem
7
Madeiras (ps)
Excrementos
DOENAS OCUPACIONAIS PRO)OCADAS POR AGENTES BIOLGICOS
Os riscos biolgicos ocupacionais so aqueles que derivam do contato dos
trabalhadores com vegetais, animais ou seus produtos ou excrees durante suas
atividades laborais podendo conduzir a processos infecciosos, txicos ou
alrgicos.
As infeces podem ser agudas ou crnicas e podem ser provocadas pelos mais
diferentes organismos vivos: bactrias, virus, riketsias, fungos, ou parasitas como
certos protozorios, helminteos e artrpodes.
As vias de ingresso so vrias: inalao, ingesto, penetrao percutnea ou
parenteral, sendo todas elas igualmente importantes, diferentemente dos agentes
qumicos, pois estes se reproduzem.
Uma fonte importante de riscos biolgicos so as doenas transmitidas ao homem
pelos animais (zoonoses).
Outras fontes importantes de contaminao biolgica so os hospitais, e
pesquisas mdicas ou biolgicas.
Outras fontes de contaminao so as indstrias alimentcias, farmacuticas, os
frigorficos e atividades de abate.
, BRUCELOSE
Tambm chamada de Febre de Malta ou febre Mediterrnea, produzida pela
Brucella Melitensis e consiste em febre contnua, intermitente ou irregular, de
durao varivel, com dores de cabea, fraqueza, sudao profusa, calafrios,
depresso e dores generalizadas.
Os hospedeiros mais comuns so: vacas, porcos, ovelhas, cabras, bfalos,
alpacas e cavalos.
A transmisso feita por contato com os tecidos, sangue, urina, secrees
vaginais, produtos abortivos, principalmente a placenta dos animais contaminados.
O controle deve ser feito atravs da educao sanitria, da desinfeco das rea
contaminadas e da segregao dos animais contaminados.
Pasteurizar o leite e seus derivados. Quando a pasteurizao impossvel, ferver
o leite.
8
Normalmente o tratamento dos contaminados feito com teraciclina e
estreptomicina.
!, CARB7NCULO
Tambm chamado de Pstula Malgna, Edema Malgno, doena dos cardadores
de l , Antrax.
O agente infecioso o Bacillus Anthracis. uma doena aguda que afeta
principalmente a pele, podendo afetar tambm o mediastino e o intestino e temos
tres tipos de Antrax:
- Cutneo
- Pulmonar
- Abdominal
Os esporos do Bacillus Anthracis so muito resistente, podendo permanecer na
terra durante anos, aps a contaminao .
A contaminao da pele se d por contato direto , a respiratria pela inalao de
esporos e a contaminao intestinal por ingesto de carne de animais
contaminados.
O controle se d atravs de vrias aes:
- Vacinaes das pessoas submetidas a risco elevado
- Educao sanitria
- Controle de poeira e ventilao adequada
- Colocao dos comedores em reas arejadas
- Lavagem criteriosa, esterilizao e desinfeo da pele, l, pelos,
farinhas e ossos.
- Exame dos animais mortos.
- Vacinao de outros animais.
", T&TANO
uma doena aguda, produzida pelo bacilo do ttano (Clostridium Tetani) , que
cresce anaerobicamente na ferida produzindo uma neurotoxinna.
A doena caracteriza-se por contraes musculares dolorosas, primeiro nos
msculos do pescoo e depois do trax rigidez abdominal e ao final expresso
facial conhecida por "riso sardnico'
A transmisso se d por esporos que penetram no corpo atravs de feridas,
contaminadas com sujeira, poeira, fezes animais e humanas.
9
O controle feito atravs de educao sanitria e imunizaes.
#, TUBERCULOSE
A tuberculose provocada no homem pelo Mycobacterium Tuberculosis e no gado
pelo Mycobacterium Bovis.
A tuberculose pulmonar a mais freqente e a infeco inicial costuma passar
desapercebida; a sensibilidade tuberculnica aparece de 3 a 10 semanas como
manifestao da resposta imunitria infeco; as leses normalmente se curam
e no deixam alteraes residuais, exceto as calcificaes pulmonares e dos
ndulos linfticos traqueobronquiais.
O principal hospedeiro o homem, seguido do gado.
A transmisso feita por exposio aos bacilos presentes nos ncleos de Weils
procedente do escarro de pessoas com tuberculose infecciosa. A exposio
intensa e prolongada a um caso infeccioso pode transmitir a doena por contato.
Tambm pode ocorrer por contato indireto com objetos contaminados ou poeira, e
tambm por invaso direta atravs das membrana mucosas ou eroses na pele.
A tuberculose bovina devida exposio ao gado bovino, geralmente por
ingesto de leite no pasteurizado ou produtos lcteos e as ve3zes atravs do ar,
como no caso dos agricultores. Por via cutnea costuma ocorrer em veterinrios e
pessoal que cuida do gado.
As pessoas com risco de tuberculose humana so as que se ocupam de trabalhos
em laboratrios, cuidado de doentes em hospitais, etc. Devem observar as regras
de higiene e de proteo ante os contatos.
A tuberculose bovina detectada pelo teste da tuberculina e os positivos devem
ser sacrificados.
%EPATITE B
Tambm chamada de hepatite srica e o agente infeccioso o virus da hepatite B
(HBV)
O incio dos sintomas aparece na forma de anorexia, dores abdominais, nuseas e
vmitos, as vezes artralgias e erupes, com apresentao de ictercia. Pode no
haver febre ou se houver pode ser moderada.
O virus da hepatite B tem um antgeno de superfcie (HbsAg), denominado
antgeno Austrlia, que pode ser detectado no soro desde uma semanas antes do
10
incio dos sintomas at uns dias, semanas ou meses depois e persiste nas
infeces crnicas.
O mecanismo de transmisso se d por inoculao cutnea(endovenosa,
intramuscular, subcutnea e intradrmica) de sangue, plasma, soro, trombina,
fibrinognio, hemacias e outros produtos hemticos de uma pessoa infectada.
O controle feito atravs de uma disciplina rgida nos bancos de sangue e da
vacinao de todo o pessoal sanitrio como mdicos, dentistas e pessoal de
laboratrios.
AN8UILOSTO$ASE
O agente infeccioso o Ancylostoma Duodenale e provoca um parasitismo
intestinal que produz debilidade e anemia. A larva penetra atravs da pele e por
vasos e chegam aos pulmes, atravessa a parede dos alvolos e sobre atravs da
traquia e da faringe, por ingesto passa ao esfago e intestino delgado, aonde se
fixa, se desenvolve e se transforma em verme adulto.
Os hospedeiros so pessoas infectadas, que eliminam ovos pelas fezes e a fonte
de infeco o solo que contem larvas infectantes em condi;ces de temperatura
e umidade adequadas.
O controle feito pelo tratamento do hospedeiros, proteo da populaao s,
com medidas de educao sanitria para evitar a contaminao, en relao com
uma estrita higiene pessoal e proteo dos ps e mos com botas e luvas.
LEIS%$ANIOSE
provocada por um parasita flagelado Leishmania Tropica (L.cutnea) e
Leishmania Donovani( L.Visceral)
A leishmaniose cutnea uma enfermidade polimrfica da pele e mucosa que se
caracteriza pela apario de leses ulceradas.
A leishmaniose visceral uma enfermidade sistmica infecciosa crnica que se
caracteriza por febre, hepatoesplenomegalia, linfoadenopatias, anemia com
leucopenia. Se no for tratada, costuma ser mortal.
A Leishmaniose cutnea tem como hospedeiro os ratos selvagens e a
leishmaniose visceral o homem, cachorros domsticos e roedores.
11
O mecanismo de transmisso atravs da picadura de um inseto do gnero
Phlebotomus, contaminado, depois de Ter-se alimentado de um hspede
infectado.
O controle feito atravs da eliminao dos animais hospedeiros. Evitar os
pntanos infestados e as zonas florestais afetadas principalmente depois do por
do sol, utilizao de repelentes contra os insetos e de roupa protetora se a
exposio inevitvel.
LEPTOSPIROSE
Tambm chamada de enfermidade de Weil, e Febre cterohemorrgica.
O agentes infecioso a Leptospira nterrogans
A leptospirose provoca febre, enxaqueca, calafrios, malestar, vmitos, mialgias e
conjuntivite, ocasionalmente meningite, erupes. As vezes ictercia, insuficincia
renal, anemia. A doena dura de poucos dias a trs semanas e a letalidade
baixa.
Os hospedeiros so: gatos, cachorros, cavalos e porcos. Os roedores so
normalmente hspedes portadores.
A transmisso feita por contato com a pele, especialmente se est lesionada,
com a gua, terreno mido ou vegetao contaminada com urina de animais
infectados, ao se banharem ou por imerso acidental ou ocupacional. Por contato
direto com a urina ou tecidos de animais infectados, e ocasionalmente por
ingesto acidental de alimentos contaminados por urina de ratos infectados.
O controle feito pela proteo dos trabalhadores de risco com uso de botas e
luvas, com o controle de gua potencialmente contaminadas e com o controle dos
hospedeiros.
OUTRAS DOENAS OCUPACIONAIS TRANS$ITIDAS POR ARTRPODES
PALUDSMO ANOPHELES
FEBRE AMARELA MOSQUTO
DENGUE PHLEBOTOMUS
FEBRE RECORRENTE ANOPLUROS)POLHOS)
PESTE BUBNCA AFANPTEROS(PULGAS)
TFO EXANTMCO(RCKETSOSE) ANOPLUROS(POLHOS)
As Ricksetsioses formam um conjunto de doenas transmissveis de carter
endemo-epidrmico, produzidas por microorganismos intracelulares pertencentes
12
ao gnero Ricketsiae, transmitidos geralmente atravs de diferentes artrpodes.
Se caracteriza por febres altas, estado tfico e exantema.
A)ALIAO DOS AGENTES BIOLGICOS
Seguindo a metodologia de pesquisa higinica, em primeiro lugar teramos que
identificar o contaminante, em segundo lugar coletar a amostra, de forma mais
r3epresentativa possvel e em terceiro lugar avaliar o problema de higiene
exposto..
Os contaminantes biolgicos em sua maioria so microorganismos vivos,
habitualmente de tamanho microscpicos, sem cheiro, cor ou outra propriedade
que nos permite detect-los atravs de nossos sentidos.
Encontraremos tambm contaminantes biolgicos transportados por partculas de
p ou e, suspenso no ambiente de trabalho, alm disso os encontraremos na
gua, nas matrias primas e equipamentos utilizados nas indstrias, na superfcie
da pele dos trabalhadores, nas superfcies de trabalho, etc.
Devido s suas caractersticas e necessidade vitais, os tipo de contaminantes
biolgicos aerotransportados podero ser provavelmente formas resistentes ao
ar seco(gros de plem, esporos, etc.). Porm ao mesmo tempo neste ambientes
poderemos encontrar aerosis formados por gotculas que contenham
microorganismos em condies de umidade adequadas para sua sobrevivncia.
Levando em considerao essas caractersticas, a amostragem deve ser feita com
um equipamento de amostragem que permita uma ampla faixa de coleta e que
assegure a sobrevivncia do dos organismos coletados.
Como vimos a avaliao dos agentes biolgicos consiste em comparar os
resultados das medies com critrios tendo-se em conta uma srie de fatores:
Tipo de contaminantes e efeitos individuais e combinados
Causas da contaminao
Vias de entrada
Tempo real de exposio
Tipo de proteo utilizada e sua eficincia.
Vias de eliminao
Melhoras tcnicas que se podem adotar
Tipo de atividade
13
As /ias 92 ing02sso 9os ag2nt2s -io.4gi+os
As vias de entrada dos agentes biolgicos so as mesmas dos agentes qumicos,
s que neste caso, as vias digestiva e parenteral so to importantes como a
respiratria
VA RESPRATRA (Nariz, boca e pulmes)
PERCUTNEA (Pele)
DGESTVA (Boca e tubo digestivo)
PARENTERAL (feridas, cortes e arranhes)
TCNCAS DE AMOSTRAGEM AMBENTAL
Existem vrias tcnica para coleta de microorganismos como: sedimentao,
coleta em meio lquido, filtrao, impactao etc.
, S29i:2nta;1o
Consiste na exposio de placas de Petri ao ambiente durante um certo tempo.
o mtodo mais sensvel de avaliar a contaminao biolgica no ar. Consiste em
distribuir nas zonas escolhidas para a amostragem, placas de Petri que
contenham meio de cultura adequados e durante um tempo controlado.
VANTAGENS DO MTODO
- Baixo custo
- Facilidade de manipulao
DES)ANTAGENS DO $&TODO(
- No possvel uma avaliao quantitativa do nmero de
microorganismos
- O ambiente no pode Ter correntes de ar
- Para tempos de amostragens maiores que 20 minutos, uma certa
quantidade de microorganismos morre por secagem.
- No possvel coletar microorganismos contidos em partculas
menores que 3 micrmetros.
14
!, Co.2ta 2: :2io .<=ui9o *i:3ing20,
O ar amostrado passa atravs de um meio lquido contido em um recipiente de
lavagem (impinger), a seguir se faz a contagem do nmero de microorganismos
segundo mtodos microbiolgicos habituais.
VANTAGENS DO MTODO
- & 3oss</2. a 92t20:ina;1o 9o n>:20o 92 :i+0oo0ganis:os
- N1o 2?ist2 o 320igo 92 :o0t2 92 :i+0oo0ganis:os 3o0 s2+ag2:
DES)ANTAGENS DO $&TODO
' P02+isa 92 +20to t2:3o 2 92 :at20ia.
- Poder haver erros por contaminao do lquido
", Fi.t0a;1o
Por esse mtodo, o ar amostrado passa atravs de um filtro de gelatina.
Posteriormente o filtro colocado em uma placa com um meio de cultura, ou
dissolvido por um lquido apropriado, fazendo-se a contagem por mtodos
apropriados.
VANTAGENS DO MTODO
- adequado para coleta de microorganismos aerotransportados.
- Permite a avaliao quantitativa.
-
DESVANTAGENS DO MTODO
Permite um volume mximo de coleta de 250litros(valores maiores
permitem a secagem do ar produzindo alteraes nos microorganismos)
No consegue detectar contaminaes inferiores a 1 u.f.c./ m
3
de ar
(unidade formadora de colnias por metro cbico de ar), que o limite mximo
permitido nas unidades dotadas de fluxo laminar.
15
Alguns microorganismos so sensveis passagem de ar durante o
processo de filtrao.
#, I:3a+ta;1o
O mtodo se baseia no choque de um determinado volume de ar amostragem
sobre um meio de cultura.
Existem vrios equipamentos baseados neste princpio.
#', Co.2to0 92 An920s2n
um dispositivo de coleta formado por 6 placas circulares de impactao, dotadas
de orifcios com dimetros progressivamente decrescentes, com o que o ar que
passa de uma placa para outra sofra uma acelerao, variando o tamanho das
partculas que se sedimentaro por impactao.
DESVANTAGENS DO MTODO
- Possui baixa sensibilidade (acima de 7 ufc/m
3
).
#'!, Co.2to0 92 @2n9a
O ar aspirado atravs de uma fenda estreita mediante uma turbina, sendo
conduzido a uma placa de cultura dotada de movimento de rotao.
VANTAGENS DO MTODO
- Permite o estudo consecutivo de vrias amostras.
16
- O prprio tcnico pode cobrir as necessidade em relao aos meios de
cultura selecionados.
DES)ANTAGENS DO $&TODO(
- Custo elevado
- Existe o perigo de secagem dos microorganismos
- nadequado para ambientes de baixa contaminaqo(capelas com fluxo
laminar).
#'", Co.2to0 RCS*Sist2:a C2nt0<@ugo R2ut20,(
Um volume de ar amostrado impulsionado por uma hlice sobre uma cinta de
plstico portadora de alvolos justapostos que contem o meio de cultura
adequado.
As partculas e microorganismos aerotransportados so projetados pela ao da
fora centrfuga sobre o meio de cultura.
VANTAGENS DO MTODO
- Grande amplitude de medio
- Tempo de 30 Seg. a 5 minutos
- Vazo de 40 litros/minuto
- Sensibilidade de manipulao
- Baixos nveis sonoros(49 dBA)
- Grande reprodutibilidade dos valores obtidos.
DESVANTAGENS DO MTODO
- Medies prolongadas em condies de ar seco e alta
temperatura pode secar o meio de cultura.
- Difcil de avaliar a quantidade de ar, pois o ar entra e sai pelo
mesmo ponto.
#' A, Sist2:a SAS *Sist2:a 92 a0 su320@i+ia.,
17
No dispositivo SAS o ar amostrado passa atravs de uma superfcie perfurada, a
uma velocidade preestabelecida e durante um certo tempo, para ser conduzido
sobre uma placa de Petri.
)ANTAGE$ DO $&TODO
- Facilidade de manejo
- Baterias de alimentao recarregveis
- O tcnico pode selecionar os meio de cultura adequados.
- Ampla faixa de medio
- Tempo de cinco minutos(15 unid. De 20Seg.)
- Vazo de 90 a 180 litros/minuto
- As placas de Petri utilizadas permitem realizar amostragens de
superfcie.
DES )ANTAGENS DO $&TODO(
- Medies em ambientes muito secos e com temperaturas e
velocidades de vento altas podem ocasionar o ressecamento do
meio de cultura.
TCNCAS DE AMOSTRAGEM EM SUPERFCES
Esta tcnica utilizada quando h possibilidades de contaminao dos
equipamentos de trabalho, roupas, mobilirio, elementos de construo que por
suas caractersticas ou como conseqncia de desinfeco ineficiente, atuem
como possveis depsitos de contaminantes biolgicos.
, P.a+a 92 +ontato
uma placa que se encontra em um meio de cultura solidificado. Coloca-se essa
placa sobre a superfcie a ser avaliada e se pressiona, mantendo a placa imvel
durante o contato.
!, Es@02ga;o
Passa-se um chumao de algodo estril sobre a superfcie a ser avaliada. Este
mtodo objetiva amostrar locais de difcil excesso pelas placas de contato.
18
ORGANIZAO DA AMOSTRAGEM AMBIENTAL
SETOR Lo+a. 92 Posi;1o 9a
N>:20o 92 A:ost0ag2ns
A:ost0ag2: A:ost0ag2: Ini+ia. Rotina
Salas de cirurgia
Proximo mesa
de operao
1 Todos dias nas
2 1
a
s semanas
1 cada 15 dias
UT
Mveis 2 Todos dias nas
2 1
a
s semanas
1 todas as
semanas
Salas de parto
Proximo mesas 1 p/dia nas 3 pri-
meiras semanas
1 todas as
semanas
%OSPITAIS
Consultrios
Lugares diversos --- 1 todos os meses
Cozinha
Lugares diversos --- 1 todos os meses
Lavanderia
Pontos entrega
e retirada
--- 1 todos os meses
Dispensrio
Mveis --- 1 cada 15 dias
IND7STRIA
reas de
fermentao
Prximo rea de
trabalho
--- 1 todas as
semanas
ALI$ENTCIA
Armazns
Lugares diversos --- 1 todos os meses
LABORATOR(DE Capelas
Centro do fluxo
laminar
1 p/dia nas 2 pri-
meiras semanas
1 todas as
semanas
BACTERIOLOG(
Laboratrio
Lugares diversos --- 1 todos meses
19
SETOR
Lo+a. 92 Posi;1o 9a
N>:20o 92 A:ost0ag2ns
A:ost0ag2: A:ost0ag2: Ini+ia. Rotina
DESINFECO
Contr.eficinc.
de desinfec.
Locais de
amostragem
Lugares diversos

---
Amostra antes e
depois de cada
desinfeco
IND(COS$ET( Cmara estril
Proximo rea
de trabalho
1 p/dia na primei-
ra semana.
2 todas as
semanas
E FAR$AC(
Prod.antibitico
Proximo rea
de trabalho
1 p/dia nas 2 pri-
meiras semanas
3 todas as
semanas
20
GRUPOS DE RISCO E$ RELAO AO TIPO DE LABORATRIO
GRUPO DE
RISCO
CLASSIFIC( DO
LABORATRIO
EBE$PLO DE
LABORATRIO
EBE$PLO DE $I''
CROORGANIS$OS
I
Risco escasso,
individual e
comunitrio
B6SICO Ensino bsico
Bacillus subtilis
Escherichia coli K12
II
Risco individual e
moderado
Risco comunitrio
e limitado
B6SICO
(com cmara de
biosegurana ou se
necessrio, outros
dispositivos de prot.
Pessoal e
conteno fsica)
Servios primrio s
de sade; hosp.
Nvel
primrio;consultrio
s mdicos;
laboratrios de
diagnstico;ensino
universitrio;
laborat. de sade
pblica
Salmonella typhi
Virus Hepatite B
Mycobacterium
tuberculosis*
Virus CML**
III
Risco individual
elevado e risco
comunitrio
escasso
CONTENO
Laboratrios de
diagnstico
especializado
Brucella spp
Virus febre de Lassa
Histoplasma
capsulatum
I)
Risco individual e
comunitrio
elevado
CONTENO
$6BI$A
Laboratrios que
trabalham com
agentes
patognicos
perigosos
Virus de Marburg
Virus da febre aftosa
* - Quando se utilizam grandes quantidades ou concentraes elevadas, ou
quando as tcnicas levam produo de aerosois, estes e outros agentes devem
passar para o Grupo de Risco
** - Compreende laboratrios de investigao no nvel apropriado de Grupo de
Risco.
21
$EDIDAS DE CONTROLE
As medidas de controle devem obedecer uma hierarquia adotando-se
primeiramente as medidas mais eficientes que so as que se referem Fonte,
seguida das medidas em relao ao Percurso, no caso das medidas relativas
fonte no forem suficientes e por fim se essas medidas ainda forem insuficientes,
as medidas relativas aos Trabalhadores devem ser tomadas.
$EDIDAS PRE)ENTI)AS ADOTADAS NA FONTE
As medidas preventivas aplicadas na orgem de contaminao, tem por objetivo
evitar a presena de microorganismos ou pelo menos evitar que passem para o
meio ambiente.
SELEO DOS EQUPAMENTOS DE TRABALHO
SUBSTTUO DE MCROORGANSMOS
MODFCAO DO PROCESSO
ENCERRAMENTO DO PROCESSO
$EDIDAS PRE)ENTI)AS ADOTADAS NO PERCURSO
Essas medidas objetivam evitar que a proliferao dos contaminantes no meio
ambiente
LMPEZA E DESNFECO
VENTLAO
CONTROLE DE VETORES(Roedores, insetos, etc)
SNALZAO
22
RISCO BIOLGICO
SO$ENTE PESSOAL AUTORI5ADO
I92nti@i+a;1o 9o 0is+o CCCCCCCCCCCCCCCCCCCCCC
Pesquisador responsvel ___________________
E: +aso 92 2:20gDn+ia t2.2@ona0 3a0aE
T2.( t0a-a.FoECCCCCCCC T2.( Pa0ti+u.a0ECCCCCCCC
$EDIDAS PRE)ENTI)AS ADOTADAS NO TRABAL%ADOR
As medidas adotadas em relao ao trabalhador complementam as outras
medidas.
NFORMAO SOBRE OS RSCOS
TRENAMENTOS SOBRE OS MTODOS DE TRABALHO APLCVES
DMNUO DO NMERO DE PESSOAS EXPOSTAS
ROUPA DE TRABALHO COM DESENHO ESPECAL
ACOMPANHAMENTO MDCO
23
ESTERILI5AO POR )APOR*AUTOCLA)AGE$,
As autoclaves utilizam calor mido na forma de vapor saturado sob presso para
destruir microorganismos.
Esse processo dependente da temperatura, tempo, contato, e umidade para ser
efetivo, o mais eficiente mtodo para a destruio de riscos biolgicos ou
resduos infecciosos.
TE$PERATURAE A temperatura recomendada de 121 a 123 C, que atingida
na presso de 15psi
TE$POE O tempo necessrio para a esterilizao de 30 minutos aps atingida a
temperatura adequada.
CONTATOE Todas as reas da carga devem ter contato com o vapor. Sacos e
recipientes devem ser abertos para a total penetrao do vapor.
U$IDADEE A saturao do vapor essencial para a mxima transferncia de
calor. Bolses de ar ou suprimento inadequado de vapor pode causar uma falha
na esterilizao. A gua pode ser adicionada aos recipientes para auxiliar a
umidade.
PROCEDI$ENTOS DE SEGURANA NA ESTERILI5AO POR
AUTOCLA)ES(
A maioria das pessoas devem estar cientes de que as autoclaves contm vida e
vapor pressurizado. Queimaduras podem ser provocadas quando as portas no
forem fechadas corretamente ou quando forem abertas quando existir presso de
vapor na cmara.
SACOS DE RESDUOS INFECCIOSOSE As embalagens contendo resduos
infecciosos devem ser estocadas no laboratrio e transportada do laboratrio para
a autoclave em recipientes secundrios rgidos, a prova de vazamentos e com
tampa selada. O recipiente secundrio deve rotulado com as palavras "resduo
biolgico perigoso ou com o smbolo nternacional de risco biolgico com a
palavra "Risco Biolgico na tampa e nas laterais de forma que possa ser visto de
qualquer direo. O rtulo deve indicar o laboratrio de orgem.
)ESTI$ENTAE Luvas resistentes ao calor e capa de laboratrio devem ser
utilizados na remoo de peas da autoclave.
24
NUNCA COLO8UE RECIPIENTES SELADO NA AUTOCLA)E(
Garrafas grandes com boca pequena podem simular recipientes selados quando
cheios com muito lquido.
Nunca autoclave: peas contendo traos de solventes, qumicos volteis ou
corrosivos(fenol, cido nitroactico, eter, clorofrmio, etc), ou materiais radioativos.
A esterilizao pode ser mais rpida com a substituio de grandes volumes de
lquidos por vrios volume menores.
Espere o tempo suficiente para a carga resfriar e nunca abra a tampa ficando de
frente para ela.
Algumas autoclaves possuem um sistema de segurana que impede a abertura da
mesma em temperaturas acima de 80 graus centgrados.
A autoclave um recipiente sob presso, portanto sujeita as recomendaes da
NR-13.
DESINFETANTES 8U$ICOS
1)Os desinfetantes qumicos so utilizados para descontaminar superfcies
utilizadas com experimentos biolgicos e a sua seleo deve ser feita com base
em alguns fatores:
a) Natureza do agente biolgico
b) O tipo de superfcie a ser desinfectada.
c) O tempo de contato necessrio para a inativao do agente biolgico
d) O volume do desinfetante necessrio para a desinfeo
e) A toxicidade do desinfetante qumicos.
f) A possibilidade de reao do desinfetante com a carga.
2) Na utilizao de um desinfetante qumico lembre-se que voc est manipulando
produtos que podem ser txicos, inflamveis, corrosivos e carcingenos. Utilize
sempre proteo adequada.
Na preparao de diluies, utilize uma capela, ou rea aberta e bem ventilada.
Na preparao de mistura, verifique se existe incompatibilidade entre os produtos.
3) Permita um tempo de contato suficiente para a completa desinfeco.
4) Evite a utilizao de produtos no diludos ou concentrados.
5) Os desinfetantes mais comumente utilizados so:
a) Compostos de Cloro f) Paraformaldedo
b) lcool Etlico g) Formaldedo
25
c) Comp.quatern.de amnia h) Glutaraldedo
d) Fenlicos i) xido de Etileno
e) odofor
SELEO DOS DESINFETANTES 8U$ICOS
A seleo dos desinfetantes qumicos essencial para a segurana e a qualidade
do servio de desinfeco.
A tabela 1 indica os produtos mais utilizados, bem como a sua eficincia para os
diversos tipos de microorganismos, bem como a concentrao ideal de aplicao
Questes importantes na utilizao de produtos qumicos para a desinfeco:
a) Ele inativado por matria orgnica?
b) afetado por gua quente?
c) Deixa resduos?
d) corrosivo?
e) irritante da pele, olhos e pulmes?
f) txico( por absoro da pele, ingesto ou inalao)?
g) Possui uma meia vida efetiva maior que uma semana?
POSS)EIS APLICAGES DOS PRODUTOSE
Superfcies de trabalho
Limpeza de vidrarias
Desinfeco de superfcies de equipamentos estacionrios ou portteis.
Lquidos tratados para descarte( amostra de culturas, culturas emplaca de
Petri, amostra de sangue, urina etc.)
TABELA ( D2sin@2tant2s 8u<:i+os
D2sin@2tant2 Di.(
*H,
Ca0a+t2
0isti+as
E@i+iDn+ia Pot2n+ia.
92 a3.i+(
$a0+a
a - + 9 2
Alcool Etlico 70-85 f, h, i I I JJ 1, 2 e 3
Alcool
soproplico
70-85 f, h, i I I JJ 1, 2 e 3
Comp. de Cloro 0,01- a, c, d, f, g,h I I 1, 2, 3 e 4 Clorox,
26
5 Purex
Formaldedo
liquido
4-8 c, e, f, h, i I I I 1, 2, e 3
Glutaraldedo 2 c, e, f, h, i I I I I I 1, 2 e 3 Microkle
ne
odofor 75pp
m
a, c,d,e,f,h, i I I I 1, 2 e 3 Wescod
yne
-Betady
ne
Paraformaldedo 0,3
g/ft3
c, e, f, g, h I I I I I 5
Comp. Fenlicos 0,2-5 b,c,d,e,f,h,i + + ** + 1, 2 e 3 Lysol
Comp. Quatern.
de Amnia
0,1-2 a, b, e, f, h, i + + 1, 2 e 3 Roccal
A3.i+a;K2s 9a Ta-2.a
, E@2ti/i9a92
J
JJ
I

Para uso em faixa ampla

As variveis dependem do
virus
Mais efetiva
Menos efetiva
a
-
+
9
2
Bactria vegetativa
Lipoviroses
Hidroviroses
Esporos bacterianos
Fungos
!, Ca0a+t20<sti+as I:3o0tant2s ", Pot2n+ia. 92 A3.i+a;1o
a
-
+
9
2
@
g
F
i
nativado por matria
orgnica
Afetado por gua quente
Residual
Corrosivo
rritante da pele
rritante dos olhos
rritante respiratrio
Txico(absoro,
ingesto,inal.)
Meia vida maior que 1

!
"
#
A
Superfcies de trabalho
Vidraria suja
Descontamin.de superfcies de
equipamentos portteis e fixos
Lquidos tratados para descarte
Descontaminao total para
descontaminao.
27
semana.
CO$POSTOS DE CLORO DESINFETANTES
APLICAO
Cloro geralmente utilizado na forma de hipocloritos, um desinfetante universal,
sendo ativo contra todos os microorganismos incluindo esporos de bactrias.
As aplicaes potenciais para cloro no laboratrio como desinfetante so:
1) Superfcies de trabalho
2) Vidraria contaminada
3) Descontaminao de superf. De equipamentos fixos ou portteis.
4) Lquidos t5atados para descarte.
USO E$ LABORATRIOSE
Muitos compostos ativos de Cloro so disponveis em vrias concentraes;
embora a mais utilizada no campo de desinfeo qumica o Hipoclorito de Sdio.
Os branqueadores de roupa so solues de hipoclorito de Sdio a 5,25% ou a
52.500 ppm. Note que a 10% ou 1:10 de diluio de branqueador resultar
numa soluo de cloro a 0,525% ou 5.250 ppm.
Centro de Controle de Doenas (CDC) recomenda 500 ppm (1:100 de diluio de
branqueador) a 5.000 ppm (1:10 de diluio de branqueador para inativar o Virus
da munodeficincia Humana.
ESTABILIDADE DAS SOLUGES DE CLORO
As solues de cloro gradualmente perde a atividade, assim solues novas
devem ser preparadas freqentemente. Solues diludas devem ser repostas a
cada 24 horas.
A estabilidade das solues de Cloro afetada pelos seguintes fatores:
1) Concentrao de Cloro,
2) Presena de concentrao de catalisadores como Cobre ou Nquel,
3) pH da soluo,
4) Temperatura da soluo,
5) presena de material orgnico,
6) Radiao Ultravioleta.
As solues de Cloro devem ser as seguintes caractersticas para a mxima
estabilidade:
28
1) Baixa concentrao de Cloro,
2) Ausncia ou baixo teor de catalisadores como o Cobre e o Nquel,
3) Alta alcalinidade,
4) Baixa temperatura,
5) Ausncia de materiais orgnicos,
6) Proteo da luz ultravioleta atravs do armazenamento longe da luz em
recipientes fechados.
FATORES 8UE AFETA$ A ATI)IDADE BIOCIDA DO CLORO
3% - O Cloro mais eficiente em pHs baixos
T2:320atu0a - Um aumento na temperatura produz um aumento na
atividade batericida.
Con+2nt0a;1o - Um aumento de quatro vezes no cloro, resultar em 50%
no tempo de desinfeco e o dobro resultar em uma reduo no tempo de
desinfeco de 30%.
$at20ia. O0gLni+o - O material orgnico consumir o cloro disponvel.
Se o material orgnico contiver protenas, a reao com o cloro formar
Cloraminas que tem alguma atividade antibacteriana. As perdas devido aos
materiais orgnicos so mais significantes se pequenas quantidades de
cloro so utilizadas.

Du02Ma - A dureza da gua no tem influncia na reduo da ao
antibacterial do hipoclorito de sdio.
A adio de amnia ou amino compostos - A adio de amnia e
compostos de nitrognio reduzir a ao antibactericida do cloro.
OUTROS CO$POSTOS DE CLORO DISPON)EIS
Outros compostos de cloro ativos disponveis so: cloro lquido, dixido de
cloro, cloraminas inorgnicas, cloraminas orgnicas e halozone
O cloro pode causar irritao dos olhos, pele e pulmes, por isso deve-se
utilizar culos contra respingos, luvas de borracha, aventais etc.
29
LEGISLAO BRASILEIRA SOBRE AGENTES BIOLGICOS
NR-15 Anexo 14
Considera-se dois graus de insalubridade para agentes biolgicos, grau mximo e
grau mdio, que so caracterizados atravs de avaliao quantitativa, atravs de
inspeo aos locais de trabalho.
INSALUBRIDADE DE GRAU $6BI$O
Trabalhos ou operaes em contato permanente com:
Pacientes em isolamento por doenas infecto-contagiosas, bem como
objetos de seu uso, no previamente esterilizados;
Carne, glndulas, vsceras, sangue, ossos, couros, plos e dejees de
animais portadores de doenas infecto-contagiosas (Carbnculo,
Brucelose, Tuberculose);
Esgotos (galerias e tanques); e
Lixo Urbano (coleta e industrializao).
INSALUBRIDADE DE GRAU $&DIO
Trabalhos e operaes em contato permanente com pacientes, animais ou com
material infecto-contagioso, em:
Hospitais, servios de emergncia, enfermarias, ambulatrios, postos de
vacinao e outros estabelecimentos destinados aos cuidados da sade
humana (aplica-se unicamente ao pessoal que tenha contato com os
pacientes, bem como aos que manuseiam objetos de uso desses
pacientes, no previamente esterilizados);
Hospitais, ambulatrios, postos de vacinao e outros estabelecimentos
destinados ao atendimento e tratamento de animais (aplica-se somente
ao pessoal que tenha contato com tais animais);
Contato em laboratrios, com animais destinados ao preparo de soro,
vacinas e outros produtos;
Laboratrios de anlise clnica e histopatologia (aplica-se to s ao
pessoal tcnico);
Gabinetes de autpsias, de anatomias e histoanatomopatologia ( aplica-
se somente ao pessoal tcnico);
Cemitrios (exumao de corpos);
Estbulos e cavalarias; e
30
Resduos de animais deteriorados
BIBLIOGRAFIA
1, E)ALUATION N CONTROL DE CONTA$INANTES BIOLOGICOS EN
A$BIENTES LABORALES - Documentos tcnicos janeiro 1989
Ana Hernandez Calleja e Carmen Marti Sole
NSHT- nstituto Nacional de Seguridad e Higiene en el Trabajo
2) Bio.ogi+a. Ag2nts at Oo0P
NEBOSH Diploma Module C - (CS 92-428)
Andrea Woolley S.R.N., B.Sc.
Dr. M.A. Buttolph Ph.D., M..Biol., M..O.S.H.
Bibliografia (Agentes Biolgicos)
3) BIOSAFETN $ANUAL
UC DAVS - ENVRONMENTAL HEALTH AND SAFETY
1996
4) Po0ta0ia "!#' $T- 08/06/78 - NR15 Anexo 14
5) %igi2n2 O+u3a+iona. Brevigliero E., Possebon J., Spinelli R. Editora Senac
So Paulo 5 edio
6) Norma Regulamentadora n. 32 S2gu0an;a 2 sa>92 no t0a-a.Fo 2: s20/i;os 92
sa>92 MTE
http://www.cro-rj.org.br/biosseguranca/Manual%20Biosseguranca%20praticas
%20corretas.pdf
31