1

Y. Rendy, L. Hadisoewignyo

Formulasi Kapsul Ekstrak Lumbricus rubellus dengan Laktosa Sebagai Bahan Pengisi dan PVP K-30 Sebagai Bahan Pengikat Capsule Formulation of Lumbricus rubellus Extract Using Lactose as a Filler and PVP K-30 as a Binder
ABSTRAK

Yohanes Rendy, Lannie Hadisoewignyo

Fakultas Farmasi, Universitas Katolik Widya Mandala Surabaya e-mail: lanhadi@yahoo.com

Kata kunci: Lumbricus rubellus Laktosa PVP K-30 Keywords: Lumbricus rubellus Lactose PVP K-30

Penelitian ini bertujuan untuk mengetahui pengaruh penambahan laktosa dan PVP K-30 pada uji mutu fisik granul Lumbricus rubellus. Cacing tanah tersebut diekstraksi lalu dikeringkan dengan aerosil hingga terbentuk ekstrak kering. Ekstrak kering yang telah terbentuk diproses kembali menjadi bentuk granul sehingga lebih mudah mengalir. Dalam penelitian ini digunakan laktosa sebagai pengisi dan PVP K-30 sebagai pengikat. Dibuat empat formula dengan konsentrasi laktosa dan PVP K-30 yang berbeda-beda. Laktosa digunakan pada konsentrasi 20 dan 80%, sedangkan PVP K-30 digunakan pada konsentrasi 2 dan 5%. Evaluasi mutu granul meliputi kadar air, sudut diam, kerapuhan, hausner ratio, densitas granul, dan indeks kompresibilitas granul. Dari hasil evaluasi tersebut didapatkan data hasil prediksi berdasarkan program optimasi design expert. Ditentukan satu nilai yang optimum dan dilanjutkan evaluasi mutu fisik granul dan mutu kapsul untuk formula optimum. Evaluasi mutu kapsul meliputi keseragaman bobot dan waktu hancur kapsul. Formula optimum dicapai pada kondisi laktosa 78,5% dan PVP K-30 2,22%. Hasil teoritis untuk sudut diam adalah 38,87, carrs index 14,55 dan 0,83% untuk kerapuhan granul. This research is intended to know the effect of lactose and PVP K-30 addition in Lumbricus rubellus granule physical quality test. Those earthworms will be extracted and then be dried using aerosil until dry extract is formed and reprocessed become granule so that could be easier to flow. In this research lactose used as the filler and PVP K-30 as the binder. Four formulae made with different concentration of lactose and PVP K-30 based on factorial design. Lactose used in concentration 20 and 80% while PVP K-30 used in concentration 2 and 5%. Responds observed to get optimum granule are repose angle, carrs index and granule friability. From those evaluation results, prediction results got by using design expert optimitation program. One optimum value is determined and then continued by granule physical quality test and capsule quality for optimum formula. Capsule quality test including weight uniformity and capsule disintegration time. Optimum formula achieved when lactose used at 78.5% and PVP K-30 at 2.22%. Theoretical value for repose angle is 32.87, carrs index is 14.55 and 0.83% for granule friability.

Pendahuluan Cacing tanah termasuk dalam kelas Oligochaeta yang mempunyai banyak suku (famili). Terdapat 4 spesies cacing tanah yang sudah dibudidayakan dan diproduksi secara komersial, yaitu Lumbricus rubellus, Eisenia foetida, Pheretima asiatica, dan Eudrilus eugeuniae. Berbagai hasil penelitian menunjukkan cacing tanah mengandung protein yang sangat tinggi, yaitu 6584,5%. Protein cacing tanah terdiri dari asam-asam amino esensial yang lengkap dan kadarnya cukup tinggi. Komposisi asam amino dalam cacing tanah adalah: arginin, sistin, glisin, histidin, isoleusin, leusin, lisin, metionin, fenionin, fenilalanin, serin, treonin, tirosin, dan valin. Selain kandungan protein, kandungan gizi lainnya yang terdapat dalam tubuh cacing tanah antara lain lemak 7-10%, kalsium 0,55%, fosfor 1%, dan serat kasar 1,08%. Selain itu, cacing tanah juga mengandung auksin yang merupakan zat perangsang tumbuh untuk tanaman (Palungkun, 1999). Berdasarkan penelitian terbukti bahwa ekstrak cacing tanah dapat menghambat pertumbuhan 5 jenis bakteri, yaitu: Salmonella typhimurium, Escherichia coli, Staphylococcus aureus, Bacillus cereus, dan Listeria monocytogenes. Hal ini menunjukkan bahwa cacing tanah dapat digunakan sebagai obat penyembuh penyakit yang disebabkan oleh bakteri. Selain itu, cacing tanah juga mengandung asam arakidonat yang

Acta Pharmaciae Indonesia 1(1) 1-7

sangat efektif sebagai penurun suhu tubuh pada demam infeksi (Waluyo, 2005). Sediaan kapsul cacing tanah saat ini mulai banyak digunakan oleh masyarakat untuk memelihara dan mempertahankan kesehatan. Dalam sebuah catatan klasik Tiongkok disebutkan, hewan licin yang berjuluk ti lung kam atau si Naga Tanah ini sudah sejak lama digunakan dalam berbagai ramuan obat tradisional, terutama untuk menyembuhkan penyakit kronis. Bahkan cacing tanah juga telah tercantum dalam Ben Cao Gang Mu, yakni sebuah buku yang dikhususkan memuat aneka bahan standar (farmakope) pengobatan tradisional Cina. Di Indonesia pun cacing tanah sudah digunakan sebagai bahan baku obat dan kosmetik (Kuswanto, 2002). Kapsul dapat berisi campuran serbuk atau serbuk yang digranulasi. Granulasi artinya partikel-partikel serbuk diubah menjadi butiran granulat, dimana partikelpartikel serbuknya memiliki daya lekat, dan sifat alirnya lebih baik. Dengan daya alir lebih baik, pengisian ke ruang kapsul dapat berlangsung secara kontinu serta homogen sehingga akan dihasilkan bobot kapsul yang konstan dan ketetapan dosis yang baik (Voigt, 1995). Bahan tambahan memegang peranan yang sangat penting pada pengisian kapsul dan juga merupakan faktor yang sangat menentukan hasil akhir dari kapsul. Bahan tambahan dapat berupa pengisi, pelincir, penghancur, dan bahan tambahan lain. Bahan pengisi umum digunakan untuk memenuhi bobot sediaan kapsul. Bahan pengikat menyebabkan terbentuknya ikatan antar partikel yang akan menentukan kuat tidaknya granul yang terbentuk, dan jumlah bahan pengikat yang digunakan sangat mempengaruhi pelepasan bahan berkhasiat.

Berdasarkan uraian latar belakang, dapat dirumuskan permasalahan sebagai berikut: bagaimana pengaruh laktosa monohidrat sebagai bahan pengisi dan PVP K30 sebagai bahan pengikat serta interaksinya terhadap sifat fisik kapsul ekstrak Lumbricus rubellus? Bahan dan Metode Bahan Cacing tanah Lumbricus rubellus, laktosa monohidrat, PVP K-30, KCl, aquadest, cangkang kapsul, nipagin, nipasol, aerosil, talk, dan Mg stearat. Alat yang digunakan blender, sentrifuge, sonikator, pengayak, oven, alat uji waktu hancur (Erweka tipe TA-3, Jerman), alat uji kelembapan granul (Sartorius MA 30, Jerman), timbangan analitis (Sartorius Tipe AL 500, Jerman), tatakan kapsul, pipet mikro, dan saringan. Formula kapsul Lumbricus rubellus Formula kapsul dalam penelitian ini tercantum pada Tabel 1. Berat laktosa dan PVP K-30 diperoleh dari persen bobot ekstrak kering yang telah dikeringkan dengan aerosil. Sedangkan nipagin, nipasol, talk, dan magnesium stearat diperoleh dari jumlah berat campuran ekstrak kering, laktosa, dan PVP K-30. Pembuatan ekstrak cacing tanah Cacing tanah basah yang telah dicuci bersih, ditimbang lalu ditambahkan larutan KCl 0,5 mM, kemudian diblender. Bentuk jus yang diperoleh lalu disentrifugasi selama 30 menit. Bentuk supernatan dan presipitat dipisahkan. Supernatan hasil pemisahan dikeringkan dengan aerosil dan dipanaskan dengan oven 50 C selama 24 jam sampai terbentuk ekstrak kering.

Tabel 1 Desain formula granul ekstrak Lumbricus rubellus Bahan yang digunakan Ekstrak kering Laktosa monohidrat PVP K-30 Nipagin Nipasol Talk Magnesium stearat Formula I (mg) 300 60 6 0,66 0,07 14,64 3,66 Formula II (mg) 300 240 6 0,98 0,11 21,84 5,46 Formula III (mg) 300 60 15 0,675 0,07 15 3,75 Formula IV (mg) 300 240 15 1 0,11 22,2 5,55

Y. Rendy, L. Hadisoewignyo

Pembuatan granul ekstrak cacing tanah Ekstrak kering ditambah dengan bahan pengisi (laktosa monohidrat), nipagin, dan nipasol lalu diaduk sampai rata, kemudian ditambah bahan pengikat (PVP K-30) yang telah dilarutkan dalam air, sampai terbentuk massa granul, kemudian diayak dengan mesh nomor18, dan dikeringkan di oven dengan suhu 40 C. Setelah terbentuk granul kering, diayak dengan mesh nomor 20. Kemudian ditambahkan talk dan magnesium stearat, dicampur sampai rata, dan sifat fisik granul dilakukan evaluasi. Evaluasi mutu fisik granul Evaluasi mutu fisik granul dilakukan uji kelembapan granul; sifat alir granul dengan mengukur sudut diam, Carrs index, dan Hausner ratio; dan kerapuhan granul. Kelembapan granul diukur dengan moisture balance analyzer, dengan persyaratan 3-5% (Voigt, 1995). Uji kecepatan alir dan sudut diam granul dilakukan dengan cara memasukkan 100 gram granul ke dalam corong yang ditutup bagian bawahnya. Kecepatan alir ditentukan dengan mengukur waktu yang dibutuhkan oleh serbuk mengalir keluar sampai habis. Sudut diam dapat ditentukan dengan rumus pada persamaan (1). Sudut diam (tg ) = tinggi kerucut (h) (cm) ....(1)

Farmakope Indonesia III (Anonim, 1979). Uji waktu hancur kapsul dilakukan dengan cara yang tercantum pada Farmakope Indonesia IV (Anonim, 1995). Waktu hancur kapsul tidak lebih dari 15 menit (Anonim, 1979). Analisis data Pada penelitian ini dilakukan analisis dari hasil pengamatan kapsul Lumbricus rubellus dengan kombinasi laktosa dan PVP K-30 dengan pendekatan teoritis dan pendekatan statistik. Pendekatan teoritis ini dilakukan dengan mengacu pada persyaratan yang sudah ada pada literatur. Pendekatan statistik menggunakan Anava satu jalan. Optimasi menggunakan program Design Expert. Keluaran dari program optimasi yaitu pengaruh faktor laktosa dan PVP K-30 dan juga interaksinya terhadap respon yang diamati yaitu sudut diam, Carrs index, Hausner ratio, dan kerapuhan granul. Hasil dan Pembahasan Pembuatan ekstrak cacing tanah Ekstrak cacing tanah diperoleh dari mencampur cacing tanah dengan larutan KCl 0,5 mM dan diblender sehingga diperoleh hasil seperti pada Gambar 1. Ekstrak kering (Gambar 2) diperoleh dengan menambahkan aerosil pada supernatan hasil blender.

jari jari (r) (cm)

Suatu granulat dikatakan bersifat mengalir baik (free flowing) apabila sudut diamnya = 20- 40 (Wells, 1988). Kerapuhan granul ditentukan dengan cara mengayak 10 gram sampel granul dengan pengayak 212 m (setara dengan mesh 70). Granul hasil ayakan diletakkan pada piringan alat uji kerapuhan yang diputar pada 25 rpm selama 5 menit. Setelah itu, sampel diayak dengan ayakan 212 m lalu ditentukan persen serbuk sebagai indeks dari kerapuhan granul. Syarat untuk uji kerapuhan granul adalah tidak lebih dari 1% (Parrott, 1971). Uji mutu fisik kapsul Uji mutu fisik kapsul dilakukan terhadap formula optimum, meliputi uji keseragaman bobot dan waktu hancur kapsul. Uji keseragaman bobot kapsul mengikuti ketentuan yang ada pada Gambar 2 Hasil ekstrak kering.

Gambar 1 Hasil cacing tanah yang sudah diblender.

Acta Pharmaciae Indonesia 1(1) 1-7

menyebabkan sifat alir yang buruk. Interaksi antar kedua faktor dapat memperbaiki sifat alir. b. Carrs index Berdasarkan data sudut diam granul diperoleh persamaan matematis seperti pada persamaan (3). Y = 13,55 + 0,33 XA 0,41 XB 0,42 XAXB .......(3) Gambar 3 Granul kering Lumbricus rubellus Y adalah respon Carrs index, XA adalah tingkat dari laktosa, XB adalah tingkat dari PVP K-30, dan XAXB adalah tingkat dari interaksi dari laktosa dan PVP K-30. Dari persamaan polimial yang diperoleh dapat dibuat suatu contour plot seperti Gambar 5. Dari hasil tersebut dapat dilihat bahwa interaksi antara laktosa dan PVP K-30 dominan untuk menurunkan indeks kompresibilitas. c. Kerapuhan granul Formula I II III IV Bulk density (g/mL) 0,42 0,43 0,42 0,41 Tapped density (g/mL) 0,44 0,44 0,44 0,44 Berdasarkan data kerapuhan granul diperoleh persamaan matematis seperti pada persamaan (4) Y = 2,69 - 0,29 XA + 0,50 XB + 1,45 XAXB ....... (4) Y adalah respon kerapuhan granul, X A adalah tingkat dari laktosa, XB adalah tingkat dari PVP K30, dan XAXB adalah tingkat interaksi dari laktosa dan PVP K-30. Dari persamaan polinomial yang diperoleh dapat dibuat suatu contour plot seperti Gambar 6. Berdasarkan persamaan polinomial untuk respon kerapuhan granul, tampak bahwa laktosa dapat menurunkan kerapuhan granul, ditandai dengan nilai koefisien yang negatif, disebabkan karena laktosa dapat menurunkan porositas granul sehingga kerapuhan granul juga akan menurun. Interaksi antara kedua faktor akan meningkatkan kerapuhan granul, disebabkan karena laktosa mengalami proses fragmentasi sehingga akan menghasilkan partikel dengan ukuran lebih kecil yang memiliki luas permukaan yang lebih besar sehingga larutan PVP K-30 yang memiliki kekentalan cukup atau tidak terlalu kental akan menyebar dengan merata di permukaan partikel dan menyebabkan ikatan partikel yang baik atau kuat sehingga kerapuhan menurun. Apabila larutan PVP K-30 yang digunakan lebih kental, penyebaran larutan pengikat tidak akan merata di permukaan partikel laktosa yang memiliki luas permukaan besar akibat terjadi proses fragmentasi. Hal ini dapat menyebabkan kerapuhan meningkat.

Hasil uji mutu fisik granul Sebelum granul dimasukkan ke dalam kapsul, dilakukan pemeriksaan mutu fisik granul dengan hasil seperti tercantum pada Tabel 2 dan Tabel 3. Tabel 2 Hasil uji bulk density dan tapped density

Semua uji mutu fisik granul memenuhi persyaratan kecuali uji kelembaban pada formula III. Perlakuan dapat dilanjutkan dengan pembuatan kapsul dari formula optimum. Optimasi Kapsul Lumbricus Rubellus dengan Factorial Design a. Sudut diam Berdasarkan data sudut diam granul diperoleh persamaan matematis seperti pada persamaan (2) Y = 31,29 + 0,71 XA 0,34 XB 0,77 XAXB ..... (2) Y adalah respon sudut diam, XA adalah tingkat dari laktosa, XB adalah tingkat dari PVP K-30, dan XAXB adalah tingkat dari interaksi dari laktosa dan PVP K-30. Berdasarkan persamaan polinomial yang diperoleh dapat dibuat suatu contour plot seperti pada Gambar 4. Dari persamaan polinomial untuk respon sudut diam, tampak bahwa laktosa memberikan pengaruh yang dominan dalam meningkatkan nilai respon, berarti memperburuk sifat alir ditandai dengan nilai koefisien + 0,71; sedangkan PVP K-30 menurunkan respon yang berarti memperbaiki sifat alir karena PVP K-30 dapat memperbaiki ikatan antar-partikel sehingga dapat mencegah timbulnya fine yang dapat

Y. Rendy, L. Hadisoewignyo

Tabel 3 Hasil uji mutu fisik granul Mutu fisik yang diuji Kelembapan (derajat) Sudut diam (derajat) Hausner Ratio Carrs index Kerapuhan granul (persen) FI 3,35 0,09 30,14 0,11 1,06 0,01 13,21 0,07 3,97 0,64 FII 3,76 0,19 33,11 0,17 1,02 0,00 14,72 0,35 0,47 0,11 FIII 5,57 0,31 31,01 0,31 1,04 0,01 13,22 0,09 2,13 0,64 FIV 3,85 0,15 30,88 0,27 1,07 0,005 13,06 0,10 4,43 0,31

Tabel 4 Rangkuman data hasil percobaan denagn Design-Expert Faktor 1 A: Laktosa (tingkat) 1,00 1,00 -1,00 -1,00 1,00 -1,00 -1,00 -1,00 1,00 1,00 1,00 -1,00 Faktor 2 B: PVP K-30 (tingkat) 1,00 1,00 1,00 -1,00 -1,00 1,00 -1,00 -1,00 1,00 -1,00 -1,00 1,00 Respon 1 Sudut diam (derajat) 31,14 30,60 31,26 30,03 33,28 30,66 30,25 30,15 30,90 33,11 32,94 31,12 Respon 2 Carrs index (persen) 3,00 3,17 3,33 3,17 4,33 3,17 3,30 3,17 3,00 4,83 5,00 3,17 Respon 3 Kerapuhan (persen) 4,30 4,06 1,33 4,63 0,40 2,63 3,56 3,60 4,68 0,37 0,57 2,10

Std 10 12 7 1 6 8 2 3 11 5 4 9

Run 4 4 3 1 2 3 1 1 4 2 2 3

Design-Expert Software
1.00

Sudut diam
3 3

Sudut diam Design Points 33.28 30.03

0.50

31.1322

X1 = A: Konst. Laktosa monohidrat X2 = B: Konst. PVP K-30

B : K o n s t . P V P K -3 0

0.00

31.6267 30.6378
-0.50

32.1211

32.6156

Prediction
-1.00

33.11
3
0.50 1.00

3
-1.00 -0.50 0.00

A: Konst. Laktosa monohidrat

Gambar 4

Contour plot sudut diam granul ekstrak Lumbricus rubellus.

Acta Pharmaciae Indonesia 1(1) 1-7

Carr's index
3 3

Design-Expert Software
1.00

Carr's index Design Points 15 13

0.50

13.3339

X1 = A: Konst. Laktosa monohidrat X2 = B: Konst. PVP K-30

B : K o n s t . P V P K -3 0

0.00

13.6111

13.8883
-0.50

14.1656 14.4428

Prediction
-1.00

14.72
3
0.50 1.00

3
-1.00 -0.50 0.00

A: Konst. Laktosa monohidrat

Gambar 5 Contour plot Carrs index granul ekstrak Lumbricus rubellus.

Design-Expert Software
1.00

Kerapuhan granul
3 3

Kerapuhan granul Design Points 4.68 0.37

0.50

2.39667

3.69667

3.04667

X1 = A: Konst. Laktosa monohidrat X2 = B: Konst. PVP K-30

B : K o n s t . P V P K -3 0

0.00

2.39667 3.04667
-0.50

1.74667 1.09667 3.69667

-1.00

Prediction
-0.50 0.00 0.50

0.446667
3
1.00

3
-1.00

A: Konst. Laktosa monohidrat

Gambar 6 Contour plot kerapuhan granul ekstrak Lumbricus rubellus.

Design-Expert Software
1.00

Overlay Plot
3 3

Overlay Plot Sudut diam Carr's index Kerapuhan granul Design Points
B : K o n s t . P V P K -3 0

0.50

X1 = A: Konst. Laktosa monohidrat X2 = B: Konst. PVP K-30

0.00

-0.50

Kerapuhan granul: 1
-1.00

3
-1.00 -0.50 0.00 0.50

3
1.00

A: Konst. Laktosa monohidrat

Gambar 7

Superimposed contour plot kapsul ekstrak Lumbricus rubellus.

Y. Rendy, L. Hadisoewignyo

Contour plot dari masing-masing respon kemudian ditumpang tindihkan (superimposed) maka akan didapat daerah optimum dengan sifat tablet yang diinginkan (Gambar 7). Salah satu rancangan komposisi formula optimum (Tabel 5) berdasarkan Gambar 7 adalah dengan menggunakan laktosa monohidrat pada konsentrasi 78,5%, dan PVP K-30 pada konsentrasi 2,23% akan memberikan respon secara teoritis pada sudut diam 32,87, Carrs index 14,55, dan kerapuhan granul yaitu 0,83%, sehingga terbentuklah granul yang memiliki sifat alir dan kerapuhan granul yang baik. Tabel 5 Komposisi formula optimum Bahan yang digunakan Ekstrak kering Laktosa monohidrat PVP K-30 Nipagin Nipasol Talk Magnesium stearat Hasil uji mutu fisik kapsul Formula optimum yang diperoleh dibuat kapsul, yang kemudian dilakukan uji mutu fisik kapsul, meliputi keseragaman bobot dan waktu hancur kapsul. Hasil uji keseragaman bobot untuk formula optimum memenuhi persyaratan keseragaman bobot yaitu perbedaan dalam persen bobot isi tiap kapsul terhadap bobot rata-rata tiap isi kapsul tidak boleh lebih dari yang ditetapkan kolom A yaitu 7,5% dan untuk maksimal dua kapsul tidak boleh lebih dari yang ditetapkan kolom B yaitu 15% (Anonim, 1979). Pada uji waktu hancur tampak bahwa waktu hancur rata-rata dari kapsul Lumbricus rubellus adalah 1,25 menit (Tabel 6). Tabel 6 Waktu hancur kapsul Replikasi 1 2 3 X SD Simpulan Laktosa monohidrat sebagai bahan pengisi kapsul dan PVP K-30 sebagai bahan pengikat maupun interaksinya berpengaruh secara signifikan terhadap sifat fisik granul antara lain sifat alir dan Waktu hancur (menit) 1,24 1,29 1,22 1,25 0,04 Formula Optimum (mg) 300 235,5 6,675 0,98 0,11 21,69 5,42

kerapuhan granul Lumbricus rubellus. Laktosa monohidrat meningkatkan sudut diam, meningkatkan Carrs index, dan menurunkan kerapuhan granul; sedangkan PVP K-30 menurunkan sudut diam, menurunkan Carrs index, dan meningkatkan kerapuhan granul. Interaksi dari laktosa monohidrat dan PVP K-30 memberikan pengaruh menurunkan sudut diam, menurunkan Carrs index, dan meningkatkan kerapuhan granul. Formula optimum granul dapat diperoleh dengan kombinasi laktosa monohidrat 78,5% dan PVP K30 2,23% dengan hasil teoritis, waktu alir 8,58 menit, sudut diam 32,87, Carrs index 14,55%, dan kerapuhan granul yaitu 0,83%. Pada formula optimum kapsul diperoleh hasil uji waktu hancur 1,25 menit dan penyimpangan keseragaman bobot adalah 0,43%. Daftar Pustaka Anonim, 1979, Farmakope Indonesia, Edisi III, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta. Anonim, 1995, Farmakope Indonesia, Edisi IV, Departemen Kesehatan Republik Indonesia, Jakarta. Kuswanto, 2002, Studi Perbandingan Kadar Protein dan Jenis Asam Amino dari Sediaan Kapsul Cacing Tanah yang Bermerk dan Tidak Bermerk, Skripsi, Unika Widya Mandala, Surabaya. Palungkun, R., 1999, Sukses Beternak Cacing Tanah Lumbricus rubellus, Penebar Swadaya, Jakarta. Parrott, E.L., 1971, Pharmaceutical Technology Fundamental Pharmaceutical, 3rd Edition, Burgess Publishing Company, Minneapolis. Voigt, R., 1995, Buku Pelajaran Teknologi Farmasi, ed. 5, terjemahan Noerono, S., Reksohadiprojo, Gajah Mada University Press, Yogyakarta. Waluyo, J., 2005, Purifikasi dan Karakterisasi Protein Antibakteri dari Cacing Tanah. Skripsi, Universitas Airlangga, Surabaya. Wells, J.T., 1988, Pharmaceutical Preformulation: The Physicochemical Properties of Drug Substance. Ellis Howard, Ltd., Chester.