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Chui et al.

Quim. Nova

Quim. Nova, Vol. 24, No. 3, 374-380, 2001.

Divulgao

QUALIDADE DE MEDIES EM QUMICA ANALTICA. ESTUDO DE CASO: DETERMINAO DE CDMIO POR ESPECTROFOTOMETRIA DE ABSORO ATMICA COM CHAMA Queenie S. H. Chui e Ricardo R. Zucchini Instituto de Pesquisas Tecnolgicas do Estado de So Paulo S.A., Diviso de Qumica, Agrupamento de Materiais de Referncia, Av. Prof. Almeida Prado, 532, 05508-901 So Paulo - SP Jaim Lichtig Instituto de Qumica da Universidade de So Paulo, Departamento de Qumica Fundamental, Cidade Universitria, Av. Prof. Lineu Prestes, 748, 05508-900 So Paulo - SP Recebido em 20/3/00; aceito em 19/9/00

QUALITY OF MEASUREMENTS IN ANALYTICAL CHEMISTRY STUDY OF CASE: Cadmium Determination by Flame Atomic Absorption Spectrophotometry. Calculation of uncertainty of results represents the new paradigm in the area of the quality of measurements in laboratories. The guidance on the Expression of Uncertainty in Measurement of the ISO / International Organization for Standardization assumes that the analyst is being asked to give a parameter that characterizes the range of the values that could reasonably be associated with the result of the measurement. In practice, the uncertainty of the analytical result may arise from many possible sources: sampling, sample preparation, matrix effects, equipments, standards and reference materials, among others. This paper suggests a procedure for calculation of uncertainties components of an analytical result due to sample preparation (uncertainty of weights and volumetric equipment) and instrument analytical signal (calibration uncertainty). A numerical example is carefully explained based on measurements obtained for cadmium determination by flame atomic absorption spectrophotometry. Results obtained for components of total uncertainty showed that the main contribution to the analytical result was the calibration procedure. Keywords: uncertainty calculation; flame atomic absorption spectrophotometry; calibration function.

INTRODUO Atualmente, diferentes setores da indstria, da sade, reas de meio ambiente, entre outros, utilizam os resultados de anlises gerados em laboratrios qumicos para a tomada de decises. Com base nestes resultados, aceitam-se ou rejeitam-se matrias primas, diferenciam-se a performance de fornecedores, processos produtivos so modificados, atua-se sobre a sade das pessoas e dos animais. Deste modo, os resultados das anlises devem ser bons, ou melhor, devem apresentar qualidade aceitvel em funo dos objetivos requeridos. Mas como podemos definir melhor estas medies de boa qualidade? Analisemos um exemplo: Segundo a legislao ambiental, a contaminao de solos por cdmio no deve exceder a 5 g/g. Se um laboratrio determinou o teor de cdmio em um solo em 4,5 g/g com incerteza de 0,5 g/g, o resultado da anlise indicou atendimento s exigncias demandadas. Mas no seria o caso, se o resultado fosse 4,5 g/g com incerteza de 0,8 g/g. O laboratrio estaria incorrendo em um certo risco de erro, ao afirmar que o solo atende s exigncias prescritas em lei. Caso os resultados analticos tivessem sido expressos apenas como mdias, eles no poderiam ter sido comparados com o valor de referncia. Apenas quando as mdias esto acompanhadas de suas incertezas, possvel tomar as decises adequadas. Resultados mdios sem as respectivas incertezas carecem de significado porque no do a informao completa sobre a medio. OBJETIVO Este artigo apresenta um procedimento para o clculo das incertezas em anlise qumica, atravs de um estudo de caso aplicado aos resultados obtidos na determinao de cdmio

usando a tcnica da espectrofotometria de absoro atmica com chama, para avaliao da capacidade de adsoro de argila utilizada como adsorvente de ons de metais. CLCULOS DE INCERTEZAS EM ANLISE QUMICA Incertezas em medies A atual preocupao da cincia da medio qumica representada pela questo do clculo da incerteza estatstica associada aos resultados obtidos experimentalmente1,2. Esta preocupao originou-se nos laboratrios analticos prestadores de servios, visto que a determinao das incertezas exigida por critrios para o reconhecimento formal da competncia tcnica de laboratrios3-6. Esta questo assunto ainda bastante controvertido no meio cientfico. At mesmo o significado do termo incerteza ainda no perfeitamente entendido por muitos qumicos, que costumam confundi-lo com a repetitividade7,9,12. De acordo com o Vocabulrio Internacional de Metrologia8,9, a incerteza de uma medio um parmetro associado ao resultado, que caracteriza a disperso dos valores obtidos em torno da mdia. A incerteza total a soma das incertezas geradas pelos diversos componentes do processo de medio, cada um deles expresso como um desvio padro. Atravs da combinao apropriada das varincias, calcula-se a incerteza padro combinada10-12. Estabelecido um grau de confiana, determina-se a incerteza combinada expandida, atravs do critrio do intervalo de confiana, utilizando um fator de abrangncia, k. Na maioria dos casos, usa-se o valor de k = 2 correspondente ao estabelecimento do nvel de confiana de aproximadamente 95%. Entre as principais fontes geradoras de variabilidade em anlise qumica esto a amostragem, a preparao da amostra em laboratrio, a extrao ou digesto, a pr-concentrao de

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solues, e as interferncias de vrios tipos durante a quantificao (dos efeitos de matriz, das caractersticas dos instrumentos utilizados e da sua calibrao, entre outras). A rigor, todo fator que contribui com a incerteza final do resultado analtico deve ser considerado; porm, para efeito didtico, este trabalho concentrar-se-, exclusivamente, na determinao das incertezas das etapas de marcha analtica previamente indicadas no exemplo para estudo de caso. Incertezas de Resultados Obtidos usando a Espectrofotometria de Absoro Atmica com Chama Na espectrofotometria de absoro atmica com chama, usualmente feita uma calibrao inicial do instrumento com uma srie de solues com concentraes conhecidas dentro de uma faixa de trabalho pr-estabelecida. Plotando-se as concentraes conhecidas utilizadas xi, contra as respostas do instrumento yi, geralmente possvel observar correlaes lineares. Estabelece-se uma curva de calibrao que representa da melhor maneira possvel o conjunto de pontos (xi, yi) obtidos. Representando uma relao linear como y = a x + b, valores para a e b so obtidos atravs de mtodo numrico dos mnimos quadrados, que um modelo matemtico de correlao entre os valores numricos de x e de y13,14. O coeficiente de correlao r calculado pela equao abaixo,

O uso da anlise pela varincia do resduo est sendo amplamente difundido para calcular a incerteza ao longo da curva de calibrao16-22. A disperso das medies deve ser independente da concentrao das solues de referncia, que a propriedade conhecida como homoscedasticidade16,19,21 em y. Deve ser vlido o pressuposto de que a varincia constante nos erros aleatrios. Se por acaso a varivel independente x estiver sujeita a erros, estes devem ser desprezveis quando comparados aos erros em y. Para verificar se a equao de regresso estatisticamente significativa efetuam-se os testes para verificao de ajuste do modelo linear, validade da regresso, sua eficincia e sua eficincia mxima19-22. Teste de Ajuste do Modelo Linear Antes de utilizarmos a funo calibrao estabelecida pela teoria dos mnimos quadrados, preciso testar a linearidade, procedendo-se comparao de varincias. A discusso que trata dos detalhes para a aplicao do modelo seguido encontrada em literatura 20,22, e no ser repetida neste trabalho, devido ao pouco acrscimo que traria aos qumicos analticos. O Quadro 1 descreve os elementos necessrios para obteno da anlise pela varincia. O teste feito atravs do clculo da razo das mdias quadrticas, ou seja, F = MQL/MQEP, e compara-se o valor obtido com Fcrtico = F(mi - 2); (n - mi); / 2 (tabelado), para o grau de confiana desejado. Se F Fcrtico, aceita-se a linearidade, ou seja, o ajuste do modelo considerado satisfatrio. Caso contrrio, novo intervalo para a faixa de trabalho deve ser estabelecido. Na prtica exclui-se o ponto correspondente concentrao mais alta da faixa pr-estabelecida e procede-se ao teste com os novos limites. Se a condio F Fcrtico atendida, confirma-se a linearidade, ou seja, as varincias em y so independentes dos nveis de concentrao em x. Teste de Validade da Regresso Compara-se F = MQR / MQE com o valor de Fcrtico tabelado, no nvel de confiana selecionado. Se F Fcrtico , aceita-se, no nvel de confiana selecionado, que a 0, o que significa que a inclinao da reta da regresso no nula. H indicao de que a regresso significativa. Se F Fcrtico, no h indicao de existncia de relao linear entre as variveis x e y; e no tem sentido utilizar a regresso. Teste de Eficincia da Regresso Aceitando a validade da regresso, calcula-se a sua eficincia:

r=

i =1

(x1 x ). (y1 y )
n n

(n 1).s x .s y

i =1

onde SX e SY so as varincias dos valores de x i e yi. O coeficiente de correlao varia entre -1 e +1. Quando utilizado em anlise qumica, o conceito estatstico de r muitas vezes mal interpretado 15,16 e utilizado como critrio de aceitao da linearidade da regresso por alguns analistas. Mesmo com valores altos de r, isto , prximos de 1, porm abaixo de 0,999, possvel que a regresso no seja linear 21, o que deve ser verificado com os testes estatsticos de comparao de varincias. Incerteza da Curva de Calibrao Laboratrios normalmente levantam a curva de calibrao com 4 a 5 pontos ao longo da faixa de trabalho desejada, com algumas repeties em cada ponto. A mdia aritmtica o valor aceito e o desvio padro da mdia calculado para cada ponto, sendo que a incerteza pontual dada pelo intervalo de confiana da mdia, estabelecido o grau de confiana desejado. Calculadas desta maneira, as incertezas no so representativas para a curva de calibrao como um todo; trata-se de incertezas pontuais, e nada se pode afirmar quanto aos pontos intermedirios da curva.

Quadro 1. Mdias quadrticas e graus de liberdade utilizados na anlise de varincia Fonte SQ dos totais correo ( b) SQT corrigida SQ da regresso (a) SQ do resduo SQ do erro puro SQ da linearidade Soma Quadrtica SQT FC SQC SQR SQE SQEP SQL Equao yij n. y002 ( yij - y00 )2 ( yi - y00 )2 ( yij - yi )2 ( yij - yio )2 ( yi - yio)2
2

n 1 n - 1 1 n - 2 n - mi mi - 2

Mdia Quadrtica MQT=SQT / n FC MQC=SQC / (n - 1) MQR=SQR MQE=SQE / (n - 2) MQEP=SQEP/ (n -mi ) MQL=SQL / (mi - 2 )

n = ni = nmero total de medies; m i = nmero de nveis com repeties da varivel x ; yij = valor da varivel controlada; yoo = mdia de todos os valores de y; y i = valor da varivel controlada calculada pela equao obtida; yio = mdia das determinaes repetidas no nvel i; O ndice i refere-se ao nvel da varivel independente x ; o ndice j refere-se s repeties feitas em cada nvel de x. Nos casos de SQR e SQL, os somatrios vo de i = 1 at i = n. Nos casos de SQT, SQC, SQE e SQEP, os primeiros somatrios vo de i = 1 at i = mi e os segundos somatrios vo de j = 1 at j = ni.

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SQR , sendo que o valor desejado para R2 teoricamente 1. SQC Na prtica, valores abaixo de 0,95 (R 2 < 0,95) indicam que a regresso no eficiente. R2 =
Clculo de eficincia mxima (R 2
mx )

O clculo de R2mx indica a varincia mxima explicvel pela regresso. R2 = SQC SQEP SQC

Clculo da incerteza de medies em x e y com a funo calibrao O intervalo de confiana calculado para a reta de regresso, utilizando a distribuio T de Student, no nvel de confiana selecionado e com o nmero de graus de liberdade (n - 2), entendido como a incerteza da funo calibrao. A incerteza para qualquer ponto dentro da faixa de trabalho estudada, tambm vlida para valores individuais, pode ser expressa como: Incerteza de yi = T Syi (1)

MQE = mdia quadrtica dos resduos obtida na Anlise pela Varincia R = nmero de repeties independentes para medies da amostra de concentrao desconhecida xm = xi /n (xi = valores da varivel independente ; n = n0 total de medies efetuadas na regresso) xo = valor de x obtido para a amostra de concentrao desconhecida b2 = MQE / n (contribuio da parcela de b, coeficiente linear, ao desvio padro) a2 = MQE / Sxx (contribuio da parcela de a, coeficiente angular, ao desvio padro) xx = (xi - xm)2 (soma quadrtica dos x) - Quando yi corresponde a apenas uma medio, a seguinte equao calculada:
2 2 Syi = MQE + S2 b + Sa (x o x m )

(4)

ESTUDO DE CASO EXPERIMENTAL Uma soluo de CdCl2. 2,5H2O contendo 56,3 mg de Cd (II) foi colocada em contato com 1 g de argila sob agitao constante, temperatura ambiente por 4 horas. Em seguida, a fase lquida foi separada por filtrao e a concentrao de cdmio foi determinada por espectrofotometria de absoro atmica com chama. O procedimento analtico apresentado brevemente abaixo, atravs de algumas etapas experimentais adotadas: 1 - Preparao da soluo da amostra, para conter o elemento de interesse, em balo volumtrico de 250 mL; 2 - Diluies necessrias para ajustar a concentrao do elemento faixa linear da curva de calibrao; 3 - Leituras no espectrofotmetro de absoro atmica utilizando instrumento da PERKIN ELMER, modelo 5000, com chama de ar-acetileno, lmpada de catodo oco de cdmio ajustada no comprimento de onda 228,8 nm e fenda de abertura de 0,7 nm, e corretor de fundo com lmpada de deutrio; 4 - Clculo do Resultado Final Para o clculo da incerteza dos resultados so consideradas as seguintes fontes de incerteza: - balana (marca Mettler com 160g de capacidade e escala de 0,1 mg); - vidrarias volumtricas; - espectrofotmetro utilizado e funo calibrao. Para a estimativa da incerteza devido pesagem, so consideradas as informaes oferecidas pelo certificado de calibrao da balana analtica, emitido por laboratrio credenciado pela Rede Brasileira de Calibrao3,12. As vidrarias volumtricas utilizadas so avaliadas quanto aos seus volumes, considerando efeitos devido temperatura entre o momento da calibrao e de sua utilizao na anlise qumica; considerada a contribuio do fator de diluio ao clculo da incerteza do resultado final10. A incerteza devido funo calibrao obtida atravs do clculo do intervalo de confiana da equao de regresso, considerando o modelo univariado, utilizando a Anlise pela Varincia dos Resduos 17-22. RESULTADOS OBTIDOS Estimando a incerteza padro devido pesagem

E os limites do intervalo de confiana para estimativas de yi podem ser expressos assim: yi - T


( / 2 ; n - 2)

Syi yi yi - T

( / 2 ; n - 2)

Syi

sendo que T( / 2 ; n - 2) = fator da tabela T de Student no nvel de de confiana (1 - ) % e (n - 2) graus de liberdade Syi = desvio padro da estimativa de yi, na regresso Pela lei de propagao de erros, entende-se que, para cada valor de yi, existe um intervalo cujos limites so estabelecidos por duas curvas hiperblicas16,19,21, definindo os limites superior e inferior da curva mdia da regresso. A largura deste limite influenciada pela incerteza das medies em y e pela incerteza das estimativas dos coeficientes linear e angular obtidas. Na prtica, o interesse ao se usar o mtodo analtico obter a incerteza de xi, que corresponde aos valores dos limites do intervalo de confiana de yi. O intervalo conhecido como intervalo fiducial19,22 e est associado incerteza dos valores obtidos nos eixos das abcissas. Para o clculo do intervalo fiducial, o valor medido em y dever ser substitudo na frmula abaixo, calculando-se o valor de interesse em x22. valor obtido (yi ) b TSy i a a

Valor de interesse ( xi) =

(2)

Clculo da incerteza de medies de amostras de concentrao desconhecida Para obter a incerteza da resposta analtica procurada, utiliza-se a expresso (2) com Syi calculado seguindo as expresses abaixo: - Quando yi corresponde mdia de R replicatas, o desvio padro de yi dado por16-23 :

Syi =

MQE 2 2 + S2 b + Sa (x o x m ) P

(3)

sendo que:

A massa inicial encontrou-se na faixa de 0,0200 a 0,2000 g da escala da balana, obtida por diferena. O certificado de calibrao da balana mostrou que uma massa obtida por diferena, na regio que compreendia os valores at 1,0000 g,

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apresentava uma incerteza de 0,1 mg (95% de confiana). Para obter a componente da incerteza em desvio padro, dividiu-se este nmero por 2 (fator de abrangncia aplicado para o clculo de incerteza), ou seja, 0,1 / 2 = 0,05. O desvio padro nas repeties para obteno das massas nesta faixa foi estimado em 0,1 mg, usando grficos de controle23,24. Combinando-se as duas componentes, obteve-se a incerteza (expressa como um desvio padro) devido etapa de pesagem. Como a massa inicial obtida por diferena, a parcela 0,05 multiplicada por 2.
s(m i ) = 2(0,05) + (0,1) = 0,1225mg
2 2

A Tabela 1 mostra os valores obtidos para o clculo da incerteza padro combinada, que foi expresso como um desvio padro, levando-se em conta as variabilidades devido a operaes de rotina e especificao de vidrarias25,26. Considerando a distribuio triangular 10-12 para limites de tolerncia especificados, calculou-se o desvio padro, dividindo-se estes valores por raiz quadrada de 6. Ao fator de diluio est associada a incerteza devido aos volumes inicial e final. Como o fator calculado por operao de diviso, a incerteza associada ao fator dada por sfator / fator. Em seguida, a incerteza associada ao fator calculada para uma diluio de 1:10, usando pipeta de 10 mL e balo de 100 mL.
s fator 10 s s = v10 + v100 fator 10 10 100
2

Estimando a incerteza padro devido diluio da massa inicial A soluo aquosa contendo ons cdmio, aps contato com a argila foi filtrada em balo volumtrico de 250 mL. Para calcular a incerteza devido s vidrarias volumtricas partiu-se da especificao ISO para vidrarias volumtricas25,26. Em geral, os limites de tolerncias declarados no indicam o nvel de confiana associado e qual a distribuio populacional a que elas pertencem. Portanto, estimou-se a incerteza utilizando a mxima amplitude declarada pela tolerncia dividida por raiz quadrada de 6, assumindo-se a distribuio triangular10-12. Sendo assim, para a diluio da massa inicial em balo volumtrico de 250 mL, o desvio padro calculado foi de 0,15 / 6 1/2 = 0,0612 mL, sendo que 0,15 mL foi obtido de tabelas para tolerncias em bales volumtricos de 250 mL25,26. Para considerar o efeito devido diferena entre temperaturas, na calibrao e no momento da anlise, foi estimada uma variao de temperatura de 3K (com 95% de confiana) 10, considerando o coeficiente de dilatao volumtrica da gua (2,1 x 10-4 / 0C a 200C). Uma vez que a dilatao volumtrica do lquido consideravelmente maior que a do frasco (10 x 10-6 / oC para vidros borossilicatos e 25 x 10-6 / 0C para vidros sdioclcio), desprezou-se o efeito deste ltimo no clculo. Sendo assim, para frasco de 250 mL, o intervalo de 95% de confiana de 250 x 3 x 2,1 x 10-4, ou seja, 0,1575 representa o efeito da temperatura incerteza do resultado final. Considerando a distribuio retangular10-12, o desvio padro calculado dividindo 0,1575 por raiz quadrada de 3, resultando em 0,09094. A incerteza combinada, referente etapa de dissoluo da amostra em volume final de 250 mL, foi calculada combinando-se as 2 parcelas de desvio padro,
s(VF ) =

sendo que: sfator 10 = desvio padro do fator (corresponde utilizao de pipeta de 10 mL e balo volumtrico de 100 mL) fator 10 = valor do fator, neste caso, 10 Substituindo os respectivos valores:
sfator 10 = 10

(0,00149 )2 + (0,000529 )2

sfator

10

= 0,0158

Estimando a incerteza devido funo calibrao A curva de calibrao foi obtida com 5 solues preparadas com concentraes diferentes: 0,50; 0,75; 1,0; 1,5 e 2,0 mg/L de Cd (II), a partir de uma soluo estoque de 1,000 0,002 g/L de Cd (II). Os erros em x so pressupostos desprezveis quando comparados s variabilidades em y. A mesma curva foi preparada em 4 dias diferentes ( em 21, 22, 23 e 29/08/97). A Tabela 2 indica os dados brutos deste experimento e a decomposio das varincias mostrada na Tabela 3. Os resultados de testes para o ajuste do modelo seguido (Tabela 4) mostra que o valor da razo MQL/MQEP=0,1795 foi inferior ao valor tabelado (F crtico = 4,15). A indicao de existncia de relao linear entre as variveis dependente y e independente x foi altamente significativa e confirmada com a razo MQR/MQE = 22 715. O valor obtido de R2 = 0,9992 demonstrou a eficincia da regresso, com R2mx de 0,9994. Os parmetros da regresso foram estimados (coeficiente angular, a = 0,2358 e coeficiente linear, b = 0,01419). Leitura nica de absorvncia obtida para a soluo amostra foi de 0,273. A concentrao de cdmio e sua incerteza, em mg/L, foi calculada utilizando a expresso (2) e (4) com T(18 ; 0,025) = 2,101. concentrao de cdmio = 0,273 - 0,01419 2,101 x 0,003861 0,2358 0,2358

(0,0612 )2 + (0,09094 )2

= 0,1096

Estimando a incerteza padro devido ao fator de diluio Para fazer as medidas de cdmio, utilizando a funo calibrao, foram necessrias 2 diluies de 10 vezes da soluo anterior. Para diluies de 10 vezes, foi utilizada pipeta volumtrica de 10 mL e bales volumtricos de 100 mL. Tabela 1. Clculo da incerteza devido s diluies material volumtrico (V - mL) pipeta 10 mL balo 100 mL balo 250 mL s(*) tolerncia/61/2 padro + efeito de temperatura 0,00878 0,0520 0,101

= (1,098 0,034 )mg / L

desvio padro combinado

incerteza padro combinada (1s - mL) 0,0149 0,0529 0,103

incerteza padro relativa (1s/V) 0,00149 0,000529 0,000412

0,012 0,010 0,020

(0,0122 + 0,0878)1/2 (0,0102 + 0,0520)1/2 (0,020 2 + 0,101)1/2

(*) desvio padro obtido atravs de grficos de controle (levando em conta operaes de rotina)

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Tabela 2. Dados brutos/construo da curva de calibrao de cdmio xi Bloco 1 0,50 0,50 0,50 0,50 Bloco 2 0,75 0,75 0,75 0,75 Bloco 3 1,00 1,00 1,00 1,00 Bloco 4 1,50 1,50 1,50 1,50 Bloco 5 2,00 2,00 2,00 2,00 y ij 0,137 0,134 0,131 0,130 0,187 0,193 0,190 0,193 0,247 0,249 0,251 0,255 0,364 0,360 0,363 0,371 0,488 0,483 0,489 0,491 1,15 1,15 1,15 1,15 1,15 1,15 1,15 1,15 1,15 1,15 1,15 1,15 xm 1,15 1,15 1,15 1,15 x i - xm (0,65) (0,65) (0,65) (0,65) 0,75 0,75 0,75 0,75 (0,15) (0,15) (0,15) (0,15) 0,35 0,35 0,35 0,35 0,85 0,85 0,85 0,85 yi 0,1321 0,1321 0,1321 0,1321 0,1910 0,1910 0,1910 0,1910 0,2499 0,2499 0,2499 0,2499 0,3678 0,3678 0,3678 0,3678 0,4857 0,4857 0,4857 0,4857 y oo 0,2853 y io 0,1330 0,1330 0,1330 0,1330 0,19075 0,19075 0,19075 0,19075 0,2505 0,2505 0,2505 0,2505 0,3645 0,3645 0,3645 0,3645 0,48775 0,48775 0,48775 0,48775 SQC 1,9503 yij-yoo -0,1483 -0,1513 -0,1543 -0,1553 -0,0983 -0,0923 -0,0953 -0,0923 -0,0383 -0,0363 -0,0343 -0,0303 0,0787 0,0747 0,0777 0,0857 0,2027 0,1977 0,2037 0,2057 SQR 0,3226 yij-yi -0,1532 -0,1532 -0,1532 -0,1532 -0,0943 -0,0943 -0,0943 -0,0943 y i-yoo 0,004937 0,001937 -0,001063 -0,002063 -0,00400 0,00200 -0,00100 0,00200 yij-yio 0,004000 0,001000 -0,002000 -0,003000 -0,003750 0,002250 -0,000750 0,002250 -0,003500 -0,001500 0,000500 0,004500 -0,000500 -0,004500 -0,001500 0,006500 0,0002500 -0,004750 0,001250 0,003250 SQL 0,00019 yi - yio 0,0009375 -0,0009375 -0,0009375 -0,0009375 0,0002500 0,0002500 0,0002500 0,0002500 -0,0005625 -0,0005625 -0,0005625 -0,0005625 0,003313 0,003313 0,003313 0,003313 -0,002063 -0,002063 -0,002063 -0,002063

-0,0353625 -0,0029375 -0,0353625 -0,0009375 -0,0353625 0,0010625 -0,0353625 0,0050625 0,0825125 0,0825125 0,0825125 0,0825125 0,2003875 0,2003875 0,2003875 0,2003875 SQE 0,3223 -0,0038125 -0,0078125 -0,0048125 0,0031875 0,002313 -0,002687 0,003313 0,005313 SQEP 0,00026

Somas quadrticas SQT 32,2500 1,9505 21,1600 7,4100

1,9502

0,0814

0,000066

Coeficiente angular Coeficiente linear x i = varivel independente yi j = varivel dependente xm = S xi / n y i = correspondente a xm na funo calibrao yoo = mdia aritmtica dos valores de yi yio = mdia das replicatas (nvel i) Tabela 3. Anlise de varincias Fontes de Variabilidade dos totais da correo dos totais corrigidos da regresso do resduo do erro puro (replicatas) da linearidade Somas Quadrticas (SQ) 1,95053 0,08139 0,32260 0,32235 0,00025 0,00018 0,00006 Sa2 = 1,91511.10 -6 Sb2 = 7,09549.10 -7 O resultado foi expresso como (1,10 0,03) mg/L, ou seja, com 95% de confiana a concentrao de cdmio na soluo encontrava-se entre 1,07 e 1,13 mg/L. Em percentagem, a incerteza devido funo calibrao representou 3%. Clculo da incerteza total do resultado final Considerando que a amostra tinha sido diluda 100 vezes

0,2358 0,01419 SQT = soma quadrtica / totais SQC = soma quadrtica corrigida SQR = soma quadrtica / regresso SQE = soma quadrtica / resduo SQEP = soma quadrtica / erro puro (replicatas) SQL = soma quadrtica / linearidade

Graus de Liberdade 20 1 19 1 18 15 3

Mdias Quadrticas (MQ) 0,0975265 0,0813960 0,01697937 0,32235276 1,4191E-05 1,26333E-05 2,19792E-05 MQT FC MQC MQR MQE MQEP MQL

(2 diluies de 10 vezes, com pipeta volumtrica de 10 ml e bales volumtricos de 100 mL) e inicialmente estava contida em balo volumtrico de 250 mL, o resultado calculado, em massa, passou a ser 27,4 mg de cdmio (mg cdmio = 1,098 x 25). A Tabela 5 resume os componentes das incertezas devido s vrias etapas do procedimento analtico descrito para a determinao de cdmio.

Vol. 24, No. 3

Qualidade de Medies em Qumica Analtica

379

Tabela 4. Testes para verificao de linearidade e eficincia da regresso LINEARIDADE Fcalculado = MQL / MQEP = 0,1795 F3 ; 15 ; 0,025 = 4,15 Fcalculado < F crtico Aceita-se a linearidade EFICINCIA R = SQR / SQC = 0,9992 Aceita-se a eficincia
2

a diferente de zero? Fcalculado = MQR / MQE = 22 715 F 1 ; 18 ; 0,025 = 5,98 Fcalculado >> F crtico a diferente de zero EFICINCIA MXIMA R2mx = (SQC- SQEP) / SQC = 0,9994

Tabela 5. Fontes de incerteza para o clculo da incerteza total na determinao de cdmio. Fontes de incerteza xobs (mg/L) Vf (mL) fator de diluio massa inicial (mg) Valor (v) 1,098 250 2 x 10(**) 56,3 Incerteza Incerteza Padro (1s) Padro (1s/v) 0,01689 (*) 0,1096 0,02234 (**) 0,1225 0,01538 0,0004384 0,002234 0,002176

(*) valor obtido utilizando a estimativa de Sy da regresso dividida pelo coeficiente angular da curva analtica - expresso (2) [ 0,003982 / 0,2358=0,01689]; (**) corresponde a 2
2 diluies de 10 vezes; portanto, s = 2 x (0,0158 ) = 0,02234

Seguindo as recomendaes internacionais estabelecidas para nomenclatura e expresso de incertezas em medies11,12, so mostrados em seguida os clculos para incerteza combinada e incerteza combinada expandida para o resultado de 27,4 mg. Clculo da incerteza combinada - u u(C ) 27,4
(C)

efetuar um maior nmero de replicatas para a amostra de concentrao desconhecida. Em trabalhos de rotina, recomenda-se estabelecer a funo calibrao com pelo menos 5 pontos, distribudos de forma eqidistante, ao longo da faixa de trabalho desejada. Estudos para planejamento otimizados 21,27 sugerem fazer 2 replicatas pelo menos para as concentraes mais alta e mais baixa da faixa de trabalho estudada. A ISO 8466/9028 recomenda procedimento com 10 replicatas de cada uma das concentraes mais alta e mais baixa da faixa de trabalho, mantendo-se leitura nica para os pontos intermedirios, para checar a homogeneidade de varincias. Como observado no presente estudo, replicatas de amostras e de solues de referncia, usadas para a construo da curva de calibrao, so fatores importantes que determinam os graus de liberdade a serem considerados no clculo das mdias quadrticas, na anlise de varincia, e que influenciam no valor a ser obtido para a incerteza dos resultados. A abordagem das incertezas, da forma como foi discutida, no pretendeu subestimar outras fontes de variabilidade importantes, que so as interferncias e efeitos de matriz em uma anlise qumica, porm no includas nesta discusso. CONCLUSO

= (0,01538)2 + (0,0004384)2 + (0,002234)2 + (0,002176)2

u(C) = 0,01570 x 27,4 u(C) = 0,43 Resultado Final: (27,4 0,4) mg Clculo da incerteza combinada expandida - U U = 2 x 0,43 U = 0,86 Resultado Final : ( 27,4 0,9) mg U (em percentagem) = 3% COMENTRIOS Observa-se que a incerteza combinada expandida expressa em percentagem de 3% referente ao resultado 27,4 mg, tem o mesmo valor obtido para a incerteza da funo calibrao. Comparando-se os valores de incertezas das vrias etapas do procedimento analtico adotado (Tabela 5), percebe-se que as incertezas relativas obteno da massa inicial (CV = 0,002176), diluio inicial (CV = 0,0004384) e ao fator de diluio (CV = 0,002234) so bem menores que a incerteza associada medio obtida com a funo calibrao (CV = 0,01538). O exemplo apresentado refere-se medio nica da amostra de concentrao desconhecida. Analisando a expresso (III), observa-se que, medida que o nmero de replicatas R de amostras aumentar, o termo MQE/ R diminuir e, conseqentemente o termo T Syi / a da expresso (II). Portanto a incerteza do valor de interesse tambm diminuir, medida que se

O exemplo dado como estudo de caso mostra a importncia de se conhecer as parcelas de incertezas que contribuem ao resultado final, uma vez que permite identificar a etapa que mais contribui incerteza total do resultado final. So recomendadas medidas de controle 29 para que a qualidade dos resultados gerados em laboratrio seja monitorada. A funo calibrao, muito empregada na qumica analtica, pode ser planejada, a fim de proporcionar uniformidade s prticas metrolgicas nos diversos laboratrios que venham a gerar resultados a serem comparados entre si, ou que venham a representar informaes para decises em situaes de impasse. A discusso da qualidade de resultados analticos, atravs das incertezas associadas s medies obtidas, representa contribuio necessria uniformizao para os seus clculos, ao mesmo tempo conscientizando o qumico analista a respeito da correta expresso de resultados em anlise qumica. A recomendao para utilizar o Sistema Internacional de Unidades ajudou a uniformizar a expresso das medies nas reas cientficas e tecnolgicas. Da mesma forma necessrio o consenso para o clculo e a expresso da incerteza em medies, a fim de facilitar a interpretao apropriada dos resultados em anlises qumicas. REFERNCIAS 1. Royal Soliety of Chemistry / Analytical Methods Committee; Analyst 1995, 120 , 2303. 2. Horwitz, W.; Albert, R.; Analyst 1997, 122, 615. 3. ISO GUIDE 25; General Requirements for the competence of testing and calibration laboratories. 4 th Edition, 1997 (E).

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