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Introdução a Espectrometria de
Massas
Prof. Fabio Gozzo
Introdução
• Espectrometria de massas (MS, do inglês Mass
Spectrometry) é o estudo da matéria através
da formação de íons em fase gasosa que são
caracterizados pela relação m/z (relação
massa/carga).
Aplicabilidade
Usos da MS
Instrumentação
Introdução
Fonte de Analizador
de Detector
Ionização de m/z
amostras
Vácuo
Direto EI B Multiplicador e-
GC CI Q MCP
HPLC APCI Tof
CE APPI IT
ESI LIT
MALDI ICR
…. Orbitrap
…
Qual é a massa de um átomo ?
M=5
Como o núcleo
não explode ?!!
4 Forças Universais
E = MC2
Fusão de um núcleo
E
Repulsão
Eletromagnética
+ +
0
x
Atração
Força Nuclear
Quando dois prótons se funde …
Qual é a massa de um átomo ?
Massa
E = MC2
Defeito de Massa
• Nenhum átomo (c/ excessão do 12C) tem
massa inteira
• Diferença é chamada de Defeito de Massa
Defeito de Massa
Energia de Ligação do Núcleo e
Defeito de Massa
Unidade de Massa Atômica (u)
• u = 1.6605 x 10-27 kg ( 1/12 12C)
• Proton: 1.6726×10-27 kg (1.0073 u)
• Nêutron:1.6749 x 10-27 kg (1.0086 u)
• Elétron: 9.1093 × 10-31 kg (0.0005u)
• 1 Da = 1 u
Tipos de Massas Atômicas
• Nominal:
– Massa aredondada em 1 u:
• H = 1, C = 12, O= 16
• Média
– Massa média dos isótopos:
• H = 1.0079, C = 12.0107, N = 14.0067
• Monoisotópica:
– Massa do isótopo mais abundante:
• H = 1.0078, C = 12.0000, N = 14.0030
Massas Moleculares Exatas
• Consiste na soma das massas atômicas
monoisotópicas
• É única para cada fórmula:
– N2 = 28.0061
– C2H4 = 28.0313
– CO = 27.9949
– B2H6 = 28.0656
Isótopos Naturais
• Substâncias Orgânicas:
• 1H (99.98%), 2H (0.01%)
• 12C (98.93%), 13C (1.07%)
• 14N (99.63%), 15N (0.37%)
• 16O (99.80%), 18O (0.20%)
• 32S (94.93%), 34S (4.29%)
• 35Cl (75.78%), 37Cl (24.22%)
• 79Br (50.69%), 81Br (49.31%)
MS e Padrão Isotópico
• MS mede isótopos individuais e não massas
médias
• Substâncias apresentam várias massas
dependendo da composição isotópica
• Composição isotópica varia de acordo com a
composição química
O Espectro de Massas
Intensidade relativa ao
sinal mais intenso (100%)
Sinal mais intenso:
Pico base
C10H22 C20H42
CH4
M+1
M+1 M+1
M+2
17 284
706
Padrão Isotópico: Efeito do C
284 270
No de carbonos ~ I(M+1)-10%
CH3Cl CH3Br
Cl e Br
C15H31Cl
C20H41Br
C15H30Cl2
C20H40Br2
Regra do Nitrogênio
• Uma molécula orgânica neutra só terá massa
ímpar se ela tiver número ímpar de átomos de
nitrogênio:
– C2H4O: 44
– CH3CONH2: 59
– C6H4(NH2)2: 108
– C10H22O: 158
Instrumentação
Introdução
Fonte de Analizador
de Detector
Ionização de m/z
amostras
Vácuo
Direto EI B Multiplicador e-
GC CI Q MCP
HPLC APCI Tof
CE APPI IT
ESI LIT
MALDI ICR
…. Orbitrap
…
Ionização por Elétrons (EI)
77
O
50
51
120
43
39
27 74
63 91
45 85 98 102
0
20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130
(mainlib) Acetophenone
Fragmentação
124
100
OH
288
246
50 O
147
91
41 79
55 105 203
67
29
133 165 228
Testosterona
Isômeros 43
43 100
100
41
50 29 57 50
71
85
57
29
100
15 39
53 71 100
2 62 65 85 15 37 50 63 77
0 0
0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110
(mainlib) Heptane (mainlib) Hexane, 2-methyl-
43 57
100 100
43
41
71
50 50
85
29
27
29 41 55 39
39 15
57 69
15 37 50 53 62 65 84 100 2 12 63 77 81 99
0 0
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 0 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110
(mainlib) Pentane, 3-ethyl- (mainlib) Butane, 2,2,3-trimethyl-
Fragmentação
• Quatro mecanismos básicos:
– Dissociação sigma
– Clivagem alfa
– Clivagem indutiva
– Fragmentação remota
• Possibilidades de rearranjo
– Rearranjo de McLafferty
Dissociação Sigma
57
100
43
71
50
85
41
29
99 113 170
127
14 141
0
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 180
(mainlib) Dodecane
Dissociação Sigma
57
100
50
41
29
71
27 85
32 39 69 82 99 112 155
0
20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160 170 180
(mainlib) Decane, 2,2-dimethyl-
Clivagem Alfa
43
100
58
50
O
15
42
27 39
14 29 41 44 59
16 18 31 52 55 57
0
10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 70
(mainlib) Acetone
100
43
Clivagem Alfa 100
57
29
O O
50 50
72
86
29
27
27 57
15 28 42 44
26 39 71 73 15 18 41 50 62 65 68 71 84
0 0
10 20 30 40 50 60 70 80 10 20 30 40 50 60 70 80 90 100
(mainlib) 2-Butanone (mainlib) 3-Pentanone
43
100
50
86
41
27
71
28 31 39 42 87
53 56 59 67 70
0
20 30 40 50 60 70 80 90 100
(mainlib) 2-Butanone, 3-methyl-
100
Rearranjo de McLafferty
43
43
100
50
58
50
86
27 41 58 71 29 41
15 39
17 34 49 52 60 63 67 73 27 100
39 71 85
0 15
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 18 31 37 50 55 67 83 91
0
(mainlib) 2-Pentanone
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110
(mainlib) 2-Hexanone
100
43
Rearranjo de McLafferty
58
50
41 71
39
27
55 85 128
53 113
15 77 81 95 99
0
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140
(mainlib) 2-Octanone
57
100
29
50
27
85
41
72
114
39 43
15 31
19 45 63 78 91 98
0
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130
(mainlib) 3-Heptanone
Compostos Aromáticos
78
100
50
77
51
39
38 63 74 79
26 49
15 40 53
0
10 20 30 40 50 60 70 80 90
(mainlib) Benzene
Compostos Aromáticos
91
100
92
50
39 65
51 63
38 41 89
27 45 52 55 64 74 77 83 86 94
0
20 30 40 50 60 70 80 90 100
(mainlib) Toluene
100
Compostos Aromáticos 91
50
106
51 65 77
39 63
27 74 89
15 86
0
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120
(mainlib) Ethylbenzene 91
100
50
120
65 78
39 51 105
15 27 57 63 85 89 115
0
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130
(mainlib) Benzene, propyl-
Compostos Aromáticos 91
100
50
134
65
39 105
27 51 78
43 63 89 115
15 32 57 69 74 128
0
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150
(mainlib) Benzene, butyl- 91
100
50
148
65 105
29 41
78
51 57
15 43 63 89 119 133
0
10 20 30 40 50 60 70 80 90 100 110 120 130 140 150 160
(mainlib) Benzene, pentyl-