Mara Antonia Malajovich / Guas de actividades

Biotecnologa: enseanza y divulgacin

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Gua 10

BIOPROCESOS


INMOVILIZAO DE CLULAS EN ALGINATO

Las tcnicas de inmovilizacin se aplican tanto a las clulas como a los microorganismos y las
enzimas. Sus principales ventajas son facilitar la separacin del producto y permitir la recuperacin
del agente biolgico. En general, se utilizan con agentes biolgicos difciles de obtener o de precios
elevados.
La tcnica de inmovilizacin en alginato de sodio es relativamente simple. Se disuelve el alginato
de sodio en un poco de agua caliente, se mezcla bien, y cuando ya est fro se agregan las
levaduras. Se deja caer la mezcla final, gota a gota, en una solucin de cloruro de calcio. Con el
intercambio de iones calcio (del medio) y sodio (del alginato) se forma una matriz de alginato de
calcio que retiene las levaduras.
A pesar de tener consistencia slida, dicha matriz permite la circulacin de sustancias, de modo
que los agentes biolgicos conservan su actividad metablica. Una vez finalizadas las reacciones
qumicas esperadas, las bolitas de alginato y la levadura se recuperan fcilmente.

MATERIAL
Balanza, mechero Bunsen, trpode y malla metlica, 3 vasos de precipitados de 100 ml, 1 probeta
de 50 ml, 1 esptula, 5 jeringas de 10 ml (sin agujas), 2,5 g de fermento biolgico seco
instantneo (levadura), 1 g de alginato de sodio, agua destilada, 1 cuchara plstica, 1 vaso de
precipitados con 500 ml de solucin de cloruro de calcio 2%, 1 colador, 1 vaso de precipitados con
solucin de sacarosa (10%), 1 fermentador construido como se indica en la Gua 02 (Fermentacin
alcohlica: cmo montar un fermentador).

PROCEDIMIENTO
1. Disolver el alginato de sodio.









Mezclar bien
Mezclar bien
Calentar y disolver Enfriar

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2. Disolver la levadura.





3. Mezclar bien las dos soluciones y distribuirlas en las jeringas.







4. Inmovilizacin
Dejar caer, gota a gota, la mezcla de alginato de sodio y levaduras en la
solucin de cloruro de calcio. Agitar suavemente durante el procedimiento.
Conservar las esferas de alginato de calcio con las levaduras inmovilizadas
en solucin de cloruro de calcio 2%. Esperar 24 horas antes de iniciar la
primera fermentacin.
6 cm

5. Primer uso de las levaduras inmovilizadas.
Separar las esferas con un colador y luego de lavarlas con agua
destilada, colocarlas en el fermentador (solucin de sacarosa 10%)
para iniciar la fermentacin.



6. Recuperacin y acondicionamiento.
Concluida la fermentacin, colar nuevamente las esferas y
lavarlas con agua destilada. Conservar las levaduras
inmovilizadas en la heladera, en una solucin de cloruro de
calcio (2%).


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NUESTRO COMENTARIO
Las levaduras inmovilizadas sobreviven bastante tiempo en cloruro de calcio. Aun as, conviene
ponerlas a fermentar de vez en cuando. El alginato de sodio debe ser puro y de buena calidad; no
obtuvimos buenos resultados con el que se vende en los comercios de productos alimenticios, pero
tal vez sea necesario aumentar y ajustar la concentracin.

BIBLIOGRAFA
GODDING, B & SMITH, J. Staffordshire Biotechnology: Secondary Science Curriculum Review.
Staffordshire County Council Education Department, 1985.
MALAJOVICH, M.A. Vinos y vinagres. Biotecnologa y vida cotidiana. Manual de trabajos prcticos
de Biotecnologa. Buenos Aires, Argenbio, 2008. En http://www.porquebiotecnologia.com.ar/