Horas presenciales a la semana: 8 CODIGO: Crditos: 4
Modalidad del Curso: Presencial Regular
Hora presenciales ( por Modulo) Horas no presenciales ( por Modulo ) Total de horas por Modulo Crditos Crditos ajustados Terico
Teorico- Prctica
Terico Teorico- practica
27 28 54 56 168 4.1 4 3
ESTRUCTURA DEL COMPONENTE
Introduccin
El campo de inmunologa se ha venido desarrollado aceleradamente en los ltimos aos de tal manera que actualmente la inmunologa se considera una rama independiente de la ciencia. Como resultado de las investigaciones hechas en las ltimas dcadas sobre los diferentes tipos de enfermedades infecciosas y otras patologas, gran parte de la informacin obtenida explica que anormalidades en el funcionamiento del sistema inmune dan lugar a muchos trastornos patolgicos observados en diferentes rganos y sistemas.
Que el egresado de medicina tenga conocimientos slidos de la inmunologa bsica y clnica para lograr el entendimiento de los fenmenos que ocurren, presentacin clnica de las distintas enfermedades y las formas de abordaje de los casos, es el objetivo principal de ste mdulo.
Esperamos que ste componen te va a proveer el marco para el entendimiento de esos mecanismos mediante los cuales la terapia inmunolgica sea dirigida en beneficio del paciente.
COMPETENCIAS
Explica los componentes, caractersticas y hechos histricos del sistema inmune para adquirir el criterio cientfico necesario en la correcta explicacin del funcionamiento del sistema inmune.
Interpreta las bases moleculares y mecanismos inmunolgicos de la respuesta inmune innata mediante la discusin cientfica de casos Clnicos y la realizacin de pruebas de laboratorio que evalan la respuesta inmune innata.
Interpreta las bases moleculares y mecanismos inmunolgicos de la respuesta inmune adaptativa mediante la discusin cientfica de casos Clnicos y la realizacin de pruebas serolgicas de laboratorio que evalan la respuesta inmune adaptativa.
Aplica los conocimientos del sistema inmune para discutir las bases inmunolgicas de las inmunopatologas mediante la solucin de casos clnicos y discusin del manejo integral en atencin primaria.
TEMPORALIZACION
Unidad Tiempo presencial asignado (horas) Terico Terico-practico Total Introduccin al sistema inmune 2 2 4 Respuesta inmune innata 4 6 8 Respuesta inmune adaptativa 12 6 18 Inmunopatologas 12 14 26 Total 30 28 58
2 laboratorios, 3 tutoras y 6 seminarios. PLANIFICACION POR COMPETENCIA
COMPETENCIA DIMENSIONES DE LA COMPETENCIA
EVALUACION
CONOCIMIENTOS
HABILIDADES
ACTITUDES
CRITERIOS
EVIDENCIAS Explica los componentes, caractersticas y hechos histricos del sistema inmune para adquirir el criterio cientfico necesario en la correcta explicacin del funcionamiento del sistema inmune..
Introduccin a la inmunologa Definir el concepto de inmunidad y tipos de inmunidad. Caractersticas de la respuesta inmune. Elementos del sistema inmune: clulas, rganos, receptores, Interleucinas. Cientficos que han contribuido con el desarrollo de la inmunologa
Describe las caractersticas de la respuesta inmune.
Relata los acontecimientos histricos que han permitido el desarrollo de la inmunologa como ciencia
Muestra inters en los hombres de ciencia destacados en la inmunologa
Se preocupa por su formacin cientfica.
Identifica Clulas, rganos y sistemas que conforman el sistema inmune. Relata evolucin histrica de la inmunologa como ciencia y los investigadores que han contribuido al desarrollo de esta
Informe escrito sobre el anlisis de la evolucin histrica de la inmunologa como ciencia y los investigadores que han contribuido al desarrollo de esta. Registro de una exposicin oral en pblico abordando las caractersticas estructurales del del sistema inmune.
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PLANIFICACION POR COMPETENCIA
COMPETENCIA DIMENSIONES DE LA COMPETENCIA
EVALUACION
CONOCIMIENTOS
HABILIDADES
ACTITUDES CRITERIOS EVIDENCIAS . Interpreta las bases moleculares y mecanismos inmunolgicos de la respuesta inmune innata mediante la discusin cientfica de casos Clnicos y la realizacin de pruebas de laboratorio que evalan la respuesta inmune innata.
Fases de la Inflamacin y fagocitosis Tipo y funcin de receptores Complemento: Componentes, funcin, vas de activacin. Antgenos Anticuerpos: tipos, formacin, funcin. Pruebas de laboratorio que evalan inflamacin sistemica
Describe los elementos del sistema inmunolgico
Analiza los mecanismos de defensa inespecficos y naturales
Reconoce cuadro clnico de procesos inflamatorios agudos y crnicos Establece diagnostico y diagnsticos diferenciales de procesos inflamatorios.
Muestra actitud autocrtica y un comportamiento tico. Trabaja en equipos. Coordina con otros niveles y disciplinas. Mantiene actualizacin cientfica. Conducta investigativa permanente. Responsable y Enrgico. Acucioso y solidario. Receptividad.
Describe las fases de la respuesta inmune inespecfica y los rganos y clulas que participan Describe cual es la funcin de cada una de las clulas que participan en la inflamacin Explica la funcin del complemento en la respuesta innata Examen escrito que evalua conocimientos sobre los mecanismos de inflamacin y fagocitosis como las bases de la inmunidad innata
Registro de una exposicin oral en pblico abordando la Interpretacin las pruebas de diagnostico de la respuesta inmune inespecfica
PLANIFICACION POR COMPETENCIA
COMPETENCIA DIMENSIONES DE LA COMPETENCIA
EVALUACION
CONOCIMIENTOS
HABILIDADES
ACTITUDES CRITERIOS EVIDENCIAS
Interpreta las bases moleculares y mecanismos inmunolgicos de la respuesta inmune adaptativa mediante la discusin cientfica de casos Clnicos y la realizacin de pruebas serolgicas de laboratorio que evalan la respuesta inmune adaptativa.
Procesamiento y presentacin de antgenos
Maduracin, activacin y diferenciacin de las celulas T y B Respuesta inmune mediada por clulas Respuesta inmune de humoral. Respuesta inmune ante microorganismos: Inmunologa de Grupos sanguneos El uso de vacunas frente a las enfermedades inmuno prevenibles Pruebas de diagnstico serolgico: ELISA, IFI, Aglutinacin. Indica las caractersticas de los elementos del sistema inmune involucrados en la respuesta especfica
Analiza los mecanismos de respuesta inmune del ser humano frente a agentes extraos
Indica y aplica vacunas segn esquemas.
Utiliza las normas de vacunacin del MINSA.
Reconoce complicaciones de las vacunas.
Muestra actitud autocrtica y un comportamiento tico.
Trabaja en equipos.
Coordina con otros niveles y disciplinas.
Mantiene actualizacin cientfica.
Conducta investigativa permanente.
Responsable y Enrgico.
Acucioso y solidario.
Receptividad.
Describe las caractersticas inmunopatolgicas del Antigeno
Explica la interaccin entre inmunidad Innata e Inmunidad adaptativa Explica la cinetica de las inmunoglobulinas Conoce las bases inmunolgicas de aplicacin de vacunas Informe sobre caso clnico en el que explica a partir de este las bases morfofuncionales de la respuesta inmune especfica,
Registro de exposicin pblica sobre produccin de anticuerpos y los mecanismos efectores de la respuesta inmune adaptativa
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PLANIFICACION POR COMPETENCIA
COMPETENCIA DIMENSIONES DE LA COMPETENCIA
EVALUACION
CONOCIMIENTOS
HABILIDADES
ACTITUDES CRITERIOS EVIDENCIAS
Aplica los conocimientos del sistema inmune para discutir las bases inmunolgicas de las inmunopatologas mediante la solucin de casos clnicos y discusin del manejo integral en atencin primaria.
Alergenos, composicin, propiedades. Tipos de Hipersensibilidad: Mecanismos inmunolgicos , manifestaciones clnicas, pruebas de laboratorio que apoyan el diagnstico. Manejo Farmacolgico de las hipersensibilidades
Realiza historia clnica y examen fsico completo de reacciones hipersensibilidad
Reconoce cuadro clnico en pacientes con hipersensibilidad I, II, III y IV.
Aplica tcnicas de estudios para reconocer a un paciente alrgico.
Establece diagnostico y diagnsticos diferenciales.
Reconoce complicaciones.
Elabora plan teraputico farmacolgico y no farmacolgico.
Muestra actitud autocrtica y un comportamiento tico.
Trabaja en equipos.
Coordina con otros niveles y disciplinas.
Mantiene actualizacin cientfica.
Conducta investigativa permanente.
Responsable y Enrgico.
Acucioso y solidario.
Receptividad. Describe las caractersticas inmunolgicas de las hipersensibilidade s Explica la fisiopatologa de las reacciones de hipersensibilidad correlacionndola con las reacciones inmunolgicas
Examen para evaluar mediante la descripcin y explicacin de los eventos que correlacionan la clnica con los mecanismos inmunolgicos que provocan las reacciones de hipersensibilidad
Registro de explicacin oral del manejo integral que debe darse a cada una de las hipersensibilidades
PLANIFICACION POR COMPETENCIA
COMPETENCIA DIMENSIONES DE LA COMPETENCIA
EVALUACION
CONOCIMIENTOS
HABILIDADES
ACTITUDES CRITERIOS EVIDENCIA
Aplica los conocimientos del sistema inmune para discutir las bases inmunolgicas de las inmunopatologas mediante la solucin de casos clnicos y discusin del manejo integral en atencin primaria. Definicin de enfermedad autoinmune.
Clasificacin de las enfermedades autoinmunes.
Epidemiologa de las enfermedades autoinmunes ms frecuentes en nuestro medio.
Fisiopatologa del lupus eritematoso, glomerulonefritis y artritis reumatoidea.
Cuadro clnico. Diagnostico y diagnostico diferencial.
Mtodos diagnsticos. Tratamiento farmacolgico y no farmacolgico de las enfermedades autoinmunes
Criterios de referencia y contrarreferencia.
Elabora la historia clnica y examen fsico completo.
Indica e interpreta exmenes complementarios pertinentes.
Realiza el diagnstico y diagnostico diferencial.
Elabora plan teraputico inicial, farmacolgico y no farmacolgico.
Cumple con las indicaciones de la referencia y contrarreferencia.
Educa y orienta al individuo, la familia y la comunidad en relacin a su enfermedad y manejo integral. Muestra actitud autocrtica y un comportamiento tico.
Trabaja en equipos.
Coordina con otros niveles y disciplinas.
Mantiene actualizacin cientfica.
Conducta investigativa permanente.
Responsable y Enrgico.
Acucioso y solidario. Describe las bases inmunolgicas de las enfermedades autoinmune. Explica los cambios fisiopatologicos que llevan a las enfermedades autoinmunes Clasifica los diferentes tipos de enfermedades autoinmunes
Informe escrito de la resolucin de un caso clnico que le permite explicar las manifestaciones y los diagnosticos diferenciales de las enfermedades autoinmunes
Registro de la exposicin pblica sobre la Interpretacin de criterios clnicos y de diagnostico de las enfermedades autoinmune
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PLANIFICACION POR COMPETENCIA
COMPETENCIA DIMENSIONES DE LA COMPETENCIA
EVALUACION
CONOCIMIENTOS
HABILIDADES
ACTITUDES CRITERIOS EVIDENCIAS
Aplica los conocimientos del sistema inmune para discutir las bases inmunolgicas de las inmunopatologas mediante la solucin de casos clnicos y discusin del manejo integral en atencin primaria. Conceptos y tipos de inmunodeficiencias (Primaria y Secundaria). Epidemiologa. Manifestaciones clnicas de las inmunodeficiencias . Inmunodeficiencias adquiridas: Interaccin del virus VIH, con el sistema inmune. Cuadro clnico. Diagnostico y diagnostico diferencial Mtodo diagnstico. protocolos de Dx. Ley 238. Repercusiones psicosociales. Programa VIH - MINSA Criterios de referencia y contrarreferencia. Elabora historia clnica y examen fsico completo. Reconoce cuadro clnico. Indica e interpreta exmenes de laboratorio especficos y complementarios para el diagnostico de las inmunodeficiencias. Maneja integral y adecuadamente al paciente con inmunodeficiencias segn la edad. Educa al paciente, la familia y la comunidad en relacin a las medidas de proteccin y prevencin del paciente con Inmunodeficiencia. Utiliza planes y programas del MINSA para paciente con VIH. Cumple y hace cumplir las leyes de proteccin del paciente. Ley 234. Utiliza criterios de referencia y contrarreferencia. Muestra actitud autocrtica y un comportamiento tico.
Trabaja en equipos.
Mantiene actualizacin cientfica.
Conducta investigativa permanente.
Responsable y Enrgico.
Solidario y Acucioso. Describe los tipos de inmunodeficiencias Sospecha a partir de manifestaciones clnicas un probable caso de inmunodeficiencia Refiere a un nivel mayor de atencin medicas los casos sospechosos de inmunodeficiencia Informe escrito sobre el anlisis las caractersticas clnicas que le permiten sospechar una inmunodeficiencia Registro de una exposicin oral en pblico del manejo en atencin primaria de las inmunodeficiencias primarias.
ESTRATEGIAS DE APRENDIZAJE
Las estrategias metodolgicas en el presente componente sern de tipo participativas, constructivista, en el cual el estudiante construya el conocimiento a partir de conocimientos previos, estimulando el autoaprendizaje, su independencia crtica sobre la informacin necesaria para su ejercicio profesional.
El programa temtico de este componente incluye un total de 40 actividades, subdivididos entre las 4 unidades, que tienen como propsito elevar el nivel de conocimiento intelectual del estudiante y como consecuencia, el desarrollo de sus habilidades para comprender el funcionamiento del sistema inmunolgico y las bases inmunolgicas de las inmunopatologas. El Ambiente de aprendizaje estar constituido por auditorios, aulas de clases, laboratorios, bibliotecas. Conferencias: Orientadas de una forma que permita en los estudiantes la construccin de conocimiento, en la que los estudiantes intercambien conocimientos con el docente, formulen preguntas y generen ellos mismos posibles respuestas que van surgiendo durante la clase. Seminarios: Se trata de actividades formativas especficas de coordinacin y relatora, adems de generar espacios de dilogos para el despliegue de competencias argumentativas e interpretativas. La actividad predominante es la investigacin formativa, la sistematizacin de conocimientos. Esta actividad es de carcter obligatorio, realizndose al menos una vez por semana. Laboratorio: Tendr como finalidad el desarrollo y fortalecimiento de la comprensin de tcnicas de laboratorio en el rea de la inmunologa, haciendo uso de medios y equipos convencionales. Esta actividad es de carcter obligatorio, ya que se requiere que desarrolle las habilidad de comprender estos procesos y necesarias para su formacin profesional. EVALUACION DE LOS APRENDIZAJES
La evaluacin se llevar a cabo sobre la base de un continuo control de asistencia, dedicacin, aprendizaje y rendimiento, por parte del personal docente que supervisa al estudiante. Se tendr en 11
cuenta el cumplimiento satisfactorio del trabajo de apoyo asignado, su modo de integracin a un equipo de trabajo, su efectiva participacin a las actividades de apoyo terico-prctico. Aprobacin del componente: El estudiante deber cumplir satisfactoriamente con el programa propuesto, donde tendr que completar un total de 4 crditos acadmicos, como parte de una calificacin ponderada, obtenida despus de la realizacin de un Examen terico durante el curso, stas evaluaciones estarn comprendidas por la sumatoria de las calificaciones Terico-Prctico constituidas por laboratorios 10%, seminarios 30%, tutoras 20% para un acumulado del 60% y el examen terico que corresponder al 40% de la evaluacin restante.
Bibliografa:
BASICA
Thomas J. Kindt, Richard A. Goldsby y Barbara A. Osborne. Editor: Javier de Len Fraga 2007 Inmunologa de Kuby. 6ta Ed. Editorial. Mexico. McGRAW-HILL INTERAMERICANA EDITORES, S.A. de C.V.
Abul K. Abbas, Andrew H. Lichtman. Editor: Shiv Pillai. 2008 Inmunologa Celular y Molecular. 6ta Espaa. Ed. Editorial ELSEVIER SAUNDERS
J.R. Regueiro Gonzales, C. Lpez Larrea, S. Gonzales Rodrguez y E. Martnez Naves. Editor: A. Lpez V. 2010 Inmunologa Biologa y Patologa del sistema inmune. 3ra Ed. Espaa. Editorial Medica Panamericana.
Steven A. Frank. 2002. Immunology and Evolution of Infectious Disease. Inglaterra. Princeton University Press Princeton and Oxford. MODULO SISTEMA INMUNOLOGICO CARRERA DE MEDICINA III AO. 2013 PLAN CALENDARIO 1ra Rotacin SEM FECHA HORA TEMA DOCENTE
1 Lunes 4 marzo 10 am Introduccin a la inmunologa M. Cceres 11 am rganos y Clulas del Sistema inmune M. Cceres Martes 5 marzo 10 am Inflamacin y Fagocitosis 2 h. W. Morales Mircoles 6 marzo 10 am Interleucinas D. Reyes 11am Complemento O. Mayorga Jueves 7 marzo 11am Antgenos y Anticuerpos B. Leiva
2 pm Seminario 1 rganos y clulas del sistema inmune
2 Lunes 11 marzo 10 am Procesamiento y Presentacin de antgenos F. Espinoza 11 am Maduracin y diferencia. de clulas T D. Reyes Martes 12 marzo 10am Inmunidad Humoral y mecanismos efectores de la inmunidad adaptativa 2 h. W. Morales Mircoles 13 marzo 11 am Respuesta inmune frente a virus M. Cceres Jueves 14 marzo 11 am Respuesta inmune frente a Parsitos y Hongos A. Tllez 2 pm Seminario 2 Respuesta inmune innata
3
Lunes 18 marzo 10 am Respuesta inmune frente a bacterias D. Reyes 11 am Inmunologa de grupos sanguneos A. Tllez 2pm Tutora No 1. Apertura Martes 19 marzo 10 am Profilaxis y Vacunacin2horas F. Espinoza
Mircoles 20 marzo 11 am Tec. Laboratorio. uso comn en inmunologa B. Leiva 2 pm Laboratorio No. 1 Respuesta inmune innata Jueves 21 marzo 11 am Reacciones de Hipersensibilidad I O. Mayorga 2 pm Seminario 3 Respuesta inmune adaptativa Viernes 22 marzo 8 am Tutora No 1. Cierre
4
Martes 2 abril 10 am Reacciones de Hipersensibilidad II O. Mayorga 11 am Reacciones de Hipersensibilidad III O. Mayorga 2pm Tutora No 2. Apertura Mircoles 3 abril 11 am Reacciones de Hipersensibilidad IV B. Leiva 2 pm Laboratorio No. 2 Reacciones serolgicas Jueves 4 abril 11 am Tolerancia Inmunolgica
W. Morales 13
SEM FECHA HORA TEMA Docente Jueves 4 abril 2 pm Seminario 4 Hipersensibilidad Viernes 5 abril 8 am Tutora No 2. Cierre
5 Lunes 8 abril 10 am Autoinmunidad 2 h. F. Espinoza 2 pm Tutora 3 Apertura Martes 9 abril 10 am Inmunoterapia S. Treminio Mircoles 10 abril 11 am Inmunodeficiencias Primarias C. Reyes Jueves 11 abril 11 am Inmunodeficiencias adquiridas: VIH SIDA M. Cceres 2 pm Seminario No. 5 Autoinmunidad Viernes 12 abril 8 am Tutora No 3. Cierre
6 Lunes 15 abril 10 am Trasplantes y rechazo A. Tllez 11 am Inmunidad frente a Tumores D. Reyes Martes 16 abril 2 pm Seminario No. 6 Inmunodeficiencias Jueves 18 abril 11 am Examen final de mdulo Viernes 19 abril 9 am Publicacin de notas de fin de modulo
Dra. Mercedes Cceres Coordinador de Mdulo SEMINARIO No. 1 INTRODUCCIN AL SISTEMA INMUNE
OBJETIVOS. 1. Explicar las Caractersticas generales del sistema inmune 2. Analizar los Tipos de inmunidad que se generan segn la respuesta del sistema inmune 3. Estudiar los rganos y clulas que conforman el sistema inmune 4. Indagar sobre hechos histricos que han permitido el desarrollo de la inmunologa.
INTRODUCCIN
EI sistema inmune surgi durante la evoluci6n para combatir las infecciones causadas por virus, bacterias, protozoos, hongos y helmintos. Estos pat6genos pueden ser responsables de infecciones intracelulares o extracelulares, para las cuales la respuesta inmune debe ser diferente. EI sistema inmune ha desarrollado una variedad de respuestas apropiadas para combatir cada tipo de patgeno, al mismo tiempo que mantiene la tolerancia a los componentes del propio organismo. Genera una enorme variedad de clulas y molculas capaces de reconocer y eliminar de manera especfica invasores extraos. Todas esas clulas y molculas actan en conjunto en una red dinmica. El sistema puede reconocer patrones moleculares que caracterizan a grupos de patgenos comunes y atacarlos de manera rpida y decisiva. Incluso es capaz de detectar diferencias qumicas sutiles que distinguen a un patgeno de otro. Encima de todo, puede discriminar entre molculas extraas y clulas y protenas del cuerpo (discriminacin entre propio y extrao). Adems, est capacitado para reconocer clulas propias alteradas que pueden desembocar en cncer.
Aunque se hace referencia al sistema inmunitario, debe sealarse que existen dos formas de respuesta, la inmunidad innata y la inmunidad adaptativa (o adquirida), que colaboran para proteger al organismo. Se conoce a la respuesta inmunitaria innata como la primera lnea de defensa del husped frente a los microorganismos. Este sistema lleva ese nombre debido a que sus mecanismos efectores existen aun antes de que aparezca la noxa. Esta tipo de inmunidad debe su importancia a bsicamente tres funciones: 15
Es la respuesta inicial a los microorganismos, previene infecciones e incluso puede eliminar completamente a cierto tipo de noxas. Sus mecanismos efectores estimulan a la inmunidad adaptativa e influyen en el tipo de respuesta. La inmunidad adaptativa utiliza, adems de sus mecanismos, a los de la inmunidad innata.
Para comprender los fenmenos de la respuesta inmune, es necesario tener conocimiento de cada uno de los elementos que componen al sistema inmune, esto nos facilitar el desarrollo del criterio cientfico para interpretar las bases moleculares y mecanismos inmunolgicos de la respuesta inmune y aplicacin de este conocimiento en la solucin de casos clnicos.
Cuestionario
1. Mencione las caractersticas generales del sistema inmune, relacionndolas con los diferentes tipos de respuesta inmune. 2. Explique los tipos de inmunidad que se pueden generar ante diferentes formas de respuesta inmune, explique con un ejemplo cada caso. 3. Haga un esquema para explicar la hematopoyesis de las diferentes clulas que componen el sistema inmune. 4. Cules son los rganos que forman parte del sistema linftico, explique la funcin y estructura de cada uno de ellos. 5. Estudie cada una de las clulas que forman parte del sistema inmune, de ellas describa: Valor normal, funcin, marcadores que las identifican, localizacin, 6. Que son los receptores de tipo Toll, que funcin tienen en el sistema inmune y que otros tipos de receptores juegan un rol importante en el sistema inmune. 7. Que es el sistema de histocompatibilidad y que rol juegan en el sistema inmune. 8. Mencione los hechos histricos que han favorecido el desarrollo de la Inmunologa como ciencia, haciendo nfasis en los cientficos participantes.
SEMINARIO No. 2
Respuesta inmune inespecfica
OBJETIVOS
Explicar los mecanismos de inflamacin y fagocitosis como las bases de la inmunidad innata. Explicar las funciones y vas de activacin del complemento como mecanismo inespecfico de defensa Describir los mecanismos de respuesta inmune inespecfica frente a las enfermedades infecciosas. Interpretar los datos de laboratorio que se reportan en los casos
CASO Paciente del sexo masculino, procedente de la comarca Chacaraseca, es traido por su madre a la emergencia del HEODRA, La madre refiere que su hijo tiene todas sus inmunizaciones, tiene buen desempeo escolar, sin antecedentes a destacar, nicamente que hace una semana le observa lesiones pruriginosas en tronco y miembros; 48 horas antes del ingreso nota tumefaccin de cara interna de muslo derecho, con rubor y calor local. En las horas siguientes la tumefaccin aumenta de tamao, y agrega fiebre de hasta 38C axilar, por lo que consulta. En sala de mergencia del HEODRA se diagnostica escabiosis y absceso de muslo, es visto por cirujano que lo drena, saliendo abundante pus, se le deja dreno. Ingresa al Servicio de Infecciosos con cefalosporina por va intravenosa. En la sala supura en forma abundante durante las primeras 48 horas, destacndose adems que mantiene un rea indurada, dolorosa, eritematosa alrededor del orificio del mismo. En los anlisis de laboratorio se destaca una leucocitosis de 22.400 glbulos blancos por mm 3 , hemoglobina y plaquetas dentro de lmites normales, PCR de 42,8 mg/dl. A las 72 horas, del ingreso se obtiene el resultado del estudio bacteriolgico que informa el desarrollo de Staphylococcus aureus meticilino resistente. Se retira la cefalosporina y se inicia, en ese momento, tratamiento con vancomicina intravenosa a las dosis habituales. Mostrando franca mejora de la supuracin y reduccin del rea indurada e eritematosa en los siguientes das. Luego de haber completados cinco das de vancomicina, y con la herida seca y en vas de cicatrizacin, es dado de alta sin antibiticos.
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Cuestionario
1. Explique las caractersticas estructurales y productos extra celulares (enzimas y toxinas) de S. aureus, haciendo nfasis en el rol que juegan en su interaccin con el sistema inmune y en la patogenia. 2. La principal defensa contra la infeccin estafiloccica es la respuesta inmune innata en relacin a esta, explique detallando cada uno de los elementos como acta la barrera cutnea? 3. Detalle las fases de la inflamacin del proceso clnico presentado. 4. Una de las fases de la inflamacin es la liberacin de mediadores, diga cuales son y explique el efecto de cada uno.
5. Que es la fagocitosis y como ocurre.?
6. Cules son las alteraciones que tiene el paciente y que Ud. Puede reconocer como producto del proceso inflamatorio. 7. Que elementos de la respuesta inmune inespecfica forman el componente exudativo y como se produce. 8. Seale los efectos que permiten entender el carcter defensivo local del proceso inflamatorio. 9. Qu es fiebre, que funcin tiene y como ocurre durante la respuesta innata. 10. Interprete los anlisis de Laboratorio y haga una relacin de estos con la respuesta Inmune Innata Nota: Fundamente sus respuestas mediante la construccin en la pizarra de figuras, grficos o esquemas, que puede estudiar en los libros que le han sido entregados y en las presentaciones en power point que los profesores les entregan despus de cada conferencia.
SEMINARIO No. 3
Respuesta Inmune Adaptativa
OBJETIVOS
Conocer los mecanismos de la respuesta inmune adaptativa. Explicar los diferentes procesos efectores de la respuesta inmune celular y humoral Describir la cintica de la respuesta inmune ante las enfermedades infecciosas. Interpretar los datos de laboratorio que se reportan en los casos
CASO
Paciente mujer de 53 aos que ingres a la emergencia por presentar un cuadro de 3 das de evolucin caracterizado por dolor torcico tipo pleurtico a nivel escapular izquierdo, asociado a tos y expectoracin purulenta. Un da antes del ingreso se agreg disnea. El da del ingreso present diaforesis, disnea al reposo, palpitaciones, y mayor dolor en regin escapular izquierda. El examen fsico revel una paciente en shock, frecuencia cardiaca en 110 latidos por minuto, frecuencia respiratoria en 36 por minuto, y temperatura oral en 39C. Luca diafortica, polipneica, la amplexacin estaba disminuida en hemitrax izquierdo con disminucin del murmullo vesicular en 2/3 inferiores de hemitrax izquierdo, egofona y disminucin de vibraciones vocales.
Los exmenescomplementarios mostraron: hematocrito: 29% , leucocitosis ( 21500) con neutrofilia (92%), plaquetas (438000), glicemia: 74 mg/dl, urea: 75 mg/dl, creatinina: 0.7 mg/dlTinciones Ziehl- Neelsen y Giemsa de esputo negativos. La radiografa de trax mostr efusin pleural en 2/3 de hemitrax izquierdo, con desplazamiento del mediastino hacia la derecha.
El cultivo del lquido pleural revel S. pneumoniae (sensible por el mtodo de Kirby-Bauer a ampicilina, cefalexina, ceftriaxona, ciprofloxacino, cloranfenicol, eritromicina, oxacilina, penicilina, rifampicina, tetraciclina, teicoplanina y vancomicina). Los hemocultivos fueron negativos. La paciente recibi cobertura antibitica con ceftriaxona, presentado una evolucin favorable. Egres con diagnstico de Neumona tpica causada por S. pneumoniae
Cuestionario
1. Explique las caractersticas estructurales de S. pneumoniae, haciendo nfasis en el rol que juegan en su interaccin con el sistema inmune y en la patogenia. 2. Defina que es Neumona y cual es la principal puerta de entrada del microorganismo en caso de neumona bacteriana. 3. En las vas areas inferiores los mecanismos de defensa son anatmicos, mecnicos, humorales y celulares, haga referencia a cada uno de ellos. 19
4. Explique la respuesta inmune adaptativa frente a microorganismos, haciendo nfasis en el procesamiento del antgeno, presentacin, elementos que participan y procesos efectores de la respuesta inmune celular y humoral. 5. Haga una grfica de la cintica de las inmunoglobulinas y su importancia en el diagnstico de los procesos infecciosos. Tome como ejemplo particular el caso Neumona atpica debida a Micoplasma pneumoniae y/o C. trachomatis. 6. Discuta sobre el diagnstico serolgico de la Neumona, periodo de toma de la muestra, tipo de anlisis que se utilizan, interpretacin, sensibilidad y especificidad de los mismos. 7. Discuta el tipo de inmunidad que fue adquirida al momento de la infeccin. 8. Investigue si existe vacuna para prevenir la Neumona por S. pneumoniae, documente su respuesta. 9. Interprete los anlisis de Laboratorio y haga una relacin de estos con la respuesta Inmune
Nota: Fundamente sus respuestas mediante la construccin en la pizarra de figuras, grficos o esquemas, que puede estudiar en los libros que le han sido entregados y en las presentaciones en power point que los profesores les entregan despus de cada conferencia.
SEMINARIO No. 4
REACCIONES DE HIPERSENSIBILIDAD
OBJETIVOS Describir los mecanismos inmunolgicos que explican las reacciones de hipersensibilidad. Conocer de las manifestaciones clnicas caractersticas en las reacciones de hipersensibilidad Describir las formas de diagnostico inmunolgico en las reacciones de hipersensibilidad.
Caso 1 Paciente de sexo femenino de 10 aos de edad, originario del Barrio de Guadalupe, sin antecedentes personales ni familiares para destacar, es llevado por su madre al centro de salud Dra. Perla Ma. Norori, consulta por sndrome febril y odinofagia de 3 das de evolucin. Al examen fsico el nio se encontraba en buen estado general, febril, con amigdalas congestivas, exudado amigdalino blanquecino y cadena ganglional cervical anterior palpable. Se realiza exudado farngeo y se indica 600.000 Unidades de Penicilina benzatinica, que le son aplicadas por la enfermera de turno en el Centro de Salud. A los 15 minutos de haber regresado a su casa el nio comienza con un cuadro de urticaria generalizada, por lo que es llevado a la emergencia del HEODRA. Al examen fsico presentaba ppulas en el tronco, los miembros y la cara, angioedema de prpados y labios, tiraje subcostal, sibilancias diseminadas en ambos campos pulmonares, frecuencia cardaca de 130 por minuto, presin arterial 120/80, saturacin de O2 99% con aire ambiental y relleno capilar menor de 3 segundos. Se aporta O2 en mscara, se coloca venoclisis perifrica y se administra una dosis de epinefrina a 1 mg/kg y de hidrocortisona a 10 mg/kg junto con nebulizaciones con salbutamol. Treinta minutos despus del tratamiento se evidencia mejora de los sntomas cutneos y respiratorios, y se decide la internacin del paciente para control. A las 24 horas de internacin se otorga el alta hospitalaria con antihistamnicos y corticoides por va oral.
Cuestionario 1. De acuerdo a la clasificacin de Gell y Coobs que tipo de Hipersensibilidad presenta este paciente, documente su respuesta, explicando los criterios clnicos que justifican su respuesta 2. Explique la respuesta inmune en este tipo de hipersensibilidad a partir de la llegada del antgeno desencadenante y concluyendo con la etapa de presentacin de los sntomas que reporta el paciente. 21
3. Ante la sospecha clnica de este tipo de hipersensibilidad cuales son las medidas de urgencia que Ud. Indicara. 4. Qu tipo de pruebas complementarias son de utilidad para investigar el tipo de antgeno desencadenante de esta hipersensibilidad.
Caso 2
Paciente femenino de 22 aos de edad, con dermatosis diseminada a tronco, extremidades superiores e inferiores. De tronco afecta regin periumbilical, submamaria y borde anterior de axila; de extremidades superiores afecta brazos y antebrazos, en superficies de extensin. En extremidades inferiores afecta muslos por todas sus caras. Bilateral y simtrica. La dermatosis est constituida por una placa liquenificada y pigmentada y numerosas ppulas y costras hemticas. Es crnica y pruriginosa. La paciente refiere haber iniciado hace un ao y medio, con lesiones periumbilicales, que cursaron con remisiones y exacerbaciones durante un ao, posteriormente aparecieron lesiones en pliegues, brazos, antebrazos y dorso de manos. Como tratamiento anterior recibi escabicidas, lubricacin y esteroides tpicos de mediana y alta potencia. Se le aplicaron pruebas epicutneas con la serie estndar Europea de Chemotechnique, encontrando una prueba positiva dos cruces a nquel. El resto de los alrgenos fueron negativos). Se indic lubricacin, crema de hidrocortisona y se proporcion un instructivo por escrito, para evitar el contacto con el nquel. Se explic ampliamente acerca de la naturaleza de la enfermedad, y se corrobor la desaparicin de las lesiones en el plazo de cuatro meses.
Cuestionario
1. De acuerdo a la clasificacin de Gell y Coobs que tipo de Hipersensibilidad presenta este paciente, documente su respuesta, explicando los criterios clnicos que justifican su respuesta 2. Explique la respuesta inmune en este tipo de hipersensibilidad a partir de la llegada del antgeno desencadenante y concluyendo con la etapa de presentacin de los sntomas que reporta el paciente, utilice para ello, esquemas, figuras, grficos etc. 3. Que tipo de pruebas complementarias son de utilidad para investigar el tipo de antgeno desencadenante de esta hipersensibilidad.
Nota: Fundamente sus respuestas mediante la construccin en la pizarra de figuras, grficos o esquemas, que puede estudiar en los libros que le han sido entregados y en las presentaciones en power point que los profesores les entregan despus de cada conferencia.
SEMINARIO No. 5
ENFERMEDADES AUTOINMUNES
OBJETIVOS
Conocer las bases inmunolgicas de las enfermedades autoinmunes mas frecuentes en nuestro medio Describir las manifestaciones clnicas relevantes de las enfermedades autoinmunes segn los casos. Explicar las formas de diagnostico inmunolgico en cada uno de los casos Caso Paciente del sexo femenino, de 37 aos de edad, con antecedentes de salud aparente (Enfermedades Crnicas no Transmisibles), refiere que desde hace aproximadamente 2 aos viene presentando dolor en las articulaciones sobre todo en las de los dedos de las manos, las muecas y las rodillas, que se aliviaba con analgsicos y antiinflamatorios, pero no le haba dado importancia debido a que labora en una fbrica de telas y refiere haber pensado que era debido al exceso de trabajo, adems con mucha frecuencia presento fatiga, malestar general, en determinadas ocasiones fiebre sin ninguna causa y sensibilidad a la luz solar, hasta que hace 3 das comienza a notar que estaba perdiendo el cabello en demasa y adems se not en las mejillas y el puente nasal un enrojecimiento que empeoro a la exposicin del sol. Niega otros sntomas. Por tales motivos tan preocupantes para la paciente decide acudir al consultorio mdico de la familia ubicado en su barrio. Se procede al examen fsico de la paciente.
DATOS POSITIVOS AL EXAMEN FSICO
PIEL. Se constato erupcin cutnea, en forma de "mariposa" en las mejillas y el puente nasal. CUERO CABELLUDO. Se constata zonas con escasos cabellos as como zonas alopcicas. SISTEMA CARDIOVASCULAR. Ruidos cardiacos arrtmicos y audibles, se ausculta roce cardiaco. SISTEMA OSTEOMIOARTICULAR. Se constata dolor a la palpacin sobre todo en las pequeas articulaciones y en las grandes articulaciones sobre todo en rodillas. EXAMEN NEUROLGICO. Se constata nerviosismo e inquietud, as como hiperreflexia patelar.
EXMENES COMPLEMENTARIOS
Pruebas de anticuerpos, incluyendo: o Pruebas analticas de anticuerpos antinucleares (AAN o AANF) POSITIVO o Anti-ADN bicatenario. POSITIVO o Anticuerpos antifosfolpidos. POSITIVO o Anticuerpos anti Smith. POSITIVO Conteo sanguneo completo que mostro los niveles bajos de glbulos blancos, hemoglobina y plaquetas Radiografa de trax que mostro pleuritis o pericarditis Anlisis de orina que mostro sangre, cilindros o protena en la orina Biopsia renal que informo Nefropata mesangial Ensanchamiento mesangial leve o hipercelularidad leve. Hipercelularidad moderada. Componente 3 del complemento (C3 y C4). BAJOS Factor reumatoideo. NEGATIVO RPR una prueba para sfilis. NEGATIVO Electroforesis de globulina en suero. BAJO Electroforesis de protena en suero. BAJO
Se le prescribe tratamiento con Antinflamatorios e inmunomoduladores, y recomend medidas generales para minimizar y sntomas y reducir inflamacin y mantener funciones normales del cuerpo.
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Cuestionario
1. De acuerdo a la historia clnica que tipo enfermedad autoinmune tiene esta paciente, documente su respuesta. 2. Explique detalladamente las bases inmunolgicas de la enfermedad autoinmune que tiene la paciente del caso. 3. Discuta los criterios Epidemiolgicos, clnicos y de laboratorio que apoyan el diagnstico de enfermedades autoinmunes. 4. Mencione los diagnsticos diferenciales ms importantes a tomar en cuenta en pacientes que presenten este tipo de patologa. 5. Cul es el manejo integral que deben recibir las y los pacientes con enfermedades autoinmunes como las de este caso. 6. A nivel de atencin primaria cual considera Ud. Es la responsabilidad del Mdico ante casos como este.
SEMINARIO No.6
INMUNODEFICIENCIAS
OBJETIVOS
Estudiar las bases moleculares de la inmunodeficiencias secundarias Efecto de la desnutricin sobre el sistema inmune Diagnstico y manejo de los casos de inmunodeficiencias en la comunidad
CASO
Paciente de 4 aos de edad, procedente de Villa 15 de Julio Chinandega, es la quinta hija de una familia de 8, madre actualmente embarazada, la nia se presenta con un peso de 25 libras, talla de 82 cms, PC de 50 cms, al examen fsico presenta, pelo en bandera, los ojos con xeroftalmia, queilosis en comisura de la boca, palidez, esta edematosa, abdomen globoso, aptica, responde poco a estmulos. Tiene antecedentes de infecciones respiratorias, de piel y diarreicas a repeticin. En el momento actual es transferida de su centro de salud al hospital por presentar un episodio caracterizado por fiebre, tos con expectoracin, distress respiratorio, a la auscultacin se escucha estertores B/A diseminados en ambos campos pulmonares. Anlisis complementarios: 18.100 leucocitos/mm3 (neutrfilos: 78,6%, linfocitos: 13,9% y monocitos: 6,6%). Hematocrito de 25%.
Cuestionario:
1. Analice el caso clnico y explique cul de los siguientes tipos de desnutricin es el ms probable en esta paciente: Desnutricin tipo marasmo o kwashiorkor. Documente su respuesta.
2. Explique con un esquema o grafico como afecta al sistema inmune el tipo de desnutricin que tiene la paciente.
3. Discuta como afecta la desnutricin la inmunidad celular y la inmunidad humoral
4. Explique qu relacin existe entre micronutrientes y respuesta inmune, analice como se afecta esta relacin en los pacientes desnutridos.
5. Describa los tipos de exmenes complementarios que le permiten valorar la afectacin y/o competencia del sistema inmune en pacientes desnutridos.
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TUTORIA 1
Temario Mecanismos inmunolgicos de las infecciones pulmonares crnicas Fases de la Inflamacin granulomatosa Inmunopatologia de laTuberculosis PROPOSITO Discutir la respuesta inflamatoria crnica como la base fundamental de la respuesta inmune en la Tuberculosis pulmonar.
Resuelva aplicando los pasos del ABP La hemoptisis de Don Chente. Paciente masculino de 83 aos, originario de Villa 15 de Septiembre Chinandega, tabaquista, sin antecedentes personales patolgicos de importancia. Fue referido al servicio de emergencias del HEODRA por prdida de peso, disnea, hemoptisis, tos productiva de entre 15 y 22 das de evolucin. Se adjuntaron copias de esputos por BK negativos y reporte radiolgico de tele de trax: campos pulmonares con aumento heterogneo de la densidad a nivel apical derecho, adosado y ensanchado, la lnea para traqueal derecha que mide 5cm de dimetro y de contorno irregular. No presenta masas ni cavernas, con impresin diagnstica: bronconeumona, proceso tuberculoso infectado, derrame pleural derecho . En el momento del examen fsico se encuentra un paciente consiente, orientado, no disneico, con hipo ventilacin de los campos pulmonares, con roncus apicales predominantes y murmullo vesicular aceptable. No se palpan adenopatas. El abdomen y las extremidades se encuentran normales. Durante la hospitalizacin el paciente present picos febriles, tos frecuente, no hemoptisis. Se le recogieron tres esputos para Estudios bacteriolgicos, que fueron reportados como: BAAR+++. Se inici el tratamiento intensivo y se egres al no presentar nuevos perodos febriles.
ELEMENTOS A ENFATIZAR Bases inmunolgicas de la tuberculosis pulmonar
PRODUCTO Elaborar en un volumen no mayor de 4 pginas los objetivos planteados y un organizador grafico que le permita conocer, Inmunofisiopatologa de la Tuberculosis
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TUTORIA No. 2
Temario Mecanismos inmunolgicos de hipersensibilidades III Presentacin clnica Diagnostico y manejo de las hipersensibilidades III
PROPOSITO Discutir las bases inmunolgicas y clnicas de las alteraciones ocurridas en la hipersensibilidad por depsitos de complejos inmunes. Resuelva aplicando los pasos del ABP La inflamacin de Jacinto Jacinto, de 10 aos de edad, es trado a la consulta por sus padres porque tiene fiebre, amanece con la cara inflamada, orina menos y cuando lo hace, la orina es color marrn. Una semana antes, el nio haba padecido una piodermitis estreptoccica (imptigo) cuya etiologa fue confirmada por cultivos. Jacinto presenta edema palpebral bilateral, y edema premaleolar bilateral. Al examen fsico se constata hipertensin arterial (140/96 mmHg), fiebre, taquicardia, edema periorbitario, edema premaleolar blando con godet positivo. No se hallan signos de ascitis ni de masa renal palpable. Al laboratorio encontramos leucocitocis leve, creatininemia y uremia (BUN) elevadas, ASO 300 Todd, crioglobulinas sricas presentes. Hay hipocomplementemia C3. En el anlisis de orina se hallan cilindros hemticos y proteinuria. El estudio histopatologico demuestra glomerulonefritis difusa con proliferacin mesangial, endotelial y epitelial, con un patrn granular ante la inmunofluorescencia debido al depsito de IgG, IgM y C3 (al microscopio electrnico encontraremos depsitos subepiteliales El diagnstico es Glomerulonefritis Postestreptoccica
PRODUCTO Elaborar en un volumen no mayor de 4 pginas los objetivos planteados y un organizador grafico que le permita reconocer los casos de hipersensibilidad III y sus formas de manejo clnico. TUTORIA No. 3
TEMARIO: Fisiopatologa de las Inmunodeficiencias adquiridas VIH Manifestaciones clnicas Formas de diagnostico y tratamiento en stos casos PROPOSITO
Discutir las bases inmunolgicas y el manejo integral de las alteraciones ocurridas en los pacientes seropositivos para VIH Resuelva aplicando los pasos del ABP Paciente varn de 36 aos de edad, con infeccin por VIH-1, que acude al servicio de Urgencias por un cuadro de fiebre, dolor torcico y de garganta, y malestar general de 48 horas de evolucin. El diagnstico de la infeccin por VIH haba sido realizado haca 3 aos (estadio C1). Entre sus antecedentes clnicos de inters destacaban un episodio de tuberculosis cuando tena 15 aos, del que fue tratado con xito, y episodios recurrentes de neumona (4 durante el ltimo ao) tratadas satisfactoriamente. El ltimo episodio de neumona lo padeci 10 das antes del ingreso en Urgencias y fue tratado con ceftriaxona (2 g/24h) durante 5 das evolucionando favorablemente, sin que se aislase ningn microorganismo responsable. Recientemente se le haba retirado la terapia antirretroviral (zidovudina, lamivudina e indinavir) debido a intolerancia, y en la ltima carga viral efectuada presentaba 45.458 copias/ml (QUANTIPLEX 3.0 bDNA, CHIRON Diagnostics) con una cifra de CD4+ de 814/ml. En la exploracin fsica el paciente estaba alerta y febril (39C) siendo el resto de exploraciones normales. La radiografa de trax fue normal y en el hemograma presentaba 8.100 leucocitos/mm3 con 5.350 neutrfilos/mm3; linfocitos 3.936/mm3; y una hemoglobina de 16.5 g/dl. Se le realizaron hemocultivos y se le tomaron muestras de esputo de las que no se recuper ningn patgeno. El paciente fue diagnosticado de infeccin respiratoria del tracto superior e inici tratamiento emprico con azitromicina (500 mg/d). A la semana sus sntomas respiratorios haban cedido pero continuaba con fiebre. Se le practicaron de nuevo hemocultivos donde a las 24 h de incubacin creci en una de las 3 extracciones una bacteria Gram. positiva de morfologa corineforme. El paciente se recuper de la fiebre y no lleg a recibir tratamiento con antibiticos. PRODUCTO En un documento no mayor de 4 paginas desarrollar los objetivos planteados y elaborar un esquema del manejo del paciente VIH positivo 29
LABORATORIO NO. 1. SEMANA 3
FACULTAD DE CIENCIAS MEDICAS UNAN-LEON MODULO SISTEMA INMUNOLOGICO - MEDICINA III CURSO
Introduccin
Ante la presencia de agentes extraos y agresivos, nuestro cuerpo reacciona generando una respuesta inmune inespecfica muy importante como primera lnea de defensa y fundamental para los eventos subsiguientes de la defensa. Esta fase inicial se caracteriza por una serie de eventos locales y sistmicos en los que se ven involucrados factores humorales y clulas actuando en forma de cascada. Uno de los eventos iniciales es el aumento de ciertas protenas conocidas como protenas de fase aguda, la mejor conocida es la Protena C Reactiva sintetizada por el hgado y de la cual se piensa que interviene en la activacin de la va alterna del complemento, se encuentra normalmente en el suero y su aumento indica la existencia de un proceso inflamatorio.
Por otro lado, muchos microorganismos tienen la propiedad de activar la accin del Complemento, este es un complejo de aproximadamente 20 protenas que actan en forma de cascada y de manera inespecfica con acciones quimiotacticas, opsonizacion y de lisis con el objetivo de eliminacin de un agente extrao. La activacin del complemento se puede dar por dos vas, la va clsica y la va alterna.
En un proceso inflamatorio, la velocidad con que los eritrocitos sedimentan (VSG) se ve tambin alterada por el mismo aumento de diferentes protenas en sangre cuyo principal responsable es el fibringeno, su presencia la aumenta o retarda. Su alteracin esta tambin ntimamente ligada a la relacin albmina-globulina y cuando esta se pierde, como por ejemplo en procesos infecciosos, se perturba el equilibrio que mantiene en suspensin los hemates y estos descienden fcilmente. El embarazo normal eleva el nivel de este factor y la sedimentacin se acelera desde su inicio, es por eso un proceso inespecfico. Su inespecificidad le da limitantes a la prueba por lo que no es 100 % concluyente.
Como parte de la respuesta inflamatoria, los microorganismos son engullidos (fagocitados) por clulas sanguneas como los neutrfilos o polimorfonucleares y en los tejidos por los macrfagos. Los neutrfilos son alrededor del 60% de los leucocitos sanguneos y su numero aumenta de manera significativa durante la infeccin (Leucocitosis). No obstante, debe tomarse en cuenta que en ciertas infecciones, como en la tifoidea, el numero de leucocitos disminuye (leucopenia).
Actividad No. 1 VELOCIDAD DE SEDIMENTACION GLOBULAR (VSG)
1. Seleccione a uno de sus compaeros como modelo 2. Haga una venopuncin y extraiga 5 cc de sangre 3. Coloque en un tubo de ensayo limpio 2.5 cc de la sangre (para extraer suero y usarlo con las otras pruebas) y en otro tubo conteniendo EDTA coloque los otros 2.5 cc mezclar bien. 4. Usando una jeringa con aguja de Wintrobe coloque sangre en un tubo de Wintrobe hasta la marca 0. 5. Coloque el tubo en una gradilla de sedimentacin durante 1 hora 6. Lea los milmetros que los eritrocitos descendieron durante la hora. Explique el principio de esta prueba Mencione los valores normales Diga porque esta prueba no es especifica Mencione tres situaciones clnicasen que esta prueba resulta alterada
Actividad No. 2. DETERMINACION DE PROTEINA C REACTIVA (PCR)
1. Seleccione a uno de sus compaeros como paciente. 2. Haga una venopuncion para la extraccin de 5 cc de sangre. 3. Deje coagular para luego extraer el suero mediante centrifugacin 4. Deje que los reactivos estn a temperatura ambiente 5. En la lamina de aglutinacin coloque 1 gota de suero 6. Agite la suspensin de latex conteniendo los anticuerpos anti-PCR y coloque una gota sobre la gota de suero. 7. Mezclar y rotar la preparacin durante 2 minutos 8. Buscar aglutinacin y anotar el resultado.
Anote el principio de esta reaccin Mencione 3 situaciones en que esta reaccin resulta positiva Describa su utilidad diagnostica.
Actividad No. 3 ACCION DEL COMPLEMENTO
1. En un tubo de ensayo pequeo, coloque una gota de suero de pollo con alto contenido de complemento. 2. Coloque dos gotas de suspensin del agente infeccioso suministrado. 3. Adicionar un tubo control colocando una gota de solucion salina y dos gotas de la suspensin del agente infeccioso 4. Incubar los tubos durante 30 minutos a 37C. 5. Haga una preparacin al fresco de las suspensiones y ver al microscopio con lente de 40X. 6. La positividad de la reaccin se observa al no encontrar microorganismos por haber sido lisados por la accin del complemento.
Describa la forma en que se activo el complemento en su experimento Pueden los agentes infecciosos evadir la accin del complemento? De que manera?
Actividad No. 4 LEUCOCITOS EN SANGRE PERIFERICA
1. Haga a uno de sus compaeros una puncin del dedo y extraiga sangre con un capilar. 2. Haga un extendido con una gota de sangre. Dejar que se seque. 3. Fijar con metanol y teir con Giemsa 4. Una vez seca la preparacin, ver al microscopio con lente 100x y diferenciar las clulas.
Que clulas encuentra con mayor frecuencia? Que forma tienen? Mencione cada una de las clulas observadas y describa su papel dentro de la inmunidad inespecfica. Mencione los valores normales de cada una de ellas.
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LABORATORIO NO. 2. SEMANA 4
FACULTAD DE CIENCIAS MEDICAS UNAN-LEON MODULO SISTEMA INMUNOLOGICO - MEDICINA III CURSO
PRACTICA DE LABORATORIO
REACCIONES SEROLGICAS
OBJETIVOS:
1. Describir los diferentes tipos de reacciones antgeno-anticuerpo. 2. Demostrar la utilidad de las reacciones inmunolgicas para el diagnstico de las afecciones mas comunes. 3. Describir los principios tericos, caractersticas y limitaciones de algunas pruebas inmunolgicas.
INTRODUCCION
En la interaccin in vitro de un antgeno con su correspondiente anticuerpo se distinguen dos etapas, la reaccin primaria, no visible y la reaccin secundaria, que sigue a la anterior y se caracteriza por un fenmeno visible como precipitacin, aglutinacin, etc. Las reacciones primarias pueden detectarse por diferentes tcnicas como el radioinmunoanlisis (RIA), enzimoinmunoanlisis (ELISA) y la inmunofluorescencia (IFI). Todas estas tcnicas se caracterizan porque la identificacin del antgeno o del anticuerpo tiene lugar por una interaccin simple, sin la participacin de fenmenos asociados, como ocurre en las reacciones secundarias. Cuando la reaccin ocurre in vivo, como consecuencia de esta reaccin antgeno-anticuerpo pueden aparecer fenmenos biolgicos colaterales como la necrosis en la reaccin de Arthus, los fenmenos vasognicos y contractura de la musculatura lisa en la anafilaxis como resultado de la liberacin de histamina etc. Estas manifestaciones se denominan reacciones terciarias.
Reacciones secundarias antgeno-anticuerpo:
Las manifestaciones secundarias de la reaccin antigeno-anticuerpo incluyen precipitacin, aglutinacin, reacciones dependientes de complemento, neutralizacin y efectos citotrpicos. Estas reacciones tienen importancia clnica para el mdico, ya que constituyen la base de una serie de pruebas de laboratorio utilizadas para descubrir e identificar antgenos, anticuerpos o complejos de antgeno-anticuerpo que intervienen en procesos patolgicos.
Precipitacin
En la precipitacin, el antgeno es una molcula soluble y por tanto tiene que formarse una red voluminosa antes de que pueda verse un agregado visible. Para crear una red de magnitud suficiente se necesita un nmero elevado de molculas de anticuerpo y los reactantes han de estar en proporciones ptimas. Por otra parte, en la aglutinacin el antgeno forma parte de una partcula voluminosa insoluble, como un glbulo rojo o una clula bacteriana, y se necesitan relativamente menos molculas para que tenga lugar la agregacin visible. En consecuencia, la aglutinacin es una prueba serolgica ms sensible que la precipitacin. Los anticuerpos IgM son aglutinadores ms eficaces que los anticuerpos IgG, por el mayor nmero de zonas de combinacin del anticuerpo en la molcula de IgM. Por otra parte, las IgG son mejores precipitinas que la IgM. La formacin de estos complejos precipitantes ha sido explicada mediante la teora del enrejado, que establece que la precipitacin ocurre por la formacin de una red tridimensional entre molculas del antgeno y del anticuerpo, que resulta en agregados insolubles. Dada la bivalencia del anticuerpo y multivalencia del antgeno, las posibilidades de combinacin varan segn que en la mezcla exista exceso de antgeno, exceso de anticuerpo o equivalencia de ambos.
Dinmica de la reaccin de precipitacin.
Si se mezclan cantidades crecientes de antgeno soluble con una cantidad constante de anticuerpo y se mide el precipitado resultante, puede comprobarse una relacin de dosis respuesta. Inicialmente no se forma precipitado alguno. A medida que aumenta la cantidad de antgeno se crean pequeas cantidades de precipitado, que aumentan de manera gradual, hasta llegar a un mximo. Si prosigue la adicin de antgeno, la cantidad de precipitado disminuye con lentitud hasta que desaparece del todo.
Esta curva puede dividirse en tres zonas, que se indican en la figura siguiente: En la primera zona de reaccin, llamada pro-zona, hay un exceso relativo de anticuerpo. Cada uno 33
de los dos sitios de combinacin de la molcula de anticuerpo puede reaccionar con una molcula de antgeno. El resultado es la formacin de complejos compuestos de un anticuerpo unido a dos antgenos. No queda antgeno para mayor unin con el exceso de anticuerpo; por lo tanto, cesa la formacin de la red y la precipitacin. En el lquido no queda antgeno libre.
En el centro, o sea en la zona de equivalencia, las concentraciones de antgeno alcanzan proporciones ptimas. Aqu las concentraciones relativas de antgeno y anticuerpo son tales que puede producirse la precipitacin mxima. Si despus de eliminado el precipitado se examina el lquido sobrenadante, se comprueba que no contienen ni anticuerpo ni antgeno libres.
El rea del lado derecho se denomina la regin de exceso de antgeno o de post-zona. Aqu se forma poco precipitado, y puede descubrirse antgeno libre en el lquido sobrenadante. Alcanzado este punto, hay demasiado poco anticuerpo para combinarse con las zonas receptoras antignicas.
Estas reacciones de precipitacin tienen particular importancia en clnica. La fagocitosis es eficaz para suprimir agregados que se forman en la regin de las proporciones ptimas. Pero complejos de antgeno-anticuerpo formados con exceso de antgeno tienen la capacidad de iniciar una secuencia de lesin inflamatoria destructora, caracterstica del trastorno del tipo de enfermedad del suero. Estos complejos son suficientemente pequeos para seguir solubles en la circulacin, pero tambin lo suficiente voluminosos para producir lesin inmunitaria de los tejidos, activando el complemento.
Las pruebas de precipitacin, aparte de efectuarse en medios lquidos, tambin se llevan a cabo en medios semi-slidos, como el agar, donde se permite que uno o ambos constituyentes difundan hacia el otro. Una solucin de agar se coloca en una placa de Petri; se preparan pequeos pozos en el gel; y en estos pozos se ponen antgeno y anticuerpo. Durante la incubacin, ambos, antgeno y anticuerpo, difunden uno hacia el otro desde los pozos e interactan para formar precipitados en el agar.
Aglutinacin
Cuando un anticuerpo es puesto en contacto con su antgeno especfico, si ste se encuentra al estado particulado (como hemates, bacterias, clulas), las partculas se aglomeran y aglutinan. Los principios que regulan esta reaccin son los mismos que para la precipitacin. La ocurrencia de uno u otro fenmeno depende de si el antgeno es particulado o soluble. En un comienzo se crey que la aglutinacin se deba a un tipo de anticuerpo denominado aglutinina. Hoy se sabe que un mismo anticuerpo puede dar aglutinacin con una suspensin bacteriana y precipitacin con un lisado obtenido a partir del mismo microorganismo.
El mecanismo de la aglutinacin ha sido explicado por la teora del enrejado, igual que ocurre con la precipitacin. De modo similar, en la aglutinacin tambin se puede presentar el fenmeno de pre-zona. Por ejemplo, cuando se valora un antisuero, la disminucin de los anticuerpos por dilucin hace que decrezca la aglutinacin hasta hacerse nula. No obstante ello, en algunos sueros se observa un comportamiento particular, caracterizado por ausencia de aglutinacin en los primeros tubos de la serie, en los que la concentracin de anticuerpos es mxima, con aglutinacin positiva a diluciones mayores.
Mtodos cualitativos
Son muy utilizados en serologa diagnstica con el objeto de identificar bacterias, en las determinaciones de grupos sanguneos, etc. Por ejemplo, la reaccin de Huddleson para brucelosis, reaccin de Widal para las salmonelosis, la serotipificacin de Shigella, etc. Estas reacciones se efectan en portaobjetos mezclando suspensiones de las bacterias o hemates para identificar con antisueros diferentes. La formacin de grumos indicar la especificidad del sistema reaccionante.
Mtodos cuantitativos
Consisten en determinar cul es la mxima dilucin de una muestra de suero capaz de aglutinar al antgeno especfico. Las diluciones generalmente se hacen en razn 2 y el ttulo se expresa por la inversa de la mxima dilucin aglutinante. Si la dilucin 1/1024 aglutina y no lo hace la dilucin 1/2048, el ttulo ser 1024.
Aglutinacin pasiva
Cantidades de anticuerpos contra un antgeno soluble no pueden detectarse por precipitacin si su concentracin no excede los 20 g/ml -1 . Teniendo en cuenta que la aglutinacin es ms sensible, se ha procurado fijar antgenos solubles a partculas, de modo de transformar la precipitacin en aglutinacin. Ello se ha logrado mediante su fijacin a eritrocitos y partculas inertes como el ltex y la bentonita. A la reaccin que resulta del empleo de glbulos rojos como soporte se la llama hemaglutinacin pasiva o indirecta. Generalmente las uniones de los antgenos a los soportes son no covalentes y la fijacin se obtiene por mezcla directa o previo acondicionamiento de la superficie de las partculas. En el caso de los eritrocitos, la fijacin de hidratos de carbono no necesita intermediarios; en cambio para las protenas es necesario el tanizado previo o tratamiento con glutaraldehdo.
La aglutinacin pasiva es un mtodo semicuantitativo que, al igual que la aglutinacin, permite determinar concentraciones relativas de anticuerpos sobre la base de la mxima dilucin aglutinante. Es cuatro veces ms sensible que la aglutinacin y mucho ms aun que la precipitacin.
Ello es consecuencia del tamao de las partculas antignicas que intervienen en la reaccin. En la precipitacin, el antgeno es molecular y se necesitan muchos complejos Ag-Ac agregados para que la reaccin se visualice, en tanto que en la aglutinacin pasiva se lo ha transformado en una partcula de gran tamao, capaz de dar aglutinados con pocas de ellas. 35
Cuadro 9-4. Valores aproximados de la concentracin mnima de anticuerpos detectables por los diferentes mtodos inmunoserolgicos.
Actividad 1. Deteccin Gonadotropina corionica humana (hCG) por Inmunocromatografa en Nitrocelulosa
La Gonodotropina Corinica humana es una hormona glicoproteica producida por la placenta durante el embarazo. Habitualmente est presente en suero y orina a partir del sptimo da despus de la concepcin y la mayora de las mujeres embarazadas tiene niveles de hCG en suero y orina iguales o superiores a 100 mUI/mL el da de la primera falta de menstruacin. Adems de en el embarazo, pueden encontrarse concentraciones elevadas de hCG en enfermedades trofoblsticas de origen gestacional y no gestacional. Este tipo de situaciones deben identificarse antes de diagnosticar un embarazo. No es posible distinguir un embarazo normal de un embarazo ectpico nicamente sobre la base de los resultados del ensayo. Un aborto espontneo tambin puede provocar confusiones en la interpretacin de los resultados del ensayo. Una orina diluida puede originar resultados negativos. Si a pesar del resultado negativo, se sospecha un embarazo, es conveniente repetir el ensayo 48 h despus utilizando la primera orina de la maana. El diagnstico clnico no debe basarse exclusivamente en el resultado de este ensayo, sino que debe integrar los datos clnicos y de laboratorio.
FUNDAMENTO DEL MTODO Una vez depositada la muestra en el pocillo correspondiente, un anti-hCG marcado con oro coloidal se solubiliza y se une a la hCG presente en la muestra. La mezcla fluye por capilaridad a travs de la tira. El complejo hCG-anticuerpo marcado se une a un anti-hCG inmovilizado en la zona de reaccin apareciendo una banda de color. El anticuerpo marcado que no se ha unido genera una banda de color en la zona control, indicando el correcto funcionamiento del ensayo.
COMPOSICIN A. Reactivo: Contiene un gotero de muestra y un cassette con una tira de reaccin preparada con anticuerpo anti-hCG conjugado a oro coloidal y anticuerpo anti-hCG y anticuerpos control inmovilizados.
MUESTRAS Suero u orina recogido mediante procedimientos estndar. No es preciso filtrar ni centrifugar. Para obtener resultados ptimos, se recomienda utilizar la primera orina de la maana, aunque puede utilizarse orina recogida a cualquier hora del da. Las muestras son estables durante 2 das a 2-8C o hasta un mes si se congelan.
PROCEDIMIENTO 1. Dejar atemperar los materiales y las muestras a temperatura ambiente. 2. Sacar el cassette del interior de la bolsa y apoyarlo sobre una superficie plana. 3. Mediante el gotero de muestra, depositar 2 gotas (60-90 L) de orina o suero en el pocillo de muestra del cassette marcado como S. 4. Examinar los resultados despus de 3-5 minutos de la adicin de la muestra.
LECTURA Examinar la presencia de bandas coloreadas en la ventana del cassette. Resultado positivo. Aparecen dos bandas de color: una en la zona de test T y la otra en la zona de control C. El resultado es positivo aunque las bandas sean dbiles. En los sueros con elevada concentracin de hCG, la banda en la zona de control C puede ser dbil. Resultado negativo. Aparece una banda de color nicamente en la zona de control C. Resultado Incorrecto. Ausencia de bandas de color o presencia de una nica banda en la zona de test T. Si se obtiene un resultado incorrecto volver a ensayar la muestra utilizando un nuevo cassette.
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Actividad 2 Aplicacin de la reaccin de aglutinacin para la determinacin del Tipo sanguneo y el factor rhesus o Rh.
En 1900 Karl Landsteiner descubri que los eritrocitos de humanos no eran iguales antignicamente y que en 1a poblacin humana se dan cuatro tipos sanguneos A, B, AB, O. Adems, encontr que el plasma contena diferentes anticuerpos contra antgenos de la membrana de los eritrocitos. Estos anticuerpos no tenan efectos sobre las clulas rojas en el mismo individuo. Sin embargo si un individuo tuviera un tipo A en sus clulas sanguneas, los anticuerpos en su suero no seran compatibles con los eritrocitos del tipo sanguneo B y si se le transfundiera sangre tipo B ocurrira una reaccin antgeno-anticuerpo en su sistema circulatorio.
Los 4 tipos antignicos de clulas rojas contienen los siguientes anticuerpos en el plasma:
Tipo antignico de Grupo Anticuerpos en plasma o suero (aglutingeno) (aglutininas)
A (Anti B) B (Anti A) AB No posee O Anti A y Anti B
A partir de esto podemos observar que se necesitan slo dos sueros de tipificacin para determinar todos los cuatro tipos sanguneos y los sueros tipificantes se denominan de acuerdo al tipo de eritrocito que aglutinan.
Materiales: - Lminas portaobjetos. - Antisueros anti-A, anti-B y anti-D. - Algodn con alcohol al 70%. - Algodn seco - Lancetas - Aplicadores de madera, Lapiz marcador.
PROCEDIMIENTO
1. En una lmina portaobjetos dibuje dos crculos de ~ 2cm, usando un lpiz marcador de cera. Marque un crculo con la letra A y el otro con B. 2. En otra lmina dibuje un solo crculo al centro y mrquelo con las letras RH. 3. Limpie el extremo del dedo anular con el algodn empapado en alcohol al 70% y squelo con otro algodn. 4. Abra la lanceta y puncione el dedo. Oprima levemente para que se forme una gota esfrica de sangre y acerque la lmina, en el crculo A, hasta que haga contacto y se adhiera a sta. Extraiga otra gota y tmela en el crculo B. Extraiga otra gota y tmela en la otra lmina marcada como RH. 5. De inmediato agregue una gota de suero anti-A y una gota de suero anti-B en sus crculos correspondientes. Mezcle usando un palillo diferente para cada crculo. Del mismo modo aada una gota del suero anti-D a la gota de sangre de la otra lmina marcada con RH y mezcle con otro palillo. 6. Rote las lminas suavemente por 1 2 minutos y observe si se produce aglutinacin.
Si la aglutinacin ocurre en el lado A, entonces su tipo sanguneo es A, si la aglutinacin es en el lado B, su tipo es B, si la aglutinacin ocurre en ambos lados, es AB. Si no hay aglutinacin, su tipo es O. Si hay aglutinacin en la lmina con anti-D, entonces es Rh positivo, en el caso contrario ser Rh negativo.
Actividad 3. Reaccin de floculacin para diagnstico de la sfilis.
La sfilis es una enfermedad de transmisin sexual causada por la espiroqueta Treponema pallidum. Para su diagnstico inmunolgico se usan pruebas que detectan antgenos no treponmicos y treponmicos. Los primeros son sustancias que no proceden del cuerpo de los treponemas sino de tejidos de mamferos que tienen reaccin cruzada con constituyentes de la pared celular de estas bacterias. Por la facilidad con que se obtiene el antgeno de las pruebas no treponmicas, stas son baratas y de fcil ejecucin. Sin embargo, tienen poca especificidad debido a que otras enfermedades tambin inducen la produccin de anticuerpos que reaccionan con el mismo antgeno. Por esto, las pruebas no treponmicas se emplean para el tamizaje o el diagnstico presuntivo de la sfilis. Una reaccin positiva debe confirmarse mediante una prueba treponmica como el test de inmunofluorescencia indirecta con absorcin de suero (FTA-Abs) o de hemaglutinacin con antgeno treponmico (TPHA).
La prueba RPR (rapid plasma reagin), al igual que la VDRL, es una prueba no treponmica basada en la deteccin de anticuerpo anticardiolipina que se produce en la sfilis, y en menor grado en otras infecciones agudas y enfermedades auto inmunes. La primera prueba serolgica no treponmica fue introducida por Wassermann en 1906 y utilizaba un extracto acuoso de fetos muertos por sfilis congnita. Posteriormente Landsteiner demostr que la prueba de Wassermann se poda hacer usando extracto de corazn de buey y en 1941 Pangborn identific la sustancia activa y la denomin cardiolipina. Posteriormente esta sustancia se identific como difosfatidilglicerol. Este fosfolpido se ha encontrado en casi todos los tejidos de los mamferos. Aparentemente la cardiolipina es tambin un constituyente de la membrana celular de los treponemas causantes de la sfilis, lo que da origen a la formacin de anticuerpos de reaccin cruzada. Inicialmente, a los anticuerpos anticardiolipina de la sfilis se les llam reaginas, lo que ha causado confusin con las inmunoglobulinas E, que tambin se llaman reaginas.
El antgeno de la prueba RPR consiste en una suspensin acuosa de liposomas de cardiolipina y partculas de carbn. En presencia de los anticuerpos anticardiolipina los liposomas forman agregados microscpicos llamados flculos, que atrapan las partculas de carbn, lo que permite observar la reaccin a simple vista. Este tipo de reaccin antgeno-anticuerpo se conoce como floculacin.
Procedimiento
1. Coloque 0.05ml de suero en el crculo de 18mm de la tarjeta de prueba, usando una pipeta capilar de 0.05ml o una pipeta serolgica de 0.2 ml.
2. Con un aplicador extienda el suero hasta que llene toda el rea del crculo
3. Aada exactamente una gota (1/60 ml) de del antgeno RPR. No mezclar.
4. Coloque la tarjeta en el rotador mecnico y cbralo con la cubierta humidificadora.
5. Rote a 100 RPM por 8 minutos. 39
Reporte los resultados como sigue:
1. Grumos pequeos o grandes = Reactor (R) 2. Sin grumos o una granulosidad muy leve = No reactor (NR)
Limitaciones del mtodo:
1. A veces ocurren falsas reacciones positivas causadas por enfermedades como la mononucleosis infecciosa, gripe, lepra, lupus eritematoso y otras enfermedades auto inmunes, borreliosis y otras trepanomatosis patgenas.
2. Las pruebas de floculacin para sfilis son afectadas por la temperatura ambiente. Para tener resultados confiables los reactivos debe estar a una temperatura entre 23 y 33C.
Pruebas treponmicas
FTA-ABS 200. (Inmunofluorescencia indirecta con absorcin del suero) Antgeno de Treponema cepa Nichols y absorbente de la cepa Reiter. Puede realizarse con suero y L.C.R.
TPHA. (Microhemaglutinacin). Solo homologada para suero. Utiliza eritrocitos sensibilizados con antgenos de Treponema cepa Nichols y absorbente de cepa Reiter.
ELISA IgG. Para utilizar con suero. Existen muchos estudios que demuestran su alta sensibilidad y especificidad.
WESTERN BLOT. Debe utilizarse como prueba de confirmacin.