19/05/2014

CBTis 24

Materia:
Biologa contempornea

Profesor:
Biol. Refugio Guadalupe Charles Jimnez

Alumno:
Rogelio Guadalupe Becerra Martnez

Grupo:
6A (C-7)

Turno:
Matutino




ADN Recombinante

El ADN recombinante, o ADN recombinado, es una molcula de ADN artificial formada de manera
deliberada in vitro por la unin de secuencias de ADN provenientes de dos organismos distintos
que normalmente no se encuentran juntos. Al introducirse este ADN recombinante en un
organismo, se produce una modificacin gentica que permite la adicin de una nueva secuencia
de ADN al organismo, conllevando a la modificacin de rasgos existentes o la expresin de nuevos
rasgos. La produccin de una protena no presente en un organismo determinado y producidas a
partir de ADN recombinante, se llaman protenas recombinantes.
El ADN recombinante es resultado del uso de diversas tcnicas que los bilogos
moleculares utilizan para manipular las molculas de ADN y difiere de la recombinacin
gentica que ocurre sin intervencin dentro de la clula. El proceso consiste en tomar una
molcula de ADN de un organismo, sea virus, planta o una bacteria y en el laboratorio manipularla
y ponerla de nuevo dentro de otro organismo. Esto se puede hacer para estudiar la expresin de
un gen, para producir protenas en el tratamiento de una enfermedad gentica, vacunas o con
fines econmicos y cientficos.

Procedimiento
El proceso de produccin de un ADN recombinante comienza con la identificacin desde un
organismo de una secuencia de ADN de inters con el fin de propagarlo en otro organismo que
carece de la secuencia y, por ende, del producto protico de esa secuencia de ADN. As se pueden
producir cantidades ilimitadas de la protena codificada por el susodicho gen. En trminos simples,
el procedimiento consiste en:
Localizacin de genes y sus funciones.
Clonacin del ADN, y su posterior almacenamiento en genotecas.
Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR)
Utilizacin de vectores de expresin.

Produccin y terapia con protenas recombinantes
Las protenas recombinantes son aquellas que se producen mediante la tcnica del ADN
recombinante, es decir, expresando un gen de un organismo en otro organismo distinto. Para que
estas protenas sean tiles desde el punto de vista teraputico tienen que conservar su actividad.
Adems, se debe evitar que sean inmunognicas para el ser humano. Para ello es importante
decidir para cada protena recombinante cual es el organismo de expresin ms adecuado.


Produccin en bacterias
Estas protenas recombinantes han intentado expresarse en bacterias como E. coli, ya que son
fciles de mantener, crecen rpido y se conoce bien su genoma. Sin embargo, el mayor problema
que presenta la produccin en bacterias es que en ellas no existe glicosilacin proteica, por lo que
algunas protenas producidas en bacterias pierden totalmente su funcin. Aun as se han logrado
producir con xito algunas protenas recombinantes en bacterias. La primera protena
recombinante que se produjo en E. coli fue la somatostatina, una hormona anti-crecimiento de 14
aminocidos. Sin embargo, aunque desde el punto de vista cientfico fue un xito, desde el punto
de vista econmico fue un fracaso, ya que su utilidad estaba reducida a personas con problemas
de gigantismo y similares, que son poco comunes. Posteriormente se logr un gran xito en este
campo mediante la produccin de insulina en bacterias. La insulina presenta la ventaja de no
necesitar modificaciones postraduccionales, por lo que se evita este problema de su produccin
en bacterias. Adems, la diabetes es una enfermedad muy frecuente en la sociedad, con unos 347
millones de diabticos. En EEUU el 6% de la poblacin (20 millones de habitantes) son diabticos y
esta enfermedad es la 6 causa de muerte. Antes de esta produccin en bacterias, se usaba
insulina porcina.
Produccin en levaduras
Al ser clulas eucariotas y por lo tanto ms similares a las humanas que las bacterias y ser muy
fciles de emplear industrialmente, las levaduras constituyen otro grupo de organismos
susceptibles de producir protenas recombinantes para uso humano. Sin embargo, aunque s
presentan glicosilacin proteica, al contrario que las bacterias, esta es totalmente distinta a la
humana, por lo que estas protenas presentan problemas, en muchos casos incluso
inmunognicos.
Produccin en clulas de mamfero
Al ser clulas ms parecidas a las humanas, el procesamiento que sufren las protenas
recombinantes producidas en clulas de mamfero tambin es ms similar, por lo que se conserva
su funcin (aunque puede haber ligeros cambios en el patrn de glicosilacin). Los inconvenientes
de este mtodo es que el crecimiento celular es ms lento, tardando de 6 a 24 horas en duplicarse
las clulas, que los cultivos pueden sufrir contaminacin de bacterias u hongos y que se puede
contaminar el producto con virus que infecten a humanos. Para la produccin en mamferos se
usan las clulas CHO, de ovario de ratn chino, que presentan la ventaja de que crecen bien y
existen gran cantidad de mutantes de glicosilacin. Adems, se est intentando que los animales
secreten estas protenas en la orina, en la leche, etc.




Usos del ADN Recombinante
Medicina
Las hormonas como la insulina o la hormona de crecimiento humanas, son creadas en cuerpos que
funcionan normalmente. Estas hormonas son protenas y las protenas estn hechas de una
secuencia especfica de aminocidos. La secuencia de aminocidos est determinada por el ADN
de una persona. Anteriormente, los diabticos usaban insulina porcina, pero no era bien tolerada
por todos los pacientes ya que su secuencia de aminocidos es levemente diferente. Hoy en da,
los cientficos han desarrollado bacterias que poseen el gen humano para la insulina que se ha
insertado dentro de ellas utilizando tcnicas de ADN recombinante. Como la secuencia de
aminocidos es la misma, los diabticos la toleran rpidamente aun cuando ha sido producida por
una bacteria. De forma similar, los cientficos han elaborado protocolos para los factores de la
coagulacin, la hormona de crecimiento, protenas para luchar contra los virus y muchas otras
medicinas que estn en desarrollo.
Terapias gnicas
Muchas enfermedades debilitantes estn codificadas genticamente. La enfermedad de clulas
falciformes, la enfermedad de Huntington y otras innumerables patologas son causados por
anomalas en el ADN. Si bien los cientficos todava no pueden curar todas las enfermedades
genticas, estn usando las ideas del ADN recombinante para crear tcnicas llamadas terapias
gnicas. El objetivo de las terapias gnicas es eliminar el ADN anormal de las clulas de una
persona y reemplazarlo por ADN normal de otra fuente. Esta tarea es extremadamente difcil ya
que el cuerpo humano est formado por alrededor de 10 trillones de clulas. Sin embargo, en las
enfermedades de la sangre, si la mdula sea de una persona es tratada y reparada, toda la sangre
nueva que crea esa persona estar tambin reparada. Todava no es una ciencia perfecta pero las
ideas son consistentes y escuchars ms y ms sobre esto en los prximos aos.
Agricultura
Los granjeros actualmente tambin se benefician con las tcnicas de ADN recombinante. Los
cientficos han desarrollado numerosos avances que pueden ser utilizados para prevenir la muerte
de las plantas debida a insectos, insecticidas, herbicidas e incluso por las heladas. Puede insertarse
ADN en las plantas para hacerlas resistentes a los herbicidas comunes. Por consiguiente, cuando el
granjero fumiga para eliminar las malezas, slo estas mueren y las plantas buenas quedan
indemnes. Esto tambin puede ser utilizado para hacer que las plantas no se vean afectadas por
los insecticidas, e incluso stas pueden liberar qumicos que ahuyentan a los insectos. Los
granjeros tambin pueden cubrir los campos de fresas con bacterias con ADN recombinante que
ayudan a proteger a las plantas de los choques trmicos y las heladas.



Bioplsticos
Los plsticos comunes son polmeros creados a partir del petrleo, que es una fuente de
combustible fsil no renovable. Cuando se acabe el petrleo, podramos quedarnos no slo sin
combustible para nuestros autos, sino tambin sin plstico. Esta posibilidad ha estimulado a la
ciencia para crear bioplsticos. Estos son creados a partir de productos de las plantas, a menudo a
travs de mtodos de ADN recombinante. Los cientficos han creado un gen que producir un
compuesto casi idntico al plstico comercial y su aplicacin es hoy en da una zona caliente de la
investigacin. De tener xito, los cientficos se habrn asegurado de que nunca nos quedemos sin
plstico o tengamos que preocuparnos sobre la polucin que produce la fabricacin de plstico a
partir de las antiguas tecnologas no renovables.
Otros usos
Las aplicaciones de la tecnologa del ADN recombinante estn limitadas slo por el ingenio de los
cientficos que aplican esta ciencia. Otros usos que se le ha dado a esta tecnologa han sido
fabricar bacterias que pueden procesar un derrame de petrleo como el ocurrido en la catstrofe
de Exxon Valdez. Los ingenieros genticos espera aplicar bacterias que puedan metabolizar el
petrleo y transformarlo en un producto biodegradable. Adems, pueden programar las bacterias
para morir una vez que el petrleo se haya consumido, de tal manera que no tengan que
preocuparse por haber creado un problema secundario con la nueva cepa de bacterias. Otros se
han centrado en la introduccin de genes para enfermedades como el mal de Alzheimer o el
cncer en ratones y otros organismos modelo. El introducir la enfermedad en los animales, les
permite a los mdicos estudiar los efectos en un perodo de tiempo ms rpido y aplicar esos
hallazgos a la investigacin en humanos.

Polimerasa
La polimerasa es una enzima capaz de transcribir o replicar cidos nucleicos. Resultan cruciales en
la divisin celular (ADN polimerasa) y en la transcripcin del ADN (ARN polimerasa).
Reaccin en cadena de la polimerasa
La Reaccin en cadena de la polimerasa, conocida como PCR por sus siglas en ingls, es una
tcnica (descrita en 1985, por Kary Mullis) de biologa molecular, cuyo objetivo es obtener un gran
nmero de copias de un fragmento de ADN particular, partiendo de un mnimo, en teora, de una
nica copia de ese fragmento.

Esta tcnica sirve para amplificar ADN. Tras la amplificacin, resulta mucho ms sencillo identificar
con una muy alta probabilidad virus o bacterias causante de una enfermedad, identificar personas
(cadveres, criminales...) o hacer investigacin cientfica sobre el ADN amplificado. Estos usos
derivados de la amplificacin han hecho que convierta en una tcnica muy extendida, con el
consiguiente abaratamiento del equipo necesario para llevarla a cabo.

Usos de la PCR
Huella gentica
Test de Paternidad
Diagnstico de enfermedades hereditarias
Clonacin de genes
Mutagnenesis
Anlisis de ADN fsil
Genotipado de mutaciones especficas


ADN Polimerasa
Las ADN polimerasa son enzimas polimerasas (celulares o virales) que intervienen en el proceso
de replicacin del ADN. Llevan a cabo la sntesis de la nueva cadena de ADN emparejando
los desoxirribonucletidos trifosfato (dNTP) con los desoxirribonucletidos complementarios
correspondientes del ADN molde. Los dNTP que se usan en la replicacin del ADN contienen
tres fosfatos unidos al grupo hidroxilo 5' de la desoxirribosa y dependiendo de la base nitrogenada
sern dATP, dTTP, dCTP odGTP. La reaccin fundamental es una transferencia de un grupo
fosfato en la que el grupo 3'-OH acta como nuclefilo en el extremo 3' de la cadena que est en
crecimiento. El ataque nucleoflico se produce sobre el fosfato (el ms prximo a la
desoxirribosa) del desoxirribonuclesido 5' trifosfato que entra, liberndosepirofosfato inorgnico
y alargndose el ADN (al formarse un nuevo enlace fosfodister).

Las ADN polimerasas pueden aadir hasta 1000 nucletidos por segundo. Esto es debido a su
naturaleza, es decir, el nmero de nucletidos que son capaces de aadir cada vez que se asocian
al molde de ADN que van a copiar. Dado que la adicin de los nucletidos es un proceso que dura
unos milisegundos, la velocidad de catlisisva a depender del tiempo que la ADN polimerasa
permanece unida al ADN, esto es, de su procesividad.
Las ADN polimerasas tambin realizan otras funciones durante el proceso de replicacin. Adems
de participar en la elongacin, desempean una funcin correctora y reparadora gracias a su
actividad exonucleasa 3', que les confiere la capacidad de degradar el ADN partiendo de un
extremo de ste. Es importante que existan estos mecanismos de correccin ya que de lo
contrario los errores producidos durante la copia del ADN daran lugar a mutaciones.

ADN polimerasas de E. coli
(ADN polimerasa en clulas procariotas) Las principales ADN polimerasas en E. coli son las ADN Pol
I, ADN Pol II, ADN Pol III, y cada una de ellas est especializada en una o ms de estas funciones
segn cul sea su papel en la replicacin. La procesividad se relaciona con cunto tiempo
permanece unida la ADNpol al ADN cuando est agregando nucletidos. As, la ADN Pol I que es
poco procesiva (aade entre 20 y 100 nucletidos por acontecimiento de unin), es la encargada
de la eliminacin de los cebadores y el "relleno" del espacio que dejan con ADN (actividad
exonucleasa 3' 5' y actividad polimerasa 5' 3'). La ADN Pol II est encargada de la reparacin
de los quiebres producidos en el ADN (actividades polimerasa 5' 3' y exonucleasa 3' 5'), la
ADN Pol III que es muy procesiva es la principal encargada de la elongacin del ADN (actividad
polimerasa 5' 3') durante la cual tambin realiza tareas de correccin (actividad exonucleasa 3'
5'). Notar que actividad correctora y de reparacin no son lo mismo. Slo la ADN pol I y beta
tienen actividad de reparacin, en cambio todas las polimerasas tienen actividad correctora
(poseen 2 sitios activos: un sitio de polimerizacin y otro de correccin). Por qu ocurre? Cmo
se da cuenta la DNApol de que hubo un error en la replicacin del ADN? Ocurre por el fenmeno
de tautomerizacin. Los nucletidos cambian a su forma qumica alternativa, la DNApol las
confunde con otro nucletido y lo elonga. Cuando este vuelve a su conformacin ms estable
provoca un cambio en el ancho de la hebra (20A) y termina abrindose. Esto es detectado por la
polimerasa, quien cambia conformacional mente y deja la hebra posicionada en el sitio de
correccin. Las ADN Pol IV y V, identificadas en 1999, estn involucradas en una forma poco
comn de reparacin del ADN.





ARN Polimerasa
Las ARN polimerasas o ARN polimerizado (ARNP) son un conjunto de protenas con
carcter enzimtico capaces de formar los ribonucletidos para sintetizar ARN a partir de una
secuencia de ADN que sirve como patrn o molde. La ARN polimerasa ms importante es la
implicada en la sntesis del ARN mensajero o transcripcin del ADN.
La ARN polimerasa es la enzima soluble conocida de mayor tamao puesto que mide unos
100 de dimetro y es visible en micrografas electrnicas, donde se observa unida
al promotor en el ADN.
Funciones
La reaccin qumica que cataliza la ARN polimerasa consiste en la unin de ribonucletidos
trifosfato, adenosn trifosfato (ATP), uridn trifosfato (UTP), guanosin trifosfato(GTP) y citidn
trifosfato (CTP), liberndose los grupos fosfato y convirtindose estos en nucletidos.
Adems de la polimerizacin de los ribonucletidos trifosfato, la ARN polimerasa tiene otras
funciones como:
Reconocer y unirse a localizaciones especficas o promotores de la molcula de ADN.
Desenrollar parcialmente la molcula del molde de ADN, gracias a su
actividad helicasa intrnseca.
Sintetizar un ARN cebador para la elongacin posterior.
Terminacin de la cadena.

La ARN polimerasa cataliza consecutivamente la elongacin de la cadena de ARN, al mismo tiempo
que enrolla y desenrolla la doble cadena de ADN, y termina la transcripcin despus de copiar
el gen.
El ARN que transcribe cada ARN polimerasa tambin es diferente:
La ARN polimerasa I produce pre-ARN ribosmico (pre-ARNr) 5S, 5'8S y 28S.
La ARN polimerasa II produce pre-ARN mensajero (pre-ARNm) y ARN pequeo nuclear (ARNsn).
La ARN polimerasa III produce pre-ARN transferente (pre-ARNt), ARNr 5S y otros ARNsn.
La ARN polimerasa mitocondrial produce el ARN mitocondrial.

Las ARN polimerasas I y III se encargan de transcribir los genes "house keeping". Bajo esta
denominacin se agrupan los genes expresados constitutivamente en todas las clulas, que
intervienen en las funciones bsicas de stas y que son diferentes segn el tipo celular y el estado
funcional. Estos genes se transcriben continuamente y con gran eficiencia. Adems, las ARN
polimerasas I y III no necesitan una regulacin tan compleja como la que sufre la ARN polimerasa II
ya que transcriben un conjunto de genes de forma constante.


La ARN polimerasa II cataliza la transcripcin de los genes que codifican protenas. Un dominio
importante de la la ARN polimerasa II es el CTD (C-Terminal Domain) que se encuentra en la
subunidad B'. El CTD est involucrado en todas las etapas de la transcripcin. Por una parte, su
estado de fosforilacin determina que se lleven a cabo eficientemente las tres etapas de la
transcripcin. Para que se inicie la transcripcin el CTD no debe estar fosforilado, mientras que
para que avance la ARN polimerasa II y deje el promotor, hace falta que el CTD est fosforilado.
Por otra parte, los factores encargados del procesamiento del pre-ARNm se unen al CTD para
realizar su funcin: la formacin de la caperuza, la poliadenilacin y el splicing de exones. Se ha
comprobado que determinadas repeticiones del heptapptido del CTD son necesarias para el normal
crecimiento y viabilidad de las clulas.

















Clulas Madre
Las clulas madre son clulas que se encuentran en todos los organismos multicelulares
1
y que
tienen la capacidad de dividirse (a travs de la mitosis) y diferenciarse en diversos tipos de clulas
especializadas y de autorrenovarse para producir ms clulas madre. En los mamferos, existen
diversos tipos de clulas madre que se pueden clasificar teniendo en cuenta su potencia,
2
es decir,
el nmero de diferentes tipos celulares en los que puede diferenciarse.
3
En los organismos
adultos, las clulas madre y las clulas progenitoras actan en la regeneracin o reparacin de
los tejidos del organismo.
La funcin especial de las clulas madre es la de formar todos estos otros tipos de clulas. Las
clulas madre son las proveedoras de nuevas clulas.
Por qu las clulas madre son importantes para su salud?
Cuando se lesiona o enferma, sus clulas se daan o mueren. Cuando esto sucede, las clulas
madre se activan. Las clulas madre tienen la tarea de reparar los tejidos daados y sustituir las
clulas que mueren rutinariamente. De esta manera las clulas madre nos mantienen sanos e
impiden el envejecimiento prematuro. Las clulas madre son como nuestro propio ejrcito de
mdicos microscpicos.
Qu nos depara el futuro y cmo podra cambiar la atencin mdica si se incorporan las clulas
madre en la terapia cotidiana?
Debido a que por naturaleza, las clulas madre tienen la tarea de reemplazar las clulas viejas o
enfermas, los cientficos han concebido la idea de utilizar las clulas madre como terapia para una
amplia variedad de condiciones mdicas. La idea es que al dar a un paciente enfermo las clulas
madre o clulas diferenciadas a partir de clulas madre, podemos hacer uso de la capacidad
natural de estas clulas para curar al paciente. Por ejemplo, si un paciente tiene un ataque al
corazn, el objetivo sera trasplantar clulas madre en el tejido herido para que reparen el dao al
corazn. Las poblaciones naturales de clulas madre que todos poseemos tienen una capacidad
limitada para reparar lesiones en nuestro cuerpo. Volviendo al ejemplo del corazn, las clulas
madre del propio corazn no son capaces de reparar todo el dao que se produce despus de un
ataque al corazn. En cambio, un trasplante de millones de clulas madre sera mucho ms
potente. Por lo tanto, el trasplant de clulas madre supera la capacidad natural del cuerpo para
sanar, debido al nmero limitado de clulas madre propias. Algunos obstculos quedan por
resolver antes de que la terapia con clulas madre se vuelva ms accesible, incluyendo efectos no
deseados, como la formacin de tumores que estas clulas potencialmente pueden generar, y el
rechazo inmunolgico. Aun as, las clulas madre pueden transformar la medicina y quizs en slo
una o dos dcadas la mayora de nosotros conoceremos a alguien, tal vez incluso nosotros
mismos, que ha tenido un trasplante de clulas madre. Las clulas madre pueden ser utilizadas
para tratar las enfermedades ms acuciantes que hoy en da enfrentamos, incluyendo cncer,
enfermedades cardacas, la enfermedad de Parkinson, esclerosis mltiple, derrame cerebral, la
enfermedad de Huntington, lesiones de la mdula espinal, y muchas ms.

Tipos de clulas madre
Teniendo en cuenta su potencia, las clulas madre pueden dividirse en cuatro tipos:
Las clulas madre totipotentes pueden crecer y formar un organismo completo, tanto los
componentes embrionarios (como por ejemplo, las tres capas embrionarias, el linaje germinal y
los tejidos que darn lugar al saco vitelino), como los extraembrionarios (como la placenta). Es
decir, pueden formar todos los tipos celulares. La clula madre totipotente por excelencia es
el cigoto, formado cuando un vulo es fecundado por un espermatozoide.

Las clulas madre pluripotentes no pueden formar un organismo completo, pero s cualquier otro
tipo de clula correspondiente a los tres linajes embrionarios (endodermo,
ectodermo y mesodermo). Pueden, por tanto, formar linajes celulares. Se encuentran en distintas
etapas del desarrollo embrionario. Las clulas madre pluripotentes ms estudiadas son las clulas
madre embrionarias (en ingls "Embryonic stem cells" o "ES cells") que se pueden aislar de la masa
celular interna del blastocisto. El blastocisto est formado por una capa externa denominada
trofoblasto, formada por unas 70 clulas, y una masa celular interna constituida por unas 30 clulas
que son las clulas madre embrionarias que tienen la capacidad de diferenciarse en todos los tipos
celulares que aparecen en el organismo adulto, dando lugar a los tejidos y rganos. En la actualidad
se utilizan como modelo para estudiar el desarrollo embrionario y para entender cules son los
mecanismos y las seales que permiten a una clula pluripotente llegar a formar cualquier clula
plenamente diferenciada del organismo.

Las clulas madre germinales son clulas madre embrionarias pluripotentes que se derivan de
los esbozos gonadales del embrin. Estos esbozos gonadales se encuentran en una zona
especfica del embrin denominada cresta gonadal, que dar lugar a
los vulos y espermatozoides. Tienen una capacidad de diferenciacin similar a las de las clulas
madre embrionarias, pero su aislamiento resulta ms difcil. Hoy se pueden manipular clulas
humanas de adulto y generar clulas con pluripotencialidad inducida (iPS), que se ha visto
poseen el mismo potencial de crecimiento y diferenciacin de las clulas madre embrionarias, e
irn sustituyendo o ampliando con creces las posibilidades biotecnolgicas soadas para las
embrionarias

Las clulas madre multipotentes son aquellas que slo pueden generar clulas de su misma
capa o linaje de origen embrionario (por ejemplo: una clula madre mesenquimal de mdula
sea, al tener naturaleza mesodrmica, dar origen a clulas de esa capa
como miocitos, adipocitos u osteocitos, entre otras). Otro ejemplo son las clulas madre
hematopoyticas - clulas madre de la sangre que puede diferenciarse en los mltiples tipos
celulares de la sangre.



Las clulas madre unipotentes, tambin llamadas clulas progenitoras son clulas madre que
tiene la capacidad de diferenciarse en slo un tipo de clulas. Por ejemplo las clulas madre
musculares, tambin denominadas clulas satlite slo pueden diferenciarse en clulas
musculares.

Adems de por el criterio de potencia, las clulas madre tambin pueden clasificarse en cuanto
a si se encuentran en el embrin o en tejidos adultos. Las clulas madre adultas se encuentran
en tejidos y rganos adultos y que poseen la capacidad de diferenciarse para dar lugar a clulas
adultas del tejido en el que se encuentran. En humanos, se conocen hasta ahora alrededor de
20 tipos distintos de clulas madre adultas, que son las encargadas de regenerar los tejidos en
continuo desgaste (como la piel o la sangre) o tejidos que han sufrido un dao (como por
ejemplo el hgado). En esta clasificacin se incluyen clulas madre multipotentes, como las
clulas madre hematopoyticas de la mdula sea (encargadas de la formacin de la sangre). En
la misma mdula sea, aunque tambin en sangre del cordn umbilical, en sangre perifrica y en
la grasa corporal se ha encontrado otro tipo de clulas madre adultas,
denominadas mesenquimales que puede diferenciarse en numerosos tipos de clulas de los tres
derivados embrionarios (musculares, vasculares, nerviosas, hematopoyticas, seas, etc.).

Clulas madre del cordn umbilical
Del cordn umbilical se puede aislar una poblacin de clulas madre multipotentes que poseen
caractersticas embrionarias (expresan los factores de transcripcinOCT-4 y Nanog) y
hematopoyticas (expresan el marcador de leucocitos CD45). Estas clulas madre adultas pueden
diferenciarse en clulas de la sangre y del sistema inmunolgico.
Las clulas madre del cordn umbilical son relativamente fciles de obtener y presentan una baja
inmunogenicidad, debido a la baja expresin del complejo mayor de histocompatibilidad (MHC),
por lo que se han comenzado a utilizar en terapias para curar diversas enfermedades:
Enfermedades autoinmunes como el lupus.
Enfermedades hematolgicas como la anemia falciforme.
Diabetes.

Tratamiento Con Clulas Madre
Algunos descubrimientos mdicos permiten creer que los tratamientos con clulas madre pueden
curar enfermedades y aliviar el dolor. Existen algunos tratamientos con clulas madre, pero la
mayora todava se encuentran en una etapa experimental. Investigaciones mdicas anticipan que
un da con el uso de la tecnologa, derivada de investigaciones para las clulas madre adultas y
embrionarias, se podr tratar el cncer, diabetes, lesiones de la espina dorsal y daos en los

msculos, entre otras enfermedades. Muchos tratamientos prometedores para enfermedades
graves han sido aplicados usando clulas madre adultas. La ventaja de las clulas madre adultas
sobre las embrionarias es que no hay problema en que sean rechazadas, porque normalmente las
clulas madre son extradas del paciente. Todava existe un gran problema tanto cientfico como
tico sobre esto.
En los ltimos aos se est investigando en la proliferacin in vitro de las clulas madre de cordn
umbilical para aumentar el nmero de clulas madre y cubrir la necesidad para un trasplante.
Estos estudios son muy prometedores y pueden permitir en un futuro utilizar clulas madre de
cordn umbilical en terapia gnica: podemos as tratar enfermedades causadas por la deficiencia o
defecto de un determinado gen. Introduciendo un determinado gen en la proliferacin de las
clulas madre in vitro y trasplantar tales clulas en el paciente receptor. El uso de otros tipos de
clulas como portadores de genes buenos en pacientes con enfermedades causadas por
deficiencias o dficits genticos, se est experimentando clnicamente.

Tratamientos del cncer
Recientemente han sido utilizadas las clulas madre encontradas en la sangre del cordn umbilical
para tratar pacientes con cncer. Durante la quimioterapia, la mayora de las clulas en
crecimiento mueren por los agentes cito txicos. El efecto secundario de la quimioterapia es lo
que los trasplantes de clulas madre tratan de revertir; la sustancia que se encuentra sana dentro
del hueso del paciente, el tutano, es remplazada por aquellas perdidas en el tratamiento. En la
mayora de los tratamientos actuales que usan clulas madre, es preferible obtenerlas de un
donante con el mismo tipo de sangre a usar las del paciente mismo. Solo si es necesario usar las
propias clulas madre (siempre como ltimo recurso y si no se encontr un donante con el mismo
tipo de sangre) y si el paciente no tiene guardada su propia coleccin de clulas madre (sangre del
cordn umbilical), entonces la sustancia contenedora en los huesos ser removida antes de la
quimioterapia, y reinyectada despus.

Inmunohematologa
El trasplante de clulas madre hematopoyticas se ha usado desde hace 50 aos con xito para
tratar mltiples enfermedades: talasemias, anemia falciforme, anemia de Fanconi, errores
congnitos del metabolismo, anemia aplsica grave, inmunodeficiencias combinadas
graves (SCID)... Tambin han sido empleadas para el tratamiento de tumores: leucemias agudas
mieloides y linfoides, leucemias crnicas mieloides, mielodisplasias, linfomas, mielomas, tumores
slidos de rios, mama, ovario y neuroblastoma, etc.
Esto se consigue mediante el trasplante de mdula sea. La mdula sea contiene las clulas
madre precursoras de las clulas sanguneas y linfticas. Se sola sacar del hueso de la cadera, pero
actualmente se est sacando de la sangre perifrica tras tratamiento con factores estimulantes del
crecimiento. El xito del trasplante de mdula, al igual que en cualquier otro trasplante, depende
de la compatibilidad HLA. Pero adems de poder producirse rechazo del individuo al tejido

trasplantado, el trasplante de mdula sea presenta la particularidad de que tambin puede darse
en sentido inverso, rechazo del tejido trasplantado al individuo (GVHD: graft versus host disease).
Sin embargo el rechazo GVHD puede presentar una ventaja y ser de inters como inmunoterapia,
ya que puede reconocer a las clulas malignas con las que compite como extraas y permitir una
remisin ms rpida de la leucemia.
Tras destruir la mdula por radiacin o quimioterapia se realiza el trasplante. A las dos semanas
aparecen nuevas clulas sanguneas y tras varios meses (autlogos) o ms de un ao
(alotrasplantes) se restituye la funcin inmune.
Alzheimer, Enfermedad de Lou Gehrig y Enfermedad de Huntington
Investigadores estn estudiando mecanismos diferentes para aproximarse a estas enfermedades a
travs de la terapia celular.
En el caso de la Enfermedad de Lou Gehrig, conocida tambin como Esclerosis lateral amiotrfica y
la cual se caracteriza por una destruccin progresiva de las funciones motoras que lleva a la
parlisis y muerte, los cientficos han usado las clulas madre para restaurar las propiedades
naturales a las clulas y as poco a poco el paciente pueda recuperar su movilidad.
Parkinson
El objetivo para tratar este mal es transformar las clulas madre de tal forma que hagan el papel
de las neuronas (las clulas tpicas del sistema nervioso), luego que sobrevivan y funcionen como
productoras de dopamina.
Lesiones de la espina dorsal
Las clulas madre pueden ayudar a reparar el tejido de la espina daado y reparar las funciones de
movilidad.
En un estudio publicado en el Journal of Neuroscience, cientficos del Krembil Neuroscience Center
en el Toronto Western Research Institute y la University of Toronto concluan esto luego de haber
experimentado con ratas.
Se trasplantaron clulas del cerebro a los animales que luego viajaron a travs de la espina de las
ratas, se incorporaron al tejido daado y se desarrollaron como el tipo de clula destruida en el
sitio lesionado. All, produjeron mielina.
El estudio mostr que las ratas que pudieron restaurar su mielina en la espina lesionada
mostraron alguna recuperacin y caminaron con ms coordinacin.
Derrame cerebral
Investigadores estn estudiando si pueden recuperarse las partes daadas provocadas por
derrame del cerebro, con clulas madre.

Los cientficos intentaron transplantar clulas madre a ratones para tratar la prdida de masa
cerebral despus de un ataque cerebral severo. En los estudios, las clulas transplantadas no slo
sobrevivieron, sino que migraron a las reas daadas del cerebro confirmando que son atradas
por las zonas con enfermedades y su potencial para regenerarlas.
Enfermedades del corazn
De acuerdo con el National Institutes of Health, las clulas madre tambin se pueden transformar
en nuevas clulas del corazn y en clulas vasculares del endotelio, por lo que los cientficos estn
explotando esta habilidad con la meta de proveer tejido de reemplazo a un corazn daado.
De hecho, los investigadores ya estn pensando en que los pacientes en riesgo de padecer algn
infarto donen sus clulas por adelantado, para que stas sean genticamente programadas y
usadas cuando las necesiten sin llegar a una emergencia.
Artritis
Investigadores identificaron clulas madre con capacidad para convertirse en condrocitos, clulas
que envuelven los cartlagos, en los huesos de personas incluso mayores de 75 aos.
Quemaduras
Se estn estudiando tcnicas basadas en la terapia con clulas madre para tratar quemaduras que
pueden daar extensas partes de la piel y provocar marcas en el tejido y prdida de funciones,
como por ejemplo falta de tacto.
Estas clulas madre tienen la propiedad de poder transformarse en keratinocitos, clulas de la piel
con funciones especficas que pueden regenerar el tejido.
Las Clulas Madre y la Regeneracin Celular
Para comprender mejor el tratamiento de regeneracin celular con clulas madre, lo primero a
responder es: Que son las clulas Terapia Celular Celulas Madre en Enfermedades Crnico
Degenerativas madre? Las clulas madre son clulas con tiempo de vida cero, lo cual significa que
son clulas nuevas. Estas clulas tienen un potencial casi ilimitado de reproducirse y formar ms
clulas con las mismas caractersticas, que son denominadas clulas hijas. Las clulas hijas a su
vez, pueden remplazar a las clulas enfermas o envejecidas, restaurando las funciones normales e
ideales del organismo. En qu consiste la regeneracin celular? La regeneracin celular corrige,
restaura o remplaza a las clulas y tejidos corporales daados o envejecidos, o bien que no estn
funcionando al 100%, con el propsito de mantener al cuerpo humano en ptimas condiciones de
salud, o al menos tratar de llegar en cierto porcentaje a este estado idea. As mismo mejora la
apariencia general y tiene efecto esttico porque la persona se ve ms saludable, mejora su estado
de nimo, incrementando su rendimiento y su concentracin El tratamiento de regeneracin

celular, es integral ya que abarca tejidos, rganos y piel, y proporciona mejoras sustantivas en la
calidad de vida de los pacientes ya que tambin ayuda a restablecer el equilibrio corporal
restituyendo la energa, estado de nimo y vitalidad, esto confiriendo proteccin al corazn y
otros rganos vitales El tratamiento de regeneracin celular tiene efectos curativos en la atencin
de enfermedades para los cuales no existan alternativas viables como la diabetes, insuficiencia
renal, entre otros.
Cmo se obtienen clulas madre?
Como mencionamos previamente, los progenitores hematopoyticos o clulas madre pueden
obtenerse directamente de la mdula sea, de la sangre o bien de la sangre de cordn umbilical.
FUENTE DE CLULAS MADRE
A) Mdula sea
Las clulas madre de la mdula sea se obtienen mediante mltiples punciones en ambas crestas
iliacas posteriores (huesos de la parte posterior de la cadera). Estas punciones se efectan a travs
de dos nicos orificios en la piel bajo anestesia general. Aunque en algunos casos puede realizarse
bajo anestesia epidural, la anestesia general es recomendable ya que permite que el
procedimiento sea ms cmodo para el paciente y adems facilita la labor del mdico. La duracin
habitual de una aspiracin de mdula sea es de 2 a 3 horas.
En todos los casos se repone parte del volumen de sangre extrado mediante una autotransfusin
que se administra durante el procedimiento. Para ello, se le realiza al donante una extraccin de
sangre unos das antes de la aspiracin de mdula sea. Esta sangre se guarda convenientemente
identificada para ser utilizada el da de la intervencin. De esta forma se evita exponer al donante
a productos sanguneos no propios. Adicionalmente, los donantes reciben hierro por va oral
durante un par de meses. El efecto secundario ms frecuente que provoca la donacin de mdula
sea es un dolorimiento en las zonas de puncin que puede persistir unas 24 horas y que se
controla fcilmente con analgsicos por va oral.
B) Sangre perifrica
En condiciones normales la cantidad de clulas madre que circulan en la sangre es muy escasa. Sin
embargo, es posible movilizar grandes cantidades de esas clulas desde la mdula hacia la sangre
de donde pueden ser recogidas sin necesidad de anestesia general.
Para ello, previamente a la recogida, los donantes han de recibir durante cuatro o cinco das una
inyeccin diaria de GCSF. Este frmaco, modalidad artificial de una protena que se encuentra en el
cuerpo de forma natural, es capaz de movilizar las clulas madre de la mdula sea a la sangre. La
mayora de los donantes toleran muy bien el GCSF aunque puede dar molestias tales como
cansancio, cefalea, dolores en los huesos y msculos o sntomas similares a una gripe. Estos
efectos secundarios son transitorios.

En el caso de los donantes, 1 2 sesiones de afresis suelen ser suficientes para obtener una
cantidad adecuada de clulas para un trasplante. Sin embargo, en los pacientes puede ser
necesario un mayor nmero de sesiones. Una vez obtenidas, las clulas madre de sangre perifrica
pueden administrarse inmediatamente o ser congeladas hasta su utilizacin (obviamente, en el
caso de trasplante autognico, siempre se congelan).
Los progenitores de sangre perifrica se emplean cada vez con mayor frecuencia por su mayor
facilidad de obtencin y por permitir una recuperacin de la funcin medular ms rpida tras el
trasplante. En la actualidad en Espaa, prcticamente la totalidad de los trasplantes autognicos y
ms del 70% de los trasplantes alognicos se efectan con progenitores de sangre perifrica.
C) Sangre de cordn umbilical
La sangre del cordn umbilical contiene de forma natural una gran cantidad de clulas madre que
pueden ser utilizadas para trasplante. Tras el parto, una ver cortado el cordn umbilical es posible
recoger la sangre que queda en el cordn y la placenta y que, en condiciones normales, seran
desechada. A continuacin estas clulas son criopreservadas (congeladas) para su eventual
utilizacin en un trasplante. Este procedimiento no conlleva ningn riesgo para la madre ni para el
recin nacido.
El principal inconveniente de estos progenitores es que, a pesar de la elevada concentracin de
clulas, el volumen es pequeo, por lo que la cantidad total de clulas obtenida no es suficiente
para un receptor adulto con un volumen corporal elevado. Por ello el empleo de estos
progenitores queda limitado a los nios y a los adultos con un bajo volumen corporal.