Aula 06

23/09/2013
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Crescimento microbiano
Biologia IV
Profa. Ilana Camargo
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Crescimento microbiano
Clulas natatrias (expansivas)

Pednculo
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Fisso Binria
Tempo que demora para ocorrer = tempo de gerao
Cromossomo, cpias de ribossomos
complexos macromoleculares,
monmeros e ons inorgnicos
Cromossomo, cpias de ribossomos
complexos macromoleculares, monmeros e
ons inorgnicos
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Crescimento populacional
O aumento do nmero de clulas tambm pode ser medido pelo aumento da
massa microbiana
Taxa de crescimento: variao de nmero de clulas ou da massa celular por unidade
de tempo;

Gerao: intervalo em que uma clula origina duas novas;

Tempo de gerao: tempo necessrio para que uma populao dobre de nmero
(Tempo de duplicao);

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Crescimento populacional
O padro de aumento populacional, em que o
nmero de clulas duplicado a cada perodo
de tempo, denominado crescimento
exponencial.
Escala aritmtica: difcil de obter informaes sobre a taxa de crescimento
Construir Grficos semilogartmicos
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Tempo de gerao
Tempo de Gerao: intervalo de tempo em que uma clula origina duas novas clulas ou
tempo necessrio para uma populao dobrar de nmero.
Muitas das bactrias estudadas apresentam tg de 1 a 3 h (pode variar de 10 min a >24h).
Tg de E. coli = 20 min
20 geraes (~7 horas), 1 clula torna-se em > 1 milho de clulas!
Tg pode ser influenciado pelas condies de cultivo (tipo de meio, temperatura, etc.).
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Tempo de gerao
n= 1 (uma gerao = tempo para duplicar a populao!)
t = 30
tg = t/n

tg = 30/1 = 30 tempo de gerao = 30 minutos

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Taxa de crescimento*
o nmero de geraes formadas, por unidade de tempo,
de uma cultura em crescimento exponencial ou variao no
nmero ou massa por unidade de tempo.

Constante de taxa de crescimento

K = ln2/tg = 0,693/tg (h
-1
)

*Esse termo tambm descrito como a velocidade de
crescimento especfico e representado por m.

No caso anterior

K = 0,693/0,5 =1,386
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Fases do crescimento
Curvas de crescimento de Pseudomonas fluorescens em culturas de batelada,
iniciadas com inculos em diferentes fases de crescimento, indicadas pelos ms
velocidade especfica de crescimento (h
-1
).
Fonte: Panikov, N.S. Microbial growth kinetics. UK: Chapman & Hall, 1995.
m=0,125 m=0,0057 m=0,0013
m ~ 0, cultura
desnutrida
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Curva de crescimento tpica de uma populao bacteriana, a partir de uma cultura
em batelada* (Madigan et al., 2004).
* Cultura que se desenvolve em um volume fixo de meio de cultura.
Fases do crescimento de uma populao
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LAG
Pouca ou ausncia de diviso celular.
Sntese enzimtica e de molculas variadas.
Pode ser curta ou longa, dependendo das
condies fisiolgicas do inculo.
Aumento na quantidade de protenas, no peso
seco e no tamanho celular
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EXPONENCIAL OU Log
Crescimento exponencial das clulas Tempo de Gerao
constante linha reta no grfico.
Fase que as clulas esto mais saudveis utilizadas
para estudos enzimticos e de outros componentes
celulares.
Taxa de crescimento exponencial (nmero de geraes
por unidade de tempo) de uma populao pode ser
influenciada pelas condies de cultivo, por exemplo.
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ESTACIONRIA
No h crescimento lquido da populao, ou seja, o nmero de clulas que
se divide equivalente ao nmero de clulas que morrem (crescimento
crptico).
Sntese de vrios metablitos secundrios (antibiticos e algumas enzimas).
Tambm pode ocorrer a esporulao das bactrias.
Alteraes de fentipo por quorum sensing (processo de comunicao
celular mediado pela densidade populacional).
Causas: esgotamento de nutrientes essenciais, acmulo de produtos de
excreo em concentraes inibitrias, alteraes no pH.
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MORTE OU DECLNIO
Nmero de clulas mortas excede o de clulas vivas.
Na maioria dos casos, a taxa de morte inferior taxa de
crescimento exponencial.
A contagem total permanece relativamente constante,
enquanto a de viveis cai lentamente. Em alguns casos h
a lise celular.
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Fatores necessrios para o crescimento
* Crescimento microbiano: em microbiologia, refere-se
ao aumento no nmero de clulas.
Crescimento
microbiano*
Fatores fsicos: temperatura,
pH, presso osmtica
Fatores qumicos: fontes de
carbono, nitrognio,
enxofre, fsforo,
oligoelementos, oxignio,
fatores orgnicos de
crescimento (vitaminas,
aminocidos, purinas,
pirimidinas).
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Efeito da temperatura na taxa de crescimento
(Fonte: Madigan et al., 2004).
Taxa de crescimento = variao do nmero de clulas ou da massa celular por
unidade de tempo
Temperaturas cardeais: mnima, tima e mxima (variveis nos diferentes
microrganismos)
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Temperatura
Relao da temperatura com as taxas de crescimento. As temperaturas timas
de cada organismo esto indicadas. (Fonte: Madigan et al., 2004).
Temperatura de crescimento pode ser mnima, tima e mxima. Maioria cresce em um intervalo de
30
o
C entre mnima e mxima.
Psicrfilos: profundezas de oceanos e regies polares (algas clorofceas e diatomceas).
Mesfilos: Temperatura tima entre 25 e 40
o
C. Maioria das bactrias.
Termfilos Temperatura entre 45 e 80
o
C. Fontes termais, camadas superiores de solos que sofrem
intensa radiao solar, esterco e silo em fermentao.
Hipertermfilos: Temperatura tima superior 80
o
C. Fontes termais, como as do Parque
Yellowstone. Principalmente membros de Archaea.
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Adaptaes moleculares psicrofilia:
Enzimas ativas em baixas temperaturas apresentam maior
quantidade de estruturas secundrias em alfa-hlice
(estrutura mais flexvel).
Contedo elevado de cidos graxos insaturados, que auxilia
na manuteno do estado semi-fluido.
Obs.: Adio de crioprotetores (glicerol 10%) ao meio ajuda
na preservao de culturas em baixas temperaturas (-70 a -
196
o
C).
Adaptaes moleculares termofilia:
Lipdeos da membrana ricos em cidos graxos saturados geram ambientes altamente
hidrofbicos colaborando para estabilidade da membrana citoplasmtica.
Protenas termoestveis tendem a formar ncleos altamente hidrofbicos,
diminuindo a tendncia ao desdobramento.
DNA girase reversa em Archaea: promove um superenovelamento positivo do DNA, mais
termoestvel.
Outras protenas termoestveis ajudam a manter a dupla fita do DNA unida.
Membrana citoplasmtica em monocamada lipdica nas Archaea (estruturalmente mais
resistente que a bicamada).
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pH
pH timo de crescimento refere-se ao pH do meio externo; o pH intracelular deve
permanecer prximo neutralidade.
A escala de pH. (Fonte: Madigan et al., 2004).
Maior parte das bactrias cresce
entre pH 6,5 e 7,5.
Acidfilos: muitos fungos (pH
timo em torno de 5 ou inferior),
vrios gneros de Archaea.
Alcaliflicos: muitas espcies de
Bacillus e algumas arquias (que
tambm so haloflicas).
Adio de sais de fosfato
(KH
2
PO
4
) em meios de cultura
funcionam como tampo para
neutralizar, por exemplo, cidos
produzidos por bactrias em
crescimento.
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Presso osmtica
Efeito da concentrao do on sdio no crescimento de microrganismos com
diferentes tolerncias ou necessidades de sal.
(Madigan et al., 2004).
Os microrganismos que tem necessidades especficas de NaCl para seu
crescimento timo podem ser :
halfilos discretos: [ ] baixas 1 a 6%
halfilos moderados: [ ] moderadas 6 a 15%
halfilos extremos: [ ] altas 15 a 30%
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Presso osmtica
plasmlise
Inibio do crescimento no momento em que a membrana plasmtica se
separa da parede celular.
Preservao de alimentos!!!
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Relaes dos microrganismos com o oxignio
Aerbios
Aerbios estritos ou obrigatrios
Microaerfilos
Aerbios facultativos
Anaerbios
Obrigatrios

Aerotolerantes
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Microrganismos variam quanto suas necessidades ou tolerncia ao oxignio

- Aerbios microrganismos capazes de utilizar o Oxignio molecular, O
2.
(Ar contm
21% de O
2
)
-Produzem mais energia a partir do uso de nutrientes.

- Aerbios estritos ou obrigatrios: So os microrganismos que necessitam de O
2
para
sua sobrevivncia.
24
- Microaerfilos
Aerbias necessitando de O
2
, mas em concentraes menores do que a encontrada no ar.

So sensveis aos radicais superxidos ou perxidos, produzidos em concentraes letais
quando em condies de altas concentraes de oxignio.
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- Aerbios facultativos
Podem utilizar o O
2
quando disponvel, mas na sua ausncia, so capazes de continuar
seu crescimento atravs da respirao anaerbia ou da fermentao.

A eficincia na produo de energia diminui quando o O
2
no est disponvel.
Exemplo: Escherichia coli

Outras bactrias substituem o oxignio, durante a respirao anaerbia, por aceptores
de eltrons como os ons nitrato.
26
- Anaerbios obrigatrios ou estritos
So microrganismos que no utilizam o O
2
para reaes de produo de energia.

O
2
pode ser um produto danoso para muitos destes.

Exemplo: Gnero Clostridium = ttano e botulismo

Alguns microrganismos no so capazes de respirar oxignio:
Anaerbios
Obrigatrios Aerotolerantes
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- Anaerbios aerotolerantes
Toleram a presena do oxignio, mas no podem utiliz-lo para seu crescimento.

Fermentam carboidratos produzindo cido ltico.
O acmulo deste cido inibe o crescimento da microbiota competitiva aerbia
estabelecendo um nicho ecolgico.
Exemplo: Lactobacillus

Podem tolerar o oxignio devido a produo de SOD.
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Grupo Relao com o O
2
Tipo de
metabolismo
Exemplo Habitat tpico
Aerbios
Obrigatrios Exigido Resp.aerbia Micrococcus luteus Pele, poeira
Facultativos
No exigido,
mas com
melhor
crescimento
em O2
Resp.
aerbia,
anaerbia,
fermentao
Escherichia coli
Intestino grosso de
humanos
Microaerofilos
Exigido, mas
em nveis
inferiores ao
atmosfrico
Resp. aerbia Spirillum volutans gua de lagos
Anaerbios
Aerotolerantes
No exigido,
sem melhor
crescimento na
presena de O2
Fermentao
Streptococcus
pyogenes
Trato respiratrio
superior
Obrigatrios Nocivo ou letal
Fermentao
ou resp.
anaerbia
Methanobacterium
formicicum
Lodo de digestores
de esgoto,
sedimentos de lagos
anxicos
Oxignio
Adaptado de Madigan et al., 2004.
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Representao dos tipos de crescimento bacteriano quanto presena de oxignio
em meio caldo tioglicolato + gar (+ denso). (a) aerbios obrigatrios. (b)
anaerbios obrigatrios. (c) aerbios facultativos. (d) microaerfilos. (e) anaerbios
aerotolerantes.
Fonte: Madigan et al., 2004.
Oxignio
Controle do
crescimento microbiano
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Controle do crescimento microbiano
Termos importantes
Controle antimicrobiano por agentes fsicos
Controle antimicrobiano por agentes qumicos
Agentes antimicrobianos utilizados in vivo
Resistncia a antimicrobianos

Termos importantes
Desinfeco*: processo de eliminao das formas vegetativas de
praticamente todos os microrganismo patognicos de objetos ou
superfcies inertes (no garante a eliminao de todos os
microrganismos, nem endsporos).
quando em tecido vivo = Anti-sepsia
Descontaminao: tratamento que torna seguro o manuseio de um
objeto ou superfcie inanimada (= remoo dos microrganismos).
Desinfetante: Agente antimicrobiano utilizado em objetos
inanimados, mas pode ser prejudicial aos tecidos humanos.
Agente anti-sptico: agente antimicrobiano, voltado para a
destruio dos microrganismos patognicos, suficientemente atxico
para ser aplicados em tecidos vivos.

*ateno para este termo no livro do Tortora, 8. edio portugus , que em
alguns trechos est definido erroneamente como destruio dos patgenos de
vegetais.
Esterilizao: destruio de todas as formas de vida microbiana
(incluindo os endsporos e vrus).
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Sanitizao: tratamento que reduz as contagens microbianas
nos utenslios alimentares at nveis seguros de sade pblica.

Sepse: do termo grego para estragado, podre, indica
contaminao bacteriana.

Assepsia: ausncia de contaminao significativa.
ambiente assptico = livre de patgenos

Esterilizao comercial: tratamento de calor suficiente para
matar os endsporos de Clostridium botulinum nos alimentos
enlatados.
Termos importantes
(Tortora, Funke e Case)
Agentes bactericida, fungicida, viricida: que matam bactrias,
fungos e vrus, respectivamente.

Agentes bacteriosttico, fungisttico, viriosttico: que inibem o
crescimento de bactrias, fungos e vrus, respectivamente.
Termos importantes
Tempo
L
o
g

d
o

n
m
e
r
o

d
e

c
l
u
l
a
s

Contagem de clulas totais
Contagem de clulas viveis
Efeito bacteriosttico
Efeito bactericida
Efeito bacterioltico
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Fatores que influenciam a efetividade dos
tratamentos antimicrobianos
O nmero de microrganismos:
quanto maior o nmero, mais tempo
se leva para eliminar toda a
populao.

Influncias ambientais: presena de
matria orgnica pode inibir a ao de
antimicrobianos qumicos. Sangue,
vmitos e fezes determinam a escolha
do antimicrobiano, por exemplo.

Tempo de exposio: antimicrobiano
qumico requer mais tempo para
eliminar endsporos, por exemplo.

Caractersticas microbianas: se a
bactria Gram-positivo ou -
negativo, micobactrias, vrus, cistos
de protozorios.
Resistncia microbiana a biocidas qumicos.
alterao da permeabilidade da membrana plasmtica

danos s protenas e aos cidos nuclicos

Aes dos agentes de controle microbiano
Fsicos
Agentes
Qumicos
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alterao da permeabilidade da membrana plasmtica

Regula ativamente a passagem de nutrientes para a clula e a
eliminao de dejetos da mesma.

Leso aos lipdeos ou protenas da membrana plasmtica por
agentes antimicrobianos, como os compostos de amnio
quarternrio, causa tipicamente o vazamento do contedo
celular no meio circundante e interfere com o crescimento da
clula
Danos s protenas e aos cidos nuclicos

Bactrias = sacos de enzimas
Protenas vitais para atividades celulares

dependem da sua forma tridimensional

Calor ou produtos qumicos rompimento das
pontes de hidrognio
Pontes dissulfeto
Dano aos cidos nuclicos calor, radiao ou substncias qumicas
impedem a realizao de funes metablicas, replicao
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Agentes fsicos de controle
Agentes fsicos de controle
Calor
mido

Seco
Desnaturao
de enzimas
Resistncia ao calor difere entre os microrganismos

Como observar tais diferenas?
Ponto de morte trmica (PMT): menor temperatura em que todos os microrganismos
em uma suspenso lquida sero mortos em 10 minutos

Tempo de morte trmica (TMT): perodo mnimo de tempo em que todos os
microrganismos em uma cultura lquida sero mortos em uma dada temperatura

Tempo de reduo decimal (TRD): Tempo em minutos em que 90% da populao de
microrganismos em uma dada temperatura sero mortos

Conceitos teis para a indstria alimentcia, de enlatados por exemplos
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Taxa de morte microbiana
Taxa de Morte Microbiana:
exemplo
Tempo
(min)
Mortes
por min
Nmero de
sobreviventes
0
1
2
3
4
5
6
0
900.000
90.000
9.000
900
90
9
1.000.000
100.000
10.000
1.000
100
10
1
Populaes microbianas
morrem em taxas constantes
TRD = 1 minuto
Para cada 1 minuto de tratamento 90% da populao morre
Mesma TRD
Mtodos fsicos de controle microbiano
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Fervura (100C ao nvel do mar) mata formas vegetativas dos
patgenos bacterianos, quase todos os vrus, e os fungos e seus
esporos dentro de 10 minutos

Vapor de fluxo livre (no pressurizado) equivalente gua fervente,
no entanto, endsporos e alguns vrus no so destrudos to
rapidamente

Vrus da hepatite pode sobreviver at 30 minutos de fervura

Alguns endsporos bacterianos podem resistir fervura por mais de
20 horas

Fervura nem sempre um bom procedimento confivel de
esterilizao, mas a fervura breve matar a maioria dos
microrganismos patgenos alimentos e gua seguros para ingesto
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Pasteurizao
Indstria de laticnios teste da fosfatase
presente naturalmente no leite, mas inativada
durante o processo

Tempos e temperaturas variam dependem dos produtos
(viscosidade e gorduras)
Antigamente 63C por 30 minutos

Hoje 72C por 15 segundos (Pasteurizao de alta temperatura e
curto tempo (HTST) serpentina: mata patgenos e diminui as
contagens bacterianas totais, mas o leite deve ser conservado sob
refrigerao

Ateno!! UHT (tratamento de temperatura ultra-elevada)
Diferente da Pasteurizao armazenamento sem refrigerao (em
menos de 5 s, a temperatura sobe de 74C para 140C e retorna para
74C (tratamentos equivalentes)
Autoclave
Mtodo preferencial para esterilizao a menos que o
material seja danificado pelo calor ou umidade
Vapor de fluxo livre 100C presso atmosfrica ao
nvel do mar
1 ATM acima (15 psi) 121C 15 minutos
Mata todos os microrganismos e seus endsporos
Maior volume mais tempo
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Autoclave
Autoclave
Indicadores de temperatura
Controle de esterilizao:
Temperatura - OK
Tempo - ???
Autoclave

Controle de qualidade do
processo
Indicadores biolgicos
Controle de esterilizao:
Temperatura - OK
Tempo - OK
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Filtrao
Poros de 0,22 m
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Tipos de membranas / filtros: (a) filtro de profundidade. (b)
membrana filtrante convencional. (c) filtro Nuclepore.
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Filtrao: Filtros HEPA
Filtros de partculas de ar de alta eficincia (high efficiency particulate air)
Removem quase todos os
microrganismos maiores que
cerca de 0,3 mm de dimetro
Filtrao: Filtros HEPA

Filtros de partculas de ar de alta eficincia (high efficiency
particulate air)
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Radiao esterilizante no-ionizante e ionizante
ionizante
> 1nm = no ionizante
Ionizao da gua produzindo ons hidroxila altamente reativos que agem no
DNA e componentes orgnicos celulares
Ex. Cobalto radioativo
Radiao no-ionizante: UV
Luz Ultra-violeta danifica o DNA das clulas
expostas produzindo ligaes entre timinas
adjacentes na cadeia de DNA

Inibem a replicao correta do DNA durante a
reproduo da clula

comprimento de onda mais efetivo: 260 nm
Luz no muito penetrante
microrganismos devem estar expostos, se
estiverem protegidos por uma superfcie no
sero atingidos

Pode lesar os olhos humanos e a exposio
prolongada pode causar queimaduras e
cncer de pele em seres humanos
Desvantagem
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-Ligue o fluxo laminar (filtrao do ar)
-Limpe a superfcie interna com lcool 70%
-Ligue a luz UV por 15 minutos antes de usar

Filtros HEPA

+
Luz Ultra-violeta
Cmara de Biossegurana
Congelamento a baixas temperaturas
- 80C
Diminui o metabolismo das bactrias;
Devido a temperatura tima da atividade
enzimtica e devido ao fato de no ter gua
no estado lquido disponvel para reao;
Efeito bacteriosttico.
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Congelamento a baixas temperaturas
Ideal para bactrias: congelamento rpido!!

Usar criopreservantes como glicerol ou DMSO

Com o crescimento lento h a formao de cristais de gelo
que rompem a estrutura celular e molecular das bactrias

Uma parte da populao morre, mas sempre h
sobreviventes!

Mtodos qumicos de controle microbiano
Tecidos vivos

Objetos inanimados
Poucos atingem a esterilidade, a maioria reduz a populao
para nveis seguros ou removem as formas vegetativas
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http://www.answersingenesis.org/assets/images/articles/aid/v4/antiseptic-surgery.jpg
Clorexidina
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CB-30 T.A. tem como principal composto o cloreto de alquil dimetil benzil
amnio, que um agente catinico de atividade em superfcie, com poderosa
ao germicida. Usado corretamente nas diluies recomendadas altamente
eficaz contra bactrias, fungos e esporos.

Herbalvet T.A. um produto para desinfeco e desodorizao de ambientes
base de amnia quaternria associada a um produto tensoativo (detergente); o
que dispensa o uso de qualquer outro produto para limpeza. As amnias
quaternrias (cloreto de benzalcnio) so conhecidas por seu excelente poder
desinfetante, atuando em bactrias Gram-positivas e Gram-negativas, fungos,
algas e alguns tipos de vrus; e por sua alta segurana em termos de toxicidade.
O xido de etileno irritante da pele e mucosas,
provoca distrbios genticos e neurolgicos. um
mtodo, portanto, que apresenta riscos
ocupacionais.
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Avaliando um desinfetante Mtodo de disco-difuso
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Mata as bactrias e
fungos, mas no tem
ao em endsporo e
vrus no-envelopados
- No deixa resduos!!
70% a concentrao mais usada
60-95% parecem matar coma mesma rapidez

Desnaturao das protenas requer gua!!
Ao oligodinmica dos metais pesados
Capacidade de quantidades muito pequenas de metais pesados,
especialmente a prata e cobre, exercerem atividade
antimicrobiana
Ao de ons do metal pesado se combinam com grupos sulfidrila nas protenas
celulares desnaturao
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http://www.sjtresidencia.com.br/invivo/?p=5913
Paul Ehrlich Bala mgica
Que mate um microrganismo, sem
matar seu hospedeiro

Idia de Toxicidade Seletiva!
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Agentes quimioterpicos: sintticos ou naturais (antibiticos).
Antibitico: substncia produzida por microrganismos que, em
pequenas quantidades, inibe o crescimento de outros
microrganismos.
1940: primeiro teste clnico da penicilina por um grupo de
cientistas da Universidade de Oxford, liderados por Howard Florey e
Ernst Chain.
Mais da metade dos antibiticos produzidos so obtidos de
espcies de Streptomyces bactria filamentosa do solo. Alguns de
Bacillus e outros dos fungos Penicillium e Cephalosporium.

Droga antimicrobiana ideal a que tem
toxicidade seletiva: capacidade do composto de inibir
bactrias ou outros agentes patognicos sem provocar
efeitos adversos no hospedeiro.
Ao das drogas antimicrobianas
Onde agir???
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Inibio da sntese da parede celular:
antibiticos beta-lactmicos inibem sntese completa
do peptideoglicano impedem a ligao peptdica
cruzada, ligando-se s transpeptidases.

Inibio da sntese protica:
inibem a formao de ligaes polipeptdicas durante
o alongamento da cadeia, por meio da unio com a
subunidade 50S;
reagem com a subunidade 30S, interferindo na fixao
do tRNA, portanto impedindo a adio de aminocidos no
alongamento da cadeia polipetdica;
alterao da conformao da subunidade 30S,
impedindo a leitura correta do mRNA;
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Danos membrana plasmtica
polimixina B liga-se ao fosfolipdeo da membrana,
rompendo-a (uso tpico).
drogas antifngicas agem sobre o ergosterol (esterol da
MP); no tem efeito sobre bactrias.

Inibio da sntese de cidos nuclicos
interferncia nos processos de replicao e transcrio do
DNA dos MO (baixo grau de toxicidade seletiva).

Inibio da sntese de metablitos essenciais
Um tipo de sulfa, p.e., compete com o PABA (cido
paraminobenzico), um substrato para a sntese do cido
flico (vitamina que atua como co-enzima para a sntese de
aminocidos e bases dos cidos nuclicos).
Ao de peptdio antimicrobianos catinicos em S. aureus
membrane cracks,
leakage of cytoplasmic contents, membrane
potential disruption, and eventually the
disintegration of the membrane
(Pouny et al., 1992)
Midorikawa et al., 2003
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Ao da polimixina na membrana citoplasmtica
Inibio da sntese protica por antibiticos.
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Mecanismo de ao da maioria dos agentes quimioterpicos
antimicrobianos.
THF = tetraidrofolato, DHF = diidrofolato, PABA = cido paraminobenzico.
cido para-aminobenzico
Espectro de ao antimicrobiano de uma seleo de agentes
quimioterpicos.
Espectro de ao do antibitico

amplo espectro: que atua tanto em Gram + como em Gram -
pequeno espectro (ou espectro estreito): atua em um nico grupo.
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Drogas sintticas
Anlogos de fatores de crescimento:
sulfas, isoniazida.

Sulfonamidas ou Sulfas: sulfanilamida,
anlogo ao cido p-aminobenzico, um
componente do cido flico.

Isoniazida: anlogo da nicotinamida, tem
espectro de ao estreito, eficaz apenas contra
Mycobacterium tuberculosis, interferindo na
sntese do cido miclico (componente
especfico da parede das micobactrias).
Quinolonas: classe de drogas sintticas que interage com a DNA girase bacteriana,
impedindo o superenovelamento do DNA bacteriano. Amplo espectro. Quinolona
prottipo o cido nalidxico. Fluoroquinonas so utilizadas em avcolas, na preveno
de doenas respiratrias.

Drogas naturais antibiticos
Antibiticos produzidos por procariotos: aminoglicosdeos, macroldeos
e tetraciclinas.
inibidores da sntese protica.

Aminoglicosdeos: contm aminoacares unidos entre si por ligaes
glicosdicas.
ex.: estreptomicina, kanamicina, gentamicina, neomicina.
empregados contra as Gram-negativas, hoje so considerados
antibiticos-reserva.
correspondem a apenas 3% do total de antibiticos produzidos no
mundo.

Macroldeos: o mais conhecido a eritromicina, til no tratamento de
legionelose (Legionella pneumophila).

Tetraciclinas: um dos primeiros antibiticos de amplo espectro, produzidos
por Streptomyces spp.
em alguns pases empregada como suplemento nutricional para aves
domsticas e sunos.
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Drogas naturais antibiticos
beta-lactmicos: penicilinas , cefalosporinas e cefamicinas.

Modo de ao: inibem sntese completa do peptideoglicano impedem a ligao
peptdica cruzada, ligando-se s transpeptidases, tornando a parede fragilizada,
alm de estimular a liberao de autolisinas, que digerem a parede.

Penicilina (Penicillium chrysogenium) e cefalosporina (Cephalosporium sp)
correspondem a mais da metade de todos os antibiticos produzidos no mundo.

Penicilina G (composto prottipo) ativa contra bactrias Gram-positivas. Algumas
penicilinas semi-sintticas (com modificaes na cadeia lateral) atuam contra
algumas Gram-negativas (passam pela membrana externa).
Estrutura comum das penicilinas. Os mais de 50 tipos
de penicilina distinguem-se pela cadeia lateral.
Penicilina G sensvel beta-lactamase
enzima produzida por algumas bactrias
resistentes penicilina.
Algumas penicilinas semi-sintticas so
resistentes beta-lactamase.
Tipos de resistncia
aos antimicrobianos
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Tipos de resistncia
Resistncia natural ou constitutiva ou intrnseca:
- Gene de resistncia no cromossomo, caracterstica da espcie bacteriana.
- No apresenta o stio-alvo ou impermevel ao antibitico.

Resistncia adquirida: a bactria pode se tornar resistente por
um dos trs mecanismos:
Alterao do stio-alvo,
Alterao da absoro
Inativao enzimtica do antimicrobiano.
Decorrente a uma alterao gentica que se expressa
bioquimicamente
- Mutaes cromossmicas
- Transferncia de genes atravs da aquisio de plasmdeos com
genes de resistncia (transposons, cassetes).
Tipos de resistncia
Adquirida
Plasmdeos
Transposons
Genes cassetes
Trazem genes que expressam protenas que iro alterar a estrutura do
stio alvo, ou com menos afinidade pela droga

Alterao gentica
- Mutao em genes que iro resultar em protena alterada com
baixa afinidade pela droga
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Mecanismos de resistncia
Alguns plasmdeos, chamados de Fatores R, contm genes para a
resistncia a muitos antibiticos.

Os plasmdeos, incluindo os Fatores R, podem ser transferidos a
outros organismos, sempre relacionados.
Conjugao
Transformao
Transduo
Mecanismos de resistncia em bactrias
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Como uma bactria resistente se dissemina?
Como uma bactria resistente se dissemina?
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46
Bactrias resistentes
so selecionadas no
organismo ou
ambiente!!!
Determinao da concentrao inibitria mnima de um
antimicrobiano mtodo quantitativo
Como saber se a bactria resistente?
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Teste de Disco Difuso Kirby Bauer
Mtodo qualitativo
Escala de Mc Farland
Etest mtodo de difuso quantitativo
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48
Bibliografia
- Madigan et al., Microbiologia de Brock. So
Paulo:Prentice-Hall, 10 ed., 2004. Captulos
17 e 21.

- Tortora et al., Microbiologia. Porto Alegre;
ArtMed, 8 ed., 2005. Captulos 7, 15 e 20.

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