You are on page 1of 16

LABORATRIOS DE TECNOLOGIAS AMBIENTAIS

ANLISES FSICO-QUMICAS DE MATRIA ORGNICA



CARNCIA QUMICA DE OXIGNIO
CARNCIA BIOQUMICA DE OXIGNIO






MIEB 2007/08
2
Documento adaptado das aulas de Elementos de Engenharia do Ambiente Joo Peixoto

1. Carncia Qumica de Oxignio (CQO)
1.1 INTRODUO
A Carncia Qumica de Oxignio (CQO), tambm designada por COD (do ingls "Chemical
Oxygen Demand"), usada como uma medida do oxignio equivalente fraco orgnica da
amostra susceptvel de ser oxidada por um oxidante qumico enrgico. Outras anlises para a
quantificao do carbono orgnico so a Carncia Bioqumica de Oxignio, CBO, e o Carbono
Orgnico Total, COT. Para certos tipos de amostras, a CQO pode ser empiricamente relacionada
com a CBO, e com o COT. Depois de estabelecida a correlao, esta anlise til para efeito de
monitorizao e controlo.
O mtodo do refluxo com dicromato prefervel a outros que usem outros oxidantes, devido
sua maior capacidade de oxidao, aplicabilidade a uma grande variedade de amostras e facilidade
de manipulao.
A maioria dos compostos orgnicos oxidada em 95 % a 100 % do valor terico. A piridina e
outros compostos do mesmo tipo apenas so oxidados enquanto estiverem em contacto com o
oxidante. O amonaco, quer da amostra, quer o libertado a partir da matria orgnica que contm
azoto, s oxidado na presena duma concentrao significativa de ies cloreto livres.
1.2 SELECO DO MTODO
O mtodo do refluxo aberto o mais utilizado para uma grande variedade de amostras com
valores de CQO entre 5 mg/L e 50 mg/L, no qual, de preferncia, se usam grandes volumes de
amostra. Os mtodos de refluxo fechado so mais econmicos no que se refere ao uso de
reagentes de sais metlicos, mas necessrio homogeneizar as amostras que contenham slidos
suspensos para obter resultados reprodutveis. As ampolas e tubos de cultura com reagentes
previamente medidos encontram-se disponveis comercialmente.
1.3 INTERFERNCIAS E LIMITAES
Os compostos alifticos volteis de cadeia aberta so oxidados em pequena extenso. Isto
ocorre em parte devido ao facto dos compostos orgnicos volteis estarem presentes no espao
gasoso, no entrando em contacto com o lquido oxidante. Consegue-se uma oxidao mais
efectiva destes compostos alifticos de cadeia aberta adicionando sulfato de prata (Ag
2
SO
4
) como
catalisador. Contudo, o Ag
2
SO
4
reage com o cloro, bromo e iodo originando precipitados que s so
oxidados parcialmente. As interferncias devidas presena de haletos podem ser grandemente
ultrapassadas, embora, pensa-se, no completamente, por complexao com sulfato de mercrio
(HgSO
4
), antes de iniciar o refluxo. Embora seja aconselhvel 1 g de HgSO
4
para 50 mL de
amostra, pode-se usar uma quantidade menor, quando a concentrao de cloretos for inferior a
2000 mg/L, desde que se mantenha uma relao HgSO
4
/Cl

de 10/1. No use este mtodo para


amostras que contenham Cl

em concentrao superior a 2000 mg/L. H outras tcnicas para


determinar a CQO em guas salinas.
Os nitritos (NO
2

) apresentam uma CQO de 1.1 mg/mg, expressa como massa de O


2
por
massa de azoto (NO
2

N). Esta interferncia normalmente considerada insignificante, e por isso


desprezada, uma vez que as concentraes de NO
2

N, nas guas, raramente excedem o valor de


2 mg/L. Para eliminar uma interferncia significativa devida ao NO
2

, adicione 10 mg de cido
sulfmico por cada miligrama de NO
2

N presente no volume de amostra usado; adicione a mesma


quantidade de cido sulfmico ao recipiente de refluxo que contm o branco de gua destilada.
As espcies inorgnicas reduzidas, tais como o io ferroso, sulfureto, mangansio,
3
Documento adaptado das aulas de Elementos de Engenharia do Ambiente Joo Peixoto

manganoso, etc., so quantitativamente oxidadas nas condies do ensaio. Para amostras que
contenham quantidades significativas destas espcies pode assumir-se a oxidao estequiomtrica
a partir da concentrao inicial das espcies interferentes, e corrigir o valor obtido para a CQO.
1.4 AMOSTRAGEM E PRESERVAO DAS AMOSTRAS
As amostras devem ser recolhidas em frascos de vidro. Analise de imediato as amostras
instveis. Se isso no for possvel, preserve a amostra por acidificao com H
2
SO
4
concentrado at
pH < 2. As amostras com slidos sedimentveis devem ser bem homogeneizadas.
Faa diluies prvias para amostras que tenham CQO elevada, de forma a reduzir o erro
inerente medio de pequenos volumes de amostra.
1.5 MTODO TITULOMTRICO REFLUXO FECHADO
Este mtodo baseia-se no facto de a maioria dos compostos orgnicos serem oxidados por
uma mistura de cido crmico e sulfrico, em ebulio.
A amostra refluxada numa soluo fortemente cida, com uma quantidade conhecida de
dicromato de potssio (K
2
Cr
2
O
7
) em excesso, na presena de um catalisador (Ag
+
). Aps a digesto,
o dicromato de potssio reduzido quantificado por titulao com sulfato de ferro e amonaco
O H 7 Fe 6 Cr 2 H 14 Fe 6
-
O Cr
2
3 3 2 2
7 2
+ + + +
+ + + +

e relacionada com o valor de CQO da amostra (6 mol de FAS, ou Fe
2+
, equivalem a 1 mol de
dicromato ou 1.5 mol de O
2
)
2 2
3 2
7 2
1.5O O H 4 Cr 2 H 8
-
O Cr + + +
+ +

O tempo-padro de 2 h para o refluxo pode ser reduzido, quando se verificar que perodos
mais curtos originam os mesmos resultados.
1.6 EQUIPAMENTO
Tubos de digesto
Use tubos de cultura de borossilicato, de 16 mm x 150 mm (so estes os disponveis nas
aulas), 20 mm x 150 mm ou, ainda, 25 mm x 150 mm, com obturadores roscados revestidos com
TFE. Como alternativa, use ampolas de borossilicato, com 10 mL de capacidade e dimetro entre
19 mm e 20 mm. Os graves danos que podem surgir nos obturadores da maioria dos tubos de
cultura, durante o perodo de digesto, so uma potencial fonte de contaminao e aumentam as
probabilidades de perda. S deve usar uma estufa para a digesto em tubo de cultura, depois de
saber que 2 h de exposio a 150
o
C no danificam os obturadores. Confirme a qualidade dos
tubos e rolhas, antes de os utilizar. S os tubos da marca Schott (tampa vermelha) podem ir
estufa. No bloco de aquecimento tambm se podem usar os tubos de pirex (tampa escura).
Bloco de aquecimento ou digestor
De liga de alumnio, com 45 mm a 50 mm de altura, e com aberturas de tamanho suficiente
para se ajustarem aos tubos de cultura ou ampolas. Para operar a 150 oC 2 oC.
1.7 REAGENTES
Soluo de digesto de dicromato de potssio, 0.0167 mol/L: adicione a
aproximadamente
500 mL de gua destilada, 4.913 g de K
2
Cr
2
O
7
, reagente de grau 1, previamente seco a 103
o
C
4
Documento adaptado das aulas de Elementos de Engenharia do Ambiente Joo Peixoto

durante 2 h, 167 mL de H
2
SO
4

concentrado e 33.3 g de HgSO
4
. Dissolva, deixe arrefecer at
temperatura ambiente, e dilua at 1000 mL.
Reagente de cido sulfrico: adicione Ag
2
SO
4
puro, em cristais ou em p, a cido sulfrico
concentrado, na proporo de 5.5 g de Ag
2
SO
4
para 1 kg de H
2
SO
4
. Deixe em repouso um ou dois
dias, para dissolver o Ag
2
SO
4
. Este reagente e o anterior so fornecidos em dispensadores
volumtricos. Verificar sempre se o volume est correctamente regulado (figura A2.1).
Indicador de ferrona: dissolva 1.485 g de monohidrato de fenantrolina e 695 mg de
FeSO
4
.7H
2
O em gua destilada, e dilua at 100 mL. De preferncia este indicador deve ser
comprado j preparado.
Soluo titulante de sulfato de amnio ferroso (do ingls,
FAS) 0.10 mol/L: dissolva 39.2 g de Fe(NH
4
)
2
(SO
4
)
2
.6H
2
O em gua
destilada. Adicione 20 mL de cido sulfrico concentrado. Arrefea e
dilua at 1000 mL. Padronize a soluo diariamente com a soluo-
padro de dicromato.
cido sulfmico: s necessrio quando se pretender eliminar
a interferncia de nitritos.
Soluo-padro de hidrogenoftalato de potssio (KHP):
triture levemente e depois seque em estufa a 120
o
C, at peso
constante, o hidrogenoftalato de potssio (HOOCC
6
H
4
COOK). Dissolva
212.5 mg em gua destilada e dilua at 1000 mL. O KHP tem uma
CQO terica de 1.176 mg/mg, e a soluo anterior tem uma CQO
terica de 250 mg/L. Esta soluo estvel durante 3 meses, se for
guardada num frigorfico, e se no for visvel qualquer desenvolvimento
biolgico.


Figura 1. Reagentes, dispensadores e bureta (titulao)
para determinao da CQO.
1.8 PROCEDIMENTO
A amostra deve conter um valor de CQO inferior a 250 mg/L. Efectuar diluies caso
necessrio. Analisar em duplicado.
Lave os tubos de cultura e os obturadores com H
2
SO
4
a 20 %, antes de serem usados pela 1.
a

vez, para evitar a contaminao. Recorra Tabela A2.1 para obter os volumes adequados da
amostra e dos reagentes.
Coloque a amostra no tubo de cultura ou ampola e adicione a soluo de digesto. Deite
cuidadosamente o reagente de cido sulfrico, fazendo-o escorrer pela parede. Feche os
obturadores dos tubos, ou sele as ampolas com firmeza, e inverta-os vrias vezes at que os
reagentes se misturem completamente. Use o vrtex, at no se notarem diferentes fases. Assim,
evita-se o aquecimento local no fundo do tubo e a possvel projeco do seu contedo.
ATENO: Use uma proteco para o rosto (culos), e proteja as mos (luvas) do calor
produzido enquanto mexe o contedo dos tubos ou ampolas. Cuidado com possveis respingos.
5
Documento adaptado das aulas de Elementos de Engenharia do Ambiente Joo Peixoto



Tabela 1. Volumes de amostras e de reagentes, para vrios recipientes de digesto
Recipiente
de
digesto
Amostra

V
a
/mL
Soluo
de
digesto
V
sd
/mL
Reagente
de cido
sulfrico
V
H2SO4
/mL
Volum
e
final
total
V
ft
/mL
Tubos de Cultura
16 mm x 150 mm* 2.5 1.5 3.5 7.5
20 mm x 150 mm 5.0 3.0 7.0 15.0
25 mm x 150 mm 10.0 6.0 14.0 30.0
Ampolas-Padro
10 mL 2.5 1.5 3.5 7.5
* So estes os tubos disponveis para estas aulas
Coloque os tubos, ou ampolas, previamente agitados no vrtex, no bloco de digesto ou estufa
pr-aquecida a 150
o
C, e deixe refluxar durante 2 h. Deixe que arrefeam at temperatura
ambiente e coloque-os no suporte para os tubos.
Transfira o contedo de cada tubo para um gobl para a titulao (verta completamente e lave
o tubo com gua destilada, vertendo a gua de lavagem no mesmo gobl). Adicione 1 ou 2 gotas
de indicador de ferrona e uma barra de agitao magntica. Proceda titulao com FAS, 0.1
mol/L, mantendo a soluo com agitao. O ponto final detectado pela mudana de cor
de azul esverdeado para castanho avermelhado.
Proceda do mesmo modo (digesto e titulao) para o branco, que contm os reagentes e um
volume de gua destilada igual ao de amostra, bem como para uma ou duas solues-padro de
KHP. Para padronizar a soluo de FAS, titule uma mistura igual ao branco, mas sem digesto.
NOTA: Os resduos desta anlise so despejados em recipiente prprio.
1.9 CLCULOS
E
M B A CQO 8000 ) (
mg/L

= sendo 10 . 0 =
D
C
M
A e B V/mL de soluo de FAS, gasto a titular o branco e a amostra, respectivamente
M molaridade da soluo de FAS

mol/L
FAS
c

C V/mL de soluo de K
2
Cr
2
O
7
(0.0167 mol/L) titulado
D V/mL de soluo de FAS, gasto na titulao da soluo anterior
E V/mL de amostra
1.10 PRECISO E EXACTIDO
Foram testadas, por cinco laboratrios, 48 amostras sintticas contendo hidrogenoftalato de
6
Documento adaptado das aulas de Elementos de Engenharia do Ambiente Joo Peixoto

potssio e NaCl. Para uma CQO de 193 mg/L, na ausncia de cloro, o desvio-padro dos valores
foi de 17 mg/L (coeficiente de variao de 8.7 %). Para uma CQO mdia de 212 mg/L e uma
concentrao de Cl

de 100 mg/L, o desvio-padro subiu para 20 mg/L (coeficiente de variao


de 9.6 %).
7
Documento adaptado das aulas de Elementos de Engenharia do Ambiente Joo Peixoto

2 CBO
5
CARNCIA BIOQUMICA DE OXIGNIO APS CINCO DIAS
Mtodo por diluio e inoculao

2.1. INTRODUO
A Carncia Bioqumica de Oxignio (CBO, ou, do ingls, BOD) define-se como a quantidade de
oxignio dissolvido, OD, habitualmente expresso com as unidades em mg/L, que consumido
durante a oxidao biolgica aerbia da matria orgnica e/ou inorgnica, contida na amostra,
aps incubao a 20
o
C, em ambiente escuro. Este mtodo aplica-se a todas as guas cuja CBO
seja igual ou superior a 3 mg/L, e no ultrapasse os 6000 mg/L. Para valores superiores o mtodo
ainda aplicvel. No entanto, os erros decorrentes das diluies necessrias implicam que os
resultados sejam encarados com precauo.
Os resultados obtidos resultam de um conjunto de aces qumicas e bioqumicas, pelo que
no possuem o carcter rigoroso e sem ambiguidade dos que se obtm atravs de um mtodo
qumico, envolvendo processos bem determinados, como a CQO. No entanto, fornecem-nos uma
indicao que permite avaliar a qualidade duma gua.
A presena de certas substncias pode influenciar os resultados. Assim, substncias txicas
para os microrganismos, como bactericidas, metais pesados ou cloro livre, podem inibir a oxidao
bioqumica. As algas e/ou os microrganismos nitrificantes podem conduzir a resultados elevados.
O mtodo baseia-se na determinao do OD duma amostra de gua antes e depois de
incubada. A incubao, em frasco completamente cheio e rolhado, feita a uma temperatura
controlada e na obscuridade, durante 5 d. O clculo da massa de O
2
consumida por litro de gua
exprime a CBO
5
. Cada pessoa origina diariamente, em mdia, 50 g de CBO
5
.
As guas naturais no poludas tm um valor de CBO
5
normalmente compreendido entre 1
mg/L e 3 mg/L.
Antes de se proceder incubao, a amostra de gua deve ser neutralizada e diluda com
quantidades variveis de uma gua de diluio rica em OD e em microrganismos aerbios, com ou
sem repressor da nitrificao, conforme o desejado. Devem ser executados, simultaneamente,
ensaios de controlo do mtodo, utilizando uma soluo-padro de Glucose e cido glutmico.
O oxignio dissolvido, OD, um dos parmetros mais importantes em sistemas aquticos,
participando em processos biolgicos e qumicos de oxidao. um bom indicador da sade
dum rio. A actividade microbiana crescente, por excesso de matria orgnica, torna o meio
aqutico hostil macroflora e fauna natural (a truta morre se OD < 4 mg/L). Um sistema
saudvel se OD = 0.90 OD
sat
, para temperatura e salinidade normais, mas muito poludo quando
OD = 0.50 OD
sat
. Os ciprindeos exigem OD 5.0 mg/L, enquanto que os salmondeos, bastante
mais exigentes, necessitam de OD 7.0 mg/L. Nas descargas muito poluentes so os
salmondeos os primeiros a morrer.
A temperatura influencia a concentrao de oxignio de saturao, sendo OD tanto menor
quanto mais elevada for a temperatura da gua: a 10
o
C (gua do mar), OD
sat
= 9.0 mg/L, mas OD
sat

= 6.7 mg/L, a 25
o
C. A presso atmosfrica tem um efeito inverso, mas , normalmente, menos
acentuado. Para processos biolgicos aerbios, o valor de referncia mnimo de OD anda volta de
4.0 mg/L, mas a sobressaturao, acima de 110 %, tambm pode ser prejudicial para a vida
aqutica.
Nos ensaios de campo, a medio de OD deve ser feita imediatamente, no local, registando-se
tambm a temperatura e a presso atmosfrica, para posterior correco do valor. H sondas e
registadores que j apresentam o valor de OD corrigido, apresentando-o tanto em percentagem de
8
Documento adaptado das aulas de Elementos de Engenharia do Ambiente Joo Peixoto

saturao, como em mg/L.
Os contaminantes orgnicos provm de substncias orgnicas naturais, insecticidas,
herbicidas e outros qumicos usados na agricultura. Efluentes urbanos e industriais tambm
contribuem, em quantidades variveis. Efluentes industriais orgnicos txicos tm um duplo efeito
negativo na vida aqutica. A CBO
5
dum esgoto domstico, em mdia, no muito elevada,
rondando os 300 mg/L. Os efluentes das indstrias de lacticnios, pelo contrrio, tm valores que
facilmente atingem 3000 mg/L (dez vezes mais), podendo ser ainda bastante mais altos,
dependendo do processo.
O COT, mtodo bastante mais caro, d uma expresso mais directa, mais rpida e mais
exacta do que a CBO (o mtodo mais lento) ou a CQO. Muitos compostos oxidados pelo dicromato
no so biodegradveis, pelo que a CBO subestima o valor de oxignio necessrio para a oxidao
completa. No entanto, h lcoois que o dicromato no oxida, mas so biodegra-dveis. A CQO
tambm no d qualquer informao sobre a cintica (normalmente de primeira ordem) de
degradao natural. Uma razo CBO/CQO elevada sugere uma grande proporo de material
biodegradvel.
2.2 Reagentes
Inculo
Se a amostra no contm, por si s, uma quantidade suficiente de microrganismos
adaptados, deve utilizar-se um inculo obtido duma das seguintes cinco maneiras:
a) Juntar 100 g de terra de jardim hmida, a 1 L de gua; misturar e deixar repousar durante
10 min; tomar 100 mL do lquido sobrenadante e diluir at 1 L com gua;
b) gua residual domstica bruta proveniente de uma zona de fraca contaminao industrial, e
previamente decantada;
c) gua de rio ou de lago contendo efluentes domsticos;
d) Efluente do decantador duma ETAR domstica (usar 2 mL/mL);
e) gua contendo microrganismos adaptados gua a analisar e obtidos no laboratrio (caso
de efluentes industriais contendo substncias dificilmente biodegradveis).
Solues salinas
i) Soluo-tampo de fosfatos: num balo de 100 mL, dissolver em 50 mL de gua
destilada, 0.85 g de KH
2
PO
4
, 2.175 g de K
2
HPO
4
, 3.34 g de Na
2
HPO
4
.7H
2
O e 0.17 g de NH
4
Cl. Diluir
at 100 mL e homogeneizar. O pH desta soluo deve ser de 7.2, sem necessitar de ajustamento.
ii) Soluo de Sulfato de Magnsio heptahidratado: dissolver 2.25 g de MgSO
4
.7H
2
O
em gua destilada. Diluir at 100 mL e homogeneizar.
iii) Soluo de Cloreto de Clcio: dissolver 2.75 g de CaCl
2
(ou quantidade equivalente
quando se utilizar Cloreto de Clcio hidratado) em gua destilada. Diluir at 100 mL e
homogeneizar.
iv) Soluo de Cloreto de Ferro (III) hexahidratado: dissolver 0.025 g de FeCl
3
.6H
2
O
em gua destilada. Diluir at 100 mL e homogeneizar.

gua de diluio
9
Documento adaptado das aulas de Elementos de Engenharia do Ambiente Joo Peixoto

Diluir 1 mL de cada uma das 4 solues salinas em 1000 mL de gua destilada e
homogeneizar. Preparar entre 6 L e 8 L para todas as anlises. Levar e manter a soluo a cerca
de 20
o
C. Medir o OD e arejar at que OD 8 mg/L. Tomar todas as precaues para no
contaminar a gua de diluio com matrias orgnicas, matrias oxidantes ou redutoras, ou
metais. O consumo de O
2
desta soluo, durante 5 d, no deve exceder os 0.2 mg/L. A gua de
diluio assim preparada deve ser utilizada nas 8 h seguintes.
gua de diluio inoculada
Juntar a cada litro de gua de diluio uma quantidade de inculo igual a 50 mL. Manter a
gua de diluio assim obtida a, aproximadamente, 20
o
C e utiliz-la dentro de 8 h. A CBO
5
desta
gua inoculada deve estar compreendida entre 0.3 mg/L e 1 mg/L.
cido clordrico (HCl), soluo a 0.5 mol/L
Hidrxido de sdio (NaOH), soluo a 20 g/L
Sulfito de sdio (Na
2
SO
3
), soluo a 63 g/L
Deve ser preparada de fresco antes da utilizao.
Soluo-padro de glucose e cido glutmico
Secar glucose desidratada (C
6
H
12
O
6
) e cido glutmico (HOOCCH
2
CH
2
CHNH
2

COOH), a 103
o
C, durante 1 h. Pesar 15.0 mg 0.1 mg de cada produto, dissolv-los em gua,
diluir at 100 mL e homogeneizar. Preparar esta soluo imediatamente antes de a utilizar.
2.3 - Material
O material de vidro utilizado deve estar rigorosamente limpo, isento de matrias txicas ou
biodegradveis adsorvidas, e deve ser conservado ao abrigo de contaminaes. Alguns dos
materiais do mtodo podem ser vistos na figura A3.1.
Frascos de incubao: de colo estreito, e de preferncia de linha direita, de 130 mL a 350
mL de capacidade munidos de rolhas de vidro esmerilado.
No esquecer de medir o volume exacto de cada frasco antes de comear a anlise.
Estufa: regulvel a 20
o
C 1
o
C. Esta estufa de incubao tambm usada no prximo
mtodo de determinao da CBO
5
, o mtodo Oxitop

.
Recipiente para a diluio: em vidro, e de capacidade consoante o volume necessrio
para diluir as amostras.
Material necessrio para a determinao do OD: sonda e medidor de O
2
.

2.4- Procedimento
Conservao da amostra
A amostra a analisar deve ser conservada, at ao momento da anlise, em frasco
completamente cheio, hermeticamente fechado, entre 0
o
C e 4
o
C. A determinao da CBO deve
ser realizada o mais rapidamente possvel, sempre dentro das 48 h que seguem a colheita. As
amostras podem ainda ser conservadas por congelao.
10
Documento adaptado das aulas de Elementos de Engenharia do Ambiente Joo Peixoto

Neutralizao da amostra: se no se verificar a relao 6 pH 8, neutralizar a amostra
com soluo de HCl ou NaOH, conforme necessrio. Se se formar um precipitado, esse facto no
constitui qualquer problema.
Presena de cloro livre e/ou combinado: neutralizar o cloro livre e/ou combinado pela
adio dum volume adequado de soluo de sulfito de sdio. Evitar juntar soluo em excesso.
Preparao das diluies
A incubao das amostras realizada com base na informao da tabela 1. A diluio pode
ser feita numa proveta, uma vez que os volumes medidos no precisam de maior rigor.
Levar a amostra para ensaio a uma temperatura de cerca de 20
o
C e agitar num recipiente
semi-cheio, a fim de eliminar a sobressaturao eventual em oxignio.
Introduzir na proveta um volume conhecido de amostra, diluir com gua de diluio inoculada,
e misturar com cuidado para evitar a entrada de bolhas de ar. Se o factor de diluio a aplicar for
superior a 100, efectuar a diluio em duas ou mais etapas.
Se for necessrio suprimir a nitrificao, juntar um reagente apropriado.
Notas
i) Escolher uma diluio tal que, aps a incubao, a concentrao residual em OD se situe
entre 1/3 e 2/3 da concentrao inicial. Perante a dificuldade de escolher, com exactido, a taxa
de diluio conveniente, torna-se necessrio proceder a diversas diluies variando em progresso
geomtrica, e que enquadrem a diluio correspondente CBO provvel (ver tabela A3.1). As
determinaes do COT e da CQO podem dar indicaes teis neste sentido.
ii) Ter o cuidado de tomar amostras representativas da massa de gua a analisar.
Tabela 2. Diluies recomendadas para a determinao da CBO
5

CBO
5
Factor de Resultado
arredondado
mg/L diluio ao mais prximo
Aplicabilidade
3 a 6 entre 1 e 2 0.5 R
4 a 12 2 0.5 R, E
10 a 30 5 0.5 R, E
20 a 60 10 1 E
40 a
120
20 2 S
100 a
300
50 5 S,C
200 a
600
100 10 S, C
400 a
1200
200 20 I, C
1000 a
3000
500 50 I
2000 a
6000
1000 100 I
R: gua de rio E: gua residual domstica tratada biologicamente
C: gua residual domstica bruta I: efluente industrial fortemente concentrado
S: gua residual domstica clarificada ou efluente industrial fracamente concentrado
11
Documento adaptado das aulas de Elementos de Engenharia do Ambiente Joo Peixoto

Ensaio em branco e teste gua de diluio
Pode-se efectuar um teste gua de diluio no-inoculada, mas aqui ser omitido. Assim, o
branco ser o ensaio referente gua de diluio inoculada. Efectuar em duplicado, ao mesmo
tempo que a determinao da amostra.
Determinao
Para cada uma de trs diluies sucessivas, encher, com auxlio dum sifo, dois frascos de
incubao fazendo-os transbordar ligeiramente. Guardar um volume adequado de cada diluio
para preencher os frascos depois da leitura de OD, devido ao volume que transborda.
Deixar escapar as bolhas de ar aderentes s paredes dos frascos. Tapar os frascos, tendo o
cuidado de evitar o aprisionamento de bolhas de ar.
Determinar a concentrao de oxignio dissolvido (OD) no tempo zero, em cada uma das
diluies e no ensaio em branco, em cada frasco (ver, abaixo, o ensaio de controlo). Repor o
volume perdido em cada determinao. Tapar os frascos e coloc-los na estufa a 20
o
C 1

o
C, na
obscuridade, durante 5 d.
Aps 5 d, determinar de novo OD, em cada uma das diluies e no ensaio em branco, da
srie de frascos colocados na estufa, pelo mesmo mtodo utilizado para o tempo zero.
Ensaio de controlo
Para verificar a gua de diluio inoculada, o inculo propriamente dito, e a tcnica do
analista, efectuar um ensaio de controlo diluindo 20 mL da soluo de Glucose e cido glutmico
at 1000 mL, com gua de diluio inoculada, e proceder conforme descrito em 4.2.4. A CBO
5

obtida deve estar compreendida entre 180 mg/L e 230 mg/L. A CBO
5
fornecida pela gua de
diluio ser insignificante em relao ao contedo em glucose e cido glutmico. Caso o valor
caia fora daquele intervalo, necessrio verificar a gua de inoculao e, se necessrio, a tcnica
do analista.
Proceder ao ensaio de controlo simultaneamente ao doseamento da amostra.
2.5. - Expresso dos resultados
Sendo C
1
o valor de OD, em cada uma das solues de ensaio, no tempo zero; C
2
o valor de
OD, nas mesmas solues, aps 5 d; C
3
o valor de OD, na soluo do ensaio em branco, no tempo
zero; C
4
o mesmo valor, na soluo do ensaio em branco, aps 5 d; V
e
o volume de amostra,
utilizado na preparao da soluo de ensaio em questo; e, por fim, V
t
o volume total desta
soluo de ensaio (volume do frasco), comea-se por determinar, entre as solues submetidas a
ensaio, aquela que satisfaz a seguinte condio:
1 2 1 1
3
2
3
1
C C C C
A CBO
5
, expressa nas mesmas unidades de C
i
, dada pela seguinte equao:
( ) ( )
e
t
4 3
t
e t
2 1 5
V
V
C C
V
V V
C C CBO

=
Se acontecer o caso de vrias diluies carem no intervalo adequado, calcular a mdia dos
resultados obtidos para estas diluies. Se nenhum cair no intervalo, usar a melhor aproximao,
mesmo sabendo que, assim, os erros so muito mais elevados.
12
Documento adaptado das aulas de Elementos de Engenharia do Ambiente Joo Peixoto

3 CBO
5
MTODO OXITOP


3.1. - Bases do mtodo
O princpio do mtodo o mesmo, mas usa-se um equipamento que regista e armazena os
valores de presso negativa que se gera no headspace dos frascos. Pela aco microbiana a
matria orgnica consumida e h consumo simultneo de oxignio. O CO
2
que libertado
absorvido em pellets de NaOH que se colocam na parte interior da tampa dos frascos. Se o volume
de amostra for adequado sua concentrao e ao tamanho do frasco, a quantidade de oxignio
que fica armazenado no headspace do frasco suficiente para que o seu decrscimo seja
detetctado e a partir dele se possa calcular a carncia bioqumica de oxignio ao fim de 5 dias
(CBO
5
). O mtodo baseia-se ento na medio da presso no espao gasoso do frasco de
incubao, acima da amostra lquida, durante 5 d, com registo dirio automtico desse valor. O
valor da presso convertido em dgitos, entre 00 e 40. Valores entre 40 e 50 ainda so
registados, mas j so valores pouco exactos. Os dgitos, multiplicados pelo factor correcto,
permitem obter a CBO
5
, expressa em mg/L. O consumo de O
2
reflecte-se num abaixamento da
presso, que lhe proporcional. O CO
2
, resultante da oxidao do carbono, reage com NaOH,
sendo anulado o seu efeito na presso.
Este mtodo aplica-se directamente, a todas as guas cuja CBO seja inferior a 4000 mg/L.
Para valores mais elevados, deve-se diluir previamente a amostra. Na preparao da amostra, pode
ser necessrio diluir por outros motivos, como se ver mais adiante.
3.2 - Material
Incubadora, WTW Model TS 606/2
Esta incubadora (j utilizada no mtodo anterior) possui uma unidade de microcontrolo da
temperatura (TMC Temperature Microcontrol Unit), que garante temperaturas estveis de 20
o
C
1

o
C. Quando se liga o interruptor, as quatro tomadas prova de choque do interior recebem
potncia (230 V, 50 Hz). Nestas tomadas, visveis no interior da estufa na figura A4.1, ligam-se os
transformadores que alimentam os tabuleiros magnticos, sobre os quais se colocam os frascos de
incubao.
As unidades de mistura (tabuleiros magnticos), com os frascos de incubao, devem ser
colocadas de modo a no obstrurem os dois ventiladores das traseiras (coloc-los chegados para a
frente), que debitam, cada um, 163 m
3
/h.
A luz indicadora da incubadora pisca rpido (2 Hz) quando a temperatura interior est a mais
de 5
o
C de diferena da temperatura desejada, que , neste caso, a temperatura de incubao, ou
seja 20
o
C. Pisca a 1 Hz quando a diferena se situa entre 2
o
C e 5
o
C, e fica fixa quando atingida
a temperatura desejada. A luz fica fixa, habitualmente, em menos de 1 h (mximo 3 h).
Se a luz do alarme ficar acesa sinal de avaria.
Medidores Oxitop


Existem medidores (iguais quanto ao funcionamento) de cor amarela e de cor verde. Fazem a
medio da presso, por recurso a sensores electrnicos. A sua funo AUTO TEMP faz o controlo
do ajuste da temperatura, e incio automtico da medio (entre 1 h e 3 h). A temperatura, T, das
amostras deve situar-se no intervalo 15
o
C T 20
o
C. Durante os cinco dias de incubao, o
Oxitop

mede e guarda os valores da presso diariamente, e apresenta os dgitos correspondentes


para o clculo da CBO. O valor actual o que aparece no medidor, depois de se pressionar o boto
13
Documento adaptado das aulas de Elementos de Engenharia do Ambiente Joo Peixoto

M, durante cerca de 1 s. Alm do M, tm apenas mais o boto S.
Inicia-se a medio premindo os dois botes simultaneamente, durante cerca de 2 s (at
aparecer 00), apagando-se ento os valores armazenados.
Os medidores so adaptados aos frascos de incubao e neles fixados, rodando at apertar
bem. Os conjuntos so colocados nos tabuleiros magnticos, com uma barra magntica em cada
frasco. Os tabuleiros so ligados, atravs dos respectivos transformadores, s tomadas existentes
no interior da incubadora. As amostras so identificadas pela posio nos tabuleiros e com
etiquetas .
Uma pastilha de NaOH (ou equivalente noutro formato, numa quantidade de cerca de 400
mg) colocada em cada frasco, por baixo do medidor, na zona alta da fase gasosa, dentro do
pequeno saco de borracha, que tambm serve de vedante. Tem por finalidade remover todo o CO
2

que se forme no processo. No deve nunca sair do saco e ser misturado com a amostra, pois
alterava drasticamente o pH.

Figura 3. Aspecto do interior da incubadora ( esquerda) com os frascos de incubao,
montados com os medidores. So visveis as tomadas e os tabuleiros magnticos. No frasco
mais direita observa-se o saco de borracha montado no interior. No fundo da incubadora,
direita, encontram-se tambm os frascos de incubao do mtodo anterior.
3. 3 DETERMINAO DA CBO
5

Preparao da amostra
As amostras de efluentes municipais, habitualmente sem substncias txicas, e contendo sais
minerais e microrganismos suficientes, podem ser usadas sem qualquer diluio. Porm, para
garantir bons resultados, inoculam-se sempre as amostras. Para facilidade de clculo, usa-se
sempre uma diluio de , colocando igual volume de amostra e de gua de diluio inoculada,
mas pode-se optar por outras diluies se for conveniente.
Amostras industriais muito carregadas com compostos azotados, devero ser tratadas para
inibir a nitrificao. Se no for feito este tratamento, as determinaes incluem tambm a CBO
14
Documento adaptado das aulas de Elementos de Engenharia do Ambiente Joo Peixoto

devida nitrificao, e no apenas a carboncea.
Sendo necessrio inibir a nitrificao, pode-se utilizar, entre outros, o ATU, Aliltioureia (1
mg/L) ou o TCMP, 2-cloro-6-(triclorometil)piridina (10 mg/L).
Com amostras contendo substncias txicas para os microrganismos, a determinao da CBO
pode ser completamente inibida. Eventualmente, uma diluio adequada pode tornar possvel a
anlise, se a concentrao final j no tiver um efeito to intenso de inibio. partida, assume-se
que no h txicos em concentraes inibidoras, mas faz-se a diluio referida anteriormente.
Fazer um branco com 250 mL de gua de diluio inoculada, se tiver sido usada, e um ensaio
de controlo com 250 mL de soluo-padro, como descrito antes.
O volume de amostra que se deve utilizar retirado da tabela A4.1. Ter uma estimativa da
CBO
5
, baseada na CQO ou outro mtodo, facilita a escolha do volume adequado. Pode-se
considerar que a CBO
5
aproximadamente 80 % da CQO. Na dvida, praticam-se vrios volumes e
escolhe-se o mais correcto, no fim.
Tabela 3. Volumes de amostra (e factores) baseados na CBO
5
esperada

V
a

Intervalo esperado

m
L

Factor
CBO
5
/ (mg/L)

4
32
1 0 a 40

3
65
2 0 a 80

2
50
5 0 a 200

1
64
10 0 a 400

9
7
20 0 a 800

4
3.5
50 0 a 2000

2
2.7
100 0 a 4000

3.4. Clculo
Decorridos cinco dias, faz-se a leitura dos valores armazenados, premindo S, sucessi-vamente,
e esperando pelos valores.
Se surgir um F, no h valor desse dia. O smbolo LO significa baterias baixas. e
significam, pela ordem, valor demasiado alto (> 50), e demasiado baixo (< 0).
Para o clculo da CBO
5
em cada frasco, basta multiplicar o valor dos dgitos do dia 5, pelo
factor correspondente da tabela A4.1. Se a amostra tiver sido diluda (com gua sem CBO
5
),
multiplica-se ainda pelo factor de diluio. Os cinco valores permitem construir a curva de evoluo
nos cinco dias, correspondentes CBO
1
, CBO
2
e assim sucessivamente at CBO
5
. Com este
mtodo no possvel, evidentemente, determinar a CBO para tempos mais longos.
15
Documento adaptado das aulas de Elementos de Engenharia do Ambiente Joo Peixoto

Para contabilizar a CBO
5
da gua de diluio inoculada, usa-se uma equao semelhante do
mtodo por diluio, substituindo apenas (C
1
C
2
) e (C
3
C
4
) pelos valores obtidos depois de se
multiplicar os dgitos pelos valores respectivos. O restante da equao as razes dos volumes
mantm-se igual. Se notarmos o valor dos dgitos por D, o factor (tabela A4.1) por F, e
mantivermos a nomenclatura do mtodo anterior, faz-se a substituio e obtm-se a equao
seguinte:
( ) ( )
e
t
B
t
e t
AD
5
mg/L V
V
F D
V
V V
F D
CBO

=

Os ndices AD e B referem-se, respectivamente, amostra diluda com gua de diluio
inoculada e ao branco da mesma soluo de diluio.
16
Documento adaptado das aulas de Elementos de Engenharia do Ambiente Joo Peixoto




4. SEGURANA NO LABORATRIO
Nunca esquecer que o laboratrio um local eventualmente perigoso, e que as nossas aces
menos reflectidas podem trazer perigo acrescido para ns mesmos e para os colegas.
No laboratrio, usar sempre bata de proteco, no comer, no fumar, no pousar objectos
pessoais nas bancadas e no ter comportamentos desleixados. No esquecer que podem ser
contaminados por infeces e/ou parasitoses veiculadas pela gua, se menosprezarem os
cuidados bsicos de higiene na manipulao das amostras.
Com compostos volteis corrosivos e/ou txicos, usar luvas, mscara e culos de proteco.
Usar a hotte sempre que indicado. No aproximar chamas de material ou reagentes inflamveis.
Ler as especificaes sobre a perigosidade dos reagentes.

You might also like