HIDRLISIS DEL ALMIDON Y CELULOSA POR ACCION DE ACIDO
NELSY PARODI SOLANO EYRA LEVIS SALA
PROFESOR: MARTIN NUES
UNIVERSIDAD POPULAR DEL CESAR VALLEDUPAR 2013
OBJETIVOS
Al finalizar el laboratorio estaremos en capacidad de: Hidrolizar almidn vegetal por medio de accin clorhdrica. Hidrolizar celulosa por medio del acido sulfrico. Comprender e identificar la utilidad de los diferentes reactivos.
INTRODUCCION HIDRLISIS Es un hidrato de carbono complejo (C6H10O5), inodoro e inspido, en forma de grano o polvo. El almidn es el principal carbohidrato de reserva en la mayora de las plantas. En las hojas el almidn se acumula en los cloroplastos, donde es un producto directo de la fotosntesis. En los rganos de almacenamiento, se acumula en el amilo plastos, en los cuales se forma despus de la translocacin de sacarosa u otro carbohidrato provenientes de las hojas. En los vegetales, el almidn se encuentra en uno o ms granos amilceos en un pastillo. La cantidad de almidn en diversos tejidos depende de muchos factores genticos y ambientales. El almidn se acumula a la luz del da cuando la fotosntesis excede las tasas combinadas de respiracin y translocacin, despus parte de l desaparece por la noche. Se presentan dos tipos de almidn en la mayora de los granos amilceos: amilasa y amilo pectina, ambos compuestos por unidades de d-glucosa unidas por enlaces -1, 4. Las uniones -1, 4 hacen que las cadenas de almidn se enrollen en forma de hlices. La amilo pectina consta de molculas muy ramificadas, cuyas ramas se localizan entre el C-6 de una glucosa de la cadena principal y el C-1 de la primera glucosa en la cadena que forma la rama (enlaces -1, 6). Las amilasas son ms pequeas y contienen de cientos a miles de unidades de glucosa, nmero que depende de la especie y las condiciones ambientales. La formacin de almidn ocurre sobre todo por un proceso que implica la donacin repetida de unidades de glucosa provenientes de un azcar nucleotidito similar al UDPG y que se denomina difosfoglucosa de adenosina, ADPG. HIDRLISIS DE ALMIDON: La hidrlisis implica la ruptura de un enlace mediante la adicin en medio del mismo de los elementos del agua. Los polisacridos de la dieta se metabolizan mediante hidrlisis a monosacridos. La mayora de los pasos de la degradacin de almidn a glucosa pueden ser catalizados por tres enzimas distintas, si bien hay otras ms que se necesitan para completar el proceso. Las tres primeras enzimas son una -amilasa, - amilasa y almidn fosforicaza. Al parecer solo la -amilasa puede atacar grnulos de almidn intactos, por lo que cuando participan la -amilasa y la almidn fosforicaza, es probable que acten sobre los primeros productos liberados por la -amilasa. La -amilasa ataca de manera aleatoria enlaces 1,4 en las molculas de amilasa y amilopectina, al principio creando huecos al azar en los granos de almidn y liberando productos que aun son grandes. En cadenas de amilasa no ramificadas, el ataque repetido por la -amilasa produce maltosa, un disacrido que contiene dos unidades de glucosa. Sin embargo, la -amilasa no puede atacar los enlaces 1,6 localizados en los puntos de ramificacin de la amilopectina, por lo que la digestin de amilopectina cesa cuando an quedan dextrinas ramificadas con cadenas de longitud corta. Muchas -amilasas son activadas por Ca+, lo cual es una de las razones por las que el calcio es un elemento esencial. La -amilasa hidroliza al almidn en -maltosa; la enzima acta primero solo sobre los extremos no reductores. La -maltosa cambia con rapidez, por muta rotacin, para formar las mezclas naturales de ismeros y . La hidrlisis de amilasa por la -amilasa es casi completa, pero la degradacin de amilo pectina es incompleta porque no son atacados los enlaces de los puntos de ramificacin. La actividad de ambas amilasas implica la incorporacin de una molcula de H2O por cada enlace roto, por lo que son enzimas hidrolasas. Las reacciones hidrolticas no son reversibles, de modo que no se pueden detectar sntesis de almidn por amilasas. Las amilasas estn diseminadas en diversos tejidos pero son ms activas en las semillas que estn germinando, ricas en almidn. Es probable que la -amilasa tenga ms importancia que la -amilasa para la hidrlisis de almidn. Gran parte de la -amilasa se localiza dentro de los cloroplastos, muchas veces unida a los granos de almidn que atacara. Acta tanto en el da como por la noche aunque, por supuesto, durante la luz de da hay produccin neta de almidn por la fotosntesis. La amilopectina solo es degradada parcialmente por la accin del almidn fosforilasa. La reaccin procede de manera consecutiva a partir del extremo no reductor de cada cadena principal o cadena ramificada hasta a unos residuos de glucosa de las uniones -1,6 de las ramificaciones, por lo que de nuevo que dan dextrinas. La amilasa, que tiene pocas ramificaciones, se degrada casi por completo, por eliminacin repetida de unidades de glucosa a partir del extremo no reductor de la cadena. El almidn fosforilasa est ampliamente distribuido en la planta y a veces resulta difcil determinar que enzima digiere la mayor parte del almidn en las clulas de inters.
PROCEDIMIENTO
Tomamos un trozo de yuca (20-30gr) la rayamos y posteriormente hicimos una mezcla con la ayuda de 100ml de agua. Agitamos vigorosamente y estrujamos a travs de varias capas de algodn en un vaso precipitado. El sedimento retenido en la gasa lo examinamos en el microscopio antes y despus de agregarle una gota de Lugol. El filtrado lo lavamos por decantacin dos veces con agua. El sedimento del filtrado lo disolvimos en 2ml de agua. RESULTADO: Despus de rayada la yuca se coloc en un Erlenmeyer y se le agrego 200 ml de agua luego se procedi a mezclarla muy bien hasta tener que la yuca ya rayada soltara los solventes de almidn. Una vez tenido esto procedimos a colarla con una tela de gasa para separar el lquido de la masa y as poder obtener el almidn de la yuca. Luego tomamos una muy pequea muestras la colocamos en un portaobjeto y la cubrimos con otro lo llevamos a observarlo al microscopio la se observaron dos capas una ms oscuras que otra la ms oscura es llamada AMILASA y la otra AMILOPECTINA
HIDROLISIS Agarramos yuca rayada la disolvimos con agua luego con un algodn absorbemos y exprimimos en un beaker pequeo luego esperamos a que se descante. En 2 tubos de ensayo adicionamos= TUBO No 1= adicionamos 1 ml de HCL y 10 ml de almidn de yuca TUBO No 2= Adicionamos 1 ml de HCL y 10 ml de almidn de laboratorio Luego sometimos al bao mara
Del primer tubo (almidn de yuca)se le agrego 1ml de HCL luego se calent por 10 minutos y se dividi en 2 tubos. En el primer tubode almidn de yuca ms 3 ml de benedit=esta solucin se puso de color morado En el segundo tubo de almidn de yuca adicionamos 5m de Lugol=Esta solucin tomo una coloracin azul
Del segundo tubo (almidn de laboratorio) se calent por 5 minuto luego se dividi en 2 tubos. Al primer tubo 2gotasde lugoly se form un anillo de color negro. En el segundo tubo adicionamos hidrxido de sodio y benedit cuando se le agrego el benedit comenz a burbujear y quedo color verde.
REACCION DE YODO En 3 tubo de ensayos numerados vertimos= 1 ml de agua destilada en el N 1 En el N 2= 1 ml de solucin de almidn 0.1M En el N 3 =1 ml de solucin de almidn en el laboratorio. A cada uno de los tubos adicionamos 2-3 gotas de reactivo de Lugol. Observamos y comparamos. Luego calentamos los tubos al mechero y observamos, enfriamos nuevamente observamos y comparamos
RESULTADO: Al calentar agua destilada + Lugol= amarrillo aceitoso luego se calent y quedo igual.
Al calentar la solucin de almidn de yuca +Lugol = se puso de color morado oscuro y en la parte de abajo se puso un color blanco lechoso luego calentamos y en el fondo se formun gel de 2 colores transparente y negro debido a la milopeptina y en la parte superior quedo totalmente liquido debido a la milosa la cual despus que calentamos quedo transparente luego dejamos reposar y quedo morado
Al calentar la solucin de almidn de laboratorio + Lugol observamos que la coloracin al ebullir tomo una coloracin azul oscuro
El almidn se torne azul con el yodo Porque el yodo entra a la estructura helicoidal del almidn, y al unirse dentro de de estas cadenas Provoca un efecto de color de los enlaces en el rango del espectro de la luz de tonos naranjas, Que reflejados a nuestros ojos lo percibimos como color azul. En la prctica de propiedades de los carbohidratos, cuando se hace la hidrlisis del almidn se debe la diferencia de comportamiento del almidn con la solucin de Lugo en caliente y en fri. Porque almidn es un glcidos, cuya frmula es compleja, al calentarlo las molculas adquieren energa, y se adquieren mayor apertura entre las mismas, y es aqu donde entra el yoduro de potasio, CREANDO un compuesto de INCLUSION, no otra molcula distinta, al meterse entre los tomos el yoduro de potasio se adquiere el color, y por supuesto al ya no haber calor, las aperturas se cierran y e KI sale, y desapareciendo el color.
PREGUNTAS 1. Cual es el papel del benedit y el lugol en el almidon 2. Explique el proceso del metabolismo del glucogeno Las principales reservas de glucgeno de los vertebrados se encuentran en el msculo esqueltico y en el hgado. La degradacin de estas reservas en energa utilizable, o movilizacin del glucgeno, requiere las rupturas fosforolticas secuenciales de los enlaces alfa 1-4, catalizadas por la glucgeno fosforilasa. En las plantas, el almidn se moviliza de manera similar por la accin de la fosforilasa del almidn. Ambas reacciones liberan glucosa 1- fosfato a partir de los extremos no reductores del polmero de glucosa. La reaccin de ruptura est ligeramente desfavorecida en condiciones estndar pero las concentraciones intracelulares relativamente elevadas de fosfato inorgnico hacen que esta reaccin opere in vivo casi exclusivamente en la direccin de degradacin, en vez de en la direccin de sntesis.
Aligual que la alfa-amilasa, las fosforilasas no son capaces de romper ms all de los puntos de ramificacin alfa 1-6, de hecho, la ruptura se detiene a los cuatro residuos de glucosa de un punto de ramificacin. El proceso desramificador requiere la accin de una segunda enzima llamada "desramificante" (alfa1-4 glucantransferasa), la cual cataliza dos reacciones. En primer lugar, est la actividad transferasa, en la que la enzima elimina tres de los residuos de glucosa restantes y transfiere este trisacrido intacto al extremo de alguna ramificacin externa. A continuacin, el residuo de glucosa que queda unido an a la cadena por un enlace alfa 1-6 se rompe por la actividad alfa 1-6-glucosidasa, que posee la misma enzima desramificadora. Ello da lugar a una molcula de glucosa libre y una ramificacin de tres residuos de glucosa con enlaces alfa 1-4, esta ramificacin que ha quedado ahora expuesta puede ser atacada por la fosforilasa. El resultado final de la accin de estas dos enzimas es la degradacin completa del glucgeno a glucosa 1- fosfato (el producto final de la glucosa). La importancia de almacenar energa de los hidratos de carbono en forma de un polmero altamente ramificado puede radicar en la necesidad del animal de generar energa de manera muy rpida, tras los estmulos apropiados. La glucgeno fosforilasa ataca los enlaces exoglucosdicos, es decir, rompe de manera secuencial a partir de los extremos no reductores. Cuantos ms extremos de este tipo existen en un polmero con mayor rapidez puede movilizarse. Para metabolizarse mediante la gluclisis, la glucosa 1- fosfato producida por la accin de la fosforilasa debe convertirse en glucosa 6-fosfato. Esta isomerizacin la lleva a cabo la fosfoglucomutasa. Desde el punto de vista de su mecanismo, esta reaccin es similar a la de la fosfoglicerato mutasa, excepto que en la fosfoglucomutasa hay una fosfoserina en vez de una fosfohistidina en la enzima que reacciona con el sustrato. La serina que lleva el grupo fosfato es excepcionalmente reactiva, como indica el hecho de que la fosfoglucomutasa, como la quimotripsina y otras proteasas de serina, se inhibe de forma irreversible por el diisopropilfluorofosfato. Ambos procesos dan lugar a formas fosforiladas de glucosa,que no pueden salir de las clulas hepticas. La conversin de glucosa libre se realiza mediante la accin de la glucosa 6-fosfatasa, que hidroliza la glucosa- 6.fosfato a glucosa y ortofosfato. Esta enzima est presente tambin en el rin y en el intestino. En cambio, el glucgeno muscular se utiliza principalmente como fuente de glucosa-6-fosfato para el catabolismo en las clulas musculares. En consecuencia, en el msculo no hay glucosa-6-fosfatasa, como tampoco la hay en el cerebro, que depende casi exclusivamente de la glucosa de la sangre como principal fuente de energa. Ello garantiza que la glucosa-6-fosfato formada a partir del glucgeno no difunda hacia el exterior de estas clulas, puesto que, como se ha indicado antes, los azcares fosfato no atraviesan con facilidad las membranas celulares.(7) 1.3 Sntesis del Glucgeno Heptico:
3.Como estan constituido los hemopolisacaridos Heteroplisacarido homopolisacarido. El almidon, el glucogeno y la celulosa son homopolisacaridos, ya que estan formados por cientos de moleculas de monosacaridos de un solo tipo, la glucosa, unidas por enlaces glicosididos.
heteropolisacarido. El acido hialuronico, formado por miles de unidades de N-acetil glucosamina que se alternan con unidades de acido glucuronico, es un ejemplo de heteropolisacarido.
CONCLUSION
Los polisacridos son la forma biolgica primaria de almacenamiento y consumo de energa. Otras formas son las grasas y, en menor medida, las protenas. Los glcidos son compuestos formados en su mayor parte por tomos de carbono e hidrgeno y en una menor cantidad de oxgeno. Los glcidos tienen enlaces qumicos difciles de romper llamados covalentes, mismos que poseen gran cantidad de energa, que es liberada al romperse estos enlaces. Una parte de esta energa es aprovechada por el organismo consumidor, y otra parte es almacenada en el organismo. En la naturaleza se encuentran en los seres vivos, formando parte de biomolculas aisladas o asociadas a otras como las protenas y los lpidos. El cuerpo humano descompone o transforma la mayora de los carbohidratos en glucosa, que es absorbida por el flujo sanguneo. Conforme el nivel de la glucosa sube en la sangre, el pncreas libera una hormona que se llama insulina. La insulina es necesaria para trasladar la glucosa de la sangre a las clulas, donde sirve como fuente de energa.
BIBLIOGRAFIA Norbert tiets, qumica clnica 2 ediccion editorial interamericana. David.T. plumer introduccin a la bioqumica practica 1 edicin: Mc Graw hitl