HEMOGRAMA DE SCHILLING

UNIVERSIDAD NACIONAL MAYOR DE SAN MARCOS

Facultad de Farmacia y Bioqumica
Escuela Acadmico Profesional de Farmacia y Bioqumica
Departamento Acadmico de Farmacologa

ASIGNATURA:
Anlisis Clnico I

DOCENTE:
Dr. Juan Manuel Parreo Tipian

GRUPO:
Lunes (11 am-3 pm)

ALUMNO:
Ever Alexander Rodrguez Castro

CODIGO:
10040131
2014-1

HEMOGRAMA DE SCHILLING 14 de abril de 2014

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INTRODUCCION

En medicina el hemograma o CSC (conteo sanguneo completo) o biometra hemtica es uno de los
elementos diagnsticos bsicos. Es un cuadro o frmula sangunea en el que se expresan el nmero,
proporcin y variaciones de los elementos sanguneos.
El hemograma, junto al recuento diferencial manual de los diferentes leucocitos o frmula
leucocitaria, es una de las pruebas diagnsticas ms solicitadas, dado que forma parte del estudio
inicial de la gran mayora de pacientes y tiene una gran utilidad diagnstica no slo en las
hemopatas, sino tambin en muchas otras enfermedades.
(1)

La frmula leucocitaria se define como el recuento porcentual de las diferentes subpoblaciones
leucocitarias. El hemograma incluye la frmula leucocitaria y la determinacin de otras magnitudes
celulares sanguneas, como el recuento de leucocitos, hemates y plaquetas, la concentracin de
hemoglobina, hematcrito y volumen medio de los hemates, entre otras. La determinacin de los
parmetros hematolgicos bsicos mediante contadores hematolgicos especializados, junto al
examen morfolgicode los elementos sanguneos en sangre perifrica, son de gran utilidad para la
deteccin de alteraciones cuantitativas y cualitativas de estas clulas sanguneas, lo que contribuye al
diagnstico de enfermedades hematolgicas y no hematolgicas.
(1)

Clsicamente se considera que un hemograma debiera incluir: el recuento de eritrocitos, la
hemoglobina, el hematocrito, los ndices corpusculares, el estudio de la morfologa eritrocitaria y,
adems, el recuento de leucocitos, la frmula leucocitaria, el recuento plaquetario, la morfologa
plaquetaria. Otros ndices que pueden incluirse son: recuento de reticulocitos, el ndice ictrico y la
velocidad de eritrosedimentacin.
(2)

En conclusin frmula leucocitaria tiene por objetivo determinar los porcentajes de las distintas
clases de leucocitos normales y anormales en la sangre. A partir de los porcentajes puede incluso
calcularse el nmero real de cada clase de leucocitos por mm
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de sangre (valor absoluto),
conocindose el total de leucocitos.
(3)






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OBJETIVOS

Conocer el fundamento y los valores normales del hemograma de Schilling y su
procedimiento.
Realizar de forma correcta las tinciones a los frotis de sangre.
Identificar los elementos formes que se encuentran en un frotis de sangre.



MARCO TEORICO

El trmino hemograma tiene su origen en la clasificacin de los neutrfilos en subgrupos en funcin
del nmero de lobulaciones realizada por J. Arneth en el ao 1904. Posteriormente, en 1930 J.
Schilling defini la desviacin a la izquierda del hemograma como un aumento de los neutrfilos
juveniles o en banda, as como el procedimiento para el recuento de las diferentes subpoblaciones
leucocitarias. Por ello, la frmula leucocitaria realizada a 100 elementos se conoce con el trmino
hemograma de Schilling. A partir de 1980, con la llegada de los analizadores hematolgicos
automatizados, que determinan otras magnitudes importantes de las clulas sanguneas
(concentracin de las diferentes clulas sanguneas y de hemoglobina [Hb], hematcrito [Hto],
volumen corpuscular medio [VCM], etc.), se ha denominado hemograma a toda la informacin que
proporcionan estos instrumentos
La frmula leucocitaria se define como el recuento porcentual de las diferentes subpoblaciones
leucocitarias. El hemograma incluye la frmula leucocitaria y la determinacin de otras magnitudes
celulares sanguneas, como el recuento de leucocitos, hemates y plaquetas, la concentracin de
hemoglobina, hematcrito y volumen medio de los hemates, entre otras. La determinacin de los
parmetros hematolgicos bsicos mediante contadores hematolgicos especializados, junto al
examen morfolgico de los elementos sanguneos en sangre perifrica, son de gran utilidad para la
deteccin de alteraciones cuantitativas y cualitativas de estas clulas sanguneas, lo que contribuye al
diagnstico de enfermedades hematolgicas y no hematolgicas
Clsicamente se considera que un hemograma debiera incluir: el recuento de eritrocitos, la
hemoglobina, el hematocrito, los ndices corpusculares, el estudio de la morfologa eritrocitaria y,
adems, el recuento de leucocitos, la frmula leucocitaria, el recuento plaquetario, la morfologa
plaquetaria. Otros ndices que pueden incluirse son: recuento de reticulocitos, el ndice ictrico y la
velocidad de eritrosedimentacin.
A travs del tiempo, el hemograma ha sido objeto de mltiples modificaciones en cuanto a los
parmetros que lo componen, la forma de obtenerlos, los grados de precisin y de exactitud y la
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manera de interpretarlo. Para una mejor utilizacin de los parmetros que el hemograma aporta es
de vital importancia conocer el desarrollo que ha acompaado a la prueba y el laboratorio clnico
debe permanecer atento al desarrollo tecnolgico para incorporar los aspectos de mayor relevancia
desde el punto de vista clnico, como una herramienta de rutina que le permita tener pruebas cada
vez ms exactas, ms precisas, a un costo razonable y, sobretodo, de mayor utilidad clnica.
El hemograma como prueba de laboratorio permite tener una visin global de la homeostasis del
sistema hematopoytico, de ah la importancia de que se evalen el mayor nmero de parmetros y,
sobretodo, de que stos tengan la mayor precisin y exactitud posibles, caractersticas que
fcilmente se pueden lograr gracias a los grandes avances en el laboratorio de hematologa mediante
la incorporacin de autoanalizadores de hematologa de alta eficiencia.
Los valores normales en los recuentos de Schilling en adultos segn la OMS son:

ALTERACIONES CUANTITATIVAS DE LAS CLULAS SANGUNEAS
Tradicionalmente, el recuento de las clulas sanguneas se realizaba de forma manual en una cmara
cuenta glbulos adecuada, siendo la cmara de Neubauer la ms utilizada, a partir de una muestra
diluida de sangre. En la actualidad, la mayora de los recuentos celulares se realizan mediante
aparatos automticos. Con la automatizacin, se ha conseguido una rapidez y fiabilidad mayores de
los valores cuantitativos de las clulas sanguneas.
La mayora de autoanalizadores utilizan la citometra de flujo para determinar los recuentos celulares
y se basan en la medida del tamao u otras propiedades fsicas de las clulas sanguneas
resuspendidas en un medio lquido de acuerdo con determinados principios, como la impedancia o
resistencia elctrica y la dispersin de luz o campo oscuro. Los resultados del recuento de hemates
se expresan en x 1012/l y del recuento de leucocitos y plaquetas x 109/l. Los valores normales en
adultos se expresan:
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LEUCOCITOSIS
Las causas ms frecuentes del hallazgo de una leucocitosis son los procesos infecciosos e
inflamatorios agudos y crnicos. Determinadas infecciones muy graves, como neumona, meningitis
o tuberculosis, pueden incluso dar lugar a lo que se denomina como reaccin leucemoide. En una
reaccin leucemoide se observa: una leucocitosis (cifra de leucocitos superior a 20 x 109/l), un
aumento del nmero absoluto de neutrfilos y una desviacin a la izquierda y/o mielemia (presencia
en sangre perifrica de precursores granulocticos, como metamielocitos, mielocitos, promielocitos,
e incluso algn elemento blstico).
Una reaccin leucemoide puede deberse a infecciones bacterianas muy graves, a neoplasias e incluso
a anemias hemolticas.
Debe realizarse el diagnstico diferencial entre las reacciones leucemoides y los sndromes
mieloproliferativos crnicos, especialmente con la leucemia mieloide crnica (LMC). Las reacciones
leucemoides son reversibles y, a diferencia de la LMC, el estudio citogentico no muestra la
translocacin entre los cromosomas 9 y 22 o t(9;22). En un sndrome leucoeritroblstico, adems de
la neutrofilia y la mielemia en sangre perifrica, se observa la presencia de eritroblastos.
Las infecciones virales, como la mononucleosis infecciosa, tambin son causa de leucocitosis,
acompaada de linfocitosis. Procesos inflamatorios agudos o crnicos, entre los que destacan la
artritis reumatoide juvenil, la periarteritis nudosa y la fiebre reumtica, son asimismo causa de
leucocitosis, pero en estos casos se acompaa de neutrofilia. Las enfermedades hematolgicas
agudas (leucemias) o crnicas (sndromes mieloproliferativos) son tambin causa de leucocitosis. En
las leucemias agudas, la leucocitosis suele acompaarse de plaquetopenia y/o anemia, mientras que
en las hemopatas crnicas suele observarse una trombocitosis. La leucocitosis tambin se asocia a
otras neoplasias hematolgicas, como el mieloma mltiple o el linfoma de Hodgkin, o no
hematolgicas, como por ejemplo los carcinomas epiteliales.
LEUCOPENIA
El hallazgo de una leucopenia, o disminucin del nmero de leucocitos, cuando es secundaria a una
insuficiencia medular grave o aplasia se acompaa adems de anemia y plaquetopenia. La
insuficiencia medular puede ser idioptica o secundaria (leucemia, neoplasia). Cuando la insuficiencia
medular afecta nicamente a la granulopoyesis se denomina neutropenia y se manifiesta por una
disminucin absoluta de la cifra de granulocitos neutrfilos en sangre perifrica (<2 x 109/l). En la
agranulocitosis la cifra de granulocitos en sangre perifrica es inferior a 0,5 x 109/l.
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Una leucopenia aislada constituye un signo de alarma, ya que puede ser el primero en manifestarse
en una enfermedad hematolgica maligna (como p. ej., una leucemia o un sndrome
mielodisplsico).
AUMENTO DE UNA SUBPOBLACIN LEUCOCITARIA
Los leucocitos se dividen en granulocitos o polimorfonucleares (neutrfilos segmentados y no
segmentados, eosinfilos y basfilos) y clulas mononucleadas (linfocitos y monocitos). Los
neutrfilos segmentados estn elevados en sangre perifrica (neutrofilia) en determinadas
situaciones patolgicas, como infecciones bacterianas, sndromes mieloproliferativos crnicos (LMC
o policitemia vera), enfermedades autoinmunitarias, neoplasias, necrosis hstica, neutrofilia
congnita (excepcional), neutrofilia transitoria despus de la esplenectoma o de una intensa
hemorragia, o neutrofilias medicamentosas.
EOSINOFILIA
Hay eosinofilia cuando la cifra de eosinfilos en sangre perifrica es superior a 0,5 109/l. Los
eosinfilos circulan durante unas 6 h en sangre perifrica antes de migrar hacia los tejidos. Fagocitan
microorganismos y desempean un papel relevante en la defensa contra ciertos parsitos. Los
eosinfilos tambin estn implicados en las reacciones alrgicas. Otras causas de eosinofilia son las
parasitosis, las enfermedades de la piel, la ingesta de determinados medicamentos y las neoplasias,
como el linfoma de Hodgkin u otros linfomas, o sndromes mieloproliferativos crnicos, como por
ejemplo la LMC o la policitemia vera. El sndrome hiperseosinoflico se acompaa de una eosinofilia
persistente sin que haya una causa que la justifique.
BASOFILIA
Los basfilos circulan en sangre perifrica en pequeo nmero (0-1%) y despus migran a los tejidos.
Estn implicados en respuestas inflamatorias y alrgicas. El trmino basofilia se refiere a una cifra
total de basfilos circulantes en sangre perifrica superior a 0,15 x 109/l. La basofilia se asocia con
frecuencia a un sndrome mieloproliferativo crnico y, muy especialmente, a la LMC.
LINFOCITOSIS
El hallazgo de una linfocitosis (aumento de la cifra de linfocitos en sangre perifrica superior a 4,5 x
109/l) puede ser fisiolgica en la infancia, o debida a infecciones bacterianas o virales.
La leucemia linftica crnica (LLC) es tambin una causa de linfocitosis (> 5 x 109/l). Los leucocitos
suelen registrar cifras superiores a 10 x 109/l y, en ocasiones, pueden ser muy elevados (300 x 109/l).
La Hb y las plaquetas pueden ser normales o estar disminuidas. La anemia, cuando existe, suele ser
normoctica y normocrmica.
MONOCITOSIS
La monocitosis (cifra de monocitos en sangre perifrica superior a 0,8 x 109/l) puede ser fisiolgica
en el recin nacido, y es muy frecuente en la fase de recuperacin hematopoytica despus del
tratamiento con agentes antineoplsicos. La monocitosis tambin puede deberse a infecciones
bacterianas de tipo crnico, linfoma de Hodgkin, enfermedades del colgeno, como la artritis
reumatoide, o el lupus eritematoso sistmico.
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En la leucemia mielomonoctica crnica la cifra absoluta de monocitos en sangre perifrica es
superior a 1 x 109/l.
CLULAS ATPICAS
La presencia de clulas atpicas en sangre perifrica es detectada por los autoanalizadores, que
muestran las alarmas correspondientes. En los autoanalizadores que utilizan la tincin de
peroxidasas para diferenciar las clulas sanguneas, las clulas atpicas corresponden a las de tamao
grande y negativas para dicha tincin (large unstained cells o LUC). En esta subpoblacin se engloban
los linfocitos reactivos, las clulas plasmticas y las clulas blsticas peroxidasa negativas.
Se consideran valores elevados de LUC los superiores a 5%, que cuando se asocian a citopenia/s en
sangre perifrica constituyen signos de alarma. La observacin de leucocitosis y plaquetopenia, junto
a un aumento de las LUC en un hemograma, indica que probablemente el paciente presenta una
enfermedad hematolgica. En los casos en los que se detecta un aumento aislado del porcentaje de
las LUC, ste probablemente se debe a un dficit adquirido de peroxidasas granulocitarias, lo que se
confirmar mediante la observacin de las clulas sanguneas al microscopio, que en estos casos
pondr de manifiesto la ausencia de clulas atpicas.


FUNDAMENTO DE LOS PROCEDIMIENTOS

1. PREPARACIN DEL FROTIS DE SANGRE :

Un frotis de sangre es un mecanismo cientfico que consiste en el extendido de una gota de
sangre en la superficie de un portaobjetos o de un cubreobjetos, con el fin de analizarla
posteriormente. Es ms adecuado emplear sangre que an no ha estado en contacto con el
anticoagulante, pues este podra alterar los resultados (algunos anticoagulantes tienden a
deformar las clulas de la sangre).
(6)


La fidelidad de la informacin obtenida de ellos, depende en gran parte de la calidad de las
extensiones en el frotis. Estas no deben ser demasiado gruesas porque las clulas se
amontonaran y no podran ser reconocidas ni diferenciarse, en especial los monocitos de los
linfocitos, ni demasiado delgados porque las clulas se deformaran, distorsionaran y
destruiran, adems casi todos los polimorfonucleares y monocitos se encontraran en los
bordes y al final de la extensin. Por eso los frotis de sangre deben ser bien nivelados.
(7)


Extensin en el portaobjetos: Para llevar a cabo las extensiones en portaobjeto se coloca una
gota de sangre de 3 a 4 mm de dimetro, a unos 2 o 3 cm de uno de los extremos del
portaobjetos este se coloca en una superficie plana y lisa. Con el borde de otro portaobjeto,
con el que se toca la gota de sangre, la cual se desliza por capilaridad a todo lo largo del
canto de dicho portaobjeto y con un movimiento rpido y uniforme, en un ngulo de 45
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grados se desliza el portaobjetos dejando una capa de sangre en la superficie del otro. El
espesor del extendido debe ser delgado.
(6)




2. TINCIN DEL FROTIS SANGUNEO - TINCIN DE WRIGHT
La tincin de Wright se utiliza en la tincin de frotis de sangre o de mdula sea. Las
soluciones son para uso diagnstico in vitro. Es una tcnica de tincin derivada del mtodo
de Romanowsky que se utiliza principalmente para el coloreo de muestras de frotis
sanguneos. Permite diferenciar cualitativamente y cuantitativamente los principales
elementos formes de la sangre.
(7)


Mtodo operatorio:
- Colocar el frotis de sangre completamente secos, en el portalamina.
- Cubrir el portaobjetos con el Reactivo de Wright.
- Tras un minuto, aadir un volumen igual de agua destilada y mezclar bien soplando con
cuidado sobre el portaobjetos.
- Tras 6 minutos aclara bien con agua de cao y secar al aire.
- Llevar la lamina a la platina del microscopio y observar con objeto de 100X, colocar una
gota de aceite de inmersin.

Fundamento de la coloracin:
(8)

El colorante de Wright contiene un colorante aninico (eosina) y un colorante
catinico (azul de metileno) ambos disueltos en metanol. Estos colorantes se
encuentran en estado no ionizado mientras se mantienen en solucin de alcohol
metlico (Dada la presencia de metanol en la composicin del colorante, no es
necesario un paso previo de fijacin antes de la coloracin).
Al aadir el agua destilada se ionizan y se unen selectivamente a los constituyentes
celulares precipitando como sales insolubles.
Los componentes celulares de naturaleza aninica (cida) se unen selectivamente a
los tintes catinicos tindose en variados tonos de azul. Estos componentes son
llamados BASFILOS (ADN, mitocondrias, ribosomas y citoplasma de clulas ricas en
ARN).
Los componentes celulares de naturaleza catinica (bsico) se unen selectivamente
al tinte cido eosina, tindose en variados tonos de naranja y rojo. A estos
elementos se les denomina ACIDFILOS o EOSINFILOS. Este es el caso de la
hemoglobina y de las protenas contenidas en las granulaciones de los EOSINFILOS.
Los componentes que tienen afinidad por ambos tipos de colorantes se denominan
NEUTRFILOS y se tien de variados tonos de violeta
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ELEMENTOS FORMES EN FROTIS COLOREADO
El estudio de los elementos formes de la sangre tiene gran importancia clnica, pues la morfologa, el
nmero y las proporciones de los diversos tipos celulares), son indicadores del estado de salud. Por
esta razn la hematologa citolgica se mantiene vigente, y es imprescindible en el examen
sistemtico de todo individuo.
El conjunto de datos cuantitativos y cualitativos se designa con el nombre de hemograma; sus
valores normales varan con el sexo, la edad, el estado fisiolgico, la ubicacin geogrfica del
individuo, etc.
Las caractersticas cualitativas se establecen a partir de la observacin al microscopio de preparados
(frotis), teidos con la tcnica de May-Grnwald Giemsa o Wrigth que permite reconocer la mayora
de los detalles morfolgicos de hemates, leucocitos y plaquetas.
(9)

MICROGRAFA NOMBRE CANTIDAD CARACTERSTICAS
ERITROCITOS

Glbulo
rojo,
hemates o
eritrocito

Los glbulos rojos (eritrocitos o hemates)
son clulas muy diferenciadas que han
perdido durante su maduracin todos los
organitos.
Los eritrocitos de los mamferos presentan la
forma de discos bicncavos y de perfil se
presentan como cuerpos alargados con
extremos redondeados. El tamao en estado
fresco es de 6 a 8 m y en los frotis
disminuye a 7 m, debido a la deshidratacin
que sufren.
LEUCOCITOS

Linfocito 25-35%
Generalmente son clulas pequeas que
contienen un ncleo circular oscuro y un
escaso citoplasma azul claro. Existen dos
tipos:
Linfocitos T: Se diferencian en el timo y
circulan en la sangre perifrica, donde ellos
son los principales artfices de la inmunidad
celular. Poseen funciones como ayudadores
(CD4) supresores (CD8), modulando la
respuesta a travs de sus efectos sobre otras
clulas.
Linfocitos B: se diferencian en la mdula
sea y son los principales encargados de la
respuesta humoral a travs de la produccin
de anticuerpos. Una vez se colocan en
contacto con un antgeno se diferencian en
clulas plasmticas que sintetizan
anticuerpos.
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Monocito 4-8%
Son las clulas circulantes de mayor tamao.
Poseen un ncleo excntrico en forma de U
en forma arrionada. Son los precursores
del sistema mononuclear fagoctico, que
incluye macrfagos (histiocitos),
osteoclastos, macrfagos alveolares, clulas
de Kupfer en el hgado y la microglia en el
sistema nervioso central.

Eosinofilo 0.5-4%
Tienen un ncleo bilobulado y poseen
granulaciones acidoflicas que contienen
enzimas hidrolticas y peroxidasa que son
liberadas en las vacuolas fagocticas.
Aumentan en infecciones parasitarias y
procesos alrgicos principalmente.

Basofilo 0.5%
Poseen un ncleo bilobulado y grandes
Grnulos esfricos basoflicos y
metacromticos dados por heparina e
histamina. Liberan adems aminas
vasoactivas y sustancia de reaccin lenta de
la anafilaxia.

Neutrfilo 55-65%
Poseen un ncleo multilobulado (3-5
lobulaciones), y grnulos azurfilos
lisosomas) en su citoplasma que contienen
enzimas hidrolticas, lisozyma y
mieloperoxidasa las cuales le permiten
actuar en la fase aguda de la inflamacin.
PLAQUETAS

Plaquetas
150 000 a 350
000
plaquetas/mm3
Las plaquetas sanguneas son corpsculos
anucleados en forma de discos
biconvexos, redondos u ovales, cuyo
dimetro est comprendido entre 1.5-3
m. Vistos de perfil tienen forma de bastn
De clulas gigantes llamadas megacariocitos,
originados en la mdula sea. Su principal
funcin es la creacin y propagacin del
cogulo.
(10)(11)











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REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

1. Anna Merino Valores normales del hemograma: cundo hay que alarmarse? Servicio de
Hemoterapia-Hemostasia. Hospital Clnic (IDIBAPS). Universidad de Barcelona. Barcelona.
Espaa.
2. Vives Corrons JL, Aguilar JL. Manual de tcnicas de laboratorio en hematologa. Barcelona:
Masson; 2002.
3. PIAGGIO R. LOS ELEMENTOS FIGURADOS DE LA SANGRE NORMAL Y PATOLGICA CAP 3 PAG
31-48
4. Zandecki M, Genevieve F, Gerard J, Godon A. Spurious counts and spurious results on
haematology analysers: a review. Part II: white blood ells, red blood cells, haemoglobin, red
cell indices and reticulocytes. Int Jnl Lab Hem. 2007;29:21-41.
5. Bain BJ. Blood Cells: A Practical Guide. 4th ed. Oxford: Blackwell Publishing; 2006
6. Jacqueline H. Carr, Bernadette F. Rodak. Atlas de Hematologia Clinica. 3
era
Edicion. Buenos
Aires. Medica Panamerica. 2009
7. Faustina Rubio Campal, Benjamn Garca Espinosa, Manuel Carrasco Carrasco. Fundamentos
y tcnicas de anlisis hematolgicos y citolgicos. 1era Edicin. Madrid. Paraninfo, S.A. 2004
8. Bernadette F. Rodak. Hematologa fundamentos y aplicaciones clnicas. 2
da
Edicin. Buenos
Aires. Medicina Panamericana, 2004.
9. Sangre y tejido hematopoytico. Galera de histologa. Pdf. Encontrado en:
http://94.23.146.173/ficheros/f9774ff542e55682817f1beeebcc2754.pdf
10. Departamento de ciencias fisiolgicas. Guas de laboratorio. Sangre y lquidos. 2012.
Encontrado en: http://med.javeriana.edu.co/fisiologia/nguias/other/sangreall.pdf
11. CLULAS SANGUNEAS. Prctica 3. Universidad Mariano Glvez. Facultad de Ciencias Mdicas
y de la Salud. Carrera de Mdico y Cirujano. Encontrado en:
http://microinmuno.files.wordpress.com/2011/07/3-cc3a9lulas-sanguc3adneas.pdf