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La gentica del sistema de grupo sanguneo Rhesus

El factor Rh es clnicamente la ms importante sistema de grupos sanguneos a base de protenas.
Con 49 antgenos de manera descrito hasta el momento, es el ms grande de los 29 sistemas de
grupos sanguneos. El nmero inusualmente grande de antgenos Rhesus es atribuible a su base
gentica compleja. Los antgenos son situado en dos protenas Rhesus - RhD y RHCE - y son
producido por las diferencias en sus secuencias de protenas. En CD nomenclatura, se denominan
CD240D y CD240CE. A diferencia de las protenas de otros grupos sanguneos, protenas Rhesus se
expresan slo en las membranas de las clulas rojas de la sangre y su precursor inmediato.
Rhesus es el segundo en su importancia clnica solamente al Grupo sanguneo ABO. Desde la
introduccin del posparto profilaxis anti-D a finales de 1960, y la profilaxis pre y posparto
combinada anti-D a principios del 1990, la incidencia de la enfermedad hemoltica en los recin
nacidos debido a aloinmunizacin se ha reducido en ms de un 90%.hasta el 1% de todas las
mujeres embarazadas tienen clnicamente significativa anticuerpos anti-eritrocitos.
Anti-D sigue siendo la principal indicacin de la fototerapia o exanguinotransfusin en recin
nacidos y embarazadas las mujeres que son D muestran negativo un promedio superior
incidencia.
Los cinco antgenos Rhesus ms importantes son la causa de la mayora de alloimmunizacion
siguientes transfusin de sangre. De acuerdo con las directrices de hemoterapia alemanes
[Richtlinien zur Gewinnung von Blut und Blutbestandteilen und zur Anwendung von
Blutprodukten] 5, receptores de transfusiones negativos D debe siempre ser dado productos de
eritrocitos D negativo.
Desde 2000, las mujeres en edad reproductiva y las nias tienen transfusiones tambin recibieron
compatibles para su posterior Rhesus antgenos, tales como C, C, E y e, adems del antgeno K del
grupo sanguneo Kell
Este procedimiento tambin se aplica a los pacientes que reciben transfusiones regulares o tienen
problemas inmunohematolgica, como antieritrocitarios alo-y autoanticuerpos. En el caso de
autoanticuerpos, su especificidad exacta no es por lo general determinado. Aunque un tercio de
tales autoanticuerpos se dirigen a protenas Rhesus, esto tiene prcticamente sin consecuencias
prcticas para tratamiento.
El antgeno D, descubierto en 1939, fue el primer Rhesus antgeno que se describir. Pacientes
positivos D se denominan Rh positivo. En 1946, una variante cuantitativa con una antgeno
dbilmente expresado D fue descubierto y denominado "Du". Esta variante, que ahora se llama "D
dbil", es de clnica y importancia diagnstica.
Desde 1953, se ha tenido claro que tambin hay variantes cualitativas del antgeno D. Aunque los
pacientes con esta variante parcial D son positivos para el antgeno D, tambin pueden formar
anti-D.


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La base gentica
Con el fin de entender la base gentica de las enfermedades, se es importante entender las
diferencias individuales en gentica la variabilidad, as como su frecuencia y distribucin en la
poblacin. Por lo general hay una estrecha correlacin entre el genotipo y el fenotipo expresado.
Por lo tanto, teniendo un cambio en el gen RHD como un ejemplo, es posible hacer inferencias
acerca de la expresin de la protena RhD en la membrana de los eritrocitos. Como es el caso con
muchos D variantes, la protena RhD modificados pueden tener importantes implicaciones para la
transfusin relacionados con la antigenicidad.
La base molecular de los alelos de RH
El primer gen Rhesus, el gen RHCE, se descubri en 1990. El gen RHD fue encontrado dos aos
despus, y la eliminacin total de este gen comprobado como la causa de la Fenotipo negativo D
europeo.
Ms de 170 alelos se han encontrado en la enfermedad hemorrgica del conejo gen desde
entonces. El lugar an no se ha explorado a fondo, incluso 15 aos despus se clon el primer gen
RH. DNB, la ms comn de todos los alelos D parciales europeos, fue descrito tan recientemente
como 2000.
En 2002, las comparaciones entre el genoma humano Proyecto y el Proyecto Genoma Mammal
aumentaron comprensin de la formacin de los dos genes RH en el cromosoma 1 (figura 1).
La mayora de los mamferos slo tienen un gen RH, cuya posicin corresponde al gen RHCE
humana. El gen RHD surgi de la duplicacin de un gen ancestral RH durante evolucin de los
mamferos. Un occurred9 eliminacin RHD durante la evolucin de los homnidos, por lo que
muchos humanos modernos carecen totalmente del gen RHD. Este haplotipo (glosario) es la
principal causa del fenotipo negativo D en todo el mundo.
Los alelos RH se pueden agrupar en funcin de su estructura molecular. En su mayor parte, estos
grupos muestran mutaciones puntuales (SNP, polimorfismos de nucletido nico) que causan
prdida de sentido, sin sentido, cambio de marco o sitio de empalme mutaciones (glosario). Alelos
hbridos RHD-CE-D son a menudo formados por la conversin de genes.
Los ejemplos de cambios moleculares y sus efectos en el antgeno D (Tabla I) muestran cmo el
antgeno D fenotipo se correlaciona con la estructura molecular.


La base molecular de los fenotipos Rhesus
Las dos protenas Rhesus, RhD y RHCE, son muy similares, que difieren en slo 36 de los 417
aminocidos, la cual que comprenden cada uno. Cada uno tiene doce segmentos dentro del


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membrana de los eritrocitos y seis bucles extracelulares (figura 2). Tanto el amino (NH3) y el
terminal (COOH) carboxilo se encuentran dentro de la clula.
Fenotipo D negativo
La diferencia esencial entre clnicamente Rhesus negativo positivo y Rh depende de la presencia o
ausencia de la protena RhD en la membrana de los eritrocitos ( O D positivo. D negativo).
No es habitual que los eritrocitos u otra clula protenas sean carece por completo de muchos
seres humanos . Este particular gentica caracterstica contribuye a la fuerte antigenicidad de la
RhD protena . Durante la duplicacin del gen ancestral RH , dos Segmentos de ADN se formaron ,
conocido como la caja Rhesus ( Figura 1 ) 9 . La supresin RHD resultado de una desigual de cruce
( figura 3 ) , que se produce cuando dos de ADN segmentos son altamente homlogas , tales como
las de la Caja Rhesus . El ms comn haplotipo RHD negativo entre los europeos se caracteriza por
una caja Rhesus hbrido. Diferencias moleculares sutiles entre las diversas formas de la caja Rhesus
se utilizan para las pruebas genticas .
La base molecular de las variantes de antgeno D
Aparte de la falta de la protena RhD , el negativo D fenotipo es causada principalmente por una
serie de cambios en el Protena RhD , que a su vez cambia el fenotipo de la D antgeno .
Dependiendo del fenotipo y su molecular estructura , estos alelos RHD se clasifican como parcial
D, D dbil o DEL .
D parcial
La protena RhD atraviesa la membrana de los eritrocitos varias veces , dejando slo una parte de
la protena expuesta al la superficie ( Figura 2 ) . Si un aminocido est sustituido en un porcin de
la protena RhD que se encuentra en el exterior superficie de la membrana de los eritrocitos , los
eptopos individuales de el antgeno D se puede perder o nuevos antgenos se puede formar . DNB
es la D parcial Europea comn ( Tabla I ) .
Categoras D son un subgrupo de D. La estructura parcial del sitio del gen RH facilita conversiones
de genes (figura 4 ) 10 . En el gen RHD algunos exones homlogas de la RHCE se insertar gen ,
formando un alelo Rhesus hbrida que expresa una protena hbrida correspondiente . As es como
el Categoras D III a VI se levant . Los cambios suelen afectar a un larga cadena de aminocidos,
que se encuentra siempre en la superficie de los eritrocitos.


D Dbil


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Si una sustitucin de aminocido se encuentra dentro de la membrana de los eritrocitos o en el
citoplasma , esto se traducir en una dbil fenotipo D (figura 2 ) 11 . Integracin de la RhD la
protena en la membrana se vea afectada , lo que lleva a debilitamiento cuantitativa del antgeno
D . No es generalmente ningn cambio cualitativo , y por lo tanto no la inmunizacin anti-D . La D
dbil tipo 1 es la ms comn en Europa ( Tabla I ) .
DEL
Un antgeno particular dbilmente expresado D se denomina DEL (anterior Del) , ya que slo pudo
ser demostrada usando elucin . En la elucin , los anticuerpos se separan de eritrocitos para
demostrar ellos en el eluato . los cambios moleculares son ms graves que los observados con D
dbil , lo que dificulta considerablemente, pero no del todo la prevencin de la integracin en la
membrana celular . Todos los alelos DEL son poco frecuentes en Europa, pero hasta el 30% de
todas aparentemente Dindividuos negativos en el este de Asia son portadores del alelo DEL RHD (
K409K ) 10,12 .
C / C y E / e antgenos
La importancia clnica Rhesus antgenos C , c, E y e son el resultado de cambios en las protenas
RHCE en slo cinco amino ubicaciones de cido (figura 2 ) . Los antgenos se denominan antittica
si una protena puede presentar slo uno de ellos . Son causadas por polimorfismos de protenas .
A menudo hay dos variantes de una protena , que se diferencian en una sola ubicacin de
aminocidos , tales como la Rhesus antgenos E y e . Alelos RHCE que muestran el aminocido
prolina en la posicin 226 expresan el antgeno E ,mientras que los alelos RHCE que muestran el
aminocido alanina en esta posicin expresa el antgeno e (Tabla I) 1 . similar diferencias entre dos
alelos RHCE representan la antittica C y antgenos c . Los pares de antgeno C / C y E / e no son
antitticas , sin embargo , debido a que el resultado de sustituciones en diferentes ubicaciones .
Los cuatro posibles combinaciones se producen a diferentes frecuencias ( entre los Europeos : Ce >
ce> ce> CE ) y se hereda como haplotipos .
Aplicaciones clnicas
Investigacin gentica , al igual que todas las investigaciones en medicina, slo debe ser llevado a
cabo en el contexto de un aim13 claro . como lo que respecta a las transfusiones , de biologa
molecular tcnicas ya se estn utilizando para proporcionar rentable respuestas a una serie de
cuestiones de importancia clnica . Los mtodos utilizados incluyen la reaccin en cadena de la
polimerasa ( PCR) para la amplificacin de genes y la posterior identificacin por electroforesis , la
secuenciacin de nucletidos y la hibridacin en biochips14 .


Anti- D en pacientes


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Los problemas clnicos encontrados son causados por una pequea nmero de alelos RHD . Los
pacientes suelen mostrar D parcial, algunos casos raros dbil D inmunizadas por el antgeno D
normal. Desde la categora VI ( DVI ) es el ms importante de ellos , la Autores recomiendan el uso
de anticuerpos monoclonales anti-D para la tipificacin , que no reaccionan con DVI.
Este procedimiento se incluy en las directrices alemanas de hemoterapia en 1996 y no se ha
cambiado desde entonces. Por lo tanto, los transportistas DVI se escriben deliberadamente como
falsos negativos para evitar transfusiones de sangre positivo D y la inmunizacin anti-D probable.
Despus de estas precauciones se construyeron en las directrices alemanas , que tambin fueron
adoptadas por otros pases europeos pases . A diferencia de D parcial, no aloinmunizacin anti-D
tiene sin embargo, ha informado de dbil tipo D 1 , 2 o 318 . Desde una clnica perspectiva, es til
que se trata de la ms comn Alelos D , que constituyen casi el 90 % de todos los tipos D dbil en
Alemania , ya que estos pacientes pueden recibir D positivo transfusiones de sangre y no
requieren productos negativas D .
Este procedimiento permite ahorrar hasta un 5 % de todos negativos D productos de eritrocitos ,
ya que pueden perfectamente ser reemplazados por productos positivas D , evitando as cuellos
de botella en el suministro de productos sanguneos D negativas.
Las mujeres embarazadas y la profilaxis anti-D
Las mujeres embarazadas con la debilidad de los tipos D 1-3 tambin pueden ser dado D positivo
transfusiones de sangre , y no requieren anti-D la profilaxis . Cada ao, una prueba gentica sola
vez ayuda a evitar repetida administracin de anti- D a 3.500 mujeres embarazadas slo en
Alemania ( hasta el 5% de todos los embarazos negativas D ) , y con l , todos los posibles efectos
secundarios de este profilaxis , que estas mujeres no necesitan . Hasta 5 % de todos los anti-D
inyecciones son , por lo tanto innecesario.
Una prueba gentica sola vez es ms rentable que la administracin repetida de productos anti -D.
Para implementar este enfoque , los lineamientos para la atencin mdica durante el embarazo y
despus ( directrices de la maternidad ) de nacimiento, emitido por el Comit Federal de Mdicos
y de Salud Fondos de Aseguramiento [ und der Bundesausschuss rzte Krankenkassen ] , tendra
que adaptarse en consecuencia. Todas las mujeres embarazadas con raros tipos D dbiles
recibiran la profilaxis necesaria y que sta no lo hara recibir automticamente en el estado actual
de hemoterapia y las directrices de la maternidad.
Un feto puede demostrar que ser D positivo demostrando ADN fetal en el plasma de perifrico
Sangre Materna. Profilaxis anti-D no es necesaria si el feto -D negativo. Esto podra ahorrar
alrededor de un 40 % de toda la profilaxis anti-D dan actualmente durante el embarazo. Este
mtodo fue desarrollado en los pases limtrofes con Alemania, donde los intensos esfuerzos estn
en marcha para implementar esta acercarse al diagnstico gentico.
Diagnstico prenatal


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Si el feto tiene que ser probado para el antgeno D, amniocentesis o el muestreo del trofoblasto es
el mtodo de eleccin. Cordocentesis ya no se realiza. Como ya se ha mencionado, el plasma
materno puede ser capaz de ser utilizado en el futuro.
Tener un hijo y anticuerpos anti -D
Si el padre es heterocigoto para la delecion de RHD, hay una probabilidad del 50 % de que el feto
es -D negativo, en el que caso el embarazo esencialmente libre de cualquier hematolgica riesgo.
Si el padre es homocigoto para el gen RHD, el feto definitivamente heredar el antgeno D , lo que
podra influir en la decisin de la pareja sobre la conveniencia de tener un hijo o no .
Durante varias dcadas, era imposible determinar si un individuo es homocigoto o heterocigoto
para RHD porque los mtodos serolgicos no son adecuados con el advenimiento del diagnstico
gentico de la Rhesus hbrida caja, sin embargo , las posibilidades se han ampliado
considerablemente . Si el padre es -D positivo, ahora es suficiente para ponerlo a prueba por el
borrado RHD .
El uso en otras enfermedades
Si los mtodos serolgicos estndar fallan, el diagnstico gentico es el mtodo de eleccin para
un grupo de sangre fiable la tipificacin de los pacientes despus de una transfusin y aquellos con
Auto o aloinmune anemias hematolgicos. Aunque leucocitos transfundidos pueden bajo ciertas
circunstancias persisten durante aos , no van a interferir con gentica rutinaria diagnstico .
Los donantes de sangre
Investigacin apropiada para el gen RHD puede identificar a los donantes negativos al parecer D,
que en realidad son D dbil o DEL , asegurando as que no se dar su sangre slo a los receptores D
positivos . Sin diagnstico gentico,
Receptores de transfusiones de sangre D negativos seguir siendo inmunizadas por el antgeno D
contenida en dicha sangre. Los donantes que hasta el momento se han identificado errneamente
como eritrocitos D negativos y cuyos son D -/ D + quimeras puede ahora ser identificado
correctamente. Quimerismo permanente puede resultar de los embarazos gemelares
monocoriales. Cualquier transfusin a partir de fuentes de donantes tales como stos pueden
resultar en anti-D inmunizacin, porque tambin contienen varios mililitros de los eritrocitos con
una D perfectamente normal positiva fenotipo. Esta sangre es D positivo, slo se puede detectar
mediante la investigacin gentica, no con serolgicas de rutina mtodos. Cualquier caso de la
inmunizacin anti-D es de considerable importancia clnica de las nias y mujeres de edad
reproductiva. En el caso de un embarazo positiva D, esto dara como resultado la enfermedad
hemoltica Rhesus del recin nacido.

La funcin de las protenas Rhesus


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La mayora de las protenas del grupo de sangre tienen una funcin conocida. Mientras que la
purificacin de protenas Rhesus humanos, Americana mdico Peter Agre descubri un
transportador de agua protena. Este descubrimiento le vali el Premio Nobel 2003 de Qumica . A
pesar de intensos esfuerzos, sin embargo, ningn funcin se ha encontrado para las protenas RhD
y RHCE. Aunque el antgeno Rhesus asociado ( RhAG ), una Rhesus homlogo contenida en los
eritrocitos , puede transportar iones de amonio , las protenas Rhesus mismos podran no se
muestra para tener dicha funcin. Una posible funcin bajo investigacin implica el intercambio de
CO2 e incluso de O2. Otra informacin sobre los alelos RH slo se pueden obtener de la aplicacin
clnica cotidiana del diagnstico gentico, lo que podra por lo tanto contribuir a la identificacin
de su funcin.
Desde la perspectiva de la investigacin bsica, en donde la medicina transfusional seguir
haciendo una contribucin, un trabajo cientfico sobre Rhesus y otros grupos sanguneos han sido
muy productiva, y es cualquier cosa menos acabada.
Perspectiva
El diagnstico gentico se ha usado para la tipificacin del grupo sanguneo en medicina de
transfusin clnica desde 2000. Como atencin prenatal ha mostrado, gentica tipificacin del
grupo sanguneo tiene conducido a una mejor calidad de la atencin, ayudando a evitar posibles
los efectos secundarios y la reduccin de costos. Esta es una rara combinacin, y justifica los
costes adicionales asociados a la optimizacin de la atencin a travs del uso de tcnicas de
diagnstico gentico. As como la mejora de la atencin al paciente, estos mtodos pueden
alimentar el desarrollo de nuevos mtodo , que tambin se utilizarn para atencin de la salud
fuera de Alemania. Departamentos europeos de medicina transfusional estn liderando el campo
en la sangre molecular diagnsticos y aplicaciones de grupo, y continuar contribuir a mejorar la
atencin al paciente .
Trminos Comn Variabilidad Genoma
SNP ( polimorfismo de un solo nucletido )
Punto de mutacin . La variabilidad en la secuencia de nucletidos debido para cambiar de un solo
nucletido .
Alelo
La expresin de una codificacin o no codificacin de nucletidos secuencia ( el exn resp . intrn
de un gen ) con dos o ms variantes , a menudo difieren en slo una mutacin puntual .
Genotipo
Un par de alelos o variantes de una secuencia de nucletidos que ocurren en sitios homlogos en
los cromosomas emparejados .
Haplotipo


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Una combinacin de alelos o variantes de un nucletido secuencia situado cerca juntos en el
mismo el cromosoma, y por lo general heredados juntos .
Mutacin con sentido
Sustitucin de aminocidos en una protena causada por un punto mutacin . Se puede alterar la
funcin o antigenicidad de una protena .
Mutacin sin sentido
Un codn de parada causada por una mutacin puntual que detiene prematuramente la sntesis
de la cadena de aminocidos, que conduce a la prdida de funcin de la protena de su expresin.
Mutacin silenciosa
Un punto de mutacin que no cambia el aminocido cido en el sitio. Aunque la protena es sin
cambios, todava puede ser asociado con un clnicamente relevante fenotipo y ser utilizado para el
diagnstico.
Cambio de marco mutacin
La prdida o la insercin de uno o dos nucletidos que cambia el marco de lectura y
prematuramente detiene protena sntesis (o lo extiende, en algunos casos raros ) , lo que resulta
en prdida de funcin de la protena o la expresin .
Mutacin en el sitio de empalme
Una mutacin puntual en un sitio de empalme ( el exn intrn conexiones) , causando empalme
defectuoso del ARN mensajero (ARNm ) y saltar un exn , cambiando as el amino secuencia de
cido . Conduce a la prdida de funcin de la protena o expresin.
La conversin gnica
El intercambio no recproco entre dos o ms genes homlogos, por lo que un determinado
nucletido secuencia de un gen se sustituye por una secuencia en otro gen, que se encuentra en el
mismo cromosoma (conversin en cis) .