Liceo Bolivariano Pedro Arnal Cumana, Estado Sucre
Bases Moleculares de la Herencia
Realizado Por:
Cuman, Febrero 2012
Introduccin
Durante muchos aos el hombre se ha interesado por descubrir los secretos de la herencia. Mediante largos y difciles estudios se descubri la existencia del ADN y ARN y su importancia para la gentica, al hablar de los mismos se hace referencia a la sntesis de las protenas que van a determinar las caractersticas genotpicas y fenotpicas del organismo.
Los cidos Nucleicos Son macromolculas, polmeros formados por la repeticin de monmeros llamados nucletidos, unidos mediante enlaces fosfodister. Se forman, as, largas cadenas o polinucletidos, lo que hace que algunas de estas molculas lleguen a alcanzar tamaos gigantes (de millones de nucletidos de largo).
ADN El ADN es un cido nucleico formado por nucletidos. Cada nucletido consta de tres elementos: 1. un azcar: desoxirribosa en este caso (en el caso de ARN o cido ribonucleico, el azcar que lo forma es una ribosa), 2. un grupo fosfato y 3. una base nitrogenada Si la molcula tiene slo el azcar unido a la base nitrogenada entonces se denomina nuclesido. Las bases nitrogenadas que constituyen parte del ADN son: adenina (A), guanina (G), citosina (C) y timina (T). Estas forman puentes de hidrgeno entre ellas, respetando una estricta complementariedad: A slo se aparea con T (y viceversa) mediante dos puentes de hidrgeno, y G slo con C (y viceversa) mediante 3 puentes de hidrgeno.
Funciones del AND Las funciones del ADN consisten en almacenar la informacin gentica completa, necesaria para especificar la estructura de todas las protenas y d cada una de las clases de ARN del organismo, en programar en el tiempo y en el espacio la biosntesis ordenada de los componentes de la clula y de los tejidos, en determinar las actividades de un organismo a lo largo de su ciclo vital y, finalmente, en definir la individualidad de un organismo dado. La informacin gentica almacenada en la secuencia de nucletidos de ADN sirve para dos propsitos:
Es la fuente de informacin para la sntesis de todas las molculas de protenas de la clula y el organismo. Provee la informacin heredada por las clulas hijas de la progenie.
Ambas funciones requieren que las clulas del ADN sirvan como molde, en el primero de los casos para la transcripcin de informacin al ARN y en el segundo, para la replicacin de la informacin en las molculas hijas de ADN.
Enzimas de Restriccin
Las enzimas de restriccin, tambin conocidas como endonucleasas, son enzimas que cortan los enlaces fosfodiester del material gentico a partir de una secuencia que reconocen. Las mismas permiten cortar DNA de hebra doble, donde reconocen secuencias palindrmicas (secuencias que se leen igual en ambas direcciones). Son extradas de organismos procariticos (bacterias), donde actan como un mecanismo de defensa, para degradar material gentico extrao que entre en la clula. Las bacterias tienen la capacidad de metilar su DNA, lo cual sirve para distinguir entre el DNA extrao y el DNA propio. Las enzimas de restriccin no pueden cortar DNA metilado, de este modo solo afectan el DNA extranjero y no el DNA bacterial.
Existen 3 tipos de enzimas de restriccin: 1. Tipo I y Tipo III: a. Tienen actividad de restriccin (cortan) y modificacin (metilan). b. Cortan a cierta distancia de la secuencia de reconocimiento, las Tipo I cortan lejos de la secuencia de reconocimiento, ya sea ro arriba o ro abajo. Las Tipo III cortan de 5-8 bases antes o despes de la secuencia que reconocen. c. Necesitan ATP para moverse a travs de la molcula de DNA, desde el lugar de reconocimiento hasta el sitio del corte. 2. Tipo II: a. Slo tienen actividad de restriccin. b. Cortan de manera consistente y predecible dentro de la secuencia que reconocen. c. Slo requieren Mg ++ como cofactor. d. No necesitan ATP.
Aplicaciones de las Enzimas de Restriccin:
1. Hacer mapa de restriccin de un plsmido o bacterifago. 2. Fragmentar DNA genmico para separacin de electroforesis y Southern Blot. 3. Generacin de fragmentos para ser usados como sondas marcadas en Southerny Northern blotting. 4. Generacin de fragmentos para ser subclonados en los vectores apropiados, creacin de DNA recombinante.
Las endonucleasas se nombran a partir de las bacterias de las que son extradas, su nombre est dado segn el gnero y la especie de la bacteria de donde se aisl por primera vez esta enzima. La primera letra representa el gnero de la bacteria, las prximas dos indican la especie, una cuarta letra indica la cepa, y un nmero al final indica la cantidad de enzimas que se han aislado de esa cepa. Ej:
Eco RI E = gnero Escherichia co = especie coli R = cepa RV 13 I = primera endonucleasa aislada de esta cepa
Las enzimas de restriccin al cortar el DNA pueden producir 2 tipos de cortes 1. Cohesivos o pegajosos:
GAATTC GGATCC AAGCTT CTTAAG CCTAGG AACGAA
EcoRI BamHI HindIII
2. Abruptos:
AATATT CCCGGG TTATAA GGGCCC
SspI SmaI
Existen varios factores que son crticos al trabajar con enzimas de restriccin y que pueden afectar la actividad de las mismas: 1. Pureza del DNA la reaccin de enzimas es muy dependiente de la pureza, contaminantes como protenas, fenol, cloroformo, etanol, EDTA, SDS, altas concentraciones de sal, etc. inhiben la endonucleasa. 2. Temperatura y pH las enzimas son muy sensitivas a temperatura y pH en lo que respecta a su estabilidad y actividad. 3. DNAsas Las DNAsas degradan el DNA en presencia de Mg ++ . 4. Contaminantes con carga (-). 5. DNA contaminado con otro DNA. 6. Grados de metilacin algunas endonucleasas son inhibidas por metilacin. 7. Tipo de molcula de DNA si el DNA no tiene la secuencia que es reconocida por la enzima accesible, esta no puede cortar el material gentico (ej. si el DNA est superenrrollado el lugar de restriccin no va a estar accesible para la enzima). 8. Buffer adecuado este provee el ambiente que necesita la enzima para trabajar en condiciones ptimas.
Importante: Una unidad de enzima se define como la cantidad de enzima que se necesita para cortar 1g de DNA en 1 hora.
El buffer siempre debe aadirse como un 10% de la reaccin total de digestin.
ADN recombinante El ADN recombinante, o ADN recombinado, es una molcula de ADN artificial formada de manera deliberada in vitro por la unin de secuencias de ADN provenientes de dos organismos de especies diferentes que normalmente no se encuentran juntos. Al introducirse este ADN recombinante en un organismo se produce una modificacin gentica que permite la adicin de un nuevo ADN al organismo conllevando a la modificacin de rasgos existentes o la expresin de nuevos rasgos. La produccin de una protena no presente en un organismo determinado y producidas a partir de ADN recombinante se llaman protenas recombinantes. El ADN recombinante es resultado del uso de diversas tcnicas que los bilogos moleculares utilizan para manipular las molculas de ADN y difiere de la recombinacin gentica que ocurre sin intervencin dentro de la clula. El proceso consiste en tomar una molcula de ADN de un organismo, sea un virus, planta o una bacteria y en el laboratorio manipularla y ponerla de nuevo dentro de otro organismo. Esto se puede hacer para estudiar la expresin de un gen, para producir protenas en el tratamiento de una enfermedad gentica, vacunas o con fines econmicos y cientficos. El proceso de produccin de un ADN recombinante comienza con la identificacin desde un organismo de una secuencia de ADN de inters con el fin de propagarlo en otro organismo que carece de la secuencia y, por ende, del producto proteico de esa secuencia de ADN. As se pueden producir cantidades ilimitadas de la protena codificada por el susodicho gen. En trminos simples, el procedimiento consiste en: Localizacin de genes y sus funciones. Clonacin del ADN, y su posterior almacenamiento en genotecas. Reaccin en cadena de la polimerasa (PCR) Utilizacin de vectores de expresin.
cido Ribonucleico (ARN) El cido ribonucleico (ARN o RNA, de RiboNucleic Acid, su nombre en ingls) es un cido nucleico formado por una cadena de ribonucletidos. Est presente tanto en las clulas procariotas como en las eucariotas, y es el nico material gentico de ciertos virus (virus ARN). El ARN celular es lineal y de hebra sencilla, pero en el genoma de algunos virus es de doble hebra. En los organismos celulares desempea diversas funciones. Es la molcula que dirige las etapas intermedias de la sntesis proteica; el ADN no puede actuar solo, y se vale del ARN para transferir esta informacin vital durante la sntesis de protenas (produccin de las protenas que necesita la clula para sus actividades y su desarrollo). Varios tipos de ARN regulan la expresin gnica, mientras que otros tienen actividad cataltica. El ARN es, pues, mucho ms verstil que el ADN. Como el ADN, el ARN est formado por una cadena de monmeros repetitivos llamados nucletidos. Los nucletidos se unen uno tras otro mediante enlaces fosfodister cargados negativamente. Cada nucletido est formado por una molcula de monosacrido de cinco carbonos (pentosa) llamada ribosa (desoxirribosa en el ADN), un grupo fosfato, y uno de cuatro posibles compuestos nitrogenados llamados bases: adenina, guanina, uracilo (timina en el ADN) y citosina.
Tipos de ARN a) ARN mensajero: Su funcin es llevar el mensaje o informacin del ADN a los ribosomas. b) ARN ribosomal: Su funcin es constituir la estructura del ribosoma. Los ribosomas son los encargados de la sntesis de protenas. c) ARN transferencia: Su funcin es llevar los aminocidos al ribosoma
Sntesis De Protenas La sntesis de protenas ocurre en los ribosomas que consisten en dos subunidades, una grande y una pequea, cada una formada por rRNA y protenas especficas. Para la sntesis de protenas, tambin se requiere de molculas de tRNA, que estn plegadas en una estructura secundaria con forma de hoja de trbol. Estas molculas pequeas pueden llevar un aminocido en un extremo y tienen un triplete de bases, el anticodn, en un asa central, en el extremo opuesto de la molcula. La molcula de tRNA es el adaptador que aparea el aminocido correcto con cada codn de mRNA durante la sntesis de protenas. Hay al menos un tipo de molcula de tRNA para cada tipo de aminocido presente en las clulas. Las enzimas conocidas como aminoacil-tRNA sintetasas catalizan la unin de cada aminocido a su molcula de tRNA especfica. En E. coli y otros procariotas, aun cuando el extremo 3' de una cadena de mRNA est siendo transcripto, se estn uniendo ribosomas cerca de su extremo 5'. En el lugar donde la cadena de mRNA est en contacto con un ribosoma, se unen tRNAs temporalmente a la cadena de mRNA. Esta unin ocurre por apareamiento de bases complementarias entre el codn de mRNA y el anticodn de tRNA. Cada molcula de tRNA lleva el aminocido especfico requerido por el codn de mRNA, al cual se une el tRNA. As, siguiendo la secuencia dictada originalmente por el DNA, las unidades de aminocidos son alineadas una tras otra y, a medida que se forman los enlaces peptdicos entre ellas, se unen en una cadena polipeptdica. Esquema general del flujo de informacin en procariotas y eucariotas: a) En procariotas, el RNA se transcribe a partir de una molcula de DNA circular y, a medida que ocurre la transcripcin, se produce la traduccin en el mismo compartimiento. b) En eucariotas, la transcripcin ocurre en el ncleo y el RNA, luego de sufrir un procesamiento, se dirige al citoplasma donde se produce la sntesis de protenas. Como se vio en el captulo 5, algunas protenas son sintetizadas en los ribosomas libres y otras en los que estn adheridos al retculo endoplsmico. Esquema general del flujo de informacin en procariotas y eucariotas.
Tres etapas en la sntesis de protenas en procariotas
La sntesis de protenas ocurre en varias etapas: a) Iniciacin. La subunidad ribosmica ms pequea se une al extremo 5' de una molcula de mRNA. La primera molcula de tRNA, que lleva el aminocido modificado fMet, se acopla con el codn iniciador AUG de la molcula de mRNA. La subunidad ribosmica ms grande se ubica en su lugar, el complejo tRNA-fMet ocupa el sitio P (peptdico). El sitio A (aminoacil) est vacante. El complejo de iniciacin est completo ahora.
Un segundo tRNA, con su aminocido unido, se coloca en el sitio A y su anticodn se acopla con el mRNA. Se forma un enlace peptdico entre los dos aminocidos reunidos en el ribosoma. Al mismo tiempo, se rompe el enlace entre el primer aminocido y su tRNA. El ribosoma se mueve a lo largo de la cadena de mRNA en una direccin 5' a 3', y el segundo tRNA, con el dipptido unido, se mueve desde el sitio A al sitio P, a medida que el primer tRNA se desprende del ribosoma. Un tercer aminoacil-tRNA se coloca en el sitio A y se forma otro enlace peptdico. La cadena peptdica naciente siempre est unida al tRNA que se est moviendo del sitio A al sitio P y el tRNA entrante que lleva el siguiente aminocido siempre ocupa el sitio A. Este paso se repite una y otra vez hasta que se completa el polipptido
Cuando el ribosoma alcanza un codn de terminacin (en este ejemplo UGA), el polipptido se escinde del ltimo tRNA y el tRNA se desprende del sitio P. El sitio A es ocupado por un factor de liberacin que produce la disociacin de las dos subunidades del ribosoma. Resumen general de la sntesis de protenas en una bacteria
A partir del DNA cromosmico se transcriben: diferentes molculas de rRNA que, combinadas con protenas especficas, forman los ribosomas; los diferentes tipos de molculas de tRNA correspondientes a los distintos aminocidos y los mRNA, que llevan la informacin para la secuencia de aminocidos de las protenas. Cuando un mRNA se une a la subunidad menor del ribosoma, comienza el proceso de sntesis de protenas, que se describe en detalle en el texto.
Conclusin
Podemos decir que el ADN contiene la informacin hereditaria correspondiente a la especie. Y el ARN requiere para la sntesis de protenas la presencia de los ribosomas en las clulas ya que en el momento de la duplicacin de los cromosomas la molculas de ADN de abre gradualmente por los puentes de hidrgeno. El papel de las molculas de ADN en la transmisin del cdigo gentico rompiendo clulas de Escherichia Coli, una bacteria de la flora intestinal, separando sus componentes en varias fracciones. Pero si el ADN es el responsable de la transmisin de la informacin gentica debe ser capaz, no sola de reproducirse, con lo cual se consigue conservar esta informacin de padre a hijos sino tambin debe poder transmitirlo.
Bibliografa
MAZPARROTE, Serafn. (1998). Biologa 9no grado Educacin Bsica. Editorial Biosfera. pp. 192 Encarta 2001 N1, Articulo ADN Y ARN. http://www.angelfire.com/magic2/bioquimica/sintesis_de_prote_ nas.htm