Mestrando Alexandre Vidotto

Programa de Ps-Graduao em Gentica - IBILCE/UNESP

Componentes
Qumicos da
Clula
Profa. Dra. Maria Terclia Vilela de Azeredo Oliveira
Profa. Msc. Rosana Silistino de Souza
Departamento de Biologia
Componentes Qumicos da Clula:
Composto Porcentagem
gua 75 a 85%
ons inorgnicos 1%
Carboidratos 1%
Lpideos 2 a 3%
Protenas 7 a 10%
cidos nuclicos 1%
Classificao dos Compostos Qumicos:
Orgnicos: contm ao menos uma molcula de
carbono e uma de hidrognio em sua
composio
Ex.: Protenas, carboidratos, etc...
Inorgnicos: So compostos formados em
geral por molculas (compostos inicos)
pequenas, em que podem ou no conter carbono
em sua composio.
Ex.: H
2
O, CO
2
HCN, NaCl, etc...
ons
- Ctions: derivados de tomos
que perderam e-, carga (+).
Ex: Na
+
, o t. de Na perdeu 1 e-
- nions: derivados de tomos
que ganharam e-, carga (-).
Ex.:Cl
-
, o t. de Cl ganhou 1 e-
Os ons so partculas carregadas (+ ou -), onde o n
de e- no mesmo que o n de p
+
.
ons
ons importantes
Na
+
: importante para transmisso do
impulso nervoso.
Ca
+2
: contrao muscular e processo
de cicatrizao.
Mg
+2
: presente na clorofila. Ex. Rubisco
Fe
+2
: hemoglobina.
Fe
-
: importante p/a manuteno dos
ossos e dos dentes.
GUA
componente mais abundante na superfcie terrestre
vida originou-se, evoluiu e desenvolveu-se nos oceanos
estruturas e funes celulares: adaptadas as propriedades
fsico-qumicas da gua
no solvente universal !!!!
solubiliza grande nmero de substncias
H
2
O: quimicamente estvel, mas com propriedades incomuns
que fazem dela um bom solvente.
GUA
PROPRIEDADES
DA GUA
Molcula de H
2
O: ESTRUTURA
O
H H
O
H H
Molcula de H
2
O: polar
O: tomo muito eletronegativo
H: tomo pouco eletronegativo
Eletronegatividade: afinidade por eltrons
PONTES DE HIDROGNIO
Definio: ligao no-covalente que se forma entre dois
tomos eletronegativos (O ou N) onde um deles est ligado
covalentemente a um tomo de H (doador).
O
H H
doador
aceptor
Ligao covalente
Ponte de hidrognio
N ou O N ou O
So ligaes fracas que podem ser rompidas e refeitas
facilmente grande importncia biolgica
Pontes de hidrognio entre molculas de gua do fora coesiva
que faz a gua lquida temperatura ambiente e slida baixas
temperaturas.
PONTES DE HIDROGNIO
O
H
H

-

-

+

+
O
H
H

+

+

-

-
Cada molcula de H
2
O pode fazer no mximo 4 pontes de H
com outras molculas de H
2
O ao mesmo tempo
PONTES DE HIDROGNIO
O
H H
O
H H
O
H H
O
H H
O
H H
H
2
O no estado slido (gelo): 4 ptes H/H
2
O
H
2
O no estado lquido: 3,4 ptes H/H
2
O
H
2
O no estado gasoso: 1-2 ptes H/H
2
O
Importncia Biolgica das Ligaes Fracas
Permitem clula montar, alternar e desmontar estruturas
supramoleculares.
Ex.: Atuao enzimtica, formao dos microtbulos.
Aumentar a versatilidade e eficincia funcional s/ grandes
gastos de energia.
Obs.: Se as ligaes fossem apenas estveis e de alto
valor energtico a atividade celular seria impossvel.
H
2
O: pode realizar com outras substncias pontes de
hidrognio e interao eletrosttica
Dissolver = envolver uma substncia com molculas de gua
SEMELHANTE DISSOLVE SEMELHANTE
substncia podem ser classificadas em:
hidroflicas: solveis em gua
hidrofbicas: insolveis em gua
anfiflicas ou anfipticas: a substncia apresenta parte
da molcula hidrofbica e parte hidroflica
SOLUBILIDADE
EM H
2
O
substncia polares: formam pontes de hidrognio com a H
2
O.
Exemplos: acar, lcool e acetona.
SUBSTNCIAS
HIDROFLICAS
GLICOSE
substncia apolares: no interagem com a H
2
O, no sendo,
portanto, dissolvidas. Os hidrocarbonetos (composto de C e H
somente) so altamente apolares. Exemplos: gasolina, petrleo,
leo diesel, etc.
SUBSTNCIAS
HIDROFBICAS
parte da molcula hidrofbica e outra parte hidroflica.
Exemplos: cido graxo, detergente, sabo, etc.
SUBSTNCIAS ANFIFLICAS
Cauda apolar
(Hidrofbica)
Cabea
Polar
(Hidroflica)
REPRESENTAO
COMPORTAMENTO DE
ANFIFLICOS EM H
2
O
MICELA: monocamada de anfiflico
VESCULA: dupla camada de anfiflico com
gua no interior
AGITAO
AGITAO INTENSA
EMULSIFICAO
SOLUBILIZAO de gorduras pela formao de uma micela
GORDURA
DETERGENTE
O
H H
O
H
H
O
H H
O
H
H
O
H
H
O
HH
O
H
H
O
H
H
O
H
H
Macromolculas Orgnicas
Macromolculas ou polmeros
Unidades
repetidas
Monmeros
Unem-se por ligaes covalentes
Homopolmeros
Polmeros formados por monmeros
semelhantes .
Heteropolmeros
Polmeros formados por monmeros
diferentes .
Macromolculas Orgnicas
Polmeros
Grupamentos
qumicos
grupamentos polares ou
hidroflicos
grupamentos apolares ou
hidrofbicos
Molculas com alto teor
de grupamentos polares
Carboidratos, DNA, RNA e
protenas
Molculas com baixo
teor de grupamentos
polares
Gorduras, parafinas e leos
Molculas Anfipticas
Detergentes, algumas
protenas e fosfolipdeos
PROTENAS
CLASSIFICAO PEPTDICA
peptdeo: polmeros curtos de aminocidos (aas)
dipeptdeo: dois resduos de aas
tripeptdeo: trs resduos de aas
oligopeptdeos: 12 a 20 resduos de aas.
polipeptdeos: mais de 20 resduos de aas
Protenas: compostos formados por uma ou mais
cadeias polipeptdicas
PROTENAS
Definio - So macromolculas constitudas por unidades
chamadas de aminocidos;
So as molculas mais abundantes e com maior diversidade de
funes nos sistemas vivos;
Aminocidos (aas) apresenta um
grupo carboxila, um grupo amino e
uma cadeia lateral distinta (grupo R)
ligados ao tomo de carbono
(exceto a prolina, que possui um
grupo imino).
Embora mais de 300 aas diferentes
tenham sido descritos na natureza,
apenas 20 deles so normalmente
encontrados como constituintes de
protenas em mamferos;
So, principalmente classificados
de acordo com a sua cadeia lateral,
pois a natureza dessas cadeias que
determina o papel de um aa em uma
protena: apolares, polares, cidos,
bsicos.
Lehninger, 2004.
PROLINA
nico aminocido que faz ligao com o carbono alfa
e o grupo amina, formando um composto imino.
NVEIS ESTRUTURAIS DAS
PROTENAS
Estrutura primria: a sequncia linear de aas em uma
protena.
ESTRUTURA
PRIMRIA
Ligaes peptdicas: Os aminocidos so unidos
entre si por ligaes peptdicas, nas quais o grupo
amina de um deles se liga ao grupo carboxila do
prximo, havendo a perda de uma molcula de
gua, ou seja, a formao de uma ligao peptdica
uma sntese por desidratao.
NVEIS ESTRUTURAIS DAS PROTENAS
Estrutura secundria: consiste em um primeiro nvel
de enrolamento helicoidal da protena, graas s
interaes, geralmente pontes de hidrognio, entre seus
aminocidos.
ESTRUTURA
SECUNDRIA
*Exemplos: queratinas famlia de protenas fibrosas intimamente
relacionadas, que constituem os principais componentes de tecidos como
cabelo e a pele!!
Hlice : existem vrias hlices polipeptdicas
diferentes na natureza, mas a hlice a mais
comum. O filamento de aminocidos se enrola ao
redor de um eixo central, formando uma escada
helicoidal. uma estrutura estvel, cujas voltas so
mantidas por pontes de hidrognio
NVEIS ESTRUTURAIS DAS PROTENAS
ESTRUTURA
SECUNDRIA
Folha : ao contrrio da hlice , so compostas
de duas ou mais cadeias peptdicas (fitas ) ou
segmentos de cadeias polipeptdicas, as quais
apresentam-se quase totalmente estendidas.
As pontes de hidrognio so perpendiculares ao
esqueleto polipeptdico!!!!
As folhas podem ser paralelas ou antiparalelas, e,
ainda, pode ser formada por uma nica cadeia,
dobrando-se sobre si mesma!!!
NVEIS ESTRUTURAIS DAS PROTENAS
ESTRUTURA
SECUNDRIA
Glicina
Prolina
NVEIS ESTRUTURAIS DAS PROTENAS
Estrutura terciria: a beta folha ou as alfa hlice comeam a
se enrolar fazendo com que interaes de aminocidos que,
antes, estavam distantes, atravs de ligaes de ponte de
hidrognio e de dissulfeto, se aproximem, e, com isso, a protena
assume a sua estrutura tridimensional conferindo a atividade
biolgica das maiorias das protenas.
*As cadeias laterais hidrofbicas so posicionadas no interior,
enquanto os grupos hidroflicos geralmente so encontrados na
superfcie da molcula!!
*A estrutura primria determina a terciria!!
ESTRUTURA TERCIRIA
NVEIS ESTRUTURAIS DAS PROTENAS
Papel das chaperonas no dobramento proteco: constituem
uma famlia de muitas protenas diferentes com funo
semelhante: elas usam energia da hidrlise de ATP para
desnovelar protenas, possibilitando novo enovelamento, dessa
vez na forma correta ou no lugar correto, e, tambm, encaminha
a protena destruio, caso no seja possvel atingir a
configurao correta.
ESTRUTURA TERCIRIA
*chaperons foram aqueles meninos que
ajudavam os nobres renascentistas a vestir
as roupas complicadssimas e colocar as
perucas enormes
NVEIS ESTRUTURAIS DAS PROTENAS
Estrutura quartenria: duas ou mais cadeias polipeptdicas
interagem atravs de interaes hidrofbicas, ligaes inicas e
por ponte de hidrognio. Cada cadeia polipeptdica possui o
terceiro nvel de organizao.
Desnaturao de protenas: resulta no desdobramento e na
desorganizao das estruturas secundria e terciria, sem que ocorra
hidrlise das ligaes peptdicas.
*Agentes: calor, solventes orgnicos, agitao mecncia, cidos e bases
fortes, detergentes e nos ou metais pesados, como chumbo e mercrio!!!
*Pode ser reversvel ou no!!!
ESTRUTURA QUATERNRIA
NVEIS ESTRUTURAIS DAS PROTENAS
TIPOS DE PROTENAS
Hemeprotenas Globulares: so um grupo especializado de
protenas, as quais contm o heme (protoporfirina + on) como
grupo prosttico firmemente ligado e que desempenha diferentes
papis, de acordo com a estrutura tridimensional da protena.
Catalase;
Citocromo;
Hemoglobina e mioglobina...
TIPOS DE PROTENAS
Protenas fibrosas: o colgeno e a elastina so os exemplos
de protenas fibrosas bem caracterizados, que apresentam
funo estrutural no organismo, Por exemplo, o colgeno e a
elastina so componentes da pele, do parede dos vasos
sanguneos e da crnea... Cada protena fibrosa
apresenta propriedades mecnicas especiais, resultado de sua
estrutura nica, a qual obtida pela combinao de aas
especficos em elementos regulares de estrutura secundria!!!!
TIPOS DE PROTENAS
Protenas de membrana: So protenas encontradas em
associao com os vrios tipos de membrana das clulas.
MTODOS DE PURIFICAO E CARACTERIZAO
DE PROTENAS
MTODOS DE PURIFICAO E CARACTERIZAO
DE PROTENAS
MTODOS DE PURIFICAO E CARACTERIZAO
DE PROTENAS
MTODOS DE PURIFICAO E CARACTERIZAO
DE PROTENAS
roxa:
Cromatografia
Um dos mtodos mais utilizados para separao de protenas a
cromatografia;
Primeiramente desenvolvida para separao de molculas pequenas
como a aminocidos e acares;
Amostra (soluto) interage fiscamente com duas fases- Uma mvel (gs
ou lquido) e um suporte slido (fase estacionria; solvente ou Matriz). A
fase mvel movimenta o soluto atravs da fase estacionria. A atrao
diferencial do soluto pelas fases mvel e estacionria afetar a sua
mobilidade.
Aplicaes:
Separao de misturas complexas de biomolculas em componentes
individuais para propsitos analticos ou quantitativos.
Isolamento em uma forma pura de uma biomolcula simples a partir de
uma mistura complexa
MTODOS DE PURIFICAO E CARACTERIZAO
DE PROTENAS
Cromatografia de Colunas
Tipos de cromatografia de coluna
Qual a importncia das protenas p/ a cl.?
Estrutura das cls. e tecidos Ex.:Queratina
Reparos Ex.: protenas responsveis pela
coagulao
Crescimento Ex.:hormnios
Defesa Ex.:anticorpos
Manuteno do organismo Ex.: Insulina
Biocatalizadores Ex.: Enzimas
Regulam milhares de reaes
qumicas diferentes
Enzimas =
Catalisadores biolgicos
Definio: catalisadores de reaes qumicas
(aceleram as reaes) altamente especficas. A grande
maioria so protenas (exceo: ribozima)
Propriedades:
Aceleram as reaes
No so consumidos na reao
Atuam em pequenas concentraes
No alteram o equilbrio das reaes
Podem ter sua atividade regulada
Reaes qumicas catalisadas (enzimas)
E
E
+
+
S
S
E
E
S
S
E
E
+
+
P
P
E
n
e
r
g
i
a
E
n
e
r
g
i
a
Caminho da Rea Caminho da Rea o o
Energia de ativa Energia de ativa o o sem sem enzima enzima
S
S
P
P
Energia de ativa Energia de ativa o o com com enzima enzima
Enzimas nomenclatura e classificao
Nomenclatura:
SUBSTRATO + FUNO + ASE
Ex.: superxido dismutase, nitrato redutase, isocitrato desidrogenase,
etc.
Enzimas - Cofatores
Poro protica
APOENZIMA
Cofator
HOLOENZIMA
Ativador
Coenzima
Grupamento
prosttico
Molculas orgnicas ou inorgnicas que condicionam a
atividade das enzimas
Enzimas - Cofatores
Cofatores inorgnicos: ons metlicos. Exemplos:
Magnsio
Mangans
Zinco -
Cofatores orgnicos
Maioria deriva de vitaminas hidrossolveis
Classificam-se em:
transportadoras de hidrognio
transportadoras de grupos qumicos
Enzimas
Centro Cataltico / Stio Ativo
Regio da molcula enzimtica
que participa da reao com o
substrato
Pode possuir componentes no
proticos: cofatores
Enzimas
Substratos
Complexo ES (Enzima-Substrato)
Ligao ao Stio Ativo ou stio cataltico
Chave-fechadura
Liberao do Produto
+
Enzima inalterada
Fatores que alteram a atividade de uma enzima
Fatores decorrentes da natureza protica das enzimas
- pH
- temperatura
Fatores decorrentes da formao do complexo ES
- concentrao do substrato
- concentrao da enzima
Presena de inibidores
LIPDEOS
LIPDEOS
Classe de molculas bastante variada
Baixa solubilidade em gua, muitos so compostos anfiflicos
Desempenham vrias funes no organismo:
Combustvel celular
Hormnios ou precursores hormonais
Reserva de energia
Componente estrutural das membranas biolgicas
Isolamento e proteo de rgos
Isolamento trmico
Vitaminas
A maioria dos lipdeos derivada ou possui na sua
estrutura cidos graxos.
CIDOS GRAXOS (AG)
cidos orgnicos com mais de
12 carbonos,
cadeia alquil pode ser
saturada ou insaturada
cidos graxos saturados
No possuem duplas ligaes
Geralmente slidos
temperatura ambiente;
Gorduras de origem animal
so geralmente ricas em AG
saturados
cidos graxos
insaturados:
Possuem uma ou mais
duplas ligaes,
mono ou poliinsaturados;
geralmente lquidos
temperatura ambiente;
Os leos de origem
vegetal so ricos em AG
insaturados;
TRIACILGLICEROL
(TAG)
lipdeos formados pela ligao de 3 molculas de cidos
graxos com o glicerol.
cidos graxos que participam da estrutura de um
triacilglicerol so geralmente diferentes entre si
principal funo: reserva de energia
armazenados no tecido adiposo
fornecem por grama aproximadamente o dobro da energia
fornecida por carboidratos
(FOSFOLIPDEOS)
Lipdios "Polares", que contm fosfato na sua estrutura
desempenham importante funo na estrutura e funo das
membranas biolgicas, por serem anfipticos.
CERAS
Ceras so insolveis em H
2
O tm ao impermeabilizante na
superfcie da pele de animais, nas folhas de plantas e nas
penas de aves.
Exemplos:
cera de carnaba: usada no polimento de carros,
sapatos, pisos, isolante em chips, revestimento de
comprimidos etc.
lanolina: protege a l. rapidamente absorvida pela
pele humana sendo por isso utilizada em cosmticos e
produtos farmacuticos.
ESTERIDES
lipdeos que no possuem AG em sua estrutura.
Destes, o principal exemplo o Colesterol.
COLESTEROL
esteride importante na estrutura das membranas biolgicas,
atua como precursor na biossntese dos esterides
biologicamente ativos, como os hormnios esterides, os cidos
e sais biliares e a vitamina D.
LIPOPROTENAS
A frao lipdica das lipoprotenas muito varivel, e permite a
classificao das mesmas em 5 grupos, de acordo com suas
densidades e mobilidade eletrofortica:
Quilomicron
Lipoprotena de muito baixa densidade (VLDL)
Lipoprotena de densidade intermediria (IDL)
Lipoprotena de baixa densidade (LDL)
Lipoprotena de alta densidade (HDL)
Quilomcron = a lipoprotena menos densa, transportadora de
triacilglicerol exgeno na corrente sangunea.
VLDL = "Lipoprotena de Densidade Muito Baixa", transporta
triacilglicerol endgeno.
IDL = "Lipoprotena de Densidade Intermediria", formada na
transformao de VLDL em LDL.
LDL = "Lipoprotena de Densidade Baixa", a principal
transportadora de colesterol para os tecidos; seus nveis
aumentados no sangue aumentam o risco de infarto agudo do
miocrdio.
HDL = "Lipoprotena de Densidade Alta"; atua retirando o
colesterol da circulao. Seus nveis aumentados no sangue esto
associados a uma diminuio do risco de infarto agudo do
miocrdio.
LIPOPROTENAS
LDL = colesterol ruim
HDL = bom colesterol
LDL: transporta o colesterol para os tecidos e sua oxidao leva
a produo da placa de ateroma
HDL: tira o excesso de colesterol dos tecidos e leva de volta ao
fgado.
O colesterol o mesmo em ambas lipoprotenas
Arteriosclerose
1 2
4
3
5
Funo Biolgica dos
Lipdeos
Combustvel: reservas energticas (gorduras e leos)
armazenados nos adipcitos.
Estrutural: esto relacionados na formao de membranas.
Isolantes: so excelentes isolantes encontram-se nas
gorduras neutras em tecidos subcutneos e em torno de alguns
tecidos (proteo trmica e mecnica).
Funes Especiais: sinalizao (hormonal), cofatores de reaes
enzimticas (vitamina K) ou ubiquinona. O lipdeo retinal
carotenide por ser sensvel luz tem papel central no processo
de viso.
CARBOIDRATOS
CARBOIDRATOS
tambm chamados sacardeos, glicdios, oses, hidratos de
carbono ou acares
biomolculas mais abundantes na natureza
maior parte da ingesto calrica da maioria dos
organismos
frmula geral : [CH
2
O]
n
, da o nome "carboidrato" ou
"hidrato de carbono"
Fonte de energia
Reserva de energia
Estrutural
Matria-prima para a biossntese
Informacional glicoclix
MONOSSACARDEOS
slidos, cristalinos, incolores, solveis em H
2
O, alguns tm
sabor doce
frmula geral : [CH
2
O]n, n3
cadeia no ramificada de tomos de C ligados entre si por
ligaes simples. Um dos C ligado ao O por uma dupla ligao
(carbonila), os outros C esto ligados a OH (hidroxila)
Classificao dos monossacardeos tambm pode ser baseada
no nmero de carbonos de suas molculas:
TRIOSES (3C),
TETROSES (4C),
PENTOSES(5C): Ribose, Arabinose, Xilose
HEXOSES (6C): Glicose, Galactose, Manose, Frutose
etc
POLISSACARDEOS
Macromolculas formadas por centenas a milhares de
unidades monossacardicas ligadas entre si por ligaes
glicosdicas.
Polissacardeos importantes formados pela polimerizao da
glicose: amido, glicognio e celulose.
AMIDO:
polissacardeo de reserva da clula vegetal
Formado por molculas de glicose ligadas entre
si atravs de numerosas ligaes
AMILOSE
AMILOPECTINA
GLICOGNIO:
Polissacardeo de reserva da clula animal (fgado manuteno
da glicemia; e msculos fornecimento energia exerccio intenso).
semelhante ao amido, mas possui um nmero bem maior de
ligaes , o que confere um alto grau de ramificao sua molcula
Alto nmero de ramificaes facilita a ao da enzima glicognio
fosforilase (do msculo e do fgado) liberando grandes quantidades
de monossacardeo rapidamente.
QUEBRA DA LIGAO GLICOSDICA
Digerida por -amilases (enzimas que hidrolisam a ligao
glicosdica)
ptialina (ou amilase salivar): inicia a degradao dos carboidratos
na boca dos mamferos.
glicognio
Clula do
fgado:
Hepatcito
Substncia de reserva
CELULOSE:
Carboidrato mais abundante na natureza.
Funo estrutural na clula vegetal, como um componente importante
da parede celular.
Este tipo de ligao glicosdica confere molcula uma estrutura
espacial muito linear, que forma fibras insolveis em gua e no
digerveis pelo ser humano.
BIBLIOGRAFIA
ALBERTS, B. Biologia molecular da Clula. Artmed,
2004
Earnshaw, W. C.; Pollard T.D. Biologia Celular.
Elsevier, 2006
CAMPBELL, M.K. Bioqumica. Artmed, 2000
NELSON, D.L. & COX, M.M. Lehninger Princpios de
Bioqumica. 2002
Obrigado !
ale_vidotto@hotmail.com