Metodologia Analtica I sem/2013 Profa Ma Auxiliadora - 1

Universidade Federal de Juiz de Fora

Instituto de Cincias Exatas
Departamento de Qumica

Disciplina
Metodologia Analtica QUI102
1 semestre 2013

AULA 02
Profa. Maria Auxiliadora Costa Matos


Download aulas: http://www.ufjf.br/nupis/




Metodologia Analtica I sem/2013 Profa Ma Auxiliadora - 2
TRATAMENTO DAS AMOSTRAS

A primeira etapa de uma anlise consiste em submeter a amostra a um tratamento
adequado visando sua preparao para os passos subsequentes da anlise.




PREPARO DA AMOSTRA
Processo que converte uma amostra bruta em uma amostra homognea de laboratrio.
Tambm, refere-se, as etapas que eliminam as espcies interferentes ou que concentram
os constituintes em anlise.

Melhor resultado no menor tempo;
Mnima contaminao;
Baixo consumo de reagentes;
Menor gerao de resduos.

a) Operaes prvias.
b) Dissoluo, decomposio da amostra.
c) Separao dos constituintes.
d) Concentrao do analito.
Pr-tratamento Tratamento Preliminares Preparo da amostra


Metodologia Analtica I sem/2013 Profa Ma Auxiliadora - 3

a) Operaes prvias: normalmente so procedimentos fsicos

Anlise direta de slidos: ex. espectrometria de fluorescncia de raios X
(polimento da superfcie).

Lavagem: Normalmente utilizado para remoo de poeiras, terra, areia e ou
outros resduos do local de coleta que poderiam causar contaminao. Neste
procedimento importante considerar o risco de perda de componentes de interesse por
lixiviao, principalmente nos casos de microanlises. Ex procedimentos: lavagem com
gua ou detergente neutro ( 0,3 %v/v).
Ex. Organismos (razes, frutos e folhas de plantas; bivalves; amostras de cabelo, etc).

Secagem: Utilizado principalmente em amostras slidas com teor varivel de
guas. O processo e as condies de temperatura so selecionados conforme os riscos
de perdas por volatilizao ou decomposio trmica da amostra. Ex processos: Estufa,
liofilizador ou dessecador. Ex amostras (compostos estudados): solos e sedimentos 105
C (no volteis) e 45 C (poluentes orgnicos volteis).







Metodologia Analtica I sem/2013 Profa Ma Auxiliadora - 4

Moagem de slidos: Na moagem em moinhos geralmente ocorre o choque entre a
amostra e o material que compem o moinho. O material do moinho poder ser uma fonte
de contaminao da amostra. A moagem da amostra promove:
-Reduo do tamanho das partculas aumenta a rea superficial da amostra promovendo
maior interao com os reagentes, facilitando a dissoluo, extrao, etc. da amostra.
-Homogeneidade da amostra
-Pode causar alterao da composio (calor, oxidao)

Filtrao







Ex: Moagem grosseira 5 mm (moinhos de facas),
Moagem fina 63 m (almofariz, moinhos de discos),
Moagem extrafina 63 m (moinho de bolas, moinhos de jatos de ar, Moinho criognicos).
Em algumas tcnicas analticas importante a remoo de
partculas em suspenso. Ex. HPLC.
-Pr-filtro de fibra de vidro com porosidade de 1 a 5 m para
amostras com elevado teor de slidos.
-Filtros de membrana com porosidade de 0,45 m ou 0,20 m
O lquido recolhido considerado a frao solvel da amostra.
Ex.: Membrana de teflon, de celulose, de nylon, etc



Metodologia Analtica I sem/2013 Profa Ma Auxiliadora - 5


Moinho de facas

Moinho de discos

Moinho de bola

Almofariz de gata
Moinho de jato de ar promove o choque
entre as partculas da prpria amostra.
Moinho criognicos Os materiais sensveis
ao calor ou com baixo ponto de fuso podem
ser modos atravs do processo criognico.
-Aumento da produtividade 2 a 3 vezes,
-Partculas com distribuio granulomtrica
mais fina
- Reduo de desgaste das ferramentas de
moagem
- Atmosfera inerte.


Metodologia Analtica I sem/2013 Profa Ma Auxiliadora - 6
b) Separao dos constituintes: os objetivos so geralmente pr-concentrao dos
analitos, a eliminao ou reduo de interferentes de forma que a informao analtica
quantitativa sobre a mistura complexa possa ser obtida. Geralmente realizada aps a
dissoluo ou decomposio da amostra.

Isolam o analito dos constituintes potencialmente interferentes.

Extrao lquida
Extrao em fase slida (SPE)
Cromatografia em colunas abertas
Destilao, vaporizao, etc




Metodologia Analtica I sem/2013 Profa Ma Auxiliadora - 7
DECOMPOSIO E DISSOLUO DE AMOSTRAS

A maioria das tcnicas analticas requer que a amostra esteja em soluo, sendo
geralmente uma soluo aquosa.


Dissoluo (solubilizao): Transformao direta da amostra em uma soluo, envolvendo
ou no uma reao qumica.

Abertura (decomposio): Converter a amostra atravs de uma reao qumica em outra
forma slida que seja facilmente solvel. So processos mais enrgicos de tratamento.

Digesto termo empregado para decomposio materiais orgnicos.






Vantagens
Facilidade no preparo de curvas analticas
Fcil diluio da amostra
Separao de constituintes
Desvantagens
Solubilidade
Decomposio qumica drstica


Metodologia Analtica I sem/2013 Profa Ma Auxiliadora - 8
DISSOLUO DE AMOSTRAS INORGNICAS

PROCEDIMENTO IDEAL

Capaz de dissolver a amostra completamente, sem deixar nenhum resduo.
Razoavelmente rpido.
Os reagentes utilizados no devem interferir na separao e na determinao do(s)
analito(s) devem ser de fcil remoo da soluo da amostra.
Os reagentes devem ter alto grau de pureza para no contaminar a amostra.
As perdas dos analitos por volatilizao, formao de aerossis, adsoro e absoro nas
paredes dos recipientes de reao devero ser desprezveis.
O recipiente onde ocorre a reao deve ser inerte aos reagentes e amostra.
As contaminaes do ambiente devem ser desprezeis
Mnimo de insalubridade
A soluo final dever conter todos os analitos de interesse.
1. Dissoluo direta em gua sem reaes qumicas
2. Dissoluo em cido ou mistura de cidos, com mudana do estado de oxidao do analito.
3. Dissoluo aps fuso da amostra com fundente.


Metodologia Analtica I sem/2013 Profa Ma Auxiliadora - 9
DISSOLUO & DECOMPOSIO: FONTES DE ERROS

Dissoluo incompleta dos analitos.
Perdas do analito por volatilizao - cidos fortes (CO
2
, SO
2,
H
2
S, etc.), meio
alcalino (NH
3
), agentes oxidantes (Cl
2
, Br
2
ou I
2
), agentes redutores (arsina AsH
3
).
Contaminao dos reagentes - critico para anlise de componentes traos.
Contaminao por recipientes da amostra - ocorre geralmente em decomposio
envolvendo fuso a temperaturas elevadas, sendo um fato critico para anlise de
componentes traos.

ASPECTOS ASSOCIADOS SEGURANA

Possibilidade de queimaduras com HF
Possibilidade de exploses com uso de HClO
4

Formao de vapores txicos de cidos volteis e de produtos gasosos (H
2
S, SO
2
,
Cl
2
, NO
2
.


Metodologia Analtica I sem/2013 Profa Ma Auxiliadora - 10
MTODOS PARA DISSOLUO EM CIDOS

Em alguns casos o tratamento com cidos pode resultar em uma dissoluo no
quantitativa das amostras, ou seja, uma dissoluo seletiva.

A escolha do cido ou mistura de cidos:
Composio da amostra,
Propriedades qumicas e concentrao do analito,
Forma associao do analito a matriz.

Propriedades dos cidos
Fora do cido
Ponto de ebulio
Poder oxidante
Poder complexante
Solubilidade dos sais correspondentes
Grau de pureza ou facilidade de purificao
Segurana de manipulao

HCl
HNO
3

H
2
SO
4

HClO
4
(risco de exploses - concentrao superior a 72%)
HF (muito utilizado para silicatos)


Metodologia Analtica I sem/2013 Profa Ma Auxiliadora - 11
A) CIDOS MINERAIS DILUDOS

Utilizado quando a amostra insolvel em gua. Normalmente h a formao de um sal do
metal solvel em gua, ou algum outro produto dependendo da natureza qumica da
amostra.

Recomendado com mtodo preliminar
Maioria dos metais mais eletropositivo que H, xidos simples, carbonatos e sulfatos
dos metais. (Exceo: Cu Cu
2+
)
Passivao: formao de uma pelcula insolvel dos xidos que impedi a ao do
cido.Ex.: Al, Cr, Mo e W.


B) CIDOS MINERAIS CONCENTRADOS

Aplicados a materiais mais resistentes, ligas metlicas, minerais comuns, solos, rochas,
argilas, aluminatos e silicatos (quente).

Ebulio em frasco aberto coberto com vidro de relgio
Ebulio com refluxo
Ebulio com evaporao do cido at quase a secura
Sistema fechado



Metodologia Analtica I sem/2013 Profa Ma Auxiliadora - 12
c) MISTURA DE CIDOS
A dissoluo da amostra pode ser feita inicialmente com uma mistura de dois cidos
seguida da adio de um terceiro cido ou vice-versa.

Diferentes propriedades, qumicas e fsicas, teis podem ser combinadas.
Ex: Complexante e oxidante HF e HNO
3
, HF e HClO
4


Reao entre os cidos formando produtos mais reativos
Ex: gua Rgia HNO
3
/HCl (3:1), formao cloreto de nitrosila (NOCl) eficiente para
metais nobres.

Moderao de uma propriedade. Ex: HNO
3
e HClO
4

HNO
3
modera a ao oxidante do HClO
4



d) MISTURA DE CIDOS COM OUTROS REAGENTES
Agentes oxidantes Aumentar o poder oxidante
Ex: H
2
O
2
utilizada como oxidante auxiliar (agente oxidante poderoso, alto grau de
pureza, forma H
2
O como produto de decomposio).

Eletrlitos inertes Aumentar o ponto de ebulio do cido promovendo uma maior
temperatura final para a dissoluo da amostra. Ex: Na
2
SO
4
, K
2
SO
4
, (NH
4
)
2
SO
4
aumenta
p.e. do H
2
SO
4
.


Metodologia Analtica I sem/2013 Profa Ma Auxiliadora - 13
DECOMPOSIO POR FUSO

Mtodo empregado quando as amostras slidas no so dissolvidas com cidos minerais
concentrados a quente ou so lentamente atacados pelos cidos ou parcialmente
dissolvidos. tambm empregado para amostras que formam solues instveis ou pouco
solveis com tratamento cido.

A amostra moda misturada ao fundente em uma proporo adequada e colocada em um
cadinho (de porcelana ou nquel ou platina). A mistura aquecida at que a mistura fique
totalmente dissolvida na soluo fundida. Aps resfriamento a temperatura ambiente, o
lquido fundido se solidifica, porm dever ser facilmente dissolvido em gua ou cido
diludo.

Ex amostras: Cimentos, aluminatos, silicatos, minrios Ti, Zr, minrios mistos de Be, Si,
Al, resduos insolveis de Fe, xidos de Cr, Si, e Fe, xidos mistos de tungstnio, silcio e
alumnio.

Fundente sal de um
metal alcalino.
Fundido mistura final
solvel em gua ou cidos.


Metodologia Analtica I sem/2013 Profa Ma Auxiliadora - 14
DECOMPOSIO POR FUSO

























Caractersticas
Alcana altas temperaturas (300 a mais de 1000C).
Normalmente necessita de alta proporo do fundente em relao a
amostra (10:1).
Perdas por volatilizao
Contaminao por impurezas do reagente
Contaminao por material resultante do ataque ao recipiente.

Tipos de fundentes
a) Bsicos - Usados para o tratamento de materiais cidos.
Ex: carbonatos, hidrxido, perxidos e boratos de metais alcalinos.

b) cidos - Usados para tratamento de materiais bsicos.
Ex: pirofosfato, fluoreto xidos de boro.

Ex. Na
2
CO
3
utilizado para decomposio de matrias contendo slica.
Aps a fuso obtido silicato de sdio.
Na
2
CO
3
2Na
+
+ CO
2
+ O
2-

SiO
2
+ O
2-
Na
2
SiO
3

(slica) (silicato de sdio solvel em gua)
Ex. fundentes (PF):
Na
2
CO
3
(851C),
NaOH (318C),
B
2
O
3
(450C),
Li
2
B
4
O
7
(920C)
Na
2
O
2
.

Aquecimento em mufla


Metodologia Analtica I sem/2013 Profa Ma Auxiliadora - 15
EXTRAO ASSISTIDA POR ULTRASSOM

A irradiao de ultrassom em solues induz o fenmeno de cavitao acstica no meio
lquido. Na interface slido-lquido ocorre, crescimento e imploso de bolhas de cavitao
que leva a formao de micro jatos com energia suficiente para causar fragmentao e
aumento da rea superficial para extrao.















H tambm o surgimento de fissuras nas partculasa da
amostra atravs das quais a soluo extratora poder
penetrar no interior das partculas.

H diminuio do gradiente de concentrao pelo
aumento do transporte de massas ocasionado pela
turbulncia e micro jatos.
Banhos Ultra-som: acoplamento de um ou mais cristais
piezeltricos na parte inferior de um vaso metlico.
Aplicando uma diferena de potencial nas faces laterais
de um transdutor piezeltrico, so provocadas vibraes
nas faces perpendiculares do dispositivo, e este vibrar
a uma freqncia pr-determinada (20 e 40 kHz)

Micro jato


Metodologia Analtica I sem/2013 Profa Ma Auxiliadora - 16
DECOMPOSIO POR MICRO-ONDAS

Micro-ondas so radiaes eletromagnticas, portadoras de energia, com
frequncias que varia de 300 a 300000 MHz. Para fins cientficos a usual
2450 MHz (comprimento de onda 12,2 cm e energia 10
-5
eV).

Decomposio assistida por micro-ondas facilita a medida da temperatura
e presso do mistura amostra-cido durante a reao.

Permiti realizar decomposio em recipientes fechados em presses
elevadas, sob temperaturas maiores que podem ser monitoradas
continuamente.

A programao do tempo e da potncia aplicada podem ser controlados
para melhorar a decomposio da amostra.

Quando um material no transparente s micro-ondas absorve este tipo de
radiao, o material sofre aumento considervel na sua temperatura devido a
interao da radiao eletromagntica com ons dissolvidos e com o solvente,
provocando os fenmenos de migrao inica e rotao de dipolos.


Metodologia Analtica I sem/2013 Profa Ma Auxiliadora - 17
DECOMPOSIO POR MICRO-ONDAS













Micro-ondas no so radiaes
ionizantes. A energia das micro-
ondas muito menor que a
energia necessria para quebrar
as ligaes das molculas
orgnicas mais comuns.
Migrao inica (ons): os ons se deslocam
produzindo fluxo de corrente. O movimento de outros
ons no fluxo oposto produz calor, aumentando a
temperatura no meio.

Rotao de dipolos (Solvente): as molculas
dipolares se alinham com os polos do campo eltrico
alternado gerado pela radiao micro-ondas.

Aplicao: Decomposio de amostras orgnicas e
inorgnicas.




Metodologia Analtica I sem/2013 Profa Ma Auxiliadora - 18
FORNOS DE MICRO-ONDAS





















Forno Micro-ondas com cavidades
A radiao produzida pelo magnetron transportada
atravs do guia de ondas para a cavidade, sendo
dispersa em direes especificas, permitindo maior
irradiao da zona prxima a cavidade.

Magnetrons nodo e ctodo e uma srie de
cavidades. Ao aplicar alta voltagem so gerados
eltrons que entram em ressonncia sob influncia
do campo magntico produzindo oscilaes
magnetrons.

Forno Micro-ondas com cavidades
Forno Micro-ondas focalizado
Decomposio em frascos fechados (quartzo, vidro
borosilicato ou PTFE) e sob presso atmosfrica.
Uma tampa adaptada na parte superior impedindo a
contaminao pelo ar e permitido adio de
reagentes.

Forno Micro-ondas focalizado


Metodologia Analtica I sem/2013 Profa Ma Auxiliadora - 19
EXTRAO LQUIDO-SLIDO

Amostra a fase lquida e a fase extratora um slido.
Concentrao de compostos orgnicos semi-volteis (demanda emergencial).

EXTRAO EM FASE SLIDA (SPE)

Tcnica de separao baseada nos mecanismos de separao da cromatografia
lquida clssica.











A soluo contendo a amostra
colocada no topo do cartucho de
extrao (contem a fase slida), sendo
aspirada com um pequeno vcuo, ou
pressionada com uma seringa ou gs.

Aps a fase lquida ter sido drenada, o
analito retido no cartucho eluido com
um pequeno volume de solvente, de
forma a obter a soluo do analito em
concentrao apropriada para a anlise.

Polipropileno
(grau mdico)
Fase slida
Disco polietileno
(20 m)
Reservatrio
o


Metodologia Analtica I sem/2013 Profa Ma Auxiliadora - 20
PRINCIPAIS ETAPAS EMPREGADAS EM SPE




















SPE_Manifold



Metodologia Analtica I sem/2013 Profa Ma Auxiliadora - 21
MODOS DE OPERAO EM SPE

1. Concentrao do analito: Enriquecimento
Um grande volume de amostra passado pelo cartucho, o analito retido na
fase estacionria, eluindo os interferentes e o solvente. Na etapa seguinte, o
composto de interesse eluido com pequeno volume de solvente obtendo-se
uma soluo concentrada do analito.



2. Isolamento do analito (clean up)
O objetivo principal isolar os analitos de interesse dos interferentes da
matriz. Em alguns casos, o analito est presente na amostra em concentrao
adequada para a anlise, porm alguns constituintes da matriz podem
interferir na anlise. Em outros casos, o isolamento e concentrao da amostra
so realizados no mesmo procedimento.
Ex. Anlise de HPAs em amostras de gua potvel.





Metodologia Analtica I sem/2013 Profa Ma Auxiliadora - 22
MODOS DE OPERAO EM SPE


3. Isolamento do matriz (clean up)
Apenas os interferentes da matriz so retidos na fase slida. O analito elui
direto com solvente e coletado para a anlise.



4. Estocagem do analito
A amostra passada pelo cartucho, os analitos so retidos na fase slida e em
seguida so conservados em baixas temperaturas at o momento de eluio. As
vantagens deste mtodo so: evitar transporte de grandes volumes de
amostras, permitir anlise de compostos lbeis ou volteis, coleta de amostras
em locais distante do laboratrio de anlise.
H necessidade de estudos preliminar sobre estabilidade do analito no
cartucho (tempo de estocagem, temperatura, natureza da fase).





Metodologia Analtica I sem/2013 Profa Ma Auxiliadora - 23
MICROEXTRAO EM FASE SLIDA (SPME)




Resina de troca inica; somente os nions so atrados para ela
Tcnica baseada na soro dos analitos por uma fibra de
slica modificada quimicamente com posterior dessoro
trmica do analitos em um cromatgrafo a gs.

A seringa utilizada para introduzir a fibra no injetor e
para proteg-la enquanto no estiver em uso.

Fibras 10 cm (1 a 2 cm recoberto com fase estacionria)
Di ext fibra 170 m


Metodologia Analtica I sem/2013 Profa Ma Auxiliadora - 24
MODO DE EXTRAO

1. Extrao direta: (Volatilidade mdia a baixa Amostras gasosas, lquidas)
O recobrimento da fibra inserido na diretamente na amostra e os analitos
so transportados da amostra par a fase extratora.
A agitao mecnica utilizada pra acelerar este processo.
Em amostras gasosas, a conveco natural do ar suficiente para estabelecer
o equilbrio.

2. Headspace: (Volatilidade mdia a alta Amostras lquidas e slidas)
Os analitos devem ser transportados atravs de barreiras de ar antes de
atingirem o recobrimento da fibra. Este procedimento protege a fibra de
possveis danos causados por interferentes de elevada massa molar ou baixa
volatilidade (materiais hmicos), protenas, etc.
Permiti modificao da matriz sem danos na fibra (pH).
A concentrao de equilbrio independe da localizao da fibra no headspace.

3. Extrao indireta: (Volatilidade baixa amostras complexas)
Membrana protetora sobre a fibra para sua proteo amostras de fluidos
biolgicos.