LIC.

SUAREZ AGUILAR
DANIEL ANGEL
HISTORIA
1984 en Lyon, Francia, por el Dr.
Lapierre
1988 en Europa
1994 Aprobacin de la
Administracin de Drogas y
Alimentos de los Estados
Unidos de Amrica (FDA).
Estandarizar las reacciones de
aglutinacin
Reducir los resultados falsamente
negativos
Crear interpretaciones ms sencillas y
consistentes
Se investig con diferentes materiales,
tales como gelatina, mallas de plstico,
poliacrilamida, esferas de slica R, ficoll R,
percoll, steres de ftalato, Sephadex
PARTES BASICAS
EQUIPOS:
Centrifuga
Incubadora
REACTIVOS E INSUMOS :
Diluyente 1 - Bromelina
Diluyente 2 - LISS
Tarjeta
TARJETA
MICROTUBO
PARTES
Cmara Incubacin
Tubo Largo
Fondo Cnico
PARTES MICROTUBO
PARTICULAS DE GEL
ESTRUCTURA PARTICULA
COMPOSICION PARTICULA DE GEL
Poliacrilamida G 100 superfino
Dimetro : 50 um
Lisas
Inertes
FUNCION GEL
FUNCION
Medio de reaccin que permite
separar las clulas de acuerdo con su
tamao
Atrapar los GR aglutinados en el gel y
La interpretacin de estos resultados
por gradiente de aglutinacin
GEL NEUTRO
GEL ESPECIFICO
GEL ANTIGLOBULINA
GEL NEUTRO
COMPOSICION
Esferas de Gel
Tampn
USOS
Grupo Serico
Pruebas Enzimticos
Estudio Anticuerpos Fros.
GEL ESPECIFICO
COMPOSICION
Esferas de gel
Tampn
Antisuero especifico
USOS
Grupo : ABO/Rh
Grupo :
C,c,E,e,Kell,Duffy,MN,Ss
GEL ANTIGLOBULINA
COMPOSICION
Esferas de Gel
Tampn
Antiglobulina
USOS
Deteccin, Identificacin y Titulo de
Anticuerpos
Pruebas Cruzada
Coombs Directo / Indirecto
VENTAJAS DEL GEL
SENSIBILIDAD
Uso de Enzimas (Bromelina o Papaina)
Uso de LISS
Contacto Prolongado
Potentes Antisueros
BIOSEGURIDAD
No se lavan Hemates
Menor formacin de Aerosoles
VENTAJAS GEL
REACCIONES ESTANDARIZADAS
Las Reacciones POSITIVAS DEBILES y las
NEGATIVAS siempre son las mismas
No hay variacin ente PERSONAS Y
LABORATORIOS
TRABAJO ESTANDARIZADO
Procedimientos Idnticos
Vol. GR = 0.4 0.5 ul / Tubo
Tiempo Incubacin = 15 minutos
Centrifugacin = 85G x 10 minutos
PRINCIPIO DE LATECNICA
Principio de las reacciones clsicas entre
antgeno y anticuerpos
Los glbulos rojos o la mezcla de eritrocitos y
suero son colocados en la parte superior del
microtubo, y se realiza una incubacin a 37C
o bien a temperatura ambiente si es
necesario.
Luego el microtubo se centrifuga bajo
condiciones establecidas (15 minutos a 900
rpm).
Durante la centrifugacin, los glbulos rojos se
separan del medio donde estn suspendidos y
pasan a travs del gel.
Algunos glbulos rojos pueden ser atrapados
y quedarse en el gel y las clulas libres pasan
a travs del gel y forman un botn en el fondo
del tubo
Despus de la centrifugacin las reacciones
negativas son claramente diferentes de las
positivas, las cuales varan de acuerdo con la
fuerza de reaccin
PRINCIPIO DE LATECNICA
PRINCIPIO
REACCIONES EN GEL
POSITIVO POSITIVO
NEGATIVO
REACCION NEGATIVA
REACCION POSITIVA
INTERPRETACION EN EL GEL
0 + 1+ 2+ 3+ 4+ DP
Pequeas cantidades de muestra
(desde 10 hasta 25 l, dependiendo de
la prueba)
Estandarizacin de procedimientos
Mayor sensibilidad
Estandarizacin en interpretacin de
resultados
Resultados estables,
Rapidez
Mayor bioseguridad para el usuario del
banco al estar trabajando con muestras
infectocontagiosas
VENTAJAS
DESVENTAJA
El costo
La limitacin al trabajar con
autoanticuerpos
PROCEDIMIENTO
GRUPO SANGUINEO
Muestra : GR CON/SIN Anticoagulante
Diluir la Muestra
LISS 0.5 ml
GR 25 ul
Dispensar 10 ul a cada microtubo
Centrifugar
Lectura
Interpretacin
COOMBS DIRECTO
Muestra : GR CON/SIN Anticoagulante
Diluir la Muestra
LISS 1.0 ml
GR 10 ul
Dispensar 50 ul a cada microtubo
Centrifugar
Lectura
Interpretacin
PROCEDIMIENTO
PRUEBA CRUZADA SIMPLE
Muestra : SUERO / PLASMA
Diluir la Muestra DONANTE
LISS 1.0 ml
GR 10 ul
Dispensar 50 ul GR 5% y adicionar 25 uL de
SUERO
Incubar 37 / 15 minutos
Centrifugar
Lectura
Interpretacin
PROCEDIMIENTO
MUESTRA 5% (GR 25ul / 0.5 ml LISS)
DISPENSAR 10 ul GR 5% AL
MICROTUBO
CENTRIFUGAR
O RH NEGATIVO O RH POSITIVO
O RH POSITIVO DEBIL