EL ADN

El ADN es el encargado de llevar informacin gentica de todos los seres vivos. Desde su conocimiento muchos secretos
de la vida han sido desvelados. Es el encargado de transmitir rdenes para controlar todas las clulas de todos los
organismos.
1.- Composicin qumica del ADN
El ADN es una molcula formada por la unin de otras molculas ms sencillas llamadas nucletidos, stos equivalen a
los eslabones de una larga cadena que, adems, estn compuestos por tres tipos de componentes qumicos.
Una molcula de cido fosfrico (en forma de grupo fosfato)
Una pentosa (hidrato de carbono de cinco tomos de carbono) denominado desoxirribosa.
Una base nitrogenada que puede ser Adenina, Guanina, Citosina y Timina.
LA Adenina y Guanina, presentan una estructura con un doble anillo tpico de los compuestos denominados
purinas. Y las Citosina y Timina, formadas por un solo anillo del tipo pirimidina.
Millones de nucletidos se unen en cadenas no ramificadas. El orden en que se unen unos con otros, denominado
secuencia, reside la informacin necesaria para las protenas. Es decir, para el mantenimiento y el desarrollo de la vida.
2.- La estructura del ADN: Una espiral especial
El ADN est constituido por dos largas cadenas de nucletidos enrollados en una doble hlice. La Adenina se une a la
Timina con un doble enlace, y la Citosina se une a la Guanina con un triple enlace. La unin especfica de unas bases
nitrogenadas con otras se denomina par de bases.
El ADN de los virus est formado por una molcula circular o lineal encerradas en una cubierta potencial
llamada Cpsida
El ADN de las clulas procariotas, y de las mitocondrias y los cloroplastos de las clulas eucariotas, es una
doble hlice circular.
En el interior del ncleo de las clulas eucariotas, el ADN est asociado a unas protenas llamadas histonas,
formando la cromatina. Durante la divisin celular, la cromatina se condensa y forma cromosomas lineales,
estructuras en forma de bastoncillo, de brazos cortos y gruesos. Cada segmento de cromosoma, y por tanto,
de ADN con las instrucciones precisas para poder sintetizar una protena es un gen.
3.- El ADN se replica
Es la nica molcula en los seres vivos que puede hacer una copia exacta de s misma.
La rplica de la molcula del ADN sucede antes de la divisin celular. Quiere decir que las clulas hijas heredan la misma
dotacin gentica que la clula madre. As, la informacin gentica se transmite de generacin en generacin.
En la replicacin de la molcula del ADN, la doble hlice se libera de las histonas y se abre como una cremallera, de
manera que cada una de las hebras de ADN sirve como molde para que se sintetice su cadena complementaria.
Las ADN polimerasas van uniendo uno a uno los nucletidos. Cada base solo puede emparejarse con su
complementaria. A-T G-C
DE este molde se formara una nueva cadena complementaria a la que sirvi de molde e idntica a la cadena que
previamente estaba unida a la misma. Al final del proceso habr dos molculas de ADN bicentenario. Cada una de ellas
estar formada por una cadena de la molcula inicial y otra nueva.
Durante la rplica de ADN se producen errores que dan lugar a mutaciones. Algunas mutaciones no tienen
consecuencia, pero otras causan enfermedades y procesos degenerativos y malignos, como el cncer. Y otras, junto con
la seleccin natural, son las causantes de la evolucin.
La trascendencia de la complementariedad de bases por un lado, permite copiar exactamente las cadenas de ADN, y
por otro, es la base de gran parte de las actuales tcnicas de biologa molecular.
4.- El ADN transmite su informacin
Los genes llevan instrucciones precisas para la sntesis de una determinada protena. Esta compleja mquina se
encuentra en todas las clulas de todos los seres vivos.
Las protenas son molculas de gran tamao formadas por la uni de otras ms sencillas, los aminocidos, de los que
existen 20 tipos diferentes. Cada protena se caracteriza por la estructura que adopta en el espacio y por su secuencia,
es decir, el nmero, el tipo y el orden especfico en que estn dispuestos sus aminocidos.
Las funciones que desempean son muy diversas: algunas forman estructuras, como los msculos o las uas, otras
regulan y coordinan las funciones de los distintos rganos. Las protenas son las molculas responsables de la actividad
biolgica y las que confieren a cada individuo su especificidad (la forma de los guisantes lisa o rugosa, el color de los
ojos azules o negros, etc)
a) La expresin de los genes: transcripcin y traduccin
En las clulas eucariotas, el ADN se encuentra protegido en el interior del ncleo, del cual no puede salir. La sntesis de
protenas se realiza en unos orgnulos, los ribosomas, situados en el citoplasma celular.
Para que las instrucciones lleguen desde un gen hasta los ribosomas, otro cido nucleico, el ARN se encarga de leer la
informacin gentica del ADN y llevarla desde el ncleo hasta el citoplasma. El ARN est formado por una sola cadena y
por las mismas bases que el ADN excepto la Timina que es sustituida por el Uracilo, Entonces la Adenina se une con el
Uracilo complementariamente. A-U G-C
El proceso se sntesis del ARN se denomina transcripcin y el ARN sale del ncleo llevando el mensaje gentico para
dirigir la sntesis de protenas. ARN mensajero (ARNm)
Una vez en el citoplasma, el ARNm se une a un ribosoma el cual lee y traduce el mensaje cifrado. Este proceso se
denomina traduccin y en l se usa un diccionario llamado cdigo gentico que asigna las equivalencias entre el
lenguaje del ARNm (secuencia de bases) y el lenguaje de las protenas (secuencias de aminocidos). A cada grupo de de
tres bases de ARNm, llamado codn, le corresponde uno de los 20 aminocidos que forman las protenas. El ribosoma
se mueve a lo largo de la cadena de ARNm leyendo el codn y va uniendo los aminocidos que llegan al ribosoma
transportados por otro tipo de ARN llamado ARN de transferencia (ARNt)









TECNOLOGA DEL ADN RECOMBINABLE
La tecnologa del ADN recombinante comprende una serie de tcnicas que permiten manipular el ADN, es decir, cortar,
aislar, pegar, reproducir y secuenciar fragmentos especficos de ADN de cualquier organismo
Adems, la tecnologa del ADN recombinante incluye las tcnicas necesarias con las que se puede insertar un
fragmento de ADN de inters, que proviene de un organismo donante, en otra molcula de ADN, llamada vector. Como
resultado se obtiene una molcula de ADN con una nueva combinacin, construida por una parte del ADN insertado y
por otra de ADN vector.
El ADN recombinante es cualquier molcula de ADN formada por la unin de segmentos de ADN de origen diferente.
Tipos de tcnicas:
a) Enzimas celulares
En las clulas vivas, el ADN es cortado y vuelto a unir una y otra vez por enzimas, un tipo de protenas que han sido
identificadas y purificadas por los cientficos para usarlas en los laboratorios.
Las enzimas de restriccin o endonucleasas de restriccin son sintetizadas por las bacterias para proteger su
ADN de un ADN invasor. Funcionan como unas tijeras qumicas que cortan el ADN extrao en fragmentos.
Las ligasas son enzimas que unen distintos fragmentos de ADN pegando sus extremos.
b) Anlisis de fragmentos de ADN
Una vez que las enzimas de restriccin han cortado un trozo de ADN, los fragmentos de distinto tamao se pueden
separar y analizar mediante diferentes tcnicas siempre usando una de ellas la electroforesis en gel de agarosa.
La electroforesis en gel de agarosa separa los fragmentos de AD en funcin de su tamao y carga elctrica.
El suporte que utiliza para que el ADN se pueda mover es la agarosa, un polisacrido extrado de las algas rojas y de
comportamiento parecido a la gelatina ya que despus de disolverse en agua hirviendo se transforma en gel a medida
que se enfra.
El procedimiento para realizar una electroforesis en gel de agarosa es el siguiente:
Se prepara una lmina delgada de agarosa gelificada en un molde adecuado que permite la formacin, en uno
de los extremos, de una hilera de pequeos huecos denominados pocillos para muestra.
A continuacin, la lmina se introduce en una cubeta de electroforesis que contiene una solucin de agua y
sales minerales y que posee electrodos adheridos a cada extremo.
En cada pocillo de gel se carga con una micropipeta, una muestra diferente que contiene la mezcla de los
fragmentos de ADN de distinto tamao que se desea separar.
Como el ADN est cargado negativamente, cuando se aplica la corriente elctrica los fragmentos de ADN
avanzan a travs del gel hasta el electrodo positivo que est situado en el otro extremo.
Puesto que la agarosa acta como un tamiz molecular, los fragmentos ms pequeos cruzan la malla firmada
por el gen ms deprisa y con mayor facilidad que los grandes, de manera que los fragmentos de ADN se
separan de acuerdo con su longitud y en el orden de tamao decreciente.
Despus de un tiempo la corriente se interrumpe.
Para visualizar el patrn de bandas de ADN, la lmina de agarosa se tie con una coloracin especial, el
bromuro de etidio que, cuando se halla unido al ADN, emite fluorescencia bajo la luz ultravioleta.
La electroforesis en gel de agarosa separa una mezcla de molculas de ADN en bandas, cada una de ellas formada por
miles de molculas de ADN de la misma longitud, o muy parecidas.
Esta tcnica permite obtener el patrn de bandas caracterstico y exclusivo del ADN de cualquier organismo, al que se
denomina huella gnica. sta constituye la huella digital del ADN y hace posible averiguar la identidad de un individuo
comparndola con la de otras muestras.
Se utiliza para investigar la autora de un delito, establecer la paternidad y ayudar a los historiadores a resolver antiguos
misterios.
c) Hibridacin mediante sondas de ADN: bsqueda especfica de un gen
La hibridacin del ADN es el proceso en el que dos hebras de ADN de cadena sencilla, con una secuencia de
bases complementaria, se une para originar una molcula de ADN de cadena doble correctamente apareada.
La hibridacin del ADN es el proceso en el que dos hebras de ADN de cadena sencilla, con una secuencia de
bases complementaria, se une para originar una molcula de AD de cadena doble correctamente apareada.
La hibridacin del ADN es una tcnica fundamental para la biotecnologa porque permite identificar la
presencia de un gen que codifica una protena de inters en un cromosoma. Para ello, lo que se hace es un
ensayo de hibridacin con una sonda de ADN.
Una sonda de ADN es un fragmento artificial de ADN de cadena sencilla marcada con radioactividad o
fluorescencia y cuya secuencia de nucletidos es complementaria a la secuencia del ge que se desea
detectar.
Una sonda de ADN que ha hibridado se logra detectar mediante un gran nmero de mtodos, por ejempo
por impresin de una pelcula radiogrfica.
Cuando se quieren analizar simultneamente miles de genes se utiliza los biochips o chips de ADN, cuya
tecnologa ha revolucionado la gentica de la misma manera que los chips de silicio revolucionaron la
industria de los ordenadores.
Los biochips son lminas de vidrio donde se fija en cada una de sus microscpicas celdillas una cantidad
nfima de fragmentos de ADN de cadena simple cuya secuencia de nucletidos acta como sonda para un
gen determinado.
Las miles de microscpicas celdillas se sitan en forma de cuadrcula en la lmina de vidrio y permiten
desarrollar e paralelo miles de reacciones de hibridacin. Como se conoce la situacin exacta de cada sonda
en el biochip, cualquier fragmento de ADN que hibride con una de ellas, podr ser identificado por un gen
concreto simplemente localizando la posicin de la sonda a la que se encuentra unido el biochip
La tecnologa de los biochips se utiliza para:
Detectar mutaciones en genes que pueden causar enfermedades.
Controlar la expresin de los genes en lneas celulares cancerosas.
Diagnosticar enfermedades infecciosas.
Personalizar el tratamiento con medicamentos, porque en funcin de las diferencias genticas
individuales se producen distintas reacciones a dicho tratamiento.
Sugerir nuevas tcnicas diagnsticas o terapias.

d) La palabra clonacin significa produccin de ejemplares genticamente idnticos mediante
reproduccin asexual. La poblacin resultante recibe el nombre de clon.
La clonacin de un fragmento de ADN consiste en la obtencin de miles de millones de copias idnticas
de dicho fragmento.
Para clonar un fragmento de ADN, este debe ser introducido en una molcula transportadora, llamada
vector.
Un vector de clonacin es una molcula de ADN pequea capaz de entrar en una bacteria y de
autorreplicarse dentro de ella.
Actualmente, existen muchos vectores de clonacin aunque los ms utilizados son los plsmidos
bacterianos. El mtodo de clonacin es el siguiente:
El plsmido y el ADN que se quieren clonar se cortan con la misma enzima de restriccin. Con los
plsmidos cortados y los fragmentos de ADN se obtienen plsmidos recombinantes que se
incuban con un cultivo de bacterias en las condiciones adecuadas para que cada una de ellas
incorpore solamente un plsmido recombinante. Este proceso se denomina transformacin.
Como los plsmidos llevan un gen que les confiere resistencia a un antibitico, las bacterias
transformadas pueden ser seleccionadas colocndolas en placas de cultivo en un medio que
contiene antibitico. nicamente las bacterias que llevan el plsmido recombinante sern
resistentes, capaces de sobrevivir y formar colonias en las placas. Las dems, que no han sido
transformadas ya que no portan el plsmido recombinante, mueren.
Cada colona de bacterias transformada se asla y se mantiene en condiciones de crecimiento. A
medida que las bacterias se duplican, tambin se duplica el nmero de plsmido recombinantes
y los fragmentos de ADN que llevan insertados.
La clonacin de clones de ADN obtenida a partir de un ADN de inters se denomina biblioteca o genoteca de
ADN.
e) Amplificacin del ADN: reaccin en cadena de la polimerasa.
A partir de cantidades minsculas, el ADN se puede copiar o amplificar muchas veces en el interior de un
tubo de ensayo, sin necesidad de clonarlo.
La tcnica se basa en un procedimiento denominado reaccin en cadena de la polimerasa (PCR)
La PCR es una reaccin en cadena que origina millones de copias de un segmento especfico de ADN
mediante la repeticin de mltiples ciclos de replicacin del ADN in vitro.
El material de partida es el ADN, muestra que se desea copiar, que no precisa ser purificado, una cantidad
suficiente de los cuatro nucletidos, dos molculas cortas de ADN de cadena simple o cebadores, que son
complementarios de las secuencias de ADN que flaquea el gen que se va a copiar, y una ADN polimerasa
resistente al calor.
La PCR es una herramienta utilizada rutinariamente para amplificar segmentos de ADN a partir de una
extensa diversidad de fuentes.
f) Secuenciacin del ADN
La determinacin de la secuencia de nucletidos es una parte fundamental de la informacin sobre cualquier
fragmento de ADN
Los primeros mtodos utilizados para secuenciar ADN eran complicados y lentos de realizar. Actualmente, se
han desarrollado tcnicas automatizadas e informatizadas que permiten una secuencia sencilla y rpida.
As, se ha conseguido conocer la secuencia de miles de genes y los genomas completos de numerosos
organismos, desde los procariotas hasta el ser humano.