Universidad nacional del Nordeste - Facultad de Medicina Microbiologa e Inmunologa

Rickettsias, Chlamydias y Mycoplasmas

Rickettsias
Las Rickettsias son bacterias que se comportan como parsitos intracelulares obligados. Se
consideran un grupo separado de bacterias porque poseen a los artrpodos como vectores. La clula
bacteriana es extremadamente pequea (0,25 de dimetro, de forma bacilar, cocoide o pleomrficas, las cuales poseen la pared bacteriana tpica de las bacterias gramnegativas, sin flagelos (excepto Rickettsia prowasekii). Se multiplican por divisin binaria slo dentro de la clula husped.
Se presentan como clulas nicas, en pares o cadenas. Muchas especies se encuentran slo
en el citoplasma de las clulas husped, pero aquellas que causan la fiebre manchada, se multiplican
tanto en el citoplasma como en el ncleo.
En el laboratorio deben ser cultivadas en tejidos vivos, tales como huevo embrionado de pollo o tejidos celulares de vertebrados.
La familia Rickettsiaceae posee tres gneros:
1. Rickettsia: incluye 11 especies, parsito intracelular obligado, que no se multiplican dentro de
vacuolas ni parasitan clulas de la serie blanca.
2. Ehrlichia: posee dos especies, parsito intracelular obligado, que no se multiplican dentro de vacuolas pero parasitan clulas de la serie blanca.
3. Coxiella: posee una sola especie, parsito intracelular obligado, que crece preferentemente dentro de vacuolas de la clula husped.
Estructura
La estructura de la Rickettsia tpica es muy similar a las bacterias gramnegativas. La envoltura consiste de tres capas principales: una membrana citoplasmtica ms interna, una fina pared celular electrnicamente densa y rgida, y una capa externa. La capa ms externa recuerda a las tpicas
membranas en su composicin qumica y es trilaminar. La pared celular es qumicamente parecida a
la de las bacterias gramnegativas la cual contiene de cido diaminopimlico y carece cido teicoico.
Metabolismo
En soluciones salinas diluidas las rickettsias aisladas son inestables perdiendo actividad metablica e infectividad para clulas animales, pero si el medio es enriquecido con potasio, seroalbmina y sacarosa, el microorganismo puede sobrevivir algunas horas. Si se agrega ATP a la solucin las
bacterias metabolizan y consumen oxgeno.
La base del parasitismo obligado de estas bacterias es que requieren un citoplasma enriquecido para estabilizar una membrana celular muy permeable.
Las rickettsias tienen algunas de las capacidades metablicas de las bacterias pero requieren
del agregado de factores exgenos para expresar dicha capacidad. La respuesta a los cofactores
exgenos implica una permeabilidad inusual de la membrana citoplasmtica.
Crecimiento y multiplicacin
Normalmente se multiplican por divisin transversal binaria. En condiciones nutricionales pobres, las rickettsias cesan su divisin y crecen en forma filamentosa pero al agregar nutrientes estas
rpidamente se transforman en formas cocoides o bacilares. Inmediatamente despus de la divisin,
la Rickettsia inicia movimientos intensos a travs del citoplasma. La Coxiella burnetti se diferencia de
los dems miembros de la familia en que permanece encerrada dentro de una vacuola durante su
divisin y crecimiento. De 6 a 10 clulas hijas se forman dentro de la clula husped antes de que la
sta se destruya y las libere.
Patogenicidad
En sus vectores artrpodos, las Rickettsias se multiplican en el epitelio del tracto intestinal,
son excretadas por las heces pero ocasionalmente llegan a las glndulas salivales de los artrpodos.

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Se transmiten al hombre a travs de la picadura del artrpodo. En el husped mamfero, las bacterias
se encuentran en el endotelio de los vasos sanguneos pequeos, particularmente en los del cerebro,
piel y corazn. La hiperplasia de las clulas epiteliales y la formacin de trombos localizados conducen a la obstruccin del flujo sanguneo, con escape de hemates al tejido circundante. Las clulas
inflamatorias se acumulan alrededor de los segmentos afectados de los vasos sanguneos. Esta angitis parece explicar la mayora de las manifestaciones clnicas tales como petequias, prdida del
conocimiento y shock terminal. La muerte es atribuida al dao de las clulas endoteliales, resultando
en prdida de plasma, disminucin del volumen sanguneo y shock.
Se asume que las manifestaciones clnicas observadas en las infecciones por Rickettsias
pueden deberse a la produccin de una endotoxina, bastante diferente en sus efectos fisiolgicos a
las toxinas de enterobacterias, que aun no ha sido aislada.
Enfermedades
Las enfermedades rickettsiales del hombre estn relacionadas con el tipo de vector, tal como
se ve en la siguiente tabla:.

Agente
R. rickettsii

Vector

Reservorio

Transmisin

Patologa

Garrapatas

Picadura
del artrpodo

Fiebre
manchada

Heces
del artrpodo

Tifus
epidmico

R. prowazekii

Piojos

Roedores,
perros,
zorros
Hombre

R. typhi

Pulgas

Roedores

Heces
del artrpodo

Tifus
endmico

Garrapatas

Animales
salvajes

Picadura
del artrpodo

Erlichiosis

Garrapatas
(slo en
los animales)

Animales
salvajes y
domsticos

Inhalacin de
polvo contaminado

Fiebre Q

E. chaffeensis

C. burnetii

Diagnstico de laboratorio
El diagnstico presuntivo de laboratorio se basa en el hallazgo de organismos compatibles
con Rickettsias en tejido o sangre, aunque el microorganismo es gramnegativo, ellos toman dbilmente la safranina, es por ello que se usan coloraciones especiales como las de:
1. Coloracin de Maquiavelo con la que se ven las bacterias coloreadas de color rojo brillante sobre
un fondo azul.
2. Coloracin de Castaeda con la que las bacterias se ven azules sobre un fondo rojo.
3. Coloracin de Giemsa que colorea a las bacterias de un prpura azulado.
El diagnstico confirmatorio de las rickettsiosis se realiza mediante los mtodos siguientes:
o
o
o
o
o
o
o

Suero: Inmunofluorescencia Indirecta (IFI)

Sangre con EDTA: Reaccin en cadena de la Polimerasa (PCR)
Sangre nitratada: PCR, Cultivo
Sangre heparinizada: Cultivo
LCR: PCR
Biopsia cutnea (Muestra de la escara de inoculacin): Microscopa, PCR
Contenido de ppulas/mculas: PCR

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Chlamydias
Caractersticas generales
Antiguamente se denominaban Bedsonias o virus basoflicos y virus filtrables ya que eran incapaces de crecer en medios de cultivo sintticos y eran retenidos por los filtros que se utilizaban
para esterilizar medios de cultivo.
Su nombre deriva del griego klamys = capa, ya que aparecen dentro de las clulas infectadas
como un cuerpo de inclusin cubriendo al ncleo celular (Figura 1). Son parsitos intracelulares obligados de animales superiores como mamferos y aves. Los miembros de este grupo poseen un ciclo
nico de desarrollo, una morfologa comn y un antgeno familiar comn. No son transmitidos por
artrpodos, son inmviles y se multiplican en el citoplasma de la clula husped. Estas bacterias generalmente parasitan clulas del epitelio cilndrico simple.

Ncleo
celular

Cuerpo de
inclusin

Fig. 1: inclusiones celulares

Las clamidias incluyen dos gneros y tres especies patgenas para el hombre:
1. Chlamydia trachomatis: Agente productor de tracoma, conjuntivitis de inclusin, infecciones genitales (uretritis, endocervicitis) y sus complicaciones y linfogranuloma venreo que infecta solamente al hombre.
2. Chlamydiophila psittaci: Agentes productores de psitacosis, una zoonosis cuyos reservorios son
los loros, cacatas y otras aves.
3. Chlamydiophila pneumoniae: Agente productor de neumona atpica transmitida de hombre a
hombre.
Morfologa
La clula bacteriana es esfrica que mide entre 0,3 y 1 de dimetro de acuerdo a su estado
de evolucin. Poseen estructura de pared de bacterias gramnegativas pero por su pequeo tamao
no pueden visualizarse con la coloracin de Gram. Bajo la pared celular se encuentra la membrana
citoplasmtica la cual contiene una gran cantidad de lpidos. El ADN se encuentra como una masa
irregular en el citoplasma, no hay membrana nuclear. Las clulas no poseen ni cpsula ni flagelo.
Metabolismo
La base del parasitismo intracelular obligado se debe a la incapacidad de generar ATP o a su
incapacidad para almacenarlo por lo cual necesita desarrollar dentro de la clula husped. La bacteria
puede sintetizar ADN, ARN y protenas.
Crecimiento y multiplicacin
Las Chlamydias pasan a travs de una serie de formas, mientras se multiplican por divisin
binaria, esto es conocido como ciclo de desarrollo (Figura 2). Se reconocen dos formas diferentes con
estados intermedios entre ambos:
1. Cuerpo elemental (CE), infectivo, no replicante.
2. Cuerpo reticular (CR), no infectivo, replicante.

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EI ciclo replicativo comienza con la absorcin del cuerpo elemental (CE) a receptores de la
membrana del epitelio cilndrico simple. Los CE representan las formas infectivas de la bacteria y son
metablicamente inertes; presentan una pared densa y genoma condensado.
El CE penetra a la clula por fagocitosis a travs de un mecanismo que dependera ms de la
bacteria que de la clula infectada. Dentro de los fagosomas los CE se transforman en cuerpos reticulares (CR). Los CR representan las formas replicativas, no infectivas y metablicamente activas, poseen una pared poco densa y genoma laxo. Durante este periodo el germen sintetiza su propio DNA, RNA y protenas. Este proceso da lugar a formacin de inclusiones citoplasmticas cuyas
caractersticas varan de una especie a otra (Figura 2). A las 24 hs de la infeccin algunos CR maduran transformndose en CE mientras que otros siguen replicndose. Este proceso durara unas 72 hs.
Finalmente como consecuencia de la liberacin de enzimas contenidas en los lisosomas y consecuente lisis celular se produce la salida de los CE para reiniciar el ciclo infectando clulas vecinas.
C u e r p o e le m e n ta l in fe c ta n te

I n g r e s o p o r e n d o c ito s is

L is o s o m a s
L is o s o m a s

E n d o so so m a

N c le o

T r a n s fo r m a c i n e n c u e r p o r e tic u la d o

E lim in a c i n d e la p r o g e n ie

F o r m a c i n d e l c u e r p o d e in c lu s i n

M u ltip lic a c i n d e l C R

Fig. 2: ciclo vital de las chlamydias

Patogenicidad
Los cuadros clnicos que producen varan segn la especie considerada:
1. C. trachomatis es un patgeno casi exclusivamente humano y es el principal agente de enfermedad de transmisin sexual, principalmente en pases desarrollados. Dentro de las especies, las
serovariedades A, B, Ba y C se asocian con tracoma endmico (la forma ms comn de ceguera
prevenible) mientras que los serovaress L1, L2 y L3 se asocian con linfogranuloma venreo. Los
serovars D y K son los que se asocian ms frecuentemente con uretritis no gonoccicas en hombres, pudiendo causar epididimitis e inducir el sndrome de Reiter. Proctitis y conjuntivitis se
describen tanto en hombres como en mujeres. En las mujeres, estas serovariedadess producen cervicitis, uretritis, endometritis, salpingitis y perihepatitis. La esterilidad tubaria y el embarazo
ectpico tras una salpingitis son las principales complicaciones. La bacteria puede ser transmitida al
recin nacido al pasar por el canal del parto y ste puede desarrollar conjuntivitis de inclusin o
neumona. La mayora de las infecciones genitales en la mujer son inaparentes, por lo que generalmente se realiza tratamiento cuando se detecta infeccin en la pareja sexual.
2. La psitacosis en una zoonosis producida por C. psittaci, muy ubicua entre especies de
aves, donde afecta el tracto intestinal. La infeccin humana deriva de la exposicin a heces de aves
domsticas. En el hombre se manifiesta como una neumona atpica.

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3. C. pneumoniae produce slo infeccin en humanos sin que se conozcan reservorios animales. La infeccin es muy comn en todo el mundo y se manifiesta con faringitis, bronquitis y
neumona moderada (neumona atpica), siendo ms frecuente en la segunda infancia, adolescencia y ancianos. En estudios epidemiolgicos, se encontr a este germen asociado con enfermedad
coronaria y otras afecciones vasculares, hallndose partculas similares a C. pneumoniae en ateromas, y se pudo demostrar la presencia de sus antgenos y material genmico mediante PCR, pero
no se pudo recuperar a la bacteria en cultivos a partir de esas localizaciones.
Diagnstico de laboratorio
El diagnstico de las infecciones por Chlamydias puede realizarse mediante diferentes tcnicas, las cuales varan en sensibilidad y especificidad segn la especie involucrada, la localizacin de
la infeccin y la etapa de la enfermedad. En la tabla V se enumeran las diferentes metodologas a
emplear. En cualquier situacin, deber consultarse con el laboratorio acerca de los mtodos de diagnstico que puede aplicar y la forma correcta de toma, conservacin y remisin de las muestras.
Las muestras a utilizar para el diagnstico de infeccin por C. trachomatis podrn ser, de
acuerdo con el sitio de la infeccin:
1.
2.
3.
4.
5.

Exudado uretral
Exudado endocervical
Exudado conjuntival
Lavado bronquial
Hisopado nasofarngeo

El diagnstico de infecciones por C. psittaci o C. pneumoniae se puede realizar actualmente

solamente detectando anticuerpos en el suero del paciente mediante tcnicas de ELISA o Inmunofluorescencia Indirecta.
En la tabla II se mencionan las diferentes tcnicas que pueden aplicarse para el diagnstico
de laboratorio de las infecciones por Chlamydias.
Tabla II: Mtodos para diagnstico de infecciones por Chlamydias
1.

Mtodos directos a ser aplicados en la muestra

1.1. Tinciones
1.1.1. Giemsa (til en conjuntivitis de inclusin)
1.1.2. Lugol (til en conjuntivitis de inclusin)
1.1.3. Inmunofluorescencia directa (rpido y especfico)
1.2. Cultivo (es el mtodo de referencia para C. trachomatis)
1.3. Enzimoinmunoensayo (aplicable para C. trachomatis)
1.4. P.C.R. (no diferencia entra bacterias muertas y viables)

2.

Mtodos indirectos a ser aplicados con el suero del paciente

2.1. Inmunofluorescencia indirecta (Detecta IgG o IgM)
2.2. Fijacin del complemento (Para C. psittaci preferentemente)

Mycoplasmas
Caractersticas generales
Estas bacterias pertenecen a la Clase Mollicutes, Familia Mycoplasmataceae, la cual incluye los Gneros Mycoplasma y Ureaplasma, siendo las especies ms importantes desde el punto de
vista mdico M. pneumoniae, M. hominis y U. urealyticum.
Los micoplasmas son bacterias carentes de pared celular ya que no pueden sintetizar precursores de pptidoglicano. Debido a que slo estn limitados por la membrana plasmtica varan de
forma desde esfricos o piriformes hasta filamentos ramificados o helicoidales (Figura 3). Son las

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bacterias de menor tamao capaces de reproducirse por s

solas. Aunque la mayora de ellos son inmviles, algunos
pueden deslizarse en medios lquidos por movimientos ameboides. La mayora de las especies requieren esteroles para
su crecimiento, los cuales son incorporados a la membrana
celular. Son anaerobios facultativos pero otros son anaerobios estrictos.
Son ubicuos en todo el mundo como saprfitos y parsitos de plantas, animales y seres humanos.
Fig. 3: Clulas filamentosas de
micoplasmas
Las enfermedades que producen pueden dividirse en dos grandes grupos:

Enfermedades genitourinarias y
Neumona atpica primaria.

Enfermedades genitourinarias
M. hominis y U. urealyticum frecuentemente pueden encontrarse como flora saprfita del aparato genital y su transmisin guarda relacin con la actividad sexual. Su determinante de patogenicidad es la produccin de amonaco a partir de la urea (U. urealyticum) y de la arginina (M. hominis).
Ambos pueden producir inflamacin oportunista de los rganos del hombre y la mujer.
Los sntomas y los datos epidemiolgicos contribuyen mucho al diagnstico etiolgico. Pueden realizarse cultivos a partir de secreciones genitales, lo cual no es muy utilizado pues se necesitan medios especiales, muy enriquecidos y con inhibidores para otras bacterias y deteccin de
anticuerpos en el suero del paciente mediante tcnicas de ELISA o inmunofluorescencia indirecta
(IFI).
La PCR aparece como una prueba promisoria en la deteccin de estas bacterias en diferentes muestras clnicas.
Neumona atpica primaria
M. pneumoniae es uno de los tres ms importantes agentes etiolgicos de neumona atpica
primaria. La propagacin requiere de un contacto estrecho y a veces a travs de gotitas transmitidas
por el aire. La enfermedad es bastante frecuente en lactantes y nios pequeos, puede ser grave en
nios mayores y adultos jvenes.
M. pneumoniae suele colonizar las vas respiratorias superiores y propagarse hacia las inferiores donde se adhiere a las clulas de la mucosa respiratoria, all produce perxido de hidrgeno
que puede ser txico.
El diagnstico de infecciones por M. pneumoniae puede realizarse mediante cultivo a partir
de secreciones respiratorias lo cual no es muy utilizado pues se necesitan medios especiales, muy
enriquecidos y con inhibidores para otras bacterias y mediante deteccin de anticuerpos en el suero del paciente por tcnicas de ELISA, aglutinacin de ltex o inmunofluorescencia indirecta (IFI).
Mediante PCR puede detectarse la presencia de la bacteria en muestras respiratorias. Los sntomas y
los datos epidemiolgicos contribuyen mucho al diagnstico etiolgico.