1.1.3.

PRCTICA N 9
Anlisis bromatolgico bsico
Determinacin de contenido de nitrgeno total por el mtodo de Kjeldahl

2. Materiales
Balanza analtica con 4 decimales Una probeta de 100 mL
Para la digestin: un baln de Kjeldahl de 800 mL
Dos placas de calentamiento (para todo el
curso)
Para la digestin: se utiliza un baln de Kjeldahl de 800 mL
colocado en forma inclinada, tapado con un tapn de caucho
perforado, en el cual se inserta un tubo de vidrio con una
trampa para evitar el arrastre mecnico durante la destilacin.
Dicha trampa se conecta por medio de un tubo a un
refrigerante, cuyo extremo inferior debe quedar por debajo del
nivel del cido, colocado en el erlenmeyer de 250 mL de
capacidad. Para el calentamiento del baln Kjeldahl puede
usarse un equipo elctrico u otra fuente de calor.
Papel de filtro franja negra
Equipo elctrico u otra fuente de calor apropiada Un frasco lavador
Mortero y mango Un agitador de vidrio
Piedra pmez Un vidrio de reloj
1,5 gramos de muestra Una esptula
Un matraz de erlenmeyer de 250 mL Papel absorbente o toalla
Una bureta de 25 mL Detergente lquido
Un soporte universal Calculadora
Una pinza doble para bureta Marcador permanente
Un vaso de precipitados de 50 mL
3. Reactivos
Los reactivos empleados en el ensayo deben ser grado analtico.
3.1. Mezcla catalizadora de la digestin.
Mezclar 20 g de sulfato de cobre pentahidratado (CuSO4.5H2O), con 3 g de xido de mercurio (HgO) y 1 g de selenio
en
un mortero. Luego mezclar 480 g de Na2SO4 anhidro previamente pulverizados.
3.2. 80 mL de solucin de hidrxido de sodio (NaOH) al 45% p/v: un estudiante se encargar de preparar 500 mL de
esta solucin para todo el curso.
3.3. Solucin alcohlica de rojo de metilo (C15H14N3O2Na x C2H6O ) al 0,2% p/v.
3.4. 20 mL de cido sulfrico concentrado (H2SO4).
3.5. Solucin de cido clorhdrico (HCl) 0,25 N estandarizada.
Tambin se puede usar una solucin 0,1 N cuando el contenido de nitrgeno es pequeo. Esta solucin debe
valorarse
peridicamente.
3.6. 50 mL de solucin de cido brico al 5% p/v: un estudiante se encargar de preparar 250 mL de esta solucin
para
todo el curso.
3.7. Agua destilada
8. Procedimiento experimental
8.1. Preparacin y digestin de la muestra (26, 61-64)
Pesar una muestra entre 0,7 2,2 g, previamente pulverizada, colocarla en un papel de filtro franja negra, doblar
el papel teniendo cuidado de no perder nada de la muestra y colocarlo dentro de un matraz Kjeldahl seco,
cuidando que la muestra no se adhiera a las paredes o al cuello del matraz.
Para muestras que contengan nitratos: Se agregan 40 mL de cido sulfrico que contengan 2 mL de cido
saliclico. Se agita
hasta mezclar completamente y se deja en reposo por 30 min, agitando peridicamente, luego se agregan 5 g de
tiosulfato
de sodio. Se agita, se deja en reposo durante 5 min y se calienta suavemente (bajo una campana de extraccin)
hasta que
disminuya la espuma; luego se suprime el calentamiento. Se agrega dentro del baln Kjeldahl 2 g de mezcla
catalizadora. Se
hierve vivamente (usando baja temperatura al inicio y aumentando el calor a medida que procede la digestin,
rotando los

matraces de vez en cuando para asegurarse de que se digiera toda la muestra) hasta que se clarifique la solucin y
luego
durante 30 min ms (la digestin terminar cuando el color de la muestra sea azul-verde claro; el proceso tomar
aproximadamente 60 minutos). Se contina como en el numeral 9.2.
Para muestras libres de nitratos. Se agregan 3 g de mezcla catalizadora y 20 mL de cido sulfrico. Si se usa una
muestra
mayor de 2,2 g se aumenta el cido sulfrico en cantidad de 10 mL por cada gramo de muestra.
Se coloca el baln en posicin inclinada y se calienta suavemente hasta que cese la espuma; se aade una pequea
cantidad
de parafina. Si es necesario se hierve fuertemente hasta que la solucin se aclare y luego durante 30 min como
mnimo (2 h
para muestras que contengan materia orgnica). Se contina como se indica en el numeral 9.2.
Se enfra al aire durante unos 10 minutos para que no se endurezca o solidifique la muestra, se agregan aprox.
200
mL de agua destilada cuidadosamente, poco a poco, a la muestra digerida, mezclar y refrigerar exteriormente
hasta temperatura ambiente.
8.2. Destilacin
Inmediatamente conectar el matraz Kjeldahl al refrigerante lo ms rpido posible para evitar la prdida de
amonaco y ste a una trampa de vapor de tal modo que el extremo del refrigerante quede sumergido dentro de
un matraz erlenmeyer que contiene 50 mL de solucin de cido brico al 5 % p/v y 2-3 gotas de rojo de metilo al
0,2 %p/v. Se agregan granallas de piedra pmez para regular la ebullicin, se inclina el baln y se agregan 80 mL
de solucin de hidrxido de sodio al 45% p/v, o la cantidad suficiente para hacer el medio fuertemente alcalino y
comprobar que todas las uniones estn bien hechas. La mezcla digerida se tornar oscura (azul gris o caf
oscuro). Si no cambia de color aadir ms NaOH.
Nota: agregar lentamente la solucin alcalina por las paredes girando suavemente el baln.
Luego se calienta hasta que haya destilado todo el amonaco (150 mL de destilado mnimo) al erlenmeyer que
contiene el cido brico y probar con papel tornasol rosado hasta que d resultado negativo para amonio. Se
retira el tubo de salida del destilado, enjuagando el exterior del tubo en el destilado para evitar el arrastre de
vapor.
8.3. Titulacin
Titulacin con indicador rojo de metilo. Se titula el destilado obtenido con la solucin de HCl 0,25 N, usando 2 gotas
de
rojo de metilo como indicador, hasta que el color cambie de amarillo a rosado.
NOTAS:
La llavecita de la segunda parte de la unidad destiladora (que conduce la muestra procesada hacia el vasito
permanece cerrada (en posicin horizontal) durante el procesamiento de la muestra. Slo se abre cuando se
enjuaga el destilador
Cuando se termina la destilacin se debe retirar el erlenmeyer donde se recogi el destilado y luego se apaga el
calentador elctrico o el mechero. De otra forma el matraz Kjeldahl al enfriarse absorber el lquido destilado.
Al retirar el matraz de erlenmeyer se debe limpiar la unidad destiladora enjuagando la cmara de ebullicin varias
veces con agua destilada. Cada vez que se aada agua destilada hasta llenar la copita superior de la unidad
destiladora para el enjuague deje que sta hierva primero. Luego abra la llave de la parte que permite salir las
muestras hacia fuera de la unidad destiladora. Una vez vaca la parte en donde se procesa la muestra asegrese de
que est bien vaca. Si queda todava un poco de agua en el fondo permita que hierva para que se vaya toda hacia
esa segunda parte de la unidad destiladora. El matraz estar listo para recibir la segunda cantidad de agua destilada
para lavar la unidad destiladora. Esta operacin se repite al menos unas 4 veces.
Cada equivalente de NaOH usada corresponde a un equivalente de NH 3 o a un equivalente de N en la muestra
original. El peso del N en mg est dado por miliequivalentes de la base X 14 (el peso equivalente del N).