Manejo y Tratamiento de La Leptospirosis Bovina

Manejo y tratamiento de
leptospirosis bovina
Alejandro de la Pea-Moctezuma
CEIEPAA, FMVZ, UNAM
Medicina preventiva
No slo implica el uso de inmungenos
Considerar la prctica del diagnstico
serolgico con base en un anlisis
comparativo con sueros basales obtenidos al
momento de la inseminacin
Agente etiolgico y respuesta

inmune
Serovariedades adaptadas a husped
Hardjo a bovinos
El pico en los ttulos de anticuerpos puede

haberse presentado dos o tres semanas
anteriores a la presentacin del aborto
Cmo manejar esto?
Muestras pareadas
Considerar que infecciones con Hardjo (SV
adaptada a husped), usualmente no se
correlacionan con ttulos de anticuerpos elevados
Agente etiolgico y respuesta

inmune
A diferencia de lo observado en los hmsteres,
los ttulos de anticuerpos aglutinantes (AM)
elevados, no necesariamente implican
proteccin contra la infeccin en bovinos
Tratamiento
Una vez confirmado el diagnstico
Por signologa
Por ttulos de anticuerpos elevados (muestras
pareadas)
Por descarte de otras etiologa (Brucelosis,
Tritrichomoniasis, Campylobacteriosis)
Por aislamiento y demostracin de la infeccin
Tratamiento
Establecer tratamiento antimicrobiano en
ganado de engorde en los animales gestantes
Estreptomicina
Tetraciclinas y oxitetraciclinas
Enrofloxacina
Tylosina
Aplicar bacterina al hato
Tratamiento
Considerar hatos lecheros
Slo animales enfermos deben ser tratados,
considerar la prdida econmica por leche
desechada durante los tratamientos.
Las inmunizaciones ayudan a disminuir el nmero
de abortos (y las prcticas sanitarias
correspondientes)
Frecuencia de inmunizacin vs. Tipo de
inmungeno utilizado
Financiado por proyectos PAPIIT IN222806,

IN221409, SEP-CONACYT 83123,
MACROPROYECTO UNAM No 7.
Interpretacin diagnstica y
aplicacin en campo
CEIEPAA, FMVZ, UNAM
Metodologa diagnstica
Deteccin de anticuerpos
Aglutinacin microscpica ILS
ELISA
Deteccin del agente infeccioso

Microscopa de CO
Inmunofluorescencia (orina y tejidos)
Inmunoperoxidasa
PCR
MLST
Deteccin de anticuerpos
Presencia de signos
Sueros de animales enfermos
Sueros de animales que no han abortado
Descarte de otras enfermedades infecciosas
asociadas con aborto
Considerar que (algunos) bovinos
infectados con Hardjo, son reactores
dbiles en la AM
Diagnstico serolgico: AM
1:25
1:50
1:100
1:200
1:400
1:800
1:1,600
A B C I G
Cultivos de Leptospira
1:3,200
AM
30 C
Incubar a 37C
durante 1 h
Observacin
microscpica
CO, 100-200X
0-25% - 1 - neg
25-50% - 2-pos
50-75% - 3-pos
75-100% - 4-pos
Diagnstico por aglutinacin

microscpica (AM)
Ventajas
Cuantitativa y cualitativa
Simple
MAT proficiency test
organizada por la ILS
Desventajas
Poco sensible en la
primera semana
Costo
Bioseguridad ?
Tiempo de preparacin y
lectura
Subjetiva, lector(a)
experimentado(a)
Interpretacin de grupo
Mtodos
- Rastro TIF Unin
de Ganaderos
de Villahermosa,
Tabasco, 2009
- 80 bovinos
Mtodos
- Muestras de
sangre para
obtener
suero
- Separacin
del suero en
laboratorio
- Realizacin
de la AM
Mtodos
- Muestras de
rin para
cultivo y PCR
Mtodos
- Bolsas plsticas para
su traslado de la sala
de labor al laboratorio
- Descontaminacin
por inmersin 10 en
0.05% en cloruro de
benzalconio
- Secado con papel
estril, diseccin y
obtencin de un
raspado
Mtodos
- Siembra en
EMJH y Fletcher
- Extraccin de
ADN en el sitio
Cultivo de riones en rastro
Resultados AM
Hardjoprajitno (aislado mex.) (51, 63.75%)

Mini (aislado mexicano) (38, 47.5%)
Tarassovi (aislado mexicano) (12, 15%)
Canicola (3, 3.75%)
Grippotyphosa (aislado mex.) (3, 3.75%)
Pomona (2, 2.5%)
Autumnalis, Bataviae, Bratislava,
Celledoni, Icterohaemorrhagiae y
Pyrogenes (cero)
Resultados AM
69 muestras de suero (86.25%),
mostraron ttulos desde 1:100
hasta 1:3,200 a por lo menos una
serovariedad
Estudio serolgico en bovinos

lecheros en Mxico
Estudio serolgico en bovinos

lecheros en Mxico
60.05% de seroprevalencia general a
leptospirosis (59.62% en Veracruz y 60.68% en
Chiapas)
Las cinco SVs ms frecuentes para Veracruz:
Tarassovi (21.25%), Mini (13.62%), Hardjo
(13.37%), Canicola (11.37%) y Pomona
(10.37%)
Las cinco SVs para Chiapas: Hardjo (23.28%),
Tarassovi (14.88%), Pomona (13.16%),
Bataviae (12.02%) y Autumnalis (11.45%).
GRACIAS
Financiado por proyectos PAPIIT IN222806,
IN221409, SEP-CONACYT 83123,
MACROPROYECTO UNAM No 7.
Seroprevalencia a diferentes puntos de corte
80
70
Seroprevalencia (IC95%)
60
50
40
30
20
0
Serovariedad
Brat
Hrjp
Wol
Bat
Aut
Can
Gry
Pom
Pyr
Tar
Ict
Cell
Brat
Hrjp
Wol
Gry
Pom
Bat
Can
Aut
Pyr
Tar
Ict
Cell
Hrjp
Wol
Brat
Gry
Pom
Bat
Pyr
Can
Aut
Ict
Tar
Cell
Hrjp
Wol
Gry
Brat
Pom
Bat
Pyr
Can
Aut
Ict
Tar
Cell
10
(No.Pos) 13110891 63 53 4738 31 17 4 0 0 9494 82 31 2118 13 8 5 2 0 0 85 70 45 2115 7 3 2 1 0 0 0 70 55 1715 14 2 2 1 1 0 0 0

Punto de corte
1:50
1:100
1:200
1:400
Estrategias para el control y

prevencin de la leptospirosis
bovina
CEIEPAA, FMVZ, UNAM
Control y prevencin
Triada epidemiolgica
Husped
Agente
Ambiente
Prevencin
Uso de bacterinas ad hoc
Especie animal a proteger
Zona geogrfica: serovariedades prevalentes
y cmo se sabe esto?, pues con base en
resultados de serologa, esto tiene sus
imprecisiones:
Son slo anticuerpos, no garantiza la identidad de la
serovariedad presente
Inherentes a la prueba: SVs, tcnico, avance de la
infeccin, contacto con el microorganismo a lo largo de
la vida
Bacterinas
Pfizer y Tornel: monovalente Hardjobovis
Bayer pentavalente (Hardjo, Can, Gri, Ict, Pom)
Chinoin octavalente (Bra, Can, Gri, Ict, Pom,
Sej, Tar, Wol)
Pfizer pentavalente (Hardjo, Can, Gri, Ict, Pom
+ virales)
Boheringer tetravalente: (Can, Gri, Ict, Pom)
Leptospirosis en bovinos
Animales estabulados y animales en pastoreo
prevalencias de 30 a 80%
Anticuerpos contra las serovariedades: Hardjo,
Tarassovi, Icterohaemorrhagiae, Canicola,
Grippotyphosa
Aislados: Hardjoprajitno (INIFAP, Palo Alto; UAM-X;
UNAM-FMVZ); Grippotyphosa, Mini, Tarassovi
(UNAM-FMVZ)
A la fecha, no se ha aislado ni demostrado la
presencia de Hardjobovis en Mxico
Una salud
Ambiente
Agente infeccioso
Sanidad
Husped
(humano /
animal)
Consideraciones
Amplia distribucin de
serovariedades en el medio,
por la presencia de animales
portadores y reservorios.
Las posibilidades de entrar en
contacto con el
microorganismo, son
igualmente altas.
VII Reunin de la ILS

Mrida, Yucatn. Sept. 19 22, 2011
3. Los principales grupos de
riesgo, se ubican en la
poblacin con actividades
agrcolas. Las infecciones son
ms comunes en varones
que en mujeres.
Consideraciones
Diagnstico de leptospirosis es complejo
Signologa es inespecfica
Ttulos de anticuerpos (1:800)
Historial epidemiolgico
Evidencia de la infeccin (aislamiento, deteccin de
ADN por PCR y PCRtr)
Ttulos de anticuerpos, slo indican contacto

con el antgeno (en forma natural o por
inmunizaciones) y no necesariamente
enfermedad.
Mecanismos de inmunidad
AM POSITIVO
NO PROTECCIN
PROTECCIN
Mecanismos de inmunidad
Respuesta Th1
Naiman et al., 1998
PROTECCIN

4. La bsqueda del inmungeno ideal que proteja
contra la infeccin contra varias serovaredades
sigue en marcha. El estudio de las protenas de
membrana externa ha mostrado el uso potencial
(de manera experimental an), de la protena
LigA. Ms an, se conoce que los elementos
repetitivos Blg 10 al 13 de dicha protena son
suficientes para proteger contra la enfermedad
al 100% de hmsteres inmunizados y desafiados.
Sin embargo, no se protege an contra la
infeccin. PROPUESTA MEXICANA: GspD
GspDL
OmpL1
LipL41
LipL21
LigA
Esquema de los antgenos de superficie de

Leptospira
LPS
Membrana externa
LipL32
LipL45
LipL36
PBPs
LipL48
GspGL
Flagelo periplsmico
Espacio periplsmico
Peptidoglicano
Membrana interna
Interior
LEPTOSPIROSIS: Prevencin
Bacterinas (mitad del siglo pasado)
Seleccin de SVs:
Regin geogrfica (productos
comerciales?)
Especie animal por inmunizar
Sv Canicola e Icterohaemorrhagiae
en Perros
No hay proteccin cruzada entre
serovariedades
Otras SVs antignicamente similares
AM
LEPTOSPIROSIS: Bacterinas
Consideraciones de control de calidad para la elaboracin de
productos biolgicos de uso en animales.
CONTROL DE CALIDAD PARA PRODUCTOS BIOLGICOS
FACTORES FISICOQUMICOS:
CONCENTRACIN
INACTIVANTES
PRESERVATIVOS
ADYUVANTES
PROTENAS
FACTORES MICROBIOLGICOS:
PUREZA
ESTERILIDAD
IDENTIDAD
FACTORES INMUNOLGICOS:
TITULACIN IN VITRO
IDENTIDAD SEROLGICA
SENSIBILIDAD
ESPECIFICIDAD
FACTORES BIOLGICOS:
TITULACIN
INOCUIDAD O SEGURIDAD
POTENCIA EN ANIMALES DE LABORATORIO
OIE, CFR , NOM-012-ZOO-1993
LEPTOSPIROSIS: Prueba de potencia

La capacidad de la bacterina para impedir la muerte del animal cuando se
infecta con 10-10,000 DL50% (dosis letal 50%).
Serovariedades no letales: Resistencia a la infeccin renal cuando los

animales se infectan con 10-10,000 DI50% (dosis infectante 50%) o
mediante la induccin de un ttulo de anticuerpos adecuado en conejos.
Dosis Letal 50%
Expresa la magnitud de la virulencia del microorganismo

Toxicidad de sustancias sintetizadas .
La menor cantidad de grmenes virulentos o de toxina que administrados

por la va apropiada a un nmero de animales susceptibles, provoca la
muerte de la mitad de stos (50%) al trmino de un perodo dado.
LEPTOSPIROSIS: Prueba de potencia

La capacidad de la bacterina para impedir la muerte del animal cuando se
infecta con 10-10,000 DL50% (dosis letal 50%).
Serovariedades no letales: Resistencia a la infeccin renal cuando los

animales se infectan con 10-10,000 DI50% (dosis infectante 50%) o
mediante la induccin de un ttulo de anticuerpos adecuado en conejos.
Dosis Letal 50%
Expresa la magnitud de la virulencia del microorganismo

Toxicidad de sustancias sintetizadas .
La menor cantidad de grmenes virulentos o de toxina que administrados

por la va apropiada a un nmero de animales susceptibles, provoca la
muerte de la mitad de stos (50%) al trmino de un perodo dado.

5. Se ha multiplicado el nmero de investigadores
que estudian la respuesta del hospedero. No es
claro an cul tipo de respuesta inmune es
ms importante o necesaria para la proteccin
contra leptospirosis en diferentes especies
animales. PROPUESTA MEXICANA: Estudio de
los receptores quimiotcticos y citocinas.
6. La AM sigue siendo la prueba de diagnstico
ms utilizada (proficiencia internacional). Otras
alternativas incluyen PCR de tr. Combinacin
de MLST y VNTR.
Mani, Yucatn,
Sept. 22, 2011
Para afiliarse a ILS:
http://groups.google.com/group/international-leptospirosissociety?hl=en
Laboratorio de Referencia de la OIE

para Leptospirosis
APROXIMACION AL DIAGNOSTICO DE
LEPTOSPIROSIS BOVINA
APROXMACION AL DIAGNOSTICO DE
LEPTOSPIROSIS BOVINA
Jessica V. Petrakovsky
Laboratorio de Leptospirosis
Coordinacin de Bacteriologa
Direccin General de Laboratorio Animal
Direccin de Laboratorios y Control Tcnico
SENASA
Laboratorio de Referencia de la OIE para Leptospirosis
Ganado lechero: contacto + frecuente
existencia de roedores
raciones que atraen a estos y luego son consumidas

por los bovinos
agua estancada
hacinamiento de animales dos veces al da durante el

ordee.
SIGNOS: mastitis, ubre flccida, disminucin de la

produccin lctea, leche sanguinolenta.
Ganado de carne. Contacto espordico.
enfermedad se encuentra presente.
SIGNOS: abortos en forma de tormenta o hay muerte
perinatal de los terneros. Diferencias entre % de
preez y destete
Cerdos criados en rgimen intensivo:
Infeccin cruzada debido a la densidad de poblacin.
movimiento de cerdos de un corral a otro y el contacto

con desechos de otros corrales..
La incorporacin de un padrillo que sea portador de

leptospiras en su aparato genital.
Diagnstico dinmica de la infeccin

Semana 1
Perodo de incubacin
(promedio)
2 a 20 das
Estado
Agudo
Semana 2
Semana 3
Estado Convaleciente
Semana 4
Meses
Aos
Uvetis (caballos)
Sntomas y signos:
Fiebre
Muestras tiles:
Sangre
LCR
Sueros
Orina (reservorios)
Orina
(convalecientes)
Concentracin
de
Anticuerpos
Fases
de la Enfermedad
IgM
IgG
Leptospiremia
Inmune
Lepstospiruria
Animales clnicamente enfermos

Leptospiremia:
Muestras: sangre, rin, hgado, cerebro, humor acuoso, MO
Tcnicas: Aislamiento, inoculacin en animales de laboratorio, PCR
Leptospiruria:
Muestras: rin, orina.
Presencia de Anticuerpos :
Muestra: 2 muestras pareadas de suero, intervalo 10 a 15 das
Tcnica: Test de Microalgutinacin (MAT).
Animales Portadores
Leptospiruria:
Muestras: rin, orina.
Abortos:
Muestra: orina materna
Si el feto no presenta autolisis se puede intentar un aislamiento o
PCR a partir de rganos
Importante!!!
Animales no deben estar bajo tratamiento antibitico.
Orina: previamente administrar diurticos (furosemida)
Orina diluida 1:3 en buffer (PBS estril) remitida al laboratorio
dentro de las 24 hs. La dilucin debe realizarse en mechero o
similar. Si es posible filtrar la muestra por 0.45 / 0.22
Para aislamiento: anticoagulantes oxalato de sodio y heparina
Para PCR: EDTA pero NO HEPARINA
Las muestras deben tomarse en la mayor ESTERILIDAD posible
Para aislamiento: muestras refrigeradas NO congeladas
Para PCR: refrigeradas o congeladas (orina preferentemente
refrigerada siempre en buffer)
Las muestras deben remitirse al laboratorio lo antes posible en
envase adecuado
Sueros para MAT no hemolizados
DEMOSTRACION DEL AGENTE

Observacin directa: al MCO, no adecuado
Observacin Previa coloracin:
numerosas tcnicas
no se tien bien con los colorantes de anilina, y las tcnicas de tincin
argntica carecen de
sensibilidad y especificidad
constituyen un complemento til para el diagnstico histopatolgico
Inmunofluorescencia Directa:
trozos de rganos u orina centrifugada
equipamiento costoso y reactivos de calidad
El xito de estas tcnicas depende del nmero de microorganismos
presentes, son menos apropiadas para diagnosticar el estado de
portador crnico, donde dicho nmero puede ser muy bajo o localizado.
Tinciones
Gram: negativo (dbil)
Tincin con Sales de Plata: (Murray & Fielding, 1936,
Gangadhar & Rajasekhar, 1998)
Inmuno-tinciones:
Conjugados fluorescentes (sueros

policlonales (Sheldon et al 1953) y
monoclonales (Stevens et al 1985, Zaki &
Shieh 1996)
Conjugados con peroxidasa (carbazol)
(Tripathy & Hanson, 1974)
Hibridizacin in situ usando sondas de ADN
(Terpstra , 1987).
AISLAMIENTO
Fundamental para definir el diagnstico

Crecimiento del agente en medios de cultivo apropiados:
medio semislido (Fletcher) /agentes selectivos: 5-fluorouracilo
uso animales experimentacin: decontaminar la muestra
hasta 5 das para el transporte.
Filtros de 0.45 o 0.22 , o agentes qumicos para decontaminar (5fluorouracilo, cido nalidxico , fosfomicina, y una mezcla de rifamicina,
polimixina, neomicina, 5-fluorouracilo, bacitracina y actidiona)
el uso de agentes selectivos puede reducir las posibilidades de
aislamiento
Incubacin a 291C
Observacin semanal,
no dar por negativo antes de 26 semanas
Permite tipificar la cepa aislada
Esquema bsico de aislamiento
EVIDENCIAS DE ANTICUERPOS: Pruebas serolgicas

Confirmar el diagnstico clnico
Determinar la prevalencia en el rebao
Para realizar los estudios epidemiolgicos
Los anticuerpos de las leptospiras aparecen a los pocos das del
comienzo de la enfermedad y persisten durante semanas o meses
y, en algunos casos, aos.
Sin embargo, los ttulos de anticuerpos puede que desciendan
hasta niveles indetectables mientras los animales permanecen
infectados crnicamente.
Para superar este problema, se necesitan mtodos sensibles que
detecten el microorganismo en la orina o en el tracto genital de
portadores crnicos.
Pruebas serolgicas
Gnero especificas:
Aglutinacin microscpica (TR), ELISA , Inmunofluorescencia indirecta.
Los + deben confirmarse por tcnica serovar especifica
Serovar especificas:
MAT (Test de Microaglutinacin o Prueba de aglutinacin
Microscpica): tcnica de referencia internacional.
Constituye la prueba de referencia frente a la que se evalan todas las

otras pruebas serolgicas
Importacin/exportacin.
Parmetros estandarizados y respetados

Muestras suero sanguneo (refrigerado o congelado), orina, LCR, leche
humor, acuoso
Los antgenos en animales dependen de cada Pas (cepas de
referencia), en humanos (OPS-OMS)
Capta IgM e IgG.
Personal altamente calificado y dificultoso mantenimiento de las cepas
Serovares (antgenos)
c
MAT
1
2
Sueros Nro.
Tcnica:
Dilucin 1/50 de los sueros .
Colocar 50 l de la dilucin 1/50 de cada suero en cada orificio, por
cada uno de los serovares en estudio (sentido horizontal).
Descarga del antgeno: dilucin final en orificio 1/100
Testigo: uno por cada serovar de L. interrogans empleado.
sol. Fisiolgica o P.B.S. + de antgeno
Agitacin e Incubacin de la reaccin
El tiempo de incubacin vara segn la temperatura seleccionada:
2 horas a 28 C; o 1 noche a 4-8 C
5
6
7
Para la lectura microscpica, el operador solo se ayudar con el

empleo de un ansa de platino. Cada gota colocada sobre el
portaobjetos ser inmediatamente leda.
8
9
Lectura en microscopio de campo oscuro.

Se considera reactivo un suero que presenta menos del 50%
leptospiras libres en comparacin con su testigo. Un suero no reactivo
o negativo es quel que prenta 50% o mas leptospiras libres en
comparacin con su testigo
+
T
Testigo/s
LECTURA
Control negativo Pocillo 1
MAT: pos
MAT: neg
1/100
1/100
Diluciones de los sueros
Sueros Nro.
Titulacin
A
R
E
S
Testigo/s T
Tcnica:
Dilucin 1/50 de cada uno de los sueros
positivos.
Diluciones sucesivas del suero utilizando
(1/100, 1/200,1/400, 1/12800)
Las diluciones siguientes para la titulacin
se harn en progresin geomtrica de 2.
Descarga del antgeno:
Agitacin e incubacin
Lectura en campo oscuro.
El ttulo final del suero ser la MAYOR
dilucin del mismo que presente menos
del 50% de leptospiras libres en
comparacin con su testigo.
MAT: Algunas consideraciones

La especificidad es buena: normalmente los anticuerpos frente a
otras bacterias no dan reaccin cruzada con Leptospira de manera
significativa.
Existen reacciones serolgicas cruzadas significativas entre
serotipos y serogrupos de Leptospira y es probable que un animal
infectado con un serotipo tenga anticuerpos frente al serotipo
infectante que d una reaccin cruzada con otros serotipos
(normalmente a un nivel ms bajo) en la MAT.
Por tanto, la serologa no puede utilizarse para identificar
definitivamente la identidad del serotipo infectante, y requiere el
aislamiento del agente.
Sin embargo, en reas donde los serotipos de Leptospira presentes
se han descrito bien mediante estudios de aislamiento, el exmen
serolgico de los animales infectados puede sugerir, aunque no
definitivamente identificar, el serotipo infectante.
En un animal aislado, la MAT es muy til en el diagnstico de la

infeccin aguda
Tiene valor diagnstico la demostracin de un aumento de cuatro veces
en los ttulos de anticuerpos en muestras de pares de sueros
procedentes de animales enfermos agudos y convalecientes
tiene limitaciones en la infeccin crnica, tanto en el diagnstico de
abortos como en la identificacin de portadores renales o genitales. Los
animales infectados pueden abortar o ser portadores renales y genitales
mostrando ttulos de MAT por debajo del ttulo mnimo significativo
ampliamente aceptado de 1/100 (dilucin final).
La respuesta serolgica en el momento del aborto es ms variable,
apareciendo algunos animales seronegativos y otros que muestran ttulos
altos.
MAT tiene un uso mucho mayor como una prueba de rebao. Para
obtener informacin til, Cole et al. sugirieron que se tomaran muestras
de al menos diez animales o del 10% del rebao, la que mayor sea.
El incremento en el tamao de la muestra mejora la informacin
epidemiolgica
La PCR se basa en la amplificacin y

deteccin de secuencias especficas de ADN
REALIZACION DE LA PCR
I.
EXTRACCION DEL ADN DE LOS TEJIDOS
II.
PREPARACION DE MEZCLA (MIX)
III. AMPLIFICACION
IV. DETECCION DEL ADN AMPLIFICADO
I. EXTRACCION DEL ADN

La tcnica de PCR se puede aplicar a muestras:
Sangre
Orina diluida en buffer (PBS) inmediatamente
Lquido cefalorraqudeo
Muestras de tejido (ante o post mortem)
Refrigeradas o congeladas
Evitar tejidos muy contaminados o autolticos.
I. EXTRACCION DEL ADN

KITS COMERCIALES:
Existen varias marcas con distintos fundamentos
de extraccin.
Ejemplo: Qiagen e Invitrogen
IN HOUSE:
Lizosima, alcohol isoamllico, etc
II. PREPARACION DE LA MEZCLA DE PCR

PRIMERS: G1 y G2 que amplifican una secuencia de 285 pb
presente en todas la cepas de Leptospiras patgenas
exceptuando a L. kirschneri. B 64 I y B 64 II, los cuales
amplifican una secuencia de 563 pb. presente en L.
kirschneri. Gravekamp y col. (1993).
ENZIMA DNA POLIMERASA (Taq) crea una nueva
secuencia de ADN a partir del templado ADN original
dNTP`s
Mg COFACTOR DE LA ENZIMA
ADN extrado en paso I (TEMPLADO)
BUFFER
AGUA
III. AMPLIFICACION
Aumentar y disminuir la temperatura para permitir la apertura

de las cadenas de ADN, la unin de los primers y la actividad
enzimtica para construccin de nuevas hebras.
34 ciclos de: 94C desnaturalizacin, 55C annealing,
72C para la extensin
El resultado es un aumento exponencial de la cantidad de
ADN
III. AMPLIFICACION
1er
ciclo
2do
ciclo
3er
ciclo
4to
ciclo

a. Siembra en gel de agarosa teido con bromuro
de etidio, en cuba con buffer TBE.
b. Siembra del marcador de peso molecular (en
nuestro caso que marca cada 100 pb).
c. Corrida a 90 V durante 30.
d. Visualizacin en transiluminador UV.
LABORATORIO
LABORATORIO COMPARTIMENTADO EN 4 AMBIENTES PARA
EVITAR CONTAMINACIONES INTERNAS.
2
Extraccin del
ADN
Preparacin
de la mezcla
3
Cargado
del ADN en la
mezcla
1
PCR y
Visualizacin
en UV
TIPIFICACION MOLECULAR
La tipificacin empleando herramientas de biologa molecular puede
realizarse empleando VNTR y MLST, entre las tcnicas mas
conocidas y desarrolladas para Leptospira sp.
PCR
AISLAMIENTO
MAT
SENSIBILIDAD
(la probabilidad de que
para un animal infectado
se obtenga en la prueba
un resultado positivo).
ALTA
(REQUIERE
BAJO NUMERO DE
LEPTOSP. PARA DETECTAR
UN +)
BAJA
(REQUIERE ALTO NUMERO
DE LEPTOSPIRAS PARA
DETECTAR UN +)
ALTA
(OPERADOR CAPACITADO)
ESPECIFICIDAD
ALTA
ALTA
TENER EN CUENTA
NECESITA DOS
SANGRADOS
RAPIDEZ
1.5 A 6 HORAS
HASTA 6 MESES
DEPENDE DEL NUMERO

DE MUESTRAS
CONGELAMIENTO
MUESTRAS
SI
NO RECOMENDADO
SI
Es la probabilidad de que
para un sujeto sano se
obtenga un resultado -)
PCR
AISLAMIENTO
MAT
CONTAMINACION DE LAS
MUESTRAS (ORGANOS)
ADMITE
(NO AUTOLITICAS)
NO ADMITE
NO ADMITE
TIEMPO DE REMISION DE
MUESTRAS AL
LABORATORIO
DIAS O MESES
CONSIDERANDO MUESTRAS
CONGELADAS O
REFRIGERADAS
CORTO (NO MAS DE 24 HS.

PARA ORGANOS Y NO MAS
DE 2 HS PARA ORINA)
DIAS O MESES
CONSIDERANDO
MUESTRAS
CONGELADAS O
REFRIGERADAS
CANTIDAD DE MUESTRAS
1 ES CONCLUYENTE
1 ES CONCLUYENTE
2 O MAS MUESTRAS
PCR: DESVENTAJAS
REQUIRE EQUIPAMIENTO
COSTO ELEVADO
LABORATORIO COMPARTIMENTADO EN 4 AMBIENTES PARA

EVITAR CONTAMINACIONES INTERNAS.
TIPIFICACION: TENIENDO UN AISLAMIENTO, LA TIPIFICACION

SE PUEDE HACER MEDIANTE EL USO DE ANTISUEROS
ESPECIFICOS O POR TECNICAS MOLECULARES
EL DIAGNOSTICO POR PCR SOLO PERMITE TIPIFICACION POR
TECNICAS MOLECULARES
COSTOS ESTIMADOS
Termociclador
Taq
Primers
dNTP`s
Reactivos en General
Transilumindor UV
Microcentrfuga
Cabina de Flujo Laminar
Micropipetas Exclusivas (0.5-5 l, 10-100 l, 1000 l)
Opcional: Cmara de fotos
Gracias por su atencin!
www.senasa.gov.ar
jpetrako@senasa.gov.ar
Pathogenesis of Bacterial Infections in Animals. Fourth Edicion. 2010
Situacin actual de la
Leptospirosis en Colombia
Ivonne Hernandez Toro.
Bacteriloga PUJ, Especialista. Responsable analtico rea de Microbiologa. LNDV. ICA. Bogot D.C.
Uriel Esteban Sierra Zuleta.

Patlogo Veterinario UNAL. Coordinador Grupo Red Laboratorios de Diagnstico Veterinario. ICA. Bogot D.C.
II Seminario Internacional de Reproduccin Bovina y salud del Hato
Bogot D.C., septiembre 6 y7 de septiembre de 2012
Introduccin
El uso, la interpretacin y el valor de los procedimientos de
diagnstico varan: historia clnica, duracin infeccin, serotipo
infectante.
Sospecharse leptospirosis aguda: aparicin repentina de agalactia,
ictericia, hemoglobinuria, meningitis, falla renal aguda/ictericia
perros.
Leptospirosis crnica: aborto, mortinatos, momificacin, nacimiento
animales dbiles, infertilidad (mortalidad embrionaria); falla renal
crnica o hepatitis crnica activa perros y, uvetis peridica caballos.
Secuelas microbiolgicas crnicas: localizacin y persistencia rin y
trato genital, portadores vida, conducen a problemas de Dx concretos.
(Manual de las Pruebas de Diagnstico y de las Vacunas para los Animales Terrestres2012)
CAPITULO 2.1.9
Manual de las Pruebas de Diagnstico y de las Vacunas
para los Animales Terrestres2012
El Dx laboratorio es complejo, pruebas en dos grupos: pruebas

detectar anticuerpos antileptospiras y el otro, poner evidencia las
leptospiras (antgenos o cidos nucleicos: tejidos animales, fluidos
corporales, aislados).
Directo: Cultivo, Examen directo, PCR, IFD.
Indirecto: MAT, ELISA indirecta Hardjo (validacin/implementacin)
Pruebas serolgicas, medio mas ampliamente usado para el Dx de
leptospirosis.
(Manual de las Pruebas de Diagnstico y de las Vacunas para los Animales Terrestres2012)
Red Oficial de LDV
Serologa
(MAT)
LDV Armenia
LDV Bucaramanga
LDV Manizales
LDV Tulu
LNDV Bogot D.C.
Cultivo, Examen
directo, PCR, IFD
LNDV- Bogot D.C.
CAPITULO 2.1.9
Prueba de aglutinacin microscpica (MAT)
Prueba serolgica estndar (evalan otras serologas).

Prescrita comercio.
Buena especificidad (antgenos vivos)
Sensibilidad optima,
antgenos representativos todos
serogrupos conocidos regin, aislados locales.
Normalmente los Acs frente a otras bacterias no dan

reaccin cruzada con Leptospira de manera significativa.
Existen reacciones serolgicas cruzadas significativas

entre serotipos y serogrupos de Leptospira y es probable
que un animal infectado con un serotipo tenga Acs frente
al serotipo infectante que d una reaccin cruzada con
otros serotipos (normalmente a un nivel ms bajo) en la
MAT (aislamiento/brote)
CAPITULO 2.1.9
Dx enfermedad individuos/poblacional (hato, rebao, granja)

Individuos, til Dx infeccin aguda
Incremento cuatro veces ttulos Ac sueros pareados, infeccin aguda
o convalecientes, DX CLARO.
Obtener informacin til, se deben examinar al menos el 10% de la
poblacin (documentar historial vacunacin (serotipos), patologa
reproductiva y sistmico/ictrico-hemorrgico).
Limitaciones, DX, infecciones crnicas individuales, Dx: aborto,
identificar portadores renales y genitales.
(Manual de las Pruebas de Diagnstico y de las Vacunas para los Animales Terrestres 2012)
LNDV
BANCO DE CEPAS (SEROVARES LEPTOSPIRA)

AREA DE MICROBIOLOGA
Actualizado 18 de Noviembre de 2011
ORIGEN
NOMBRE DE LA CEPA
UBICACIN
ESPECIE
SEROGRUPO
SEROVAR
CEPA
AO
PROCED
ENCIA
N CRIO
POSICIN
MTODO DE
CONSERVACIN
N DE VIALES
POSICION
MEDIO
SEMISOLIDO
L. interrogans
Australis
Australis
Ballico
2011
IOC
NO
MEDIO EMJH
TUBO
L. interrogans
Autumnalis
Autumnalis
Akiyami A
2011
IOC
MEDIO EMJH
TUBO
L. borgpetersenii
Ballum
Castellonis
Castellon 3
2011
IOC
NO
MEDIO EMJH
TUBO
L. interrogans
Bataviae
Batavie
Swart
2011
IOC
NO
MEDIO EMJH
TUBO
L. interrogans
Canicola
Canicola
Hond Utrech IV
2011
IOC
NO
MEDIO EMJH
TUBO
L. kischeneri
Cynopteri
Cynoptery
3522 C
2011
IOC
NO
MEDIO EMJH
TUBO
L. kischeneri
Grippotyphosa
Grippotyphosa
Moska V
2011
IOC
NO
MEDIO EMJH
TUBO
L. interrogans
Hebdomadis
Hebdomadis
Hebdomadis
2011
IOC
NO
MEDIO EMJH
TUBO
L. interrogans
Icterohaemorrhagiae
Copenhageni
M 20
2011
IOC
NO
MEDIO EMJH
TUBO
10
L. interrogans
Icterohaemorrhagiae
icterohaemorrhagiae
RGA
2011
IOC
NO
10
MEDIO EMJH
TUBO
10
11
L. borgpetersenii
Javanica
Poi
Poi
2011
IOC
NO
11
MEDIO EMJH
TUBO
11
12
L. noguchii
Panama
Panama
CZ 214 K
2011
IOC
NO
12
MEDIO EMJH
TUBO
12
13
L. interrogans
Pomona
Pomona
Pomona
2011
IOC
NO
13
MEDIO EMJH
TUBO
13
14
L. interrogans
Pyrogenes
Pyrogenes
Salinem
2011
IOC
NO
14
MEDIO EMJH
TUBO
14
15
L. borgpetersenii
Sejroe
Sejroe
M 84
2011
IOC
NO
15
MEDIO EMJH
TUBO
15
16
L. interrogans
Sejroe
Hardjo
Hardjoprajitno
2011
IOC
NO
16
MEDIO EMJH
TUBO
16
17
L. interrogans
Sejroe
Wolffi
3705
2011
IOC
NO
17
MEDIO EMJH
TUBO
17
18
L. biflexa
Semaranga
Patoc
Patoc 1
2011
IOC
NO
18
MEDIO EMJH
TUBO
18
19
L. borgpetersenii
Tarassovi
Tarassovi
Perepelistsin
2011
IOC
NO
19
MEDIO EMJH
TUBO
19
20
L. borgpetersenii
Sejroe
Hardjo
Hardjobovis
2011
IOC
NO
20
MEDIO EMJH
TUBO
20
21
L. interrogans
Australis
Bratislava
Jez Bratislava
2011
IOC
NO
21
MEDIO EMJH
TUBO
21
22
L. borgpetersenii
Ballum
Ballum
Mus 127
2009
IOC
NO
22
MEDIO EMJH
TUBO
22
23
L. santarosai
Shermani
Shermani
1342 k
2009
IOC
NO
23
MEDIO EMJH
TUBO
23
24
L. noguchii
Louisiana
Louisiana
LSU 1945
2009
IOC
NO
24
MEDIO EMJH
TUBO
24
25
L. borgpetersenii
Javanica
Javanica
Veldrat Batavia 46
2009
IOC
NO
25
MEDIO EMJH
TUBO
25
ORDEN
Serovares y Cepas (Brasil IOC)

Bovinos/Bufalinos
Porcinos
Equinos, Caninos y otros
Humanos
Hardjo (Hardjo
pradjitno)
Pomona (Pomona)
Pomona (Pomona)
Hardjo (Hardjo pradjitno)
Hardjo (Hardjobovis)
Canicola (Hond Utrech IV)
Hardjo (Hardjobovis)
Pomona (Pomona)
Icterohaemorrhagiae (RGA)
Tarassovi (Perepelicin)
Icterohaemorrhagiae
(RGA)
Grippotyphosa (Moskva V)
Pomona (Pomona)
Bratislava (Gez Bratislava)
Ballum
Ballum
Hebdomadis
(Hebdomadis)
Ballum
Autumnalis (Akiyami A)
Sejroe (M 84)
Wolffi
Copenhageni (M 20)
Copenhageni (M 20)
Copenhageni (M 20)
Ballum
Copenhageni (M 20)
Patoc (Patoc 1)
Panama (CZ 214 K)
Bratislava (Gez
Bratislava)
Cynoptery (3522 C)
Hebdomadis (Hebdomadis)
Wolffi (3705)
Sejroe (M 84)
Patoc (Patoc 1)
Fuente: rea de Microbiologa LNDV ICA- Bogot D.C.. 2012

SIL
Deteccin de Acs Aglutinantes.

Diluciones del suero con diferentes
serovares (especie)
Titulo de punto final, se define dilucin del
suero que muestra 50% aglutinacin =
Positivo para el serovar
Resultado, puede indicarse punto final de
dilucin 1/100 (1/3200) Suero + cepa.
Ttulos 1/100, correlacin, DX
50%
aglutinacin
Tatiane Varela Ramos. IOC Brasil
PCR CONVENCIONAL PARA LA DETECCIN DE LEPTOSPIRA

BLANCO
Regin del gen rrs
Codifica
rRNA 16S de
Leptospira
patgena spp
Primers utilizados
Tomado de: Genome features of Leptospira interrogans serovar Copenhageni.
Braz J Med Biol Res, April 2004, Volume 37(4) 459-477
Nombre
Secuencia (5-3)
Lep A
GGC GGC GCG TCT TAA ACA TG
Lep B
TTC CCC CCA TTG AGC AAG ATT
Mezcla Maestra
Procedimiento PCR convencional
para la deteccin de Leptospira spp.
Agua libre de nucleasas

Buffer Green
Cloruro de Magnesio
dNTPs
Primer Lep A
Primer Lep B
Enzima Taq Polimerasa
ADN
Obtenido
a partir
Producto obtenido
Cultivo
Hgado, Pulmn, Cerebro y
Rin
Orina, sangre, leche, fluidos
cerebroespinal, torcico y
peritoneal
330pb
Tomados de: http://www.pasteur.fr/ip/easysite/pasteur/fr/recherche/platesformes-technologiques/genopole/PF/pf1-genomique
11
12920
Leptospirosis, consolidado analtico por especie, MAT. 2.009 - 2.012
11511
14000
12000
31.586
CANINA
3.585
Fuente: rea de Microbiologa, LNDV. ICA. 2012
76.026
EQUINA
PORCINA
HUMANA
14.557
13.935
12.363
3280
2785
385
270
140
605
0
BOVINA
4020
5337
2150
850
710
720
2000
1305
4000
3050
6000
2009
2010
2011
2012
5913
6480
6810
8000
6785
10000
Leptospirosis, porcentaje de reactividad serolgica por especie animal, MAT.

2.009 - 2.012.
70,0%
58,0%
60,0%
56,0%
46,7%
47,7%
44,6%
%
re
act
ivi
da
d
se
rol
g
ica
50,0%
54,6%
40,0%
39,6%
33,3%
30,0%
27,5%
20,0%
45,6%
42,4%
38,6%
46,6%
42,4%
33,3%
25,0%
21,6%
21,5%
22,9%
20,0%
10,0%
0,0%
BOVINA
CANINA
EQUINA
PORCINA
HUMANA
2009
2010
2011
2012
Ballum
BOVINA
CANINA
0,0%
0,0%
0,0%
Grippotyphosa.
Hebdomadis
EQUINA
PORCINA
Patoc
HUMANA
0,0%
0,0%
0,0%
0,0%
Pomona
0,0%
0,0%
Bratislava
0,0%
4,2%
1,0%
0,7%
0,9%
0,2%
1,5%
0,8%
0,3%
0,3%
0,5%
0,2%
0,9%
1,7%
1,0%
0,9%
1,5%
1,7%
1,2%
2,5%
3,9%
0,6%
0,2%
0,9%
1,0%
1,0%
0,8%
1,2%
9,8%
13,2%
13,7%
19,2%
22,4%
35,6%
36,8%
40,0%
10,7%
8,2%
9,1%
9,9%
8,5%
5,9%
4,9%
2,1%
10,7%
6,2%
8,2%
10,0%
1,2%
3,7%
15,0%
0,0%
22,1%
25,0%
0,0%
5,0%
17,1%
20,0%
4,0%
0,4%
1,2%
0,0%
Hardjoprajitno
0,0%
Leptospira, porcentaje de reactividad serolgica por serovar y especie animal. MA
35,0%
30,0%
Porcentaje de reactividad serolgica a serovares de Leptospira, en todas las

35,0%
30,5%
30,0%
25,0%
20,0%
17,5%
15,0%
9,7%
10,0%
3,5%
5,0%
4,0%
4,4%
6,5%
% serovares con titulos
Ha
rd
jo
po
ty
ph
os
a
Gr
ip
ad
is
He
bd
om
Cy
no
pt
er
1,3%
1,1%
W
ol
ffi
0,0%
Se
jro
e
0,0%
Ba
llu
m
Ta
ra
ss
ov
i
0,0%
0,0%
3,7%
5,6%
5,5%
10,4%
Correlacin clnica-serolgica. Leptospirosis. 2009-2012

No. anlisis Porcentaje
Positivos
anlisis (+)
Serovar
No. anlisis
Tarassovi
Copenhageni
534
29
0
0
0%
0%
No informan
No informan
Ballum
30
0%
No informan
Panama
Sejroe
Patoc
460
874
341
5
11
12
1.1%
1.3%
3.5%
No informan
No informan
No informan
Wolffi.
353
13
3.7%
Debilidad, muerte, decaimiento, perdida de

peso, aborto, nacimiento de terneros dbiles,
mortinatos, retencin de placenta
Pomona
10.050
403
4.0%
Cynoptery
Autumnalis
159
1.425
7
78
4.4%
5.5%
Hebdomadis
863
48
5.6%
Cancola
9.894
646
6.5%
Grippotyphosa
10.048
971
9.7%
Icterohaemorrhagiae
10.048
1.046
10.4%
Hardjo
25.292
4.426
17.5%
Bratislava
5.622
1.713
30.5%
TOTAL
76.026
8.210
10.8%
Historia clnica
Aborto epidmicos, repeticin de celos,

petequias en la vulva, nacimiento de terneros
dbiles, mortinatos, retencin de placenta
No informan
No informan
Debilidad, muerte, hematuria, aborto,
Ictericia, hemorragias, aborto, cachorros
dbiles, cuadro urmicos
Debilidad, muerte, decaimiento, perdida de
peso, aborto epidmicos, nacimiento de
terneros dbiles, mortinatos, retencin de
placenta
Hemorragias, aborto, nacimiento de terneros
dbiles. Fiebre, vomito y diarrea
Aborto espordicos, repeticin de celos,
petequias en la vulva, nacimiento de terneros
dbiles, mortinatos, retencin de placenta,
infertilidad, mortalidad embrionaria
Aborto, repeticin de celos, petequias en la
vulva, nacimiento de terneros dbiles,
Reactividad serolgica Leptospira (todos serovares bovinos-13). MAT . 2012

25,0%
22,1%
22,4%
20,0%
17,1%
13,7%
15,0%
9,9%
10,0%
8,5%
BOVINA
9,1%
5,0%
1,7%
0,0%
HARDJO PRAJITNO
Grippotyp.
Ballum
Hebdom.
1,5%
Patoc
1,7%
0,3%
Pomona
0,2%
0,0%
Bratislava
mero de sueros de bovinos con reacciones cruzadas, frente a Hardjoprajitno y Hardjbovis. MAT.
70
62
60
50
50
N
o.
S
u
e
r
o
s
40
30
29
26
22 24
20
28
20
14
10
5
0
Grippotyp.
0
Ballum
Hebdom.
2
Patoc
HARDJO PRAJITNO
586 sueros
8
6
1
Sejroe
HARDJO BOVIS
0
Cancola
0
Autumn.
0
Cynoptery
Relacin serolgica entre Hardjobovis, Hardjoprajitno y otros

serovares. Bovinos 2012.
SEROVAR
No. Sueros /
sueros (+)
Porcentaje % (+)
Hardjoprajitno y Hardjobovis
(Cualquiera)
586/220
37.5%
Hardjobovis
586/133
22,7%
Hardjoprajitno
586/87
14,8%
Hardjobovis + OTROS (NO Hardjoprajitno)
586/82
14,0%
Hardjoprajitno+ OTROS (NO Hardjobovis)
586/36
6,1%
Hardjobovis+Hardjoprajitno
586/6
1,0%
Hardjobovis+Hardjoprajitno+Otros
586/51
8,7%
REACTIVIDAD SEROLOGICA DE HARDJO POR DEPARTAMENTO

Departamento
ANTIOQUIA
ARAUCA
ATLNTICO
BOLVAR
BOYAC
CALDAS
CAQUET
CASANARE
CAUCA
CESAR
CHOCO
CRDOBA
CUNDINAMARCA
GUAVIARE
HUILA
LA GUAJIRA
MAGDALENA
META
NARIO
Positivos
4
82
0
17
3
0
32
32
1
34
0
0
123
6
29
5
23
37
0
2009
Total
53
171
0
28
18
10
72
65
12
74
0
0
233
12
79
7
36
99
5
%
7,5%
48,0%
0,0%
60,7%
16,7%
0,0%
44,4%
49,2%
8,3%
45,9%
0,0%
0,0%
52,8%
50,0%
36,7%
71,4%
63,9%
37,4%
0,0%
Positivos
6
24
12
0
1
0
6
7
0
8
0
0
4
0
1
1
5
7
1
2010
Total
86
133
101
28
29
7
59
112
14
48
0
15
45
1
47
10
40
130
8
%
7,0%
18,0%
11,9%
0,0%
3,4%
0,0%
10,2%
6,3%
0,0%
16,7%
0,0%
0,0%
8,9%
0,0%
2,1%
10,0%
12,5%
5,4%
12,5%
Positivos
16
49
17
7
1
3
27
19
13
21
0
28
8
0
9
5
32
70
2
2011
Total
73
109
52
31
9
7
66
63
17
57
3
65
49
1
49
16
64
221
9
%
21,9%
45,0%
32,7%
22,6%
11,1%
42,9%
40,9%
30,2%
76,5%
36,8%
0,0%
43,1%
16,3%
0,0%
18,4%
31,3%
50,0%
31,7%
22,2%
Positivos
18
13
6
0
6
5
5
15
0
13
0
33
3
0
2
8
11
7
0
2012
Total
61
33
13
3
48
11
25
61
1
36
0
100
23
0
10
11
24
17
6
%
29,5%
39,4%
46,2%
0,0%
12,5%
45,5%
20,0%
24,6%
0,0%
36,1%
0,0%
33%
13,0%
0,0%
20,0%
72,7%
45,8%
41,2%
0,0%
NORTE DE SANTANDER
17
35,3%
0,0%
31
6,5%
13
15,4%
PUTUMAYO
34
0
0
22
1
39
17
1
86
0
1
55
3
108
61
4
39,5%
0,0%
0,0%
40,0%
33,3%
36,1%
27,9%
25,0%
2
5
0
1
1
25
9
0
67
21
3
12
37
141
138
7
3,0%
23,8%
0,0%
8,3%
2,7%
17,7%
6,5%
0,0%
0
0
0
11
0
23
26
1
1
0
1
28
7
72
172
2
0,0%
0,0%
0,0%
39,3%
0,0%
31,9%
15,1%
50,0%
0
0
0
0
8
5
7
0
0
0
0
2
22
16
41
0
0,0%
0,0%
0,0%
0,0%
36,4%
31,3%
17,1%
0,0%
QUINDIO
RISARALDA
SANTANDER
SUCRE
TOLIMA
VALLE DEL CAUCA
VICHADA
Reactividad Serolgica Leptospira (todos los serovares equinos-8) MAT. 2012

40,0%
35,6%
35,0%
30,0%
25,0%
19,2%
20,0%
Equinos
13,2%
15,0%
10,7%
10,0%
6,2%
4,2%
4,0%
5,0%
0,0%
Hardjoprajitno
1,0%
Grippotyp.
Ballum
2,5%
0,0%
Hebdom.
Patoc
0,5%
1,5%
Pomona
1,0%
Bratislava
Reactividad Serolgica Leptospira (todos los serovares porcinos-9) MAT. 2012

40,0%
36,8%
35,0%
30,0%
25,0%
Porcinos
20,0%
15,0%
8,2%
10,0%
9,8%
3,9%
5,0%
0,4%
0,0%
0,0%
Hardjoprajitno
0,8%
Grippotyp.
Ballum
1,0%
0,2%
Hebdom.
1,0%
Patoc
0,2%
0,8%
Pomona
0,7%
Bratislava
Reactividad Serolgica Leptospira (todos los serovares caninos-8) MAT. 2012

9,0%
8,2%
8,0%
7,0%
6,0%
5,9%
Caninos
5,0%
4,0%
3,0%
2,0%
1,0%
0,0%
0,0%
Hardjoprajitno
1,2%
0,0%
Grippotyp.
1,2%
0,0%
Ballum
0,0%
0,0%
Hebdom.
0,0%
Patoc
0,0%
0,0%
Pomona
0,0%
Bratislava
Reactividad Serolgica Leptospira (todos los serovares caninos-8) MAT. 2012

9,0%
8,2%
8,0%
7,0%
6,0%
5,9%
Caninos
5,0%
4,0%
3,0%
2,0%
1,2%
1,0%
0,0%
0,0%
Hardjoprajitno
0,0%
Grippotyp.
1,2%
0,0%
Ballum
0,0%
0,0%
Hebdom.
0,0%
Patoc
0,0%
0,0%
Pomona
0,0%
Bratislava
Reactividad Serolgica Leptospira (todos los serovares humanos-17). MAT. 2012

12,0%
10,7%
10,0%
8,0%
6,0%
Humanos
4,9%
3,7%
4,0%
2,1%
2,0%1,2%
1,2%
0,9%
0,6%
0,9%
Grippotyp.
Ballum
Hebdom.
0,9%
0,3%
0,0%
0,0%
Harjopratjino
0,9%
Patoc
Pomona
Bratislava
Conclusin
1.
2.
3.
4.
Reactividad serolgica a Leptospira Red LDV ICA, es

10.8%:
30.5%
Bratislava,
17.5%
Hardjo,
10.4%
Icterohaemorrhagiae, 9.7% Grippotyphosa, 6.5% Canicola,
5.6% Hebdomadis, 5.5% Autumnalis, 4% Wolffi, 3.5% Patoc,
1.3% Sejroe y 1.1% Panama.
Obtener informacin til, Dx Leptospirosis, serologa:
anlisis individuales poco practico, se deben examinar al
menos diez animales o el 10% del hato/granja (documentar
historial, vacunacin (serotipos), patologa reproductiva y
sistmico/ictrico-hemorrgico,
insuficiencia
renalheptica).
Dx serolgico individual infecciones agudas/convalecientes
(MAT), recomendada la serologa pareada, incremento
cuatro veces en los ttulos Acs, constituye un DX claro
Infecciones crnicas,
abortar, portadores renales y
genitales con ttulos por debajo del mnimo significativo,
aceptado de 1/100 (dilucin final)
Agradecimientos
Ervin Seplveda, Asistente de la Coordinacin Grupo Red LDV

Ivonne Hernndez, Responsable analtico rea Microbiologa
LNDV.
Gracias
Fisiopatologa y manifestaciones
clnicas de la leptospirosis bovina
CEIPAA-FMVZ-UNAM
Problemas reproductivos
Infertilidad
Disfuncin hormonal
Malnutricin (estabulacin vs pastoreo)
Origen infeccioso
Abortos
Fsico (traumtico)
Malnutricin
Infeccioso
DESCONOCIDO ( 60%)
Prdidas econmicas por aborto: 1,000 USD
Diagnstico
Clnico
Individuo
Hato
Diferencial
Laboratorio
Diagnstico de abortos
Determinar la causa de
abortos en animales de
produccin es complejo
El xito en el diagnstico
slo es del 30 al 40%
Causas que impiden un diagnstico

1. Los abortos generalmente resultan de
eventos que sucedieron hace unas semana
en el hato
2. El feto es retenido dentro del tero horas o
das antes de ser expulsado. Generalmente
se elimina autolisado
3. Las membranas fetales, las cuales
generalmente
tienen
lesiones
ms
importantes, raramente se recolectan
Causas que impiden un diagnstico

4.
Factores txicos y genticos

responsables de muerte fetal no
son detectables en las muestras
recolectadas
5. Algunas causas de aborto son
desconocidas o no existe un
procedimiento diagnstico efectivo
para identificarlo
Diagnstico de las causas infecciosas de

aborto
No todas las causas infecciosas se pueden
reconocer en las muestras de feto y placenta
remitidas al laboratorio
Algunas condiciones en las que la madre
puede indirectamente afectar al feto son:
hemoconcentracin,
falla
circulatoria,
anemia severa, fiebre, endotoxemias y fallas
respiratorias.
Diagnstico de las causas

infecciosas de aborto
Los agentes infecciosos pueden ingresar (a la
vaca), por diferentes vas: respiratoria,
vaginal, oral, mucosas, vectores.
Existen agentes que pueden transferirse en el
semen o en los embriones transferidos
(resisten la congelacin y antibiticos)
Ejemplos: DVB, Herpes virus, Ureaplasma
diversum
Etiologa infecciosa
Agentes fungales
Aspergillus fumigatus
Agentes virales
IBR
DVB
Herpesvirus
Agentes parasitarios
Tritrichomonas foetus
Neospora canis
Agentes bacterianos
Brucella abortus
Salmonella enterica
Campylobacter fetus
Listeria monocytogenes
Ureaplasma diversum
Leptospira

Leptospira Hardjo puede mantenerse en
tero o cuernos uterinos e infectar al feto
cuando la vaca queda gestante
La accin hormonal permite la proliferacin
de algunos agentes como: Campylobacter
fetus que puede entonces migrar de vagina a
tero

Algunos organismos pueden
multiplicarse en el feto mucho
antes de ser abortados como
Ureaplasma diversum,
Aspergillus fumigatus,
herpesvirus-1

El aborto es el pico de un
problema complejo
Por tanto, es necesario
colectar la mayor cantidad de
informacin y trabajar de
manera coordinada (clnico
laboratorio- propietario).

Como la vaca, el feto y la placenta
estn igualmente involucrados en el
problema es indispensable que se
tomen muestras de los tres.
Sin embargo, siendo un problema de
hato, igualmente importante es
colectar muestras de los animales que
no han abortado (serologa).
Importancia de los agentes infecciosos

Son realmente importantes las diversas
etiologas infecciosas, como causas de aborto?
Considerar
Regin geogrfica
Condiciones ambientales
Condiciones sanitarias
Polticas y costumbres regionales
Medicina preventiva
Diagnstico
Real Academia de la Lengua Espaola
Evidencias vs indicios
La primera: Certeza clara y manifiesta de la que no se
puede dudar
Lo segundo: Fenmeno que permite conocer o inferir
la existencia de otro no percibido
En enfermedades de etiologa infecciosa, la

evidencia consiste en lograr el aislamiento e
identificacin, otras pruebas slo arrojan indicios.
Leptospirosis
Enfermedad de mamferos
Domsticos
Silvestres roedores (Rattus norvegicus,
Mus musculus)
Zoonosis
Humano es husped accidental
Qu causa la leptospirosis?
Epizootiologa de leptospirosis
Distribucin geogrfica
Una de las enfermedades
infecciosas ms
diseminadas
Areas agrcolas, ganaderas,
basureros, zonas
suburbanas
Presencia de ratas el factor
de riesgo ms importante
para leptospirosis en
humanos
Limpieza en Acapulco
Grupos en riesgo:
Agricultores
Trabajadores en establos y porquerizas
Mdicos veterinarios
Trabajadores de rastros y empacadoras
Trabajadores de limpieza de alcantarillado
Criadores y propietarios de perros
Atletas (triatletas) que practican natacin en
lagos y lagunas cenotes
Leptospirosis
El humano es un husped accidental.
Adquiere la infeccin mediante el contacto
estrecho con orina o lquidos uterinos de
animales
enfermos,
portadores
asintomticos o reservorios.
Rattus norvegicus, Del. Coyoacn, 2009
Mus musculus, establo en

Teoloyucan, Edo. de Mxico, 2007
Leptospirosis
Tambin
en
forma
indirecta por agua o
lodos contaminados
ORINA DE
PORTADORES Y
RESERVORIOS
INUNDACIONES
INDIVIDUOS
SUSCEPTIBLES
Triada epidemiolgica de la leptospirosis y de

otras enfermedades transmisibles
AGENTE
AMBIENTE
Carmona Gasca, CA. 2010.
HOSPEDERO
Persistencia de Leptospira en el
ambiente
Rpidamente inactivada
por:
Desecacin
Luz solar
Detergentes y
desinfectantes
pH cido o muy alcalino
Calor
Persistencia de Leptospira en el
ambiente
Por lo tanto,
Portadores asintomticos y reservorios son
fundamentales para su mantenimiento.
Ambos eliminan Leptospira con orina o lquidos
uterinos / fetales
Ambiente hmedo, inundaciones, lodos
Contacto con heridas, piel reblandecida por
exceso de humedad o bien mucosas
Leptospirosis bovina
Principal etiologa
L. interrogans SV Hardjo, subtipo Hardjoprajitno
L. borgpetersenii SV Hardjo, subtipo Hardjobovis
Otras SVs no adaptadas al husped bovino

como Pomona, Grippotyphosa, Tarassovi,
Mini*
* Aislados obtenidos en animales
de abasto a partir de 197 riones
trabajados de Mxico central
(Carmona Gasca CA, 2011)
Transmisin
Hardjobovis es la SV con la informacin
gentica ms simple
La transmisin (aparentemente), requiere un
contacto directo vaca vaca
Animales infectados eliminan leptospiras en
cuentas 10E8 por orina
Aerosoles pueden infectar animales
susceptibles por mucosas
No hay evidencias de la transmisin ambiental
Distribucin
Replicacin en sangre carente de anticuerpos

Distribucin a tejidos (pulmn, rin, tero)
Dao a endotelios, petequias
Deficiente perfusin, necrosis focal, aborto
Alojamiento en tbulos contorneados renales
Tambin se alojan en oviducto resultando en
infertilidad
Eliminacin con la orina
Semiologa
Principalmente signos de tipo reproductivo
Abortos (tormentas de abortos), en ltimo
tercio de la gestacin
Momificaciones
Mortinatos
Nacimientos prematuros
Becerros dbiles
Infertilidad
Semiologa
Otros signos
Sndrome de cada de la leche
Hemolactia
Leche amarilla espesa
Fiebre
Hemoglobinuria
Ictericia
Zoonosis...!
Semiologa
En animales jvenes
Signos ms severos
Fiebre, anorexia
Disnea, congestin pulmonar
Ictericia
Hemoglobinuria (48 72 hrs)
Anemia (4 a 5 das)
Serovariedades adaptadas
Serovariedades adaptadas a husped
Hardjo a bovinos
Pomona a cerdos
Canicola a perros
Icterohaemorrhagiae a ratas
Ballum a ratones
No hay tal para humanos
Serovariedades no adaptadas
Clasificacin de Leptospira
Patgenas
> 320 serovariedades
L. alstonii
L. alexanderi
L. borgpetersenii
L. interrogans
L. kirschneri
L. noguchii
L. santarosai
L. weilii
l.. fainei
Intermedias
L. terpstrae
L. wolffii
L. licerasiae
L. inadai
L. broomii
No patgenas
L. kmetyi
L. wolbachii
L. meyeri
L. biflexa
L. vanthielii
L. yanagawae
Leptospirosis en humanos
Enfermedad de Weil
Mialgias / artralgias
Fiebre
Conjuntivitis
Petequias en piel
Ictericia
Anictrico
Semejante a influenza
Cefalea
Fiebre de origen
desconocido
Meningitis
crnica (?) sin
evidencias
Leptospirosis en humanos
Prevalencias de anticuerpos del 10 al 22%
Anticuerpos contra las serovariedades:
Icterohaemorrhagiae, Pomona, Sejroe Australis,
pero variable segn la regin.
CEIPAA-FMVZ-UNAM
delapema@unam.mx
Laboratorio de Referencia de la
OIE para Leptospirosis
Incidencia de Leptospirosis Bovina en Amrica Latina
Incidencia de Leptospirosis Bovina en Amrica

Latina
Laboratorio de Referencia de la OIE para Leptospirosis
Servicio Nacional de Sanidad y Calidad Agroalimentaria (SENASA)
Buenos Aires, Argentina
Organizacin Mundial de Sanidad Animal
Una de las misiones de la OIE es garantizar la transparencia de la

situacin de la salud animal en el mundo, zoonosis incluidas, y
mejorar los conocimientos que se tienen de ella.
Entre las obligaciones formales de los Miembros de la OIE figura

el envo del modo ms oportuno y transparente de informacin sobre
las enfermedades animales pertinentes - incluidas las zoonosis
presentes en su territorio
Categoras para informar incidencia de un Pas
0 Enfermedad ausente
+.. Enfermedad presente sin datos cuantitativos
+
Enfermedad presente con datos cuantitativos, pero el

nmero de focos es desconocido
... No hay informacin disponible para esta enfermedad

?
Se sospecha de la enfermedad pero no ha sido

confirmada
+? Presencia de la infeccin pero sin signos clnicos

0 Foco(s) anterior(es) que continan
Encontramos distintos tipos de informes
13 pases
Informan
INCIDENCIA
(Nmero de brotes en
animales domsticos y
diagnsticos positivos
en animales silvestres,
durante el ao 2011)
Barbados: 11
Belice: ausente (0)
Brasil: 90
Chile: 24
Colombia: 417
Costa Rica: 3
Cuba: 43
El Salvador: 1
Mxico: 346
Nicaragua:3
Panam: 1
Paraguay: 31
Uruguay:65.
Distintos tipos de informes

7 pases Informan tener la
enfermedad presente sin datos
cuantitativos (+...)
Argentina, Rep. Dominicana,

Guadalupe, Guatemala, Guyana,
Martinica, Surinam
2 pases Informan presencia de la

infeccin pero sin signos clnicos
(+?)
Bolivia, Ecuador,
2 pases Declaran sospecha de la

enfermedad pero no ha sido
confirmada (?)
Aruba, Hait
11 pases No hay informacin

disponible para esta enfermedad
()
Caimn (Islas), Dominica, Granada,

G. Francesa, Honduras, Jamaica,
Per, San Vicente y granadinas, St.
Kitts and Nevis, Trinidad y Tobago,
Venezuela
11
31%
13
37%
11
32%
declaran incidencia
no hay informacion
presencia o sospecha de la enfermedad
Mapa de distribucin de Lepto en America

julio-dic 2011
Mapa mundial de distribucin de Leptospirosis

Animal. 2011
Enfermedades en el tiempo: OIE- Leptospirosis

Clave para los colores
No hay informacin disponible para esta
enfermedad
Enfermedad nunca sealada
Enfermedad no informada durante este periodo
de informe
Se sospecha de la enfermedad pero no ha sido
confirmada
Presencia de la infeccin pero sin signos clnicos
Presencia de la infeccin pero con la presencia
de signos clnicos
Presencia de la infeccin pero limitada a ciertas
zonas
Ninguna informacin
Cuando la situacin sanitaria en los animales domsticos y salvajes es

diferente, la casilla se divide en dos:
La parte superior indica la situacin en los animales domsticos
La parte inferior indica la situacin en los animales salvajes
Pas
2005
2006
ene.-jun. jul.-dic. ene.-jun.
Anguilla
Antigua y
Barbuda
Antillas H.
Argentina
Aruba
Bahamas
Barbados
Belice
Bermudas
Bolivia
Brasil
Caimn
(Islas)
Estatus semestrales
2007
2008
jul.-dic. ene.-jun.
jul.-dic. ene.-jun.
2009
jul.-dic. ene.-jun.
2010
jul.-dic. ene.-jun. jul.-dic.
Chile
Colombia
Costa Rica
Cuba
Dominica
Dominicana
(Rep.)
Ecuador
El Salvador
Granada
Guadalupe
(Francia)
Guatemala
Guyana
Guyana
Francesa
Hait
Honduras
Islas
Vrgenes
Britnicas
Jamaica
Martinica
(Francia)
Mxico
Montserrat
Nicaragua
Panam
Paraguay
Per
Puerto Rico
San Vicente y
las
Granadinas
St. Kitts and
Nevis
St. Lucia
St. Pierre y M
Surinam
T. y Tobago
Turco y
Caicos (Islas)
Minor
Outlying
Uruguay
Venezuela
Conclusiones
Si bien para la OIE la enfermedad es de declaracin obligatoria, en
algunos pases no se la considera de esa manera y otros pases no
presentan los informes correspondientes.
La informacin obtenida a travs de los reportes de OIE result

escasa y muchas ocasiones incompleta, no pudiendo deducirse
claramente los serovares predominantes en cada pas.
Es necesario fomentar el diagnstico, el aislamiento, la tipificacin

y la comunicacin estos resultados al Servicio Veterinario o al
organismo oficial encargado de enviar los informes a OIE.
Esta informacin es relevante en cuanto a la produccin de

biolgicos eficaces y diagnsticos correctos.
Contar con datos oficiales sobre la situacin de

cada pas es relevante para poder prevenir y
controlar la enfermedad ya que es imposible su
erradicacin debido a sus reservorios silvestres.
Gracias por su atencin
www.senasa.gov.ar
Aproximacin epidemiolgica
diagnstico poblacional de
leptospirosis en Bovinos
Jorge L Zambrano Varn

DVM, MPVM.PhD.Dipl ACT
Grupo de Reproduccin Animal y Salud de Hato
Facultad de Medicina Veterinaria y de Zootecnia
Universidad Nacional de Colombia
Dx de Aborto: Consideraciones Econmicas

Riesgo de Aborto
Perfil del hato (Prevalencia del
patgeno
Edad del grupo afectado
Interacciones de agentes causales
Riesgo de Transmisin
Vertical
Horizontal
Impacto Economico sobre el hato
Conversin de alimento
Eficiencia Reproductiva
Perdidas en produccin
Riesgo de descarte
Identificar el tipo de patrn clnico

Evaluar Historia del hato y de las vacas
Edad del feto

Edad de la vaca(s) / numero de lactancias
Presentacin de abortos anteriores
Historia de vacunacin
Cambizo de manejo
Nuevas adiciones al hato
10
% 5
0
0
Gestation
12 15 18 21 24 27 30 33 36 39 42 45
Weeks
Investigacin de Hato
Ejemplo:
Association
21 abortos en 10 das
1st aborto vaca comprada de 4 aos
14 abortos en el grupo de las novillas
4
3
# 2
4 aos
2 aos
0
1
9 10
Tormenta de Abortos - dias
Aspectos Clnicos
Procedimientos Diagnsticos
Definicin de caso = Aproximacin Clnica
- Mortalidad embrionaria
- Aborto
- Mortinatos
- Infertilidad de hato
Pruebas Diagnosticas
- Necropsia, toma y envi de muestras
- Interpretacin Serolgica a nivel de hato
Sensibilidad / Especificidad; PPV/NPV
Medidas de enfermedad / Aproximacin
Clnico- Epidemiolgica
Prevalencias esperadas de los caso de

perdidas reproductivas
Fallas en la Fertilizacin:
5-15%
Muerte embrionaria< d 42:

15-30%
Muerte Fetal (aborto)

5%
Infertilidad del hato??
Rutas de infeccin
a la placenta
A travs del crvix
hematgena al placentoma
Infeccin uterina pre-existentes?
La distribucin de las lesiones en el feto pueden

sugerir
Placenta
vasos umbilicales
Placenta
Liquido amnitico
From M. Anderson CAHFS, 2003
feto (Hgado,
Sx sistmico)
feto (Piel,
pulmn, TGI)
Procedimientos Diagnsticos
Histopatologa
Seleccin completa de tejidos incluyendo: cerebro, pulmn,
corazn, hgado, rin, bazo, timo, G linfticos, abomaso,
intestino, placenta
Conjuntiva
From M. Anderson CAHFS, 2003
Leptospirosis - histopathology
Hgado
Rin
Leptospirosis
Leptospira FA en
impronta de rin
Leptospira IHC en rin
Dx: Pruebas Serolgicas

Usos:
1. Estimar prevalencia
2. Detectar enfermedades
3. Confirmar la presencia de enfermedades (alta
especificidad >99%)
4. Monitorear vacunaciones, disminucin de la
inmunidad pasiva, y exposicin a agentes
infecciosos
5. Erradicar enfermedades
Sensibilidad
Varia con las
caractersticas biolgicas
del agente y del husped
Edad
Estado de la
enfermedad
preclnica, clnica
Agente
Tiempo de infeccin
Infecciones
inmunosupresoras
Especificidad
Geografa
Uso de vacunas
Husped
Hato
Se y Esp son propiedades

de las pruebas Dx
que confirmas si la prueba es
valida
Seleccin de los puntos de corte

Se, Sp <1
No-infectado
Probability
density
Infectado
Cut-off
TN
TP
FN FP
Se = 1
Sp = 1
Quantitative test value (e.g.,MATP)
Diagnostico serolgico de Hato

Considerar el Hato como la unidad de diagnostico .
Evaluar la asociacin entre los agentes infecciosos y
los problemas clnicos
perfil de anticuerpos agente especficos en
diferentes grupos de poblacin
Estimar hasta donde el problema puede ser
atribuido a un agente infeccioso (OR, RR)
Caso-control
Diagnstico serolgico:
Casos y Controles
1) Toma de muestras de vacas abortadas

2) La unidad de inters es el hato
3) Toma de muestras de suero de un animal
del mismo grupo con caractersticas
reproductivas y productivas similares
4) Comparar la distribucin de anticuerpos y

los ttulos entre las vacas afectadas y las
sanas
5) Calcular el nivel de asociacin y en riesgo
de aborto
Resultado Serolgico
Negativo
Positivo
Frequency
50
45
40
Non-infected
Infected
35
30
25
20
15
10
5
0
1:20
1:50
1:100
Titer
Se = 97.1%
Sp = 94.4%
1:200
1:400
1:800 1:160
Resultados Serolgicos
Negativo
Positivo
Frequency
50
45
40
Non-infected
Infected
35
30
25
20
15
10
5
0
1:20
1:50
1:100
Titer
Se = 100%
Sp = 83.3%
1:200
1:400
1:800 1:1600
Resultados Serolgicos
Negativo
Positivo
Frequency
50
45
40
Non-infected
Infected
35
30
25
20
15
10
5
0
1:20
1:50
Se = 81.7%
Sp = 100%
1:100
Titer
1:200
1:400
1:800 1:1600
Hato expuesto / Perfil de alto riesgo:

Titulo Promedio = 694
No. Animales
Patrn uniforme de anticuerpos vacnales:

Titulo Promedio = 116
No. Animales
Diagnstico serolgico
Titulo
Diagnstico de perdidas gestacionales
D 28 Dx temprano
D 3 Dx Confirmativo
D 45-60 Dx Palpacin
D 55-75 Sexaje Fetal
D 120 Reconfirmar
D 210 Confirmar para secar
Desarrollo de la vescula amnitica
D 35
D 45
52 d
D 48
55 d
Dx de gestacin temprana
Dx Criteros:
- Fluido (amnios)
- Embrin
- Corazn fetal
D 28
UG
Bl
AV
Evolucin de la gestacin (d 28-56)

CU
AMN
CF
Muerte Fetal
Distribucin del riesgo de aborto por edad
4
#
2
4 Aos
2 Aos
0
1
9 10
Tormenta de Abortos - dias
( Tormenta de abortos n=18 en un periodo de 10 d
Risk of fetal loss

(deaths per 100 per 35 d)
Riesgo y patrones de muerte fetal

10
9
8
7
6
5
4
3
2
1
0
0
50
100
150
200
Days in gestation
250
300
IBR Causalidad
Abortadas
No-abortadas
BHV-I >1:256
BHV-I <1:256
11
Odds Ratio = 1.57 (0, 71)

p = 0.6
Dx basado en serologa para aborto

por BVDV
Abortado
No abortado
>1:1024
<1:512
10
16
32
64
128
256
512 1024 2048 4096
1/titer
SVN Titulo
OR = 35 (2,170)
p = 0.003
Leptospira vsAborto
Aborto Epidmico
Asociado normalmente con una
exposicin aguda en el hato:
Medioambiental o estacional
Asociado con exposicin de animales

no expuestos previamente al serovar
endmico
Edad y manejo de grupos etreos.
Leptospirosis es Endmica en el hato
Afecta la eficiencia reproductiva
Leptospira vs Falla Reproductiva

Bovino husped de mantenimiento o adaptado a Leptospira
hardjo.
Abortos espordicos debido a L. hardjo en el hato adulto
Ineficiencia Reproductiva
Aumento del IEP

Fallas en la concepcin en animales seropositivos a L
hardjo
Incremento en el numero de servicios
Leptospira vs Falla Reproductiva

12
10
8
Falla
Control
Concepcion
6
4
2
0
Neg
100
200
400
1/titer
800
1600
L. hardjo
seropositivo
Negativo
L. hardjo
Odds ratio = 2.8 (0.53, 14.73)

P = 0.21
Leptospira vs aborto
En hatos donde Leptospira es
endmica en adultos:
Novillas: Sx clnicos (aborto) at 1st
exposicin al hato adulto
Los ttulos decaen hacia el momento
del aborto (Dx individual difcil).
4
3
#2
4 years
2 years
0
1
Abortion storm - days
9 10
Dx basado en la poblacin
(caso-control) es mas eficiente
especialmente en los casos de
Leptospira
Leptospira spp MAT

L. pomona hardjo grippotyphosa ictero. canicola
Negativo
N
N
N
N
N
Expuesto a
L. hardjo
1:400
Vacunado,
no-expuesto
1:200
1:100
1:100
1:200
1:100
Vacunado,
expuesto
L. hardjo
1:400
1:1600
1:200
1:200
1:100
Interpretacin ttulos de Leptospira

Anticuerpos elevados por periodos de
60120 das
En general < 1:800
Tienden a aumentar si se usan vacunas polivalentes y
si se usan m >2x por ao
Ttulos contra mltiples serovares
No comparar resultados entre laboratorios
Reactividad cruzada en comn
El serovar de titulo mas alto = Infeccioso
Ttulos en aborto > 1:800 = dx
Ttulos de L. Hardjo pueden ser bajos aun ante
infeccin
From C. Bolin, MSU, 2003
Estrategia recomendada para evaluar infecciones

de hato por Hardjo
Tamao de la muestra
Colectar orina post administracin de furosemida IV
AF o PCR en orina
Serologa ?
Muy til para identificar animales no infectados por
L. Hardjo
Incrementa los costos de Dx
From C. Bolin, MSU, 2003
Resumen Dx poblacional de Leptospirosis

Definicin Clnica
Epidemiologia
Conocimiento de la
Enfermedad
Factores de Riiesgo
Periodos de Riesgo
Seleccin diferencial
Seguimiento
Las vacunas son solo una
de las mltiples estrategias
de control
jlzambranov@unal.edu.co
Vacunacin sobre periodos de riesgo
Sistema Nacional de Vigilancia de

Leptospirosis
Milena Rodrguez Bedoya

Mdica Veterinaria Epidemiloga,
MSc (c) Epidemiologa Clnica
Grupo de zoonosis
Subdireccin de Vigilancia y Control en Salud Pblica
Instituto Nacional de Salud
Colombia
Sistema Nacional de Vigilancia en Salud

Pblica
Orientar las polticas y la planificacin en salud pblica
Tomar las decisiones para la prevencin y control de
enfermedades y factores de riesgo en salud
Optimizar el seguimiento y evaluacin de las intervenciones
Racionalizar y optimizar los recursos disponibles y lograr la
efectividad de las acciones en esta materia, propendiendo por
la proteccin de la salud individual y colectiva
Normatividad
Ley 9 de 1979
Decretos 1562/1984 1601/1984
Ley 10 de 1990
Ley 100 de 1993 (SGSSS).
Ley 715 de 2001
Circular 018 de 2004
Decreto 3518 de 2006 (Creacin y reglamentacin del Sistema

de Vigilancia en Salud Pblica).
Decreto 2323 de 2006 (Red Nacional de Laboratorios).
Decreto 2257 de 1986 (investigacin, Prevencin y Control de la
Zoonosis).
Estructura
INTEGRANTES EN EL SECTOR SALUD
OMS/OPS
RED NAL. DE LAB.
INS
INVIMA
DDS - LSP
DLS
IPS
pblicas
IPS
privadas
ASEGURADORES
SUPERSALUD
MSPS
Notificacin
Semanalmente
Nivel Nacional Instituto Nacional de Salud
Mircoles o jueves si el lunes es festivo
Unidades Notificadoras Departamentales y Distritales
Martes o mircoles si el lunes es festivo
Unidades Notificadoras Municipales

Lunes o martes si el lunes es festivo
Unidades Primarias Generadoras de Datos y/o
Unidades Informadoras
Inmediatamente
En caso de brote, situaciones de emergencia.
Eventos de inters en salud pblica

Segn la transmisin o
prevencin
Zoonosis.
Enfermedades transmitidas por
vectores.
Infecciones de transmisin
sexual.
Enfermedades
inmunoprevenibles.
Enfermedades debidas a
factores de riesgo ambiental y
sanitario.
Enfermedades no transmisibles
Segn las medidas de alcance

de la poblacin
Eventos en erradicacin.
Eventos en eliminacin.
Eventos de control nacional.
Eventos de control
internacional.
Vigilancia de
Leptospirosis
Sivigila
SVCSP
Grupo
Microbiologa
RNL
Serogrupos: 17
Serovares: 28
Notificacin desde
2005
* Ficha de datos
bsicos
*Implementacin
de la prueba de
MAT - RNL
* Primera revisin
y actualizacin del
protocolo
2010
2008-2009
Vigilancia de leptospirosis en Colombia
* Ficha de datos
bsicos
* Ficha de datos
complementarios
Objetivo general
Realizar el seguimiento continuo y sistemtico de la

leptospirosis y sus factores asociados, de acuerdo con los
procesos establecidos para la notificacin, recoleccin y
anlisis de los datos, que permita generar informacin
oportuna, vlida y confiable para orientar medidas de
prevencin evitando el deterioro de la salud en las
poblaciones y logrando el control de la enfermedad.
Definiciones operativas de caso

Caso sospechoso:
Paciente que presenta enfermedad febril aguda con cefalea,
mialgias y postracin asociada a cualquiera de los siguientes
sntomas:
sufusin conjuntival, irritacin menngea, anuria, oliguria y
proteinuria, ictericia, hemorragias (intestinal, pulmonar),
arritmia o insuficiencia cardaca, erupcin cutnea, falla
respiratoria
Con antecedentes epidemiolgicos de contacto con aguas
estancadas, pozos, ros, roedores, animales domsticos o
silvestres en el ltimo mes.

Caso confirmado:
Caso probable que es confirmado por uno de los siguientes
criterios:
Prueba de microaglutinacin (MAT) positiva en dos muestras
tomadas con 15 das de diferencia (suero), en las cuales se
evidencie un aumento de cuatro veces o ms el ttulo de
anticuerpos a uno o ms de los antgenos leptospirales.
Seroconversin mediante MAT en dos muestras tomadas con
15 das de diferencia.
En el caso que slo se obtenga una muestra debe presentarse
un ttulo igual o superior a 1:400.

Caso Confirmado..
Aislamiento de Leptospira spp en cultivo de sangre, orina o

LCR.
Biopsia positiva (por inmunofluorescencia o coloraciones de
plata) en muestras de hgado, rin, pulmn.
Caso confirmado por nexo epidemiolgico:

Confirmacin de casos probables a partir de casos
confirmados por laboratorio utilizando la asociacin de
persona, tiempo y lugar.
Notificacin
Notificacin semanal
La notificacin de casos de mortalidad
leptospirosis debe ser inmediata a nivel local
Ficha de notificacin
por
Ficha de datos bsicos
Fuente Sivigila 2012
Ficha de datos complementarios
Actividades de control
Individuales (caso)
oTratamiento al paciente
oInvestigacin de caso y campo:
Ruta de
transmisin
La prevencin y
control
Demostrar la infeccin
en el husped humano
ILS OMS, 2003
INTERSECTORIALIDAD
Acciones colectivas
Fuentes y abastecimiento
de agua
SANEAMIENTO
BSICO
Manejo adecuado de
alimentos
ANIMALES
Disposicin de residuos
slidos y excretas
ROEDORES
Susceptibles
Educacin a la comunidad: IEC
o Mejoramiento de las condiciones
de saneamiento bsico
o
Caracterizacin epidemiolgica
Comportamiento de la notificacin de
leptospirosis 2009-2011
Casos totales notificados
120
Nmero de casos
100
80
2009
60
2010
40
2011
20
0
1 2 3 4 5 6 7 8 9 1011121314151617181920212223242526272829303132333435363738394041424344454647484950515253
Semana epidemiolgica
Fuente: Sivigila, grupo de zoonosis. INS
Ao
2009
2010
2011
SIVIGILA
Individual
1816
2261
2478
Casos de leptospirosis notificados segn

clasificacin final, Colombia 2009-2011
3000
Nmero de casos
2500
2000
1500
Probable
1000
Confirmado
500
0
2009
2010
2011
Aos
Ao
2009
2010
2011
Probable Confirmado
45,5
54,5
58,6
41,4
49,9
50,1
Caractersticas socio-demogrficas de los casos de

leptospirosis notificados, Colombia 2009-2011
Masculino
Femenino
Tipo de caso
Probable
Confirmado
2112 (68,4)
2426 (69,9)
975 (31,5)
1041 (30,0)
15 19 aos
20 24 aos
340 (11,0)
354 (11,4)
409 (11,7)
441 (12,7)
Cabecera municipal
Rural disperso
Centro poblado
2258 (73,1)
463 (15,0)
365 (11,8)
2406 (69,3)
576 (16,6)
483 (13,9)
Subsidiado
Contributivo
No afiliado
Especial
Excepcin
1370 (44,3)
1137 (36,8)
451 (14,6)
78 (2,5)
45 (1,4)
1571 (45,3)
1093 (31,5)
589 (16,9)
124 (3,5)
88 (2,5)
Caractersticas socio-demogrficas
Sexo
Edad
rea de
procedencia
Tipo de SGSSS
Promedio de edad
31,5 aos.
Incidencia de leptospirosis por departamento y regin,

Colombia 2009-2011
Incidencia por 100.000 hbt
Incidencia
Departamento
acumulada por
de procedencia
100.000 hbt
Amazonas
2,78
Antioquia
7,57
Arauca
1,21
Atlntico
12,59
Barranquilla
17,11
Bogot
0,30
Bolvar
7,15
Boyac
0,32
Caldas
1,84
Caquet
1,79
Cartagena
17,04
Casanare
1,84
Cauca
5,84
Cesar
3,41
Choc
5,46
Crdoba
2,02
Cundinamarca
2,30
Guaina
13,05
Departamento de
procedencia
Guajira
Guaviare
Huila
Magdalena
Meta
Nario
Norte de Santander
Putumayo
Quindo
Risaralda
San Andrs
Santa Marta
Santander
Sucre
Tolima
Valle del Cauca
Vaups
Vichada
Incidencia
acumulada por
100.000 hbt
2,69
157,75
4,06
25,10
1,61
0,61
0,77
4,29
5,09
15,67
36,82
32,56
1,64
6,66
4,47
18,43
0,00
0,00
Notificacin de leptospirosis hasta el octavo periodo de

2012, Colombia
Total de casos 1437

78% (1117) de casos sospechosos
350
Nmero de casos
300
250
200
150
100
50
0
I
II III IV V VI VII VIII IX X XI XII XIII I

2009

2010
Periodos epidemiolgicos

2011
II III IV V VI VII
2012
Departamento de Muertes
procedencia
acumuladas
Santa Marta
8
Cartagena
16
Amazonas
1
San Andrs
1
Barranquilla
7
Atlntico
5
Magdalena
3
Valle del Cauca
16
Cesar
3
Casanare
1
Putumayo
1
Cauca
4
Risaralda
2
Antioquia
13
Bolvar
2
Caldas
1
Santander
2
Boyac
1
Tolima
1
Crdoba
1
Bogot
1
Total
90
Mortalidad por
1.000.000 hbt
17,84
16,93
13,88
13,64
5,90
4,43
3,98
3,65
3,10
3,07
3,07
3,03
2,16
2,14
1,93
1,02
0,99
0,79
0,72
0,63
0,14
1,98
Tasa de mortalidad de
leptospirosis, Colombia 20092011
Circulacin de serogrupos de Leptospira por entidad

territorial, Colombia 2007-2011
30,00
Total muestras: 225
Porcentaje (%)
25,00
20,00
15,00
10,00
5,00
Serovares
Australis (24,89%), Hebdomadis (9,33%), Sejroe (8%)

Porcinos y bovinos, ratas y roedores
Celledoni
Pyrogenes
Panama
Cynopteri
Autumnalis
Ballum
Pomona
Shermani
Canicola
Javanica
Tarassovi
Grippotyphosa
Bataviae
Icterohaemorrhagiae
Sejroe
Hebdomadis
Australis
0,00
Signos o sntomas
Signos y sntomas de los casos de leptospirosis

notificados durante el 2011, Colombia.
Fiebre
Cefalea
Mialgias
Dolor abdom.
Artrlagias
Vmito
Nusea
Ictericia
Diarrea
Tos
Dolor pantorr.
Dolor retroocul.
Hiperemia
Hepatomegalia
Disnea
Brote
Hematuria
Insf. Respiratoria
Epistaxis
Insf.Renal
Esplenomegalia
Insf.Heptica
Melenas
Sec. Conjuntival
P.Torni.Positiva
Hemoptisis
Signos menngeos
,00
Porcentaje de casos
20,00
40,00
60,00
80,00
Confirmados
100,00
Probables
Antecedentes epidemiolgicos de los casos de

leptospirosis notificados durante el 2011, Colombia.
Antecedente epidemiolgico
Ratas en vivienda
Perros
Ratas en trabajo
Disposicin peridomiciliaria de
residuos slidos
Malas condiciones de
saneamiento bsico o higinico Sin servicio de acueducto
sanitarias
Presencia de alcantarillas
destapadas
Actividades sociales, recreativas Contacto con aguas estancadas
o situaciones de riesgo
Inundacin
Contacto o presencia de
reservorios animales en la
vivienda o lugar de trabajo
Tipo de caso
Probables
Confirmado
n (%)
n (%)
721 (50,4)
603 (51,0)
675 (47,2)
588 (49,7)
546 (38,2)
458 (38,7)
660 (53,0)
629 (53,2)
419 (29,3)
362 (25,3)
517 (43,7)
343 (29,0)
300 (21,0)
318 (26,9)
209 (14,6)
226 (19,1)
En que estamos.
Vigilancia rutinaria
Comit
tcnico
de
leptospirosis
Circular 007 de enero de 2011
Seguimiento final 2011
Videoconferencias
con
entidades territoriales (22)
Evaluacin de la vigilancia
Hacia donde vamos.

Estrategia de IEC
Construccin
de
una
estrategia
integral
de
vigilancia (OPS-MSPS-INS)
Priorizacin de zonas de
riesgo
Seguimiento
y
fortalecimiento del proceso
diagnstico
Mejorar la calidad del dato
Centinela
de
sndrome
febril??
Investigacin
Gracias
Milena Rodrguez Bedoya
Mdica Veterinaria Epidemiloga
Grupo zoonosis
Subdireccin de Vigilancia y Control en Salud Pblica
Instituto Nacional de Salud
Correo electrnico: irodriguez@ins.gov.co
Telfono (57-1) 220 77 00 Extensin 1388
Bogot, COLOMBIA
www.ins.gov.co
Lnea gratuita nacional: 01 8000 113 400
ANLISIS DE LOS RESULTADOS

OBTENIDOS APARTIR DE UN
LABORATORIO DE DIAGNOSTICO
VETERINARIO (2009-2012)
Alejandro Castellanos H
Director cientfico ZOOLAB LTDA
Jorge Zambrano Varn
Director departamento de Posgrados
Universidad Nacional de Colombia
Grupo de Reproduccin Animal y Salud de Hato

Bogot D.C. , 7 de septiembre de 2012
Estudios en
Colombia
Llanos Orientales de Colombia

1979 -1981 (Rivera y col)
n= 1735 sueros bovinos en 46 predios

Revista ACOVEZ 15 (5), (1981);11-14.
Llanos Orientales de Colombia

1990-1991 (Otte y col)
n=12 Fincas
Caso: >10% aborto
Control:<3% aborto
Preventive Veterinary Medicine 22 ( 1995 ) 103- 113
Dos Matas Antioquia

1997-1998 (Ochoa y col)
n=174 Bovinos
n=67 Operarios
Pan Am J Public Health 7(5), (2000 )325- 330
Pereira, Risaralda
2002-2005 (Zuluaga y col)
N= 1648 en 231 Predios
Serovar
hardjo
grippotyphosa
canicola
icterohaemorrhagiae
pomona
bratislava
prevalencia
45.7%
18.9%
14.5%
9.1%
6.8%
5%
Investigaciones Andina. No. 19 Vol. 11 108-117
Importancia de los Laboratorios privados en

el Diagnstico
Apoyo a la red de laboratorios del ICA.
Apoyo rpido, oportuno y de confianza para los

productores.
Recoleccin de datos importantes para estrategias
de manejo y control de las diferentes
enfermedades.
Desarrollo de la capacidad tcnica

Inicialmente el laboratorio remita
muestras.
Pocos laboratorios procesan muestras
para diagnostico de leptospira (MAT)
Se evidenci la necesidad de estudiar
mas serovares.
Se obtiene formacin para el
diagnstico.
Actualizacin constante: cursos

internacionales.
Apoyo incondicional ILS
Construccin de la informacin
Es de vital importancia la
colaboracin de todos los
veterinarios de campo.
Las encuestas de recepcin de
muestras
Anamnesis del Individuo
Organizacin sistemtica
Aprovechamiento de los datos.
De donde se obtienen las muestras

La mayora de las muestras llegan
como diagnsticos (muestra
nica).
Convenio con asociaciones de
productores.
Convenios para apoyo de ventas.
Proyecto Nacional De serologas
Convenios con secretarias de
salud.
Prevalencia Leptospira
Serovar por Regin en Bovinos
L. hardjoprajitno corte 100
Regin
Resultados
Andina
N
Prevalencia
Negativo
1368
96.7%
Positivo
47
3.3%
Total
1415
100.0%
Caribe
N
Prevalencia
313
95.4%
15
4.6%
328
100.0%
Pacifica
N
Prevalencia
85
98.8%
1
1.2%
86
100.0%
Orinoquia
N
Prevalencia
420
96.3%
16
3.7%
436
100.0%
Amazonia
N
Prevalencia
140
100.0%
0
.0%
140
100.0%
Total
N
Prevalencia
2326
96.7%
79
3.3%
2405
100.0%
L. bratislava corte 1:100

Regin
Resultados
Andina
N
Prevalencia
Negativo
1040
97.4%
Caribe
N
Prevalencia
160
94.7%
9
5.3%
169
100.0%
Pacifica
N
Prevalencia
73
96.1%
3
3.9%
76
100.0%
Orinoquia N
Prevalencia
38
97.4%
1
2.6%
39
100.0%
Amazonia N
Prevalencia
93
96.9%
3
3.1%
96
100.0%
Total
1404
97.0%
44
3.0%
1448
100.0%
N
Prevalencia
Positivo
28
2.6%
Total
1068
100.0%
L. hardjobovis corte 100

Regin
Resultados
Andina
N
Prevalencia
Negativo
260
97.0%
Positivo
8
3.0%
Total
268
100.0%
Caribe
N
Prevalencia
47
95.9%
2
4.1%
49
100.0%
Pacifica
N
Prevalencia
9
100.0%
0
.0%
9
100.0%
Orinoquia
N
Prevalencia
15
100.0%
0
.0%
15
100.0%
Amazonia
N
Prevalencia
10
100.0%
0
.0%
10
100.0%
Total
N
Prevalencia
341
97.2%
10
2.8%
351
100.0%
L. australis corte 1:100

Regin
Resultados
Andina
N
Prevalencia
Negativo
1000
97.7%
Positivo
24
2.3%
Total
1024
100.0%
Caribe
N
Prevalencia
160
94.7%
9
5.3%
169
100.0%
Pacifica
N
Prevalencia
74
97.4%
2
2.6%
76
100.0%
Orinoqua
N
Prevalencia
39
100.0%
0
.0%
39
100.0%
Amazona
N
Prevalencia
93
96.9%
3
3.1%
96
100.0%
Total
N
Prevalencia
1366
97.3%
38
2.7%
1404
100.0%
L. copenhageni corte 1:100

Regin
Resultados
Andina
N
Prevalencia
Negativo
1013
98.8%
Caribe
N
Prevalencia
213
98.6%
3
1.4%
216
100.0%
Pacifica
N
Prevalencia
71
93.4%
5
6.6%
76
100.0%
Orinoquia N
Prevalencia
36
92.3%
3
7.7%
39
100.0%
Amazonia N
Prevalencia
96
100.0%
0
.0%
96
100.0%
Total
1429
98.4%
23
1.6%
1452
100.0%
N
Prevalencia
Positivo
12
1.2%
Total
1025
100.0%
L. shermani corte 100

Regin
Resultados
Andina
N
Prevalencia
Negativo
1008
98.3%
Caribe
N
Prevalencia
167
98.8%
2
1.2%
169
100.0%
Pacifica
N
Prevalencia
76
100.0%
0
.0%
76
100.0%
Orinoquia N
Prevalencia
38
97.4%
1
2.6%
39
100.0%
Amazonia N
Prevalencia
96
100.0%
0
.0%
96
100.0%
Total
1385
98.6%
20
1.4%
1405
100.0%
N
Prevalencia
Positivo
17
1.7%
Total
1025
100.0%
L .mini corte 100

Regin
Resultados
Andina
N
Prevalencia
Negativo
1016
99.1%
Positivo
9
0.9%
Total
1025
100.0%
Caribe
N
Prevalencia
163
96.4%
6
3.6%
169
100.0%
Pacifica
N
Prevalencia
75
98.7%
1
1.3%
76
100.0%
Orinoquia
N
Prevalencia
38
97.4%
1
2.6%
39
100.0%
Amazonia
N
Prevalencia
94
97.9%
2
2.1%
96
100.0%
Total
N
Prevalencia
1386
98.6%
19
1.4%
1405
100.0%
L. cynopteri corte 100

Regin
Resultados
Andina
N
Prevalencia
Negativo
1035
98.6%
Positivo
15
1.4%
Total
1050
100.0%
Caribe
N
Prevalencia
213
98.6%
3
1.4%
216
100.0%
Pacifica
N
Prevalencia
76
100.0%
0
.0%
76
100.0%
Orinoquia
N
Prevalencia
38
97.4%
1
2.6%
39
100.0%
Amazonia
N
Prevalencia
96
100.0%
0
.0%
96
100.0%
Total
N
Prevalencia
1458
98.7%
19
1.3%
1477
100.0%
L. icterohemorragiae corte 1:100

Regin
Resultados
Andina
N
Prevalencia
Negativo
1376
99.0%
Caribe
N
Prevalencia
364
99.7%
1
0.3%
365
100.0%
Pacifica
N
Prevalencia
81
94.2%
5
5.8%
86
100.0%
Orinoquia N
Prevalencia
432
99.1%
4
0.9%
436
100.0%
Amazonia N
Prevalencia
131
97.0%
4
3.0%
135
100.0%
Total
2384
98.8%
28
1.2%
2412
100.0%
N
Prevalencia
Positivo
14
1.0%
Total
1390
100.0%
L. grippotyphosa corte 100

Regin
Resultados
Andina
N
Prevalencia
Negativo
1039
98.9%
Positivo
12
1.1%
Total
1051
100.0%
Caribe
N
Prevalencia
165
97.6%
4
2.4%
169
100.0%
Pacifica
N
Prevalencia
76
100.0%
0
.0%
76
100.0%
Orinoquia
N
Prevalencia
44
100.0%
0
.0%
44
100.0%
Amazonia
N
Prevalencia
101
100.0%
0
.0%
101
100.0%
Total
N
Prevalencia
1425
98.9%
16
1.1%
1441
100.0%
L. pomona corte 100

Regin
Resultados
Andina
N
Prevalencia
Negativo
1517
99.5%
Caribe
N
Prevalencia
369
100.0%
0
.0%
369
100.0%
Pacifica
N
Prevalencia
86
100.0%
0
.0%
86
100.0%
Orinoquia N
Prevalencia
433
99.3%
3
0.7%
436
100.0%
Amazonia N
Prevalencia
132
97.8%
3
2.2%
135
100.0%
Total
2537
99.5%
13
0.5%
2550
100.0%
N
Prevalencia
Positivo
7
0.5%
Total
1524
100.0%
Serovar por Regin en Caninos
L. icterohemorragiae corte 100
Regin
Resultados
Andina
N
Prevalencia
Negativo
374
92.8%
Positivo
29
7.2%
Total
403
100.0%
Caribe
N
Prevalencia
29
100.0%
0
.0%
29
100.0%
Pacifica
N
Prevalencia
3
100.0%
0
.0%
3
100.0%
Orinoquia
N
Prevalencia
5
100.0%
0
.0%
5
100.0%
Total
N
Prevalencia
411
93.4%
29
6.6%
440
100.0%
L. copenhageni corte 100

Regin
Resultados
Andina
N
Prevalencia
Negativo
374
92.8%
Positivo
29
7.2%
Total
403
100.0%
Caribe
N
Prevalencia
29
100.0%
0
.0%
29
100.0%
Pacifica
N
Prevalencia
3
100.0%
0
.0%
3
100.0%
Orinoquia
N
Prevalencia
5
100.0%
0
.0%
5
100.0%
Total
N
Prevalencia
411
93.4%
29
6.6%
440
100.0%

Regin
Resultados
Andina
N
Prevalencia
Negativo
392
97.3%
Caribe
N
Prevalencia
29
100.0%
0
.0%
29
100.0%
Pacifica
N
Prevalencia
3
100.0%
0
.0%
3
100.0%
Orinoquia N
Prevalencia
5
100.0%
0
.0%
5
100.0%
Total
429
97.5%
11
2.5%
440
100.0%
N
Prevalencia
Positivo
11
2.7%
Total
403
100.0%

Regin
Resultados
Andina
N
Prevalencia
Negativo
397
98.5%
Positivo
6
1.5%
Total
403
100.0%
Caribe
N
Prevalencia
27
93.1%
2
6.9%
29
100.0%
Pacifica
N
Prevalencia
3
100.0%
0
.0%
3
100.0%
Orinoquia
N
Prevalencia
5
100.0%
0
.0%
5
100.0%
Total
N
Prevalencia
432
98.2%
8
1.8%
440
100.0%
L. hardjoprajitno corte 100

Regin
Resultados
Andina
N
Prevalencia
Negativo
474
98.8%
Caribe
N
Prevalencia
30
100.0%
0
.0%
30
100.0%
Pacifica
N
Prevalencia
3
100.0%
0
.0%
3
100.0%
Orinoquia N
Prevalencia
5
100.0%
0
.0%
5
100.0%
Total
512
98.8%
6
1.2%
518
100.0%
N
Prevalencia
Positivo
6
1.3%
Total
480
100.0%
L. canicola corte 100

Regin
Resultados
Andina
N
Prevalencia
Negativo
399
98.8%
Caribe
N
Prevalencia
N
Prevalencia
29
100.0%
3
100.0%
0
.0%
0
.0%
29
100.0%
3
100.0%
Orinoquia N
Prevalencia
5
100.0%
0
.0%
5
100.0%
Total
436
98.9%
5
1.1%
441
100.0%
Pacifica
N
Prevalencia
Positivo
5
1.2%
Total
404
100.0%
Serovar por Regin en Equinos
L. icterohemorragiae corte 100
Regin
Resultados
Negativo
237
Positivo
9
Total
246
Prevalencia
96.3%
3.7%
100.0%
N
Prevalencia
5
100.0%
0
.0%
5
100.0%
Orinoquia N
Prevalencia
1
50.0%
1
50.0%
2
100.0%
243
10
253
96.0%
4.0%
100.0%
Andina
Caribe
Total
Prevalencia
L. copenhageni corte 100

Regin
Resultados
Negativo
227
Positivo
7
Total
234
Prevalencia
97.0%
3.0%
100.0%
N
Prevalencia
5
100.0%
0
.0%
5
100.0%
Orinoquia N
Prevalencia
1
50.0%
1
50.0%
2
100.0%
233
241
96.7%
3.3%
100.0%
Andina
Caribe
Total
N
Prevalencia

Regin
Resultados
Negativo
229
Positivo
6
Total
235
Prevalencia
97.4%
2.6%
100.0%
N
Prevalencia
5
100.0%
0
.0%
5
100.0%
Orinoquia N
Prevalencia
2
100.0%
0
.0%
2
100.0%
236
242
97.5%
2.5%
100.0%
Andina
Caribe
Total
N
Prevalencia
L. canicola corte 100

Regin
Resultados
Negativo
242
Positivo
4
Total
246
Prevalencia
98.4%
1.6%
100.0%
Caribe
N
Prevalencia
5
100.0%
0
.0%
5
100.0%
Orinoquia
N
Prevalencia
2
100.0%
0
.0%
2
100.0%
Total
249
253
98.4%
1.6%
100.0%
Andina
Prevalencia

Regin

Negativo
230
Positivo
3
Total
233
Prevalencia
98.7%
1.3%
100.0%
Caribe
N
Prevalencia
5
100.0%
0
.0%
5
100.0%
Orinoquia
N
Prevalencia
2
100.0%
0
.0%
2
100.0%
Total
237
240
98.8%
1.3%
100.0%
Andina
Prevalencia
L. autumnalis corte 100

Regin
L. autumnalis corte 100
Andina
N
Prevalencia
Negativo
230
98.7%
Positivo
3
1.3%
Total
233
100.0%
Caribe
N
Prevalencia
5
100.0%
0
.0%
5
100.0%
Orinoquia N
Prevalencia
2
100.0%
0
.0%
2
100.0%
Total
237
98.8%
3
1.3%
240
100.0%
N
Prevalencia
L. shermani corte 100

Regin
Resultados
Negativo
232
Positivo
1
Total
233
Prevalencia
99.6%
0.4%
100.0%
Caribe
N
Prevalencia
5
100.0%
0
.0%
5
100.0%
Orinoquia
N
Prevalencia
2
100.0%
0
.0%
2
100.0%
Total
239
240
99.6%
0.4%
100.0%
Andina
Prevalencia
Serovar por Regin en Bovinos no vacunados
L. icterohemorragiae
Regin
Andina
Caribe
Pacifica
Orinoquia
Amazonia
Total
Diluciones
Total
<1:25
1:25
1:50
1:100
1:200 1:400
257
34
27
322
79,8%
10,6%
8,4%
0,9%
0,0%
0,3%
100,0%
118
18
149
79,2%
6,0%
12,1%
2,7%
0,0%
0,0%
100,0%
14
20
70,0%
5,0%
25,0%
0,0%
0,0%
0,0%
100,0%
311
28
44
392
79,3%
7,1%
11,2%
1,8%
0,5%
0,0%
100,0%
27
39
69,2%
7,7%
17,9%
5,1%
0,0%
0,0%
100,0%
727
75
101
16
922
78,9%
8,1%
11,0%
1,7%
0,2%
0,1%
100,0%
L. hardjoprajitno
Regin
Diluciones
<1:25
Andina
Caribe
Pacifica
Orinoquia
Amazonia
Total
1:25
1:50
Total
1:100
1:200
1:400
210
18
57
32
322
65,2%
5,6%
17,7%
9,9%
0,9%
0,6%
100,0%
87
11
30
12
149
58,4%
7,4%
20,1%
8,1%
4,7%
1,3%
100,0%
19
20
95,0%
0,0%
5,0%
0,0%
0,0%
0,0%
100,0%
157
53
118
50
14
392
40,1%
13,5%
30,1%
12,8%
3,6%
0,0%
100,0%
20
39
51,3%
10,3%
23,1%
15,4%
0,0%
0,0%
100,0%
493
86
215
100
24
922
53,5%
9,3%
23,3%
10,8%
2,6%
0,4%
100,0%
L. pomona
Regin
Andina
Caribe
Pacifica
Orinoquia
Amazonia
Total
Diluciones
Total
<1:25
1:25
1:50
1:100
1:200
1:400
282
26
322
87,6%
1,9%
8,1%
1,6%
0,6%
0,3%
100,0%
116
10
18
149
77,9%
6,7%
12,1%
3,4%
0,0%
0,0%
100,0%
19
20
95,0%
0,0%
5,0%
0,0%
0,0%
0,0%
100,0%
319
19
46
392
81,4%
4,8%
11,7%
1,3%
0,8%
0,0%
100,0%
27
39
69,2%
2,6%
12,8%
7,7%
7,7%
0,0%
100,0%
763
36
96
18
922
82,8%
3,9%
10,4%
2,0%
0,9%
0,1%
100,0%
Otras especies
Ovinos, Caprinos y Bubalinos bajo nmero de
muestras
Porcinos todos los ttulos encontrados son
menores o iguales a 1:100 (serovares australis,
bratislava, copenhageni, grippotyphosa, pomona).
Conclusiones
El serovar hardjoprajitno sigue siendo uno de los
mas prevalentes en la poblacin de Bovinos
El Caribe muestra una de las mayores presencias
de seropositividad en el pas.
Falta hacer diagnstico de esta entidad en Bfalos,
Cabras, Ovejas.
Seria conveniente realizar el diagnstico de la
leptospirosis con un mayor numero de serovares.
Preguntas?
Recomendaciones de la OIE para el

manejo de Leptospirosis Bovina
Recomendaciones de la OIE para el

manejo de Leptospirosis Bovina
Laboratorio de Leptospirosis
Coordinacin de Bacteriologa y Enfermedades Exticas
Coordinacin General de Laboratorio Animal
Direccin de Laboratorio y Control Tcnico
SENASA
Laboratorio de Referencia para Leptospirosis de la O.I.E.
La Organizacin Mundial de Sanidad Animal

(OIE)
La necesidad de combatir contra las enfermedades de los animales a nivel mundial

constituy el motivo por el cual se cre la Oficina Internacional de Epizootias
gracias al Acuerdo internacional firmado el 25 de Enero de 1924. En mayo de 2003
la Oficina se convirtin en la Organizacin Mundial de Sanidad Animal, pero
conserva su acrnimo histrico OIE.
La OIE es la organizacin intergubernamental encargada de mejorar la sanidad

animal en el mundo.
La Organizacin Mundial del Comercio (OMC) ha reconocido las normas dictadas

por la OIE, que en 2011 contaba con 178 pases Miembros, como normas de
referencia mundial. La OIE mantiene relaciones permanentes con otras 45
organizaciones internacionales y regionales, y dispone de oficinas regionales y subregionales en todos los continentes.
www.oie.int
Asamblea mundial de
Delegados
rgano supremo de la OIE
Consejo
Integrado por el Presidente, el Vicepresidente y el
Presidente saliente de la Asamblea mundial as
como por seis Delegados
Comisiones Especializadas
Animales terrestres,
Laboratorios,
Animales acuticos,
Cientfica
Centros Colaboradores
Centros expertos en un mbito
especfico relacionado al manejo de
las cuestiones generales de la Salud
Animal
Laboratorios de Referencia
Designados para abordar todos los
problemas de mbito cientfico y
tcnico relacionados a las
enfermedades de los animales
Director general
Bernard Vallat
Sede
Establecida en Pars, es dirigida por
el Director general de la OIE,
nombrado por la Asamblea mundial
Comisiones Regionales
frica,
Amricas,
Asia-Extremo Oriente y Oceana,
Europa y Oriente Medio
Grupos Ad hoc
Convocados para examinar temas
cientficos y tcnicos especficos
Grupos de trabajo
Responsables del continuo estudio de los
avances en su campo
Representaciones Regionales
frica, Amrcas, Asia-Pacfico, Europa del Este,
Oriente Medio
Cdigo Sanitario para los Animales Terrestres

Las normas consignadas en el Cdigo Sanitario para los Animales Terrestres
(denominado en adelante Cdigo Terrestre) buscan mejorar la sanidad y el
bienestar animal al igual que la salud pblica veterinaria en todo el mundo.
Son fruto del trabajo asiduo que desde 1960 viene realizando la Comisin de
Normas Sanitarias para los Animales Terrestres.
Textos normativos para garantizar el comercio internacional seguro de
animales terrestres (mamferos, aves y abejas) y de sus productos derivados.
Las Autoridades Veterinarias de los pases importadores y exportadores
debern referirse a las medidas sanitarias que en l figuran durante las
actividades de deteccin temprana, notificacin y control de agentes patgenos
con el fin de evitar su transmisin a los animales y, en caso de enfermedades
enzoticas, a las personas, as como su diseminacin a travs de los
intercambios internacionales de animales y productos derivados, impidiendo al
mismo tiempo la instauracin de barreras sanitarias injustificadas.
Cdigo Sanitario para los Animales Terrestres (2011)
captulos sobre : glosario, notificacin de enfermedades y datos

epidemiolgicos, procedimientos para la declaracin por los Miembros y
para el reconocimiento oficial por la OIE, los Servicios Veterinarios,
evaluacin de los Servicios Veterinarios, creacin y aplicacin de sistemas
de identificacin que permitan el rastreo de los animales, zonificacin y
compartimentacin, aplicacin de la compartimentacin,
condiciones generales de higiene en los centros de toma y tratamiento de
semen, toma y tratamiento de semen de bovinos, de pequeos rumiantes
y de verracos, recoleccin y manipulacin de embriones de ganado y
quidos recolectados in vivo, recomendaciones generales relativas a la
desinfeccin y desinfestacin, procedimientos de certificacin,
procedimientos de la OIE relacionados con el Acuerdo sobre Medidas
Sanitarias y Fitosanitarias de la Organizacin Mundial del Comercio,
medidas de cuarentena aplicables a los primates no humanos, modelos de
certificados veterinarios para el comercio internacional de animales vivos,
huevos para incubar y productos de origen animal, control de peligros
asociados a la alimentacin animal que constituyen una amenaza para la
salud de las personas y la sanidad de los animales, medidas de
bioseguridad aplicables a la produccin avcola, etc
Esta nueva edicin incluye un nuevo captulo sobre la comunicacin.
Los criterios para inscribir una enfermedad en la Lista de la OIE
Manual de las Pruebas de Diagnstico y de las

Vacunas para los Animales Terrestres
El Manual de animales terrestres tiene como
objetivo contribuir a la armonizacin
internacional de los mtodos de vigilancia y de
control de las enfermedades animales de
mayor relevancia.
Describe los mtodos normalizados para los
diagnsticos de laboratorio y para la
produccin y el control de productos
biolgicos de uso veterinario (principalmente
las vacunas) en el mundo entero.
Suministra las pruebas y procedimientos de
diagnstico recomendados en el Cdigo
Sanitario para los animales Terrestres
El Manual de animales terrestres

primera parte de carcter general con captulos sobre
las tcnicas de muestreo, buenas prcticas de laboratorio, la
produccin de vacunas, biotecnologa, gestin de la calidad en los
laboratorios veterinarios, validacin de las pruebas, controles de
esterilidad, seguridad en los laboratorios, el papel de los organismos
oficiales en la reglamentacin internacional que se aplica a los
productos biolgicos veterinarios, y control de la sensibilidad
antimicrobiana.
Los captulos siguientes tratan cada uno de una enfermedad
especfica. (Lepto : 2.1.9)
resumen que ofrece una informacin general sobre las pruebas y
vacunas disponibles para la enfermedad considerada.
una monografa destinada a los especialistas de laboratorio: abarca
todos los detalles necesarios sobre las pruebas de diagnstico y
tambin, cuando se da el caso, sobre las normas recomendadas
relativas a las vacunas y dems productos biolgicos.
Por ltimo, cada captulo comprende una bibliografa.
Pruebas de diagnstico prescritas y de sustitucin para las

enfermedades de la Lista de la OIE
Estas pruebas deben realizarse en estricta conformidad con las
indicaciones del Manual Terrestre, para evitar diferencias de
interpretacin de resultados entre el pas exportador y el pas importador.
Las pruebas prescritas son las que se consideran ptimas para
determinar el estado sanitario de los animales antes de exportarlos.
Las pruebas de sustitucin no ofrecen el mismo grado de fiabilidad
que las pruebas prescritas en cuanto a la ausencia de infeccin en los
animales.
Sin embargo, la Comisin de Normas de la OIE para los Animales
Terrestres considera que una prueba de sustitucin escogida de
mutuo acuerdo por el pas importador y el pas exportador puede
proporcionar datos interesantes para evaluar los riesgos asociados a
cualquier proyecto de comercio de animales o productos de origen
animal.
Captulo
del
Cdigo
Terrestre
Captulo
del
Manual
Terrestre
Enfermedad
Pruebas
prescritas
Prueba
s
de
sus
tit
uci
n
Enfermedades de la Lista de la OIE

Enfermedades comunes a varias especies
8.2.
8.10.
2.1.2.
Enfermedad de Aujeszky
2.1.9.
Leptospirosis
2.1.13.
Rabia
ELISA, VN
MAT
VN, ELISA
8.9.
2.1.11.
Paratuberculosis
DTH,
ELI
SA
8.6.
2.1.6.
Cowdriosis
ELISA,
IFA
8.8.
2.1.10.
Miasis por Cochliomyia hominivorax y miasis por

Chrysomya bezziana
Agent
id.
8.13.
2.1.16.
Triquinelosis
Agent id.
ELISA
8.5.
2.1.5.
Fiebre aftosa
ELISA1, VN
CF
8.15.
2.1.19.
Estomatitis vesicular
CF, ELISA, VN
Volviendo a Lepto
TRANSMISIN
25
C
Bebederos
Lagunas
Riachuelos
Estacionalidad
Contacto directo
Va inhalatoria o
Conjuntival
Excretor NO permanente
ORINA
ORINA
SUELO
pH neutro
presencia de
materia orgnica
Congnita
o neonatal
Portador
crnico
Excretor
permanente
Humedad
Alta
Consideraciones segn tipo de explotacin

En el ganado lechero es donde todas las condiciones para la transmisin
de la leptospirosis estn presentes (existencia de roedores, de raciones
que atraen a estos y luego son consumidas por los bovinos, agua
estancada, hacinamiento de animales dos veces al da durante el ordee).
An s en el ganado de carne, aunque el manejo es diferente, y no existen
ni el hacinamiento ni las raciones, la enfermedad se encuentra presente.
Los cerdos criados en rgimen intensivo plantean un problema diferente a
los criados a campo o semicautiverio. En grandes criaderos la posibilidad
de infeccin cruzada es muy importante debido a la densidad de
poblacin. El movimiento de cerdos de un corral a otro y el contacto con
desechos de otros corrales son los medios ms importantes de
diseminacin en las granjas. La introduccin de la enfermedad en una de
ellas puede suceder por la incorporacin de un padrillo que sea portador
de leptospira en su aparato genital.
Ganado lechero:
existencia de roedores
raciones que atraen a estos y luego son consumidas

por los bovinos
agua estancada
hacinamiento de animales dos veces al da durante el

ordee.
SIGNOS: mastitis, ubre flccida, disminucin de la

produccin lctea, leche sanguinolenta.
Ganado de carne. enfermedad se encuentra presente.

SIGNOS: abortos en forma de tormenta o hay muerte
perinatal de los terneros.
Cerdos criados en rgimen intensivo:
Infeccin cruzada debido a la densidad de poblacin.
movimiento de cerdos de un corral a otro y el contacto

con desechos de otros corrales..
La incorporacin de un padrillo que sea portador de

leptospiras en su aparato genital.
Medidas de control en medicina veterinaria

Podemos agrupar las medidas de control aplicables
en medicina veterinaria en:
Medidas higinico-sanitarias
Vigilancia epidemiolgica
Prevencin.
1. Medidas Higinico-Sanitarias
Deben basarse en dos puntos esenciales:
Control de hospedadores de mantenimiento silvestres
Control de hospedadores domsticos.
Algunas opciones son:
Desratizacin general de la explotacin
Implementar programas de control de roedores e higiene ambiental en
forma permanente
Construccin de edificios a prueba de roedores protegiendo los
depsitos de raciones y alimentos.
Las buenas prcticas de higiene pueden disminuir la carga microbiana del
ambiente teniendo especial cuidado de la orina de los animales infectados
no permanezca en contacto con equipos, herramientas e instalaciones.
Aguas estancadas son fuentes de leptospirosis a controlar.
Evitar el uso de fuentes de agua comunales
Reducir el pastoreo conjunto con otras especies domsticas y con otros
rodeos
Mantener una poltica de ciclo cerrado y en su defecto, someter a
cuarentena estricta a los animales de reposicin que entran nuevos en la
explotacin
No separar las cras de la hembra
Antibiticos
Numerosos trabajos han sido publicados indicando el uso de antibiticos
para controlar fundamentalmente la eliminacin de leptospiras por orina
al medio ambiente.
Lamentablemente no existen suficientes evidencias que demuestren la
eficacia de la antibioticoterapia para la eliminacin de la leptospiruria
Internacionalmente se recomienda el uso de una dosis de 25 mg. por kg
de dihidroestreptomicina
No hay que olvidar el efecto negativo que generan las resistencias
antimicrobianas
La profilaxis higinico-sanitaria es esencial en el control de la enfermedad
en un rodeo, pero siempre ha de formar parte de un sistema general de
control, junto con la vacunacin y la epidemiologa, ya que ninguna de
estas medidas es eficaz por separado
2. Vigilancia epidemiolgica
Conocer la prevalencia de serovares especficos en una determinada
poblacin
Descubrir los focos de contagio a fin de evitar aparicin de nuevos casos.
Para ello se recomienda:
Estudiar todas las especies susceptibles y poblaciones a riesgo para
determinar la prevalencia y presencia de serovares en cada especie.
Realizar el aislamiento de cepas de leptospira spp. en distintas especies
para conocer los serovares actuantes.
Realizar estudios de reservorios silvestres.
Realizar estudios epidemiolgicos para estudiar la evolucin de la
enfermedad.
Implantar un programa de extensin y comunicacin para lograr la
participacin de la comunidad.
El conocimiento de la epidemiologa de la enfermedad es la base de la
prevencin y control de la infeccin en el hombre y los animales.
El control de la enfermedad debe planificarse de acuerdo al tipo de tenencia
del animal considerando siempre el riesgo para el hombre.
3. Prevencin
El mejor mtodo de prevencin es una vacunacin sistemtica.
En bovinos el plan de vacunacin sugerido por el Instituto Nacional de Tecnologa
Agropecuaria (INTA) es el siguiente:
1 dosis al 4 mes de edad
2 dosis a los 30 das de la primera
3 al ao de edad, y revacunacin anual
En el caso de un rodeo que nunca ha sido vacunado:
Vacunar:
Toda la
Toda la
Al ao
poblacin Nacidos
poblacin
siguiente
inicial
inicial
Animales de
Reposicin
Si existen hembras no vacunadas o no se conoce su plan sanitario anterior deben

vacunarse con una primera dosis 45 das antes del servicio y una segunda dosis
30 das despus de la primera (o sea 15 das antes del servicio)
Los caninos deben vacunarse entre las 10 a 12 semanas de vida
aplicando una segunda dosis un mes despus y revacunaciones
anuales.
VACUNAS
Mono o polivalentes con uno o mas serovares de
Leptospira interrogans
Lquidas o liofilizadas
Combinadas o no con agentes virales
Para grandes y pequeos animales
Nacionales o importadas
Todas las vacunas debern ser aprobadas por el Servicio
Oficial. La metodologa de control de calidad de las
bacterinas es la establecida en la Disposicin N 405/88
del Servicio Nacional de Sanidad Animal y Calidad
Agroalimentaria (SENASA).
Controles realizados en SENASA segn Disposicin 405/88
LA LIBERACION AL MERCADO DE CADA SERIE DE VACUNA QUE

INGRESA AL SENASA IMPLICA EL CUMPLIMIENTO DE CADA UNO
DE LOS SIGUIENTES CONTROLES :
I.
CONTROL DE ESTERILIDAD
II.
CONTROL DE INOCUIDAD
III.
CONTROL DE INACTIVACION
IV.
CONTROL DE pH
V.
CONTROL DE POTENCIA
La metodologa de cada uno de ellos se encuentra descripta en la

Disposicin SENASA N405/88
CARACTERSTICAS DE ESTOS INMUNGENOS:

FORMULADO:
SIEMPRE DEBE ESTAR PRESENTE EL SEROVAR O LOS SEROVARES AISLADOS
DE CASOS CLINICOS.
MONOVALENTES (UN SOLO SEROVAR)
POLIVALENTES (VARIOS SEROVARES)
COMBINADOS CON FRACCIONES BACTERIANAS Y/O VIRALES
PRESENTACION:
LIQUIDOS
LIOFILIZADOS
CON O SIN ADYUVANTE (ACUOSOS U OLEOSO)
ORIGEN:
NACIONALES
IMPORTADOS
PRODUCCION:
SEGUN LINEAMIENTOS DE LA O.I.E.

N.B.C 2
Grandes
animales
Pequeos
DISPOSICIN SENASA N 405/88
CONTROL DE CALIDAD DE BACTERINAS CONTRA LA

LEPTOSPIROSIS
ASEGURAR INMUNGENOS EFICACES, POTENTES, QUE CONTRIBUYAN AL

CONTROL DE ESTA ZOONOSIS, REDUNDANDO EN BENEFICIO DE LA SANIDAD
Y DEL BIENESTAR ANIMAL.
LA LIBERACION DE UNA SERIE DE VACUNA AL

MERCADO IMPLICA EL CUMPLIMIENTO DE CADA
UNO DE LOS SIGUIENTES CONTROLES :
I.
CONTROL DE ESTERILIDAD
II.
CONTROL DE INOCUIDAD
III.
CONTROL DE INACTIVACION
IV.
CONTROL DE pH
V.
CONTROL DE POTENCIA
REALIZADOS A LA TOTALIDAD DE LAS SERIES QUE INGRESAN AL

SENASA.
I.-CONTROL DE ESTERILIDAD
SIEMBRA DE LA MUESTRA POR DUPLICADO : 10% v/v
MEDIOS DE CULTIVO:
TIOGLICOLATO FLUIDO USP (EN EL CASO DE VACUNAS OLEOSAS SE
AGREGA TWEEN 80 AL 1%)

AGAR CASEINA SOJA
AGAR SABOURAUD
INCUBACION: 14 DIAS A 252C Y 352C
INTERPRETACION: NO DEBE HABER DESARROLLO BACTERIANO
TURBIDEZ
SUBCULTIVO
DESARROLLO BACTERIANO
NUEVAMENTE DESARROLLO
SE REPITE
NO CUMPLE CON ESPECIFICACIONES
I.-CONTROL DE ESTERILIDAD
II.- CONTROL DE INOCUIDAD:
DOS COBAYOS (150-300 gr.)

INOCULACION
2 ml VIA SUBCUTANEA
OBSERVACION: 7 DIAS
INTERPRETACION:
NO DEBE HABER REACCIONES LOCALIZADAS O GENERALES ATRIBUIBLES AL
PRODUCTO
REACCIONES LOCALIZADAS O GENERALES ATRIBUIBLES AL PRODUCTO
NO CUMPLE
REACCIONES LOCALIZADAS O GENERALES NO ATRIBUIBLES AL PRODUCTO
REPETICION
MISMAS LESIONES
NO CUMPLE
III.- CONTROL DE INACTIVACION

INOCULACION:
1 ml DE VACUNA HOMOGENEIZADA
MEDIOS DE CULTIVO: APTOS PARA LEPTOSPIRA (FLETCHER
o MEDIOS CON ALBUMINA BOVINA FACTOR V)
INCUBACION : 14 DIAS A 28-30C
OBSERVACION AL MICROSCOPIO DE CAMPO OSCURO
INTERPRETACION:
LEPTOSPIRAS VIVAS
NO CUMPLE
IV.- CONTROL DE pH
DEBE MANTENERSE DENTRO DE LOS LIMITES DE pH 7-7.4
V.- CONTROL DE POTENCIA

VACUNAS DESTINADAS A:
GRANDES ANIMALES: DILUCION 1/800 DE LA DOSIS
PEQUEOS ANIMALES: DILUCION 1/80 DE LA DOSIS
VACUNACION
SE VACUNAN POR LA VIA RECOMENADADA POR EL ELABORADOR A 10-12
HAMSTERS DORADOS, CEPA SIRIA, DE 50-90 gr
TESTIGOS: 10-12 HAMSTERS DE LAS MISMAS CARACTERISTICAS

DESAFIO
14-18 DIAS POST-VACUNACION.
SE DESAFIAN VACUNADOS Y TESTIGOS.
UNA SUSPENSION DE CEPA VIRULENTA DE Leptospira interrogans DEL
MISMO SEROVAR QUE COMPONE LA VACUNA A TESTEAR
SE DEBE INOCULAR 10 A 10000 DL 50
SIEMPRE, PARA EL TEST DE POTENCIA, EL DESAFO SE HAR CON UNA CEPA
VIRULENTA LOCAL, AISLADA DE CASOS CLNICOS
OBSERVACION
VACUNADOS Y TESTIGOS
14 DIAS

INTERPRETACION
TOTAL ACUMULATIVO
DE MUERTOS PARA
TEST NO
SATISFACTORIO
ETAPA
N VACUNADOS
N ACUMULATIVO
DE VACUNADOS
TOTAL ACUMULATIVO DE
MUERTOS PARA TEST
SATISFACTORIO
10
10
2 MENOS
5 MAS
10
20
5 MENOS
6 MAS
TEST VALIDO
SI MUEREN 3 4 VACUNADOS
MUERTE 8 MAS TESTIGOS

SEGUNDA ETAPA
EVALUACIN FINAL SE HACE EN BASE A LA SEGUNDA ETAPA Y A LOS TOTALES

ACUMULADOS
MAS ALLA DE LOS CONTROLES DE CALIDAD
VACUNAS BRINDAN UNA SLIDA INMUNIDAD SI:

LOS RECEPTORES SE ENCUENTREN EN CONDICIONES FSICAS ADECUADAS
SE SIGUE UN PLAN DE VACUNACIN RIGUROSO
FALLAS DE LA VACUNACIN
MLTIPLES FACTORES:
ANTGENOS INADECUADOS
PLAN DE VACUNACIN INCORRECTO
FACTORES INDIVIDUALES: ANIMALES CAQUCTICOS, PARASITADOS, ETC.
La leptospirosis es una zoonosis a

controlar ya que es sumamente difcil
de erradicar debido a que el
microorganismo se puede albergar y
expulsar en la orina de muchos
animales, perpetundose entre ellos
el estado de portador.
Gracias por su atencin !
www.senasa.gov.ar
jpetrako@senasa.gov.ar

Manejo y Tratamiento de La Leptospirosis Bovina

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Manejo y tratamiento de

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El pico en los ttulos de anticuerpos puede

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Diagnstico por aglutinacin

Cultivo de riones en rastro

Hardjoprajitno (aislado mex.) (51, 63.75%)

Estudio serolgico en bovinos

Estudio serolgico en bovinos

Seroprevalencia a diferentes puntos de corte

(No.Pos) 13110891 63 53 4738 31 17 4 0 0 9494 82 31 2118 13 8 5 2 0 0 85 70 45 2115 7 3 2 1 0 0 0 70 55 1715 14 2 2 1 1 0 0 0

Estrategias para el control y

VII Reunin de la ILS

Ttulos de anticuerpos, slo indican contacto

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Expresa la magnitud de la virulencia del microorganismo

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Para afiliarse a ILS:

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raciones que atraen a estos y luego son consumidas

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SIGNOS: mastitis, ubre flccida, disminucin de la

Cerdos criados en rgimen intensivo:

Infeccin cruzada debido a la densidad de poblacin.

movimiento de cerdos de un corral a otro y el contacto

La incorporacin de un padrillo que sea portador de

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Parmetros estandarizados y respetados

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En un animal aislado, la MAT es muy til en el diagnstico de la

La PCR se basa en la amplificacin y

EXTRACCION DEL ADN DE LOS TEJIDOS

PREPARACION DE MEZCLA (MIX)

I. EXTRACCION DEL ADN

I. EXTRACCION DEL ADN

II. PREPARACION DE LA MEZCLA DE PCR

Aumentar y disminuir la temperatura para permitir la apertura

IV. DETECCION DEL ADN AMPLIFICADO