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I. OBJETIVOS:
a) Conocer las diferentes tcnicas de tincin y coloracin bacterianas
y utilizarlas correctamente.
b) Identificar las diferentes formas bacterianas.
III. MATERIALES:
_Material biolgico
_ Aceite de inmersin
_ Microscopio
_ Hisopos
_ Porta y cubreobjetos
_ Tinta china, azul de metileno, azul de lactofenol.
_ Aceite de inmersin
_ Microscopio
IV.PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL:
4.1 Procedimiento para el azul de metileno:
a) Hacer un extendido a partir de una muestra de saliva bucal
tomada con hisopo.
b) Dejar secar por unos minutos.
c) Cubrir el extendido con una pequea cantidad de azul de
metileno, djelo actuar por un minuto.
d) Lavar con agua para eliminar el exceso de colorante.
VI. CONCLUSIONES:
_Las tinciones utilizadas en el laboratorio de microbiologa
permiten el diagnstico oportuno y sugerente de los agentes
infecciosos, por lo que juegan un papel importante en la decisin del
tratamiento inicial de las enfermedades infecciosas. Las tinciones son
importantes en la microbiologa porque:
* Proporciona contraste entre el microorganismo y el
medio que lo rodea, permitiendo diferenciar varios tipos morfolgicos.
VII. CUESTIONARIO:
7.1 Mencione los factores que afectan toda tcnica de
coloracin
_ Concentracin de los reactivos de tincin.
_ pH adecuado.
_ Tiempo de tincin.
_ Temperatura adecuada.
7.2 Indique a que se denomina MORDIENTE, mencione algunos
ejemplos.
Son los reactivos o sustancias que preparan al tejido para la
coloracin, comunicndole las apetencias colorantes. El uso de los
reactivos mordientes es imprescindible en aquellos casos en que la
materia orgnica se muestra refractaria a los colorantes. Algunos
ejemplos: Alcohol etlico, lugol, cido crmico, bicromato potsico y
acetato de cobre.
7.3 Qu funcin cumplen el Lugol en la coloracin Gram?
El lugol cumple la funcin de mordiente e impide la salida del
cristal violeta por la formacin de un complejo cristal violeta-yodo que
satura los espacios de peptidoglicano de la pared bacteriana.
Neisseria
BIBLIOGRAFA
* Las tinciones bsicas del laboratorio de microbiologa (Artculo de
revisin)
* De la Torre y Callejas, Salvador Luis. Manual bsico de microtecnia
biolgica. Edicin Revolucionaria. Instituto Cubano del Libro. La
Habana, 1975. p.113.
* http://www.microinmuno.qb.fcen.uba.ar/SeminarioTinciones.htm