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SEP

DGETI

SEMS

CENTRO DE BACHILLERATO TECNOLGICO Industrial y de servicios N 107


TUXTEPEC OAXACA.

NOMBRE DEL ALUMNO: AUREA AIDA AGUILAR FELIPE

CATEDRTICO: YOLANDA VERGARA CORDERO

SUBMDULO PROFESIONAL: APLICAR TCNICAS DE VALORACIN CLNICA

REPORTE DE LA PRCTICA: BIOMETRIA HEMATICA

SEMESTRE: 6

GRUPO: AL

FECHA DE ENTREGA: ____ DE __________________ DEL 201_

CALIFICACIN Y OBSERVACIONES: _____________________________________

INTRODUCCION
La Biometra Hemtica tambin denominada Hemograma, es uno de los estudios de rutina
de mayor importancia, ya que la informacin que de aqu se deriva nos proporciona una
idea muy confiable del estado general de la salud del paciente, consta de 2 bloques:
Formula Roja: Determina los parmetros relacionados con el eritrocito.
Formula Blanca: Determina los parmetros relacionados con los leucocitos.
Formula Roja: La determinacin de la frmula roja se compone de los siguientes
parmetros:
A. Microhematocrito (Ht): Volumen del paquete globular, despus de centrifugacin
respecto del volumen sanguneo total expresado en litros/litros.
El volumen total que ocupan los eritrocitos en un volumen dado de sangre, dividido entre el
volumen de sangre, se denomina fraccin de volumen de eritrocitos.

El resto de sangre se compone de casi completamente de plasma, junto con una reducida
cantidad de glbulos blancos.

B. Hemoglobina (Hb): Es determinada la cantidad de esta protena expresada en


g. /dl.
C. Conteo eritroctico (Eri): Es la cantidad total de eritrocitos circulantes por
microlitros de sangre.
Algunos factores que afectan hematocrito, hemoglobina y conteo eritroctico son:
1. Cambios que inciden directamente en la circulacin de eritrocitos:
Valor disminuido: Se denomina anemia, los tres parmetros disminuyen aunque este
decremento puede ser desproporcionado cuando existen cambios en el tamao eritroctico
y/o la cantidad de hemoglobina contenida en ellos, por lo que el clculo e interpretacin de
los ndices de la formula roja son de ayuda en estos casos.
Valor aumentado: Denominado policitemia, donde aumente el nmero de eritrocitos
circulantes denominado policitemia absoluta, tambin puede darse un aumento transitorio
en los eritrocitos circulantes denominado policitemia relativa (descritos posteriormente).
2. Cambios en el volumen plasmtico:
Valor aumentado: Se presenta en estados de deshidratacin.

Valor disminuido: Se presentan en sobrehidratacin con fluidos administrados


parenteralmente dando una lectura que simula anemia.

D. ndices eritrocticos: Determinados mediante clculos matemticos.


1. Volumen Globular Medio (VGM): (Ht x 10 / Eri), Es el tamao eritroctico expresado en
fentolitros y se comporta de la siguiente forma:
Valor aumentado: Se presenta en anemia macroctica en la que la interferencia en la
sntesis del ADN causa inhibicin de la divisin celular y la resultante es la aparicin de
eritrocitos de gran tamao (como ocurre en los casos de deficiencia de vitamina B12 y cido
flico).
Tambin
aumenta
transitoriamente
en
los
casos
de
reticulocitosis
(anemia regenerativa).
Valor disminuido: Se presenta en casos de deficiencia de hierro
2. Hemoglobina Globular Media (HGM): (Hb x 10 / Eri.), Se refiere a la cantidad de
hemoglobina depositada en l eritrocitos expresada en picogramos.
Valor aumentado: En los casos de hemolisis tanto in vivo como in vitro; la hemoglobina
extracelular tambin est implcita, aunque el ndice asume que toda la hemoglobina es
intracelular por lo que se debe interpretar con reservas. Durante la reticulocitosis
permanece normal o ligeramente elevado.
Valor disminuido: En los casos de deficiencia de hierro.
3. Concentracin de Hemoglobina Globular Media (CHGM): (Hb x 100 / Ht) Es la
cantidad de hemoglobina que est relacionada directamente con el eritrocito. Es el ndice
ms preciso, ya que no requiere del conteo total de eritrocitos circulantes.
Valor aumentado: En los casos de hemolisis tanto in vivo como in vitro, as mismo puede
incrementarse en los casos de esferocitosis marcada.
Valor disminuido: En los casos de reticulocitosis y deficiencias de hierro.
E. Morfologa eritroctica: Es determinada en el frotis sanguneo.
1. Rouleaux: Es el agrupamiento de eritrocitos a manera de monedas amontonadas, es
debido a una tendencia de sedimentacin en forma paralela, trastorno que se relaciona con
el incremento en la concentracin de fibringeno y/o el cambio en las concentraciones de
globulinas. En caninos y felinos puede presentarse en condiciones normales en un grado
moderado y es muy marcada en casos de enfermedad inflamatoria y neoplasias. En equinos
sanos es comn desapareciendo en casos de anemia.
2. Aglutinacin eritroctica: Cuando se forma un acumulo de eritrocitos, ocurre
generalmente en los casos de anemias inmunomediadas, puede ser observada en las
paredes del tubo colector como pequeos grumos.
3. Anisocitosis: Es la variacin en el tamao de los eritrocitos donde aparecen macrocitos
y/o microcitos a lado de clulas de tamao normal, se presenta como respuesta
en anemias de tipo regenerativo.
Macrocitos: Son eritrocitos de gran tamao que provocan incremento en el VGM,
(reticulocitos) aparecen generalmente en anemias regenerativas.

Microcitos: Son pequeos eritrocitos con un VGM disminuido que son observados en
casos de anemias dadas por deficiencia de hierro y Piridoxina generalmente.
4. Esferocitos: Son considerados microcitos que cuentan con una membrana celular
reducida, lo que incrementa la permeabilidad hacia el sodio, son casi exclusivos de caninos
y se presentan generalmente en anemias de tipo autoinmune y en anemias hemolticas
isoinmunes as como despus de una transfusin. Son removidas rpidamente de la
circulacin por los macrfagos esplnicos, debido a su falta de elasticidad y a que no estn
habilitadas para traspasar los poros capilares esplnicos.
5. Policromasia: Es una variacin en la afinidad eritroctica hacia el colorante, donde
existe un tono azuloso en las clulas que contienen residuos de ARN, eritrocitos que
generalmente son grandes y se consideran reticulocitos. La presencia de Policromasia est
asociada con el incremento de la actividad eritropoyetica como respuesta a una anemia,
catalogada como regenerativa cuando est presente.
6. Hipocroma: Se refiere a la presencia de palidez marcada en la regin central del
eritrocito dado por la disminucin en la concentracin de hemoglobina dentro de la clula, la
causa ms comn en la que se presenta es la deficiencia de hierro.
7. Poiquilocitosis: Son clulas anormales en su forma comnmente encontradas
en anemias debidas a la prdida crnica de sangre o a enfermedades caracterizadas por
fragmentacin eritroctica, clulas que son retiradas prematuramente de la circulacin
agudizando el estado anmico. Los acantocitos, son un tipo de poiquilocitosis.
8. Leptocitos: Son clulas delgadas que cuentan con una membrana celular grande
observadas en enfermedades crnicas debilitantes que producen anemia.
9. Estomatocitos: Son eritrocitos con una forma oval hacia el centro que se observa en la
Estomatocitos hereditaria del Alaska malamut y en enfermedades hepticas.
10. Clulas en diana: Son clulas con forma de tiro al blanco que se presentan en
anemias de tipo regenerativo junto con Policromasia, aunque cuando se presentan y no
existe Policromasia se pueden relacionar con enfermedad renal, heptica o esplnica.
11. Cuerpos de Howell-Jolly: Son remanentes nucleares observados frecuentemente
como consecuencia de un estado anmico en procesos regenerativos, no obstante si son
numerosos pueden indicar hipoesplenismo..
12. Cuerpos de Heinz: Son estructuras localizadas en la membrana eritroctica producto
de la desnaturalizacin de la hemoglobina causada por la accin oxidante de ciertas drogas
o qumicos, estos cuerpos desorganizan la membrana eritroctica y se asocian con hemolisis
intravascular.
13. Cuerpos eritrocticos refrctiles: Se localizan en estados normales en
aproximadamente el 10% de los eritrocitos del gato, se incrementan en la presencia de
diversas enfermedades, en muchas ocasiones juegan un papel importante en el desarrollo
de la anemia.
14. Eritrocitos nucleados (Rubrocitos y Metarrubrocitos): Se deben a la liberacin de
clulas eritroides inmaduras hacia la circulacin sangunea en los casos de anemia, aunque

pueden ser observadas en casos de enfermedad de la mdula sea donde existe dao en el
parnquima que afecta la barrera capilar, as como en casos de leucemia.
Formula blanca:
Frotis sanguneo.
La extensin se prepara repartiendo uniformemente una gota pequea de sangre sobre un
portaobjetos de manera que solo se deposite una capa de clulas.
Despus de teirlas, las extensiones se sangre se utilizan para.

Determinar las fracciones de nmero de los tipos de leucocitos.


Para detectar glbulos rojos anormales
Identificar ciertos parsitos.

Cmara de Neubauer
Es para ambos conteos, glbulos blancos y glbulos rojos, tambin con oxalato de amonio podemos
contar plaquetas y glbulos blancos al mismo tiempo.

Serie Plaquetaria:
Puede ser por medio del frotis sanguneo o en Cmara de Neubauer, estas se cuentan para
observar que no haya trombosis o trombocitopenia.

OBJETIVO
El alumno realizara la biometra hemtica completa, en 30 minutos correctamente.

MATERIAL, REACTIVOS, APARATOS


Por persona:
1. 1.- tubo de ensaye con anticoagulante
2. Torundas en alcohol
3. Ligadura hueca de 45 cm aprox.
4. Portaobjetos limpios y secos
5. Tubo capilar
6. Tubo de wintrobe
7. Pipeta de Sahli
8. Pipetas toma p/ blancos y rojos
9. Tubos de ensaye de 13x100mm
10.
Boquilla con manguera o alargadera
11.
Cmara de Neubauer

12.

Jeringas o vacutainer para 5ml

Reactivos:
1. Anticoagulante EDTA u Oxalato doble
2. Amonio y Potasio. Alcohol de caa
3. Lquido de Drabkin (cianometahemoglobina)
4. Liquido de Turk y de Hayen
5. Colorante de Wright
6. Buffer para colorante de Wright
Aparatos:
1. Soporte para tubos de wintrobe
2. Centrifuga p/Microhematocrito
3. Aparato p/ lectura de Microhematocrito
4. Espectrofotmetro

METODOLOGA

TOMAR MUESTRA, 5MLS DE SANGRE CON ANTICOAGULANTE DE EDTA

LLENADO DE TUBO DE WINTROBE


o Sujetar en un embolo limpio y seco, la cnula de wintrobe. Mover bombeando
unas 3 o 5 veces el embolo y mezclarlo al topo.
o Mezclando la sangre por inversin, quitar el tapn dejarlo sobre la mesa
invertido (no ensuciar la mesa de sangre), introducir la cnula hasta el fondo de
tubo con sangre y
o Aspirar hasta 1ml, sacar la cnula, tapar el tubo de sangre y limpiar el exterior
de la cnula sin tocar la punta, ahora
o Tomar el tubo de wintrobe etiquetado. Introducir la cnula hasta el fondo del
tubo de wintrobe, a la altura de la vista ir inyectando la sangre y sacando al
mismo tiempo la cnula, de tal manera que cuando haya llegado exactamente a
la marca 0-10, tambin la cnula este afuera. Si hubiera sobrado sangre en el
embolo, quitar la cnula y vaciar por las paredes el sobrante la sangre. Y el tubo
de wintrobe
o Llevarlo a la gradilla de wintrobe, dejarlo ah y leer a los 60 minutos
exactamente.

TUBO CAPILAR MICROHEMATOCRITO


o Tubo capilar lleno a , presione el extremo para evitar que salga la sangre,
limpiar el extremo con papel sanitario, sellar el extremo opuesto a la sangre,

con la llama del mechero girando cuidadosamente para que se funda


uniformemente. Llevarlo a centrifugar por 5 minutos, en la microcentrifuga para
luego leer el Microhematocrito.
o Lectura:
Hacer coincidir exactamente la fase hemates-plasma, con la raya y no
mover ms el capilar.
Colocar en la ranura de plstico, orientando el paquete de hemates hacia
el punto rojo.
Moviendo el disco de aluminio hacer coincidir la lnea graduada, con el
fondo de paquete de glbulos rojos por un lado y por el otro con la fase
plasma aire, procurando que la lnea intercepten esos puntos por el
centro.
Escribir la lectura de Microhematocrito en la escala.

RECUENTO DE ERITROCITOS Y LEUCOCITOS:


o Siempre agitar la sangre que tiene anticoagulante, tantas veces como la utilice
o La sangre en la pipeta de Thoma debe estar exactamente en la marca 0.5,
limpiar el exterior con papel sanitario, sin tocar la punta para evitar que baje la
marca. El diluyente (Hayen para rojos, Turk para blancos) debe quedar
exactamente en la marca /101 rojos, 11 blancos) indicada en la pipeta (no debe
faltar ni sobrar), cubrir los extremos de la pipeta con el pulgar y cordial, agitar
por inversin varias veces por 15 segundos. Llevar al agitador mecnico 3
minutos, desechas las 3 primeras gotas (que es liquido diluyente).
o La cmara (colocarla sobre un fondo
blanco) y el cubre de Neubauer sobre la
cmara (debe estar libre de polvo y sin
grasa), ya lista depositar inmediatamente
la dilucin en la cmara de Neubauer (sin
que se derrame o tenga burbujas). Puede
ser de un lado, rojos y al otro blancos.
o Colocar la cmara en el microscopio con
cuidado y leer. Rojos cuadricula central (5
cuadrantes de 4x4 objetivo de 40x; y
blancos en las cuadriculas de los extremos
(4 cuadrantes de 4x4 objetivo de 10x).

o Se escribe el nmero total de


cada cuadrante, desde el primero
hasta
el
numero
5
(as
observamos la diferencia entre
cada cuadricula, ya que no debe
haber una diferencia de ms de
10 para que se considere
correcta la lectura. Y de la misma manera se realiza para los blancos, solo que
sern los 4 cuadrantes).
o Se suman los 5 resultados, se multiplica el total por 10,000 asi obtendr el
numero de hemates por ml de sangre.
o Para blancos se suman los 4 resultados, se multiplica por 50, obteniendo el
numero de leucocitos por ml de sangre.

LECTURA DE CIANOMETAHEMOGLOBINA
o Agitar la sangre con anticoagulante, tales veces que se utilice.
o La sangre en la pipeta de Sahli debe estar exactamente en la marca 0.02mls y
limpiar el exterior con el papel sanitario sin tocar la punta (evitando la variacin
en la marca).
o En el tubo de ensaye etiquetado con 5 mls de cianometahemoglobina, depositar
la sangre soplando y con la misma pipeta mezclar, aspirar la misma dilucin y
soplar y mezclar (varias veces), haciendo una dilucin homognea, que no
quede sangre en el interior de la pipeta. Dejar en reposo por 0 minutos.
o Leer en el espectrofotmetro a 540nm.

FROTIS

o Portaobjetos limpios y secos (bordes uniformes, no rooso o rotos), se toman


por los lados laterales para evitar las huellas o grasa de las manos, si es
necesario lavarlos con jabn y secarlos con un pao limpio y sin pelusa.
o Portaobjetos sobre un fondo blanco, que tendr sobre la mesa de trabajo.
o Agitar lenta, uniforme y por inversin el tubo que contiene la sangre, para evitar
sedimentaciones y errores, al quitar el tapn rpidamente colocar
o Una gota de sangre en el extremo central de cada portaobjetos con rapidez
tomar con una mano (pulgar y cordial) los extremos del portaobjetos y con el
ndice presionar el centro.
o Con la otra mano, tomar el otro portaobjetos, sujetndolos con el dedo ndice la
punta de un extremo y con el pulgar un poco ms arriba del extremo, y con los
dems dedos sujetar el borde lateral, el portaobjeto quedara por debajo de la
mano (segn se le ha mostrado). El dedo ndice nos marcara en el frotis segn
lo necesitemos.
o Colocar en ngulo de 50
con los portaobjetos (uno
horizontal y con el otro
haciendo ngulo de 50),
haciendo contacto con la
gota de sangre que, por
capilaridad formara una
lnea con el portaobjetos.
Deslizando rpido y con
firmeza para obtener un
frotis
en
condiciones
favorables: delgado, ms
de la mitad, liso (sin
ondulaciones).
o Dejar
que
se
seque
airendolo (al aire libre), si
tenemos dudas observarlo
al microscopio con objetivo
de 10x o 40x, las clulas
sanguneas deben estar
separadas unas de otras.

TINCIN CON WRIGHT


o Teirlo con el colorante de Wright, en el soporte colocar el frotis y cubrirlo
totalmente con el colorante de Wright por 3 min. ( segn se indique), ahora
aadirle el buffer de Wright unas 6 u 10 gotas inmediatamente, con una pipeta
soplarle (en forma de

8)

por 20 o 30 segundos, haciendo una mezcla

homognea (toma la superficie un brillo


metlico homogneo) reposar por 6 minutos;
transcurrido el tiempo lavar al chorro de la
llave verticalmente (solamente eliminando el
exceso de colorante), se deja escurrir dejando
paradito a que se escurra y se limpia la parte
opuesta al frotis para que no tenga
interferencia en la observacin microscpica.

HEMOGRAMA
o En la punta del frotis teido colocar una gota
de aceite de inmersin levantarlo para que
resbale recorriendo lo teido. Ahora colocarlo
en la platina del microscopio y enfocar con
objetivo de 10x, ya enfocado mover el
revolver directamente al objetivo 100x y
mover ligeramente el micromtrico e ir
leyendo las clulas correspondientes.
o Eritrocitos anormales que localice reportarlo.
o Leucocitos
agranulocitos

monomorfonucleares como monocitos y


linfocitos.
o Leucocitos granulocitos polimorfonucleares:
Neutrfilo basfilo, Neutrfilo Eosinfilo.

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